实时荧光定量PCR仪性能指标对比
实时荧光定量PCR仪介绍
实时荧光定量PCR仪介绍 | QPCR的国际标准---MIQE | 联系我们仪器名称实时荧光定量PCR仪英文名称Real-Time QPCR System国产/进口进口产地/品牌美国品牌，德国制造型号Mx3000P/Mx3005P实时荧光定量PCR仪【性能参数】美国安捷伦Stratagene公司实时荧光定量PCR仪Mx3000P/Mx3005PMx3000P系统性能指标：激发光源：石英卤钨灯检测器：扫描光电倍增管(PMT）多重检测：四个光学通道，并提供用户选择的滤光系统加热系统：Peltier的热循环加热模块内置芯片在断电或连接中断时自动保存数据样品量：96孔高通量平台，反应体系10-100ul外形尺寸：33cm(宽) x 46cm(长) x 43cm(高)，重量：20kgMx3000P系统参数配置：动力学范围：10个数量级激发光范围：350—750nm发射光范围：350—700nm温度均一性：+/- 0.25℃温度精确性：+/- 0.25℃升降温速率：2.5℃/秒兼容所有常规荧光染料：FAM、SYBR Green I 、Texas Red、ROX、TET 、Cy3、Cy5、HEX、JOE、VIC 、TAMRA、ALEXA Fluor 350等标准配置的滤光片组为：Cy5，HEX，FAM，ROX具有快速QPCR功能(反应时间在50分钟内)Mx3000P软件功能：•分析功能强大：通过一台计算机可连接和控制6台QPCR仪;可同时分析12个独立的96孔板;也可以在同一块板上进行和分析不同的实验•设置和运行简单：根据实验目的和方法不同，可选择多种实验设置：（多重）绝对定量PCR、相对定量PCR、Sybr Green定量及熔解曲线分析、SNP分析、Molecular Beacon熔解曲线分析等使用简便：实验条件设置、反应过程监控、数据显示分析三大功能模块从同一界面链接，直观简便•实时观测和数据分析：反应过程中可实时监测和收集荧光信号，在实验还未结束的情况下便可对现有数据进行分析提供多种数据显示模式：用户可根据自己需要选择：扩增曲线模式、熔解曲线模式、标准曲线模式、原始荧光信号模式、最终定量结果模式等•多种数据传输格式：所有结果可以原始数据的形式显示，也可输出到Excel 中作进一步分析，曲线和表格等结果可直接用于PowerPoint、Text等文档中。
快速荧光定量PCR比较表
德国耶拿qTOWER 3G德国耶拿qTOWER3G touch罗氏LightCycler 480II仪器光源采用蓝色、绿色、红色、白色（RGBW）四个高强度长寿命LED光源采用蓝色、绿色、红色、白色（RGBW）四个高强度长寿命LED光源高强度，宽光谱光源，寿命不低于10000小时通道最高六通道的配置，可灵活配置成1-6通道中的任意一种通道数，而且使用过程中可以随时进行通道数升级，以满足未来更多的检测需求最高六通道的配置，可灵活配置成1-6通道中的任意一种通道数，而且使用过程中可以随时进行通道数升级，以满足未来更多的检测需求≥5通道（校正通道，专用共振通道FRET除外）检测器通道式光电倍增管（CPMT）通道式光电倍增管（CPMT）冷CCD滤光系统有12 种激发/检测滤光片组可供自由组合，包括滤光片错配的FRET检测组合和专用于蛋白熔解曲线分析的滤光片组有12 种激发/检测滤光片组可供自由组合，包括滤光片错配的FRET检测组合和专用于蛋白熔解曲线分析的滤光片组激发/检测可自由组合≥20种样品通量96孔96孔96孔/384孔激发光范围≥5通道广泛的激发波长400－700nm，可以使用尽可能多的荧光信号检测光范围400－700nm可用荧光染料（470 nm-520 nm）FAMTM, Sybr®Green, Alexa488®（515 nm-545 nm）JOETM, HEXTM, VIC®, YakimaYellowTM（535 nm-580 nm）TAMRATM, DFOTM,Alexa546®, NEDTM（565 nm-605 nm）ROXTM, TexasRed®, Cy3.5®（630 nm-670 nm）Cy5®, Alexa633®,Quasar670TM（660 nm-705 nm）Cy5.5®, LightCyclerRed®（470 