大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-1

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INSM1在胃肠胰神经内分泌肿瘤诊断中的价值

INSM1在胃肠胰神经内分泌肿瘤诊断中的价值

81.3
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胃 肠 道 和 胰 腺 是 神 经 内 分 泌 肿 瘤 的 好 发 部 位[1],WHO(2017)内分泌器官肿瘤分类将发生于该 部位的神经内分泌肿瘤统称为胃肠胰神经内分泌肿 瘤 (gastroenteropancreaticneuroendocrineneoplasms, GEPNEN)。神经内分泌肿瘤的诊断依据典型的特 征即器官样结构、纤细的纤维血管分隔和丰富嗜酸 性胞质,同时结合神经内分泌分化标志物进行诊断。 目前外科病理中常用的神经内分泌标志物有 CgA、 Syn和 CD56,然而这些标志物并不具有较高的敏感 性和特异性。胰岛素瘤相关蛋白 1(insulinomaasso ciatedprotein1,INSM1)是最近发现的一种用于诊 断神经内分泌肿瘤的标志物,文献报道 INSM1在肺 和胸腔神经内分泌肿瘤、头颈部神经内分泌肿瘤的 诊断中具有非常高的敏感性和特异性。本文应用免 疫组化法检测 INSM1在 GEPNEN中的表达,旨在 探讨其在 GEPNEN诊断中的应用价值。
王劲松,王 彬,苟思琪,杨路路,齐 琼,黄文斌
摘要:目的 探讨胰岛素瘤相关蛋白 1(insulinomaassociatedprotein1,INSM1)在胃肠胰神经内分泌肿瘤(gastroenteropancreatic neuroendocrineneoplasms,GEPNEN)中的表达及其在诊断中的应用价值。方法 应用免疫组化 EnVision法检测 48例 GEP NEN和 40例胃肠胰非神经内分泌肿瘤中 INSM1、CgA、Syn和 CD56的表达,并分析其与 GEPNEN临床病理特征的关系。结 果 48例 GEPNEN中,INSM1的阳性率为 813%,而 CgA、Syn和 CD56的阳性率分别为 50%(24/48)、899%(43/48)和 667%(32/48),INSM1、CgA、Syn和 CD56在胃肠胰非神经内分泌瘤中的阳性率分别为 0(0/40)、100%(4/40)、125%(5/ 40)和 10%(4/40),INSM1、CgA、Syn和 CD56在 GEPNEN中的表达均明显高于胃肠胰非神经内分泌瘤中的表达(P<005); INSM1主要表达于食管、胰腺和结直肠神经内分泌肿瘤中,与 CgA、Syn和 CD56表达不同,INSM1表达与 GEPNEN分级无关 (P>005)。INSM1对 GEPNEN诊断的灵敏度高于 CgA,特异度与 CgA、Syn和 CD56差异无统计学意义(P>005)。结论 INSM1属于新的神经内分泌标志物,可与 CgA、Syn和 CD56联合检测用于 GEPNEN的诊断。 关键词:神经内分泌肿瘤;胰岛素瘤相关蛋白 1;CgA;Syn;CD56 中图分类号:R735 文献标志码:A 文章编号:1001-7399(2019)04-0407-05 doi:10.13315/j.cnki.cjcep.2019.04.007

