卵巢肿瘤原位移植动物模型的建立
卵巢癌动物模型制备的研究进展
卵巢癌动物模型制备的研究进展李冬冬;王莉;钟洁;凌晨祁;梁延平【摘要】卵巢癌是导致女性癌症死亡的第五大原因,其中75%的卵巢癌患者检出时即为晚期.目前该病缺乏有效的早期筛查手段,同时临床治疗效果较差,已经成为严重威胁妇女健康的重大疾病.借助卵巢癌动物模型开展相关研究工作,是阐明其发病机制或者筛选有效的诊断、治疗措施的重要手段.目前,按照制备方法分类,该疾病模型主要分为有自发型、诱发型、移植型、基因干预型等四类造模方法.该模型所选择的动物主要有小鼠、大鼠、鸡、东方田鼠、长爪沙鼠等.本文结合近年来的文献报道,综述了卵巢癌动物模型制备方法,并介绍了各种方法制备的动物模型的评价标准及主要特点.%Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer-related death in women. 75% of ovarian cancer patients were detected at an advanced stage. At present,the disease lacks effective early screening method and the clinical therapy effect is poor,which has become a serious threat to women's health. The use of animal models of ovarian cancer is an important mean to elucidate the pathogenesis of the disease,and to screen effective diagnosis and treatment. The disease models are mainly divided into four types: spontaneous, induced, transplanted and gene intervention type. Mice, rats, hens,Mirotus Fortis and Mongolian gerbil are mainly selected to prepare animal models of ovarian cancer. Based on recent literature reports,we reviewed the preparation method of animal models of ovarian cancer and introduced the evaluation standards and main characteristics of these animal models.【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2018(026)002【总页数】6页(P259-264)【关键词】卵巢癌;动物模型;制备方法;研究进展【作者】李冬冬;王莉;钟洁;凌晨祁;梁延平【作者单位】上海市杨浦区市东医院妇科,上海 200438;上海市杨浦区市东医院妇科,上海 200438;上海市杨浦区市东医院妇科,上海 200438;上海市杨浦区市东医院妇科,上海 200438;上海市杨浦区市东医院妇科,上海 200438【正文语种】中文【中图分类】Q95-33卵巢癌是导致女性癌症死亡的第五大原因，5年生存率仅为44%，约75%的卵巢癌患者检出时即为晚期[1,2]。
整体可视化卵巢癌原位及转移动物模型的建立
理 学方 法验证 了可视 化模 型的可靠性 。结论
的 可 靠 有 效 的观 察 模 型 。
整 体可视 化 卵巢癌动物 原位及转 移模 型是研 究 卵巢癌发展及 转移
【 关键词 】 卵巢癌 ；动物模型 ， 整体可视化 图像
Ｅｓａｂｌｓ ｔ ｉｈｍ ｅ ｎｔｏｆｗｈｏｌ — ｂｏ ｖｓ ｌｚ ｉ ｎ ｏ ｌ Ｖ ｉ ｃ ｃ ｒ ｏｒ ｈｏ ｏ ｃ ｎ ｄ ｅ ａ ｔ ｉ ｏ ｅ ｎ ｅ ｄｙ ｉｕａｉａｔｏ ｍ ｄｅｓ ｏｆ ０ ａｒａｎ ａ ｅ ｔ ｔ ｐｉ ａ ｎ ｍ ｔ ｓａｔｃ ｍ ｄ ｌｉ ｎｕ ｄｅ
