高效液相色谱法检测化妆品中6种糖皮质激素
高效液相色谱串联质谱检测化妆品中糖皮质激素、雌激素、雄激素、孕激素共22种禁用激素
53《轻工标准与质量》2019年第1期高效液相色谱-串联质谱检测化妆品中糖皮质激素、雌激素、雄激素、孕激素共22种禁用激素朱海佩 张亮 张碧宇（温州市质量技术监督检测院，浙江温州 325000）摘要：建立了化妆品中糖皮质激素、雌激素、雄激素、孕激素类共22种大范围禁用激素的电喷雾离子化-高效液相色谱-串联质谱分析方法。
化妆品试样用甲醇超声提取，提取液离心后取上清液加亚铁氰化钾和醋酸锌溶液沉淀大分子杂质，再次离心将上清液以Oasis HLB 固相萃取小柱净化，经Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱（2.1×150mm,2.7μm）反相色谱分离后在多反应监测MRM 模式下进行定性和定量分析。
结果表明，22种激素的检出限为0.1～27.4 μg/kg；该方法样品的平均添加回收率为72.4%～99.7%，相对标准偏差RSD 均小于10%。
关键词：化妆品；激素；电喷雾离子化-高效液相色谱-串联质谱分析法中图分类号：O657.63 TQ658 文献标识码：A DOI：10.19541/ki.issn 1004-4108.2019.01.011短期使用添加激素的化妆品可以防止皮肤老化，有除皱、增加皮肤弹性等作用，但长久使用也会导致色素沉积，皮肤萎缩变薄，甚至具有致癌性。
化妆品中激素物质的检验，对于控制化妆品产品质量安全，保障人们身体健康具有重要意义。
目前化妆品中激素的检测方法中，现行有效的国家标准有：《化妆品安全技术规范》，其中仅提供了雌三醇等七种组分的检测法；GB/T 24800.2—2009《化妆品中四十一种糖皮质激素的测定 液相色谱/串联质谱法和薄层层析法》也单是糖皮质激素的检测等。
由于化妆品基质复杂、激素种类繁多，增加了多种不同类别激素净化和检测的难度。
本研究应用电喷雾离子化-高效液相色谱-串联质谱仪建立化妆品中糖皮质激素（曲安西龙、曲安奈德、泼尼松龙、泼尼松、甲基泼尼松龙、醋酸泼尼松龙、氢化可的松、可的松、醋酸可的松、醋酸氢化可的松、倍他米松、地塞米松、醋酸地塞米松、丙酸氯倍他索、丙酸倍氯米松）、雌激素（雌二醇、雌三醇、雌酮、己烯雌酚）、雄激素（睾酮、甲基睾丸酮）、孕激素（黄体酮（孕酮））共22种禁用激素的测定分析方法，筛选更优化的前处理方法，实现对各类激素、多组分的快速准确测定。
动物源性食品中糖皮质激素残留检测方法研究
动物源性食品中糖皮质激素残留检测方法研究糖皮质激素是一类激素类物质，具有抗炎、免疫抑制、抗过敏等作用，在医药领域广泛应用。
然而，长期过量使用糖皮质激素可能导致一系列副作用，因此对于动物源性食品中糖皮质激素的残留水平进行监测具有重要意义。
本文将对动物源性食品中糖皮质激素残留检测方法进行研究，包括目前常用的高效液相色谱法、气相色谱法以及免疫分析法等。
一、高效液相色谱法：高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分析技术，其通过将样品溶解于有机溶剂中，然后采用高压泵将溶液通过填充在柱子中的固定相进行分离。
在检测糖皮质激素残留时，可以选择不同的检测波长以及不同的固定相，实现糖皮质激素的快速、准确分离和定量。
同时，该方法简便易行，结果稳定可靠，因此被广泛应用于糖皮质激素残留的检测中。
二、气相色谱法：气相色谱法（GC）是一种将样品中的化合物蒸馏至气态后通过色谱柱分离的技术。
与高效液相色谱法相比，气相色谱法具有分离能力好、分析速度快等优点。
在糖皮质激素残留的检测中，GC通常与质谱联用，能够提高分析的灵敏度和选择性。
然而，气相色谱法对样品的前处理要求较高，需要进行提取、洗脱、洗涤等步骤，且一些溶剂可能与色谱柱相互作用，影响分析结果。
三、免疫分析法：免疫分析法主要包括酶联免疫吸附试验（ELISA）和放射免疫法等。
