蛋白质重点
蛋白质工程重点
一、名词解释1、蛋白质工程（Protein Engineering）——以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过化学、物理和分子生物学的手段进行基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类对生产和生活的需求的工程技术。
2、结构模体（supersecondary structure，motif）——介于蛋白质二级结构和三级结构之间的空间结构,指相邻的二级结构单元组合在一起，彼此相互作用，排列形成规则的、在空间结构上能够辨认的二级结构组合体，并充当三级结构的构件（block building），其基本形式有αα、βαβ和βββ等。
3、结构域（domain）——是在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区，它是相对独立的紧密球状实体。
4、蛋白质的折叠(protein folding)——从体内新生的多肽链或体外变性的多肽链的一维线性氨基酸序列转化为具有特征三维结构的活性蛋白质的过程。
5、分子伴侣（molecular chaperone）——一大类相互之间没有关系的蛋白质，它们具有的共同功能是帮助其他含蛋白质的结构在体内进行非共价的组装和卸装，但不是这些结构在发挥其正常的生物学功能时的永久组成部分。
6、晶胞(Unit cell)——空间点阵的单位（大小和形状完全相同的平行六面体），是晶体结构的最小单位。
7、核磁共振现象（nuclear magnetic resonance ，NMR）——指核磁矩不为零的核，在外磁场的作用下，核自旋能级发生塞曼分裂(Zeeman splitting)，共振吸收某一特定频率的射频辐射（radio frequency, RF）的物理过程。
8、化学势（位）移（）——在有机化合物中，各种氢核周围的电子云密度不同（结构中不同位置）共振频率有差异，即引起共振吸收峰的位移，这种现象称为化学位移。
9、耦合常数（J）——由于自旋裂分形成的多重峰中相邻2峰间的距离。
生物化学重点整理
生物化学重点整理生物化学是一门研究生物体化学组成和生命过程中化学变化的科学。
它涵盖了广泛的领域，从分子水平揭示生命的奥秘。
以下是对生物化学重点内容的整理。
一、蛋白质化学蛋白质是生物体内最为重要的大分子之一。
1、蛋白质的组成蛋白质主要由碳、氢、氧、氮等元素组成，其基本组成单位是氨基酸。
氨基酸通过肽键相连形成多肽链，进而折叠形成具有特定空间结构的蛋白质。
2、蛋白质的结构蛋白质具有一级、二级、三级和四级结构。
一级结构指的是氨基酸的排列顺序；二级结构包括α螺旋、β折叠等；三级结构是整个多肽链的三维构象；四级结构则是由多个亚基组成的蛋白质的空间排列。
3、蛋白质的性质蛋白质具有两性解离、胶体性质、变性与复性等特性。
变性会导致蛋白质的空间结构破坏，从而失去生物活性，但在一定条件下可以复性。
二、核酸化学核酸包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。
1、核酸的组成核酸由核苷酸组成，核苷酸包含碱基、戊糖和磷酸。
DNA 中的碱基有腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胸腺嘧啶（T）和胞嘧啶（C）；RNA 中的碱基用尿嘧啶（U）代替了胸腺嘧啶。
2、 DNA 的结构DNA 是双螺旋结构，两条链反向平行，碱基之间遵循互补配对原则（A 与 T 配对，G 与 C 配对）。
3、 RNA 的种类与功能RNA 包括信使 RNA（mRNA）、转运 RNA（tRNA）和核糖体RNA（rRNA）。
mRNA 携带遗传信息，指导蛋白质合成；tRNA 转运氨基酸；rRNA 是核糖体的组成部分。
三、酶酶是生物体内具有催化作用的蛋白质或 RNA。
1、酶的特点酶具有高效性、专一性和可调节性。
高效性使得酶能够大大加快反应速率；专一性保证了酶对特定底物的作用；可调节性使酶的活性能够适应生物体的需求。
2、酶的作用机制酶通过降低反应的活化能来加速反应。
