转 铁 蛋 白(Transferrin)测定标准操作程序SOP文件
转铁蛋白

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化验取材
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化验类别
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化验结果意 义
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化验方法
血清运铁蛋白,TF
ELISA法、RIA法: 成人:2.20~4.0g/L (220~400mg/dl) >60岁: 1.80~3.8g/L (180~380mg/dl)
(1)升高:缺铁时增高(缺铁性贫血)、铁蛋白释放增加(急性病毒性肝炎、肝细胞坏死)。
转铁蛋白
运铁蛋白
01 简介
03 相关疾病
目录
02 参考资料
转铁蛋白又名运铁蛋白 transferrin,TRF,siderophilin)是血浆中主要的含铁蛋白质,负责运载由消化 管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。以TRF-Fe3+的复合物形式进入骨髓中,供成熟红细胞的生成。
简介
01
别名
02
(2)降低:感染性疾病、风湿性关节炎、原发性肝癌、肾病、尿毒症、遗传性运铁蛋白缺乏症、流行性出血 热、血色病、再生障碍性贫血、慢性溶血性贫血、系统性红斑狼疮等。
血液
蛋白质测定
血液生化检查、蛋白质测定
参考资料
《新编临床检验与检查手册》、《新编化验员工作手册》
相关疾病Βιβλιοθήκη 发性肝癌感谢观看
转铁蛋白 沉淀

转铁蛋白沉淀
转铁蛋白(transferrin)本身不直接与“沉淀”这一概念关联,但在特定条件下可发生沉淀现象。
转铁蛋白是一种重要的血浆蛋白,负责运输铁离子到身体各部分。
转铁蛋白结合的铁不会催化羟基自由基形成,具有抗氧化和抗菌作用。
在某些情况下,如疾病或化疗过程中,转铁蛋白的铁结合能力可能超载,导致非转铁蛋白结合的铁离子在体内富集,这可能会影响细胞的正常功能。
在实验室研究中,转铁蛋白的测定可能涉及到使其沉淀的步骤,以便于检测和量化。
例如,在进行血浆蛋白电泳时,转铁蛋白可以作为样本的一部分被沉淀并分离出来。
此外,转铁蛋白受体在肿瘤细胞表面过度表达,且能在酸性微环境下释放包载药物,因此在肿瘤治疗中也有应用。
总的来说,转铁蛋白主要涉及铁的运输和相关生理功能,而其沉淀现象可能发生在特定的生物化学分析过程中,或者是由于病理状态下体内铁代谢的改变。
鸡蛋卵转铁蛋白铁结合能力及性质的研究

鸡蛋卵转铁蛋白铁结合能力及性质的研究杜华英,吴磊燕,朱丽琴,杨武英,蒋艳,徐明生(江西农业大学食品科学与工程学院,江西省高校天然产物研究与开发重点实验室,江西南昌 330045)摘要:本试验研究了鸡蛋卵转铁蛋白与不同浓度铁离子的结合能力,以及卵转铁蛋白在不同pH值和NaHCO3条件下与铁离子的结合能力;采用差示扫描量热仪(DSC)和圆二色性(CD)光谱分析卵转铁蛋白铁饱和度对其热变性温度和结构的影响。
结果表明,铁离子与卵转铁蛋白的摩尔比值在2.2左右时,卵转铁蛋白铁达到完全饱和;在中性和偏碱性的条件下,卵转铁蛋白对铁结合能力比较高;卵转铁蛋白铁结合能力随着NaHCO3浓度的增加而增强,当其浓度超过75 mmol/L以后,铁结合能力基本保持不变。
卵转铁蛋白铁饱和度越高,其热变性温度越高,由去铁卵转铁蛋白的63.41℃到饱和铁卵转铁蛋白的83.29 ℃;去铁卵转铁蛋白比饱和铁卵转铁蛋白的远紫外CD光谱带更加趋于负值,α-螺旋含量有微小的减少,减少量为4.40%,而β-折叠、β-转角和其它的含量均有所增加,增加量分别:2.80%、1.20%、12.90%;在近紫外CD光谱区,饱和铁卵转铁蛋白的三级结构发生了较为明显的变化。
