示差分光光度法测定水样中非那西汀的含量11
试验五复方乙酰水杨酸片的含量测定——非那西丁四
外指示剂法 淀粉-KI糊剂
遇淀粉边蓝
实验五 复方乙酰水杨酸片的含量测定
——非那西丁
五、计算
含量(g/片）=
V × T × F ×平均片重 W
Thank you
实验五 复方乙酰水杨酸片的含量测定 ——非那西丁
一、实验目的
1.掌握容量分析法在复方制剂分析中的应用杨酸片的含量测定 ——非那西丁
二、处方
乙酰水杨酸 220g 非那西丁 150g 咖啡因 35g
制成 1000片
本品每片中含乙酰水杨酸（C9H8O4）应为0.209~0.231g，含非那西丁（C10H13O2N） 应为0.143~0.158g，含咖啡因 （C8H10O2N4·H2O）应为31.5~38.5mg。
实验五 复方乙酰水杨酸片的含量测定 ——非那西丁
三、实验原理
第一步：水解，得到芳香伯胺；
实验五 复方乙酰水杨酸片的含量测定 ——非那西丁
三、实验原理
第二步：重氮化定量反应。
实验五 复方乙酰水杨酸片的含量测定
——非那西丁
四、测定法
原理： 2NaNO2+2KI+4HCl NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O
示差分光光度法测定水样中非那西汀的含量11
1. 示差分光光度法的测定步骤：
1）采用浓度为cs的标准溶液为参比溶液;
2 ）测定一系列 Δc 已知的标准溶液的相对吸光度 (ΔA)； 3）绘制ΔA-Δc工作曲线； 4）由测得试样溶液得相对吸光度 ΔA，从工作曲 线上求出 Δc ，根据 cx ＝ cs+Δc 即可求出试样浓 度cx
试剂与器材
UV-2450紫外-可见分光光度计， 石英比色皿（1cm）， 容量瓶（50ml）， 移液管（1ml、10ml）， 未知样品液。
3. 绘制工作曲线 分别取非那西汀标准溶液5mL，6mL，7mL， 8mL，9mL，10mL分别于6 个50ml容量瓶中，用蒸 馏水稀释至刻度，以第一个溶液为参比，于最大波 长处测定吸光度值，以ΔA对Δc作图绘制工作曲线。
4.样品测定 取一定体积样品溶液（浓度在40-60μg/mL）于 50mL容量瓶中，于最大吸收波长处测定吸光度值。
测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准 溶液的吸光度之差ΔＡ(也叫相对吸光度Ar)。
示差法测得的吸光度ΔA与Δc呈直线关系。由标 准曲线上查得相应的Δc值，则待测溶液浓度cx ： cx = cs + Δc 示差法标尺扩展原理
普通法： cs的T =10%；cx的T = 5% 示差法： cs 做参比，调T =100% 则： cx的T = 50% 标尺扩展10倍
实验方法及步骤
1.标准溶液的配制 非那西汀标准溶液（100μg/ml）：准确称取非 那西汀0.0500g于小烧杯中，加少许乙醇溶解，转移 到500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀备 用 2.吸收曲线绘制 移取5.00ml非那西汀标准溶液于50ml容量瓶中， 蒸馏水稀释至刻度，摇匀。以蒸馏水为空白，进行 全波长扫描，绘制吸收曲线，找出最大波长。
紫外分光光度法测定复方药剂中非那西丁的含量
紫外分光光度法测定复方药剂中非那西丁的含量李书鹏;刘柱【期刊名称】《化工时刊》【年(卷),期】2009(023)009【摘要】采用紫外分光光度法,利用非那西丁在盐酸介质中水解,水解产物被重铬酸钾氧化为棕红色,在560 nm处有强紫外吸收的原理测定其含量.实验结果表明,在1.1～1.3 mol/L的盐酸溶液中,显色剂重铬酸钾的浓度为0.7～0.9 mol/L,显色剂与非那西丁反应时间达到90 min时吸光度达到最大值且持续40 min.非那西汀在0.04～0.36 mg/mL范围内线性关系良好,方法的平均回收率为98.5%.适用于复方药物中非那西丁单一组分的含量测定.【总页数】3页(P31-33)【作者】李书鹏;刘柱【作者单位】齐齐哈尔大学化学工程学院,黑龙江,齐齐哈尔,161006;淮海工学院化学工程学院,江苏,连云港,222005【正文语种】中文【中图分类】TQ46【相关文献】1.