原果胶检测试剂盒(咔唑微板法)
果胶含量的测定方法二
果胶的测定（方案一）：黄晓钰，刘邻渭等．食品化学综合实验[M]．中国农业大学出版社. 2002．158~159实验原理：果胶经水解，其产物——半乳糖醛酸可在强酸环境中与咔唑试剂产生缩合反应，生成紫红色化合物，其呈色深浅与半乳糖醛酸含量成正比，由此可进行比色定量测定果胶。
实验试剂：1.化学纯无水乙醇或95%乙醇。
2.精制乙醇：取无水乙醇或95%乙醇1000ml，加入锌粉4g，硫酸（1:1）4ml，至于衡温水浴中回流10h，用全玻璃仪器蒸馏，馏出液每1000ml加锌粉和氢氧化钾各4g，并进行蒸馏。
3. 0.15%咔唑乙醇溶液：称取咔唑g，溶于精制乙醇并定容至100ml。
4.半乳糖醛酸标准溶液：先用水配置成浓度1 g/L的溶液，再配制成浓度分别为（0、10mg/L、20 mg/L、30 mg/L、40 mg/L、50 mg/L、60 mg/L、70mg/L）的系列半乳糖醛酸标准溶液。
5.优级纯浓硫酸。
操作方法：1样品处理：总果胶提取：（鲜样）研磨新鲜样品50g，放入1000ml烧杯中，加入L HCl400mL，放置沸水浴中加热1h，加热时应随时补充蒸发损失的水分。
冷却后，移入500ml容量瓶，定容摇匀，过滤，滤液待用。
（干样）磨细的干燥样品5g，置于250ml三角烧瓶，加入L HCL 150ml，装上冷凝器，与沸水浴中加热回流1h，取出冷却甚至室温，用水定容至200ml，摇匀，过滤，滤液待用。
水溶性果胶提取：新鲜样品应尽量研磨碎，干燥的样品应磨细后过60目筛。
样品中存在有果胶酶时，为了顿化酶的活性，可以加入适量热的95%乙醇，是样品溶液的乙醇最终浓度约为70%，然后于沸水浴中沸腾回流15min，使果胶酶钝化，冷却过滤后，以95%乙醇洗涤多次，再用乙醚洗涤，以除去全部糖类、脂类及色素，最后风干除去乙醚。
2果胶提取：水溶性果胶的提取：将样品研碎，新鲜样品标准称取30~50g，干燥样品准确称取5~10g至于250ml烧杯，加入150ml水。
总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(FRAP 微板法)说明书
植物样品的吸光度值和 0.5mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则该血浆(血清)样品的总抗氧化 能力为 0.5mM/(0.5g/5ml)=0.5mmol/100g；
血浆(血清)样品的吸光度值和 0.7mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则该血浆(血清)样品的总抗 氧化能力为 0.7mM；
细胞(组织)匀浆样品的吸光度值和 0.3mM 的 Fe2+的吸光度值相同，该匀浆液蛋白浓度为 0.2mg/ml，则该细胞(组织)样品的总抗氧化能力为 0.3mM/0.2mg/ml=0.15mmol/g； 0.3mM 的抗氧化物质，其吸光度值和 0.6mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则其相对总抗氧化能力为 0.6mM/0.3mM=2。
注意事项： 1、 实验材料应尽量新鲜，样品提取的整个过程最好在 4℃条件下进行；如取材后不能立即 检测，也可以-80℃冻存后再进行测定(应在 1 个月内测定完毕)。 2、 亚铁标准溶液如变为黄色或棕黄色应弃用。 3、 测定 593nm 如有困难，亦可在 585~605nm 范围内进行测定。 4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(FRAP 微板法)即 Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method，简称 T-AOC Assay Kit，是一种采用铁离子还原能力(Ferric Reducing Ability of Plasma,FRAP)来测定样品抗氧化活性的方法，其原理是在酸性条件下样品中的抗 氧化物质还原 Fe3+-TPTZ 产生 Fe2+-TPTZ，呈现出明显的蓝色(紫色)，于 593nm 处有最大 的光吸收，在 Fe3+-TPTZ 过量的情况下测定蓝色物质的生成量即可获得待测样品的还原能 力即总抗氧化能力，由于反应在酸性条件下进行，可以抑制内源性的一些干扰因素，并且由 于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于 10μM，因此血浆等样品中的铁离 子或亚铁离子不会显著干扰 FRAP 法的检测反应，本方法可以对血浆、血清、尿液等各种体 液，细胞或组织裂解液、植物或中草药抽提液或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力进行检测。 该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
