睾丸组织中的TSP50启动子甲基化差异的研究

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小鼠睾丸发育过程睾丸特异基因表达与不育的研究的开题报告

小鼠睾丸发育过程睾丸特异基因表达与不育的研究
的开题报告
一、研究背景
睾丸是雄性哺乳动物生殖系统中的重要器官，其发育过程涉及到许多分子和基因的调控。

与此同时，男性不育也是一种常见的生殖问题，其中睾丸功能异常是造成不育的主要原因之一。

因此，对睾丸发育与基因表达的研究对于揭示不育的病理机制以及开发治疗不育症的方法具有重要意义。

二、研究目的
本研究旨在探究小鼠睾丸发育过程中的睾丸特异基因表达，并结合睾丸发育不良小鼠模型，探究某些基因在小鼠睾丸发育过程中的作用及其与不育之间的关系。

三、研究内容及方法
1. 收集小鼠睾丸发育相关的文献资料，了解小鼠睾丸发育的过程及其特异基因表达情况。

2. 构建小鼠睾丸发育不良模型，观察其睾丸发育情况，并进行组织学分析。

3. 采用PCR、Western blot等方法检测睾丸特异基因的表达情况，探究其在小鼠睾丸发育过程中的作用。

4. 利用生物信息学技术对筛选出的特异基因进行功能注释和基因网络分析，探究其与不育之间的关系。

四、预期成果
1. 在小鼠睾丸发育过程中筛选出一批关键的睾丸特异基因。

2. 探究这些特异基因在小鼠睾丸发育过程中的作用及其与不育之间的关系。

3. 提供一些有价值的基础数据和理论基础，为不育的病理机制研究和治疗方法的开发提供一些参考依据。

PRP基因在睾丸中的表达及其生物学功能初步研究的开题报告

PRP基因在睾丸中的表达及其生物学功能初步研究
的开题报告
研究背景和意义：
PRP基因（Proline-Rich Protein）属于一类具有高丰度、丰富的脯氨酸序列的基因，其在生物体中广泛分布，包括哺乳动物、鸟类、爬行动物等种类中都有表达。

PRP基因的主要功能是参与细胞凋亡、胶原纤维的合成以及组织修复等生物学过程，目前研究还发现其在生殖系统发育和成熟中也具有重要作用。

在睾丸中，PRP基因的表达模式和功能尚未被完全阐明，因此本研究将从睾丸中的PRP基因表达入手，初步探究其生物学功能。

研究内容及方法：
本研究将通过PCR扩增和Western Blot检测等方法，检测睾丸中PRP基因的表达情况，并对PRP基因进行亚细胞定位扫描。

同时，将采用荧光原位杂交技术（FISH），对PRP基因在睾丸中的表达位置进行初步定位。

最后，将利用RNAi技术对PRP基因进行干扰，观察PRP基因的敲除对睾丸生物学功能的影响。

研究意义：
PRP基因作为一类重要的细胞因子，其在生物学过程中具有多种作用。

本研究选取睾丸作为研究对象，旨在初步探究PRP基因在生殖系统中的表达和生物学功能，为深入了解PRP基因的作用机制提供一定的参考依据，并为新型生殖调控策略的开发提供理论依据。