紫外分光光度法测定维吾尔药复方艾皮提蒙合剂中总黄酮含量 [J], 热孜亚·吾甫尔;艾尼瓦尔·塔力甫;买迪娜木·米吉提;热甫哈提·赛买提2.紫外可见分光光度法测定蒙药复方述达格-4中总内酯的含量 [J], 杜银飞;信莎莎;董玉;彭璐;孙伟;樊玮;林盈达;刘红彩;杨峥;3.紫外可见分光光度法测定蒙药复方述达格-4中总内酯的含量 [J], 杜银飞;信莎莎;董玉;彭璐;孙伟;樊玮;林盈达;刘红彩;杨峥;4.紫外可见分光光度法测定蒙药复方述达格-4中总内酯的含量 [J], 杜银飞;信莎莎;董玉;彭璐;孙伟;樊玮;林盈达;刘红彩;杨峥5.紫外分光光度法测定复方痛风颗粒剂中总酚的含量 [J], 唐勇琛; 李拥军; 张亚洲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
分光光度法测定复方茶碱片中非那西汀含量
分光光度法测定复方茶碱片中非那西汀含量
郭成明
【期刊名称】《天津药学》
【年(卷),期】1989(000)003
【摘要】复方茶碱片为一大复方制剂,由于处方中各种成份之间的相互干扰,现行质量标准仅能控制处方中氨基比林含量、本文经分离提取用分光光度法测定其中非那西汀含量,取得了比较满意的结果。
【总页数】4页(P41-44)
【作者】郭成明
【作者单位】天津市药品检验所
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.用分光光度法测定复方药物安痛定片、阿司匹林和感克片中非那西丁含量 [J],
高元萍;倪春娟;郑王巧
2.紫外分光光度法测定复方药剂中非那西丁的含量 [J], 李书鹏;刘柱
3.复方西格列汀二甲双胍片与二甲双胍片治疗初诊T2DM患者的随机对照研究 [J], 温辉;郑黎黎
4.统计模拟分光光度法测定复方制剂组分含量的研究───小儿复方苯巴比妥片组分含量测定新方法的制订 [J], 王玺;卢静华;周炬;朱舸;毕开顺;杜立颖;罗旭
5.一阶导数分光光度法测定复方茶碱甲麻黄碱片中茶碱含量 [J], 马立夫
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
进出口保健食品中伐地那非、西地那非、他达那非的检测方法(一)
进出口保健食品中伐地那非、西地那非、他达那非的检测方法（一）1 范围本标准规定了保健食品中、、他达那非的液相色谱-质谱/质谱检测办法。
本标准适用于片剂、胶囊剂和口服液剂类保健食品中伐地那非、西地那非、他达那非的检测。
2 测定办法 2.1 办法提要片剂、胶囊剂试样中的伐地那非、西地那非、他达那非用甲醇超声提取，提取液经稀释后过滤。
口服溶液剂经挺直稀释后过滤，用配有电喷雾离子源的液相色谱-质谱/质谱仪举行测定，外标法定量。
2.2 试剂和材料全部试剂除特别注明外，均为分析纯，水为二次蒸馏水。
2.2.1 ：高效液相色谱级。
2.2.2 ：高效液相色谱级。
2.2.3 ：优级纯。
2.2.4 ：优级纯。
2.2.5 0.1 mol/L＋甲醇混合液(9+1，体积比)。
2.2.6 伐地那非(vardenafil, CAS号：224785-90-4，分子式：C23H32N6O4S·HCl·3H2O)标准品：纯度大于等于99.5%。
2.2.7 西地那非(Sildenafil, CAS号：139755-83-2，分子式：C22H30N6O4S)标准品：纯度大于等于99.5％。
2.2.8 他达那非(tadalafil, CAS号：171596-29-5，分子式：C22H19N3O4)标准品：纯度大于等于99.5%。
2.2.9 标准溶液：分离精确称取适量伐地那非、西地那非、他达那非标准品，用甲醇配制成浓度为10 ug/mL的混合标准储备液，于4℃下保存。
按照需要用0.1mol/L盐酸＋甲醇混合液(2.2.5)将标准储备液稀释成1 ng/mL、2 ng/mL、4 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL的混合标准工作溶液。
2.3 仪器和设备 2.3.1 高效液相色谱-质谱/质谱仪：三重四极杆质谱检测器，配电喷雾离子源(ESI)。
