EDTA引起假性血小板减少的分析
EDTA依赖性假性血小板减少症1例
EDTA依赖性假性血小板减少症1例乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)作为血细胞分析的抗凝剂已经国际血液学标准委员会(ICSH)认定及《全国临床检验操作规程》推荐使用，广泛应用于临床。
但临床发现EDTA可引起少数患者的血小板发生聚集，经血细胞自动分析仪检测可出现假性血小板减少(pseudothrombocytopenia，PTCP)，称为EDTA依赖性假性血小板减少(EDTA - PTCP)。
国内外已见多例报告1-3，我科近期发现一例EDTA-PTCP，报告如下。
1 病例资料患者，女，48岁。
主诉：发热、畏寒、咳嗽、咽痛。
无既往病史。
查体：体温39℃，咽部充血，四肢未见出血点及瘀斑，无牙龈出血。
拟诊为上感。
实验室检查：血常规全血细胞计数分析仪分析显示白细胞计数10.1×109/L，血小板计数37×109/L（EDTA-K2抗凝全血）。
凝血酶原时间(PT) 11.5s, 国际标准化比值0.91, 部分凝血活酶时间(APTT) 29.4s, 凝血酶时间(TT) 16.2s, 纤维蛋白原( FIB )2.5g/L。
疑为PTCP。
2 材料与方法2.1 血小板计数手工法末梢血目视计数：20μl末梢血加入3.8ml的1% 草酸铵稀释液中，混匀后计数。
血细胞自动分析仪分析：使用仪器Coulter-HMX血细胞全自动分析仪，EDTA-K2抗凝全血及枸橼酸钠（CTAD）抗凝全血混匀后上机分析。
2.2 血涂片瑞氏染色镜检：参照《全国临床检验操作规程》4进行操作。
3 结果EDTA抗凝全血标本血细胞自动分析仪分析血小板计数结果显著低于CTAD抗凝全血标本血细胞自动分析仪分析血小板计数结果及末梢血手工计数法结果，见表1。
EDTA及CTAD法采血后10分钟分析与1小时后分析血小板计数结果间无显著差异。
EDTA抗凝标本血涂片瑞氏染色后镜下见血小板凝集，CTAD标本血小板镜下未见凝集。
表格 1 不同抗凝剂及放置时间下的血小板计数结果血小板计数(×109 L-1)EDTACTAD手工法t=10m37145149t=1h391424 讨论PTCP常由血标本中的EDTA抗凝剂引起，导致EDTA-PTCP。
我院56例EDTA依赖性假性血小板减少病例分析及临床处理
有所 改变 ， 见表 ２ 。通 过 上 述 统 计 可 得 出 以下 结 果 ：
（ ３ ） 追踪 ８例 Ｅ Ｄ ＴＡ— Ｐ Ｔ Ｃ Ｐ患 者 ９个 月 内 ４次 血小板 计数 ， 与首 次计数 无 明显差 异 。
（ １ ） Ｅ ＤＴ Ａ— Ｋ２ 抗 凝血 在 １ ５ — ６ Ｏ分 钟 内大 幅 度 下 （ ２ ） 镜下 瑞 士 染 色 血 涂 片尾 部 可 明显 观 察 到 成
各地 ， 给 临床 追 踪 监 测 带 来 了很 大 困难 。选 取 了居 降 ， 在 ６ Ｏ 一 １ ２ ０分钟 内趋 于稳 定 。
够 踮 ∞ ∞ 即
∞
∞ 捣
¨
０
注： 方 法 同首 次 检 测 。
３
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间 的延长 ， 聚集越 明 显 。且 在 ６ Ｏ 一 １ ２ ０分 钟 内趋 于稳 通过 表 ２ ， 追踪 回访 的 ８例 Ｅ Ｄ ＴＡ－ Ｐ Ｔ Ｃ Ｐ患者 ，
１ ． ３ 试 验方 法 于我 院证 实 为 Ｅ Ｄ ＴＡ — Ｐ Ｔ Ｃ Ｐ患 者