老年人睾丸间质细胞结构及StAR和P450scc蛋白表达的变化

ＢＡＩＧｕａｇｙ，ＸＩＺｈｎｇｃｅｇｎ－ｉＮｏ－ｈｎ
（ｎｒｌｙＣｎｒＰｋｎｎｖｒｉｉｔｏｐａ，ｅｉｇ１０３Ｃｉ）Ａｄｏｇｅｔ，ｅｉｇＵｉｅｔＦｒｓｉｌＢｉｎ００４，ｈｎｏｅｓｙｓＨｔｊａ
Ｐ５ｓｃ白表达水平的下降等病理变化均与老年人迟发性性腺功能减退症症状和血清总睾酮水平变化密切相４０ｃ蛋
关，其确切机制有待深入研究。［关键词］衰老；性腺功能减退症；固醇侧链裂解酶；固醇合成快速调节蛋白；胆类睾丸问质细胞［中图分类号］Ｒ８５８［文献标志码］Ａ［文章编号］１７ — ７２１）４００－４６１１Ｘ（０１０－５５０６
・
老年人睾丸问质细胞结构及ＳＡｔＲ和Ｐ５ｓｃ４０ｃ蛋白表达的变化
李维仁，勃萱，韩刘涛，李广永，周峰，巩艳青，高菇珠，万寿，崔白光一，辛钟成
（北京大学第一医院男科中心，北京１０３）００４
ｄｉ１．９９ｊｉｎ１７ —６Ｘ．０１０．０ｏ：０３６／．ｓ．６１１７２１．４０５ｓ
ＣｈｎｇｓｉｏｐｌｇｎｄｓｅｏｄｇｎｉｕｔｏｏｇｄｍａｙｉｅｌａｅｎｍｒｈｏｏｙａｔｒｉｏｅｃｆｎｃｉｎｆａｅｈｕｎＬｅｄｇｃｌｓ
血清总睾酮水平显著低于青年组（．２± ．８３１０５
Ｌｖ．．９±１１ｇＬＰ＜．５。ＨＥ染色显示，６２ｓ．７ｗ／，００）老年人睾丸呈

白血病细胞中雄激素受体启动子CpG岛甲基化的实验研究的开题报告

白血病细胞中雄激素受体启动子CpG岛甲基化的实验研究的开题报告一、研究背景及意义白血病（Leukemia）指的是一种造血组织恶性肿瘤，是由骨髓或淋巴组织中的异常白细胞（白血病细胞）突然增生并在血液系统中广泛分布而引发的。

近年来，白血病的发病率呈逐年增长的趋势，其治疗方案也在不断更新和完善。

研究白血病的病理生理机制以及相关的信号通路、分子靶点等，具有重要的临床意义。

雄激素受体（Androgen receptor，AR）是一种核受体，属于类固醇受体家族。

AR在正常细胞中主要参与雄激素的生物学作用，与细胞周期、生长、分化等过程密切相关。

近年来，研究发现，在某些恶性肿瘤细胞中，如前列腺癌、乳腺癌等，AR在促进肿瘤生长、转移、抵抗治疗等方面发挥着关键作用。

虽然目前对于AR在白血病中的功能还相对较少研究，但研究人员已经发现，某些类型的白血病细胞中也存在AR，且与肿瘤的发生、发展等方面有关。

启动子（Promoter）是基因调控的关键区域之一，其甲基化状态可以影响基因的转录过程。

目前已经确认，AR启动子区域有多个甲基化的CpG岛，这些岛上的甲基化水平可以影响AR基因的表达水平。

而在白血病细胞中，CpG岛甲基化在基因的表达及调控中也发挥着重要的作用，比如某些肿瘤抑制基因（Tumor suppressor genes）的CpG岛甲基化，往往会导致基因的失活或抑制。