nm-580 nm）FAMTM (donor) /TAMRATM (acceptor)（470 nm-670 nm）FAMTM (donor) / Cy5® (acceptor)（470 nm-705 nm）FAMTM (donor) /Cy5.5® (acceptor)(515 nm-670 nm)JOETM (donor) / Cy5®(acceptor)(470 nm-605 nm)FAMTM(Donor)/ROXTM (acceptor)(490 nm-580 nm)SYPRO® Orange（470 nm-520 nm）FAMTM, Sybr®Green, Alexa488®（515 nm-545 nm）JOETM, HEXTM, VIC®, YakimaYellowTM（535 nm-580 nm）TAMRATM, DFOTM,Alexa546®, NEDTM（565 nm-605 nm）ROXTM, TexasRed®,Cy3.5®（630 nm-670 nm）Cy5®, Alexa633®,Quasar670TM（660 nm-705 nm）Cy5.5®, LightCyclerRed®（470 nm-580 nm）FAMTM (donor) /TAMRATM (acceptor)（470 nm-670 nm）FAMTM (donor) / Cy5® (acceptor)（470 nm-705 nm）FAMTM (donor) /Cy5.5® (acceptor)(515 nm-670 nm)JOETM (donor) / Cy5®(acceptor)(470 nm-605 nm)FAMTM (Donor)/ROXTM(acceptor)(490 nm-580 nm)SYPRO® Orange荧光染料（SYBR Green I）等检测动态范围10个10个10个温度均一性±0.15 ℃±0.15 ℃±0.2 ℃升降温速度升温速率：最大8 ℃/s降温速率：最大6 ℃/s升温速率：最大8 ℃/s降温速率：最大6 ℃/s≥3.3 ℃/s(升降温速率连续可调)实时荧光定量PCR仪比较表罗氏LightCycler 96美国热电（原ABI）Prism 7500 Fast美国热电（原ABI）Prism 7900HT Fast高强度白色固态光源的寿命长达10000-20000个小时。
实时荧光定量PCR仪参数
实时荧光定量PCR仪参数1仪器性能1.1检测模式：HybProbe杂交探针、SimplProbe单探针、染料模式、水解探针、分子信标、蝎型探针、高分辨率熔解曲线（HRM）等1.2线性范围：1-1010个拷贝1.3检测灵敏度：可检测单拷贝基因1.4模块规格：支持96孔模块与384孔模块1.5★模块互换：用户可自行更换并升级至384模块，自行手动更换后无需校准1.6重复性：样品检测CV≤0.15% (50nmol/l荧光浓度)1.7精密度：≤1.5倍拷贝数差异，置信度≥99.8%2硬件配置2.1温控系统2.1.1★温控模块：采用新型半导体温控模块，可消除温控边缘效应的有效技术设计2.1.2★模块设计：所有样本对应的温控模块一体化成型，不由独立的多个小型模块组合而成2.1.3★温控模块平均温控速率 > 6.5 ℃/s2.1.4样本平均温控速率 > 4.5℃/s2.1.5温度准确性：≤0.1 ℃（37-99 ℃）2.1.6★温度均一性(Tm)：±0.1 ℃（37-99 ℃）2.1.7熔解曲线温度分辨率≤ 0.02 ℃2.1.8★高分辨率熔解曲线反应时间：<10分钟（提供实际软件截图证明）2.1.9反应体积：96孔板为10-100ul，384孔板为5-20ul2.1.10反应时间：40个循环反应：≤60分钟(96孔标准检测) ；≤40分钟 (384孔标准检测)2.2光学系统2.2.1光源：新型固态光源2.2.2★单个光源寿命：> 10000小时2.2.3检测通道数≥6通道2.2.4★检测系统：冷CCD2.2.5所有样本同时激发并采集数据，孔间无时间差2.2.6光路设计：2.2.6.1激发滤光片与检测滤光片可自由组合，提供至少20种不同的组合的检测模式2.2.6.2采用有效消除光学边缘效应的技术设计2.2.6.3全固定光路设计，激发光源与检测系统在工作中无需移动，保证系统稳定性3软件3.1颜色补偿功能：具备3.2软件：具有定性定量（绝对定量、相对定量）、自动报告熔解温度、自动报告基因分型结果、高分辨率熔解曲线分析等功能，配套的运行和结果分析软件，能够针对观察到的扩增情况随时增加循环数目，实时动态监测，扩增和检测同时进行3.3数据导出：Excel ,TXT, PDF, XML, GIF, PNG, BMP, JPEG4试剂4.1配套耗材：开放平台，可使用市面上国产或进口的各品牌试剂及第三方提供的8连板、96孔板和384孔板4.2支持的荧光染料种类：包括但不限于FAM™、SYBR®、Fluorescein、SYPRO®Orange、VIC®、JOE™、TET™、HEX™、TAMRA™、TexasRed®、Alexa Fluor 633、LC Cyan 500、Fluo 3、ResoLight、EvaGreen、LC Green、Cy3、Cy5、Yellow555、LC Red610、ROX、SYPRO Ruby、LC Red640、Snarf 1、Acid Fuchsin、Cy5.5、LC Red670、LC Red705等5仪器配置5.1主机，配套96孔和384孔模块5.2除标配外，另配光源寿命 > 10000小时的原厂新型固态光源一个5.3操作手册（中英文版本）5.4软件安装光盘5.5控制单元：原装进口电脑（配置不低于：酷睿I5-6500，内存：8GBDDR4 2133MHz，硬盘：2T，并口(PCI)*1，串口(PCI-E)*5，USB 3.0*2，USB 2.0*4）5.6操作系统：至少Windows 7 专业版5.7扩展性：具备LIMS（实验室信息管理系统）接口，可以实现远程控制并可以结合自动装载微孔板的工作站。
全自动实时荧光定量PCR仪技术参数
全自动实时荧光定量PCR仪技术参数全自动实时荧光定量PCR仪技术参数1、工件条件：电源：AC220V±10%50-60Hz环境温度：10-30℃相对湿度：≤80%2、仪器性能与技术指标：2.1热循环系统：96孔珀耳帖效应系统；*2.2通道数：至少具有6色激发光通道和6色检测光通道，并且每一孔可同时检测6种不同的目标基因；6色激发光通道和6色检测光通道互相组合，可在一次实验运行中采集多达15种不同的荧光波长组合，用于进行多重分析2.3加热模块具有6个独立数码控温模块组成，每个控温模块可独立手工精确设置运行温度；相邻两个模块之间的温度差可达5℃，每个温度孵育时间相同；2.4试剂开放，各种国产及进口试剂均适用；2.5耗材开放，可使用0.2mL单管、八联管、96孔板等；2.6PCR主机具有触摸屏，可独立运行，离线操作，无需连接电脑即可实时监控PCR 荧光扩增曲线；*2.7荧光定量PCR仪主机自带存储功能，可备份还原超过1000次的定量运行文件；2.8激发光源：高亮度白光半导体光源（工作寿命>4年）；*2.9检测系统：CCD或CMOS成像系统，所有孔同时采集荧光数据，不同检测孔之间没有时间差；2.10支持的荧光染料：FAM?，SYBR?，VIC?，JOE?，TET?，HEX?，TAMRA?，NED?，Texas Red?，Cy?3，ABY，JUN，LIZ?，Cy?5，Cy?5.5等；*2.11温控模块最高升温速率：至少6℃/秒；*2.12温控模块在实验运行前及实验运行后，均可保持4℃恒温，防止试剂常温降解*2.13温控范围：4℃～99.9℃；2.14温度准确性：≤±0.5℃；2.15温度均一性：≤±0.5℃；2.16灵敏度：单拷贝检测/反应体系；*2.17精密度：最低可分辨1.5倍拷贝数差异；2.18线性动态范围：9个数量级；2.19提供仪器厂家正版的引物与探针设计软件，可进行Taqman、TaqmanMGB等常用探针的设计和自动测评2.20具有USB、Wifi和云服务平台接口，可单机运行，可连接电脑运行，或通过云服务平台运行，使用户直接登录网络浏览器，随时随地查看和分析、分享实验数据。
实时荧光定量PCR仪比较表
软件易用性
LED
3通道
2/4通道
2、4、5、6不 3块检测滤光片 /6块检测滤光片 等 PMT 光电二极管 3个/6个发射光 检测滤光镜 32
五通道
4通道
2/4/6/8通道
光电二极管 带有3个/4个检 测端滤光片 48孔/96孔
1/2个PMT 激发端没有滤 光片发射端有 2/4个滤光片 96孔