它与底物结合形成酶底物复合物，然后经过一系列的中间步骤完成催化反应。
3、影响酶活性的因素温度、pH 值、底物浓度、酶浓度、抑制剂和激活剂等都会影响酶的活性。
食品化学蛋白质期末考试重点
蛋白质42、蛋白质的分类：简单蛋白质、结合蛋白质（根据化学组成分类）球状蛋白质、纤维状蛋白质（根据分子的形状分类）结构蛋白质、有生物活性的蛋白质、食品蛋白质（根据功能分类）43、氨基酸的组成与结构：氨基酸的基本构成单位是α－氨基酸。
在氨基酸的分子结构中，含有一个α－碳原子、一个氢原子、一个氨基和一个羧基、一个侧链R基，氨基酸的差别在于含有化学本质不同的侧链R基。
44、酸性氨基酸：谷氨酸、天冬氨酸碱性氨基酸：赖氨酸、精氨酸、组氨酸45、从营养学上分类必需氨基酸：在人体内不能合成或合成的速度不能满足机体的需要，必须从日常膳食中供给一定的数量。
8种，苏、缬、亮、异亮、赖、色、苯丙、蛋。
婴儿10种，加组和精非必需氨基酸：人体能自身合成，不需要通过食物补充的氨基酸，12种。
限制性氨基酸：在食物蛋白质中某一种或几种必需氨基酸缺少或数量不足，使得食物蛋白质转化为机体蛋白质受到限制，这一种或几种必需氨基酸就称为限制性氨基酸。
大米：赖氨酸、苏氨酸大豆：蛋氨酸。
46、等电点的计算：侧链不带电荷基团氨基酸：pI=(pKa1+pKa2)/2酸性氨基酸：pI=(pKa1 + pKa3)/2碱性氨基酸：pI=(pKa2+ pKa3)/2（1、2、3指α－羧基、α－氨基、侧链可离子化基团）47、蛋白质的二级结构：是指多肽链中主链原子的局部空间排布即构象，不涉及侧链部分的构象。
螺旋结构（α-螺旋常见、π-螺旋、γ-螺旋），折叠结构（β-折叠、β-弯曲）48稳定蛋白质结构的作用力(空间相互作用、范德华相互作用、氢键、静电相互作用、疏水相互作用、二硫键、配位键）疏水相互作用：在水溶液中，非极性基团之间的疏水作用力是水与非极性基团之间热力学上不利的相互作用的结果。
在水溶液中非极性基团倾向于聚集，使得与水直接接触的面积降至最低。
水的特殊结构导致的水溶液中非极性基团的相互作用被称为疏水相互作用。
49蛋白质的变性定义：蛋白质变性是指当天然蛋白质受到物理或化学因素的影响时，使蛋白质分子内部的二、三、四级结构发生异常变化，从而导致生物功能丧失或物理化学性质改变的现象。
高中生物面教案蛋白质
高中生物面教案蛋白质
目标：了解蛋白质的结构、功能和作用。
教学重点：蛋白质的结构、功能和作用。
教学难点：蛋白质的多样性和复杂性。
教学准备：教学PPT、蛋白质模型、实验器材。
教学过程：
一、导入（5分钟）
老师向学生介绍蛋白质是构成生命体的重要组成部分，是生物体内最丰富的有机物质之一，对生命活动具有重要作用。
二、学习蛋白质的结构（15分钟）
1. 老师通过PPT展示蛋白质的结构，包括氨基酸的结构和连接方式，以及蛋白质的三维空间结构。
2. 学生观察蛋白质模型，了解蛋白质的空间结构是由氨基酸的序列和连接方式决定的。
三、探讨蛋白质的功能（20分钟）
1. 老师讲解蛋白质的功能多样性，包括酶、激素、抗体等。
2. 学生分组讨论蛋白质在生物体内的具体功能，并向全班汇报。
四、实验探究蛋白质的作用（30分钟）
1. 老师布置实验任务：让学生观察不同条件下的蛋白质的变化，如加热、酸碱处理等。
2. 学生进行实验，并记录实验结果。
五、总结与评价（10分钟）
1. 老师总结本节课的主要内容，并强调蛋白质在生物体内的重要作用。
2. 学生进行课堂小结，提出疑问和建议。
教学拓展：学生可进一步了解蛋白质的合成、降解及其在生态系统中的作用。
课后作业：查阅资料，了解蛋白质在疾病治疗中的应用。
高一生物蛋白质笔记
高一生物蛋白质笔记
以下是一份高一生物蛋白质的笔记：
（一）蛋白质的概念和作用
蛋白质是生命活动的主要承担者，具有多种功能。
蛋白质的结构多样性与功能多样性是相适应的。
（二）氨基酸的结构特点
氨基酸是蛋白质的基本组成单位，每种氨基酸都至少含有一个氨基和一个羧基，并且他们都连结在同一个碳原子上。
（三）蛋白质的合成
DNA指导下的蛋白质合成，是以mRNA为模板合成蛋白质的过程，该过程需要核糖体、tRNA、ATP等参与。
