重金属Cu、Zn和Pb对白蛤酯酶同工酶活性的影响

供 证据 支持 ．
３ 讨 论
王兰 研究 了镉 对河 蟹组 织酯 酶 同工 酶 的影 响 ， 结果 表 明 ， 镉对 蟹 体组 织 器 官酯 酶 同工 酶 的影 响不 但 有组 织差 异性 ， 且 与 积累量 有 很大关 系 ． 贾 秀英 等 实验 结果 显示 亦 如此 ， 且不 同组 织 间表 现 了酶 活性 的变化 和 酶带 数 的变化 ． 本 研 究针 对 白蛤 肌 肉组 织测 定酯 酶 同工酶 活性 ， 主要 体现 在 酶带 数量 和 酶 活性
Ｕ／ ｍＬ
Ｚ ｎ处 理组 的 总酯 酶活 性 明显 高 于对 照组 ， 表 现 为促 进 作用 ． 在一 定 浓度 范 围 内 ， 随着 ｚ ｎ浓 度 增大 ， 白蛤 总酯 酶 活性 相应 增 强 ， 在Ｚ ｎ浓度 为 ０ ． ７ ５ ｍｇ ／ Ｌ时 ， 总酯 酶 活性 达 到最 大 ； 在Ｚ ｎ浓 度 为 １ ． ０ ０ ｍｇ ／ Ｌ时 ，
总 酯 酶活性 有 所下 降 ， 但 仍 高于 对照 组 ， 与 图 ２的结果 相对 应．
Ｐ ｂ处 理组 的 总酯 酶活 性 与 Ｚ ｎ处理 组 的变 化 趋势 基本 保 持一 致 ， 在Ｐ ｂ浓 度 为 ０ ． ７ ５ ｍｇ ／ Ｌ时 ， 总酯 酶
活 性 达到 最 大 ； 在 Ｐ ｂ浓 度 为 １ ． ０ ０ ｍｇ ／ Ｌ时 ， 总酯 酶 活性 有 所 下降 ， 表 现 为对 白蛤 总酯 酶 活性 有 抑 制作 用 ． 在 Ｐ ｂ浓度 为 １ ． Ｏ Ｏ ｍ ｇ ／ Ｌ时 ， 图 ３中有些 酶 带 染 色深 ， 有些 几 乎看 不 清 ， 这 可 能 为测 得 的 总酯 酶 活性 低 提
１ 材 料 与方 法
１ ． １材料
实 验 用 白蛤 采 购 于漳 州 市北 桥市 场 ， 单 个 白蛤 体 重约 为 １ ２ ． ２ ４ ￣ １ ． １ ８ ｇ ， 用磷 酸缓 冲 溶液 （ ｐ Ｈ ７ ． ２ ） 冲洗
收稿 Ｅ ｔ 期： ２ ０ １ ５ — ０ ６ — ０ ２ 作者简介 ： 刘 兵钦 （ １ ９ ７ ５ 一 ） ， 男， 工程师 ． Ｅ － ｍ ａ ｉ ｈ ｌ ｉ ｕ ｂ ｉ ｎ ｇ ｑ ｉ ｎ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｍ 基金项 目： 福 建省 教育厅 Ａ类项 目（ Ｊ Ａ１ １ １ ６ ８ ） ； 闽南师 范大学博士科研启动项 目
宁德师范学院学报（ 自然科学版 ）
２ ０ １ ５年 ８月
生 成 ． 在Ｃ ｕ浓度 为 １ ． ０ ０ ｍ ｇ ／ Ｌ时 ， 总酯 酶活 性 比对照 低 ， 表现 为抑 制作 用 ， 可能 是高 浓度 Ｃ ｕ产 生毒 性作
用， 破 坏酯 酶合 成和 蛋 白质结 构［ ２ ２ １ ．
表 １ 不 同浓 度 重 金 属 作 用 下 白蛤 总 酯 酶 活 性
色深 浅各 异 ， 以上 结论 与本 研究 一致 ． 本实 验 的谱 图也显 示处 理组 酶 带数 量较 对 照组 多一条 （ 酶带 ５ ） ， 但
未 表 现 出不 同 重金 属 处 理 间 的差异 ． 从 着 色 的深 浅变 化 ， 反 映 出不 同重 金属 间 的差异 ， 酶带 ６即为很 好

第 ３期
刘兵钦等 ： 重金属 ｃ ｕ 、 ｚ ｎ和 Ｐ ｂ 对 白蛤酯酶 同工酶活性的影响
・ ２ ５ １ ．
和Ｐ ｂ 理组 随胁 迫 时间 的延长 而缓 慢 降低 ， 在 高 浓度 Ｃ ｄ 和Ｐ ｂ ２ ＋ 处理组 则短 时间 内出现 大幅度 降低 ， 均
