实验一ABO和Rh血型鉴定2013.3
实验一ABO正反定型及Rh定型、唾液血型物质检测
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唾液中HAB血型物质测定
【目的】
了解唾液HAB血型物质测定的原理、方法。
【原理】
HAB血型物质也存在于某些人的分泌液中。唾液中 HAB血型物质为半抗原，能特异性地与相应抗体结 合，从而抑制抗体与相应红细胞发生凝集。所以利
用凝集抑制试验，可测定唾液中HAB血型物质，它 有助于ABO亚型的分类及其特殊情况下血型的鉴定
(3)室温轻转动玻片(或鉴定纸板) ，使血清与细胞充
分混匀连续约2min，肉眼观察凝集(溶血)反应。玻片
试验时可用低倍镜观察结果。
医学ppt
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表l ABO血型正反定型结果
试剂血清+受检红细胞 （正定型）
-A -B 受检血型
受检血清+试剂红细胞 （反定型）
Ac Bc Oc
＋－
A
－＋
B
－－
O
＋＋
AB
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【器材】 小试管、滴管、试管架、记号笔、离心机
【试剂】 1. ５％A、B和O型红细胞盐水悬液。 2. 最适稀释度抗血清的制备（标化血清）
【标本】受检者唾液
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1.被检者漱口后留取自然流出的唾液2ml，将留取 的唾液1000g离心，取上清液置于大试管中，煮 沸10min，再离心10min，留取上清液备用。
－＋ － ＋－ － ＋＋ － －－－
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注意事项 1.试剂 2.悬红 3.蛋白 4.溶血 5.冷抗体 6.老年、儿童 7.污染
作业 简述ABO血型鉴定正反不一致的原因
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红细胞凝集强度判断标准 4+ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。 3+ 红细胞凝集成大小块，血清清晰。 2+ 红细胞凝块分散成许多小块，血清清晰。 l+ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。 ± 镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离
实验一ABO及Rh血型鉴定2013.3
二、ABO鉴定
目的：掌握ABO正反定型的原理、方法。 原理：红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定ABO 血型。 正定型：用已知血型特异性抗体（抗-A、抗-B） 来测定红细胞上有无相应的抗原； 反定型：用已知血型试剂红细胞测定血清中有无 相应的抗体。
器材:
记号笔、小玻璃试管、滴管、试管架、
离心机、鉴定纸板、显微镜。
试剂:
1. ABO血型抗体：抗A、抗B(-A、-B)；
பைடு நூலகம்
2．试剂红细胞：3％～5％Ac、Bc及Oc。
3. 生理盐水。
标本:
抗凝或非抗凝静脉血。
操作（试管法） (1)标记试管：正定型：取洁净小试管2支，分别标 明－A、－B；反定型：取3支小试管，标记Ac、Bc、 Oc。 (2)配5%悬浮红细胞：取静脉血2滴于小试管中，加 2ml生理盐水，混匀，1000g离心60s，弃上清；重复3 次。取管底1滴压积加19滴生理盐水，即为5%悬红。 (3)加样：正定型管中分别加入1滴试剂和1滴悬红， 反定型管中分别加入2滴血清和1滴试剂红细胞。 （4）离心：1000g离心15秒。 (5)结果：轻摇试管,观察有无凝集或溶血现象。
器材 小试管、滴管、试管架、记号笔、鉴定纸 板、显微镜、离心机。 试剂 1.Rh抗血清：常用的为IgM抗抗D（其他为抗C、 抗c、抗E、抗e）。 2.己知Rh阳性和阴性的5％红细胞悬液各1份 3.生理盐水。 标本 静脉血。
操作(盐水试管测试法)
1.取单克隆抗-D（IgM）-C、-c、-E、-e试剂各
试管架、离心机、记号笔、显微镜。
试剂: 生理盐水。
标本:
抗凝或非抗凝静脉血。
操
作
