临床样本的采集运输和保存及核酸提取

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临床标本的采集和运输

临床标本的采集和运输

XXXX
XXXXX
2
3
准备采集工具:根据采集方法准备好所需的工具,如注射器、试管、 棉签、滤纸等
遵循无菌操作原则:在采集过程中,必须遵循无菌操作原则,以避 免污染标本和感染采集人员
4床中最常用的标本采集方法之一,以下是采集过程中的注意事项 选择合适的静脉:通常选择肘正中静脉或头静脉等较大且清晰的静脉进行采血
消毒:在采血前,需要对采血部位进行消毒,以避免感染
穿刺:在消毒后,使用采血 针进行穿刺,穿刺成功后将 针头固定在静脉上
收集血液:将血液收集到试 管中,根据需要加入抗凝剂 或防腐剂等
拔针:在采血完成后,迅速 拔出针头,并压迫采血部位 5-10分钟,以避免出血和感 染
2. 尿液采集
尿液采集通常分为两种方式:留置导尿和自然排尿。以下是尿液采集的注意事项
标识:在容器上标识患者信息、标本类型、采集时 间和检测要求等
保护标本:在运输过程中,需要保护标本免受震动 、污染和光照等影响
及时送检:在规定时间内将标本送至实验室进行检 测,以保证检测结果的准确性
BRILLIANT JOURNEY ABOUT NATURE
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目录
CONTENTS
1 临床标本采集前的准备
2
临床标本的采集
3
临床标本的运输
2
1
在进行临床标本 采集之前,需要 做好以下准备工

1
了解患者的基本信息:包括姓名、性别、年龄、病史、用药情况等, 以便确定采集的标本类型和数量
确定采集方法:根据标本类型和采集部位的不同,需要采用不同的 采集方法,包括静脉采血、尿液采集、呼吸道分泌物采集等

临床检验标本采集、运输、保存操作规程

临床检验标本采集、运输、保存操作规程

临床检验标本米集、运输、保存操作规程目录第一章体液标本的采集、运输、保存操作规程一、尿液标本采集、运输、保存二、脑脊液标本采集、运输、保存三、浆膜腔积液标本采集、运输、保存四、阴道分泌物标本采集、运输五、分泌物革兰阴性双球菌检测标本采集、运输六、精液标本采集、运输、保存七、前列腺液标本采集、运输、保存八、粪便采集、运输、保存第二章血液一般检验的标本采集、运输、保存操作规程一、未梢血标本采集二、静脉血采集、运输、保存第三章生化检验标本采集、运输、保存操作规程第四章免疫学检验标本采集、运输、保存操作规程第五章化学发光免疫分析项目标本采集、运输、保存操作规程第六章血气分析标本采集、运输、保存操作规程第七章凝血功能四项检测标本采集、运输、保存操作规程第八章微量元素检测标本采集、运输、保存操作规程第九章临床微生物学检验标本采集、运输、保存操作规程第一节尿液标本的采集、运输和保存第二节粪便标本的采集、运输和保存第三节上呼吸道标本的采集、运输和保存第四节痰标本的采集、运输和保存第五节化脓和创伤标本的采集、运输和保存第六节脑脊液标本的采集、运输和保存第七节胆汁标本的采集、运输和保存第八节胸水标本的采集、运输和保存第九节腹水标本的采集、运输和保存第十节生殖道标本的采集、运输和保存第十一节血液及骨髓标本的采集、运输和保存第十章液基薄层细胞学检查标本采集、运输、保存操作规程刖百在临床工作中,检验标本的分析结果是临床医生诊断疾病、制订治疗方案的重要依据,而标本采集及送检工作的合格与否直接影响检验结果的真实性,进而影响疾病的诊治工作。

为了进一步提高检验结果的准确性和可靠性,除了要求检验科提高检验质量水平■外,还要求临床医护人员正确采集标本。

为确保标本的正确米集、运输和保存,检验科特编写了临床检验标本米集、运输、保存操作规程,要求医护人员严格按操作规程采集、运输和保存标本。

第一章体液标本的采集、运输、保存操作规程―、尿液标本采集、运输、保存1 .尿液干化学测定:尿液比重、pH值、尿胆原、胆红素、潜血、酮体、蛋白质、白细胞、业硝酸盐、葡萄糖、抗坏血酸。

