试验一糖类的颜色反应

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生物化学实验

生物化学实验

⽣物化学实验实验⼀1、糖类的颜⾊反应1. α-萘酚反应糖在浓⽆机酸(硫酸或盐酸)作⽤下,脱⽔⽣成糠醛及糠醛衍⽣物,后者能与α-萘酚⽣成紫红⾊物质。

注意:因糠醛及糠醛衍⽣物对此反应均呈阳性,不是糖类的特异反应。

2. 间苯⼆酚反应在酸作⽤下,酮糖脱⽔⽣成羟甲基糠醛,后者再与间苯⼆酚作⽤⽣成红⾊物质。

此反应是酮糖的特异反应。

因为醛糖在同样条件下呈⾊反应缓慢,只有在糖浓度较⾼或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。

2、还原作⽤许多糖类由于其分⼦中含有⾃由的或潜在的醛基或酮基,因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等⾦属离⼦还原,同时糖类本⾝被氧化成糖酸及其他产物。

糖类这种性质常被利⽤于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。

本实验所⽤的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。

它们都是Cu2+的碱性溶液,能使还原糖氧化⽽本⾝被还原成红⾊(颗粒⼤)或黄⾊(颗粒⼩)的Cu2O沉淀。

实验⼆脂肪碘值的测定碘值(价)是指100g脂肪在⼀定条件下吸收碘的克数。

碘值是鉴别脂肪的⼀个重要常数,可⽤以判断脂肪所含脂肪酸的不饱和程度。

脂肪中常含有不饱和脂肪酸,不饱和脂肪酸具有⼀个或多个双键,能与卤素起加成作⽤⽽吸收卤素。

常⽤碘与脂肪中不饱和脂肪酸的双键起加成作⽤。

脂肪的不饱和程度越⾼,所含的不饱和脂肪酸越多,与其双键起加成作⽤的碘量就越多,碘值就越⾼。

故可⽤碘值表⽰脂肪的不饱和度。

I2+-CH=CH--CHI-CHI-本实验⽤溴化碘(Hanus试剂)代替碘。

⽤⼀定量(必须过量)溴化碘和待测的脂肪作⽤后,⽤硫代硫酸钠滴定的⽅法测定溴化碘的剩余量,然后计算出待测脂肪吸收的碘量,求得脂肪的碘值。

加成作⽤:IBr+-CH=CH--CHI-CHBr-剩余溴化碘中碘的释放:IBr + KI KBr + I2再⽤硫代硫酸钠滴定释放出来的碘:I2 +2Na2S2O3 2Na2S4O6+2NaI思考题:何谓空⽩溶液和空⽩实验?空⽩实验有何意义?在各种分析⽅法中,为消除⼲扰,⽤与测定试样时完全⼀致的条件进⾏测定的溶液。

生物化学实验

生物化学实验

生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一:糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的掌握莫氏(molisch)实验鉴定糖的原理和方法。

二、原理糖经浓无机酸(浓硫酸、浓盐酸)脱水产生糠醛或糠醛衍生物,后者在浓无机酸作用下,能与α-萘酚生成紫红色缩合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环,因此又称“紫环反应”,其反应如下图:利用这一性质可以鉴定糖。

三、实验器材1、棉花或滤纸。

2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。

3、试管1.5*15cm(*4)。

四、实验试剂1、莫氏试剂:称取α-萘酚5g,溶于95%乙醇并稀释至100ml。

此试剂需新鲜配置,并贮于棕色试剂瓶中。

2、1%蔗糖溶液:称取蔗糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml。

3、1%葡萄糖溶液:称取葡萄糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液:讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物,然后缓缓倾入沸蒸馏水中,边加边搅。

最后以沸蒸馏水稀释至100ml。

五、操作于4支试管中,分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素(棉花或滤纸浸在1ml水中)。

然后各加莫氏试剂2滴1,摇匀,讲试管倾斜,沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇!)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层,观察液面交界处有无紫色环出现。

