NS-398对人卵巢癌C13K细胞株增殖的抑制作用及对Snail和E-cadherin表达的调节
NS-398和抗癌药联用对胃癌细胞增殖的影响
理组 同时设 Ｄ Ｓ Ｍ Ｏ对照组和 Ｓ Ｃ ７０ 细胞空 白对照组 ， 四个 Ｇ 一９ １ 各
复孔 。加入相应药物和试剂孵育 ４ｈ ８ ，孵育结束前 ４ 加入 Ｓ Ｌ ｈ Ｏ 的 ＭＴ＂ Ｉ溶液 ２ Ｌ ０ 。吸去上清 ， 每孔加人 １０ ５ Ｌ二 甲基 亚砜 ， 振荡 １ｍ ｎ ０ ｉ ，使 结晶充分溶解 ，ｈ内用分光 光度 计在 ５ ０ ｍ处 １ ７ｎ
用， 可以作为 ５ Ｆ － Ｕ的化疗增敏剂 。
［ 关键词】胃肿瘤； 环氧合酶抑制剂； 化疗药物； 生长抑制
【 分 类号 】Ｒ ３ ． 【 献标 识 码 】Ａ 【 章 编 号】１７ — ７ １ ２ １ ）３ １－ ２ 中图 ７ ５２ 文 文 ６３ ９ ０ （０ ０ ０ — ６ ０
胃癌是我 国最 常见的三大肿瘤之一 ， 病率和病死 率都 其发
略 ， 目的是为 了获取协同作用【 其 １ ］ 。研究表 明 ， 抑制环氧合酶 一 ２
（ｏ 一 ） ｃ ｘ ２ 在非 甾体抗炎药 （ Ａ Ａ Ｄ ）￣ 化学预防 中起重要 的 Ｎ Ｓ Ｉｓｎ 瘤 作用。在人类多种肿瘤 中， 包括消化道肿瘤均存在过表达ｆ】 ２。另 ＇ ３
７ ０ 细 胞 ， 酶 消化 细 胞 ， 每 孔 １ ０ 个 细 胞接 种 于 ９ 孔 板 ９１ 胰 以 ×１５ ６
超 过 了世界 平均水平 。联合用 药是 临床上治疗 肿瘤 的常用 策
１ 、０ 、００ ｍ ｌ ０ １０ １０ ｏ Ｌ的 Ｎ 一 ９ 和 １ ｓ Ｅ的 ５ Ｆ 。 ／ Ｓ３８ ０ ／ ｍ 一Ｕ
１ ． Ｍ＇ ．３ ３ Ｉ 检 测细 胞 的增 殖活 性 Ｔ法
取对 数 生长期 的 Ｓ Ｃ Ｇ一
中，每孔体积 ２ ０ ， ７Ｃ， ％Ｃ 件下培 养 ２ ｈ ０ Ｌ ３ ５ ０ 条 ｏ ４ 。分别加
NS398对卵巢癌细胞系CAOV3免疫杀伤作用体外研究
NS398对卵巢癌细胞系CAOV3免疫杀伤作用的体外研究【摘要】目的观察和探讨cox2选择性抑制剂ns398对卵巢癌细胞系caov3增殖抑制作用及对ctl细胞体外免疫杀伤作用的影响。
方法放射免疫法测定caov3细胞及经ns398处理的caov3细胞培养上清液中的pge2含量，流式细胞仪分析ctl细胞表型，mtt比色法检测ctl细胞杀伤活性。
结果ns398能抑制caov3细胞分泌pge2；经ns398处理的caov3刺激诱导产生ctl细胞对caov3细胞的杀伤活性显著增加。
结论ns398可能成为卵巢癌预防与治疗的新靶点。
【关键词】ns398；ctl；卵巢癌卵巢癌起病隐匿，五年生存率在30%左右[1]。
ns398是一种磺胺类药剂的衍生物，是cox2选择性抑制剂[2]。
特异性细胞毒性t细胞（ctl）杀伤肿瘤作用是抗原特异性的[3]，本研究旨在探讨ns398对卵巢癌细胞系caov3增殖抑制及对ctl细胞体外免疫杀伤作用的影响，为卵巢癌的预防和治疗提供新的理论依据。
1材料和方法11材料卵巢浆液性癌细胞系ca0v3由中国医科大学细胞生物实验室提供。
ns398为美国cayman公司产品。