表 达 质 粒 ０ ８ ｇ Ｌｐｆ ｔ ｉｅ ２ ０ ０ｔ ， 温 孵 ． 和 ｉｏ ｃ ｍ ｎ ０ ０２ Ｌ 室 ｅａ ｘ
１ １ 材料 ．
人 卵巢 癌细 胞 株 Ｈ Ｏ一８ １ ９０为本研 究 所
自存 。Ｌｐｆ ｔ ｉ ０ ０试剂 和 Ｏ ｔ—ＭＥ 培养 基 ｉ ｅａ ｎ ｏ ｃ ｍ ２０ ｐｉ Ｍ 购 自 Ｉｖ ｒ ｅ ｎｉｏ ｎ生 物公 司 ； Ｅ Ｆ ｔｇ ｐ Ｇ Ｐ—Ｎ １由周军博 士 赠
卵巢 癌是 一种常见 的严重威胁人类 生命健康 的妇
送 ； ４ ８购 自Ｓｇ ａ公司 ；Ｐ Ｇ１ ｉ ｍ Ｓ Ｆ级 ３～ ４周龄及 ７～ ８只 裸 鼠购 自南 方医科 大学动 物实验 中心 ， 总研 究时 间为
２０ ０ ９年 ９月 至 ２ １ ０ ０年 ４月 。
１ ２ 方 法 ．
科恶性肿 瘤 ， 近年 来 虽然 手 术 、 化疗 等 技 术 的不 断 改 善， 但卵巢癌 的病 死率仍没 有得 到很好控 制 ， ５年生 存 率仍保 持在 ３ ％左 右… 。建立 一种 易于观 察 、 物学 ０ 生
Ｍｅ ｉａ ｉｅｓｔ ｄ ｃ ｌＵｎｖ ｒｉ ｙ，Ｇｕ ｎ ｚ ｏ ０ ５，Ｃ ｉ ａ ａ ｇ ｈ ｕ ５１ ５１ ｈｎ
人卵巢癌裸鼠移植实体瘤模型的建立
（ ．ｉｎｘ ｎｔｕｅｏ ａ ｏ ｒＨｙｉｎ ｎ ｃ ｕａｉｎ ｌＭｅ ｉ ｎ ， ａ ｃ ａｇ３ ０ ０ ， ｈｎ １Ｊ ｇｉＩｓｔｔ ｆ ｂ ｕ ｇｅ ｅａ ｄＯ ｃ ｐｔ ａ ｄｃ ｅ Ｎ ｎ ｈｎ ３ ０ ６ Ｃ ｉａ ａ ｉ Ｌ ｏ ｉ
２． ｉｎ ｘ ｔｒ ｌａ ｄ Ｃｈｌ ａｔ Ｎａ ｃ ａ ｇ ３ ０ ０６， ｉａ； Ｊａ ｇ ｉＭａｅｎａ ｎ ｉ Ｈｅ ｌｈ， ｎ ｈ ｎ ３ ０ ｄ Ｃｈｎ
【 要 】 目 的 建 立 人 卵 巢 癌 裸 鼠移 植 实 体瘤 模 型 。方 法 摘
将 １ 例人 卵 巢 癌 组 织 移 植 裸 鼠 ， 立 人 卵巢 癌 裸 建
鼠原 代 移 植 实 体瘤 模 型 的 基础 上 ， 再将 实体 瘤 皮 下 移 植 、 体瘤 原 位 移 植 、 体 瘤 细 胞 移 植 裸 鼠 。观 察 裸 鼠实 体 瘤 实 实 生 长 和 转 移情 况 ， 量 其 体 重 、 宫 卵 巢 重 、 重 及瘤 的 大 小 ， 作 病 理 、 镜 、 色 体 检 查 。结 果 成 功 地 建 立 人 称 子 瘤 并 电 染
３． ｄｃｌ ｃ ｏ ｌ ｆ ａ ｃ ａ ｇＵ ｉｅｓ ｙ Ｎ ｎ ｈｎ ３ ０ ６ Ｃ ｉａ Ｍｅ ｉ ｈ ｏ ｏ ｎ ｈ ｎ ｎｖｒｉ ， ａ ｃ ａｇ３ ０ ０ ， ｈｎ ） ａＳ Ｎ ｔ
【 ｂｔ ｃ】 Ｏ ｊｃｖ Ｔ ｓ ｂ ｓ ｈｍ ｎｏａｉ ａｃｒｒｎｐ ｎ ｄｓｂｕ ｎｏｓ ｕｅｍｃ ｏｅ．Ｔ ｓ ｂｓ Ａ ｓ ａｔ ｒ ｂｅｔｅ ｏｅａｌｈ ｕ ａ ｖｒ ｎｃｎｅ ａｓｌ ｔ ｕｃｔ ｅｕｌ ｎｄ ｉ ｍ ｄ１ ｏｅｔ ｌｈａ ｉ ｔ ｉ ａ ｔ ａｅ ａ ｙ ｅ ａｉ
维普资讯
２０ ０ ８年 ８月
中 国 比 较 医学 杂 志
人卵巢癌 HO-8910原位移植瘤动物模型建立及分期研究
人卵巢癌 HO-8910原位移植瘤动物模型建立及分期研究郭秀霞;唐德才;臧文华;刘敏;戴建国;张硕;尹刚【摘要】OBJECTIVE To establish an ovarian cancer xenograft model by fluorescence and study of the cancer staging. METHODS The human ovarian cancer HO-8910 cells were cultured for 10 generations in the cell culture dish,and the cells that could stably express fluorescence were selected and injected into nude