（四）蛋白质的分类
根据蛋白质的功能，可以将蛋白质分为：结构蛋白、催化蛋白、调节蛋白、运输蛋白等。
（五）蛋白质的生物合成
蛋白质的生物合成是指将氨基酸通过肽键连接在一起
形成肽链的过程。
该过程需要核糖体、tRNA、ATP等参与。
（六）蛋白质的检测方法
常用的蛋白质检测方法包括：双缩脲试剂法、吲哚酚试剂法、茚三铜试剂法等。
这些方法可以用来检测蛋白质的存在和含量。
（七）蛋白质的特性
蛋白质具有多种特性，包括：相对分子质量大、分子结构复杂、具有特定的空间构象、具有多种功能等。
（八）蛋白质的消化吸收和代谢
人体需要摄入适量的蛋白质来维持正常的生理功能。
蛋白质在消化系统中被分解为氨基酸，然后被吸收进入血液。
氨基酸在体内可以用于合成新的蛋白质或者作为能源物质进行代谢。
蛋白质工程重点
一、名词解释1、蛋白质工程(Protein Engineering)——以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过化学、物理和分子生物学的手段进行基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类对生产和生活的需求的工程技术。
2、结构模体（supersecondary structure,motif）-—介于蛋白质二级结构和三级结构之间的空间结构，指相邻的二级结构单元组合在一起，彼此相互作用，排列形成规则的、在空间结构上能够辨认的二级结构组合体,并充当三级结构的构件(block building），其基本形式有αα、βαβ和βββ等。
3、结构域（domain）——是在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区,它是相对独立的紧密球状实体。
4、蛋白质的折叠(protein folding）—-从体内新生的多肽链或体外变性的多肽链的一维线性氨基酸序列转化为具有特征三维结构的活性蛋白质的过程。
5、分子伴侣（molecular chaperone)-—一大类相互之间没有关系的蛋白质，它们具有的共同功能是帮助其他含蛋白质的结构在体内进行非共价的组装和卸装，但不是这些结构在发挥其正常的生物学功能时的永久组成部分。
6、晶胞（Unit cel l）-—空间点阵的单位（大小和形状完全相同的平行六面体)，是晶体结构的最小单位.7、核磁共振现象(nuclear magnetic resonance ，NMR)--指核磁矩不为零的核,在外磁场的作用下，核自旋能级发生塞曼分裂(Zeeman splitting），共振吸收某一特定频率的射频辐射（radio frequency，RF)的物理过程.8、化学势（位）移( )—-在有机化合物中,各种氢核周围的电子云密度不同（结构中不同位置)共振频率有差异，即引起共振吸收峰的位移,这种现象称为化学位移。
9、耦合常数（J)——由于自旋裂分形成的多重峰中相邻2峰间的距离.用以表征2核之间耦合作用的大小，单位赫兹Hz.10、蛋白质组（proteome）--一个基因组、一种生物或一种细胞/ 组织所表达的全套蛋白质。
蛋白质组学复习重点
蛋白质组学复习重点1.名词解释(掌握名词的中英文)1、蛋白质组（proteome)是指一个基因组、一种细胞或组织表达的所有蛋白质。
2、蛋白质组学 Proteomic蛋白质组学是通过大规模研究蛋白的表达水平变化、翻译后修饰、蛋白质与蛋白质之间的相互作用，以获取蛋白质水平上疾病变化、细胞进程及蛋白质网络相互作用的整体综合信息的科学研究，是生命科学研究的热点领域之一。
3、电喷雾电离（Electrospray Ionization，ESI）电喷雾离子化是在质谱系统离子源毛细管的出口处施加一高电压，所产生的高电场使从毛细管流出的液体雾化成细小的带电液滴，随着溶剂蒸发，液滴表面的电荷强度逐渐增大，最后液滴崩解为大量带一个或多个电荷的离子，致使分析物以单电荷或多电荷离子的形式进入气相。
4、噬菌体展示技术 (phage display technology)一种将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，使外源基因随外壳蛋白的表达而表达，同时，外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。