内毒素脂多糖对胰岛细胞株INS-1细胞活力及胰岛素分泌的影响

内毒素脂多糖对胰岛细胞株INS-1细胞活力及胰岛素分泌的影响

内毒素脂多糖对胰岛细胞株INS-1细胞活力及胰岛素分泌的影响杜世春;林宁;葛勤敏;苏青【摘要】Objective To investigate the expression of Toll-like receptor 4 (TLR4) on INS-1 cells, and explore the effects of lipopolysaccharide ( LPS) on viability and insulin secretion of INS-1 cells and expression of TLR4 on INS-1 cells. Methods The expression of TLR4 mRNA and protein in INS-1 cells with or without treatment with 1 mg/L LPS was detected by RT-PCR and Western blotting. After treatment with different mass concentrations of LPS (0.01 mg/L, 0. 1 mg/L, 1 mg/L, 5 mg/L and 10 mg/L) , the viability of INS-1 cells was detected by CCK8 method, and the insulin secretion of INS-1 cells was determined by GSIS. Results RT-PCR and Western blotting revealed that the expression of TLR4 mRNA and protein in INS-1 cells was significantly increased after treatment with LPS (P < 0. 05) . The viability of INS-1 cells was inhibited in a dose and time dependent manner after treatment with 0. 1 to 10 mg/L LPS (P <0. 05). The insulin secretion of INS-1 cells was significantly decreased after treatment with 1 mg/L LPS (P < 0.05). Conclusion The viability of INS-1 cells is inhibited, and the insulin secretion function of INS-1 cells is decreased after treatment with LPS of certain concentrations. The expression of TLR4 mRNA and protein in INS-1 cells is increased after treatment with LPS. Pancreatic β cells may be damaged by endotoxin in a direct manner.%目的观察Toll样受体4(TLR4)在胰岛细胞株(INS-1)中的表达情况,探讨内毒素脂多糖(LPS)对INS-1细胞活力、胰岛素分泌功能以及TLR4表达的影响.方法采用RT-PCR技术和Western blotting 方法检测INS-1细胞和经1 mg/L LPS刺激的INS-1细胞中TLR4 mRNA和蛋白的表达变化;分别用不同质量浓度的LPS (0.01、0.1、1、5、10 mg/L)刺激INS-1细胞,CCK8法检测细胞活力,GSIS法测定胰岛素分泌功能.结果 RT-PCR和Western blotting检测结果显示:LPS刺激使INS-1细胞TLR4mRNA和蛋白的表达显著增加(P<0.05).当LPS在0.1~ 10 mg/L时,INS-1细胞活力受到抑制,且呈剂量时间依赖性(P<0.05);1 mg/L LPS刺激可使高糖环境下的INS-1细胞的胰岛素分泌量显著减少(P<0.05).结论一定浓度范围内的LPS刺激可抑制INS-1细胞活力,并减少高糖培养条件下细胞胰岛素的分泌量.LPS刺激能上调INS-1细胞TLR4 mRNA和蛋白的表达.内毒素可能通过直接作用损伤胰岛β细胞.【期刊名称】《上海交通大学学报(医学版)》【年(卷),期】2012(032)012【总页数】4页(P1577-1580)【关键词】Toll样受体4;脂多糖;INS-1细胞株;β细胞功能【作者】杜世春;林宁;葛勤敏;苏青【作者单位】上海交通大学医学院附属新华医院内分泌科,上海200092;上海交通大学医学院附属新华医院内分泌科,上海200092;上海交通大学医学院附属新华医院急诊科,上海200092;上海交通大学医学院附属新华医院内分泌科,上海200092【正文语种】中文【中图分类】R587脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是细菌细胞外膜的一种内毒素。

SIRT1-FoxO-自噬通路研究进展

SIRT1-FoxO-自噬通路研究进展

SIRT1-FoxO-自噬通路研究进展徐俊;黄秀兰【摘要】FoxO as an important transcription factors,can be deacetylated by SIRT1 (a sort of deacetylases),SIRT1-FoxO-au-tophagy pathway is likely to play a vital role in some diseases,e.g.diabetes,aging,obesity,cancer,cardiovascular diseases and muscle atrophy,etcetera.This paper aims to analy transcription-al regulation mechanism of FoxO,and reviews the progress of SIRT1-FoxO-autophagy pathway.%FoxO是一类重要自噬调控因子,其活性主要受SIRT1的去乙酰化调节。

SIRT1-FoxO-自噬通路可能为糖尿病、衰老、肥胖、肿瘤、心血管疾病、肌肉萎缩等多种疾病提供新的防治策略。

该文旨在分析 FoxO 的转录调节机制,综述SIRT1-FoxO-自噬通路的研究进展。

【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2014(000)007【总页数】4页(P901-904)【关键词】自噬;FoxO;SIRT1;去乙酰化;疾病;通路【作者】徐俊;黄秀兰【作者单位】中央民族大学中国少数民族传统医学国家民委-教育部重点实验室,北京 100081;中央民族大学中国少数民族传统医学国家民委-教育部重点实验室,北京 100081【正文语种】中文【中图分类】R-05;R329.24;R339.38;R394.2;R587.1;R589.2;R73;R54自噬是真核细胞内的蛋白质大分子、细胞器等在自噬溶酶体的作用下被降解的过程。