2.3.2 超声波清洗器。
2.3.3 旋涡混匀器。
差示扫描量热仪(DSC)在药物分析中的应用
差示扫描量热仪（DSC）在药物分析中的应用珀金埃尔默仪器（上海）有限公司朱兵刘继涛前言：药品的研发与生产必须监控其物化性质，如纯度、晶型、稳定性和安全性，以确保药物具有预期的药性。
众所周知，有机化合物包括药品常常具有多种结构及晶态，这势必影响到药品的加工条件、期稳定性、衰变及生物投递能力。
药品的最终组成中包含了多种活性组份以及它们之间相互作用而生成的产物，当然还有赋形剂、水分、药片涂层等，十分复杂。
因此对其全面的表征也变得越来越重要，其中最理想的测试方法之一就是热分析。
热分析具有用量少、方法灵敏、快速的特点，在较短的时间内可获得需要复杂技术或长期研究才能得到的各种信息。
差示扫描量热仪（DSC）是目前在医药领域应用最广的热分析仪之一，DSC通过测量药物热焓和温度随程序温控的变化，具体可以研究的信息如：z药物纯度z药物的多晶及亚稳态、无定形态的研究z优化冷冻干燥z脂质检测、蛋白质变性1. 药物纯度DSC在药物分析中最主要的应用之一是评估药物纯度。
自从上世纪六十年代商业DSC 产品出现以来，因DSC测定药物纯度快速、准确易于操作，这项技术已被广泛接受。
DSC 池体的响应时间和温度测量对于纯度的准确分析至关重要。
功率补偿型DSC因其炉体小（<1g），响应时间极快，而且其使用铂电阻测温精度高、准确好，因而非常适合纯度的准确测量。
众所周知，当物质中有微量杂质存在时，其熔点将会降低，同时熔程变宽。
图1. 不同纯度非那西汀样品的DSC熔融测试结果图1所示不同纯度的非那西汀（乙酰对氨苯乙醚）样品的DSC曲线，可以说明这一点。
而DSC测定纯度通过Var’tHoff 方程计算求得：1/Fs = [∆H/R] • [To – Ts] / To2• [1/X2]式中Ts为样品的瞬间熔解温度，To为纯物质的熔点（°K）；△H为纯物质的熔融热（J/g），X2为杂质样品中的摩尔分数；R为气体常数（8.314J/mole），Fs则为温度Ts时样品已熔化的分数，Fs=As/At，As为温度为Ts时已熔融部分的熔融热，At为总熔融热。
示差分光光度法测定水样中非那西汀的含量
实验方法及步骤
1.标准溶液的配制 非那西汀标准溶液（100μg/ml）：准确称取非 那西汀0.0500g于小烧杯中，加少许乙醇溶解，转移 到500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀备 用 2.吸收曲线绘制 移取5.00ml非那西汀标准溶液于50ml容量瓶中， 蒸馏水稀释至刻度，摇匀。以蒸馏水为空白，进行 全波长扫描，绘制吸收曲线，找出最大波长。
1. 示差分光光度法的测定步骤：
1）采用浓度为cs的标准溶液为参比溶液;
2 ）测定一系列 Δc 已知的标准溶液的相对吸光度 (ΔA)； 3）绘制ΔA-Δc工作曲线； 4）由测得试样溶液得相对吸光度 ΔA，从工作曲 线上求出 Δc ，根据 cx ＝ cs+Δc 即可求出试样浓 度cx
试剂与器材
UV-2450紫外-可见分光光度计， 石英比色皿（1cm）， 容量瓶（50ml）， 移液管（1ml、10ml）， 未知样品液。
三、示差分光光度法原理
普通分光光度法 一般测定痕量组分 参比溶液浓度为零
即朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。
示差分光光度法
用于测定浓度较高组分 用浓度稍低于待测溶液的标准溶液 作参比
设：待测溶液浓度为cx， 标准溶液浓度为cs(cs < cx)。 则： Ax= εb cx As = εb cs ΔＡ＝Ａx －Ａs =εb(cx － cs ）=εbΔc
测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准 溶液的吸光度之差ΔＡ(也叫相对吸光度Ar)。
示差法测得的吸光度ΔA与Δc呈直线关系。由标 准曲线上查得相应的Δc值，则待测溶液浓度cx ： cx = cs + Δc 示差法标尺扩展原理
普通法： cs的T =10%；cx的T = 5% 示差法： cs 做参比，调T =100% 则： cx的T = 50% 标尺扩展10倍