mice.When the tumor grew to a mass volume of 1 mm3 ,it was implanted into the ovarian mucous membrane of nude mice through micro-surgery.The tumor growth and metas-tasis were observed by in vivo imaging technique,and the tumor tissue and surrounding tissues were observed through patholo-gy detection methods.RESULTS In vivo imaging technology successfully traced the development and metastasis of tumor. Pathological examination showed tumor cell metastasis trend.Both of them combining with TCM clinical ovarian cancer staging determined the ovarian cancerstaging.CONCLUSION The experiment successfully establishes ovarian cancer orthotopic transplantation model and represents the evolution of clinical oncology.The stages will provide some experimental basis for the study of tumor and the evaluation criterion of antitumor drug effect.%目的：建立 HO-8910卵巢癌荧光原位移植瘤模型,并进行分期研究。
人卵巢癌裸鼠移植瘤模型的建立及其生物学特性的实验应用研究
人卵巢癌裸鼠移植瘤模型的建立及其生物学特性的实验应用研
究
孙慧;战忠利
【期刊名称】《中国肿瘤临床》
【年(卷),期】1994(021)010
【摘要】研究用１例人卵巢癌淋巴转移的癌组织直接移植于裸鼠皮下，建成一株人卵巢癌移植瘤动物模型，已传至５经２６代。
移植成功率达１００％，平均裸带瘤存活中位数为１０２。
肿瘤倍增时间为７．１７天。
组织学和超微结构形态证实保持了原人肿瘤的特征，有淋巴结转移行为。
人类肿瘤染色体特征。
保留了分泌癌胚抗原的能力。
具有Ｐ５３癌基因蛋白的异常表达。
移植瘤细胞可在体外培养并传至５例。
流式细胞仪及显微光光度计检测移植瘤，提示肿
【总页数】6页(P786-791)
【作者】孙慧;战忠利
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R73－354
【相关文献】
1.人喉癌裸鼠移植瘤模型的建立及部分生物学特性研究 [J], 王太一
2.人胃粘液腺癌裸鼠移植瘤模型的建立及其生物学特性的研究 [J], 甘润良;胡萍玲
3.人绒毛膜癌JAR细胞裸鼠移植瘤模型的建立及其生物学特性的研究 [J], 崔莹;刘
镭;许倩;鲁艳杰;李玉红;范文静
4.人卵巢癌顺铂耐药细胞SCID小鼠腹腔移植模型的建立及其生物学特性的实验研究 [J], 张辉;左连富;王晓玲;王永军;贾金华;康山;赵群
5.2种人卵巢癌裸鼠移植瘤模型的生物学特性比较研究 [J], 蒲才秀;常淑芳;孙江川;刘红霞;朱轶;陈佳
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肿瘤动物模型的建立及应用
肿瘤动物模型的建立及应用肿瘤动物模型是一种在动物体内模拟人类肿瘤发展过程的实验模型，被广泛用于肿瘤的病理生理学、分子生物学、药理学等研究。
通过建立肿瘤动物模型，可以加深对肿瘤的发生、发展、转移和抑制机制的了解，同时也可以评估新药物及治疗策略的有效性。
下面将探讨肿瘤动物模型的建立及应用。
