5例EDTA抗凝剂引起的假性血小板减少的原因探讨
EDTA引起假性血小板减少的分析
EDTA引起假性血小板减少的分析【摘要】目的探讨用EDTA作为抗凝剂致假性血小板减少的原因及鉴别诊断要点，防止发生误报漏报。
方法选择2012年5月至2013年3月在我院住院的2例患者，用EDTAK2和肝素锂作为抗凝剂的抗凝血，仪器检测血常规。
同时制作血涂片各一张，通过人工镜检对照。
结果2例患者用TDTAK2抗凝管采血，血小板分别为23×109/L和9×109/L。
而肝素锂抗凝管血小板分别为145×109/L 和241×109/L，血涂片经瑞氏染色后镜检发现血小板均匀分布肝素锂抗凝血涂片中，无血小板凝集现象。
而EDTAK2抗凝血涂片中发现涂片尾部和两侧聚集的血小板数量不等，大小不一。
结论EDTA抗凝剂可引起血小板聚集，造成血小板计数假性减少。
对于应用EDTAK2致血小板减少时，应进一步进行人工计数和血涂片复查，或改用肝素抗凝管复查血小板，以避免误诊。
【关键词】假性血小板减少；EDTA；肝素锂目前，全自动血液分析仪在临检工作中广泛应用，乙二胺四乙酸（EDTA）是国际血液学标准化委员会推荐对血细胞影响较小的血液抗凝剂，用于血常规抗凝。
它的原理是能与血液中的钙离子结合成螯合物，而使钙离子失去凝血作用，从而阻止血液凝固。
但在某些时候又能促使或诱导血小板聚集，导致血小板计数假性降低[1]。
现将我院2例因EDTA抗凝致血小板减少的分析报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选择2012年5月至2013年3月在我院住院患者2例，1例食道癌，一例脑瘤。
患者无紫癜和出血倾向。
1.2 仪器和试剂BeckmanCoulter LH750血液分析仪及其配套的稀释液，溶血素，清洗液。
Olympus显微镜，BD公司EDTAK2抗凝管和肝素锂抗凝管。
珠海贝索公司生产的瑞氏染液。
1.3 仪器法患者分别用EDTAK2抗凝管和肝素锂抗凝管采静脉血，用BeckmanCoulter LH750血液分析仪测定血小板3次，结果取均值。
EDTA致血小板计数假性减少的分析
EDTA致血小板计数假性减少的分析摘要目的:了解EDTA盐依赖性假性血小板减少的原因及意义。
方法:用EDTA-K2抗凝真空管采集静脉血,在自动血液分析仪上检测,4例血小板计数明显减少者改用枸橼酸钠抗凝真空管采集静脉血在血液分析仪上重新检测,同时做血涂片检查,采末梢血手工计数血小板。
结果:4例EDTA-K2抗凝计数血小板显著减少者,血涂片见血小板聚集成团,而用枸橼酸钠抗凝及手工计数者血小板均在正常范围内。
结论:EDTA作为血液分析仪的抗凝剂,有时会导致血小板计数假性减少,应引起临床的足够重视。
关键词EDTA 血小板计数血小板聚集资料与方法2007年2月～2009年3月住院患者4例,年龄分别为55岁、65岁、68岁、72岁,男1例,女3例。
仪器与试剂:日本光电MEK-6318K血液分析仪及配套试剂;Olmpus显微镜;草酸铵血小板稀释液(按操作规程[1]配制);EDTA-K2真空抗凝管与枸橼酸钠真空抗凝管;瑞氏染色液。
方法:仪器法为病房护士晨起按要求采集静脉血于EDTA-K2真空抗凝管内至2ml刻度处,检验科收到标本后,在自动旋转式混匀器上混匀,上机检测,发现血小板明显减少者重新采集血液于枸橼酸钠真空抗凝管内,上机检测,同时按操作规程[1]采集末稍血手工计数血小板。
对2种抗凝剂全血进行涂片瑞氏染色显微镜检查。
结果结果见表1。
讨论血小板在体内主要参与止血与血栓形成,此外在动脉粥样硬化和炎症反应中起着重要的作用。
血小板数量的检测是临床上最常用的检测项目之一,EDTA所导致的血小板假性减少如未及时发现,会给病人的诊断和治疗带来很多麻烦,增加不必要的其他检查或治疗,甚至引起医疗纠纷。
因此,检验科工作人员在工作过程中如发现血小板计数明显减少时,必须进行复查及涂片染色显微镜检查,看血小板是否假性减少,涂片是否有血小板成堆现象。
EDTA抗凝原理是与血液中的凝血因子Ⅳ(钙离子)结合成螯合物,使其失去凝血作用,从而阻止血液凝固。
EDTAK2致假性血小板减少分析
EDTA-K2致假性血小板减少分析【关键词】 EDTA；假性；血小板计数摘要目的：探讨EDTA-K2抗凝血时导致血小板计数假性减少现象及避免措施。
方法：对采用全自动血球计数仪检测，血小板计数值异常偏低的561例标本，进行再次血涂片，观察血小板分布情况，对其中发现的涂片与计数明显不符的5例患者再次抽血进行手工血小板计数、末梢血涂片观察血小板分布情况、抽取肝素抗凝血进行血细胞计数等方法复检。
结果：上述5例在后三种方法复检时血小板计数在正常范围，与初次乙二胺四乙酸二钾(EDTA)抗凝血血细胞分析仪所测血小板计数结果明显不符。
结论： EDTA抗凝剂偶尔可导致血小板发生聚集，引起血球计数仪计数血小板结果的假性减少，临床工作中应引起同行们的高度重视。
关键词 EDTA；假性；血小板计数在临床检验工作中，常发现有少数病人经全自动血细胞分析仪进行血细胞分析时，血小板计数值异常偏低，临床反馈与临床症状严重不符，经手工计数或其他方法复检血小板数又正常，为探讨其发生原因，本文对血常规检验中遇到的5病例进行分析报道如下。