pge2放免测定试剂盒由苏州医学院血液研究所提供。
12放射免疫法测定caov3细胞及经ns398处理的caov3细胞培养上清液中的pge2含量。
13卵巢癌caov3细胞体外刺激外周血单个核细胞（pbmc）诱导特异性细胞毒性t细胞（ctl）；流式细胞仪分析ctl细胞表型。
14ctl杀伤活性检测：采用mtt比色法检测ctl细胞杀伤活性。
15统计学方法应用spss 100统计软件分析数据。
样本均数以x ±s表示，样本均数比较采用t检验，多组比较采用方差分析。
2结果21pge2放射免疫结果显示，经ns398处理后，caov3细胞培养液中pge2含量减低，差异有统计学意义（p<005）。
22在il2存在的条件下，pbmc经ns398处理的caov3细胞两次抗原刺激成功诱导产生ctl，表达cd3+cd8+阳性率分别为41%、64%，而未经处理的pbmc cd3+cd8+阳性率仅为25%。
NS-398诱导肝癌细胞HepG2凋亡的作用机制
等 量 的培养 液 ， 酶 标 仪 上 用 ５０ ｎ 测 定 吸 光 值 在 ７ ｍ （ 。按下式 计 算 药 物对 肿 瘤 细 胞 生 长 的 抑 制 率 ： Ａ） 肿 瘤 细胞 生 长 抑 制 率 （Ｒ）＝（ 一 验 组 Ａ值／ 胞 Ｉ １实 细 对 照组 Ａ值 ）×１０ 。 以药 物 浓 度 为横 轴 ， 制 率 ０％ 抑 为 纵轴 ， 出生 长 抑制 曲线 。 绘
位 细 胞 凋 亡 检 测 法 观察 细 胞 凋 亡 形 态 学 变 化 ； 疫 细 胞 化 学 免 分 析 Ｃ Ｘ２ ｃＡ 一 、 ＩＰ、ｕｖ ｉ 蛋 白 变 化 。 结 果 Ｎ、ＩＰ１抗 体 购 于英 国 Ａ ｃｍ公 司 ； 位 末 Ｉ Ｐ ｃＡ 一 ｂａ 原 端 凋亡 检 测 试 剂 盒 （ Ｕ Ｅ ） 于 美 国 Ｐｏ ｅａ公 ＴＮ Ｌ购 ｒｍ ｇ 司 ；Ｐ免疫 组 化检 测试 剂 盒购 于 北 京 中衫 金桥 生 物 ｓ
有 限公 司 ；Ｉ Ｐ 试剂 盒 购 于南 京 凯 基 生 物科 技 发 展 有
限公 司 。
３ ８对 Ｈ ｐ ２细胞株有增殖抑 制作用 ， ９ ｅＧ 流式细胞 仪检测用 药 组凋亡率 明显高于对照组 。Ｔ Ｎ Ｌ染 色可见 典型 的凋 亡形 ＵＥ 态学特征 。免疫细 胞化学 分析 表明使 用 Ｎ 一９ Ｓ３ ８后 ， Ｏ 一 、 Ｃ Ｘ ２ ｃＡ 一、 Ｉ Ｐ Ｓｒｉｉ 白表达 降低 。结论 ＩＰ １Ｘ Ａ 、ｕｖｖ ｎ蛋 Ｃ Ｘ ２选择 性 Ｏ 一
１３ 细 胞 系 ．
研 究所 。 １ ４实验 方法 ．
抑制剂 Ｎ 一９ Ｓ３ ８对人肝 癌细胞株 Ｈ ｐ ２有诱导 凋亡 作用 ， ｅＧ 其 机制可能通过抑制 Ｃ Ｘ２ 下调 ｃＡ 一 、 Ｉ Ｐ Ｓｒｉｉ Ｏ 一， ＩＰ １ Ｘ Ａ 、 ｕｖｖ ｎ的表
NS398逆转溶血磷脂酸拮抗顺铂抑制卵巢癌细胞增殖作用的研究
ＸＩ ｏＮＧ ｅ ｈｕ ｅ ｌ Ｘｕ — ａ。 ｔａ
（ ｅ ａｔｅｔｆＰｔｏｏｙ Ｃｌｇ Ｂ ｓ ｄｃ ｅ Ｃ ｏｇ ｉｇ ｄｃｌ ｎ ｅｓｙ Ｄ ｐ ｒ ｎ ａ ｌ ， ｏｌ ｅｏ ａｉＭｅｉｉ ， ｈｎｑｎ Ｍｅｉ ｉ ｒｉ ） ｍ ｏ ｈ ｇ ｅ ｆ ｃ ｎ ａＵ ｖ ｔ