六、注意事项1、试管中加入各种糖后,应做好标记,浓硫酸加入的方式应保持一致。

2、莫氏反应非常灵敏,所用的试剂应洗净,不可再样品中混入纸屑等杂物。

3、当糖浓度过高时,由于浓硫酸对他的焦化作用,将呈现红色及褐色而不呈现紫色,需稀释后再做。

思考题:1、解释α-苯酚反应的原理。

2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些?试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏(Seliwanoff)实验鉴定酮糖的原理和方法。

二、原理酮糖在浓酸的作用下,脱水生产5-羟甲基糠醛,后者与间苯二酚作用,呈红色反应,有时亦同时产生棕色沉淀,此沉淀溶于乙醇,呈鲜红色沉淀2,以果糖为例,其反应如下:三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。

生物化学实验

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生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一:糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的掌握莫氏(molisch)实验鉴定糖的原理和方法。

二、原理糖经浓无机酸(浓硫酸、浓盐酸)脱水产生糠醛或糠醛衍生物,后者在浓无机酸作用下,能与α-萘酚生成紫红色缩合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环,因此又称“紫环反应”,其反应如下图:利用这一性质可以鉴定糖。

三、实验器材1、棉花或滤纸。

2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。

3、试管1.5*15cm(*4)。

四、实验试剂1、莫氏试剂:称取α-萘酚5g,溶于95%乙醇并稀释至100ml。

此试剂需新鲜配置,并贮于棕色试剂瓶中。

2、1%蔗糖溶液:称取蔗糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml。

3、1%葡萄糖溶液:称取葡萄糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液:讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物,然后缓缓倾入沸蒸馏水中,边加边搅。

最后以沸蒸馏水稀释至100ml。

五、操作于4支试管中,分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素(棉花或滤纸浸在1ml水中)。

然后各加莫氏试剂2滴1,摇匀,讲试管倾斜,沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇!)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层,观察液面交界处有无紫色环出现。

六、注意事项1、试管中加入各种糖后,应做好标记,浓硫酸加入的方式应保持一致。

2、莫氏反应非常灵敏,所用的试剂应洗净,不可再样品中混入纸屑等杂物。

3、当糖浓度过高时,由于浓硫酸对他的焦化作用,将呈现红色及褐色而不呈现紫色,需稀释后再做。

思考题:1、解释α-苯酚反应的原理。

2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些?试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏(Seliwanoff)实验鉴定酮糖的原理和方法。

二、原理酮糖在浓酸的作用下,脱水生产5-羟甲基糠醛,后者与间苯二酚作用,呈红色反应,有时亦同时产生棕色沉淀,此沉淀溶于乙醇,呈鲜红色沉淀2,以果糖为例,其反应如下:三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。

实验一糖类的颜色反应

实验一糖类的颜色反应

第十六章实验技术实验一糖类的颜色反应一、实验目的1•了解糖类某些颜色反应的原理。

2 •学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。

二、实验原理1. a-萘酚反应(Molisch反应)原理糖在浓无机酸(硫酸、盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与a萘酚生成紫红色物质。

因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。

濒醛(咲哺醛)糖醛衍生物如轻甲基糠醛2•间苯二酚反应(Seliwanof反应)原理在酸作用下,酮糖脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。

此反应是酮糖的特异反应。

醛糖在同样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。

在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。

三、器材1•试管及试管架2•滴管3•水浴锅四、试剂1•莫氏(Molisch )试剂:5% a萘酚的酒精溶液,称取a-萘酚5g,溶于95%酒精中,并用此酒精使总体积达100mL,贮于棕色瓶内。

此试剂需新鲜配制。

2•塞氏(Seliwanof )试剂:称取间苯二酚0.05g溶于30 mL浓盐酸中,再用蒸馏水稀释至100 mL,此试剂需新鲜配制。

3.1%葡萄糖溶液:称取葡萄糖1g,溶于100mL蒸馏水中。

4.1%果糖溶液:称取果糖1g,溶于100mL蒸馏水中。

5.1%蔗糖溶液:称取蔗糖1g,溶于100mL蒸馏水中。

6.1%淀粉溶液:称取可溶性淀粉1g与少量冷蒸馏水混合成薄浆状物,然后缓缓倾入沸蒸馏水中,边加边搅,最后以沸蒸馏水稀释至100mL。

7.0.1%糠醛溶液:称取糠醛0.1g,溶于100mL蒸馏水中。

8•浓硫酸500mL五、操作1. 獄酚反应(Molisch反应)取5支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各1.5mL。

