酶与蛋白质工程实验及复习题
蛋白质工程重点
一、名词解释1、蛋白质工程（Protein Engineering）——以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过化学、物理和分子生物学的手段进行基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类对生产和生活的需求的工程技术。
2、结构模体（supersecondary structure，motif）——介于蛋白质二级结构和三级结构之间的空间结构,指相邻的二级结构单元组合在一起，彼此相互作用，排列形成规则的、在空间结构上能够辨认的二级结构组合体，并充当三级结构的构件（block building），其基本形式有αα、βαβ和βββ等。
3、结构域（domain）——是在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区，它是相对独立的紧密球状实体。
4、蛋白质的折叠(protein folding)——从体内新生的多肽链或体外变性的多肽链的一维线性氨基酸序列转化为具有特征三维结构的活性蛋白质的过程。
5、分子伴侣（molecular chaperone）——一大类相互之间没有关系的蛋白质，它们具有的共同功能是帮助其他含蛋白质的结构在体内进行非共价的组装和卸装，但不是这些结构在发挥其正常的生物学功能时的永久组成部分。
6、晶胞(Unit cell)——空间点阵的单位（大小和形状完全相同的平行六面体），是晶体结构的最小单位。
7、核磁共振现象（nuclear magnetic resonance ，NMR）——指核磁矩不为零的核，在外磁场的作用下，核自旋能级发生塞曼分裂(Zeeman splitting)，共振吸收某一特定频率的射频辐射（radio frequency, RF）的物理过程。
8、化学势（位）移（）——在有机化合物中，各种氢核周围的电子云密度不同（结构中不同位置）共振频率有差异，即引起共振吸收峰的位移，这种现象称为化学位移。
9、耦合常数（J）——由于自旋裂分形成的多重峰中相邻2峰间的距离。
酶工程与蛋白质工程
酶工程与蛋白质工程酶工程与蛋白质工程是现代生物技术的重要领域，它们以分子水平为基础，通过基因工程技术来改造酶和蛋白质。
酶工程主要研究酶的结构与功能关系以及酶催化反应机理，以此来优化酶的性质和功能；而蛋白质工程则致力于蛋白质的高表达、纯化和改造，进而实现分子水平的控制和利用。
两者交叉融合，共同应用于工业、医药、环保和食品等各个领域，促进了生物技术的发展和推广。
一、酶工程简介酶是一种生物催化剂，具有极高的选择性和催化效率。
酶工程旨在通过对酶的分子结构和催化机理的研究，优化酶的性质和功能，使其在特定条件下能够更高效地催化反应。
比如，通过改变酶的氨基酸序列，可以实现酶催化活性和稳定性的提高。
再比如，通过引入新的催化中心或变异剂，可以改变酶的底物特异性和反应特性。
这些优化方法可以显著提高酶的效率和选择性，为实现工业生产和科学研究提供了有效手段。
酶工程的具体步骤如下：1. 酶的筛选和分离。
这个步骤是酶工程的基础，通常需要从自然界中分离出能够催化特定反应的酶。
现代酶工程技术一般采用高通量筛选法，通过分子筛、高速离心、色谱法等方法来分离出酶的纯品。
2. 酶的分子结构分析。
这个步骤是为了了解酶的分子结构和功能关系，找到优化方案的基础。
目前，常用的酶的分析方法有X射线晶体学和核磁共振法。
3. 酶的基因工程改造。
通过基因工程技术，改变酶的氨基酸序列和三维结构，使其获得更高的活性和稳定性。