引起 人们 的注 意 ］ 。 由于血小板 在人体 生理 功 能上 起 着极 大 的作 用 ， 临 床工 作 中得 到 了大 家 的 广泛 关
注， 所以 Ｅ Ｄ ＴＡ— Ｐ Ｔ Ｃ Ｐ 的 发 现 率 也 逐 年 提 升 。本 文
５ ６ 例， 各采 集 ２份 样 本 ， １份 Ｅ ＤＴ Ａ— Ｋ２抗 凝 ， １份
枸 橼酸 钠 抗凝 。分 别 于 ０ － ５ 、 １ ５ 、 ３ ０ 、 ６ ０ 、 １ ２ ０ ｍｉ ｎ上
通过统 计及 追 踪 就 诊 于 我 院 的 Ｅ Ｄ ＴＡ 依 赖性 假 性
EDTA引起假性血小板减少的分析
EDTA引起假性血小板减少的分析【摘要】目的探讨用EDTA作为抗凝剂致假性血小板减少的原因及鉴别诊断要点，防止发生误报漏报。
方法选择2012年5月至2013年3月在我院住院的2例患者，用EDTAK2和肝素锂作为抗凝剂的抗凝血，仪器检测血常规。
同时制作血涂片各一张，通过人工镜检对照。
结果2例患者用TDTAK2抗凝管采血，血小板分别为23×109/L和9×109/L。
而肝素锂抗凝管血小板分别为145×109/L 和241×109/L，血涂片经瑞氏染色后镜检发现血小板均匀分布肝素锂抗凝血涂片中，无血小板凝集现象。
而EDTAK2抗凝血涂片中发现涂片尾部和两侧聚集的血小板数量不等，大小不一。
结论EDTA抗凝剂可引起血小板聚集，造成血小板计数假性减少。
对于应用EDTAK2致血小板减少时，应进一步进行人工计数和血涂片复查，或改用肝素抗凝管复查血小板，以避免误诊。
【关键词】假性血小板减少；EDTA；肝素锂目前，全自动血液分析仪在临检工作中广泛应用，乙二胺四乙酸（EDTA）是国际血液学标准化委员会推荐对血细胞影响较小的血液抗凝剂，用于血常规抗凝。
它的原理是能与血液中的钙离子结合成螯合物，而使钙离子失去凝血作用，从而阻止血液凝固。
但在某些时候又能促使或诱导血小板聚集，导致血小板计数假性降低[1]。
现将我院2例因EDTA抗凝致血小板减少的分析报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选择2012年5月至2013年3月在我院住院患者2例，1例食道癌，一例脑瘤。
患者无紫癜和出血倾向。
1.2 仪器和试剂BeckmanCoulter LH750血液分析仪及其配套的稀释液，溶血素，清洗液。
Olympus显微镜，BD公司EDTAK2抗凝管和肝素锂抗凝管。
珠海贝索公司生产的瑞氏染液。
1.3 仪器法患者分别用EDTAK2抗凝管和肝素锂抗凝管采静脉血，用BeckmanCoulter LH750血液分析仪测定血小板3次，结果取均值。
EDTAK2致假性血小板减少分析
EDTA-K2致假性血小板减少分析【关键词】 EDTA；假性；血小板计数摘要目的：探讨EDTA-K2抗凝血时导致血小板计数假性减少现象及避免措施。
方法：对采用全自动血球计数仪检测，血小板计数值异常偏低的561例标本，进行再次血涂片，观察血小板分布情况，对其中发现的涂片与计数明显不符的5例患者再次抽血进行手工血小板计数、末梢血涂片观察血小板分布情况、抽取肝素抗凝血进行血细胞计数等方法复检。
结果：上述5例在后三种方法复检时血小板计数在正常范围，与初次乙二胺四乙酸二钾(EDTA)抗凝血血细胞分析仪所测血小板计数结果明显不符。
结论： EDTA抗凝剂偶尔可导致血小板发生聚集，引起血球计数仪计数血小板结果的假性减少，临床工作中应引起同行们的高度重视。