该方法通过将待测样品与抗体结合，形成抗原-抗体复合物，通过测量光学、电化学信号或放射性衰减来定量目标物。
免疫分析法具有灵敏度高、专属性强等优势，且操作简单快速。
然而，免疫法对样品的前处理也较为复杂，同时需要合适的抗体和标记物来实现对糖皮质激素的定量分析。
在实际研究中，通常会综合运用上述方法来进行糖皮质激素残留的检测。
首先，使用样品前处理方法，如萃取、净化等，将样品中的糖皮质激素提取出来。
然后，使用HPLC或GC对提取物进行分离，通过不同的检测波长或质谱联用分析等手段进行定量分析。
最后，为了确保结果的准确性和可靠性，通常会进行多次重复实验，并比较结果。
超高效液相色谱法同时测定化妆品中的15种激素
马 强 ， 王 超 ， 王 星 ， 白 桦 ， 陈 伟 ， 武 婷 ， 周 新 ， 于 文莲
（ 国 检 验 检疫 科 学 研 究 院工 业 品检 验 研 究 所 ，北 京 １０ ２ ） 中 ０ ０ ５ 摘 要 ： 立 了采 用 超 高 效 液 相 色谱 同 时测 定 化 妆 品 中糖 皮 质 激 素 、 激 素 、 激 素 、 激 素 等 共 ｌ 建 雌 雄 孕 ５种 激 素 （ 曲安 西
ａ ｄ ｐ ｏ ｅ ｔｒ ｎ ｎ ｒ ｇ ｓｅ ｏ ｅ）ｉ ｏ ｍｅｉｓ ｎ ｃ ｓ ｔ ．Ｖａ ｏ ｓｃ ｓ ｔｃｓ ｍｐｅ ｒ ｘ ｒ ｃｅ ｔ ｔ ａ ｏ ｎ ｅ ｃ ｉ ｒ ｕ ｏ ｍｅ ｉ ａ ｌｓｗｅ ｅ ｅ ｔａ ｔ ｄｗｉ ｍｅｈ ｎ ｌ ｄ ｒ ｈ ｕ
Ｏ ｓ Ｂ 固 相 萃 取柱 富集 净 化 ， ＷａｅｓＡ Ｑ Ｉ ＹＵ Ｌ Ｅ Ｉ 谱 柱 （ ． ｍ，． ａｉ ＨＬ ｓ 以 ｔｒ Ｃ Ｕ Ｔ Ｐ ＣＢ Ｈ Ｃ ８ 色 １７ ２ １ｍｍ × ０ｍｍ） 离 ， ５ 分 乙 腈 和 水 为流 动 相 梯 度 洗 脱 ， ｎ 内完 成 了 １ ６ｍｉ ５种 激 素 的分 离 及 检 测 。在 １～ ５ｎ 进 样 范 围 内 ，５种 激 素 的工 作 曲 ２ ｇ ｌ 线 的线 性 相 关 系 数 ｒ均 高 于 ０９ ９５ 在 低 、 、 （ ，Ｏ ２ ／ ｇ ３个 添 加 水 平 下 ｌ ． ９ 。 中 高 ２ ｌ ，０ ｍｇ ｋ ） ５种 激 素 的 平 均 回 收 率 为 ８ ． ％ 一１２４ 相 对 标 准 偏 差 为 １６ ～ ． ％。 ８２ ０ ．％， ． ％ ７４ 关 键 词 ： 高 效 液相 色谱 法 ； 相 萃 取 ； 素 ； 妆 品 超 固 激 化 中图分类号 ：６８ Ｏ ５ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ０８ １ （０ ７ ０ — ４ —５ １０ —７３ ２０ ）４０ １０ ５ 栏 目类 别 ： 究 论 文 研
高效液相色谱法检测化妆品中6种糖皮质激素
[作者简介] 吴大南(1964-),女,副主任医师,主要从事化妆品检验和环境卫生工作。
【化学测定方法】高效液相色谱法检测化妆品中6种糖皮质激素吴大南,郑和辉,李 洁(北京市疾病预防控制中心环境卫生室,北京 100013)[摘要] 目的:建立检测化妆品中6种糖皮质激素的分析方法。
方法:本文利用液相色谱带二极管阵列检测器,检测波长240n m,C18色谱柱,流动相:乙腈+水=40+60,测定化妆品中氢化可的松,醋酸波泥松,醋酸氢化可的松,醋酸氟氢可的松,醋酸可的松,醋酸地塞米松。
结果:在化妆品中糖皮质激素的最低检出浓度015μg/g,回归系数r≥019997。
各糖皮质激素添加量为5μg时,氢化可的松,醋酸波泥松,醋酸氢化可的松,氟氢可的松,醋酸可的松,醋酸地塞米松的添加回收率分别为7912%±416%,8315%±311%,8513%±614%,8617%±511%,8515%±317%和8211%±018%;添加量为50μg时,添加回收率分别为8616%±510%,8818%±415%,8913%±417%,9416%±512%,9116%±414%和9017%±415%。