常用的方法有扩展、交换和修饰等方法。
4. 酶的活性和特性检测。
通过活性酶测定、底物特异性、pH和温度对酶催化反应的影响等方法来检测酶的改造效果。
5. 酶的产量提高。
通过使用表达载体、调节生产菌株的生长条件等方法，使酶的产量达到最高。
二、蛋白质工程简介蛋白质工程是将目标蛋白基因从生物体内放大、纯化、定位和表达，以达到高效率和高纯度的目的。
主要应用于药物研发、工业化生产、分子诊断和分子工业等领域，对于制造可溶性蛋白、表达蛋白、纯化蛋白和修饰蛋白等方面都发挥着重要作用。
蛋白质工程部分期末习题
蛋白质工程期末复习题一、名词解释（每题4分，共20分）1、蛋白质的分子设计：从分子、电子水平上，通过数据库等大量实验数据，结合现代量子化学方法，通过计算机图形学技术等设计新的蛋白质分子。
2、蛋白质的化学修饰：通过各种方法使蛋白质分子的结构发生某些改变，从而改变蛋白质的某些特性和功能的技术过程称为蛋白质的化学修饰。
3、亲和标记：试剂对蛋白质分子中被修饰部位的专一性修饰，为亲和标记或专一性的不可逆抑制作用。
4、折叠病：蛋白质分子的氨基酸序列没有改变，只是其结构或者说构象有所改变引起的疾病。
如老年性痴呆症、帕金森氏症以及某些肿瘤。
5、透析：利用蛋白质等大分子不能通过半透膜的性质，使蛋白质和其它小分子物质如无机盐单糖等分开。
二、单项选择题（每题2分，共30分）1、不属于蛋白质空间结构的基本组件的是（D）A α螺旋B β层C 环肽链D 结构域2、分子遗传学发展了以（B）为中心的基因操作技术，为通过基因修饰改造蛋白质提供了工具。
A PCR技术B 定点诱变C 分子克隆D 盒式突变3、下列不属于蛋白质结构测定的技术是（D）A X射线晶体衍射技术B 核磁共振波谱技术C 生物信息学预测蛋白质结构D缺失突变技术4、蛋白编码基因的定向诱变属于第（B ）代基因工程A 一B二C三D四5、通过增加内氢键数目可以改善蛋白质设计的哪项目标（A ）A 热稳定性B对氧化的稳定性C对重金属的稳定性 D pH稳定性6、蛋白质分子设计的关键是（B）A 建立所研究蛋白质的结构模型B 找出对所要求的性质有重要影响的位置C 预测突变体的结构D 定性或定量计算优化所得到的突变体结构是否具有所要求的性质7、蛋白质工程的最终目的是( C )A 开发新产品B 创造新理论C 制造具有新性能的新蛋白质结构D 研究蛋白质的氨基酸组成8、蛋白质分子的完全从头设计属于（C）A 小改B 中改C 大改D 没改9、TNBS（2，4，6-三硝基苯磺酸）是（B ）的化学修饰常用试剂。
酶工程期末试题及答案
酶工程期末试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 酶工程中常用的酶固定化方法不包括以下哪种？A. 吸附法B. 共价结合法C. 包埋法D. 离心法答案：D2. 下列哪项不是酶的催化特性？A. 高效性B. 专一性C. 可逆性D. 需要高温答案：D3. 酶工程中，酶的来源不包括以下哪种？A. 植物B. 动物C. 微生物D. 无机物答案：D4. 酶的活性中心通常包含哪些元素？A. 金属离子B. 氨基酸残基C. 核酸D. 糖类答案：B5. 下列关于酶工程的描述，错误的是？A. 酶工程是生物技术的一部分B. 酶工程可以提高酶的稳定性C. 酶工程可以提高酶的催化效率D. 酶工程不能改变酶的催化特性答案：D6. 酶工程中，酶的固定化技术主要用于什么目的？A. 提高酶的稳定性B. 增加酶的催化效率C. 便于酶的回收和重复使用D. 以上都是答案：D7. 下列哪种酶在工业生产中应用最广泛？A. 