首先，肿瘤动物模型的建立是一个复杂而具有挑战性的过程。
一般来说，肿瘤动物模型的建立可以分为自发性肿瘤模型和人工诱导肿瘤模型两种类型。
自发性肿瘤模型主要是利用动物自身遗传倾向或环境诱导等因素，在动物体内自发产生肿瘤。
比如在家养动物中，很多小鼠和家兔由于遗传因素或者饮食、环境等长期暴露，会自发产生肿瘤。
这种模型更接近人类肿瘤的发展过程，但是其建立的可控性和可重现性较差，需要耗费大量的时间和经费。
人工诱导肿瘤模型则是通过外界的干预手段，比如化学药物、辐射等方式，直接在动物体内诱导肿瘤的产生。
这类模型具有较好的可控性和可重现性，可以更好地满足科研实验的需要。
常用的人工诱导肿瘤模型包括移植肿瘤模型、化学诱导模型、基因编辑模型等。
其次，肿瘤动物模型的应用范围非常广泛。
一方面，肿瘤动物模型可以用于研究肿瘤的发生机制和发展过程。
比如，利用肿瘤动物模型可以深入探究各种致癌物质或致癌基因对肿瘤发生的影响，分析肿瘤细胞的生物学特性和转移能力等。
通过模拟肿瘤的生长形态，可以更好地了解肿瘤细胞的生理活动和分子机制，为探寻肿瘤治疗策略提供理论依据。
另一方面，肿瘤动物模型还可以用于筛选和评估抗肿瘤药物。
通过向肿瘤动物模型中输入肿瘤细胞或移植肿瘤组织，可以评估新药物对肿瘤生长的抑制效果，了解药物的毒副作用、适应症等。
这种通过体内实验评估药物疗效和安全性的方法，大大提高了新药物研发的效率和成功率。
此外，肿瘤动物模型还被广泛用于研究肿瘤的诊断和预后指标、肿瘤免疫治疗、基因治疗等领域。
通过模拟肿瘤动物模型，可以更好地理解和验证这些新技术和新疗法在肿瘤治疗中的应用。
人卵巢癌裸鼠卵巢原位移植瘤模型的构建
人卵巢癌裸鼠卵巢原位移植瘤模型的构建詹光熙;彭书敏;美丽古丽·莫合买提;郭晓青【摘要】To build a suitable animal ovarian cancer model in vivo,so as to study the mechanism of its progression.Lentivirus transfection technology was used to build a green fluorescent protein (GFP) marked EOC cells model:SKOV3 (human ovarian serous carcinoma cell lines) and ES-2 (human ovarian clear cell carcinoma cell lines).After isoflurane anesthesia,4-6 week old BALB / C (nu / nu) nude female,back into the abdominal cavity from the median longitudinal incision.Micro multipoint injection method was used to transplant suspension cell model in one side ovary;Night OWL vivo imaging system was used to dynamically observe the growth and metastasis of xenografts in nude mice.Nude mice were dissected at 4-6 weeks after transplantation,the ovarian and metastatic tissues were stained with HE.Both SKOV3 and ES-2 GFP positive cell model was successfully constructed with ovarian orthotopic xenograft.nude mice did not lead to surgical death,the success rate of orthotopic transplanted tumor model