第9章 杂环类药物的分析

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原理：
CONHNH2 3 N COOH 3 N
+ 2KBrO 3
+3N2+3H2O+2KBr
等当点:稍过量的Br2
BrO3 5Br 6H + 3Br2 3H 2O + 甲基橙
红→无
• 讨论：
a.缓缓滴定并充分振摇,防止局部 浓度过高终点提前； b.到终点后,补加一滴指示剂,如颜 色褪去即可,否则未到终点；
COOH
CHO CHOH
Ar
N
CH
CH
NH
Ar
2. 二硝基氯苯反应(Ch.P2010)
二硝基氯苯
蒸干
无水 △
残渣
甲醇
紫红色
二硝基氯苯反应
CONHNH2 NaOH N N Cl COONa N NO2 NO2 NO2 NaOH N CHOH NO2 NO2 COONa COONa
紫红色
NO2
异烟肼不经处理的反应：
Ch.P2010 地西泮的鉴别
三. 含量测定 1. 非水滴定法
2. HPLC法
（一）．高效液相色谱法：
• 1．特点： 80~90%反相色谱分离，最常用十八烷 基硅烷键合硅胶（ODS）。 硅胶表面仅有25~50%硅醇基可与硅烷 化试剂作用，在分离极性化合物特别是碱性 药物和生物碱时，裸露的硅醇基和碱性药物 发生吸附或离子交换作用，而使色谱峰拖尾， 保留时间过长，甚至长期保留在色谱柱上。
1、非水碱量法： 吩噻嗪类药物母核上氮原子碱性极弱, 不能进行滴定,10位取代基上N原子为 碱性,可在非水介质中以高氯酸标准液， 以CV为指示剂。
2、铈量法： 原理: 适当pH下,用硫酸铈氧化吩噻 嗪进行测定 开始： 药物－e → 红色游离基 终点： 药物－2e → 红色消失 终点：红色→无色 自身指示剂 条件：稀硫酸
d.化学计量关系：3/2
T=0.01667×3/2×137.14=3.429mg/ml
• 2.非水滴定法： 利用吡啶环的碱性，进行非水 滴定（尼克刹米，Ch.P2010）
第二节 吩噻嗪类药物分析
一、结构与性质 1. 代表药物
6 7 8 9 10 5
S N R
4 3
2 1
R'
硫氮杂蒽母核
• R，R’取代基不同
NHCH3 N
1 5
CH3
9
C
2 3 4
O
3
N
1 5
C
2
CH2
Cl
8
CH2
Cl
7 6
C
N O
7 6
4
C
N
氯氮卓
地西泮
• 共同点：
（1）二氮杂卓环为七元环，环上氮原子 具有强碱性，苯基的取代使碱性降低， 可进行非水滴定法测定； （2）UV吸收，用于含量测定；
（3）环比较稳定，在强酸性下水解， 形成相应的二苯甲酮衍生物，可用 于鉴别和比色测定。（氯氮卓水解 生成芳伯胺基；地西泮水解生成芳 仲胺基和甘氨酸）； （4）本类药物多为游离碱，不溶于 水，而溶于甲醇、乙醇和氯仿中。
• 二、鉴别
1、芳伯胺基反应： 氯氮卓水解生成芳伯胺基(重氮化偶合反 应)
2、茚三酮反应： 地西泮水解生成甘氨酸（茚三酮反应）
3 、硫酸荧光反应： 本类药物→加硫酸，在紫外灯下，呈荧光。
4. 分解产物的反应 本类药物是有机氯化合物，采用 氧瓶燃烧法破坏，生成HCl，用5％ NaOH吸收，显氯化物反应。
2. 方法（以盐酸氯丙嗪注射液为例 USP24) 取样V（≈100mg）
0.1mol/L
500ml
10ml
H2O NH3 T.S
乙醚4次/25ml
乙醚液
0.1mol/L HCl
4次/25ml
250ml
标示量％＝
CS×D V ×标示量
×100％
• 第五节 苯并二氮杂卓类药物的分析
一. 结构分析
9 8
显色剂：对二甲氨基苯甲醛（黄） 判断：在供试品溶液主斑点前方与对照品溶液 主斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。 20μg/ml ×10-3 ×100% 限度%= 100mg/ml
• 四、含量测定 • 1、溴酸钾法（ Ch.P 2010）注射用异烟肼
操作： 异烟肼 KBrO 滴定 / 强酸中甲基橙指示终点
1. 与HgCl2的反应 异烟肼
尼克刹米 2. 与CuSO4反应 尼克刹米
HgCl2
白色↓
(Ch.P2010鉴别）
CuSO4 NH4SCN
草绿色↓
• （四）. 分解产物的反应
无水NaCO3或 尼克刹米、异烟肼 Ca(OH) 共热 2
吡啶臭味
尼克刹米
NaOH
加热
二乙胺臭味
(Ch.P2010鉴别）
红色石蕊试纸
异烟肼
尼克刹米 硝苯地平
1. 戊烯二醛反应（吡啶类的特征反应） 尼可刹米
(Ch.P2010鉴别）