ＣＣＤ ５个激发端滤 光片和６个检 测断滤光片 ９６／３８４
卤钨灯 5通道其中一个 为校正染料通 道 冷CCD
5
4
2
2
4 通道
5通道
6个光电二极管 5个光电二极管 3个光电二极管 2个光电二极管 6个激发与6个 检测 96孔 5个激发与5个 检测 384孔
PMT
PMT
5个激发光滤镜 4个激发光滤镜 5个激发光滤镜 3个激发与3个 48个激发与2个 光栅分光/全波 6色激发滤光片 与5个发射光滤 与4个发射光滤 与5个发射光滤 检测 检测 长检测 /6色检测滤光片 镜 镜 镜 96/384(14块 标准96孔模 48 96孔 96孔 96孔 96孔 384孔样品板/ 块；• 快速96孔 天) 模块；• 384孔 450-580 nm 470-500 nm 350-750nm 350-750nm 488nm
有
有 单个拷贝的基 因组DNA Peltier半导体
有 单个拷贝的基 因组DNA Peltier半导体
实时荧光定量PCR
绝对定量 相对定量
突变检测
等位基因检测
＊
荧光定量PCR的方法
定量可分为绝对定量（即测定X的分子数量） 和相对定量（即测定不同样本中X的比率）
X指原始模板
绝对定量 构建标准曲线： A、按照扩增片段的序列，人工合成一段寡聚核苷酸。 B、克隆有扩增产物的质粒 C、利用纯化的扩增产物制备
对照组 实验组
靶基因A 25.2
22.1
GAPDH 19.5
20.8
ΔCt 5.7
1.3
1．计算ΔCt：ΔCt=Ct
靶基因－Ct GAPDH，分别计算实验组
和对照组的ΔCt。 2．计算ΔΔCt：ΔΔCt=ΔCt实验组－ΔCt对照组，本例中 ΔΔCt= －4.4。 3．计算相对表达量的差值。2
－ΔΔCt
的量，从而排除了因管间扩增效率的不同所致的差异。
非竞争性内标准
（1）与靶核酸无关的基因序列； （2）既可是内源的也可是外源的； （3）与靶核酸无相同的引物结合位点和扩增序列； （4）最常用的是β-actin、GAPDH、rRNA基因等管家
基因；
竞争性内标准
“竞争性”内标：人为构建的可与原始靶核酸竞争酶、核苷酸
实时荧光定量PCR（FQ－PCR)
通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物 进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软 件对结果进行分析，计算待测样品的初始模板量。
荧光定量 PCR仪
荧光定量PCR仪是一种带有激发光源和荧光信号检测系 统的PCR仪，通常配有电脑系统及相应的分析软件。
荧光定量PCR仪的几个关键部分
硬件部分： PCR热循环系统 光学检测系统 包括：光源、滤光片、放大器、检测器 软件部分： 校正：荧光干扰/加样误差 结果分析：基因表达分析等
荧光定量PCR仪参数比照表
这个表格反映的是碱基的不同，带来的Tm值的变化，可以看出A/T之间的突变，需要温度分辨率小于﹤0.2℃才能区分开，而象AB等其它公司的分辨率是± 0.25℃，所有它是区别不开第四类的SNP变化的，HRM技术的发明者，曾发表过一篇文章，用市场上所有能做HRM机器的定量，做了一次比较，结果显示QIAGEN Rotor-Gene Q 是能做的最好的一个公司；文章全文可见以下链接：Herrmann et al 2007 Clinical Chemistry 53,/cgi/content/abstract/clinchem.2007.088120v1 Expanded Instrument Comparison of Amplicon DNA Melting Analysis for Mutation Scanning and GenotypingFig 1 (detail) Normalized melting curves of a 110 bp β-globin amplicon (triplicate HRM data)以下是一些关于定量PCR HRM（High Resolution Melt中文：高分辨率熔解曲线）一些介绍！