淀粉酶B. 蛋白酶C. 纤维素酶D. 脂肪酶答案：A8. 酶的催化效率通常比无机催化剂高多少倍？A. 10倍B. 100倍C. 1000倍D. 10000倍答案：D9. 酶的专一性是由什么决定的？A. 酶的活性中心B. 酶的氨基酸序列C. 酶的三维结构D. 酶的浓度答案：A10. 酶工程中，酶的催化反应通常在什么条件下进行？A. 高温B. 高压C. 常温常压D. 真空答案：C二、填空题（每题2分，共20分）1. 酶工程是通过___________和___________技术，对酶进行改造和应用的一门学科。
答案：基因工程、蛋白质工程2. 酶的活性中心通常由___________和___________组成。
答案：氨基酸残基、金属离子3. 酶的催化作用是通过___________和___________来实现的。
答案：降低反应活化能、提供反应途径4. 酶工程中，酶的固定化方法主要有吸附法、___________和___________。
10生物技术蛋白质与酶工程复习题与答案
一. 名词解释1．生物酶工程又称高级酶工程它是酶学与现代分子生物学技术相结合的产物。
2．蛋白质工程蛋白质工程就是运用蛋白质结构功能和分子遗传学知识，从改变或合成基因入手，定向地改造天然蛋白质或设计制造新的蛋白质。
3.多核糖体把细胞放在极其温和的条件下处理，就能得到几个到几十个核糖体在一条mRNA上结合起来的形态4.固定化酶水溶性酶经物理或化学方法处理后，成为不溶于水的但仍具有酶活性的一种酶的衍生物。
在催化反应中以固相状态作用于底物5.酶反应器以酶或固定化酶为催化剂进行酶促反应的装置。
6．酶工程又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术7.生物传感器对生物物质敏感并将其浓度转换为电信号进行检测的仪器。
8. motif (模体)指的是蛋白质分子结构中介于二级结构与三级结构之间的一个结构层次，又称超二级结构9. domain功能域生物大分子中具有特异结构和独立功能的区域,特别指蛋白质中这样的区域10.PDB蛋白质数据库（Protein Data Bank,PDB）是一个生物大分子，11. DNA shuffling体外同源重组技术。
通过改变单个基因原有的核苷酸序列创造新基因，并赋予产物以新功能。
12.生物催化剂是指生物反指应过程中起催化作用的游离或固定化细胞各游离或固定化酶的总称13.必需基团有的基团既在结合中起作用，又在催化中起作用，所以常将活性部位的功能基团统称为必需基团(essential group)14.活性中心。
酶的活性中心是酶与底物结合并发挥其催化作用的部位。
15.有性PCR dna改组16.DNA改组通过改变单个基因原有的核苷酸序列创造新基因，并赋予产物以新功能。
17.免疫传感器偶联抗原/抗体分子的生物敏感膜与信号转换器组成的，基于抗原抗体特异性免疫反应的一种生物传感器。
18.易错PCR是从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行聚合酶链反应，使扩增得到的基因出现碱基配对错误，从而引起基因突变的技术过程。
皖西学院生物工程专业大三蛋白质与酶工程复习题及答案
皖西学院生物工程专业大三蛋白质与酶工程复习题及答案蛋白质与酶工程课程复习题一．名词解释：1.蛋白质工程概念:通过基因工程技术或化学修饰技术改造现有蛋白或组建新型蛋白的现代生物技术、2.蛋白质的一级结构；蛋白质多链中氨基酸残基的排列顺序3.蛋白质的二级结构：指肽链主链不同区段通过自身的相互作用，形成氢键，沿某一主轴盘旋折叠而形成的局部空间结构，是蛋白质结构的构象单元5.β－折叠:是蛋白质中的常见的二级结构，是由伸展的多肽链组成的。