关键词:卵转铁蛋白;铁结合能力;热变性温度;结构文章篇号:1673-9078(2015)4-109-114 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.4.018 Analysis of the Iron-binding Capacity and Characteristics of Hen Egg Ovotransferrin under Different ConditionsDU Hua-ying, WU Lei-yan, ZHU Li-qin, YANG Wu-ying, JIANG Y an, XU Ming-sheng(College of Food Sci-Eng, Jiangxi Agriculture University, Key Laboratory of Education in Natural Product Research andDevelopment, Nanchang 330045, China)Abstract: The binding capacity of hen egg ovotransferrin (OV T) to different concentrations of iron ions was studied under multiple pH conditions and NaHCO3concentrations. The effects of iron saturation on the thermal denaturation temperature and structure of OV T were analyzed by differential scanning calorimetry (DSC) and circular dichroism (CD) spectrum analysis. The results showed that complete iron saturation was obtained at an approximate iron ion to OV T molar ratio of 2.2. OV T exhibited higher iron-binding capacity under neutral or slightly alkaline pH conditions. The iron-binding capacity of OVT also increased with the increase in NaHCO3concentration; however, a steady-state level was reached at NaHCO3concentrations exceeding 75 mmol/L. The thermal denaturation temperature of OV T increased corresponding to the increase in iron saturation, and was observed to be 63.41 ℃and 83.29 ℃for apo-ovotransferrin (apo-OV T) and holo-ovotransferrin (holo-OV T), respectively. Apo-OVT showed a more negative band in the far-ultraviolet CD spectrum compared to holo-OV T; the α-helical content of apo-OVT decreased by 4.4%, while that of β-sheet strands, β-turns, and other structures increased by 2.80%, 1.20%, and 12.90%, respectively. The tertiary structure of holo-OV T displayed an obvious change in the near-ultraviolet region of the CD spectrum.Key words:ovotransferrin; iron-binding capacity; thermal denaturation temperature; structure转铁蛋白(Transferrin)是单一肽链的蛋白质,是人体内一种重要的铁元素载体,许多疾病都与人血清中转铁蛋白的含量变化有关,如缺铁性贫血、急性肝炎及蛋白质缺乏等。
检验科本周蛋白检测标准操作规程

检验科本周蛋白检测标准操作规程1.【检验目的】2.为了规范本周蛋白定性检测方法, 特制定本规程。
3.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP, 室负责人监督落实。
4. 2.2本SOP的改动, 可由任一使用本SOP的工作人员提出, 并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。
5.【样本类型及实验前准备】3.1样本类型: 新鲜尿液3.2患者准备: 患者处于安静状态精神、体力、情绪等因素的影响较小。