关键词 EDTA；假性；血小板计数在临床检验工作中，常发现有少数病人经全自动血细胞分析仪进行血细胞分析时，血小板计数值异常偏低，临床反馈与临床症状严重不符，经手工计数或其他方法复检血小板数又正常，为探讨其发生原因，本文对血常规检验中遇到的5病例进行分析报道如下。
1 资料和方法1.1 资料来源对2003年1月～2006年7月间用全自动血球计数仪进行血液分析时，血小板计数值异常偏低的561例(≤50×109/L)，取同份血进行血涂片观察血小板分布情况，对其中发现的涂片血小板分布情况与计数值明显不符的5例，初步考虑存在血细胞分析仪血小板计数结果与真值不符的现象，依此做为符合研究条件的病例进行进一步研究。
1.2 方法对2003年1月～2006年7月间用我科门诊检验室全自动血球计数仪进行血液分析时，血小板计数值低于50×109/L 的561例患者的标本，均经二种仪器同时进行初检或复检，并取同份血进行血涂片观察血小板分布情况，对其中发现的涂片血小板分布情况与计数值明显不符的5例，一方面与临床了解临床症状表现，确定5例均无皮肤粘膜出血点、紫癜等明显出血征象、肝脾淋巴结不大，另一方面与患者协义：再次抽血进行EDTA抗凝血血球计数仪血液分析、手工血小板计数、末梢血涂片观察血小板分布情况、抽取肝素抗凝血进行血细胞计数等方法复检。
EDTA依赖性假性血小板减少症分析
EDTA依赖性假性血小板减少症分析发表时间：2013-04-08T09:33:26.577Z 来源：《医药前沿》2013年第4期供稿作者：贺想平谢海苏嘉恋[导读] 加强血小板减少现象原因的综合分析可纠正EDTA抗凝剂诱发的血小板聚集引起血小板假性减少。
贺想平谢海苏嘉恋（泉州医学高等专科学校附属人民医院福建泉州 362000）【摘要】目的为避免EDTA抗凝剂诱发血小板聚集引起假性血小板减少的错误结果报告。
方法采用仪器法和手工法进行血小板计数和血涂片瑞-姬氏染色法观察血小板形态。
结果改用枸橼酸钠抗凝剂后仪器检测血小板计数不受干扰。
结论加强血小板减少现象原因的综合分析可纠正EDTA抗凝剂诱发的血小板聚集引起血小板假性减少。
【关键词】EDTA抗凝剂假性血小板减少症血液分析仪血小板计数【中图分类号】R558+.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）04-0058-03 由于EDTA盐对各种血细胞的影响极小，因此国际血液学标准化委员会（ICSH）推荐使用EDTA-K2为血细胞计数的抗凝剂，并已在世界范围广泛应用，一般不会对检测结果造成影响。
但有时EDTA可以诱发血小板发生聚集,引起EDTA依赖性假性血小板减少症(EDTA-dependent pseudo thrombocytopenia, PTCT),会导致临床增加不必要的辅助检查，备受国内外广泛关注。
现将我院1例EDTA依赖性血小板凝集致血小板假性少症报道如下。
1 材料与方法1.1 病例摘要：患者×××，女，25岁，我院健康产前检查孕妇，PT、TT、APTT和Fib (枸橼酸钠抗凝) 均在参考区间内，皮肤、牙龈、胃肠道等处无紫癜、出血等现象。
1.2 仪器：MAXM型全自动五分类血细胞分析仪，美国库尔特公司产品。
1.3 试剂：1.3.1 仪器试剂：EDTA-K2抗凝剂及仪器原装配套试剂盒。
1.3.2 手工试剂：血小板稀释液、瑞-姬氏染色，按《全国临床检验操作规程》配制[1]。
EDTA依赖性假性血小板减少症实验室分析