因此，本研究旨在探究白血病细胞中AR启动子区域的CpG岛甲基化状态与细胞转录水平之间的关系，探讨AR在白血病中的调控作用，为开发新的白血病治疗方案提供依据。

二、研究方法1. 白血病细胞系的构建：选择一种合适的白血病细胞系进行研究，建立体外细胞培养模型。

2. CpG岛甲基化状态的检测：采用甲基化特异性PCR（Methylation-specific PCR，MSP）等方法，对AR启动子区域的CpG岛进行甲基化水平的定量检测。

3. AR mRNA水平的检测：采用实时定量PCR（Real-time quantitative PCR，qPCR）等方法，检测AR mRNA的表达水平。

睾丸组织中ACRBP的表达及启动子CpG位点的甲基化分析

可能与该基因表达的机制有关。
ＡＲＰ蛋白呈区域性的阳性反应，ＣＢ可能与生精小管内精子发生的不同步性有关；ＣＢＡＲＰ启动子ＣＧ位点低甲基化ｐ关键词：肿瘤一睾丸抗原；睾丸；ｐＣＧ位点；甲基化
中图分类号：７７３Ｒ３．１文献标志码：Ａ文章编号：０２２６（０１４－２－３１０ —６Ｘ２１）７０１００
ｎｎｆｐｒｔｇｎｕａｄｓｅｍａｏｙｅｂｉｇｏｅｍａｏｏｉｍｎｐｒｔｃｔｙＡＣＲｏｙｌｎｌｎｉｏｙｈｅｆ４ＣＧｓｔｓｗｅｅｍｅｈｌｔｄｄｒｇｔｅｓＢＰｐｌｃｏａｔｂｄ．Ｔｒｅｏｐｉｒｔｙａｅｕｉｈａ２ｅｎ
摘要：目的定基础。方法
了解人睾丸组织中ＡＲＰ的表达及其启动子ＣＧ位点的甲基化状态，ＣＢｐ为探讨该基因表达机制奠运用免疫组化法研究睾丸组织中目的蛋白定位；合生物信息学分析该基因启动子ＣＧ位点序结ｐ
列；通过ＢｓｌｔＰＲ测序法（Ｓ）ｉｆｅＣｕｉＢＰ分析目的基因ＣＧ位点的甲基化状态。结果ｐ
ＤＡｆｇｅｔＮａｍｎ（一１７十１０ｂ）ｏＣＢｅｅａｌｅ，ｎｅｍｔｙｔｎｆｑｅｃａ１６％．ｏｃｕｉｎＡｒ２一ｐｆＲＰｇｎｍｐｉｄａｄｔｅｈｌｉｅｕｎｅｓ．７１ＡｉｆｈａｏｒｗＣｎｌｓ－ｏ
．
ｍａｅｔａｅｅｔｄｂｍｍｕｏｉｔｃｅｌｓａｎｎｔｏｙｌｎｌａｔｏｙ；ｔｅｐｏｉｌｐｏｔｒｏＲＢｓｎｔｓｓｗｄｔｃｅｙｉｉｓｎｈｓｈｍｉａｔｉｉｇｗｉｐｌｃｏａｎｉｄ０ｈｂｈｒｘｍａｒｍｏｅｆＡＣＰｗａｂｏｏｍａｉａｌａａｙｅｏｏｔｉｔｓｑｅｃ；ｔｅｍｅｈｌｔｎｏｐｓｔａｎｌｚｄｂｉｕｆｅｓｑｅｃｎＣｉｆｒｔｌｎｌｚｄｔｂａｎｉｅｕｎｅｈｔｙａｉｆＣＧｉｗｓａａｙｅｙｂｓｌｔｅｕｎｉｇＰＲｃｙｓｏｅｉ

欧洲雏鸡性别鉴定技术取得重大突破

和邱峰教授牢领的研究团队，揭爪了高致病性ＰＲＲＳＶ术发现一种方法，可以鉴定产４天内的鸡蛋内胚胎的
ＰＲＲＳＶ抗免疫反应提供了新认识。（ＨＰ — ＰＲＲＳＶ）抑制抗原递呈作川新机制，为深入理解性别。据科技新闻网站ＥｕｒｅｋＡ１ｅｒｃ报道，这种厅法町以通过鸡蛋液体巾性别闪素的差异，来Ｉ）（＝分雄性胎和雌
☆２０１７年第３期
ＵｐｄａｔｅｏｆｔｈｅＩｎｄｕｓｔｒｙ行业动态
上海兽医研究所揭示ＰＲＲＳＶ抗宿主免疫反应新机制
近口，巾农业科学院上海兽研究所的马志永教授
欧洲雏鸡性别鉴定技术取得重大突破近日，欧洲的一个科学家团队借助分光法的成像技
流感疫情蔓延导致｝｝．现 “ 鸡蛋荒 ”现象．政府决定批准进
巾，该基因缺失ｊ一个碱基，导致基冈序列移码和所编码的口蛋加＿ｒ品。为此，安全处修订了《畜产品允ｆ，ｌ：进口国家地区）及进口ｌ生条件》部分条款。根据修订案，美同蛋白失活，从延迟开花，产生长童期性状。将来自 “ 中黄（２４ ” 的ＧｍＥＩＦ３ｌ太ｌ即Ｊ基因，转入 “ 华夏３号” ，能实现功和泰国的蛋加工品将获批进口，批准期将俄至农林畜产食个月内。外围产蛋加＿Ｔ品将能互补，使 “ 华夏３号”开花提早，从而进一步证明ＧｍＥ［Ｆ３品部宣布禽流感疫情结束后的３突变导致长童期性状的产生。Ｊ基因克隆对发展低纬度地经过枪疫检验等通关程序后，１月内在韩国上市。｛大豆生产、提高植物蛋白保障能力具有重大意义。