临床微生物标本采集和运送基本原则

临床微生物标本采集和运送基本原则

临床微生物标本采集和运送基本原则摘要:一、微生物标本采集和运送的重要性二、微生物标本采集的基本原则1.采集时机2.采集方法3.采集容器4.无菌操作三、微生物标本运送的基本原则1.快速送检2.妥善保存3.避免污染四、标本采集和运送的注意事项正文:临床微生物标本采集和运送基本原则是确保微生物检验结果准确、可靠的关键环节。

正确的采集和运送方法可以有效地捕捉与感染相关的病原菌,并保持其活性,同时减少其他与感染无关细菌的干扰。

一、微生物标本采集和运送的重要性微生物标本采集和运送在临床微生物学检验中具有重要意义。

它直接影响到病原菌的检出率和检验结果的准确性,为临床治疗提供重要依据。

二、微生物标本采集的基本原则1.采集时机:为避免漏检,确保病原体的检出,应尽量在抗菌药剂使用前采集标本。

2.采集方法:采集无菌部位的标本应严格无菌操作,非无菌部位尽量减少正常菌群的污染,采样量足。

3.采集容器:标本采集时应使用专用的无菌容器,防渗漏,有盖,无酸、碱、防腐剂等添加剂。

4.无菌操作:采集过程中应严格执行无菌操作,避免微生物污染。

三、微生物标本运送的基本原则1.快速送检:标本采集后应尽快送检,避免细菌在室温下长时间保存导致活性降低。

2.妥善保存:标本在运输过程中应妥善保存,避免高温、湿度、振动等影响标本的质量。

3.避免污染:运输过程中应防止标本受到污染,避免与其他物品混放。

四、标本采集和运送的注意事项1.标本的唯一性:送检申请单必须惟一标识,以便实验室能针对该标本选用相应培养基和适宜培养环境。

2.信息完整:送检申请单应注明样品名称、型号、年月、性状、标本来源、采集时间、检验目的及添加物使用情况等。

3.特殊标本的处理:对于特殊类型的标本,如血液、脑脊液等,应严格按照相关操作规程进行采集和运送。

总之,临床微生物标本采集和运送基本原则对于确保微生物检验结果的准确性和可靠性至关重要。

样本的采集、保存及运送

样本的采集、保存及运送

结果判读 原发性登革热的特点是在感染发作后 3-
5 天可检测到 IgM 抗体。继发性感染的特点是最

早可于疾病发作后 第 3 天检测到特异性 IgG 抗体
升高。但是,急性继发性诊断的峰值检测窗口是
疾病发作后 6-15 天。

应该结合 IgG 和 IgM 测试线的结果来判读。该试

验不是用于单独的 IgG 或 IgM 测试线分析,单独
三 取5微升(吸管第一刻度处)全血标本,垂直 加入金标卡上”加样孔A”内。
四 然后再撕开装有裂解液的铝箔袋,取出袋 内的裂解液管和吸管;并随即用该吸管吸取裂 解液,在“样品孔B”上垂直滴加4滴裂解液。
五 在十五分钟内判读结果。注意:必须在15
分钟内判读结果,如超时判断,结果无效
六 请遵循相关法规,妥善处理样本及废弃材 料。
环状滋养体的数量与构造,有助于疟原虫种 类的鉴别。恶性疟原虫的配子体很易识别, 但在初发时,一般需要在发作八日后才能在 末稍血液中出现,应当注意。
一 撕开铝箔袋,取出袋内金标卡。注意:不要 让袋内材料暴露于高温高湿环境,撕开铝箔袋 后尽快使用。
二 将金标卡平放在台面上;并将病人名字和编 号写在标签上。
(二)伊蚊成蚊和幼虫。
(一)临床标本采集
用无菌真空干燥管,采集患者非抗凝血,及时分离 血清,分装2份,保存于带螺旋盖、内有垫圈的冻 存管内,标记清楚后低温保存,其中1份用于现场 实验室检测,1份用于上级预防控制机构复核(附 件1,附表1)。
1.登革热临床诊断病例及疑似病例,每次采集血液 标本至少5mL。
2.登革热临床诊断和疑似的住院病例(包括初筛阴 性),应采集双份血液标本,入院当天和出院前1 天各一份。
3.疫点首发病例,必要时应采集第二份血标本,距 第一份血样采集日期间隔在7天以上。