咔唑比色法测定掺假蜂蜜中果胶的含量
咔唑比色法测定掺假蜂蜜中果胶的含量任雪梅;胡梅;周传静;王文特;吴裕健【摘要】A method for determination of pectin content in honey was established by carbazole colorimetry. The pectin was extracted by 63 ％hot ethonal to remove the sugar in honey. The results showed that the top grade concentrated sulphurie acid should be used during the experience. And the ethonal, which was used to dilute carbazole, should be pured. The recovery of pectin was 88.2％～ 94.6％ with the detectable limit of 0.15 mg/kg.%建立了咔唑比色法测定蜂蜜中掺假果胶含量的方法.采用63%热乙醇溶液洗除蜂蜜中的糖分,提取试样中的果胶.结果表明,试验过程中试剂要采用优级纯浓硫酸,配制咔唑显色剂的乙醇使用前要进行精制.半乳糖醛酸的加标回收率为88.2%-94.6%,检出限为0.15 mg/kg.【期刊名称】《山东农业科学》【年(卷),期】2011(000)003【总页数】3页(P100-102)【关键词】蜂蜜;果胶;掺假【作者】任雪梅;胡梅;周传静;王文特;吴裕健【作者单位】山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100【正文语种】中文【中图分类】O656.31;S896.1蜂蜜是一种营养丰富、组成复杂的天然食品，它不仅能为人类提供各种营养元素以满足正常的生理需要，还有增进食欲、改善肠胃功能、治疗贫血、保护肝脏、提高人体免疫能力等多种功能，因此蜂蜜成为消费者青睐的营养保健品。
咔唑比色法测定果胶含量
咔唑比色法测定果胶含量-标准曲线的制作1方法原理方法基于果胶物质水解，生成半乳糖醛酸在强酸中与咔唑的缩合反应。
然后，对其紫红色呈色溶液进行比色定量。
2试剂(1) 乙醇(化学纯)：无水乙醇和95%乙醇。
(2) 精制乙醇：取无水乙醇(化学纯)或95%乙醇1000mL，加入Zn粉4g和硫酸、(1∶1)4mL，置恒温水浴中回流10h后，用全玻璃仪器蒸馏。
馏出液每1000mL加入Zn粉和KOH各4g，进行重蒸馏。
(3) 1.5g·L-1咔唑乙醇溶液：称取化学纯咔唑0.150g，溶解于精制乙醇，并定容至100mL。
(4) 标准半乳糖醛酸：以医药公司上海化学试剂采购供应站分装的L.Light出品α-D水解半乳糖醛酸作为标准半乳糖醛酸。
(5) 浓硫酸(优级纯)(注2)。
(6) 0.05mol·L-1HCl溶液。
3 操作步骤(1)半乳糖醛酸标准曲线的制作：准确称取α-D-水解半乳糖醛酸100mg，溶解于蒸馏水，并定容至100mL，混合后得1mg·mL-1的半乳糖醛酸原液。
移取上述原液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL，分别注入100mL容量瓶中，稀释至刻度，即得一系列浓度为10、20、30、40、50、60、70μg·mL-1的半乳糖醛酸标准溶液。
取30mm×200mm的硬质大试管7支，用吸管注入浓H2SO4各12mL。
置冰水浴中冷却，边冷却边分别沿壁徐徐加入上述不同浓度的半乳糖醛酸标准溶液各2mL，充分混合后，再置冰水浴中冷却。
然后，在沸水浴中加热10min，冷却至室温后，加入1.5g·L-1咔唑溶液各1mL，充分混和。