3.3容器添加剂类型: 配套小便试管3.5实验试剂: 2g/L磺基水杨酸溶液。
2mol/L 醋酸盐缓冲溶液(PH4.9±0.1):取醋酸钠(CH3COONa-3H2O)17.5g,加冰醋酸4.1ml,再加蒸馏水至1ml,调PH至4.9.6.【测定原理】7.本-周氏蛋白又称凝溶蛋白, 是一种免疫球蛋白的轻链或其聚合体。
此种蛋白在一定的PH条件下加热至40-60P时沉淀发生, 温度升高至1P时, 沉淀消失, 再冷却时又可重现沉淀。
8.【操作步骤】5.1将尿液用磺基水杨酸法作蛋白定性检查, 如呈阴性反应, 也需对尿液标本中本-周氏蛋白进一步检测。
9. 5.2取透明尿液4 ml于试管中, 再加入乙酸缓冲液1 ml, 混匀后放置56P水浴中15分钟, 如有浑浊或出现沉淀, 再将试管放沸水中煮沸3分钟, 观察试管中浑浊或沉淀的变化。
如浑浊变清、减弱或沉淀减少均提示本-周氏蛋白阳性。
若煮沸后, 浑浊增加或沉淀增加, 表明此尿液中还有其他蛋白质, 此时应将试管从沸水中取出, 立即过滤, 如滤液开始透明, 温度下降后浑浊, 再煮沸时又透明, 提示本-周氏蛋白为阳性。
10.【结果计算与判断】如浑浊变清, 浑浊减弱或沉淀减少, 均提示本-周氏蛋白阳性。
11.若煮沸后, 浑浊增加或沉淀增多, 表明此尿液中还有其他蛋白质, 此时应将试管从沸水中取出, 立即过滤。
如过滤开始透明, 温度下降后浑浊, 再煮沸时透明, 提示本-周氏蛋白为阳性。
转铁蛋白检测操作方法

转铁蛋白检测操作方法
转铁蛋白检测是一种常用的实验方法,用于检测样品中的转铁蛋白含量。
以下是转铁蛋白检测的操作方法:
1. 准备试剂:
a. 细胞裂解液或组织液样品
b. 酸性显色试剂:通常使用巴比特酸或戊二酰亚胺溶液作为酸性显色试剂
2. 样品预处理:
a. 首先,对细胞裂解液或组织液样品进行蛋白质浓度测定,以确保样品在检测范围内。
b. 将样品稀释至合适的浓度,以避免过高的浓度影响检测结果。
3. 进行转铁蛋白检测:
a. 取一部分样品,加入相应的试管或微孔板中。
b. 加入酸性显色试剂,将样品与显色试剂混合。
c. 在适当的温度下孵育反应混合物一段时间,使其发生显色反应。
d. 制备一个空白对照组,其中只包含显色试剂。
e. 使用分光光度计测量每个样品的吸光度,并记录吸光度值。
4. 数据分析:
a. 根据测量的吸光度值绘制标准曲线,曲线上吸光度值与已知转铁蛋白浓度
之间的关系。
b. 将样品的吸光度值与标准曲线进行比较,从而确定样品中转铁蛋白的浓度。
需要注意的是,转铁蛋白检测方法会因实验室和试剂的差异而有所不同。
因此,具体的操作步骤可能会有所不同,建议参考所使用试剂盒的说明书或咨询相关专业人士进行操作。
转铁蛋白应用

转铁蛋白(Transferrin)Cas;11096-37-0转铁蛋白是血液中一种主要的糖蛋白, 负责将肝组织(是铁贮藏的主要场所)的铁向其它组织的细胞运输。
没有结合铁的转铁蛋白称作脱铁转铁蛋白(apotransferrin), 它能够紧紧结合两个Fe3 , 此时称为铁结合转铁蛋白(ferrotransferrin)。
所有生长中的细胞表面都有铁结合转铁蛋白的受体,在中性pH条件下转铁蛋白与铁结合, 然后通过内吞作用进入细胞。
在细胞内,在内体的酸性环境下, 转铁蛋白释放出铁, 但是仍与膜受体结合在一起, 并与受体一同回到质膜。
当细胞外环境变成中性时, 转铁蛋白同受体脱离,并自由地结合铁, 然后又开始新一轮循环。
实际上, 转铁蛋白穿梭于细胞外液体和内体之间, 避开了溶酶体, 快速传递细胞生长所需的铁。
基本简介转铁蛋白(transferrin,TRF,siderophilin)是血浆中主要的含铁蛋白质,负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。
以TRF-Fe3+的复合物形式进入骨髓中,供成熟红细胞的生成。
TRF分子量约7.7万,为单链糖蛋白,含糖量约6%。
TRF可逆地结合多价离子,包括铁、铜、锌、钴等。
每一分子TRF可结合两个三价铁原子。
TRF主要由肝细胞合成,半寿期为7天。
血浆中TRF的浓度受铁供应的调节,在缺铁状态时,血浆TRF浓度上升,铁有效治疗后恢复到正常水平。
血浆中TRF水平可用于贫血的诊断和对治疗的监测。
在缺铁性的低血色素贫血中TRF的水平增高(由于其合成增加),但其铁的饱和度很低(正常值在30%-38%)。
相反,如果贫血是由于红细胞对铁的利用障碍(如再生障碍性贫血),则血浆中TRF正常或低下,但铁的饱和度增高。
在铁负荷过量时,TRF水平正常,但饱和度可超过50%,甚至达90%。