5-临床标本采集、保存及核酸的提取-唐翠燕

5-临床标本采集、保存及核酸的提取-唐翠燕

• 总之,标本的收集及适当的预处理,对用 于PCR测定的核酸模板的成功提取,具有
决定作用。
二、核酸的提取
• 待检样品中的核酸是PCR反应的模板,由 于PCR具有高度的特异性和敏感性,一些 样品甚至简单到不需要任何处理便可用于 PCR。但是在大多数的情况下,还是需要 对样品作适当的处理才能用于PCR。
• 下列试剂是制备RNA的常规试剂:
• 裂解液:4mol/L GuSCN,25mmol/L柠檬 酸钠pH7.0,0.5%Sarkosyl, 100mmol/Lβ-巯基乙醇(用前加入)
• 饱和酚:氯仿:异戊醇(50:49:1)
• 3mol/L NaAc pH5.2 • 无水乙醇 • 75%乙醇 • DEPC处理的无菌去离子水 • RNAasin(RNA酶抑制剂)
钟,待大块状物下沉后,取上清立即离 心,其后的沉淀即可用于DNA提取。如不 立即用于核酸提取,则需保存于-20℃下。
• 2.4 脓液
• 脓液的处理依情况而定,如用于分枝杆菌 (如结核杆菌)核酸测定的标本,粘稠的 脓液同痰标本的处理模式,先进行液化, 再离心取沉淀提取DNA;水样的脓液则直 接离心,沉淀用生理盐水洗2~3次后,即 可用于DNA提取。
• 2.2 痰
• 痰属于分泌物,临床上常用作结核杆菌 DNA测定样本,由于痰中含有大量粘蛋白 和杂质,故在核酸提取时,需对样本进行 初步处理,用4%NaOH液化,需注意的 是,液化时不能加热,液化时间不能过 长。
• 液化标本如不立即用于核酸提取,可保存 于-20℃下。此外,对用于非结核杆菌如肺 炎支原体的PCR检测,痰标本只能室温悬 浮于生理盐水中,充分振荡混匀,促使大 块粘状物下沉,取上清离心,所得到的沉
5
• 2.3 75%乙醇漂洗DNA,是为了去除残余 的盐类,去除过量SDS和酚等杂物,因为 SDS在75%的乙醇中保持溶解状态,不与 DNA共沉淀,从而通过弃上清液去除这种 去污剂,避免对以后PCR反应的影响。

临床PCR检验标本的采集、处理、保存及核酸提取方法

临床PCR检验标本的采集、处理、保存及核酸提取方法
过晚都可能会出现假阴性结果)
标本采集部位的准备(适度消毒) 标本的类型和采集量 (衣原体 上皮细胞) 采样质量的评价(评价方法:肉眼观察、显微镜下观察和化
学分析)


采样及运输容器(一次性无菌器材,防腐剂,抗凝剂) 标本采集中的防污染(一次性无菌容器,防止混入操作
者头发,表皮等,如玻璃容器要高压灭菌)
临床PCR检验标本的采集、处 理、保存及核酸提取方法
江西省肿瘤医院 陈文学
检验误差的发生率


1997年,一位意大利著名检验专家对急诊检验 误差发生的种类和发生率进行了统计。结果显 示,约有68.2%的检验误差发生在检验前期, 而来自检验中期和检验后期的误差率分别为 13.3%和18.5%。 2007年,这位专家又进行了类似的统计,结果 显示,检验前期的误差发生率仍高达61.9%

试剂准备 ①裂解液:50 mmol/L Tris-HCl, 10 mmol/L EDTA, 2% Triton X-100, 4 mol/L 异硫氰酸胍盐(GITC), 0.3 mol/L 醋酸钠。 ②玻璃珠:(直径:425-600um)
乳汁标本离心6000rpm,5min,弃上清 脂质和沉淀用750ul裂解液重悬 重悬液移入含100mg玻璃珠离心管搅拌 煮沸5min,离心14000rpm,3min 650ul上清转移到另一离心管中,等体积异 丙醇沉淀
IgG
IgG的抑制作用是由于其与单链DNA
的相互作用,使得靶DNA不能与DNA 聚合酶相互作用
使用煮沸作为标本处理方法或使用
PCR前的热启动,将增强IgG对PCR反 应的抑制
去除或减轻抑制的一些方法
NaOH处理可中和临床标本中的Taq
DNA聚合酶抑制剂,但这种方法 不适用于DNA含量低的标本,因 为NaOH处理可使DNA大量丢失。