结论:该方法简单,分离效果好,能够满足检测化妆品中6种糖皮质激素的需要。
[关键词] 糖皮质激素;化妆品;液相色谱[中图分类号] TS97411 [文献标识码] A [文章编号] 1004-8685(2006)03-0309-02 糖皮质激素可抑制纤维细胞增生,减少5-羟色胺形成,因而对皮肤具有一定的嫩白作用[1]。
但长期使用后则会发生皮肤变薄、毛细血管扩张、毛囊萎缩,一旦停用,皮肤就会发红、发痒、出现红斑、丘疹、脱屑等。
在医学上称之为糖皮质激素依赖性皮炎、接触性皮炎或化妆品皮肤病。
因此我国《化妆品卫生规范》[2]规定此类物质为禁用成分。
超高效液相色谱-质谱法快速检测化妆品中24种禁用激素
质量监管40 2020年10月（下）/ 总第271期引 言尽管皮质类固醇在化妆品中是被禁止的，但市场上可能存在假冒产品，对健康构成危害。
这种副作用会增加长期使用和剂量，尤其是在使用时不注意。
长期使用有效的局部激素也会有风险。
鉴于皮质激素的副作用，通过原料和药物配方的质量控制，分析化学对药物治疗的安全性起决定作用。
这些类固醇可能被非法添加到大量的化妆品中; 消费者并不知道化妆品中存在这些类固醇，这导致了不当的长期使用和过量。
因此，需要有效的分析方法，在消费者出现无副作用的有害影响时，迅速筛查保健商店出售的非处方药膏和药膏中是否含有假皮质类固醇。
1 化妆品中的禁用激素种类分析1.1 化妆品中的禁用糖皮质激素糖皮质激素是皮质类固醇激素的一种。
糖皮质激素是一种皮质类固醇激素，它与几乎所有脊椎动物细胞中都存在的糖皮质激素受体结合。
“糖皮质激素”是一种混合物(葡萄糖 + 皮质 + 类固醇) ，由其在调节葡萄糖代谢、肾上腺皮质合成及其甾体结构中的作用组成。
较少见的同义词是糖皮质激素。
临床研究表明，这些化合物可以抑制成纤维细胞的增殖，并有助于治疗皮肤病，如牛皮癣和湿疹。
皮肤护理产品中加入糖皮质激素，可以改善皮肤的光滑和纹理，防止皮肤老化。
然而，长期使用这些药物会导致皮肤变薄、发红和发痒，以及其他情况，例如高血糖、高血压、骨质疏松、胎儿异常、免疫功能减退和其他副作用，这些副作用是由于药物经皮肤吸收。
中华人民共和国卫生部化妆品卫生标准(2007)和欧盟化妆品条例明确规定化妆品中禁用糖皮质激素。
近年来，尽管有这些规定，一些化妆品生产商继续在他们的产品中添加这些禁用物质，以治疗皮肤瘙痒、脂溢性皮炎，甚至美白皮肤。
因此，开发合适的分析方法测定化妆品中的糖皮质激素含量，对保证化妆品的安全使用具有重要意义。
1.2 检测方法目前，检测化妆品中激素的主要方法有反相高效液相色谱法，气相色谱法-质谱联用(GC-MS) ，高效液相色谱二极管阵列检测器(HPLC-DAD) ，薄层色谱法(TLC)，超高效液相色谱法(UPLC) ，高效液相串联质谱法(hplc-MS)。
高效液相色谱法检测化妆品中的6种抗生素和甲硝唑
2019年12月第6期 香料香精化妆品D e c. 2019,N o.6 flavour fragrance cosmetics研究报告高效液相色谱法检测化妆品中的6种抗生素和甲硝唑___________________________________________青海省药品检验检测院/青海省中藏药现代化研究重点实验室，青 海西宁810016.....................................韩晓萍 李亚楠作者简介韩晓萍（1980—），女，硕士，副主任药师，研究方向：药品及化妆品检测。
联系电话：0971 - 8299836E-m a il： 89323352@___________________________________________采用高效液相色谱法同时测定不同种类化妆品中6种抗生素和甲硝唑的含量。
样品用甲醇-0.1 mol/L盐酸（体积 比1:1)提取，采用Phenomenex Luna C18色谱柱（4.6 mm x 250 mm x 5 |im)分离，以乙腈（A )和质量分数0.1%甲酸 (B )为流动相系统，在268 m n波长下进行检测。