5、双向电泳（two-dimensional electrophoresis,2-DE）指的是按照蛋白质的两个性质即“等电点”和“分子量”进行二维电泳分离。
过程主要是先进行等电聚焦电泳，按照等电点分离，然后再进行SDS-PAGE，按照分子大小分离，经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。
6、等电点（isoelectric point）在某一pH的溶液中，氨基酸或蛋白质解离成阳离子和阴离子的趋势或程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时溶液的pH 称为该氨基酸或蛋白质的等电点。
7、质谱分析（mass spectrometry，MS）MS是在高真空系统中测定样品的分子离子及碎片离子质量，以确定样品相对分子质量及分子结构的方法。
8、生物信息学（bioinformatics）生物信息学是综合运用数学、计算机科学和生物学的各种工具，来阐明和理解大量数据所包含的生物学意义的新兴交叉学科，包含了生物信息的获取、处理、存储、发布、分析和解释等在内的所有方面。
生物化学(1)
第四章蛋白质化学第一节蛋白质的分子组成1、蛋白质的元素组成有哪些特点？已知生物样品含氮量怎样计算生物样品蛋白质含量？第二节蛋白质的分子结构1、蛋白质的分子结构包括哪些？2、蛋白质分子中氨基酸之间的连接方式是什么？何谓肽键？3、蛋白质多肽链的方向是怎样的？4、何谓蛋白质的一级结构、二级结构、三级结构和四级结构？5、蛋白质二级结构有哪些基本形式？6、维系蛋白质各级结构的化学键分别是什么？第四节蛋白质的理化性质1、蛋白质的最大紫外吸收峰是多少?2、什么是蛋白质的等电点？当溶液PH小于、等于、大于PI时，蛋白质在溶液中分别带何种电荷？3、蛋白质在水溶液中的稳定因素是什么？4、蛋白质变性的实质是什么？蛋白质变性后理化性质有哪些改变？蛋白质变性的应用第五章核酸化学第一节核酸的分子组成1、核酸分为哪两大类？2、核酸的基本组成单位是什么？3、核苷酸的基本组成成分有哪些？第二节核酸的分子结构1、核酸分子中核苷酸的连接方式是什么？何谓核酸的一级结构？2、DNA双螺旋结构的要点有哪些？Chargaff法则有哪些？第三节核酸的理化性质6、何谓Tm？DNA分子中的G-C含量或A-T含量与Tm有何关系？7、何谓DNA变性？DNA变性的实质是什么？核酸变性后有什么特征？8、核酸的最大紫外吸收峰是多少?第六章酶第一节酶的分子组成与活性中心1、全酶的组成成分有哪些？各组成成分的作用是什么？2、何谓酶的活性中心？酶活性中心内有哪两种必需基团？第二节酶促反应的特点和机制1、酶与一般催化剂的不同点有哪些？2、酶具有高效性的机制是什么？第三节酶促反应动力学1、影响酶促反应速度的因素有哪些？2、何谓Km？有何意义？3、酶的抑制作用包括哪几类？4、磺胺类药物的作用机制？5、什么叫竞争性抑制作用及非竞争性抑制作用？动力学参数有何变化？各有什么主要特点？6、反竞争性抑制作用的动力学参数有何变化？7、高温及低温影响酶活性的机制分别是什么？8、激活剂的定义？唾液淀粉酶的非必需激活剂是什么？第四节酶的调节1、酶原的定义及其无活性的根本原因。
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生物体内，其主要作用是与新生肽或部分折叠的蛋白质的疏水 表面结合，加速其折叠或组装成天然构象的进程，并防止其相 互聚集和错误折叠。 14. 定位突变：基于天然蛋白质结构的蛋白质分子“小改”，是指 对已知结构的蛋白质进行少数几个残基的修饰、替换或删除 等，这是目前蛋白质工程中最广泛使用的方法，主要可分为蛋 白质修饰和基因定位突变两类 15. 蛋白质分子拼接:蛋白质由结构元件组装而成，可以将不同蛋白 质的特定结构元件剪裁拼接起来，从而将不同蛋白的功能结合 在一起创造出新的蛋白。 16. 蛋白质空间结构：又称为蛋白质的构象,指蛋白质分子中所有原 子在三维空间排列分布和肽链的走向。 