INSM1在小细胞肺癌的诊断意义

INSM1在小细胞肺癌的诊断意义

小细胞肺癌(Small Cell Lung Cancer,SCLC)占所有肺癌发病率的14-20%[1]。

其临床特点为恶性程度高、生长迅速、侵袭能力强、预后差。

Insulinoma Associated-1(IA-1/INSM1)是一类含有锌指结构的转录因子,已有研究表明在神经母细胞瘤、宫颈小细胞癌等多种神经内分泌肿瘤都有异常表达[2-3]。

本实验旨在通过免疫组织化学方法检测INSM1蛋白在SCLC组织中的表达水平,分析INSM1作为诊断SCLC标志物的可行性。

1 材料与方法1.1 材料收集大庆市人民医院病理科2017年12月~2019年9月存档的诊断为SCLC的石蜡包埋标本55例,所有患者术前均未行放疗、化疗。

1.2 试剂与方法一抗:INSM1鼠单克隆抗体(sc-271408)购自Santa Cruz公司(稀释度1:300);CD56,Syn,CgA抗体及免疫组化SP试剂盒均购自福州迈新生物公司。

PBS 代替一抗作阴性对照,已知阳性标本作为阳性对照。

1.3 结果判断INSM1定位于细胞核, CD56定位于细胞膜,CgA和Syn定位于细胞质。

根据肿瘤细胞的染色阳性比例进行免疫组化结果判断。

阳性细胞<5%为阴性,≥5%为阳性。

1.4 统计方法采用SPSS 22.0软件进行统计学分析; 两组间表达率比较采用,采用χ2检验或Fisher确切概率法,检验水准α=0.05。

2 结果INSM1、CgA、Syn和CD56在SCLC的阳性率分别为90.90%(50/55)、72.73%(40/55)、81.82%(45/55)、87.28%(48/55)。

其中,INSM1在SCLC组织的阳性率显著高于C g A,差异有统计学意义(χ2=6.111,P=0.013);与Syn和CD56阳性率的差异无统计学意义(P 值均>0.05),见表1。

3 讨论SCLC起源于较大支气管的Kulchitsky细胞(嗜银细胞),是肺部神经内分泌癌中最常见的肿瘤类型。

SD大鼠1型糖尿病动物模型的建立

SD大鼠1型糖尿病动物模型的建立

・218・・实验研究・SD大鼠1型糖尿病动物模型的建立唐山钢铁集团有限责任公司医院(063020)常利民上海交通大学医学院附属第九人民医院蓑蓑言妻姜主妻萎【摘要】目的探讨制作理想糖尿病动物模型的方法。

方法采用空腹腹腔一次性注射65mg/kg链脲佐菌素的方法,建立sD大鼠1型糖尿病模型。

结果造模1周后测血糖均高于16.7mn帕I/L。

持续观察8周,血糖值始终在建模初期高血糖水平上波动,未见到复转,并出现典型的“三多一少”症状,胰腺符合糖尿病成模动物胰腺病理变化。

结论采用空腹腹腔一次性注射65mg/kg链脲佐菌素的方法复制出1型糖尿病模型,具有造模方法简便、用药量小、药物毒性较低、胰岛B细胞损害特异性高等优点,可应用于糖尿病及其并发症研究的各个领域。