与标准方法相比较，该研究中流动相以甲酸代替草酸盐，排除了溶剂 峰的干扰，降低管路堵塞机率；6种抗生素和甲硝唑在进样范围内线性关系良好，相关系数r多0.995,在水、乳、膏、霜四种不同基质中低（60%)、中（100%)、高（140%)三个梯度的加样回收率范围为96.5°/。
~ 110.8%,相对标准偏差范 围为0.32% ~ 1.85% (/I = 9 )。
所建立的方法简便、准确、有效，可用于化妆品中6种抗生素和甲硝唑的筛查和测定。
化妆品高效液相色谱法抗生素甲硝唑Simultaneous Determination of Six Kinds of Antibiotics and Metronidazole in Cosmetics by High Performance Liquid Chromatography*HAN Xiao-ping LI Ya-nan(Qinghai Institute for Drug Control/Qinghai Key laboratory of Modernization Research of TCM and Tibetan Medicine,Xining810016, Qinghai,China)Abstract ：HPLC method was established for simultaneous determination of 6 kinds of antibiotics ( minocycline hydrochloride, oxytetracycline dihydrate, tetracycline hydrochloride, chlortetracycline hydrochloride, doxycycline hydrochloride, chloramphenicol) and metronidazole in cosmetics. Samples were extracted by methanol and 0.1 mol/L hydrochloric acid (volume ratio 1/1 ), then separated by Phenomenex Luna C l8(4.6 mm x 250 mm x 5 |im) column using acetonitrile and mass 0.1% formic acid as mobile phase with gradient elution, the detection wavelength was 268 nm. The calibration curves showed good linear relationship and the correlation coefficients were above 0.995, the average recoveries spiked at 60%, 100%, 140% were in the range of 96.5% to 110.8% with RSD of 0.32% to 1.85% (n=9).The established method is simple, accurate and efficient. It can be used for simultaneous determination of 6 kinds of antibiotics and metronidazole in cosmetics.Keywords ：cosmetics high performance liquid chromatography antibiotics metronidazole抗生素指由微生物或高等动植物产生的一类 具有抗菌功能的次级代谢产物，能干扰其他细胞 发育功能，但不具有抗病毒功能⑴。
高效液相色谱法检测化妆品中性激素的条件选择及应用
【 关键词 】 高效液相色谱法 ； 品中性激素 ； 化妆 检测条件 ； 应用