（QIAGEN）有2个最显著特点：1）是温控精度非常高（温度均一性：±0.01℃，温度分辨率：±0.02℃）及升降温速度非常快（升温可达15 ℃/秒，降温可达20℃/秒）2）是区别与其它的公司定量PCR的是它的HRM功能，这个是其它厂家都无法能做到的（比如ABI 7500Fast及其它公司这种板式加热系统，因为它的温度分辨率达不到）QIAGEN 是一个集遗传分析和定量完美结合的一款机器;现阶段,大家检测SNP时都用一贯的检测方法,包括测序,探针还有DHPLC等等,而甲基化大多用MSP.至于HRM技术并不为大家所熟知,有两个原因:1)适合做HRM技术的仪器在国内的普及程度不高,具我了解能真正能够做HRM的只有QIAGEN Roter-Gene Q+HRM系列和Idaho LightScanncer.Roche；其中QIAGEN 在其温度控制及软件分析上是做的最好的. （其它的比如ABI 7500 Fast及伯乐也对外宣传它的HRM功能，但由于它的温控精度，决定了它做HRM功能是做不好的，可见也是一个赶时髦的功能，也只能通过软件的模拟来处理）2)HRM的实验灵敏度太高,影响实验因素过多,很多人都做了,但是就是做不出来.因此就放弃,就换用其他比较成熟的方法.殊不知,HRM技术的检测方法有其他技术难以比拟的优势，不仅能实现高通量和高精度的同时,PCR和荧光定量在同一管内进行,能够有效避免假阳性.（QIAGEN 在上海有个用的非常好的用户，是交通大学华山医院的关明主任，用这个机器发表了一篇非常好的文章，如果老师有兴趣，可过去看看）作为新一代的遗传扫描工具,HRM具有"简,效,快,廉"等其他技术难以比拟的优势:简:无需序列特异性探针,不受碱基位点局限,同时检出已知或未知突变、SNP和甲基化位点：闭管操作，避免交叉污染。
PCR仪不同分类的对比
PCR仪不同分类的对比PCR（聚合酶链反应）是一种用于扩增DNA（脱氧核糖核酸）的技术。
PCR仪是 PCR 实验中不可或缺的设备。
PCR 仪种类繁多，根据不同的特点和实验需求，可以将 PCR 仪分为以下几类。
1. 常规 PCR 仪常规PCR 仪是最早的PCR 仪，其主要特点是功率稍小，不适用于大规模扩增。
其定温功能常常采用两步式升温，程控温度区间为4-99°C，最高可达100°C。
常规 PCR 仪最常见的是使用96孔板，但也有少量供应48孔、384孔板的型号。
常规 PCR 仪适用于小规模试验和学术研究，其优点是设备简单，价格便宜，维修方便。
不过，由于功率小，不能满足高通量的扩增。
2. 实时 PCR 仪实时 PCR 仪是常规 PCR 仪的升级版，是目前应用最广泛的 PCR 仪型号。
与常规PCR 仪相比，实时PCR 仪功率大、扩增速度快，精确度高，适用于高通量扩增。
实时 PCR 仪不仅可以监测反应进行，还可以在反应进行中以定量方式测定扩增物的量和浓度。
其工作原理是在反应进行中，通过测量荧光信号来测定扩增产物的量。
在定量PCR（qPCR）实验中，荧光群体的荧光强度与样品中目标分子的浓度成正比，荧光信号可实时在反应过程中收集，并使用软件来分析和研究反应的结果。
实时 PCR 仪可分为相对定量和绝对定量两种：相对定量是以对照样本中的目标分子浓度作为基准，与待检样本中的目标分子浓度比较，用来研究基因在不同组织、不同阶段或不同环境下的表达量差异；绝对定量是基于标准曲线法，利用标准品进行定量，得出目标分子的精确浓度。
3. 数字 PCR 仪数字 PCR 仪是一种新型 PCR 仪，它采用了数字化技术，可以更加准确地定量扩增产物。
数字 PCR 仪工作原理是将反应混合液分散到微型液滴中，每个微滴只有一个扩增产物分子。
之后在 PCR 反应中，每个微滴中的分子会自行扩增成百万甚至亿级别的扩增产物，通过计数液滴个数及所含扩增产物的分子数，就可以得出目标分子在样品中的绝对量。
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ALEXA Fluor ® 350 (350nm440nm), FAM ™/SYBR® Green I (492nm516nm), TET (517nm538nm), HEX ™/JOE™/VIC ™ (535nm555nm), Cy3™ (545nm568nm), TAMRA™ (556nm580nm), ROX ™/Texas Red® (585nm610nm), and Cy5™ (635nm665nm).