6.α－螺旋:是蛋白质分子的一种基本结构7.超二级结构:在蛋白质分子中，特别是球状蛋白质中，由若干相邻的二级结构单元（即α—螺旋、β—折叠片和β—转角等）彼此相互作用组合在一起，，形成有规则、在空间上能辨认的二级结构组合体，充当三级结构的构件单元，称超二级结构。
8.三级结构是指球状蛋白质的多肽键在二级结构的基础上，通过侧链基团的相互作用进一步卷曲折叠，借助次级键维系使β－折叠α－螺旋和无规则卷曲等二级结构相互配置而形成特定的构象。
9四级结构指由相同或不同的称作亚基（ubunit）的亚单位按照一定排布方式缔合而成的蛋白质结构，维持四级结构稳定的作用力是疏水键、离子键、氢键、范得华力。
10蛋白质折叠:蛋白质可凭借相互作用在细胞环境（特定的酸碱度、温度等）下自己组装自己11蛋白质变性:是指蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改变，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失，这种现象称为蛋白质变性。
12蛋白质复性:、13回拆:所连接的肽链发生180°的反相弯曲14第二遗传密码：氨基酸顺序与蛋白质三维结构之间存在的对应关系15分子伴侣:是一类相互之间有关系的蛋白，它们的功能是帮助其他含多肽结构的物质在体内进行非共价健的组装和卸装，但不是这些结构在发挥其正常生物学功能的永久组成成分、蛋白质的化学修饰:凡通过活性基团的引入或除去，而使蛋白质一级结构发生改变的过程、19模拟酶:就是利用有机化学的方法合成一些比酶简单的非蛋白质分子，可以模拟酶对底物的络合和催化过程，既可达到酶催化的高效性，又可以克服酶的不稳定性、20生物传感器—将生物体的成份（酶、抗原、抗体、DNA、激素）或生物体本身（细胞、细胞器、组织）固定化在一器件上作为敏感元件的传感器。
蛋白质工程复习资料
蛋白质工程复习资料一级结构：蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序。
二级结构：一段连续的肽单位借助于氢键，排列成的具有周期性结构的构象。
超二级结构：相邻的二级结构单位组合在一起，彼此相互作用，行为规则排列的组合体，以同一结构模式出现在不同的蛋白质中。
结构域：二级结构和结构模体以特定的方式组织连接，在蛋白质分子中形成两个或多个在空间上可以明显区分的三级折叠实体。
三级结构：蛋白质的多肽链在各种二级结构的基础上再进一步盘曲或折叠形成具有一定规律的三维空间结构。
四级结构：由两条或两条以上具有独立三级结构的多肽链组成的蛋白质就是寡聚蛋白质分子中多肽链间通过次级键相互组合而形成的空间结构。
蛋白质的变性：天然蛋白质分子受到某些物理因素或者化学因素的影响时，会引起蛋白质天然构象的破坏，导致生物活性的降低或完全丧失的过程。
蛋白质的复性：当变性因素除去后，变性蛋白又可以重新恢复到天然构象的现象。
第二遗传密码：氨基酸顺序与蛋白质三维结构之间存在着对应关系。
分子伴侣：一类可介导蛋白质的正确折叠与装配，但并不构成被介导的蛋白质组分的蛋白。
小改：进行蛋白质修饰或基因定位突变中改：进行蛋白质分子裁剪拼接晶体：离子，原子和分子这些微粒在三维空间中周期性重复排列形成的结构。
盐析现象：蛋白质在高浓度中性盐溶液中会沉淀析出的现象。
盐溶现象：在蛋白质水溶液中加入晒量的中性盐（如硫酸铵，硫酸钠，氯化钠）会增加蛋白质分子表面的电荷，增强蛋白质分子与水分子的作用，从而使蛋白质在水溶液中的溶解度增大的现象。