TSP50在肺腺癌中的表达及意义

广东医学2019年7月第40卷第14期Guangdong Medical Journal Jul.2019,Vol.40,No.14・2083・TSP50在肺腺癌中的表达及意义胡幸-邓星辉2,何凯宁"'江门市五邑中医院病理科（广东江门529000）:$江门市中心医院病理科（广东江门529000）【摘要】目的探讨睾丸特异性蛋白酶50（testes-specific protease50,TSP50）在肺腺癌组织中的表达及其临床意义。

方法应用免疫组织化学方法检测TSP50蛋白在72例肺腺癌及癌旁组织标本中的表达情况，分析其与各临床病理特征的关系。

结果TSP50在肺腺癌组织中阳性表达率为73.6%,显著高于癌旁组织（P<0.01）；TSP50蛋白表达与肿瘤的淋巴结转移状态、临床分期存在明显相关性（P=0.009,P=0.022）,而与肺腺癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、吸烟史、组织学类型无明显相关性（P>0.05）。

结论TSP50在肺腺癌中高表达，与肺腺淋巴结转移及临床分期显著正相关，有望成为新的肺腺癌的治疗靶点。

【关键词】肺腺癌；TSP50；免疫组化；预后【中图分类号】R734.2；R361\2【文献标志码】ADOI：10.13820/ki.gdyx.20190259肺癌是全球范围内发病率最高的恶性肿瘤，在我国其发病率和病死率均位于各种肿瘤的首位⑴。

肺癌约85%是非小细胞性肺癌，其中肺腺癌是最常见的组织学类型。

尽管近年来关于肺腺癌的手术治疗、药物靶向治疗及放疗均取得了长足的进步，但肺腺癌患者的总体生存率仍处于较低的水平⑵。

探索新的肺腺癌恶性行为相关分子靶点及其内在机制，可望为随后的靶向治疗提供理论支持。

睾丸特异性蛋白酶50（testes-specific protease50,TSP50）,是一种新发现的癌/睾丸抗原（cancer/testis antigen, CTA）,CTA是一类仅在正常睾丸生殖细胞中及多种肿瘤中异常表达的抗原，在肿瘤早期诊断及靶向治疗方面有着巨大的潜力［3_4］o TSP50己发现在乳腺癌、胃癌等多种肿瘤中高表达，并参与这些肿瘤的恶性进展，与多种肿瘤的临床病理特征及预后存在着密切关系［3>5-61o目前关于TSP50在肺腺癌的表达及临床意义的研究较少,英文文献仅有2篇分别报道了TSP50在非小细胞性肺癌恶性生物学行为中的作用及临床意义,而中文文献尚未见TSP50表达与肺癌关系的研究。