EDTA依赖性假性血小板减少症实验室分析【关键词】EDTA-K2 假性血小板减少；血小板计数；血小板聚集EDTA盐(EDTA-K2)作为血细胞分析的抗凝剂是国际血液标准化委员会认定并得到广泛使用，目前血小板计数实验室普遍采用的是全自动血细胞分析仪[1]，操作方便,重复性好,准确度高等优点已被普及应用，通常情况下使用EDTA二钾作为抗凝剂，对血细胞和血小板计数的影响较小，但临床发现EDTA盐有时会引起少数患者的血小板聚集导致血细胞分析仪在血小板计数出现假性偏低的现象，检测时需要实验室结合临床、排除干扰因素、选择科学可行的检测方法，才能正确报告血小板计数结果。
以防差错事故的发生，以免给临床医生带来困扰，防止医疗纠纷。
1.资料和方法1.1临床资料：患者，女18岁主诉发热、头痛、鼻塞、咳嗽、咽干咽痛等上呼吸道症状。
查体：体温38.2度、咽部充血、扁桃体无肿大，乡镇卫生院拟定为上感进行系列检查，实验室检查:白细胞10.8x109/L,红细胞3.47x1012、血红蛋白115 g／L、血小板计数为27x109/L(EDTA抗凝全血)既往健康、医生建议来上级医院院复查。
我院再次实验室检查：白细胞10.5x109/L、红细胞 3.54x1012、血红蛋白117 g／L、血小板21x109、凝血酶原时间:12.8s、活化部分凝血活酶时间:25.4s、凝血酶时间：12.5s、纤维蛋白原:2.48s、患者平日经期血量正常，无皮肤黏膜出血倾向，四肢未见出血点瘀斑。
怀疑为EDTA依赖性假性血小板减少症。
1.2方法1.2.1仪器与材料：采用希森美康XS500i全自动血液分析仪进行分析，试剂(溶血剂、稀释液、清洗液)为仪器配套试剂。
EDTA-K2抗凝剂和枸橼酸钠抗凝剂。
仪器采用专用校准品进行校准,每日室内质控均在控，参加卫生部室间质评亦在控。
1．8 mg／ml的EDTA-K2真空采血管、109 mmol／L的枸橼酸钠真空采血管均有河北超然医疗器械有限公司提供。
EDTA依赖假性血小板减少症临床表现、发生机制、怀疑情况及处理措施
EDTA依赖假性血小板减少症临床表现、发生机制、怀疑情况及处理措施EDTA依赖假性血小板减少症乙二胺四乙酸是国际血液学标准化委员会推荐进行全血细胞计数时首选的抗凝剂。
EDTA具有对血液样本中的细胞形态和计数影响非常小等优点，目前在临床广泛使用。
但在少数情况下，EDTA可以引起血小板聚集，在血细胞分析仪上进行检测时，造成血小板计数的假性减低，这种现象被称为EDTA依赖性假性血小板减少。
疾病发生率约为0.09%—0.21%。
EDTA依赖假性血小板减少症的发生机制目前还不明确，普遍认为可能与EDTA诱导血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物中隐藏抗原的暴露或对其进行修饰，导致自身抗体的产生有关。
可以确定发生EDTA依赖假性血小板减少症的原因之一是在EDTA盐作为抗凝剂的前提下，出现的免疫介导的冷抗血小板自身抗体。
EDTA依赖假性血小板减少怀疑情况1、血小板计数<100 X 109 /L。
2、室温下EDTA抗凝的标本发生血小板减少，由其他抗凝剂抗凝的标本或是将标本保存在37摄氏度，能大大削减血小板减少程度。
3、随标本采集到检测时间的延长，血小板计数越来越低。
4、血涂片显示或血球仪提示有血小板聚集。
5、缺乏血小板减少的临床症状和表现，如出血。
处理措施1、仪器法。
重新采样，用肝素抗凝管或枸橼酸盐抗凝管等非EDTA-K2分别抽取静脉血2ml，充分混匀，在10min内完成测定。
2.手工计数法。