1、全血2ml 1000g离心5min，吸取分离上清至另一干净试 管（备用）； 2、压积加生理盐水约2～3ml，充分摇匀或吸管轻轻吹打 混匀，再次离心去掉上清液； 3、重复离心（1000g，60s）洗涤红细胞3次，去掉上清液 制备压积红细胞； 4、取1滴压积红细胞于1支干净的小试管中，在其中加入 19滴生理盐水，用小吸管轻轻吹打混匀，就是5%的红细 胞悬液。
血型鉴定实验报告
血型鉴定实验报告一、引言血型鉴定是一项常见的实验，用以确定个体的血型类型。
血型是由红细胞表面的抗原和血清中的抗体所决定的。
通过血型鉴定，我们能够了解每个人的血型类型，从而在输血、器官移植等医学过程中做出更合适的决策。
二、实验目的本实验的目的是通过实验方法对样本进行血型鉴定，掌握血型鉴定的基本原理与方法，并对结果进行分析与推断。
三、实验材料与方法本次实验所使用的材料包括：标准化的血型试剂盒、试管、血清孵育箱等。
实验步骤如下：1. 提取样本首先，我们需要从被测者的静脉或指尖提取一定的血样。
要注意使用消毒棉球消毒，以确保样本的纯净性。
2. 实验准备将血型试剂盒中的试剂按照要求倒入试管中，并进行必要的标识，以免混淆。
同时，将提取的血样注入试管中，与试剂充分混合。
3. 观察结果根据试管中的混合物的变化和聚集情况，可以判断被测者的血型类型。
我们注意到，当血型试剂中的抗体与红细胞表面的抗原结合时，会产生凝集现象。
四、实验结果与讨论通过实验观察，我们可以对被测者的血型进行鉴定。
1. ABO血型系统根据血型试剂盒中的反应结果，我们可以确定被测者的ABO 血型类型。
例如，如果观察到血液与试剂A和试剂D发生凝集反应，而与试剂B无反应，我们就可以判断被测者的血型为A型。
2. Rh血型系统在确定了ABO血型后，我们进一步进行Rh血型的鉴定。
通过将被测者的血液与试剂中的抗体进行反应，我们可以判断被测者是否具有Rh抗原。
如果血液与试剂发生凝集反应，则表示个体具有Rh抗原，即Rh阳性；反之则为Rh阴性。
3. 遗传性血型的遗传是一个重要的科学问题。
通过观察不同家庭成员的血型可以发现，血型的遗传是以特定规律进行的。
例如，A型血的个体与B型血的个体之间组合，可能会产生AB型血的个体。
这是由于A型血和B型血都是由ABO基因控制的，而AB型血则表现出A和B两种基因的共同表达。
五、实验结论通过实验鉴定，我们可以得出被测者的血型结果。
在输血、器官移植等医学过程中，这一血型鉴定结果将为医生做出更合适的决策提供重要参考。
血型鉴定实验报告结论
血型鉴定实验报告结论血型鉴定实验报告结论在现代医学中，血型鉴定是一项非常重要的实验，它不仅可以帮助医生确定病人的血型，还可以为输血、器官移植等医疗过程提供必要的信息。
在这次实验中，我们通过几种不同的方法来鉴定血型，最终得出了结论。
实验中我们采用了ABO血型系统和Rh血型系统进行鉴定。
ABO血型系统是根据红细胞表面的抗原A和抗原B来进行分类的，而Rh血型系统则是根据红细胞表面的Rh抗原（D抗原）的有无来进行分类的。
首先，我们进行了直接凝集试验。
这个试验是通过将病人的血液与已知血型的抗血清混合，观察是否出现凝集反应来确定血型。
实验结果显示，当病人的血液与抗A抗血清混合时出现凝集反应，而与抗B抗血清混合时没有凝集反应。
这表明该病人的血型为A型。
接下来，我们进行了间接凝集试验。
这个试验是通过将病人的血清与已知血型的红细胞混合，观察是否出现凝集反应来确定血型。
实验结果显示，当病人的血清与A型红细胞混合时出现凝集反应，而与B型红细胞混合时没有凝集反应。
这进一步证实了该病人的血型为A型。
然后，我们进行了Rh血型的鉴定。
实验结果显示，当病人的血液与抗Rh抗血清混合时没有凝集反应，这表明该病人的Rh血型为阴性。
通过综合以上实验结果，我们可以得出结论：该病人的血型为A阴性。
这个结论对于未来的治疗和输血过程非常重要，因为不同血型之间的输血会引发免疫反应，严重的话可能会导致输血反应甚至死亡。
因此，在进行任何输血或器官移植之前，都需要对病人的血型进行准确的鉴定。
此外，血型鉴定还有其他的应用领域。
例如，在法医学中，血型鉴定可以用于破案和鉴定亲子关系。
在破案中，通过对犯罪现场的血迹进行血型鉴定，可以帮助警方锁定嫌疑人。
而在鉴定亲子关系方面，通过对父母和子女的血型进行比对，可以确定亲子关系的真伪。
总之，血型鉴定是一项重要的实验，它可以为医疗过程提供必要的信息，确保病人的安全。
通过本次实验，我们成功地确定了该病人的血型为A阴性。
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程(一)检验目的检测红细胞表面ABO血型抗原、RhD抗原及血清(或血浆)中抗A、抗B抗体，确定受检者ABO及RhD血型。