Stratage Stratage ne ne Mx3000 Mx3005 P P
ABI, Prism 7500
Eppend ABI Step RotorBio-Rad orf:2 / 4 One/Plu Gene CFX96 Color s 6000 Systems
5－100ul （通常 20ul）
软件功能比 较强大。
Stratagene定量软件的操作简单，有口皆碑！
Stratage Stratage ne ne Mx3000 Mx3005 P P
1.开放的系 统，宽广的 波长范围， 能采用所有 的定量探针 染料 . 2.孔间 温差小，实 验重复性好 。 3. 采用 PMT检测， 减少激发光 、检测光交 叉干扰，提 高灵敏度 4.软件功能 强大，但非 常简单易用 5，机器内置 芯片能保存 数据，电脑 死机等情况 不会丢失数 据。 6，5通 道配置，支 持FRET应用 。7，完全的 荧光定量 PCR培训项 目。8，个人 化的荧光定 量PCR仪
激发光与发射光的双重过滤能排除杂光的影 响，从而提高检测的准确性
样品通量
96孔
96孔
96孔
48孔/96孔
96孔
96孔
36/72/100 365nm/470 nm/530nm/ 585nm/625 nm/680nm/ 460nm
32
９６／３８ ４
96孔通量高，可以采用多孔板方便操作。
激发光范 350-750nm 350-750nm 围
光源
石英卤钨灯 石英卤钨灯
卤钨灯
蓝光LED
6个LED
96个蓝光
LED
LED
1个LED
氙灯
石英卤灯激发范围宽广，光强强，非常适合做 多通道的定量PCR，LED的激发光源是冷光源 相对 寿命相对也要长，但是光强度低，光的 激发范围受限制。
通道
4 通道
5通道
5通道其中一 个为校正染 料通道
3通道
5
2/4通道
Stratagene的可用染料最多,开放性最好
Stratage Stratage ne ne Mx3000 Mx3005 P P
检测动态 范围 温度均一 性
10个 10个
ABI, Prism 7500
Eppend ABI Step RotorBio-Rad orf:2 / 4 One/Plu Gene CFX96 Color s 6000 Systems
450-730 nm
530， 640 ，705nm/ 460nm/510 530， nm/555nm/ 560，610， 430-630nm 610nm/660 640 ， nm 670， 705nm
Stratagene检测光范围最宽广
可用荧光 染料
ALEXA Fluor® 350 (350nm440nm), FAM ™/SYBR® Green I (492nm516nm), TET (517nm538nm), HEX ™/JOE™/VIC ™ (535nm555nm), Cy3 ™ (545nm568nm), TAMRA™ (556nm580nm), ROX ™/Texas Red ® (585nm610nm), and Cy5™ (635nm665nm).