17. 超二级结构：是指若干相邻的二级结构中的构象单元彼此相互 作用，形成有规则的，在空间上能辨认的二级结构组合单位。 18. 四级结构：由两条或两条以上的具有三级结构的多肽链聚合而 成特定构象的蛋白质分子叫蛋白质的四级结构。 19. 变构效应：蛋白质在表达功能的过程中构象发生变化的现象。 20. 蛋白质的化学修饰：通过活性基团的引入或去除使蛋白质化学 (一级)结构的发生改变的过程。 21. 蛋白质的复性：除去变性因素后，变性蛋白质恢复到天然构 象，称为蛋白质的复性。 22. 单链抗体（scFv）：抗体可变区的重链（VH）与轻链（VL）通 过一段约15-25个氨基酸残基构成的弹性短肽（Linker）相连， 融合表达出来的抗体片断。 23. 蛋白质工程(Protein Engineering)：是以蛋白质的结构规律 与生物功能的关系为基础，利用基因工程技术对现存蛋白质加 以定向改造，设计、构建并最终获得新型蛋白质的现代生物技 术。
A 提高脯氨酸的含量 B 在蛋白质分子中引入二硫键 C 增加蛋白
质分子的α螺旋 D 增加β折叠
4. 蛋白质工程的最终目的是( C )
A 开发新产品 B 创造新理论 C 制造具有新性能的新蛋白质结构
D 研究蛋白质的氨基酸组成
6、不属于蛋白质空间结构的基本组件的是（ C ）
A α螺旋 B β层 C 环肽链 D 结构域
2、 蛋白质工程原理：基因指导蛋白质的合成,设计和改造基因获取新
蛋白质。
3、 蛋白质工程设计原理 基因水平，蛋白质水平
4、 中心法则：Crick提出
5、 第二遗传密码特性:（ 1）简并性（2）多义性（3）全局性和复杂
性
11、 蛋白质分子设计原理：计算机模拟，基因构建，获得突变蛋白产
品，功能分析
12、 蛋白质的几种修饰方法 :侧链的化学修饰、位点专一性修饰、聚
a) 通过反向拟合天然蛋白质设计新的功能 b) 结合及催化的从头设计 c) 在全新蛋白质中引入结合位点 d) 催化活性蛋白质的设计 e) 膜蛋白及离子通道的设计、新材料的设计 17、 蛋白质工程设计可以采用定点突变和体外分子定向进化两种方式 对天然酶分子进行改造。 18、 蛋白质三维结构解析方法：X-射线晶体衍射法：85.3%；核磁共 振波谱：14.7%；电镜三维重构、各种光谱技术、显微技术和计算机模 拟。 19、 1895 伦琴 “X射线” 。 20、 其他测定蛋白质结构的方法：现代光谱技术、三维电镜衍射技 术、动力学全精研究技术 21、 质谱分析(MS)的特点：高灵敏度、易操作性、准确性、快速性、 很好的普适性 22、 目前，国际上主要有Genbank、EMBL、DDBJ三大核酸序列数据库 23、 PDB(Protein Data Bank）蛋白质结构数据库是国际上最完整的 蛋白质、核酸、糖类、蛋白质-核酸复合物及病毒等生物大分子三维结
简答题
1. 简述鼠源性单抗的改造原则及常见类型 a) 改造原则：降低其免疫原性、尽量保持其亲合力 b) 常见类型：人鼠嵌合抗体、CDR移植抗体、小分子抗体
2. 噬菌体抗体库技术的主要流程及优点 a) 噬菌体抗体库技术：借助噬菌体展示技术，将抗体V基因与噬 菌体外壳蛋白基因融合表达于噬菌体表面，从而构建噬菌体 抗体库，然后通过筛选获得特异性抗体的V区基因。 b) 主要流程： i. 扩增全套抗体基因 ii. 构建合适的重组噬菌体表达载体 iii. 转化大肠杆菌并保存 c) 优点： i. 省时省力 ii. 筛选容量大 iii. 直接得到抗体基因 iv. 可制备人源抗体和其它难于制备的抗体 v. 可原核表达 d) 缺点： i. 库容受转化效率限制：一般不超过1010 ii. 一些抗体分子会抑制宿主菌生长 iii. 具极高亲和力的抗体与抗原结合后，难以洗脱，造成丢失 1. 受人类病原体污染的危险性最小
乙二醇修饰
1. 维持蛋白质一级结构的作用力是（ 肽键
）和（ 二硫键
）。
2.目的蛋白的表达模式检测的方法有（ DNA探针检测
）和（
mRNA做探针
）
4．常用的蛋白表达系统有（酵母表达系统 ）、（ 昆虫表达系统
）和（ 哺乳动物表达系统 ）。
5、二级结构折叠：α—螺旋、β—折叠、β—转角、环肽链、无规卷