另以蒸馏水代替半乳糖醛酸标准溶液，依上法同样处理，作为试剂空白。
室温下放置30min后，用721型分光光度计，在波长530nm下，分别测定其吸光度(A)，以测得的吸光度(A)为纵座标，每mL标准溶液中半乳糖醛酸的含量为横座标，制作标准曲线。
NYT2016-2011水果及其制品中果胶含量的测定分光光度法
NY/T 2016—2011 水果及其制品中果胶含量的测定 分光光度法1 范围本标准规定了用分光光度法测定水果及其制品中果胶含量的方法。
本标准适用于水果及其制品中果胶含量的测定。
本标准方法线性范围为1 mg／L～l00 mg／L，检出限为0.02 g／kg。
2 规范性引用文件下列文件对本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB／T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 原理用无水乙醇沉淀试样中的果胶，果胶经水解后生成半乳糖醛酸，在硫酸中与咔唑试剂发生缩合反应,生成紫红色化合物，该化合物在525 nm处有最大吸收，其吸收值与果胶含量成正比，以半乳糖醛酸为标准物质，标准曲线法定量。
4 试剂除非另有说明，所用水应达到GB／T 6682规定的三级水要求，所用试剂均为分析纯试剂。
4.1无水乙醇(C2H6O)。
4.2 硫酸（H2SO4，优级纯）。
4.3 咔唑(C12 H9N)。
4.4 67%乙醇溶液：无水乙醇＋水= 2+1。
4.5 pH0.5的硫酸溶液：用硫酸调节水的pH至0.5。
4.6 40 g／L氢氧化钠溶液：称取4.0g氢氧化钠，用水溶解并定容至100 mL。
4.7 1 g／L咔唑乙醇溶液：称取0.100 0 g咔唑，用无水乙醇溶解并定容至100 mL。
作空白实验检测，即1 mL水、0.25 mL咔唑乙醇溶液和5 mL硫酸混合后应清澈、透明、无色。
4.8 半乳糖醛酸标准储备液：准确称取无水半乳糖醛酸0.100 0 g，用少量水溶解，加入0.5 mL氢氧化钠溶液(4.6)，定容至100 mL，混匀。
此溶液中半乳糖醛酸质量浓度为1 000 mg／L。
4.9半乳糖醛酸标准使用液：分别吸取0.0 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL半乳糖醛酸标准储备液(4.8)于50 mL容量瓶中,定容，溶液质量浓度分别为0.0 mg／L、20.0 mg／L、40.0 mg／L、60.0 mg／L、80.0 mg／L、100.0 mg／L。
咔唑比色法测定苹果渣提取液果胶含量的研究
通讯作者 ： 仇农学 ， 陕西师范大学食 品工程 系，１０２ ｍ ｉ ｏｘ ＿３ １ ２． ｍ ７０６． ａ＇ ｕｉ ８０＠１６ ｏ ｏ ｇ Ｌ ｙ ｎ ｃ
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原果胶检测试剂盒(咔唑比色法)
原果胶(PP)检测试剂盒(咔唑比色法)简介：天然果胶类物质以原果胶、果胶(Pectin)、果胶酸的形态广泛存在于植物的果实、根、茎、叶中，是细胞壁的一种组成成分，它们伴随纤维素而存在，构成相邻细胞中间层粘结物，使植物组织细胞紧紧黏结在一起。
原果胶是不溶于水的物质，但可在酸、碱、盐等化学试剂及酶的作用下，加水分解转变成水溶性果胶。
果胶(Pectin)又称多聚半乳糖醛酸，是由D-半乳糖醛酸以α-1,4糖苷键连接形成的直链状聚合物，本质上是一种线形的多糖聚合物，含有数百个脱水半乳糖醛酸残基。
原果胶是一种非水溶性的物质，在未成熟的果实或植物组织中果胶物质大多与纤维素结合以原果胶的形式存在，原果胶能使果实或其他植物组织坚硬、变脆。
Leagene 原果胶(PP)检测试剂盒(咔唑比色法)检测原理是果胶物质水解生成半乳糖醛酸，后者在硫酸溶液中咔唑进行缩合反应形成紫红色的化合物，该化合物呈色强度与半乳糖醛酸浓度成正比，该化合物颜色在反应内呈色最深，当反应液颜色最深时在波长处测定吸光度，通过与标准曲线比较，计算出样品中原果胶或可溶性果胶含量。
该试剂盒主要用于定量检测植物组织或果实中原果胶含量，亦可用于定量检测植物组织或果实中可溶性果胶含量，进而计算出总果胶含量(为原果胶含量与可溶性果胶含量之和)。
该25T试剂盒可以检测25-30左右个样本。