再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂,充分混合。

斜执试管,沿管壁慢慢加入浓硫酸约1mL ,慢慢立起试管,切勿摇动。

1糖的呈色反应和还原糖的检验(讲稿)

1糖的呈色反应和还原糖的检验(讲稿)

糖的呈色反应和还原糖的检验(讲稿)本次实验目的是了解鉴定糖和还原糖的原理以及方法,并通过实验操作予以验证。

2人一组,前1-18组1个实验室。

二、实验原理。

糖的鉴定:糖经浓无机酸处理,脱水产生糠醛或糠醛衍生物。

戊糖形成糠醛,己糖则形成羟甲基糠醛。

这些糠醛和糖醛衍生物在浓无机酸作用下,能与酚类化合物缩合生成有色物质。

与一元酚如α-萘酚作用,形成三芳香环甲基有色物质。

与多元酚如间苯二酚作用,则形成氧杂蒽有色物质。

通常使用的无机酸为硫酸。

如用盐酸,则必须加热。

常用的酚类为α-萘酚、甲基苯二酚、间苯二酚和间苯三酚等,有时也用芳香胺、胆酸、某些吲哚衍生物和一些嘧啶类化合物等。

还原糖和非还原糖的鉴别:含有自由醛基(-CHO)或酮基(>C=O)的单糖和二糖为还原糖。

在碱性溶液中,还原糖能将金属离子(铜、铋、汞、银等)还原,糖本身被氧化成酸类化合物,此性质常用于检验糖的还原性,并且常成为测定还原糖含量的各种方法的依据。

三、实验内容本次实验一共采用了6种糖液作为测试糖液,2%葡萄糖,果糖,麦芽糖,蔗糖,1%淀粉溶液和1种未知糖液,每种糖液均有专门的移液管移取(贴有标签,有些实验可能只需加几滴,可以在移液管头部套上胶头滴加),不要弄混,所有试剂都有相应的移液管移取(大概4个组公用1套),用后请放回原位,方便别的同学使用。

实验包括2个部分,共7个实验。

(一)糖的呈色反应1.Molish反应(α-萘酚反应)本实验是鉴定糖类最常用的颜色反应。

糖在浓酸作用下形成的糠醛及其衍生物与α-萘酚作用,形成红紫色复合物。

在糖溶液与浓硫酸两液面间出现紫环,因此又称紫环反应。

自由存在和结合存在的糖均呈阳性反应。

此外,各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸、丙酮、甲酸、乳酸等皆呈颜色近似的阳性反应。

因此,阴性反应证明没有糖类物质的存在;而阳性反应,则说明有糖存在的可能性,需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有糖的存在。