CNBr 苯胺
戊烯二醛衍生物
黄色
CONHNH2
COOH
同上条件
KMnO4 ( Br2 )
N
[O]
N
黄色→ 黄棕
CONHNH2 KMnO4 或Br 2 N
COONa CNBr 溴化氰 N
COOH
N Br CN COOH 2Ar-NH 2
• 2. 显色反应：
(1)
母核 呈色(樱红 红色)
氧化剂
氧化剂：H2SO4、HNO3、FeCl3、H2O2
(2)
环上的S 呈色
FeCl3或PdCl2
（癸氟奋乃静的鉴别。可用于比色测定）
三. 含量测定
1. 非水滴定法
2. 钯离子比色法
3. 氧化还原法（铈量法） 4. 紫外分光光度法
R
-(CH2)3N(CH3)2 R’ -H 盐类 HCl 药名 盐酸丙嗪
-(CH2)3N(CH3)2
CH2CH(CH3)N(CH3)2
-Cl
-H
HCl
HCl
盐酸氯丙嗪
盐酸异丙嗪
2. 特点与性质 1) 硫氮杂蒽母核
2) UV吸收：具有共轭体系，S未被氧化
三个峰（205、254、300nm）；
3) S原子二价，可被氧化；与氧化剂（硫酸、 硝酸、三氯化铁及过氧化氢等）呈色。
10ml
标示量：1ml:10mg
100ml
注射剂 标示量% = 每ml药液含主ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ的量
标示量
A×D
×100%
标示量％=
E
1% 1cm
×100×V取×标示量
×
100％
2. 萃取后UV法
E 1% 法 ） 例：盐酸氯丙嗪注射液（ 1cm
盐酸氯丙嗪
NH3
HCl 乙醚 提取液 提取 萃取
除掉Vc
萃取液 λ=254nm 测定A
(Ch.P2010鉴别）
异烟肼＋香草醛
异烟腙（黄色结晶） 测定mp
水杨醛、对二甲氨基苯甲醛
CONHNH2
CHO
CONHN
CH
+ N OH OCH3 N OH OCH3
黄色
（三）形成沉淀的反应
本类药物具有叔胺性质，可与重金 属盐类（氯化汞、碘化铋钾、硫酸铜等 试液）和碘试液等生物碱沉淀剂形成沉 淀。
• 解决方法：
• 1、加扫尾剂法：以十八烷基硅烷 （ODS）键合的硅胶为固定相，在流 动相中加入扫尾剂，以抑制或掩蔽固 定相表面的游离硅醇基的活性。最常 用的扫尾剂是三乙胺（TEA）。 • 2、离子对色谱
吡啶
2.性质：
（1）碱性:吡啶环上氮原子具有叔胺性质， pKb=8.8（水中），非水滴定； （2）异烟肼：酰肼基有强还原性, 与芳醛 缩合,氧化还原滴定或比色测定；
（3）尼可刹米:酰胺基在碱性下可水解,放
出NH(C2H5)2↑, 用于鉴别。 （4）VU吸收
二、鉴别试验 （一）吡啶环开环
适用于吡啶环的α、α’位未取代以及 β或γ位被羧基衍生物取代。
优点：
（1）赋形剂不干扰,复方制剂中咖啡因、 苯丙胺、可待因、巴比妥类药物等不干 扰测定。 （2）反应为一价还原（Ce4+→Ce3+）,对 环上取代基无作用；mol比：1：2 （3）用于原料药，也可用于制剂分析。
3、钯离子比色法：
原理： 吩噻嗪类药物可与一些金属离子 （如Pd2+）在适当pH值的溶液中形成 有色的络合物，借以进行比色测定。
蓝
三、特殊杂质检查
异烟肼中杂质→游离肼（致癌物） TLC法（杂质对照品法） 来源 a. 原料未反应完全 b. 降解产生游离肼 NH2NH2
供试液：100mg/ml → 点5μl 对照液： ( NH2)2H2SO4配制（≈ ( NH2)2 20μg/ml ）→ 点5μl 异烟肼与硫酸肼混合液 系统适用性
NO2 CONHNH2 NO2 Cl NO2 N CONHNH NO2
+
N
碱性溶液 红棕色
（二）. 酰肼基团的反应
1. 还原反应： （Ch.P2010鉴别）
CONHNH2
氨制
N
AgNO3 N2
+
Ag
Ag+被还原生成Ag，产生黑色浑浊，在干净 的试管壁发生银-镜反应，气泡有氮气生成。
2. 缩和反应
盐酸氯丙嗪
• 3. 萃取-双波长分光光度法：
----用于校正样品中氧化产物对测定影响 • 氯丙嗪的最大吸收波长为254nm,其氧化产物 在此波长也有吸收,同时在277nm处氧化产物 也有吸收,且其吸收度与在254nm处吸收度相 等,而氯丙嗪在此波长处无吸收.
A 254(s) A 254(c) A 254(o) A 277(s) A 277(c) A 277(o) A 277(c) 0 又 A 254(o)＝A 277(o) A (S)＝A 254(s)－A 277(s)＝A 254(c) 同理得：A ( R ) A (S) A ( R ) CS CR