in nude mice was 100％.The in vivo imaging system can dynamically monitor the growth of a transplanted tumor in nude mice by detecting the fluorescence intensity and range of GFP.SKOV3 cell model was built-in ovarian canceer and metastatic tissues,HE staining pathological features consistent with human ovarian serous adenocarcinoma;ES-2 cell model was built-in ovarian cancer and metastatic tissues,HE staining pathological features consistent with humanovarian clear cell carcinoma.it can be concluded that inhalation of isoflurane anesthesia,middle of the back vertical incision into the abdominal cavity,micro multipoint injection of GFP-carrying EOC cell model,can be successfully constructed dynamic observation of ovarian orthotopic transplantation tumor in nude mice animal models.This animal model is similar to the biological characteristics of human ovarian cancer and is suitable as an in vivo model to study the development of human ovarian cancer.%为探讨人卵巢癌进展机制的相关研究,构建适宜的体内动物模型.采用慢病毒转染技术,构建稳定过表达绿色荧光报告基因(GFP)的人EOC细胞模型:SKOV3(人卵巢浆液性腺癌细胞株)和ES-2(人卵巢透明细胞癌细胞株);异氟烷吸入麻醉4-6周龄BALB/C(nu/nu)雌性裸鼠,从裸鼠背部正中纵切口进入腹腔,显微多点注射法分别将细胞模型悬液,移植于裸鼠的单侧卵巢,每组6只裸鼠;NightOWL 活体成像系统动态观察裸鼠移植瘤生长和转移情况;移植术后4-6周解剖裸鼠,取卵巢和转移瘤组织行HE染色.结果显示,携带GFP的EOC细胞模型SKOV3和ES-2,均可成功构建裸鼠卵巢原位移植瘤模型,裸鼠未发生手术原因死亡,成功率均100％;活体成像系统通过检测GFP的荧光强度和范围,能够动态监测裸鼠移植瘤生长情况;SKOV3细胞模型构建的卵巢癌和转移瘤组织,HE染色观察病理特征符合人卵巢浆液性腺癌;ES-2细胞模型构建的卵巢癌和转移瘤组织,HE染色观察病理特征符合人卵巢透明细胞癌.由此可知,异氟烷吸人麻醉、从背部正中纵切口进入腹腔、显微多点注射法移植携带GFP的EOC细胞模型,能成功构建可动态监测的裸鼠卵巢原位移植瘤动物模型;该动物模型与人卵巢癌生物学特征类似,适宜作为研究人卵巢癌演变进展的体内模型.【期刊名称】《石河子大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2017(035)005【总页数】6页(P574-579)【关键词】卵巢癌;裸鼠;卵巢原位移植瘤模型;显微多点注射法【作者】詹光熙;彭书敏;美丽古丽·莫合买提;郭晓青【作者单位】石河子大学医学院,新疆石河子,832003;石河子大学医学院,新疆石河子,832003;石河子大学医学院,新疆石河子,832003;同济大学附属第一妇婴保健院,上海200040【正文语种】中文【中图分类】R711.75卵巢癌是致死率最高的妇科恶性肿瘤 [1]，早期往往缺乏典型临床症状，且没有灵敏的标志物和筛选手段，约超过70%的病人在被确诊时已是疾病晚期，其5年生存率不到30%，极易发生侵袭、转移等生物学特性是导致其预后差、死亡率高的主要因素之一[2]。