目前 ， 随着 社会 的发展 ， 人们 生活水平的提高 ， 人们对
的试样约 １ Ｏ 于 ５ ．ｇ Ｏ ０毫升小烧杯 中 ， 加入 ２ ｇ Ｎ Ｏ ０／ ａ Ｈ溶液 Ｌ １ 升（ ５毫 分三 次加入 ）用玻璃棒将 其进行充分搅 拌 ， 入 ， 倒 分液漏斗中 ， 再加入 １０毫升 Ｎ Ｃ 溶液 ， １ ｏＬ盐酸调 ０ ａ１ 用 ｍｌ ｆ 节ｐ Ｈ约为 ３ ，最后用 ３ ０毫升体积比为 ４ ： ０１的二氯甲烷 一
后进行进样分析￣Ｎ［ ４ Ｉ ３ １ Ｊ —。
１ 色谱条件 ． ５ １ ． 色谱柱的选择 ．１ ５ 色谱柱选择 Ｘ ｅｒ Ｍ Ｐ ＴｒＴ Ｒ １ ａ ８色谱柱 ，主要是 由于雌 三 醇在普通色谱柱上的保 留时间一般为 ２ ３ － 分钟 ，然而在 实 际的样 品测定中 ， 雌三醇常常被某些因素干扰 ， 而使测定 从 不能准确定量 ，因此 ，为了延长雌三醇的保留时间，选择 Ｘ ｅｒ Ｍ Ｐ ８色谱 柱是 比较合适的。 ＴｒＴ Ｒ １ ａ 在其他条件都不变 的 情况下 ，雌三醇在 Ｘ ｅｒ ＭＲ Ｉ Ｔ ｒ Ｔ Ｐ ８色谱柱上 的保 留时间比 ａ 普通的色谱柱要长 ，保 留时间的延长有利于消除杂质峰 的
动相 的选 择 为 水 一甲 醇 一乙 腈 ， 体 积 比为 ５ ：２１ ， 样 且 ０ ：８ 这 ３
仪器 ： 高效液相色谱仪 ； 超纯水器 ； 恒温水浴 。 试剂 ： 雌二醇 、 雌三醇 、 雌酮 、 睾酮 、 甲基睾酮 、 孕酮 、 己
烯雌酚 ； 甲醇 、 乙腈为色谱纯试剂 ； 二氯 甲烷 、 乙酸 乙酯 、 无
性激素 的特殊美容功效 以及人们的爱美心理 ，非法将之添
加 到一 些 化妆 品 中 ，有 的功 效 添加 剂 的量 不 符合 相关 技 术 规 范 的规 定 ， 现 有 超 标 的一 些 情 况 ， 此 以往 ， 消 费 者 发 长 对
高效液相色谱法测定皮质激素含量
高效液相色谱法测定皮质激素含量【摘要】目的：建立高效液相色谱法测定醋酸肤轻松软膏的含量，研究醋酸肤轻松、醋酸去炎松、醋酸氟氢可的松、丙酸倍氯美松及氯氟舒松五种皮质激素的分离情况。
方法：样品经甲醇溶解后，用diamonsil c18柱分析，结果：五种皮质激素能较好地分离，达到了一种方法可同时分离五种激素的目的。
结论：采用高效液相色谱法测定醋酸氟轻松软膏的含量使操作更方便，结果更准确。
【关键词】五种皮质激素；高效液相色谱；含量测定【中图分类号】r927.1 【文献标识码】a 文章编号：1004-7484（2012）-04-0610-01醋酸肤轻松、醋酸去炎松、醋酸氟氢可的松、丙酸倍氯美松及氯氟舒松五种皮质激素软膏为治疗皮肤病的常用药。
国内一般采用紫外－可见分光光度法分别测定吸光度，因为有基质干扰，含量偏高，且操作复杂，测定结果重现性差。
其他方法收载的醋酸肤轻松软膏含量测定方法均不够理想，本人经过试验，采用高效液相色谱法较好，做了回收率试验，确立样品的含量测定。
1.仪器、试剂及样品岛津uv-2100型高效液相色谱仪，紫外检测器，检测波长：240nm，柱温：30℃；填料用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，diamonsil c185u200×4.6mm柱；甲醇、乙醚为色谱纯规格；醋酸肤轻松、醋酸去炎松、醋酸氟氢可的松、丙酸倍氯美松及氯氟舒松五种皮质激素对照品及内标物醋酸地塞米松、炔诺酮均符合规定，内标物甲基睾丸素及黄体酮为中国药品生物制品检定所提供的标准品；供试品均为市售品。
2.分析条件确定2.1 取醋酸肤轻松、醋酸去炎松、醋酸氟氢可的松、丙酸倍氯美松及氯氟舒松五种皮质激素的甲醇溶液（浓度为50ug／ml），进样量为10ul，流速为1.0ml／min，以不同比例的甲醇－水为流动相，考察各自的保留时间，计算容量因子（k）。
通过实验结果，表明分离醋酸肤轻松、醋酸去炎松和醋酸氟氢可的松这三种皮质激素它们适宜的甲醇浓度为60～70%，而分离丙酸倍氯美松及氯氟舒松这两种皮质激素它们适宜的甲醇浓度为75%左右为好，这样它们的容量因子均能在2～8之间。