检验标本采集运输指南

检验标本采集运输指南

检验标本采集运输指南检验科民乐县妇幼保健院重要警示语将每一份标本都看作是无法重新获得、唯一的标本,必须小心地:采集、保存、转运。

按照时间顺序,从临床医生开出医嘱开始,到分析检验报告发回的步骤,包括:检验申请、患者准备、原始样品采集、运送到实验室完成分析前的质量控制。

大部分工作都是医生、护士、运输人员、检验人员共同协调完成。

在实验室检测以外空间完成的分析前的质量管理最易出现问题。

临床反馈不满意的检验结果,60%报告最终可溯源到标本质量不合格。

可靠的检验结果,第一个环节必须依赖于标本的高质量。

要获得高质量的标本:临床医生:应主动明确地告之患者如何配合好护理人员和检验人员:采集好、检测好标本运输人员:及时快速规范转运好标本在实验室进行检测、检验结果审核、报告数据发回。

一、采集标本前质量保证、对策(一)加强沟通,合理选项医生应认真、完整地填写检验申请单,特别是:患者服药史、特殊病理变化、留取标本、送检标本的时间等。

(二)患者准备,至关重要医护人员应了解在标本采集前影响结果的非病理性因素(药物、饮食、运动、治疗、生理变化、生活环境和习性、标本采集时间)正确指导患者,采取切实措施,规范采集标本前患者的一切行为,保证采集的标本符合疾病的实际情况,留取合格的标本。

应告之患者:试验名称、所需标本类型、为什么要检测、检测报告时间、如何获得结果。

(三)采集前准备:1、条码生成与粘贴。

2、合格的采血人员。

3、标准化的采血程序。

4、合格的采血器材。

二.标本基本类别全血、血浆、血清、尿液、粪便、脑脊液、心包积液、胸腔积液和腹腔积液关节积液、前列腺液和精液、痰其他(包括乳汁、泪液、房水、唾液、脓液和各种分泌物等)各种穿刺物[血液标本的采集]一.血液标本基本要求保持标本完整性:控制各种干扰因素保持标本新鲜:最好的尺度是时间拒绝不合格血标本:脂血、溶血、凝固等二.标本采集的时间(一)随机和急诊标本随机和急诊标本是指无时间限定或无法规定时限而必须采集的血和尿等标本,一般无法让患者进行准备。