人卵巢癌高转移细胞株裸鼠原位移植瘤模型的建立的开题报告
人卵巢癌高转移细胞株裸鼠原位移植瘤模型的建立
的开题报告
一、研究背景和目的
人卵巢癌是一种恶性肿瘤，常常由于早期症状不明显而被忽视。
虽
然在诊断和治疗方面取得了显著进展，但该疾病的患者预后仍然不够理想。
目前，研究人卵巢癌的治疗策略和药物疗效的方法之一是通过动物
模型进行预测和评价。
然而，缺乏可重复、可控和准确反映临床特征的
动物模型是目前研究面临的主要问题之一。
因此，本研究旨在建立一种高转移人卵巢癌细胞株的裸鼠原位移植
瘤模型，该模型可以模拟人卵巢癌的生物学特性，为研究人卵巢癌的预
后和治疗提供有力的实验手段。
二、研究内容和基本思路
1. 选择高转移人卵巢癌细胞株进行实验。
在细胞学染色体分析、细
胞表面标记物、酶联免疫吸附检测（ELISA）等多个方面，对这些细胞进行生物学特性的检测和分析。
2. 通过细胞培养和体内实验验证细胞对移植模型的适应性和易感性。
从体内反应结果来判断细胞的生长率和对免疫缺陷裸鼠是否有侵袭性等。
3. 总结并建立高转移人卵巢癌细胞株的裸鼠原位移植瘤模型，并对
其生物学特性进行评估。
4. 进一步采取多种手段，如测定生长曲线、切片、组织化学染色、
免疫组化等，研究裸鼠移植瘤中的生化、生物学特性和肿瘤微环境等，
对人卵巢癌的发病机制和治疗方法做出贡献。
三、研究意义
该研究将建立一个高转移人卵巢癌细胞株的裸鼠原位移植瘤模型，这个模型能够反映人卵巢癌的生物学特性，并为卵巢癌治疗提供一个优秀的实验平台。
该模型可以评估肿瘤微环境中的生化和生物学特性，深入研究人卵巢癌的发病机制和治疗方法。
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卵巢肿瘤原位移植动物模型的建立刘艺杰;段刚;段萍;卢晓声;梅洁;华莹;吕杰强【摘要】目的:建立能够模拟临床肿瘤发展过程的卵巢癌动物模型.方法:将处于对数生长期的人卵巢癌细胞株SKOV3 (2× 106个/只)、A2780多水平细胞数(2×106个/只、5×106个/只、1×107个/只、1.5×107个/只和2×107个/只)裸鼠皮下注射,A2780(1.5×107个/只)腹腔注射.取SKOV3第3代连续传代皮下瘤组织进行裸鼠右侧卵巢包膜下移植.结果:卵巢癌细胞株SKOV3皮下注射、组织块原位移植成瘤率均100％.原位移植卵巢癌裸鼠6～8周时剖腹探查见局部形成较大包块,与周围组织发生粘连,腹腔暗红色血性积液伴脏器广泛性转移,淋巴结转移.卵巢癌A2780细胞株多水平细胞数皮下注射均未成瘤;腹腔注射8周时剖腹探查见腹腔内生成2～3 mL无色澄清腹水,双侧卵巢增大,脾脏明显增大,未能发现任何腹腔瘤块.结论:成功建立了临床转移模式的SKOV3卵巢癌肿瘤细胞原位移植动物模型；卵巢癌A2780细胞接种未能成瘤,可能是因其对宿主体内非特异性免疫反应较敏感.%Objective:To establish an animal model with ovarian carcinoma to simulate the clinical tumor development. Methods: Human ovarian carcinoma cell lines SKOV3 and multi-level A2780 in exponential phase of growth were inoculated subcutaneously in nude mice,A2780 cells were also inoculated intraperitoneally. The third generation of SK0V3 subcutaneous tumor was transplantated below