该试盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：编号名称TC212325TStorage试剂(A): 果胶标准(1mg/ml) 1ml 4℃避光试剂(B): SP Lysis buffer 2×500ml RT试剂(C): PP Lysis buffer 100ml RT使用说明书1份1、蒸馏水2、浓硫酸3、实验材料：桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织4、研钵或匀浆器5、试管6、离心机7、水浴锅8、比色杯9、分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、可溶性及原果胶提取：①取果实或其他植物组织，洗净，擦干，称取剪碎的新鲜样品，置于研钵或匀浆器。
果胶酯酶（PE）活性检测试剂盒说明书
果胶酯酶（PE ）活性检测试剂盒说明书NaOH 滴定法货号：BC2700规格：50T/48S 、100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称50T 规格100T 规格保存条件提取液粉剂×1瓶粉剂×2瓶室温保存试剂一粉剂×1瓶粉剂×1瓶室温保存试剂二液体1.5mL×1支液体3mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体10mL×1瓶液体20mL×1瓶2-8℃保存50T 溶液的配制：1、提取液：临用前加入100mL 蒸馏水，充分溶解；用不完的试剂4℃避光可保存3个月；2、试剂一：临用前加入100mL 蒸馏水，磁力搅拌50℃加热溶解3小时左右至完全溶解，转移至250mL 容量瓶，蒸馏水定容至250mL ；用不完的试剂4℃可保存8周；（因试剂一较难配制，建议客户提前制备）3、试剂三工作液：临用前根据样本量取出部分试剂三，用蒸馏水稀释16倍得到试剂三工作液备用，现配现用，用不完的试剂4℃可保存1周；100T 溶液的配制：1、提取液：临用前取1瓶加入100 mL 蒸馏水，充分溶解；用不完的试剂4℃避光可保存3个月；2、试剂一：临用前加入100mL 蒸馏水，磁力搅拌50℃加热溶解3小时左右至完全溶解，转移至500mL 容量瓶，蒸馏水定容至500mL；用不完的试剂4℃可保存8周；（因试剂一较难配制，建议客户提前制备）3、试剂三工作液：临用前根据样本量取出部分试剂三，用蒸馏水稀释16倍得到试剂三工作液备用，现配现用，用不完的试剂4℃可保存1周；产品说明：果胶酯酶（Pectinesterase ，PE ），又称果胶甲基酯酶、果胶氧化酶，广泛存在于植物及微生物中。
果胶是构成植物细胞壁的主要成分之一，而果胶酯酶催化果胶的甲氧酯水解产生果胶酸和甲醇，在植物果实成熟的细胞壁代谢过程中发挥着重要作用，在食品工业中具有极其重要的作用和开发前景。
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原果胶(PP)检测试剂盒(咔唑微板法)
简介：
天然果胶类物质以原果胶、果胶(Pectin)、果胶酸的形态广泛存在于植物的果实、根、茎、叶中，是细胞壁的一种组成成分，它们伴随纤维素而存在，构成相邻细胞中间层粘结物，使植物组织细胞紧紧黏结在一起。
原果胶是不溶于水的物质，但可在酸、碱、盐等化学试剂及酶的作用下，加水分解转变成水溶性果胶。
Leagene 原果胶(PP)检测试剂盒(咔唑微板法)检测原理是果胶物质水解生成半乳糖醛酸，后者在硫酸溶液中咔唑进行缩合反应形成紫红色的化合物，当反应液颜色最深时在波长530nm 处测定吸光度，通过与标准曲线比较，计算出样品中原果胶或可溶性果胶含量。
该试剂盒主要用于定量检测植物组织或果实中原果胶含量，亦可用于定量检测植物组织或果实中可溶性果胶含量，进而计算出总果胶含量(为原果胶含量与可溶性果胶含量之和)。
该50T 试剂盒可以检测50-60左右个样本。
该试盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 可溶性及原果胶提取：
①取果实或其他植物组织，洗净，擦干，称取剪碎的新鲜样品，置于研钵或匀浆器。
②加入SP Lysis buffer ，充分研磨或匀浆后转入5ml 试管中。
用SP Lysis buffer 冲洗研钵或匀浆器并转移至试管中，补加SP Lysis buffer 至。