蛋白质芯片：也叫蛋白质微阵列，是将大量蛋白质有规则地固定到某种介质载体上，利用蛋白质与蛋白质，酶与底物，蛋白质与其他小分子之间的相互作用检测分析蛋白质的一种芯片。
噬菌体技术：将目的基因克隆在丝状噬菌体衣壳蛋白的基因中，是外源基因产物与衣壳蛋白融合，伸展在噬菌体表面，可用来直接检测表达产物的某些活性。
蛋白质组：基因组表达的全部蛋白质及其存在方式。
生物技术在蛋白质工程中的应用考核试卷
答案：标签
3.生物技术中，CRISPR/Cas9系统来源于______。
答案：细菌
4.蛋白质的折叠是由其______决定的。
答案：氨基酸序列
5.蛋白质工程中，常用的蛋白质表达系统有原核表达系统和______。
答案：真核表达系统
B.双向电泳
C.蛋白质芯片
D.串联质谱
8.以下哪些生物技术可以用于基因编辑？（）
A. CRISPR/Cas9
B.锌指核酸酶
C. TALEN
D. PCR
9.以下哪些方法可以用来提高蛋白质的表达量？（）
A.优化启动子
B.使用强化的终止子
C.添加融合标签
D.调整培养条件
10.蛋白质工程中，以下哪些方法可以用于设计蛋白质突变体？（）
3.基因编辑技术在蛋白质工程中用于精确改造基因序列，CRISPR/Cas9简单、高效、成本低，但可能存在脱靶效应；ZFNs和TALENs精确性高，但设计和构建复杂、成本高。
4.以血红蛋白为例，通过同源建模预测其空间结构，再结合分子对接方法分析其与氧分子的结合模式，从而推测其运输氧气的功能。
A.氨基酸序列
B.环境条件
C.翻译后修饰
D.蛋白质浓度
5.以下哪些是蛋白质工程在医药领域的应用？（）
A.生产治疗性抗体
B.开发疫苗
C.设计药物载体
D.诊断疾病
6.常见的蛋白质纯化方法包括哪些？（）
A.离子交换层析
B.凝胶过滤
C.亲和层析
D.电泳
7.以下哪些技术可以用于蛋白质组学研究？（）
A.质谱分析
B.改变蛋白质的空间结构
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实验部分
稀释倍数意思就是你得到的最后的活性要换算成最初样品的活性。
比如粗酶液是30ml，再取1ml稀释到10ml（最后用移液枪取10ul做微量活性测定）。
那么稀释倍数就是
10/1*30=300。
公式里面就有两个体积，一个是反应总体积，一个是酶样液体积。
反应总体积是指你最后测定时候，每个试管最终的体积3 ml酶样液体积是你加入试管的SOD的体积，比如微量法就是0.01ml(10ul)。
样液速率是30秒的，需乘以2。
理论部分复习题大纲
（给大家的只是复习的大纲，还有一些由于时间仓促，上课时强调的重点内容有些没在这个大纲上，但仍然是考试内容，希望大家能认真复习。
）
一．名词解释8个，每题3分
1.酶工程
2.凝胶过滤层析
3.离子交换层析
4.亲和层析
5.酶的生产
6.酶的改性
7.生物酶工程
8.化学酶工程
9.酶分解代谢物阻遏作用
10.酶生物合成的诱导作用
11.酶生物合成的反馈阻遏作用
12.密度梯度离心
13.等密度梯度离心
14.酶分子修饰：
15.酶大分子结合修饰
16.酶侧链基团修饰
17.酶反应器
18.流化床反应器鼓
19.泡式反应器
20.定点诱变技术
21.蛋白质工程
二．填空每空1分10分
1.化学酶工程研究的主要内容是(酶的制备)、(酶的分离纯化)、（酶与细胞的固定化技术）、(酶分子修饰)、（酶反应器）和(酶的应用)。
2.在酶的发酵生产中，为提高产酶率和缩短发酵周期，最理想的合成模式是（延续合成型）。