与 本研 究结 果 一致 ．
耐受力 比Ｃ ｕ 强． 关键词 ：酯酶同工酶 ； 酶活性 ； 铜、 锌、 铅； 白蛤 中图分类号 ： Ｘ ５ ０ ３ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： ２ ０ ９ ５ ． ２ ４ ８ １ （ ２ ０ １ ５） ０ ３ — ０ ２ ４ ７ ． ０ ５
重 金属 污染 遍 布 于 土壤 、 水 体 和空 气 【 ， 对 生 态环 境 的平衡 以及人 类 的健 康 造成 了严 重 影 响 ， 且重 金属 已被 世 界各 国列为 重要 的污染 物 之一 ， 重 金 属污 染研 究 已成 为一 个世 界 性 的课题 ． 近年 来 国 内外对 水体 重 金属 污染 的研究 较 为重 视 ， 研 究 介质 涉及 海 洋［ ５ ］ 、 河流、 湖 泊 及其底 质 和地 下水 ［ ６ － ９ ］ ． 乔永 民［ １ ０ ， １ １ 等研 究 了柘 林 湾 和汕 头 湾沉 积物 的重金 属 含 量 ， 发现 水 体 呈现 被 Ｃ ｕ 、 Ｚ ｎ和 Ｐ ｂ不 同程 度 的 污染 ． 潮 间带 动物 体 内重 金 属含 量 分 析表 明 ， 潮 间带 动 物受 到 重金 属 Ｃ ｕ 、 Ｚ ｎ和 Ｐ ｂ污 染［ １ ２ ￣ １ ３ ］ 重金 属 污染 对 生物 个 体 、 生 物 群 落 和生 态 系统 产 生影 响． 目前 关 于 重 金属 污 染 对植 物 和 土壤 生 物 的影 响研 究 报 道较 多［ 】 ６ １ ， 而重 金属 对底 栖 动物 的影 响报道 较 少． 本 文从酯 酶 同工 酶 的角 度研 究重金 属 Ｃ ｕ ， Ｚ ｎ和 Ｐ ｂ对 白蛤 的影 响． 白蛤 （ Ｍａ ｏ ｃ ｔ ｒ ａ Ｖ ｅ ｎ ｅ ｒ ｉ ｆ ｏ ｒ ｍｉ ｓ Ｒ ｅ ｅ ｖ ｅ ） 学 名 四角 蛤 蜊 ， 隶属瓣鳃纲 （ Ｌ ａ ｍ ｅ Ｌ ｌ ｉ ｂ ｒ ａ ｒ ｃ ｈ ｉ ａ ） ， 真瓣鳃 目（ Ｅ ｕ — ｌ ａ ｍｅ ｌ ｌ ｉ ｂ ｒ ａ ｎ ｃ ｈ ｉ ａ ） ， 蛤蜊科 （ Ｍａ ｃ ｔ ｒ ｉ ｄ ａ ｅ ） ， 蛤蜊属 （ Ｍａ ｃ ｔ ｒ ａ ） ， 是 我 国沿海 滩 涂 广 泛 分 布 的底 栖 经 济 贝 类 ． 它具 有 一定 的食 用 和 药用 价值 ． 酯 酶 同工酶 （ Ｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ａ ｓ ｅ ） 是 生 物体 内广 泛存 在 的水解 酶 类 ， 它 能催 化 酯类 化 合 物水 解 ， 在 细胞 代 谢 中 有 转酯 作 用 ， 还 能 大量 水解 非 生理 存 在酯 类 化合 物 ， 包 括一 些 药物 或其 他 有毒 物 质 （ 如 重金 属 等 ） ， 因此
的例证 ， 处 理 组 的酶带 ６均 比对 照组 有所 减 弱 ， 因此 可作 为重 金属 胁迫 的 明显标 志物 之一 ． 本实 验 中 ， 处 理 组 总酯 酶 活性 在低 浓度 时 ， 呈 现 出较 强 的诱 导 效应 ． Ｓ ｔ ｅ ｂ ｂ ｉ ｎ ｇ ｔ ￣ ｌ 认 为 毒 物在 低 浓 度 下 出现 的这 种增 益现 象是 其在 无 毒情 况下 的刺 激反 应 ， 将这 一 现象称 为 “ 毒 物兴奋 效 应 ” ． Ｇ ｅ ｒ ｅ ｔ 等［ ２ ５ １ 研 究 了 铜暴露下 Ｒ ｕ ｄ ｉ ｔ ａ ｐ ｅ ｓ ｄ ｅ ｃ ｕ ３ ｓ ａ ｔ ｕ ｓ鳃 中抗氧化防御 系统 的变化 ，结果显 示 ２ ５ １ ￣ ｇ ／ Ｌ铜 处理组在暴露 ３ ｄ后 ＭＤ Ａ 含 量 显著 升 高 ； 于 庆云 等 研究结 果 显示 菲律 宾 蛤仔 鳃 和 消化 腺组 织 的 Ｓ Ｏ Ｄ和 Ｃ Ａ Ｔ活 性在 低 浓度 Ｃ ｄ