睾丸癌的基因表达谱研究

睾丸癌的基因表达谱研究概述：睾丸癌是男性最常见的实体肿瘤之一，但其发病机制尚未完全明确。

研究睾丸癌的基因表达谱可以揭示其发展机制，并为治疗提供新的靶向方法。

本文将探讨目前对于睾丸癌基因表达谱的研究进展。

一、综述现有的基因表达谱技术1.1 RNA-Seq技术RNA-Seq技术是当前最为先进和广泛应用的测定基因表达水平的方法之一。

该技术能够直接检测并定量在转录组中存在的各个转录本，从而揭示不同实例之间存在的差异。

在睾丸癌研究中，RNA-Seq已经被广泛应用于确定异常表达的关键基因和途径。

1.2 芯片技术芯片技术通过测量芯片上固定引物与待检样品中特定序列间杂交信号强度来分析基因表达情况。

这种高通量分析方式能同时检测数万个基因，也可以为针对睾丸癌相关信号通路进行更详尽的研究提供便利。

二、睾丸癌的基因表达谱研究进展2.1 高级别染色体异常与睾丸癌发展通过基因表达谱分析，已经发现一些高级别染色体异常在睾丸癌发展中起到关键作用。

例如，X染色体增强型区域（X-STR）与非精原细胞肿瘤发生相关。

此外，还有许多其他染色体缺陷（如Y染色体长臂缺失、局灶性创伤等），它们与睾丸癌的易感性紧密相关。

2.2 关键基因和途径的变异近年来，通过RNA-Seq技术鉴定了一系列在睾丸癌中具有异常表达的关键基因和途径。

例如，C-KIT基因突变广泛存在于实质性精原细胞肿瘤中，并被认为是该肿瘤中靶向治疗的最佳标志物之一。

此外，表达模式改变的其他基因包括AFP、HCG和PLAP等。

2.3 NF-κB信号通路及其作用机制NF-κB信号通路在多种恶性肿瘤中扮演重要角色，并且在睾丸癌中也显示出异常激活的趋势。

该通路参与了细胞增殖、凋亡和炎症等多个过程，因此其异常调节可能对睾丸癌的发生和发展起到重要作用。

2.4 其他通过基因表达谱分析识别的关键途径除了上述NF-κB信号通路外，还有其他一些关键途径是通过基因表达谱识别出来的。

例如，雄激素信号通路在精原细胞肿瘤中的异常激活被认为是促进睾丸癌发展的重要机制之一。

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中国免疫学杂志２１年第２０１７卷
ｄｉ１．６／．ｓ．００４４２１．９０８ｏ：０３９ｊｉｎ１０—８Ｘ．１０．９ｓ００
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生殖免疫学・
睾丸组织中的ＴＰ０启动子甲基化差异的研究① Ｓ５
茅淑砚杨明② 蒲春雪吕静静
［关键词］ＴＰ０肿瘤睾丸抗原；Ｓ５；甲基化
ＤｉｅｅｃｎＴＳ０ｐｏｏｅｅｈｌｔｏｔｔｓ０ｅｔＳｔｓｕｆｒｎｅｉＰ５ｒｍｔｒｍｔｙａｉｎｓａｕｆｔｓｉｉｓｅ
ＭＯＳｕＶｎ，ＡＧＭ，ＵＣｕ— ｕ，Ｕ如曙豫曙，Ａｕ—ｅ．ｈｅａｏｔｙｏａｏｉｏｙＭｉ— Ａｈ —ａＹＮ讯ｇＰｈｎＸｅＬ一ＷＮＧＹｅＺＴｅｙＬｂｒｏＫａｒｆＰｔｂｌ，ｎｈｏｇ