3.常用的酶或蛋白质干燥的方法有真空干燥、(冷冻干燥)、气流干燥、（喷雾干燥）和吸附干燥。
4.（葡萄唐氧化酶）是一种有效地食品除氧保鲜剂。
5. 通过检测（）的酶活性，可以诊断癌症。
6.（X-射线衍射法）是测定蛋白质晶体结构的极其重要方法。
7.确定蛋白质分子在溶液中结构信息的方法是（核磁共振技术）。
8.酶反应器的操作方式可分为（）反应器、（）反应器和流加分批式反应器。
9.细胞固定化的方法有（吸附法）和（包埋法）。
10．1982年，Thomas R.Cech等人发现四膜虫细胞的26S rRNA前体具有自我剪接功能，将这种具有催化活性的天然RNA称为( )。
11．酶的生产方法主要有（），（）和（）。
12 微生物发酵产酶中使用的两种培养基是（）和（）。
13 针对胞内酶的分离提取，细胞破碎的方法有（）、物理破碎、（）
和（）。
14.利用有机溶剂沉淀法分离酶或蛋白质时常用有机溶剂有丙酮、（）、
（）和（）。
15.离子交换剂由（）、（）和（）构成。
16.凝胶过滤层析中常用的凝胶材料有（）、（）和
（）。
17. 常用的蛋白质序列数据库英文简写：（）和（）。
18.1926年,美国康乃尔大学的Sumner博士从刀豆中提取出( )结晶，并证明
具有蛋白质的性质。
19．常见产酶微生物种类（）、（）、（）和（）。
18. 酶的主要提取方法有酸提取法、（）、（）和（）。
19. 吸附层析中常用的强吸附剂：（）和（）。
20．离子交换层析中常用的阳离子交换基团是（）和
（）。
21．典型的双水相萃取系统：（）和（）。
22. 常用的基因组数据库英文简写：（）、（）和
（）。
23．过滤分离的种类有、、和。
24．根据酶分子大小、形状的不同可选择的分离方法有、
或。
25．酶的固定化方法有、、和。
26. 固体发酵产酶的方法有、和。
27. 密度梯度离心常用的梯度介质是和。
28. 凝胶过滤层析中凝胶可分为凝胶、凝胶和凝胶。
29. 典型的双水相萃取系统：和。
30. 根据酶分子电荷性质的不同可选择的分离法是或。
31. 酶制剂有四种类型即液体酶制剂，酶制剂，酶制剂和
酶制剂。
32．CO2超临界萃取的临界温度，临界压力。
33.1902年，亨利根据蔗糖酶催化蔗糖水解的实验结果，提出（）学说。
34.1960年，雅各和莫诺德提出了（）学说，阐明了酶生物合成的基本调节机制。
三．选择（5个，每个2分）
1.粗滤是借助于过滤介质截留悬浮液中直径（）的大颗粒，使固形物与液体分离的技术。
A、大于1μm
B、大于2μm
C、大于4μm
D、大于6μm
2.微滤是以微滤膜作为过滤介质的膜分离技术，所截留的颗粒直径为（）。
A、大于2μm
B、0.2μm ~2μm
C、0.1μm ~0.2μm
D、小于0.2μm
3.等密度梯度离心常用的介质是（）。
A、氯化铯
B、氯化钠
C、甘油
D、溴化氰
4.密度梯度离心常用的介质是（）。
A、氯化铯
B、氯化钠
C、蔗糖
D、葡萄糖
5.密度梯度离心可使（）比较接近的物质得以分离。
A、密度
B、沉降系数
C、形状
D、颗粒大小
6.蛋白质结构数据库是（）
A、PDB
B、GenBank
C、SWISS-PROT
D、PIR
7.蛋白质序列数据库是
A、PDB
B、GenBank
C、SWISS-PROT
D、DDBJ
8.蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（）
A、氨基酸结构
B、蛋白质空间结构
C、肽链结构
D、基因结构
9. 关于蛋白质工程的说法错误的是（）
A. 蛋白质工程能定向改造蛋白质的分子结构，使之更加符合人类的需要