第２ ７卷第 ３期
２ ０ １ ５年 ８月
宁德师范学 院学报（ 自然科学版）
Ｊ ｏ ｕ ｎａ ｒ ｌ ｏ ｆ Ｎ ｉ ｎ ｇ ｄ ｅ Ｎ ｏ ｒ ｍ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ（ Ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ）
Ｖ０ １ ． ２ ７ Ｎ ｏ ． ３ Ａｕ ｇ ．２ ０ １ ５
的变 化 ， 基 于对 不 同种类 生 物酯 酶 同工酶 的差 异 ， 本研 究 白蛤 酯酶 同工 酶 的条带 数亦 有不 同． 王 定星 等ｆ ｚ ４ ］
研 究铅 对 长江 华溪 蟹酯 酶 同工 酶 的影 响 结果 显示 ： 处 理组 的酶 带数 在 不 同的组 织有增 加 或减 少 ， 条 带染
被 认为 有解 毒作 用 ． 酯 酶 同工 酶具 有 明显 多 态性 、 高度 组织 特 异性 和种 族 特异 性 ， 且具 有 广谱 底物 ， 其 催
化 反应 式 为 Ｒ Ｃ Ｏ ０ 一 Ｒ ＋ Ｈ ２ ｏ —Ｒ Ｃ Ｏ Ｏ Ｈ ＋ Ｒ Ｏ Ｈ． 酯酶 同工 酶作 为直 接 的基 因产 物 ， 是 基 因功 能 良好标 记物 ， 可 作 为遗 传 、 生化 指标 ． 本 实验 通 过 实验 室模 拟培 养染 毒 方法 ， 利 用 聚丙烯 凝胶 电泳 技术 获得 酯 酶 同工 酶谱 图及 酯酶 活性 ， 研究 不 同浓度 重金 属对 酯 酶 同工 酶活 性 的影 响．分 析 Ｃ ｕ ， Ｚ ｎ和 Ｐ ｂ对 白蛤 的致毒 作用 差异 及 作用 机理 ， 以期在 贝类 的致 毒作 用研 究方 面 为海 洋生 态环 境保 护 和水 产养 殖提 供理 论依 据．
科学 ， ２ ０ １ ３ ， ３ （ ６ ） ： ８ ２ ４ — ８ ３ ０ ．
重金属 Ｃ ｕ 、 Ｚ ｎ 和Ｐ ｂ 对 白蛤酯酶 同工酶活性的影响
刘兵钦 ， 刘爱芬 ． 一 ， 廖 燕哉 ，
（ １ ． 漳州市环境保 护局 ， 福建 漳州 ３ ６ ３ ０ ０ ０ ； ２ ． 闽南师范大学 化学与环境学 院， 福建 漳州 ３ ６ ３ ０ ０ ０ ；
３ ． 现代分 离分 析科 学与技术 福建 省重 点实验室 ， 福建 漳州 ３ ６ ３ ０ ０ ０ ） 摘要 ：通过急性暴露 实验 ， 研究不 同浓度 （ Ｏ ． ２ ５ ｍ ｇ ／ Ｌ ， Ｏ ． ５ ｍｓ ／ Ｌ ， ０ ． ７ ５ ｍｇ ／ Ｌ ， １ ． Ｏ Ｏ ｍ ｇ ／ Ｌ ） 重金 属ｃ ｕ 、 ｚ ｎ 、 Ｐ ｂ 溶液 对 白蛤酯酶同工酶 和总酯 酶活性 的影响． 结果 表明 ： 处理组 的酯酶 同工酶谱 图条 带数 目比对照组增加一 条 ， 共 得 到７ 条酶带 ； 条 带显色更深（ 除酶带６ 显色变 浅外 ） ， ｃ ｕ 浓 度为０ ． ２ ５ ｍ ｇ ／ Ｌ 时， 总酯酶活性最高 ， 高于对照组８ ８ ． ５ ％； 总 体随ｃ ｕ 浓度的增加 而变弱 ； Ｃ ｕ 浓度为 １ ． ０ ０ ｍＣ Ｌ 时， 总酯酶活性低于对照 ， 表现抑制作用 ； 当ｚ ｎ 和Ｐ ｂ 浓度为０ ． ７ ５ ｍ ｇ ／ Ｌ 时， 总酯酶活性最高 ， 分别高于对照组９ １ ． ０ ％和１ ４ １ ． ０ ％； 处理组的总酯酶活性均高于对照组 ， 说明 白蛤对ｚ ｎ 和Ｐ ｂ