③沸水浴30min ，在煮沸过程中及时补加SP Lysis buffer 至，取出冷却至室温，8000g 离心，弃上清液。
重复该步骤2次，以去除样品中的糖分以及其他物质。
④取含有沉淀的试管，加入蒸馏水，50℃水浴以溶解果胶。
取出冷却至室温，8000g 离心15min ，将上清液转移至新试管中。
用少量蒸馏水洗涤沉淀，8000g 离心，一并将上清液转移至上述新试管中，加蒸馏水定容至，即为可溶性果胶提取液。
⑤取上述可溶性果胶提取液，8000g 离心，弃上清液，向离心管中加入PP Lysis buffer ，
编号 名称
TC2121 50T Storage
试剂(A): 果胶标准(1mg/ml) 1ml
4℃ 避光
试剂(B): SP Lysis buffer 2×500ml RT 试剂(C): PP Lysis buffer 100ml RT 试剂(D): PP Assay buffer 1ml
4℃ 避光 使用说明书
1份
沸水浴，取出冷却至室温，8000g离心，加蒸馏水定容至，即为原果胶提取液。
2、稀释果胶标准溶液：取适量的果胶标准(1mg/ml)，按下表进行稀释：
加入物(μl) 1 2 3 4 5
果胶标准(1mg/ml) 4 8 12 16 20
蒸馏水196 192 188 184 180
果胶含量(μg) 4 8 12 16 20
3、加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免
产生气泡，小心混匀。
如果样品中的果胶浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
样品的检测最好能设置3平行管，求平均值。
加入物(ml) 空白管标准管测定管
蒸馏水0.2——
系列果胶标准(1-5号管) —0.2—
可溶性果胶提取液——0.2
浓硫酸(沿管壁小心加入) 1.8 1.8 1.8
加盖或塞沸水浴20min，迅速冷却至室温。
※注意：浓硫酸具有强腐蚀性，应小心操作，沿管壁缓慢加入。
4、测定：取上述空白管、标准管、测定管中溶液各，加至96孔板的孔中，加入SP Assay
buffer，避光静置，当显色最深时以酶标仪，以空白调零，测定系列标准孔、测定孔在530nm处吸光度。
如果测定原果胶含量，以原果胶提取液作为测定管；如果测定可溶性果胶含量，则以可溶性果胶作为测定管；如果测定总果胶含量，则同时以原果胶作为测定管和可溶性果胶作为测定管。
计算：
以1-5号管系列果胶标准(4、8、12、16、20μg)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，直接计算直线回归方程。
果胶=原果胶+可溶性果胶。
组织样品的果胶(μg)={m×V T×2}/(W×V s×0.2)
式中：m=根据标准曲线求得的测定管果胶含量(μg)
V T=原果胶(或可溶性果胶)提取液总体积(ml)
2=加入浓硫酸后反应液体积(ml)
V s=加样时所用原果胶(或可溶性果胶)提取液的体积(ml)=0.2
W=样品鲜重(g)
0.2=加入反应液体积(ml)
液体样品的果胶(μg/ml)=m×N×2/V×0.2
注意事项：
1、浓硫酸具有强腐蚀性，应小心操作，沿管壁缓慢加入。
2、取样量、试剂用量应根据果胶含量适当调整。
3、可溶性糖对测定结果有较大影响，应彻底去除样品中的可溶性糖。
4、PP Assay buffer应密闭避光保存，避免有效成分挥发。
5、PP Assay buffer的反应时间根据具体情况而定。
6、如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但应考虑分光光度计的最小检
测体积。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
相关：
编号名称
CS0201细胞线粒体分离试剂盒
DC0032 Masson三色染色液
DM0007 瑞氏-姬姆萨复合染色液
NR0001 DEPC处理水(0.1%)
PS0013 RIPA裂解液(强)
TC1167 尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)
TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)。