【关键词】糖尿病,1型;模型,动物;链脲佐菌素Establishmentoftype1diabetesratmodelinducedbystrep蝴a翻NGLi-min’,DONrG胁一sheng,X【,Hua,WANGL“一∥携g,DAICAuan-chang,ZHULian,WANGYi-min.%,培妣纰IronandS纰fCo.,Ltd.Host,/一to./,Hebe/063020,China【Al麓traet】ObjectiveToestablish嬲idealtype1diabetesmeUitusSDratsn如del.Methods∞ratsw虢in—joetedintraperitoneallywith65mg/kgstreptozotoeinoncetoinducehyperglycemia.ResultsOneweekafterinducedbystrepto∞tocin(STZ),thebloodglucoseoftheexperimentalgroupwerehigherthan16.7rranol/L.Duringthe8weeksobservation,thebloodgltlgx】seoftheexperimentalgroupwerestablyhigherthan16.7mn的I/L.Morphologicalinvestigation011parlclP.ssshowedthereductionofislets,lossofpcellsintheexperimentalgroup.C0ndllsi帅m既一perimentprovidedanidealtype1diabetesmeUitusSDratsnxxJd,【KeyWOI'凼】Diabetesmellitus,typel;Modd,animal;蛳t0跹舡)cin随着人们生活水平的提高,糖尿病的发病率呈上升趋势,糖尿病的相关研究越来越受到人们的重视,而建立相应的动物模型是研究糖尿病的重要手段之一。

肺神经内分泌肿瘤中insm1的表达及其临床意义

肺神经内分泌肿瘤中insm1的表达及其临床意义
饶 秋,男,教 授,博 士 生 导 师,通 讯 作 者。Email:rao qiu1103@126.com
档的石蜡包埋标本 196例,包括肺小细胞癌 26例, 大细胞神经内分泌癌 23例,肺类癌 23例,肺腺癌 72例,肺鳞癌 52例。所有标本均行 HE染色,并且 经本院两位高年资病理医师确诊。 1.2 主要试剂 一抗:鼠抗人单克隆抗体 INSM1 购自 SantaCruz公司(稀释度 1∶300);即用型单抗 Syn、CgA、CD56,均 购 自 北 京 中 杉 金 桥 公 司。HRP 标记的鼠兔通用型二抗及 DAB显色液均购自 DA KO公司。 1.3 免疫组化 免疫组化染色采用 EnVision两步 法,3~4μm厚石蜡切片经脱蜡,水化,行高温高压 抗原 修 复 (10% 柠 檬 酸 盐 抗 原 修 复 缓 冲 液,pH 60);每张切片滴加 50μL一抗,4℃孵育过夜,PBS 冲洗;滴 加 50μLEnVision试 剂,室 温 下 孵 育 30 min;PBS冲洗,DAB显色,苏木精衬染。 1.4 结果判读 INSM1阳性定位于细胞核,Syn和 CgA阳性定位于细胞质,CD56阳性定位于细胞质和 细胞膜,>1%的肿瘤细胞着色即判读为阳性。 1.5 统计学分析 采用 STATA120软件进行统 计学分析,并采用 Graphpad70制图,P<005为差 异有统计学意义。采用 χ2 检验分析 INSM1在不同 类别肿瘤中的表达差异,采用确切概率法分析 IN SM1与传统 抗 体 的 敏 感 性 和 特 异 性 的 差 异,采 用
1 材料与方法
1.1 材料 收集 2010~2018年中国人民解放军东 部战区总医 院 (原 南 京 军 区 南 京 总 医 院 )病 理 科 存
接受日期:2020-01-12 基 金 项 目:国 家 自 然 科 学 基 金 面 上 项 目 (81872095)、国 家 自 然 科 学