_基于分光光度法测定血液中非那西丁与扑热息痛含量的肝脏储备功能评估
基金项目：山东省科技攻关项目（2009GG10002005）；山东省医药卫生科研项目（2007HW116）。
第一作者简介：逯素梅（1982-），女，博士，主管技师，研究方向为临床医学检验。
E-mail ：lsmqianyi@126．com 通信作者简介：马万山（1967-），男，硕士，主任技师，研究方向为临床医学检验。
E-mail ：mwsqianyi@163．com 基于分光光度法测定血液中非那西丁与扑热息痛含量的肝脏储备功能评估逯素梅，任瑞，孙涛，马永梅，马万山（山东省千佛山医院，济南250014）摘要：目的建立基于分光光度法测定非那西丁与扑热息痛含量的肝脏储备功能评估方法。
方法筛选分光光度测定的显色体系，确定最大吸收波长，分析不同因素对显色体系的影响，优化非那西丁与扑热息痛水解的最佳条件，最后对技术体系进行应用性验证。
结果建立了利用分光光度测定样品中非那西丁和扑热息痛含量的技术体系，即样品加入3mol /L 盐酸水解30min ，加入0．02%1，2-萘醌-4-磺酸钠、1%十六烷基三甲基溴化铵及2%NaOH （或3%Na 2CO 3）（比例为1ʒ6ʒ1ʒ2或3），分别于500nm 和570nm 下测定吸光值，计算各自浓度。
该技术测定血浆样品中非那西丁与扑热息痛时的分辨率和重复性与高效液相色谱法相当。
结论利用分光光度技术测定血液中非那西丁与扑热息痛含量，二者比值具有评估肝脏储备功能价值。
关键词：肝脏储备功能；分光光度技术；非那西丁；扑热息痛doi ：10．3969/j．issn．1002-266X．2015．04．005中图分类号：Ｒ333．4文献标志码：A文章编号：1002-266X （2015）04-0014-04Assessment of liver reserve function based on determination of phenacetin and paracetamol by spectrophotometryLU Su-mei ，ＲEN Ｒui ，SUN Tao ，MA Yong-mei ，MA Wan-shan （Shandong Provincial Qianfoshan Hospital ，Jinan 250014，China ）Abstract ：ObjectiveTo establish a liver reserve function assessment method based on detection of phenacetin andparacetamol by spectrophotometry．MethodsTo screen the spectrophotometric color system ，determine the maximum ab-sorption wavelength ，analyze the influence of color system in different factors ，optimize optimal conditions that phenacetin and paracetamol hydrolyze ，and then verify the application of this technology about the established system．Ｒesults Thetechnology system detected phenacetin and paracetamol of blood samples using spectrophotometry was established ，in which 3mol /L hydrochloric acid was added to samples to hydrolyze for 30min ，then added 0．