TRF在急性时相反应中往往降低。
因此在炎症、恶性病变时常随着白蛋白、前白蛋白同时下降。
在慢性肝疾病及营养不良时亦下降,因此可以作为营养状态的一项指标。
生化室操作规程

(4)对稳定性较短的质控品,均值的建立可在3至4天内,每天分析每水平质控品3至4瓶,每瓶进行2至3次重复。收集数据后,计算平均数、标准差和变异系数。对数据进行离群值检验(剔除超过3s的数据)。如果发现离群值,需重新计算余下数据的平均数和标准差。以此均值作为质控图的均值。至于标准差,可采用以前变异系数(CV)来估计新的标准差。以前的标淮差是几个月数据的简单平均或甚至是累积的标准差。这就考虑了检测过程中更多的变异。标准差等于平均数乘以以前变异系数(CV%)。
纤维蛋白原(Fib)测定操作规程
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NYEY-JYK-SOP-SH-08
粘蛋白(mPr)测定操作规程
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NYEY-JYK-SOP-SH-09
尿、脑脊液蛋白(Pro)测定操作规程
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NYEY-JYK-SOP-SH-10
钾(K+)测定操作规程
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钠(Na+)测定操作规程
4.1室内质控出控时,应填写失控报告单,并上交专业主管,由专业主管做出是否发出与测定质控品相关的那批患者标本检验报告并分析及登记失控原因。 失控信号的出现受多种因素的影响,这些因素包括操作上的失误、试剂、校准物、质控品的失效,仪器维护不良以及采用的质控规则、质控限范围、一次测定的质控标本数等等。
4.2失控信号一旦出现就意味着与测定质控品相关的那批患者标本报告可能作废。此时,首先要尽量查明导致的原因,然后再随机挑选出一定比例(例如5%或10%)的患者标本进行重新测定,最后根据既定标准判断先前测定结果是否可接受,对失控做出恰当的判断。对判断为真失控的情况,应该在重做质控结果在控以后,对相应的所有失控患者标本进行重新测定。如失控信号被判断为假失控时,常规测定报告可以按原先测定结果发出,不必重做。当得到失控信号时,可以采用如下步骤去寻找原因:
生化检测-血清铁测定(SOP)

生化检测-血清铁测定(SOP)1.目的:检测人体血清铁测定。
2.原理:2.1.方法学:络合显色比色法。
2.2.方法原理:2.2.1.本试剂与铁试剂盒配套使用,用于测定人血清中未饱和,过剩的铁用碱性碳酸镁吸附,沉淀除去,然后按测定铁同样的方法测定铁的含量及末饱和铁结合力。
2.2.2. 铁-转铁蛋白去污剂Fe3++转铁蛋白Fe3+原污剂Fe2.2.3.反应方程式:Fe3++亚铁嗪→红色络合物3.样本采集和处理:3.1.病人准备:病人应处于安静、呼吸稳定的状态,穿刺时应尽量减少病人的疼痛感。
坐位与卧位、睡眠后与清醒时、运动后与进餐后都会产生不同的结果。
3.2.样本种类:生物学的体液样本应该以同样的方式来收集,以便用来测试任何实验室中的试验。
新鲜的、刚被抽出的血清、血浆或脑脊液是最佳的样本选择。
如果用血浆作样本,最好使用草酸钾/ 氟化钠抗凝剂,因为草酸钾/氟化钠抗凝剂可制葡萄糖的酵解。
全血是不被推荐的样本。
3.3.样本采集:除非是卧床的病人,一般在静脉采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布,因此影响测定水平。
故在采血前至少应静坐5min 。
一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1m i n ,穿刺成功后立即松开止血带。
采3.4.样本接收:接收标本时应检查标本是否符合要求(要求封密、无溶血、无杂物)所用试管是否正确、试管标签是否填写完整、并询问采血时间,对不合格标本应退回重采,并填写记录。
3.5.样本保存:3.5.1.采血管应该一直保持垂直、塞住的姿势。
血清或血浆应该立即被分离,防止溶血,避免接触到血球部分。
从采血到上机的最长时间限制是 2 小时。
3.5.2.分离的血清或血浆在 15℃~30℃的环境下不应该保存超过 8 小时。
假如测试无法在 8小时内完成时,血清或血浆应该被保存在 2℃~8℃的环境中;假如测试无法在 48小时内完成,或分离的样本无法储存超过 48 小时,样本应该冰冻在零下 15℃~20℃的环境中。