步骤:取6支已标号的试管,分别加入各种测试糖液lmL(约15滴),再各加入Molish 试剂2滴,摇匀。

糖的颜色反应原理及应用

糖的颜色反应原理及应用

糖的颜色反应原理及应用1.糖的颜色反应原理糖是一种常见的有机物质,它们在化学反应中会呈现出不同的颜色。

糖的颜色反应主要基于糖的还原性和一些特定反应剂之间的反应。

下面将介绍几种常见的糖的颜色反应原理。

1.1 邮票试剂法邮票试剂法是一种常见的检测糖的方法,基于邮票试剂和糖之间的还原反应。

邮票试剂中的某些金属离子(如铜离子)在和糖反应后会被还原并生成沉淀物,这种沉淀物具有特定的颜色。

1.2 麦氏试剂法麦氏试剂法也是一种常见的糖的检测方法,基于麦氏试剂(以氢氧化钠为主要成分)和糖之间的反应。

在麦氏试剂的存在下,某些糖类(如蔗糖)会产生特定的反应,颜色会呈现出深棕色。

1.3 色素法色素法是一种利用糖与一些特定的色素之间的反应来检测糖的方法。

不同类型的糖与不同的色素反应后会产生不同的颜色,从而可以进行糖的检测。

2.糖的颜色反应应用糖的颜色反应有着广泛的应用,主要体现在以下几个方面。

2.1 食品工业在食品工业中,糖的颜色反应被广泛应用于食品的检测和质量控制。

通过检测糖中的还原性物质和特定反应剂发生反应后所形成的颜色,可以判断食品中糖的含量和品质。

2.2 医药工业在医药工业中,糖的颜色反应常被用于药物中糖含量的测定。

通过测定药物中的糖含量,可以判断药物的纯度和质量,并对药物进行质量控制。

2.3 生物学研究糖的颜色反应在生物学研究中也有着重要的应用。

研究人员可以利用糖的颜色反应来检测细胞中的糖含量和代谢情况,从而更好地了解细胞的生理状态和代谢途径。

2.4 环境保护糖的颜色反应在环境保护方面也有着一定的应用。

例如,可以利用糖的颜色反应来监测水体中的糖污染情况,判断水质的净化效果和环境的污染程度。

2.5 科学教育糖的颜色反应也广泛应用于科学教育中。

通过演示糖的颜色反应原理和实际操作,可以激发学生对化学和生物学的兴趣,提高他们的实验技能和科学素养。

3.总结糖的颜色反应是一种简单而有效的方法,可用于糖的检测和分析。

它的原理基于糖的还原性和一些特定反应剂之间的反应。

生物化学实验

生物化学实验

生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一:糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的精品文档,你值得期待掌握莫氏(molisch)实验鉴定糖的原理和方法。

二、原理糖经浓无机酸(浓硫酸、浓盐酸)脱水产生糠醛或糠醛衍生物,后者在浓无机酸作用下,能与α-萘酚生成紫红色缩合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环,因此又称“紫环反应”,其反应如下图:利用这一性质可以鉴定糖。

三、实验器材1、棉花或滤纸。

2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。

3、试管1.5*15cm(*4)。

四、实验试剂1、莫氏试剂:称取α-萘酚5g,溶于95%乙醇并稀释至100ml。

此试剂需新鲜配置,并贮于棕色试剂瓶中。

2、1%蔗糖溶液:称取蔗糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml。

3、1%葡萄糖溶液:称取葡萄糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液:讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物,然后缓缓倾入沸蒸馏水中,边加边搅。

最后以沸蒸馏水稀释至100ml。

五、操作于4支试管中,分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素(棉花或滤纸浸在1ml水中)。

然后各加莫氏试剂2滴1,摇匀,讲试管倾斜,沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇!)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层,观察液面交界处有无紫色环出现。

六、注意事项1、试管中加入各种糖后,应做好标记,浓硫酸加入的方式应保持一致。

2、莫氏反应非常灵敏,所用的试剂应洗净,不可再样品中混入纸屑等杂物。

3、当糖浓度过高时,由于浓硫酸对他的焦化作用,将呈现红色及褐色而不呈现紫色,需稀释后再做。

思考题:1、解释α-苯酚反应的原理。

2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些?试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏(Seliwanoff)实验鉴定酮糖的原理和方法。

二、原理酮糖在浓酸的作用下,脱水生产5-羟甲基糠醛,后者与间苯二酚作用,呈红色反应,有时亦同时产生棕色沉淀,此沉淀溶于乙醇,呈鲜红色沉淀2,以果糖为例,其反应如下:三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。