02%1，2-naphthoquinone-4-sulfon-ate ，1%sixteen alkyl bromide and 2%sodium hydroxide （or 3%sodium carbonate ）（ratio of 1ʒ6ʒ1ʒ2or 3），and then the absorbance was measured under 500nm and 570nm to calculate each concentration．Ｒesolution and repeatability of technology used for determining phenacetin and paracetamol of plasma samples were comparable with HPLC．Conclusion Ｒatio of phenacetin and paracetamol under established spectrophotometric system could assess liver reserve function．Key words ：liver reserve function ；spectrophotometry ；phenacetin ；paracetamol肝脏储备功能是肝脏所有储备肝细胞功能的总和，其在决定是否进行肝切除术及方案选择上起着不可替代的地位［1］，但目前临床使用的肝脏储备功能评价技术和指标存在诸多不足。
示差分光光度法测定水样中非那西汀的含量共22页文档
▪
27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
▪
28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。——孔子
▪
29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。——达·芬奇
▪
30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华
谢谢！
22
示差分光光度法测定水样中非那西汀 的含量
51、山气日夕佳，飞鸟相与还。 52、木欣欣以向荣，泉涓涓而始流。
53、富贵非吾愿，帝乡不可期。 54、雄发指危冠，猛气冲长缨。 55、土地平旷，屋舍俨然，有良田美 池桑竹 之属， 阡陌交 通，鸡 犬相闻 。
▪
26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
化妆品中非那西丁的检验方法
附件3化妆品中非那西丁的检验方法Determination of Phenacetin in Cosmetics1 范围本方法规定了液相色谱-串联质谱法测定化妆品中非那西丁的含量。
本方法适用于膏霜乳类、液体类、凝胶类、粉类等化妆品中非那西丁的定性与定量。
2 方法提要样品以乙腈为溶剂提取，采用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测，根据保留时间和特征离子对的相对丰度比定性、定量离子对峰面积定量，以标准曲线法计算含量。
本方法取样量为0.5 g时，检出浓度为0.012 mg/kg，最低定量浓度为0.04 mg/kg。
3 试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 甲醇，色谱纯。
3.2 乙腈，色谱纯。
3.3 氯化钠。
3.4 50%乙腈：取乙腈、水等体积混合，摇匀。
3.5 饱和氯化钠溶液：称取40 g氯化钠（3.3），置于250 mL磨口锥形瓶中，加入100 mL 水，超声15 min，即得。
3.6 标准品：非那西丁（英文名称：Phenacetin，分子式：C10H13NO2，CAS：62-44-2），纯度≥98%。
3.7 标准储备溶液：精密称取非那西丁标准品10 mg（精确到0.00001 g）于10 mL容量瓶中，加入甲醇（3.1）溶解并定容，配制成质量浓度为1 mg/mL的标准溶液备用，转入棕色储液瓶中，4 ℃避光保存，有效期3个月。
3.8 标准中间液：精密量取适量标准储备溶液（3.7），用甲醇（3.1）稀释成质量浓度为10 mg/L的标准中间液。
4 仪器和设备4.1 高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪。