2、4、5、6 不等
3块检测滤光 片/6块检测 滤光片
五通道
多通道是定量PCR发展的趋势，现在多通道的 荧光定量实验也越来越多，主流的是4通道
检测器
PMT
PMT
冷CCD
6个光电二极 1/2个PMT 光电二极管 管
PMT
光电二极管
ＣＣＤ
采用CCD检测器具有边缘效应，做实验时必须 加入校正染料。采用PMT检测器，能将光信号 放大，检测灵敏度高，无需校正染料。发光二 极管的检测灵敏度低。
实时荧光定量PCR仪比较表
Stratage Stratage ne ne Mx3000 Mx3005 P P ABI, Prism 7500 Eppend ABI Step RotorBio-Rad orf:2 / 4 One/Plu Gene CFX96 Color s 6000 Systems Roche LightCy cler 1.5/2.0 Roche LC480 简 评
FAM™ /SYBR® Green FAM™ I,VIC™ /SYBR® Green, VIC /JOE ™,NED/TA ®/JOE™, and ROX™ MRA™ /CY3,和 ROX™ CY5
FAM™ LightCycle /SYBR® r®Cyan Green 500/ SYBR SYBR® I,TET,HE FAM/SYB,L Green I/ 没有明确注 Green, C610.LC71 X VIC™ FAM/ 明可用染 FAM, VIC, 0(2.0增加 料， HEC(VIC)/ /JOE,/TA HEX TET, HEX, SybrGreen I LightCycle MRA ™ ,JOE,640,6 ROX, JOE, 可用 r®Red 610/ 70) TAMRA /CY3,Texa LightCycle s Red和 r®Red 640/ ROX™ Cy5 CY5
Roche LC480
简
评
软件功能强 大，支持绝 对定量分析 、基因表达 软件易用 差异分析、 SNP分析等不 性 同应用模式 、操作非常 方便简单， 界面直观。
软件功能强 大，支持绝 对定量分析 、基因表达 差异分析、 标准曲线分 SNP分析等不 绝对定量 析，Δ CT与 同应用模式 （标准曲 Δ Δ CT进行 、操作非常 软件操作复 线）、Δ Δ 相对定量分 方便简单， 杂、单个软 CT进行相对 析，基因分 界面直观。 件功能薄弱 定量分析、 型、读板实 支持激发光 。 基因分型、 验。数据输 滤光片与发 融解曲线分 出方便。具 射光滤光片 析 有e-mail提 的单独控 醒功能。 制，能形成 滤光片的错 配，从而来 满足 FRET应 用。
15度/秒
0.1-20度/秒
升4.8度/秒, 降2.5度/秒
相比同类型产品,Stratagene的升降温速度快
检测灵敏 度（准确 性）
单拷贝（区 别5000个拷 贝与10000 个拷贝的可 信度为 99.7％）
单拷贝（区 别5000个拷 贝与10000 个拷贝的可 信度为 99.7％）
≤50 fM fluorescein
PCR反应的一般体积都是20－50ul
试剂和耗 材
开放
开放（支持 专门为 ABI专用耗材 FRET） Taqman设计 （0.1mL）
低缘管
开放
快速PCR 功能
与Full 与Full Velocity配 Velocity配 合使用可以 合使用可以 快速至 50分 快速至 50分 钟完成 钟完成
无
有，快速功 能40分钟内 完成
Roche LightCy cler 1.5/2.0
Roche 80
简
评
反应体积
10～100uL
10～100uL
20～100uL
10-30uL
1～50uL
20ul－100ul 10uL-100uL 的毛细管 (96 well) （反应体积 and 5uL20uL (384 可最少到 well) 5ul）
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升降温方 式
Peltier半导 体
Peltier半导 体
Peltier半导 体/step one plus 使用 Peltier半导 Peltier半导 VeriFlex 技 体 体 术分为6个 独立控制区 域
Peltier半导 体
空气加热制 空气加热制 冷 冷
Peltier半导 半导体加热制冷控温更加精确。空气加热制冷 体 虽然快速，但是控温不精确。
5通道，能与 Taqman探 针很好的匹 配，软件使 用麻烦，需 要校正染料 。仪器搬动 后需要校正 光路。有引 物探针设计 软件，但只 能设计引物 与Taqman探 针。有单独 的相对定量 软件。
目前StepOne 系列的光学 系统没有详 细信息。只 是知道LED激 发所有的孔 。
具有梯度 和快速功 能 LED+光电 二极管 （检测灵 敏度值得 怀疑）； 逐孔扫描 （光源移 动）；操 作温度30100℃
激发端没有 ５个激发端 4个激发光滤 5个激发光 5个激发光 带有3个/4个 3个/6个发射 6个激发与6 滤光片发射 滤光片和６ 检测滤镜片 光检测滤光 滤光系统 镜与4个发射 滤镜与5个 滤镜与5个 检测端滤光 个检测 端有2/4个滤 个检测断滤 发射光滤镜 发射光滤镜 光滤镜 片 镜 光片 光片
9个 9个
Roche LightCy cler 1.5/2.0
9个
Roche LC480
简
评
9个
9
10个
10
宽广的动态范围有利于摸索实验条件
(+/-)0 .25
(+/-)0 .25
(+/-)0.5
± 0.5 ° C
±0.4° C
± 0.4 ° C
＋/-0.01
(+/－)0.4
(+/-)0 .35
Stratagene改进了传统的模块加热方式，使得 温度非常均匀，实验的重复性更好
ABI, Prism 7500