核酸检测的流程是什么

核酸检测的流程是什么

核酸检测的流程是什么核酸检测是一种用于检测其中一种病原体(例如,病毒或细菌)是否存在的方法。

它是通过检测病原体的核酸(DNA或RNA)来确定其存在与否。

核酸检测在当前COVID-19大流行期间被广泛使用,以便迅速诊断感染的人群。

以下是核酸检测的一般流程:1.样本采集核酸检测最常用的样本类型是呼吸道分泌物,包括咽拭子或鼻拭子。

样本采集过程由专业人员进行,以确保正确采集和保存样本。

其他潜在的样本类型包括唾液、痰液、血液或粪便。

2.样本保存和运输采集好的样本需要被正确保存,以便在送检至实验室之前保持其完整性和稳定性。

这通常涉及将样本放入含有保存介质的容器中,并在低温条件下保存。

样本需要尽快运输到实验室进行分析。

3.样本前处理在样本进行核酸提取之前,需要进行一些预处理步骤。

这可能包括样本离心、稀释、加入缓冲液或去除潜在干扰物质等,以准备样本进行下一步的核酸提取。

4.核酸提取核酸提取是从样本中分离和纯化核酸的过程。

这可以通过不同的方法和试剂盒来完成,通常包括细胞溶解、蛋白质消化和核酸沉淀等步骤。

提取后的核酸应具有足够的纯度和浓度,以确保后续的检测步骤的准确性。

5.反转录(适用于RNA病原体)如果需要检测的是RNA病原体,那么在检测之前通常需要进行反转录(RT)。

反转录是将RNA转录为相应的DNA的过程。

这可以通过使用逆转录酶和引物进行RT-PCR(逆转录聚合酶链反应)来实现。

6.PCR扩增聚合酶链反应(PCR)是核酸检测的关键步骤。

在PCR中,特定的引物会通过温度循环在目标核酸序列中进行扩增。

PCR扩增可以使用不同的方法,如定量PCR(qPCR)或实时荧光PCR(RT-PCR)来检测扩增的DNA。

7.结果分析PCR扩增后,可以通过不同的方法来分析结果。

这可能包括电泳、荧光检测、免疫测定等。

这些分析方法将增加的核酸与已知病原体的标准进行比较,以确定样本中是否存在病原体。

8.结果解读和报告根据分析结果,可以判断样本是否呈阳性或阴性。

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临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
3、核酸的浓缩、沉淀与洗涤
沉淀可去除部分杂质与某些盐离子 加入一定的盐类(醋酸钠、氯化钠等)后
使用有机溶剂(如乙醇、异丙醇等) 少数盐类可使用70-75%的乙醇洗涤
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临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
4. 核酸的鉴定
浓度鉴定 纯度鉴定 完整性鉴定
临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
全血
l 以全血作为待测标本时,必须注意抗凝剂 的选择,一般使用EDTA-Na2或枸椽酸钠,不 可使用肝素
l 全血样本如用于DNA提取检测,可4℃下短 期保存,如用于RNA检测,则应在取血后, 尽快提取RNA
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Байду номын сангаас临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
血清(浆)
•酚 •抽 •提 •法 •提 •取 •步 •骤:
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临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
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•DNA酚抽提法示意图
临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
主要试剂的作用:
EDTA:1. 二价金属螯合剂,抑制核酸酶; 2. 降低细胞膜的稳定性
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临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
力,而且在SDS、EDTA存在时仍保持较高活性,可 同时使用
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临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
苯酚: l 蛋白质强变性剂、抑制DNA酶活性 l 苯酚溶于有机溶剂,微溶于水 l 提取DNA前苯酚用Tris-Hcl饱和,防止吸收过多
DNA,降低DNA的损失率 l 氧化苯酚会破坏DNA
l 每μg核酸标本中加入0.1U的肝素,即可100%的抑制 酶活性
l 在标本中加入肝素酶I 或Ⅱ1~3 U/μg核酸在于5 mM
Tris pH7.5, 1 mM CaCl2, 40 U RNasin 25 ℃下作用2
小时可去除肝素的抑制作用
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临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
(二)、样本的运送
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临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
DNA的沉淀:
1)无水乙醇沉淀
l 沉淀前往往加入NaCl等盐离子,作用是中和核酸分子表面的负电 荷,有助于分子之间的聚集。
l 无水乙醇可以吸收分子之间的水,使DNA沉淀析出,无水乙醇使 用前冰冻,可以减少DNA沉淀析出过程释放热量对DNA的损伤。
•RNA完整性鉴定:
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•正常时,28S RNA的荧光强度 约为18S RNA的 2倍,否则提示 RNA的降解
临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
5、核酸的贮存——DNA保存
1)短期贮存: 4℃或-20℃存放于TE(tris和EDTA)缓冲液中。 TE缓冲液的PH与DNA 贮存有关,PH为8时,可减少DNA 脱氨反应,PH低于7.0时DNA容易变性。
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临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
RNA:
l 紫外吸光光度法: A260×稀释倍数×40= μg/ml
(OD260-OD320)×稀释倍数×40= μg/ml
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临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
2)荧光光度法 荧光染料溴化乙锭,可嵌入到碱基平面,而发 出荧光,且荧光强度与核酸含量呈正比。 适用于低浓度核酸溶液的定量分析(1-5ng)
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(二)、核酸提取的基本步骤
1、核酸的释放:
破裂细胞
释放核酸
机械法与非机械法
(非机械法中溶胞法是应最广泛的方法)