采新鲜指血20ul，稀释后由专业检验人员计数两次并取均值。
3、无任何抗凝剂抽血立即上机，血小板结果也是可以供参考。
4、瑞氏染色涂片镜检看血小板的聚集情况再估算其数量。
5、预稀释仪器法:采新鲜指血20ul，加入稀释液120ul，进行1:7稀释后，在1h内用预稀释法进行测定。
6、对这类患者采血之前抗凝剂中添加阿米卡星纠正。
EDTA-K2引起假性血小板减少1例分析
结果较稳定与手工相符。
离 ｒ （ ｒ ） 甲状 腺 球 蛋 白 （ Ｏ 、Ｇ ｂ Ｔ ｂ 乙 肝 全 套 ， ｒ Ｆ ， ４ Ｔ ） Ｔ Ａ 、ＭＡ ， 梅
由于 这 种 假性 低血 小板 计 数 会 导 致 临 床 无故 增加 其 他 不
毒抗体 ， 艾滋病抗体初筛均正常 ， 术前凝 血酶原时间 （ Ｔ ， Ｐ ） 部
邪之所凑 ， 其气必虚 ， 脉络空虚 ， 卫外不固 ， 感受风寒之邪侵袭 面部 阳明 、 阳之脉 ， 少 以致 经气阻滞 ， 流行失 常 ， 血不和 ， 气 或 风湿痰阻 ， 停脉络 ， 气 虚血瘀 ， 挟 风痰 ， 犯 头面所致 ， 瘀 或 兼 上 西医治疗 ， 无特效药物 ， 效果不佳 。我 院近年来充分发挥中医
尿 系 出血 等 血 小 板 减 少病 症 ， 考 虑 假性 血小 板 减 少 ， 时 加 应 同 强 与检 验 医生 的沟 通 ， 可 疑 结 果 ， 要 求 检 验 医 生 手 工计 数 对 可 血 小 板 和进 行 人 工 血 涂 片 ， 可 能 避 免 由 于 Ｅ Ｔ —Ｔ Ｐ引发 尽 Ｄ ＡＰＣ 的 医疗 差 错 。 同时 检 验 医 生 也可 仔 细 从 血 小 板 直 方 图 上发 现 问题 ， Ｄ Ｎ Ｃ １０ 如 Ｙ ． Ｄ ８０型血 细胞分 析仪 上 ， 正常 直方 图相 与 比 ， 形 分 布 峰 明 显右 移 ， 不 与 横 坐 标 重 合 ， 器 一 般 不 显 图 也 仪 示 ＭＰ Ｖ值 ， 血小板下 降呈 明显 的锯齿 状 ， Ｄ Ｉ ２ Ａ ＶＡ １０血 小 板 体 积 分 布 图呈 散 在 锯 齿状 ， 低 而 不 集 中 ， 小 板分 布 宽 度 峰 血 明 显增 高 （ Ｄ ） 这 时 检 验 医 生 也 要 引 起 重 视 ， 行 涂 片 镜 ＰＷ ， 进 检， 看血小板 是否是聚集现象非常显著 ， 可用毛细血管法或静 脉血不抗凝进行验证 ｌ 或手工计数血 小板 ， ４ 尽量 避免 因化验 误差 而 导 致 的误 诊 。
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EDTA引起假性血小板减少的分析
作者：田雪玲陈涛张伟鹤
来源：《中国实用医药》2013年第15期
【摘要】目的探讨用EDTA作为抗凝剂致假性血小板减少的原因及鉴别诊断要点，防止发生误报漏报。
方法选择2012年5月至2013年3月在我院住院的2例患者，用EDTAK2和肝素锂作为抗凝剂的抗凝血，仪器检测血常规。
同时制作血涂片各一张，通过人工镜检对照。
结果 2例患者用TDTAK2抗凝管采血，血小板分别为23×109/L和9×109/L。
而肝素锂抗凝管血小板分别为145×109/L和241×109/L，血涂片经瑞氏染色后镜检发现血小板均匀分布肝素锂抗凝血涂片中，无血小板凝集现象。
而EDTAK2抗凝血涂片中发现涂片尾部和两侧聚集的血小板数量不等，大小不一。
结论 EDTA抗凝剂可引起血小板聚集，造成血小板计数假性减少。
对于应用EDTAK2致血小板减少时，应进一步进行人工计数和血涂片复查，或改用肝素抗凝管复查血小板，以避免误诊。