(二)检验原理1.手工试管法、玻片法或纸板法利用标准IgM抗A／B血清鉴定红细胞表面ABO抗原即正定型，利用已知ABO 血型反定型红细胞鉴定同一标本血清(或血浆)中的抗A／B 抗体即反定型，综合正反定型结果确定受检标本ABO血型；利用标准IgM抗D直接鉴定RhD血型。
2.微柱凝胶法ABO／RhD卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶颗粒中，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法ABO／RhD卡的微管中装填有玻璃微珠和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工、半自动、全自动ABO血型及RhD血型鉴定试验。
(四)设备性能参数各种血型检测系统性能指标参见相应血型检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO 血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro AutoVue Innova全自动血型配血系统、B600-A型低速离心机、KA-2200血清学专用离心机、阅片灯箱、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×12mm和75m m×l2mm)、血型鉴定专用纸板、玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
2.试剂Diana DG Gel ABO-CDE血型卡、DiaMed ABO／RhD血型卡、OTHROBiovueABO／RhD血型卡、2％氢氧化钠溶液、生理盐水、抗A／B标准血清、抗D标准血清、3％～5％反定型试剂红细胞、1％反定型试剂红细胞。
血型鉴定与血液配型实验方法介绍
血型鉴定与血液配型实验方法介绍在医学领域中，血型鉴定与血液配型是非常重要的实验方法，它们对于输血、器官移植以及疾病诊断等方面至关重要。
本文将介绍血型鉴定与血液配型的实验方法。
一、血型鉴定实验方法血型鉴定是指通过实验手段来确定一个人的血型类型，主要包括ABO血型和Rh血型。
1. ABO血型的鉴定方法ABO血型包括A型、B型、AB型和O型。
下面介绍几种常用的鉴定方法：(1) 滴定法：该方法主要利用抗血清对相应抗原进行滴定。
将被测血清稀释后与抗A、抗B、抗AB和抗O血清滴定反应，根据凝集程度来鉴定血型。
(2) 纸片凝集法：该方法是将试纸片吸附抗体，然后滴加被鉴定血液，根据试纸片上是否出现凝集来鉴定血型。
(3) 红细胞溶血法：该方法是将鉴定者的红细胞与ABO抗血清混合，根据红细胞的溶血情况判断血型。
2. Rh血型的鉴定方法Rh血型包括Rh阳性和Rh阴性。
下面介绍几种常用的鉴定方法：(1) 抗人球蛋白试验法：将被测血液与抗人球蛋白血清相混合，根据悬浮液的凝集程度鉴定Rh血型。
(2) 免疫胶体凝集法：本方法是将被测血液与含有相应抗原的胶体颗粒混合，当出现凝集时，可判定为Rh阳性。
以上是血型鉴定的常用实验方法，可以根据实际需要选择合适的方法进行鉴定。
二、血液配型实验方法血液配型是指将供者和受者的血液样本进行相互匹配，以确保输血或器官移植等过程的安全性和有效性。
目前常见的血液配型方法包括ABO血型配型和Rh血型配型。
1. ABO血型配型方法ABO血型配型是最基本的血液配型方法，其原理是将供者和受者的血清与相应的抗原进行反应，根据凝集的反应程度来确定合适的血液配型。
根据实际情况，可以选择滴定法、纸片凝集法等方法进行配型。
2. Rh血型配型方法Rh血型配型是根据供者和受者的Rh抗原是否相匹配来确定合适的血液配型。
可以通过抗人球蛋白试验法、免疫胶体凝集法等方法进行配型。
血液配型方法的选择取决于具体需求，各种方法各有优劣，医务人员在实际操作中应根据需要进行选择。
ABO血型及Rh血型鉴定-卡式法(审)
ABO血型及Rh血型鉴定操作规范（卡式法）
1、用抗凝（EDTA—K2）血，取40ul放入2ml生理盐水中，
配制成10%红细胞悬液，混匀备用。
2、取血型鉴定卡，撕开封条，编号。
3、分别取10ul 10%红细胞悬液，加入A、B和Rh孔。
注
意加红细胞悬液时不能直接加到孔内有试剂的液面。
4、将加好红细胞悬液的血型卡平衡放入专用离心机中，以
转/分的速度，离心5分钟。
5、5分钟后离心机提示音响，打开离心机，取出观察结果。
6、结果观察：