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[作者简介] 吴大南(1964-),女,副主任医师,主要从事化妆品检验和环境卫生工作。
【化学测定方法】
高效液相色谱法检测化妆品中6种糖皮质激素
吴大南,郑和辉,李 洁
(北京市疾病预防控制中心环境卫生室,北京 100013)
[摘要] 目的:建立检测化妆品中6种糖皮质激素的分析方法。
方法:本文利用液相色谱带二极管阵列检测器,检测波长240n m,C
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色谱柱,流动相:乙腈+水=40+60,测定化妆品中氢化可的松,醋酸波泥松,醋酸氢化可的松,醋酸氟氢可的松,醋酸可的松,醋酸地塞米松。
结果:在化妆品中糖皮质激素的最低检出浓度015μg/g,回归系数r≥019997。
各糖皮质激素添加量为5μg时,氢化可的松,醋酸波泥松,醋酸氢化可的松,氟氢可的松,醋酸可的松,醋酸地塞米松的添加回收率分别为7912%±416%,8315%±311%,8513%±614%,8617%±511%,8515%±317%和8211%±018%;添加量为50μg时,添加回收率分别为8616%±510%,8818%±415%,8913%±417%,9416%±512%,9116%±414%和9017%±415%。
结论:该方法简单,分离效果好,能够满足检测化妆品中6种糖皮质激素的需要。
[关键词] 糖皮质激素;化妆品;液相色谱
[中图分类号] TS97411 [文献标识码] A [文章编号] 1004-8685(2006)03-0309-02
糖皮质激素可抑制纤维细胞增生,减少5-羟色胺形成,因而对皮肤具有一定的嫩白作用[1]。
但长期使用后则会发生皮肤变薄、毛细血管扩张、毛囊萎缩,一旦停用,皮肤就会发红、发痒、出现红斑、丘疹、脱屑等。
在医学上称之为糖皮质激素依赖性皮炎、接触性皮炎或化妆品皮肤病。
因此我国《化妆品卫生规范》[2]规定此类物质为禁用成分。
为了配合完成卫生部对全国化妆品的抽检任务,参考中国疾控中心环境所的LC/M S/M S法测定化妆品中皮质激素[3],我们建立了化妆品中6种糖皮质激素:氢化可的松,醋酸波泥松,醋酸氢化可的松,醋酸氟氢可的松,醋酸可的松,醋酸地塞米松的液相色谱-二极管阵列检测方法。
1 材料与方法
111 仪器
液相色谱W aters2695带996型二极管阵列检测器,M llen2 niu m色谱工作站;飞鸽牌TG L-16G高速离心机;Cali per life Sciences公司的TurboVapⅡ浓缩仪。
112 试剂
11211 糖皮质激素 氢化可的松,醋酸波泥松,醋酸氢化可的松,醋酸氟氢可的松,醋酸可的松,醋酸地塞米松,由中国药品生物制品检定所购买。
11212 糖皮质激素单标溶液 准确称取各激素标准物质01010g移至1010m l容量瓶,用甲醇定容至刻度,各单标浓度分别为1000μg/m l。
11213 糖皮质激素混标溶液 准确移取上述各单标溶液110m l于1010m l容量瓶,用甲醇定容,得各糖皮质激素浓度为100μg/m l的混标溶液。
11214 甲醇(色谱纯);乙酸乙酯(AR);乙腈(色谱纯);超纯水,由M ili-Q W ater Syste m纯化制备,电阻1812MΩ;氯化钠(AR)。
113 色谱条件
预柱:D I K MA easyguard保护预柱;色谱柱:Sy mmetry C
18 319mm×150mm,粒经5μm;流动相:乙腈+水=40+60;流
速:018m l/m in;进样量:5μl。
柱温:室温;检测波长:240n m。
114 标准工作曲线的制作
标准工作液的浓度分别为:5、10、20、50、100μg/m l。
在设定色谱条件下,分别取10μl进行HP LC分析。