the capsule of the right ovary. Results:Subcutaneous inoculations of human ovarian carcinoma SKOV3 cells and orthotopic transplantations of SKOV3 subcutaneous tumor both succeeded in all mice. Six to eight weeks after orthotopic transplantations,tumors invasion into surrounding tissues wereobserved,as well as dull red effusion with peritoneal metastasis and lymph node metastasis. The subcutaneous inoculation of multi-level cell linesA2780 all failed in tumor formation. Eight weeks after A2780 cells were injected in intraperitoneal cavity,2-3 mL colorless ascites appeared,o-varian and spleen grew obviously,but tumor was not detected. Conclusions: The SKOV3 orthotopically transplantated animal model was successfully established. The inoculation of A2780 cell lines failed in tumor formation,possibly due to their sensitivities to non-specific immunity in the host.【期刊名称】《国际妇产科学杂志》【年(卷),期】2012(039)004【总页数】4页(P373-375,封3)【关键词】卵巢肿瘤;癌;模型,动物;原位移植;淋巴转移【作者】刘艺杰;段刚;段萍;卢晓声;梅洁;华莹;吕杰强【作者单位】325000 温州医学院附属第二医院妇科;南方医科大学南方医院影像中心;325000 温州医学院附属第二医院妇科;325000 温州医学院附属第二医院妇科;325000 温州医学院附属第二医院妇科;325000 温州医学院附属第二医院妇科;325000 温州医学院附属第二医院妇科【正文语种】中文卵巢癌为女性生殖系统三大恶性肿瘤之一，起病隐匿，但缺少能早期发现的敏感而特异的诊断方法；转移复发率高，且在治疗过程中易对化疗药物产生耐药性，死亡率极高，已跃居妇科恶性肿瘤的首位［1］。
建立能够模拟临床肿瘤发生发展过程的动物模型是研究肿瘤的有力手段，将本实验所进行的卵巢癌动物模型的建立及其建立过程中发现的相关问题报道如下。
1.1 材料卵巢癌细胞株SKOV3、A2780（南方医科大学肖云彬博士、陈如大硕士惠赠）；RPMI 1640培养基、高糖型DMEM培养基（吉诺生物制剂）；胎牛血清（杭州四季青）；健康、无特定病原体（specific pathogen-free，SPF）级、雌性裸小鼠，3～4 周龄，体质量 15～20 g；6～8 周龄，体质量 20～25 g，购自南方医科大学实验动物中心。
1.2 方法1.2.1 SKOV3、A2780卵巢癌细胞准备卵巢癌细胞株，5%CO2、37℃饱和湿度下，SKOV3、A2780分别培养于 10%FBS-RPMI 1640、高糖型DMEM培养基中，待无污染、生长状态良好的细胞处于对数生长期时将其消化、离心收集、计数后重悬于无血清培养基，配置成细胞浓度为1×107个/mL的单细胞悬液，置于冰上待用。