曲等。
3. 人一鼠嵌合抗体的制备 a) 改造依据 i. 抗体的免疫原性主要C区 b) 主要流程 i. 免疫动物 ii. 制备杂交瘤 iii. 克隆鼠源单抗的可变区基因 iv. 克隆人抗体恒定区基因 v. 构建包含鼠V区和人C区的重组表达载体 vi. 哺乳动物细胞表达(如骨髓瘤细胞、CHO细胞) c) 特点
9、一级结构：肽键、二硫键（都属于共价键）
10、二级结构：氢键（主链上—C=O—和N—H之间 形成）
11、三四级结构：二硫键、次级键（氢键、疏水键、离子键、范德华 力、配位键） 13、变性蛋白的特征 ：（1）、生物活性的丧失——最主要标志
（2）、理化性质的改变： 溶解度下降，易沉淀 结晶能力丧失 渗透压力和扩散速度降低 粘度、旋光性负值上升，等
7、不属于强烈倾向于形成α螺旋的氨基酸 （ C ）
A Ala B Glu C Pro D Met
8、蛋白质分子的完全从头设计属于（ C ）
A 小改 B 中改 C 大改 D 没改
9. 蛋白质工的基本原理是（ C ）
A 中心法则 B 热力学第二定律 C 中心法则的逆推 D 模型对
比
3、 填空题
1、 蛋白工程之父：ULmer
电点上升 （3）、生化性质的改变
14、 变性因素： a) 物理：热、紫外线照射、高压和表面张力 b) 化学：有机溶剂、脲、胍、 酸、碱、（脲，盐酸胍，十二烷 基硫酸钠（SDS） c) 重金属阳离子、生物碱等
15、 蛋白质分子设计的原则：活性设计、对专一性的设计、Scaffold 设计(框架)、疏水基团与亲水基团需合理分布、最优的氨基酸侧链几何 排列。 16、 蛋白质功能设计包括：
二、单选题 1.下列不属于蛋白质结构测定的技术是（ D ） A X射线晶体衍射技术 B 核磁共振波谱技术 C 生物信息学预测 蛋白质结构 D 缺失突变技术 2. 下列不属于蛋白质结晶技术的是（ D ） A 悬滴法 B 坐滴法 C 微量扩散小室法 D 插入突变法 3. 增加蛋白质分子的热稳定性的常用方法是（ B ）
构数据库。 24、 DSSP (Database of Secondary Structure of Protein）是一 个二级结构推导数据库，用于研究蛋白质序列与蛋白质结构的关系。 25、 现代生物学技术：
a) 传统技术：分离纯化技术，如层析技术、电泳技术；蛋白质 鉴定技术，如免疫印迹技术、酶联免疫吸附测定（ELISA）
b) 新技术：对蛋白质进行分析鉴定的蛋白质芯片技术、蛋白指 纹图谱技术
c) 研究蛋白质相互作用的表面等离子体共振技术、酵母双杂交 技术
26、 根据用途的不同蛋白质芯片可分： 蛋白功能芯片、蛋白检测芯 片 27、 蛋白质粗分级主要方法：硫酸铵分级沉淀、有机溶剂分级沉淀、 超速离心、等电点沉淀、透析、 超过滤、蛋白质结晶 28、 蛋白质细分级方法：分子筛层析、离子交换层析、吸附层析、亲 和层析、电泳、其他技术 29、 蛋白质含量测定有很多方法：凯氏定氮法 、双缩脲法 、福林-酚 法 、考马斯亮蓝比色法 、紫外吸收法 天然蛋白质分为三类：纤维状蛋白质、球状蛋白质、膜蛋白. 氨基修饰常用试剂：三硝基苯磺酸，烷基化试剂，磷酸吡哆醛等。 羧基修饰常用试剂：碳二亚胺法 制造突变体的方法：易错PCR DNA改组 NMR法一般只能解析相对较小的蛋白质，X-射线晶体衍射法适用于研究 各种大小的蛋白质。 生物信息学在蛋白质的序列分析、结构预测、功能预测、分子设计等方 面具有重要应用 蛋白质的鉴定：纯度鉴定、分子量及等电点测定、氨基酸组成及顺序分 析 、结晶与结构分析、免疫印迹（Western-blotting）鉴定 、生物活 性及功能测定 提高热稳定性-----引入二硫桥，增加内氢键数目，改善内疏水堆积 对氧化的稳定性------把Cys转换为Ala或Ser，把Trp转换为Phe或Tyr 对重金属的稳定性--------替代表面羧基，把Met转换为Gln、Val、Ile 或Leu pH稳定性-------替换表面荷电基团，His、Cys以及Tyr的置换，内离子 对的置换 提高酶学性质-------专一性的改变，增加转换数， 改变酸碱度 Pro和Gly是α螺旋 的中断者 。Glu是β折叠片的中断者