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各种组织细胞破碎方法
Ⅰ机械法 Ⅱ物理法 Ⅲ化学法
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细胞破碎方法
1.匀浆法 2.捣碎法 3.研磨法 1.超声法 2.反复冻融法 3.冷热交替法 4.低渗裂解 1.有机溶剂 2.去垢剂
2)异丙醇沉淀
l 除了使DNA沉淀外,还可以溶解少量的小的RNA分子
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(二) 甲酰胺解聚法:
l 破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白 质与DNA的结合,再透析获得DNA。高浓度甲酰 胺可以裂解蛋白质与DNA的复合物,可以使蛋 白质变性。减少了酚多次抽提的步骤
第十天提取效果差
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(二)、DNA提取
(一)酚抽提法: 先用EDTA、 SDS 、蛋白酶K破碎细胞, 消化蛋白,然后用pH8的Tris饱和酚或酚 -氯仿抽提DNA,最后乙醇或异丙醇进行 沉淀。获DNA大小为100-150kb。
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标本采集的注意事项
l 所有标本的采集、运送和处理应在无菌操作,防止污染的原则 下进行
l 已采集标本都应置于防漏、密封的无菌容器中运送 l 采集足够量标本 l 每份标本都应标记患者姓名、送检号码、标本来源、具体部位、
日期、时间及相关临床信息
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2)长期贮存: TE缓冲液中-70℃保存数年;在DNA溶液中加一滴氯仿 可有效防止细菌和核酸的污染。
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核酸的贮存——RNA保存:
l RNA可溶于0.3mol/L的醋酸钠溶液或双蒸水,在70℃保存。
l RNA可溶于70%的乙醇溶液或去离子的甲酰胺溶液 中,可在-20 ℃保存。
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(一)、提取核酸总的原则
l 保证核酸一级结构的完整性; l 其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类 分子的污染应
降低到最低程度; l 核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过
高浓度的金属离子; l 其他核酸分子,如提取DNA中的RNA,也应尽量去除。
SDS的作用: 1. 溶解膜蛋白和脂肪,从而使细胞膜破裂 2. 溶解核膜和核小体,使其解聚,将核酸
释放出来 3. 对RNA、DNA酶有抑制作用 4. 与蛋白质形成R-O-SO3 ….R蛋白质复合物,
使蛋白质变性
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蛋白酶K: l 水解蛋白质的作用,消化DNA酶和细胞中的蛋白质 l 蛋白酶K与其他蛋白酶相比,它具有更强的水解能
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肝素的作用机理
l 肝素对MLV逆转录酶和TAQ DNA聚合酶均很强的抑 制作用,如果临床标本为肝素抗凝,则在核酸纯化过 程中,标本中的肝素可结合于DNA和RNA上
l 对标本进行煮沸、凝胶过滤、酸碱处理后凝胶过滤、 反复乙醇沉淀等均不能去除肝素的这种干扰作用
l 甲酰胺解聚法适用于从标本中制备高分子量的 DNA样品。可得DNA 200kb左右。
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(三)磁珠法: l 磁珠在高盐低pH值下吸附核酸,在低盐
高pH值下与核酸分离,再通过移动磁珠 来获取DNA
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(四)微柱法 :
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浓度鉴定
DNA:
1)紫外分光光度法:测定DNA在A260nm的光吸收值。 如计算DNA浓度
A260×稀释倍数×50= μg/ml
•(A值等于1时,相当于50μg/ml双链DNA, 40μg/ml单链DNA或RNA, 20μg/ml单链寡核苷酸)
紫外分光光度法只用于测定浓度大于0.25ug/ml的核酸 溶液。
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DNA提取前样本采集、 预处理和保存:
全血 抗凝剂:
EDTA-Na2 或枸橼酸钠 作为抗凝剂 不宜使用肝素
-80℃ 4℃ 室温
抗凝剂处理血 肝素 柠檬酸* EDTA*
保存2个月,第10天收率90%
第四天收率90%
第10天提取效 果差
提取效果差
第十天收率85% 第四天收率90%
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临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
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•EB与DNA的结合
临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
纯度鉴定
紫外分光光度法:
l 在260nm和280nm处测定DAN溶液的光吸收,纯的DNA A260与A280之比 应在1.80 (1.60~1.80),低于此值表明制备物中留有蛋白质成份。高 于此值表明有RNA的残留量
l RNA如果以DEPC(焦碳酸二乙酯)可以抑制RNA酶 对RNA的降解
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临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
三、基因组DNA的分离 与纯化
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临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
(一)、DNA样品准备
l 常见的标本: 血液、尿液、唾液、组织及培养细胞等
l 生物组织: 最好新鲜组织,若不能马上提取,应贮存 - 70℃或液氮
l 利用DNA在高盐、低pH的特定溶液环境下可吸 附在固相介质(如硅胶膜)上,洗涤去除杂质后, 再改变溶液环境使DNA溶解到纯水或TE中
临床样本的采集、运输 和保存及核酸提取
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2020/11/7
临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
•研究背
样本的采集、处理 景 样本的保存 样本的运输 DNA的提取 RNA的提取
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临床样本的采集运输和保存及核酸提 取
•研究背 景
一、样本的采集、 处 理、保存及运输
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