4.2 分析天平：感量0.0001 g和0.00001 g。
4.3 超声波清洗器（≥250 W）。
4.4 涡旋混合仪。
4.5 高速离心机。
5 分析步骤5.1 空白基质提取液称取空白试样0.5 g（精确到0.0001 g），置于15 mL具塞比色管中，自“加入饱和氯化钠溶液2 mL”起与样品同法处理（5.4），作为空白基质提取液。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
操作规程简介
1.打开电源开关，打开电脑及软件，进入自检界面。 打开电源开关，打开电脑及软件，进入自检界面。 打开电源开关 2.单击确定开始自检，自检过程中不得打开样品室盖。 单击确定开始自检， 单击确定开始自检 自检过程中不得打开样品室盖。 3.完成自检后，单击波长扫描按钮，选择“方式”，设定波长 完成自检后，单击波长扫描按钮，选择“方式” 完成自检后 及测量方式（ 及测量方式（Abs） ） 4.将参比溶液放入参比池中，另一参比液放入样品池第一池内。 将参比溶液放入参比池中， 将参比溶液放入参比池中 另一参比液放入样品池第一池内。 点击自动清零键清零。 点击自动清零键清零。 5.取出样品池中参比，放入测量液，进行全波长扫描，找出最 取出样品池中参比， 取出样品池中参比 放入测量液，进行全波长扫描， 大吸收波长。 大吸收波长。 6.取出测量液，将标准曲线的五个试样放入测量池中，打开定 取出测量液， 取出测量液 将标准曲线的五个试样放入测量池中， 量分析界面，设定波长和测量方式Abs，测定各点吸收值， 量分析界面，设定波长和测量方式 ，测定各点吸收值， 绘图。 绘图。 7.放入待测样品，测定。 放入待测样品， 放入待测样品 测定。
数据处理
1. 绘制非那西汀的吸收曲线 2. 绘制工作曲线 3. 在工作曲线上查出未知样中非那西汀的浓 度c 4. 计算未知样中非那西汀的浓度 x 计算未知样中非那西汀的浓度c 5.完成实验报告并交给指导教师 完成实验报告并交给指导教师。 5.完成实验报告并交给光度法原理
普通分光光度法 一般测定痕量组分 参比溶液浓度为零
即朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。 即朗伯 比耳定律只适用于稀溶液。 比耳定律只适用于稀溶液
示差分光光度法
用于测定浓度较高组分 用浓度稍低于待测溶液的标准溶液 用浓度稍低于待测溶液的标准溶液 作参比
设：待测溶液浓度为cx， 标准溶液浓度为cs(cs < cx)。 则： Ax= εb cx As = εb cs Ａ＝Ａx －Ａs =εb(cx － cs ）=εbc
一、紫外－可见分光光度法基本原理 紫外－ 紫外
紫外-可见分光光度法是指利用紫外 可见 紫外 可见分光光度法是指利用紫外-可见 可见分光光度法是指利用紫外 吸收光谱对物质进行定性和定量分析的方法。 吸收光谱对物质进行定性和定量分析的方法。 紫外-可见吸收光谱属于分子吸收光谱， 紫外 可见吸收光谱属于分子吸收光谱，由 可见吸收光谱属于分子吸收光谱 分子的外层电子跃迁产生。 分子的外层电子跃迁产生。其中 可见吸收光谱：波长范围 可见吸收光谱：波长范围400750 nm ， 主要用于有色物质的定量分析。 主要用于有色物质的定量分析。 紫外吸收光谱：波长范围 紫外吸收光谱：波长范围200400 nm 近紫外区） 可用于结构鉴定和定量分析。 （近紫外区） ，可用于结构鉴定和定量分析。
物质的结构不同， 物质的结构不同，紫外吸收光谱的形状 不同，据此可进行结构鉴定 结构鉴定。 不同，据此可进行结构鉴定。 例如: 例如 不饱和脂肪族化合物在175~200 nm处有 不饱和脂肪族化合物在 处有 吸收。 吸收。 芳香族化合物的苯环在紫外区有三个吸 收峰， 收峰， λmax = 250 nm，。 ，。
示差分光光度法测定水样 中非那西汀的含量
指导教师 权新军
实验目的
1、通过标准曲线的绘制及样品溶液的测定， 了解示差分光光度法的原理及特点 2、掌握UV-2450型紫外-可见分光光度计的使 用方法
实验原理