（1）A型：A试剂孔红细胞在试剂液面上端（凝集），B试剂孔红细胞沉降到试剂液面底端（不凝集）；
（2）B型：B试剂孔红细胞在试剂液面上端（凝集），A试剂孔红细胞沉降到试剂液面底端（不凝集）；
（3）AB型：A试剂孔红细胞在试剂液面上端（凝集），B试剂孔红细胞在试剂液面上端（凝集）；
（4）O型：试剂孔红细胞沉降到试剂液面底端（不凝集），B 试剂孔红细胞沉降到试剂液面底端（不凝集）；
（5）Rh阴性：Rh试剂孔位红细胞沉降到液面底端（不凝集）；
（6）Rh阳性：Rh试剂孔位红细胞在试剂液面上端（凝集）。
注意：观察结果时，要反复查对结果，以免报告错误。
7、打印结果，报告。
血型鉴定机能实验报告
血型鉴定机能实验报告实验报告：血型鉴定机能实验一、引言血型是根据红细胞表面的抗原差异进行分类的，常见的血型分类系统有ABO血型系统和Rh血型系统。
ABO血型系统包括A型、B型、AB型和O型四种血型，Rh血型系统包括Rh阳性和Rh阴性两种血型。
血型的鉴定对于输血、器官移植等临床操作具有重要意义，因此开展血型鉴定机能实验是非常有必要的。
二、实验目的1. 了解ABO血型的基本原理和鉴定方法。
2. 了解Rh血型的基本原理和鉴定方法。
3. 学习使用血型试剂进行血型鉴定。
4. 比较不同试剂的鉴定结果，评估各试剂的准确性和可靠性。
三、实验原理1. ABO血型的鉴定方法：a) 直接试剂法：将待鉴定的血液滴在不同的试剂反应孔上，观察出现凝集反应的现象。
b) 不直接试剂法：将待鉴定血液与试剂反应孔中的抗体混合，观察凝集反应或溶解反应的现象。
2. Rh血型的鉴定方法：a) 直接试剂法：将待鉴定的血液滴在不同的试剂反应孔上，观察出现凝集反应的现象。
b) 不直接试剂法：将待鉴定血液与试剂反应孔中的抗体混合，观察凝集反应或溶解反应的现象。
四、实验步骤1. 根据实验需要，准备所需试剂和标本。
2. 将待鉴定的血液滴在试剂反应孔上，按照试剂说明书的要求进行操作。
3. 观察试剂和血液的反应情况，记录凝集反应或溶解反应的现象。
4. 根据试剂说明书的解读规则，判断血型的鉴定结果。
五、实验结果根据实验步骤操作，观察到了血液与试剂的反应现象。
根据试剂说明书的要求和解读规则，得出了每个被鉴定血样的血型结果。
比较不同试剂的鉴定结果，评估各试剂的准确性和可靠性。
六、实验讨论1. 不同试剂的鉴定结果是否一致？不同试剂的鉴定结果一般是一致的，但也存在少数情况下不一致的情况。
这可能是由于试剂的质量差异、操作技巧不同或被鉴定血样的特殊情况等原因导致的。
2. 试剂的准确性和可靠性如何评估？评估试剂的准确性和可靠性可以通过比对不同试剂的鉴定结果，以及与已知的标准血型结果进行对比来进行。
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试管架、离心机、记号笔、显微镜。
试剂: 生理盐水。
标本:
抗凝或非抗凝静脉血。
操
作
1、全血2ml 1000g离心5min，吸取分离上清至另一干净试 管（备用）； 2、压积加生理盐水约2～3ml，充分摇匀或吸管轻轻吹打 混匀，再次离心去掉上清液； 3、重复离心（1000g，60s）洗涤红细胞3次，去掉上清液 制备压积红细胞； 4、取1滴压积红细胞于1支干净的小试管中，在其中加入 19滴生理盐水，用小吸管轻轻吹打混匀，就是5%的红细 胞悬液。
作业
简述导致ＡＢＯ血型鉴定出现正反
定型不一致的常见原因。
器材 小试管、滴管、试管架、记号笔、鉴定纸 板、显微镜、离心机。 试剂 1.Rh抗血清：常用的为IgM抗抗D（其他为抗C、 抗c、抗E、抗e）。 2.己知Rh阳性和阴性的5％红细胞悬液各1份 3.生理盐水。 标本 静脉血。
操作(盐水试管测试法)
1.取单克隆抗-D（IgM）-C、-c、-E、-e试剂各
正定型
反定型
注意事项
1.试剂 5.冷抗体 2.悬红 3.蛋白 4.溶血 7.污染 6.老年、儿童
三 、 Rh血型鉴定
目的 原理ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
掌握Rh血型鉴定的原理、方法。 Rh血型系统，包括四十几个抗原，通常使用相应
的抗C、抗c、抗D、抗E、抗e五种Rh分型血清来检查红
细胞抗原。 在临床输血中一般只做D抗原的鉴定，被检红细胞 和抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集者为Rh阴性。
实验一ABO血型 鉴定和Rh血型鉴定
临床检验诊断学实验室
实
验
内
容
一、5%红细胞悬液的配制 二、ABO血型鉴定（试管法、纸片法） 三、Rh血型鉴定
?