1.2.2 卵巢癌细胞皮下瘤的形成选3～4周龄雌性裸鼠18只随机分为两组，A组（n=3）：颈部皮下注射SKOV3细胞悬液（2×106个/只），B 组（n=15）再随机分为 5 组（n=3）后多水平细胞数（2×106/只、5×106/只、1×107/只、1.5×107/只、2×107/只）颈部皮下注射A2780细胞悬液，送回SPF级环境下饲养，观察裸鼠皮下瘤生长情况。
为提高肿瘤细胞在裸小鼠体内的适应生存能力，待A组SKOV3细胞皮下注射成瘤后，将瘤组织连续皮下传代3次。
1.2.3 卵巢癌A2780细胞株腹腔种植选3～4周龄雌性裸鼠 3 只，卵巢癌细胞株A2780（1.5×107个/只）腹腔注射，送回SPF级环境下饲养，密切观察小鼠生长状态，接种8周时剖腹探查。
1.2.4 卵巢癌原位移植转移动物模型的建立用1%戊巴比妥钠20 mg/kg对A组第三代荷瘤小鼠进行腹腔注射麻醉，麻醉成功后取出皮下瘤组织，用含100 IU/mL 青、链霉素双抗的生理盐水冲洗瘤组织块，放入清洁无菌容器内切成1～2 mm3大小的组织块，将容器置于冰上待用。
取6～8周龄雌性裸鼠4只，麻醉成功后固定，常规消毒铺巾，取右侧上腹部（肋弓下0.8 cm始腋前线延长线上）纵切口1 cm（切口选择不宜太靠近头侧，因易导致大血管损伤，引起裸鼠休克死亡），打开腹腔，推开肠管，在肾脏下方见一灰白色不规则组织为鼠类卵巢。
用显微剪在卵巢体部剪一小切口，用9/0手术缝线将备好的癌组织块穿线法（手术缝线从癌组织块边缘穿过）包埋、固定于卵巢内，用4/0的可吸收肠线逐层关腹。
酒精消毒缝合皮肤，送回SPF级环境下饲养，密切观察裸鼠的一般生长情况。
2.1 成瘤和转移情况卵巢癌细胞SKOV3皮下注射、组织块原位移植成瘤率均100%，荷瘤鼠脾脏增大；原位移植卵巢癌裸鼠6～8周时出现恶病质体征，身体消瘦，皮肤苍白，腹部膨隆，剖腹探查见局部形成较大包块（图1，见封三），与周围组织粘连，腹腔暗红色血性积液伴腹腔脏器广泛性转移，淋巴结转移（图2，见封三）。
卵巢癌A2780细胞株多水平细胞数（2×106个/只、5×106个/只、1×107个/只、1.5×107个/只、2×107个/只）皮下注射均未能成瘤；细胞腹腔注射后裸鼠生长状态良好，8周时剖腹探查，见腹腔内生成2～3 mL无色澄清腹水，双侧卵巢增大（组织病理切片未发现癌灶，可能为水肿所致），脾脏明显增大，未能发现任何腹腔瘤块（图3，见封三）。
2.2 组织病理学检查待SKOV3瘤组织块原位移植荷瘤鼠出现恶病质时（6～8周），颈关节脱臼处死动物，剖腹探查，观察肿瘤生长、转移情况，取肿瘤、转移淋巴结及可疑肿瘤细胞侵犯脏器组织用福尔马林固定、常规石蜡包埋，切片HE染色，显微镜下观察，可见患侧卵巢内充满移植瘤病灶，瘤内大量液化坏死，癌细胞体积大、胞浆丰富、核大深染，异型性明显，与皮下肿瘤组织形态一致；淋巴结转移灶内可见除淋巴细胞外的大量肿瘤细胞侵犯（图4，见封三）。
应用裸小鼠开展人类肿瘤研究已有40余年的历史，迄今已对许多肿瘤的基础研究有了很大的进展，但对妇科病死率极高的卵巢癌病因和分子过程还了解甚少。
动物模型的建立为探讨肿瘤发病原因、早期诊断、淋巴转移机制、探讨新的干预手段提供了一个良好的平台。
1977年Davy等［2］成功地在裸鼠皮下接种人卵巢癌组织建立了皮下移植瘤模型。
皮下移植瘤模型的主要生物学特点是反映瘤细胞的增殖特性，表现为瘤细胞数量增多和瘤体积增大，自发性转移甚少。
理想的动物肿瘤模型应在发生部位、组织学类型、病因、发病机制及生物学行为等方面尽量模拟所需研究的人类肿瘤。
1993年，Fu等［3］用新鲜的卵巢癌手术标本移植至裸鼠卵巢表面建立了第1个卵巢癌裸鼠原位移植模型。
但由于原位移植动物模型的建立操作复杂、不易观察，皮下、腹腔移植仍为目前常用的两种卵巢肿瘤模型的建立方式。
近年来，国内一些学者也对卵巢癌原位移植模型的建立进行了相关报道，但大多对鼠类卵巢的解剖结构及其寻找方法缺乏详细而细致的描述，以至于对卵巢癌原位移植模型的建立理解抽象，不易于原位移植模型的大力推广。
本实验在进行卵巢癌动物模型建立时，对雌性裸鼠生殖系统进行了细致而深入的了解，分别进行了皮下、腹腔、原位移植3种卵巢癌动物模型的建立，并试图发现一些临床相关问题，以期为人类治疗卵巢肿瘤提供更加有益的思路和借鉴，从而为癌症的治疗提供一条新的治疗靶点和途径。