B. 蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子结构
C. 蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
D. 蛋白质工程又称为第二代基因工程
10. 蛋白质工程的基本操作程序正确的是（）
①蛋白质分子结构合成
②DNA合成
③mRNA合成
④蛋白质的预期功能
⑤根据氨基酸的序列推出脱氧核苷酸的序列
A. ①→②→③→④→⑤→①
B. ⑤→④→③→②→①→②
C. ④→①→⑤→②→③→①
D. ②→③→⑤→①→②→④
11. 蛋白质工程制造的蛋白质是（）
A. 天然蛋白质
B. 稀有蛋白质
C. 自然界中不存在的蛋白质
D. 血红蛋白质
四．简答6个，共36分
1、酶分离纯化的一般技术路线？
2、氨基的化学修饰反应有哪些？使用的修饰剂有哪些？
3、SDS- PAGE原理及操作过程？
4、产酶微生物优良菌种的筛选步骤？
5、修饰酶的性质？
6、密度梯度离心与等密度梯度离心的区别？
7、固定化酶和细胞中应用的载体种类及特点？
8、大分子(共价)修饰酶的操作过程，并列举两种水溶性大分子修饰剂？
9、层析方法根据分离机理的不同可分为几种，各自的依据是什么？
10、判断一个分离纯化方法的优劣的两个指标，计算公式及各自表示的意义？
11、固定化应遵循的原则？
12、连续流搅拌反应器定义及优缺点？
13、用于酶的生产的微生物有哪些特征？
14.图示微生物发酵产酶的工艺过程？
15.层析聚焦的操作过程？
16.固定化微生物细胞的特点？
17.固定化植物细胞的特点？
18.固定化原生质体的特点？
19.酶的大分子结合修饰的过程及作用？
20.酶分子侧链基团修饰的反应有几种？可作用得侧链基团分别有哪些（每种修饰反应写出两种可作用的侧链基团即可）？
21.M13 DNA寡核苷酸诱变的过程?
22.蛋白质体外定向进化的原理?
23. 图示酶生物合成的四种模式？
24．根据有效成分和杂质之间理化性质的差异，酶分离纯化方法的选择依据有哪些？
五．论述
1.结合所学酶分离提取的相关知识，设计从仙人掌中采用离子交换层析法分离提取SOD的实验方案。
已知SOD的等电点为4-6，要求写出离子交换剂的选择和处理方法及离子交换层析的操作过程。
2.现阶段蛋白质工程亟待解决的一个主要问题是克隆基因的表达方法,即找到理想的宿主表达系统。
目前常用的表达系统有细菌表达系统,酵母表达系统，昆虫表达系统哺乳动物表达系统，简述这四种表达系统的优缺点。
3.结合酶生物合成的三种调节机制，简述提高酶产量的措施？要求写出三种酶生物合成的机制的特点及提高酶产量的具体方法？
4.酶反应器多种多样。
依据其结构的不同，有搅拌罐式反应器，填充床反应器，流化床反应器，鼓泡式反应器，膜反应器，喷射式反应器。
图示各种反应器的构造并简述各种反应器的特点。
5.蛋白质工程中定位诱变通常需要了解目的序列的详细情况，但当缺乏这方面的资料和信息
时，定位诱变方法的利用旧受到限制。
在这种情况下可利用随机诱变方法研究目的蛋白或目的核酸序列的结构。
试论述随机诱变的工作原理及存在的问题？
6.酶的提取与分离纯化是酶的生产中最早采用并一直沿用至今的生产方法，在采用其他方法进行酶的生产过程中，也必须进行酶的提取和分离纯化。
在酶学研究方面，酶的提取和分离纯化是必不可少的环节。
根据你所学内容谈谈如何制定合理的酶分离纯化程序？如何评价一个分离纯化程序的优劣？
7.简述四种常用酶固定化方法的优缺点？
8.比较动物植物和微生物在细胞结构、培养基和培养方式上的不同?。