一、5%红细胞悬液的配制
原理：使用一定量的稀释液（生理盐水）稀释
压积红细胞，遵循抗原抗体结合的量比关系，
获出最佳结果。
器材: 小试管（玻璃及塑料皆可）、加样枪、
1滴到5支试管中。
2.每管各加1滴3％～5％待检红细胞悬液。 3.充分混匀，以1000 g离心15秒。 4.观察结果：轻摇散开试管底部的细胞扣，用 肉眼观看凝集。 5.判定结果
注意事项
1．用抗D血清进行Rh血型鉴别时，结果为阴性，不能直 接报告Rh阴性，需进一步检测弱D型还是部分D型。 2．Rh血型鉴定应严格控制温度与时间，因Rh抗原、抗体 凝集反应块比较脆弱，观察反应结果时，应轻轻摇动 试管，不可用力振摇。 3.Rh血型系统的抗体多为后天免疫刺激产生，不需要做 反定型。
试管法结果判定
判断标准
表l ABO血型正反定型结果
受检血清+试剂红细胞 （反定型） Ac Bc Oc － ＋ ＋ － ＋ － ＋ － － － － － 试剂血清+受检红细胞 （正定型） -A -B 受检血型 ＋ － － ＋ － ＋ － ＋ A B O AB
操作：玻片法(鉴定纸板)
(1)洁净玻片(鉴定纸板)一张。标-A、-B，分别用滴管滴
试剂:
1. ABO血型抗体：抗A、抗B(-A、-B)；
2．试剂红细胞：3％～5％Ac、Bc及Oc。
3. 生理盐水。
标本:
抗凝或非抗凝静脉血。
操作（试管法） (1)标记试管：正定型：取洁净小试管2支，分别标 明－A、－B；反定型：取3支小试管，标记Ac、Bc、 Oc。 (2)配5%悬浮红细胞：取静脉血2滴于小试管中，加 2ml生理盐水，混匀，1000g离心60s，弃上清；重复3 次。取管底1滴压积加19滴生理盐水，即为5%悬红。 (3)加样：正定型管中分别加入1滴试剂和1滴悬红， 反定型管中分别加入2滴血清和1滴试剂红细胞。 （4）离心：1000g离心15秒。 (5)结果：轻摇试管,观察有无凝集或溶血现象。
二、ABO鉴定
目的：掌握ABO正反定型的原理、方法。 原理：红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定ABO 血型。 正定型：用已知血型特异性抗体（抗-A、抗-B） 来测定红细胞上有无相应的抗原； 反定型：用已知血型试剂红细胞测定血清中有无 相应的抗体。
器材:
记号笔、小玻璃试管、滴管、试管架、
离心机、鉴定纸板、显微镜。
加抗-A、抗-B试剂1滴，再加受检者10％红细胞悬液l滴， 混匀。
(2)另取洁净玻片(或鉴定纸板)一张。标Ac、Bc、Oc，各 (3)室温轻转动玻片(或鉴定纸板) ，使血清与细胞充分混 玻片试验时可用低倍镜观察结果。
加受检血清2滴，再分别滴加Ac、Bc、Oc悬红1滴。
匀，约2min肉眼观察凝集(溶血)反应。
红细胞凝集强度判断标准 4+ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。 3+ 红细胞凝集成大小块，血清清晰。 2+ 红细胞凝块分散成许多小块，血清清晰。 l+ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。 ±镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离 红细胞。 mf 混合凝集外观（mixed field）指镜下可见少数红细 胞凝集，而极大多数红细胞仍呈分散分布。 － 表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。