一、紫外－可见分光光度法基本原理 紫外－ 紫外 分光光度计基本组成及UV-2450型紫外－ 紫外－ 二、分光光度计基本组成及 紫外 可见分光光度计操作规程 三、示差分光光度法的原理
测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准 也叫相对吸光度A 溶液的吸光度之差 也叫相对吸光度 。 溶液的吸光度之差 Ａ(也叫相对吸光度 r)。
示差法测得的吸光度A与 呈直线关系 呈直线关系。 示差法测得的吸光度 与c呈直线关系。由标 准曲线上查得相应的c值 则待测溶液浓度c 准曲线上查得相应的 值，则待测溶液浓度 x ： cx = cs + c 示差法标尺扩展原理
3. 绘制工作曲线 分别取非那西汀标准溶液5mL，6mL，7mL， ， 分别取非那西汀标准溶液 ， ， 8mL，9mL，10mL分别于 个50ml容量瓶中，用蒸 分别于6 容量瓶中， ， ， 分别于 容量瓶中 馏水稀释至刻度，以第一个溶液为参比， 馏水稀释至刻度，以第一个溶液为参比，于最大波 长处测定吸光度值， 作图绘制工作曲线。 长处测定吸光度值，以A对c作图绘制工作曲线。 对 作图绘制工作曲线 4.样品测定 样品测定 取一定体积样品溶液（浓度在40-60g/mL）于 取一定体积样品溶液（浓度在 ） 50mL容量瓶中，于最大吸收波长处测定吸光度值。 容量瓶中， 容量瓶中 于最大吸收波长处测定吸光度值。
定量分析依据朗伯-比尔定律： 定量分析依据朗伯 比尔定律： 比尔定律 A＝lg（I0/It)= εb c ＝ （ 式中A：吸光度； 式中 ：吸光度； b：液层厚度，通常以cm为单位； ：液层厚度，通常以 为单位 为单位； c：溶液的摩尔浓度，单位molL－１； ：溶液的摩尔浓度，单位 ε：摩尔吸光系数，单位Lmol－１cm－１ ：摩尔吸光系数，单位
试剂与器材
UV-2450紫外 可见分光光度计， 紫外-可见分光光度计 紫外 可见分光光度计， 石英比色皿（ 石英比色皿（1cm）， ）， 容量瓶（ 容量瓶（50ml）， ）， 移液管（ 移液管（1ml、10ml）， 、 ）， 未知样品液。 未知样品液。
实验方法及步骤
1.标准溶液的配制 标准溶液的配制 非那西汀标准溶液（ ）：准确称取非 非那西汀标准溶液（100g/ml）：准确称取非 ）： 那西汀0.0500g于小烧杯中，加少许乙醇溶解，转移 于小烧杯中， 那西汀 于小烧杯中 加少许乙醇溶解， 到500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀备 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度， 容量瓶中 用 2.吸收曲线绘制 吸收曲线绘制 移取5.00ml非那西汀标准溶液于 非那西汀标准溶液于50ml容量瓶中， 容量瓶中， 移取 非那西汀标准溶液于 容量瓶中 蒸馏水稀释至刻度，摇匀。以蒸馏水为空白， 蒸馏水稀释至刻度，摇匀。以蒸馏水为空白，进行 全波长扫描，绘制吸收曲线，找出最大波长。 全波长扫描，绘制吸收曲线，找出最大波长。
普通法： 普通法： cs的T =10%；cx的T = 5% ； 示差法： 做参比， 示差法： cs 做参比，调T =100% cx的T = 50% 标尺扩展10倍 则： 标尺扩展 倍
1. 示差分光光度法的测定步骤： 示差分光光度法的测定步骤： 1）采用浓度为cs的标准溶液为参比溶液 ）采用浓度为 的标准溶液为参比溶液; 2） 测定一系列 已知的标准溶液的相对吸光度 ） 测定一系列c已知的标准溶液的相对吸光度 (A)； ； 3）绘制A-c工作曲线； ）绘制 工作曲线； 工作曲线 4）由测得试样溶液得相对吸光度A，从工作曲 ） 由测得试样溶液得相对吸光度 ， 线上求出c， 根据c 线上求出 ， 根据 x ＝ cs+c即可求出试样浓 即可求出试样浓 度cx
朗伯-比尔定律是紫外 可见分光光度吸收法定量分 朗伯 比尔定律是紫外-可见分光光度吸收法定量分 比尔定律是紫外 析的依据。 析的依据。
二、分光光度计的基本组成及UV-2450 及 型紫外－可见分光光度计操作规程 紫外－ 紫外
光源 单色器 样品室 检测器 显示
UV-2450型紫外－可见分光光度计 紫外－ 紫外