ａ ｔｒｙｏ ｈ ｈｂｔ ｇｅｆｃ ｆ ｎｅｇ ｎｔｅｉ ｉｉ ｎ ｆ ｔｏ ｎ ｉ ｅ ＤＤＰｉ ｅｐｏｉ ｒｔ ｎｏ ＡＯ ｃ ｌ ，ａ ｄｄ ｃｅ ｓ ｈ ｒｐ ｒｉｎｏ ｅｌ ｉ ｅＧＪ ｈ ｓ ｆｈ ｅｌ ｔ ｒｌｅａｉ ｆ ｎｈ ｆ ｏ ３ ｅｌ ｎ ｅ ｒａｅ ｔｅｐｏ ｏｔ ｆ ｌ ｎｔ Ｇ１ ａ ｅｏ ｅｃ ｌ ｓ ｏ ｃ ｓ ｈ ｐ ｔ
ｏ ＤＰ ｉ ｅｐｏｉ ｒｔ ｎｏ ＡＯ ｃ ｌ ｅｅｍｅ ｓ ｒｄｂ ＂Ｃｅｌ ｙ ｌ ｆ ＡＯ ｗ ｒ ｎ ｌｓｄ ｂ ｏ ｙｏ ｔ （ ＣＭ） Ｔ ｅｅｆｃ ｏ ｆ Ｄ ｔ ｒｌｅａｉ ｆ ｎｈ ｆ ｏ ３ ｅｌ ｗ ｒ ａｕ ｅ ｙＭＴＩ ｓ ． ｌ ｃ ｃｅｏ ３ ｅｅａ ａｙ ｅ ｙｆ ｗ ｃ ｔｍｅｒ Ｆ ｌ ｙ ． ｈ ｆ ｔ ｆ ｅ
重庆医科大学学报 ２１ 第 ３ ０ ０年 ５卷 第 ２期 （ｏ ｒａ ｆ ｈ ｎ ｑｎ ｄｃ ｌ ｎｖ ｒｉ ０ ０ Ｖ １５Ｎ ． Ｊ ｕｎ ｌ ｏ ｇ ｉｇＭｅ ｉ ｉ ｓｔ ２ １ ． ｏ． ｏ２） ｏＣ ａＵ ｅ ｙ ３
一
２９ 一 ０
基础 研究 文章 号：５ ３ ６ ００ ２ ２ — 编 ０ ３ ６ （ １０— ０ ０ ２ — ２２ ） ０ ９ ４
Cox-2抑制剂NS-398对人胆管癌QBC939细胞增殖侵袭的影响
ｋｎ ， 学显微 镜 （ 岛 Ｈｓｎｅ 。 ｏ ）光 青 ｉ ｓ） ｅ
１２ 实验方 法 ．
５ Ｃ 饱 和湿度 恒 温培养 箱 中培 养 ， ３ 取 ％ Ｏ、 于 ６ｈ后 出小 室 ， 签擦 去膜 内表 面未 穿过 膜 的细胞 ， 棉 甲醛 固 定 ，．％结 晶紫溶 液染 色 ， 微镜 下观察 并拍 照 ， ０１ 显 随 机 于镜 下取 上 、 、 、 、 下 左 右 中心 ５个 视野 进行 细胞计 数， 并计 算 平均值 。 １３ 统计 学方法 ． 采 用 ＳＳ １． ＰＳ３ ０统计 软件 。计 量 资料 用 ±ｓ 示 ， 间 比较 用 ｔ 验 或单 因素 方 差 表 组 检
胞 悬 液接种 于侵袭 小 室上 室 ， 室加 入含 １％ 胎 牛 下 ０ 血清 的 Ｒ ＭＩ６０培养基 ６０ Ｌ Ｐ １４ ０ 。实 验组 上室加 入 Ｎ ・９ ， Ｓ３８ 终浓 度分别 为 ２ 、０ １０ １０ ２０￣ ｌＬ ５５ 、０ 、５ 、０ ｍｏ ， ／
对 照 组 加 入 含 １ ％ 胎 牛 血 清 的 Ｒ Ｍ １４ ，７ ｏ ０ Ｐ Ｉ６ ０ ３ Ｃ、
关键词 ： 环氧合酶－ ２抑制剂 ； 胆管肿瘤 ； 胆管癌 ；Ｎ －９ 细胞 Ｓ３ ８ 中图分类号 ： ７５ ８ １ ３ ． １ 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ：０ ２２６ ２ １ ） ４０ ３ －２ １０ －６ Ｘ（０ ２ １ － ５ｏ ０
近 年来 的研究表 明 ， 环氧合 酶 －（ ｏ－） ２ Ｃ ｘ 抑制 剂 ２ 具 有 抑 制 结 肠 癌 、 癌 、 癌 等 癌 细 胞 增 殖 的 作 胃 肝 用 。Ｎ ．９ 是 一 种 选 择 性 Ｃ ｘ 抑 制 剂 。 Ｓ３８ ｏ． ２ ２１ ０ １年 ８月 １日 ～１ １月 １日， 们将 Ｎ －９ 我 Ｓ３ ８作 用 于胆 管癌 Ｑ Ｃ ３ Ｂ ９９细 胞 ， 察其 对 该 细 胞体 外 增 殖 观 及 侵 袭 的影 响 ， 以期 为 Ｃ ｘ２抑制 剂 治 疗 胆管 癌 提 ｏ一 供 实验 依据 。