【关键词】
假性血小板减少；EDTA；肝素锂
目前，全自动血液分析仪在临检工作中广泛应用，乙二胺四乙酸（EDTA）是国际血液学标准化委员会推荐对血细胞影响较小的血液抗凝剂，用于血常规抗凝。
它的原理是能与血液中的钙离子结合成螯合物，而使钙离子失去凝血作用，从而阻止血液凝固。
但在某些时候又能促使或诱导血小板聚集，导致血小板计数假性降低[1]。
现将我院2例因EDTA抗凝致血小板减少的分析报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料选择2012年5月至2013年3月在我院住院患者2例，1例食道癌，一例脑瘤。
患者无紫癜和出血倾向。
1.2 仪器和试剂 BeckmanCoulter LH750血液分析仪及其配套的稀释液，溶血素，清洗液。
Olympus显微镜，BD公司EDTAK2抗凝管和肝素锂抗凝管。
珠海贝索公司生产的瑞氏染液。
1.3 仪器法患者分别用EDTAK2抗凝管和肝素锂抗凝管采静脉血，用BeckmanCoulter
LH750血液分析仪测定血小板3次，结果取均值。
1.4 瑞氏染色每管血制作薄厚均匀血涂片1张，用瑞氏染液染色，在显微镜下观察。
2 结果
2.1 TDTAK2抗凝血2例患者血小板计数分别为23×109/L和9×109/L。
肝素锂抗凝血2例患者血小板计数分别为145×109/L和241×109/L。
2.2 血涂片经瑞氏染色后镜检为：EDTAK2抗凝血涂片有大量血小板聚集，多在尾部和两侧。
肝素锂抗凝血涂片均匀散在，无聚集。
3 讨论
对于以上2位患者，我们对其基本情况进行了解，这2例均无紫癜和出血倾向，白细胞和红细胞数量基本正常，凝血功能PT，APTT，TT，FIB 均在参考范围内。
EDTAK2抗凝管血小板明显减低，肝素锂抗凝剂并血涂片血小板正常。
由此表明EDTA盐作为抗凝剂，偶可诱导血小板发生体外聚集，血细胞自动分析仪又不能加以识别，导致血小板计数低于实际值，而出现假性血小板减少现象，即EDTA依赖性血小板减少症[2]。
EDTA盐作为抗凝剂，可使血液不凝固，并保持红细胞、白细胞、血小板体积、形态不发生改变，从而进行血细胞计数和分析，已被广泛应用并作为标准执行[3]。
但EDTA的确有促使或诱导血小板发生聚集，有观点认为该现象与血小板表面存在某种隐匿性抗原有关[4]。
EDTA可导致血小板活化，血小板形态由正常的圆盘形改为圆球形，改变了血小板表面某种隐匿性抗原表位构象，与存在血浆中的自身抗体相结合，激活细胞膜中的磷脂酶A2和磷脂酶C，水解血小板膜磷脂并释放花生四烯酸，5TH胶原，凝血酶原等活性物质。
这些活性物质能活化血小板纤维蛋白原受体，促使血小板与纤维蛋白原聚集成团[510]。
在日常检验中，如果应用EDTA抗凝管血细胞分析仪计数出现血小板减少，血小板直方图异常，而临床无出血症状者，应做涂片染色镜检，看有无血小板聚集成堆或成簇现象，并另行改肝素锂抗凝管血细胞分析仪复查血小板，获得准确实验数据，以免误诊误治给患者增加痛苦和经济负担。
参考文献
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[3] 梁勤，周思彤，李国铎1例EDTA依赖性血小板假性降低临床资料分析.国际检验医学杂志，2012，33（21）：26832684.
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