ｃｔｈＧｅｉｎｏｈｍｍｏｅｆＴＳ５ｆｈｍａａｄｍｏｓｙＰＣＲ．ｅｔｏｈｒｓｓ，ｕｙａｄｌｋｔｅｉｔｖｃｏ，ｎｈｎｔａｓａｅｔｅＣｐｒｇｏｆｔｅｐｔｒｏＰ０ｏｕｎｕｅｂｎＥｌｅｒｐｏｅｉｐｎｆｎｉｈｍｎｏＴｅｔｒａｄｔｅｒｎ — ｎ
ｇｎａｄｔｅｓｅｔｂａｔｂｔｓａｗｒｌｖｌｉｅｓｅｏｉｓａｐｍｍｏｌｓｓｕｔｌｅｅｎｔｐｍｍｔｃｔｓＣｎｌｓｏＴｅｍｅｙａｉｅｅｆｔｅｍｔｙａｉｎｓｅｏｅｐｏｎｈｉａｏｅｈｏｙｅ．ｏｃｕｉｎ：ｈｔｌｔｎｌｖｌｏｅｈｌｔｉｆｈｒ — ｈｏｈｏｔｔ
ｄｃｅｔＤ５ｅｓｏｍｌｃห้องสมุดไป่ตู้，ｘｃａｄ呻ｕｅｔｍｉｏＨａｃｌｐｆａｅａｔｎｈｎｌｔａｉｅｉ
ｔｌｍｄｄｔｓｕｎｅｈｐｇｎｏｔｒｍｔＳ５．ｅｕｓＴｅｈｐａｉａｑｅｃｅＧｒｉｆｈｐｏｏｒｆＰ０Ｒｓｌ：ｈｅｓｓｎｏｅｔＣｅｏｅｅｏＴｔ
原细胞、精母细胞和精子，分别提取人的睾丸组织、ｔａＮｅ－ｒ２细胞、鼠精原细胞、细胞和精子的基因组ＤＡ，精母Ｎ用重亚硫酸盐处
理基因组ＤＡ，ＣＮＰＲ扩增人和鼠的ＴＰ０的启动子ｃＧ岛区域，ＳＳｐ电泳，提纯，连接于质粒中，转导入细胞中，扩增，提取，纯化质粒，测序。结果：人睾丸组织甲基化水平较低，ｔａ２Ｎｅ一细胞处于较高水平。鼠的精原细胞和精子细胞甲基化水平较高，ｒ精母细胞甲基化水平较低。结论：Ｓ５ＴＰ０启动子区域甲基化位点的甲基化水平调控ＴＰ０白的表达。Ｓ５蛋
ｍｅｈｌｔｎｌｖｌｉｌｗｉｅｈｍａｓｉｂｔｔａｈｇｅｖｌｎｔｅＮｅａ２ｃｌ．ｕｅｔｅｍｅｈｌｔｎｌｖｌｓｉｈｉｅｓｔｔ — ｔｙａｉｅｅｓｏｔｕｎｔｔｕｉｈｒｌｅｔｒ－ｅｓＡｓｔｍｏｓ，ｔｙａｏｅｇｔｐｍａｏｏｎｈｅｓａｅｉｈｌｏｈｉｅｉｈｎｈｅ
ｎｓＭｅｈｄ：ｏｉｌｅａｄｐｒｙｔｅｓｅｍａｏｏｉｓｓｅｍａｏｙｅｎｐｒｔｚａｏｍｏｓｓｓａｄｅｔｃｔｅｇｎｍｅＤＮｆｕｎｉｍ．ｔｏｓＴｓａｎｕｉｐｒｔｇｎａ，ｐｒｔｃｔｓａｄｓｅｍａｏｆｕｅｔｔ，ｘｒｔｈｅｏＡｏｍａｏｔｆｈｏｅｉｎａｈｔｓｓｔｓｅＮｅａ２ｃｌｎｐｒｔｇｎａｓｅｍａｏｙｅｓｅｍａｏｏｆｕｅｒｓｅｔｅｙＧｎｍｅＤＮａｅｔｄｗｔｉｌｔ，ｎｌ — ｅｔｉｕ，ｔｒ－ｅｌａｄｓｅｍａｏｏｉ，ｐｒｔｃｔ，ｐｒｔａｏｓｅｐｃｉｌ．ｅｏＡｗｓｔａｉｂｓｆｅｍｐｉｉｓｓｚｍｏｖｒｅｈｕｉｉｆ
ｉｒｏｄｃｔｎＪｉＵｉｒｔＣａｇｈｎ１０２，ｈｎｓｙｆＥｕａｉ，ｉｎｎｅｉｈｎｃｕ３０１Ｃｉｔｏｌｖｓｙ，ａ
ｌｂｔａｔＯｊｃｖ：ｏｄｔｔｈｅｙｔｎｓｔｆｈｒｏｒｆＳ５ｉｅｎｔｓｅａｄｅｐｒｉｘｒｓｏｅｈ— ｓｃ］ｂｅｔｅＴｅｃｔｍｔｌｉｔｕｏｅｏｔＰ０ｉｄｒｔｉｕｓｎｘｌｅｔｅｐｅｓｎｍｅａＡｒｉｅｅｈａｏａｓｔｐｍｅｏＴｎｆｅｓｏｓｉ
Ｒ３．７０２
王悦增
Ａ
（吉林大学病理生物学教育部重点实验室，长春１０２）３０１
文章编号１０．４２１）９０９－４００４Ｘ（０１０．７６０８
中国图书分类号
文献标识码
［摘
要］目的：检测不同组织中ＴＰ０Ｓ５启动子区域的甲基化状态，研究其表达的机制。方法：分离、纯化鼠睾丸中的精