以标准系列质量浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。
115 样品的制备
称取012g左右的样品于5m l试管中,加1m l饱和NaCl 溶液,摇匀,用1m l乙酸乙酯超声波振荡提取20m in,离心4m in(10000r/m in),取出上层的乙酸乙酯,重复提取1次,合
并乙酸乙酯,加无水Na
2
S O4干燥。
用氮气吹干(TurboVapⅡ浓缩仪),加入015m l甲醇溶解后进行分析。
116 添加回收率的测定
在称约012g化妆品中,各糖皮质激素两个添加量分别为5μg和50μg。
按样品制备的方法制备样品,每个添加量5个重复样,测定添加回收率。
2 结果与分析
211 糖皮质激素的色谱分析
糖皮质激素的标准色谱图见图1,检测波长为240n m。
氢化可的松,醋酸波泥松,醋酸氢化可的松,醋酸氟氢可的松,醋酸可的松,醋酸地塞米松的保留时间分别是:2179、6104、6154、6195、8104、11102m in 。
图1 糖皮质激素的标准色谱图
212 工作曲线
以糖皮质激素的浓度为横坐标,以糖皮质激素的检出峰面积为纵坐标,过原点,做工作曲线,回归工作曲线见图2,工作曲线方程见表1。
回归系数r ≥019997。
图2 回归工作曲线表1 工作曲线方程
化合物曲线方程
r
氢化可的松Y =3113×104X 019998醋酸波泥松Y =2144
×104X 019998醋酸氢化可的松Y =2162×104X 019998醋酸氟氢可的松Y =2189×104X 019998醋酸可的松Y =2173×104X 019998醋酸地塞米松
Y =2155×104X
019997
213 最低检出限
基线的噪声约是550,按化妆品卫生规范对HP LC 方法检出限的定义,以3倍信噪比估算检出限,在化妆品中糖皮质激素的最低检出浓度约为013μg/g 。
214 添加回收率和精密度
在样品中糖皮质激素两个添加量分别为5μg 和50μg,每个添加量5个重复。
添加回收率和相对标准偏差(即精密度)见表2,各糖皮质激素添加量为5μg 时,氢化可的松,醋酸波泥松,醋酸氢化可的松,醋酸氟氢可的松,醋酸可的松,醋酸地塞米松的添加回收率分别为7912%±416%,8315%±311%,8513%±614%,8617%±511%,8515%±317%和8211%±018%;添加量为50μg 时,添加回收率分别为8616%±510%,
8818%±415%,8913%±417%,9416%±512%,9116%±414%和9017%±415%。
表2 糖皮质激素的添加回收率和相对标准偏差(n =5)化合物添加量5μg 的回收率
添加量50μg 的回收率
氢化可的松7912%±416%8616%±510%醋酸波泥松8315%±311%8818%±415%醋酸氢化可的松8513%±614%8913%±417%醋酸氟氢可的松8617%±511%9416%±512%醋酸可的松8515%±317%9116%±414%醋酸地塞米松
8211%±018%
9017%±415%
215 样品分析
按本方法对卫生部抽检的具有去皱功能的护肤类化妆品
共23件,进行了6种糖皮质激素的测定,用保留时间和检出峰的光谱图进行定性分析,均未检出糖皮质激素。
样品分离色谱图如图3,由图3可见样品经前处理后,基质对糖皮质激素的检出干扰较少。
对于部分样品中防腐剂成分可能的干扰,可通过光谱图鉴别排除。
图3 样品的色谱图
[参考文献]
[1]郑星泉,周淑玉,周世伟1化妆品卫生检验手册[M ]1北京:化学
工业出版社,200312941
[2]化妆品卫生规范[S]120021
[3]卫生部卫生监督中心12005年国家健康相关产品卫生监督抽检工
作手册[M ]1北京:卫生部卫生监督中心文件,20051671
(收稿日期:2005-12-05)
继续教育思考题
11简述突发性化学危害事件应急检测技术和仪器设备?21空气质量卫生监测主要开展哪些项目?。