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转铁蛋白(Transferrin)测定
标准操作程序SOP文件
1 测定方法
免疫比浊法。
2 测定原理
标本中的转铁蛋白(Transferrin)与试剂中的抗转铁蛋白抗体相遇,发生特异性的抗原-抗体反应,形成抗原-抗体复合物,使溶液的浊度发生改变。
该浊度的高低在一定抗体存在时与抗原的含量成正比,待反应完成后测定其浊度,从而使转铁蛋白得以测定。
另外加入PEG可以使浊度形成的较快并且很快达到终点,也可以增加反应的灵敏度同时避免由于抗原过剩造成的假阴性结果。
3 标本
血清及肝素-Li、Na/K-肝素或K-EDTA抗凝血浆,处理方法见标本处理程序。
稳定性:4 - 8℃ 8天
20 - 25℃ 8天
-20℃ 6个月
4 试剂
4.1 试剂
来源:ROCHE配套试剂(详见试剂说明书)。
贮存条件及稳定性:未打开试剂盒:2-8℃储存至效期末
R1:打开后机上稳定21天,冰冻保存90天。
R2:打开后机上稳定21天,冰冻保存90天。
准备:直接使用。
4.2 校准物
来源:ROCHE配套校准物,符合WHO CRM470标准,具体如下:
S1: 0.9%的NaCl
S2-6:C.f.a.s
将批特异的定标液的靶值乘以下面的系数,用于计算定标曲线:
S2:0.125 S3:0.250 S4:0.500 S5:1.000 S6:2.000
贮存条件:校准物在2-8℃保存至效期末。
准备: 直接使用。
定标频率:A 试剂批号更换 B 由质控结果决定
4.3 质控物
来源:Precinorm protein (罗氏蛋白正常值质控)
Precipath protein (罗氏蛋白病理值质控)
其它适合的质控品
贮存条件:置2-8℃冰箱至有效期。
准备:直接使用。
质控间隔时间及限制:应视不同地区及各自实验室情况而定。
质控结果应在限定的范围之内,如果超出范围,实验室应根据情况采取措施。
ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。
6 操作
见ROCHE MODULAR P生化分析仪作业指导书。
参数设置见附表。
7 参考范围
8
本法线性范围为80-500mg/dl,不准确度允许范围X±3SD,不精密度CV=3.0%,灵敏度为15mg/dl。
9 注意事项
9.1 TIBC是非特异的铁离子与不同蛋白的结合力,不仅仅是指转铁蛋白。
基于这个原因,转铁蛋白至TIBC的转换因子与转铁蛋白的分子量无关,而基于具体
的实践的测定。
1 mg Transferrtin 1.41ug Fe
mg Transferrtin × 1.27 = ug TIBC/dl
mg transferrtin /dl × 0.2275 = umol TIBC/l
9.2 血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。
9.3 换算公式:mg/dl × 0.01 = g/l
mg/dl × 0.126 = umol/l
9.4 仅应用于体外诊断。
10抗干扰能力:
10.1 标准:回收率在90%-110%之间。
10.2 黄疸:黄胆指数达到60时不会有明显干扰。
(直接和间接胆红素浓度约为60mg/dl)。
10.3 溶血:溶血指数达到1000时不会有明显干扰。
(血红素浓度约为1000mg/dl)。
10.4 乳糜:甘油三酯的浓度在600mg/dl以下不会受到明显干扰。
10.5 RF < 500Iu/ml时不会受到明显干扰。
10.6 Transferrtin的浓度低于2000mg/dl时不会有HOOK效应。
10.7 病人服用IgM型单克隆球蛋白会造成结果的假性降低。
11 临床意义:
转铁蛋白是一种分子量为79570的糖蛋白。
它含有一条有两条联有寡糖链的N-葡萄糖苷的多肽链,并且存在有很多的同种形式。
其在肝脏中合成的速率依赖于体内铁的需求和铁的贮存情况而变动。
转铁蛋白是血清中的铁的转运蛋白。
如果铁缺乏,转铁蛋白的饱和程度将是功能性铁耗尽的极端敏感的指示物。
当铁存储缺乏时,铁蛋白的水平将降低。
在铁质缺乏时,如果血清转铁蛋白的浓度很低,将可以排除铁离子的缺乏,这种情况通常在炎症或者抗坏血酸缺乏时出现。
在筛查遗传性血色素沉着病时,转铁蛋白的饱和度比铁蛋白能够提供了一个更好的纯合基因型的指示。
当铁存储不足时,应用红细胞生成素治疗由于肾衰造成的贫血是唯一有效的方案。
在治疗的过程中检查转铁蛋白饱和度提供了一个很好的监视手段。
结合检测转铁蛋白饱和度和铁蛋白将能够排除由于慢性肝脏疾病造成的铁的过剩。