甲状旁腺素相关肽对INS-1细胞株胰岛素分泌的影响

甲状旁腺素相关肽对INS-1细胞株胰岛素分泌的影响

Lj AN G u s ng , UE H a—he X Yaom i , — ng ZH O N G — a y hu
( De arme t f En c ieS cein,h nhA f iitd H op t l Gu n xi . p t n dorn er t o o t eNit f l e s ia , a g a
与10pmollpthrp干预组比较各组ins1细胞内ca浓度经pthrp处理的各组细胞ca1pmoll10pmoll100pmollpthrp干预的各组细胞ca01提示pthrp可能具有浓度依赖性促进ins1细胞cains1细胞胰岛素及pdx1表达检测根据上述结果提及100pmollpthrp干预观察点进行各组细胞westernblot检测胰岛素及pdx1表达图提示100pmollpthrp干预组中胰岛素及pdx1表达显著高于空白对照组p胰岛素pdx1在各组细胞中的表达目前认为pthrp是一种细胞自分泌及旁分泌同时作用的一类细胞因子它们在ca通路平衡和细胞新陈代谢过程中发挥重要作用
岛素 分 泌作 用 , ua3 A 荧光 负荷 技 术 测 定 C 。Wetr lt 测 细胞 胰 岛素 及 胰 腺 十 二 指 肠 同 源 框 1 P X 1 的表 达 。 F r一/ M a senBo 检 ( D -)
结 果 P Hr T P对 I - NS1细胞 葡 萄糖 刺 激 胰 岛素 分 泌 能 力及 c “ 负荷 呈 浓度 依 赖 性 关 系。P a THr P组 上 调 胰 岛素 及 P X 1 达 , D 一表
P THr 可 以促 进 胰 岛 0细 胞胰 岛 素 分泌 及 合 成 。 P
中 图分 类 号 : 3 5 5 7 R 6. 8
文 献标 识 码 : A

大鼠二型糖尿病造模方法

大鼠二型糖尿病造模方法

大鼠2型糖尿病模型建立方法讨论专业:药理班级:六班姓名:刘畅学号:150517摘要:据国际糖尿病联合会(InternationalDiabetesFederation,IDF)估计,现在全球约8.3%的成年人患有糖尿病。

到2035年,该病患者人数预计会上升至5.92亿。

在2013年,全球约有3.82亿成年人患有糖尿病,中国的糖尿病患者人数居全球之首,调查统计人数为1.14亿。

糖尿病导致约510万人死亡,平均大约每6秒钟就有1人死于糖尿病。

2012年1月9日,中国健康教育中心公布的“中国慢病监测及糖尿病专题调查”结果显示,我国18岁及以上居民糖尿病患病率为2。

6%,60岁以上老年人患病率高达19.6%。

因此,为治疗糖尿病建立简单、稳定、经济的动物模型非常重要。

因2型糖尿病患者人数占糖尿病患病人数的90%以上,本文主要综合讨论高糖高脂饲料联合链脲佐菌素大鼠2型糖尿病模型的建立方法和注意事项。

得出结果为:使用体重在190g ~240g之间的雄性SD大鼠,通过连续两次腹腔注射小剂量链脲佐菌素并辅以去抗氧化剂处理,合理饲养并通过尾静脉采血方法建立的2型糖尿病模型较理想。

关键词:2型糖尿病,SD大鼠模型,链脲佐菌素STZ,糖尿病(diabetes)是一种以胰岛素分泌缺陷和胰岛素作用不足所致的以高血糖为特征的葡萄糖、蛋白质、脂质代谢紊乱的综合征,基本治疗方案包括饮食治疗、运动治疗、药物治疗、糖尿病监测及糖尿病教育。

病因主要有遗传因素、病毒感染、肥胖等,临床表现为“三多一少”即多尿、多饮、多食和体重减轻。

长期的高血糖最终会引起很多严重的并发症,包括心脑血管疾病、糖尿病神经病变、糖尿病视网膜病变,糖尿病肾病、糖尿病足、感染、糖尿病酮症酸中毒、高渗性昏迷等[1]。

糖尿病分为1型糖尿病(Type 1 diabetes)和2型糖尿病(Type 2 diabetes)两种,1型患者因自身免疫β细胞破坏所致,每日胰岛素分泌量非常少,空腹基值及糖刺激后峰值均明显低于正常值,表现为绝对分泌不足。

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大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-1
Catalogue No.:
Product Format::one storage tube
Culture Properties:贴壁
Complete Growth Medium:89%1640+10%FBS+1%双抗
Application:Cells and cancer research
NOTE:FOR RESEARCH USE ONLY.
Components
Item Specifications
T25cm21x10^6clles
Manual1copy
PS:若客户收到2ml小管细胞
收到细胞以后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿(不需要离心),加入5ml左右含FBS的培养基均匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞汇合度:若未超过80%汇合度,换液继续培养,根据情况传代或者冻存。

若超过80%汇合度,可直接进行传代(细胞贴壁处理方法)。

Operation steps for:one storage tube
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