糖类测定实验报告

糖类测定实验报告

一、实验目的1. 掌握糖类检测的基本原理和方法。

2. 学习使用化学试剂对糖类进行定量和定性分析。

3. 了解糖类在生物体中的重要性及检测方法在生物学研究中的应用。

二、实验原理糖类是一类生物大分子,广泛存在于自然界中,是生物体的重要营养物质。

本实验采用化学试剂法对糖类进行检测,主要利用糖类与特定试剂发生颜色变化的原理。

1. 斐林试剂法:还原糖在斐林试剂的作用下,加热后生成砖红色沉淀,根据沉淀的量可以定量分析还原糖的含量。

2. 苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂法:脂肪在苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂的作用下,呈现红色或橙色,可以定性检测脂肪的存在。

3. 双缩脲试剂法:蛋白质与双缩脲试剂反应,产生紫色复合物,可以定性检测蛋白质的存在。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:待测生物组织样品、斐林试剂、苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂、双缩脲试剂、蒸馏水、移液器、试管、酒精灯、烧杯、显微镜等。

2. 实验仪器:分析天平、恒温水浴锅、显微镜、电子天平等。

四、实验步骤1. 糖类检测(1)取待测生物组织样品,研磨成匀浆。

(2)取2 mL匀浆于试管中,加入2 mL斐林试剂,混合均匀。

(3)将试管放入50-65℃的恒温水浴锅中加热2分钟。

(4)观察试管中溶液的颜色变化,记录结果。

2. 脂肪检测(1)取待测生物组织样品,研磨成匀浆。

(2)取2 mL匀浆于试管中,加入3滴苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂,混合均匀。

(3)观察试管中溶液的颜色变化,记录结果。

3. 蛋白质检测(1)取待测生物组织样品,研磨成匀浆。

(2)取2 mL匀浆于试管中,加入1 mL双缩脲试剂A液,摇匀。

(3)加入4滴双缩脲试剂B液,摇匀。

(4)观察试管中溶液的颜色变化,记录结果。

五、实验结果与分析1. 糖类检测实验结果显示,待测生物组织样品在斐林试剂的作用下,溶液呈现砖红色沉淀,说明其中含有还原糖。

2. 脂肪检测实验结果显示,待测生物组织样品在苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂的作用下,溶液呈现红色,说明其中含有脂肪。

3. 蛋白质检测实验结果显示,待测生物组织样品在双缩脲试剂的作用下,溶液呈现紫色,说明其中含有蛋白质。

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实验一糖类的颜色反应
一、实验目的
了解糖类某些颜色反应的原理;学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。

二、实验原理
(一)α-萘酚反应(Molisch反应)原理
糖在浓无机酸(硫酸、盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与α-萘酚生成紫红色物质。

因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。

(二)间苯二酚反应(Seliwanoff反应)原理
在酸作用下,酮糖脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。

此反应是酮糖的特异反应。

醛糖在同样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。

在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。

三、实验器材
1.仪器:试管及试管架、滴管、水浴锅。

2.材料:蔗糖。

3.试剂:5% α-萘酚的酒精溶液、95%酒精、α-萘酚5g、间苯二酚0.05g、30 mL浓盐酸、1%葡萄糖溶液、
4.1%果糖溶液、
5.1%蔗糖溶液、
6.1%淀粉溶液、
7.0.1%糠醛溶液、100mL 蒸馏水、浓硫酸500mL。

四、实验步骤
(一)α-萘酚反应(Molisch反应)
取5支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各1.5mL。

再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂,充分混合。

斜执试管,沿管壁慢慢加入浓硫酸约1mL,慢慢立起试管,切勿摇动。

浓硫酸在试液下形成两层。

在二液分界处有紫红色环出现。

观察、记录各管颜色。

α-萘酚反应
(二)间苯二酚反应(Seliwanoff反应)
取3支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各5mL。

再向各管分别加入塞氏试剂2mL,混匀。

将3支试管同时放入沸水浴中,注意观察、记录各管颜色的变化及变化时间。

五、注意事项
1.添加浓硫酸时斜执试管,沿管壁慢慢加入,慢慢立起试管,切勿摇动。

2.沸水浴注意时间,不要煮的太久。

3.添加试剂操作规范,减少误差。

六、思考题
1.可用何种颜色反应鉴别酮糖的存在?
2.α-萘酚反应的原理是什么?。

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