非类固醇类抗炎药NS398对肺癌H460细胞MT1-MMP表达的影响
癌细胞株 Ｈ ６ ， 测 其增 殖 能 力及 相关 的 Ｍ １一ＭＭＰ和 ４０ 检 Ｔ
ＭＭ ２的 表 达 ， 期 探 讨 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ一 以 Ｓ Ｉ Ｓ的 抗 肺 癌 作 用 及 其 可 能
机制。 １ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
修 回日期
基金项 目
甘 肃 省 自然 科 学 基金 项 目 （ 号 ：Ｚ ０ １ ２ 编 Ｓ Ｓ５ 一Ａ ５—０８ ８） 兰 州 大学 第 二 临床 医学 院 ， 肃 甘 兰州 ７０ ０ ３０ ０ 兰州 ７ ０ ５ ３ ００ 兰 州 军 区 兰州 总 医院 呼 吸 内科 ， 肃 甘 从 事 肺 癌 的 基 础 与 临床 研 究 。
ｕｓ ｄ ｔ ｅｅ ｔｔｅ ａ ｔｏ ｓ ｏ ３ ｎ ｔ ｃ ｉａｉ ｎ ｏ ＭＰ 一２ ｉ ６ ｃ ｌｓ Ｒｅ ｕ ｔ ｅ ｏ ｄ ｔｃ ｈ ｃ ｉｎ ｆＮＳ ９８ ｏ ｈｅ ａ ｔｖ ｔｏ ｆＭ ｎ Ｈ４ ０ ｅｌ ． ｓ ｌｓ：Ｔｒａｔ ｎ ｔ ３ ８ ｉ ｅ ｍｅ ｔｗｉｈ ＮＳ ９ ｎ
ｃｅ ｓ ｎ ｔ ｘ ｒ ｓ ｉｎ ｏ Ｍ Ｐ 一２ ｒ ｔｉ ｎ ｒ ａ ｅ ｉ ｈｅ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｆ Ｍ ｐ ｏ ｅｎ ｉ Ｈ４ ０ （ ｌｓ Ｃｏ ｌ ｓｏｎ： ＮＳ３ ８ ６ ： ｌ． ｅ ｎｃ ｕ ｉ ９ ｍｉｈｔｄ ｃ ｅ ｓ ｔｅ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｆ ｇ ｅ ｒ ａ ｅ ｈ ｘ ｒ ｓ ｉｎ ｏ
ＭＴｌ—ＭＭＰ ａ ｄ ＭＭＰ一２ ａ ｔ ａｉｎ ｉ ｕ ｇ ｃ ｒ ｉｏ ｅｌ ．ｗ ｉｈ ｃ ｎ ｌ ａ ｏ ｔ ｅ ｄ ｃｅ ｓ ｆｅ ｔａ ｅｌｌ ｎ ａｒ ｎ ｃ ｉ ｔ ｎ ｌｎ ａ ｃｎ ｍａ ｃ ｌ ｖ ｏ ｓ ｈ ｃ ａ ｅ ｄ ｔ ｈ ｅ ｒａ ｅ ｏ ｘ ｒ ｃ ｌ ａ ｎ ｔ ｘ ｕ ｉ
NS-398对宫颈癌HeLa细胞的生长抑制及诱导凋亡作用的研究
【 摘要】 目的 研究环氧合酶一２（ Ｏ Ｃ Ｘ一２ ）选择性抑制剂 Ｎ Ｓ一３８对宫颈癌细胞的作用及其 作用机制 ， ９ 探讨 ＮＳ一３８在宫颈癌治疗 中的可能性 。方法 ９ 细胞早期凋亡 。结果 用不 同浓度 Ｎ ３ ８作用于人 宫颈癌 Ｈｅ ａ Ｓ一 ９ Ｌ 细胞 ，Ｃ Ｋ一 Ｃ ８法检
Ｔｈ ｆｅｔ ｆ ｅｅｆｃｓｏ ＮＳ一３ ８ｏ ｈ ｒ ｌｅａｉｎｏ ｅ ａｃ ｌ ｓａ ｓｓｅ ｙＣｅＩ ｕ ｔ ｇＫｉ一８ （ ９ ｎ ｔｅｐ ｏｉ ｒｔｏ ｆＨ Ｌ ｅｌ ｗａ ｓｅ ｓｄ ｂ ｌＣｏ ｎ ｉ ｔ ｆ ｓ ｎ ＣＣＫ 一８ ）ｍｅｈ ｔ—
测Ｎ Ｓ一３８对 Ｈｅ ａ ９ Ｌ 细胞增殖的影 响 ；流式细胞仪 Ｐ 染色法检测细胞 周期改变 ；Ａ ｎｘ Ｖ— Ｃ Ｐ 双标法检 测 Ｉ ｎｅｉ ＨＴ ／ Ｉ ｎ
ＮＳ一 ９ ３ ８对人宫颈癌 Ｈｅ ａ Ｌ 细胞 的增殖具有 明显抑制作用 。其抑制率 随着药物浓度的增高 而增加 ，随着药物作用时间的延长而显著增高 。与对照组 比较 ，ＮＳ ３ ８处理组 Ｇ１ 一９ 期细胞明显减少，而 Ｓ 期细胞 明显增多，两组比较，差异有统计学意义 （ ＜Ｏ０） Ｐ ．５；ＮＳ ９ 作用 ２ 一３８ ４ ｈ后，在 １ ／ ０ｗｍｌ Ｌ组的 Ｈｅ ａ Ｌ 细胞凋亡率为 ５６ ；２ ｚ ｌＬ组凋亡率为 １． ９ ，而 ４ ￣ ｌＬ组 的凋亡率高达 ２． ３ ，对照组 Ｈｅ ａ ．０ Ｏ／ ／ ｍｏ ２ ８ Ｏ／ ／ ｍｏ ７ Ｏ Ｌ 细胞无凋亡 。结 论 ＮＳ一 ９ 对宫颈癌细胞具有明显 的抑 制作用 ，且 呈剂量 和时间依赖性 。其 对宫颈癌 细胞的作用 可能 与诱 导 ３８ 【 关键词】 宫颈癌 ；环氧化酶一２ ；ＮＳ一３ ８ ９ ；增殖 ；凋亡
NS-398逆转结肠癌细胞多药耐药作用研究
NS-398逆转结肠癌细胞多药耐药作用研究NS-398逆转结肠癌细胞多药耐药作用研究摘要：结肠癌是世界范围内引起死亡的主要癌症，多数患者在治疗中会出现耐药现象，而NS-398是一种选择性抑制COX-2的药物，也具有逆转多种细胞耐药的作用。
本研究旨在探讨NS-398对结肠癌细胞耐药的作用。
实验分为两部分：一部分为原发结肠癌细胞Caco-2和HCT-116系列，另一组为多药耐药结肠癌细胞Caco-2/ADR和HCT-116/5-FU。
使用MTT法检测不同浓度NS-398对细胞增殖的影响，并检测细胞凋亡率。
利用Western Blot检测药物耐受性的相关蛋白表达，以期验证NS-398的逆转多药耐药机制。
结果表明：NS-398可以抑制Caco-2和HCT-116系列细胞的增殖，增加细胞凋亡率。
同时，NS-398在一定程度上可逆转Caco-2/ADR和HCT-116/5-FU的多药耐药作用，减小耐药细胞的IC50值。
Western Blot结果显示，NS-398可以降低耐药细胞中P-gp和MRP1的表达，增加细胞内药物积聚，进一步阻碍肿瘤细胞的生长。
此外，NS-398在结肠癌细胞中还具有一定的芽殖酵母蛋白数量调节作用，可能与其逆转肿瘤细胞耐药有关。
综上所述，NS-398可作为一种新型多药耐药逆转剂，并可提高结肠癌患者的治疗前景。
关键词：NS-398；结肠癌；多药耐药；逆转剂结肠癌是常见的恶性肿瘤，其治疗常常依赖化疗。
然而，化疗常常面临多药耐药的问题，限制了治疗效果，因此探寻新的多药耐药逆转剂具有重要意义。
本研究中，我们发现NS-398可以抑制结肠癌细胞的增殖，并增加细胞凋亡率。
更为重要的是，NS-398可以逆转结肠癌细胞的多药耐药作用，降低耐药细胞的IC50值，同时还可以降低耐药细胞中P-gp和MRP1的表达，增加细胞内药物积聚。
这一发现为结肠癌的治疗提供了新的思路。
此外，NS-398在结肠癌细胞中还具有芽殖酵母蛋白数量调节作用。