1 资料和方法1.1 资料来源对2003年1月～2006年7月间用全自动血球计数仪进行血液分析时，血小板计数值异常偏低的561例(≤50×109/L)，取同份血进行血涂片观察血小板分布情况，对其中发现的涂片血小板分布情况与计数值明显不符的5例，初步考虑存在血细胞分析仪血小板计数结果与真值不符的现象，依此做为符合研究条件的病例进行进一步研究。
1.2 方法对2003年1月～2006年7月间用我科门诊检验室全自动血球计数仪进行血液分析时，血小板计数值低于50×109/L 的561例患者的标本，均经二种仪器同时进行初检或复检，并取同份血进行血涂片观察血小板分布情况，对其中发现的涂片血小板分布情况与计数值明显不符的5例，一方面与临床了解临床症状表现，确定5例均无皮肤粘膜出血点、紫癜等明显出血征象、肝脾淋巴结不大，另一方面与患者协义：再次抽血进行EDTA抗凝血血球计数仪血液分析、手工血小板计数、末梢血涂片观察血小板分布情况、抽取肝素抗凝血进行血细胞计数等方法复检。
EDTA-K2抗凝剂引起血小板减少的结果探讨
EDTA-K2抗凝剂引起血小板减少的结果探讨摘要】目的探讨 EDTA 盐作为抗凝剂的抗凝血在全自动血液分析仪检测时发生血小板假性减少的原因。
方法使用 EDTA 盐和肝素锂作为抗凝剂的抗凝血和手工采指血20μL，同时制作血涂片一张，通过人工镜检对照。
结果通过对3种方法对血小板测定结果对比分析。
结论 EDTA抗凝剂引起血小板聚集，造成血小板计数假性减少。
【关键词】乙二胺四乙酸二钾血小板假性减少在血细胞计数仪问世以后,检测各种血细胞参数快速、准确，给临床疾病的诊断及治疗提供了有诊断价值的数据。
乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)作为国际血液学标准化委员会认定的对血细胞影响较小的血液抗凝剂,在临床检验工作中被广泛应用。
但乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)作为抗凝剂的抗凝血全自动血液分析仪上检测时引起血小板假性减少的现象[1-2]，在临床上少见，如果不能及时诊断和鉴别血小板减少是否乙二胺四乙酸二钾有关，会导致临床医师为诊断明确疾病而给患者增加其他检查，甚至导致患者的误诊误治。
因此，探讨EDTA-K2抗凝剂对假性血小板减少的影响并探讨其解决方法，有着极其重要的意义，为此，笔者对2008年1月～2011年9月在我科遇见的30例乙二胺四乙酸二钾引起血小板假性减少的病例进行分析，先将结果总结如下。
1 材料与方法1.1 血液来源所有血液标本均来自于我院住院及门诊病人，其中5份血液样本来自糖尿病患者，6份血液样本来自高血压患者，6份血液样本来自脑梗死患者，4份血液样本来自高脂血症患者，4份血液样本来自慢性肾炎患者，5血液样本来自肝炎患者。
共30例，其中男性21例，女性9例，所有患者均无紫癜和出血倾向。
1.2 仪器和试剂检测仪器采用Sysmex公司出产的型号为XE2100全自动血细胞分析仪及原厂配套试剂;德国ZEISS显微镜;EDTA-K2抗凝管,肝素锂抗凝管均由美国BD公司提供。
1.3 仪器法分别将抽取的静脉血2ML置于EDTA-K2和肝素锂抗凝管，用SysmexXE2100血细胞分析仪测定血小板3次，结果取均值。
EDTA依赖假性血小板减少症临床表现、发生机制、怀疑情况及处理措施
EDTA依赖假性血小板减少症临床表现、发生机制、怀疑情况及处理措施EDTA依赖假性血小板减少症乙二胺四乙酸是国际血液学标准化委员会推荐进行全血细胞计数时首选的抗凝剂。
EDTA具有对血液样本中的细胞形态和计数影响非常小等优点，目前在临床广泛使用。
但在少数情况下，EDTA可以引起血小板聚集，在血细胞分析仪上进行检测时，造成血小板计数的假性减低，这种现象被称为EDTA依赖性假性血小板减少。
疾病发生率约为0.09%—0.21%。
EDTA依赖假性血小板减少症的发生机制目前还不明确，普遍认为可能与EDTA诱导血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物中隐藏抗原的暴露或对其进行修饰，导致自身抗体的产生有关。
可以确定发生EDTA依赖假性血小板减少症的原因之一是在EDTA盐作为抗凝剂的前提下，出现的免疫介导的冷抗血小板自身抗体。
EDTA依赖假性血小板减少怀疑情况1、血小板计数<100 X 109 /L。
2、室温下EDTA抗凝的标本发生血小板减少，由其他抗凝剂抗凝的标本或是将标本保存在37摄氏度，能大大削减血小板减少程度。
3、随标本采集到检测时间的延长，血小板计数越来越低。
4、血涂片显示或血球仪提示有血小板聚集。
5、缺乏血小板减少的临床症状和表现，如出血。
处理措施1、仪器法。
重新采样，用肝素抗凝管或枸橼酸盐抗凝管等非EDTA-K2分别抽取静脉血2ml，充分混匀，在10min内完成测定。
2.手工计数法。
采新鲜指血20ul，稀释后由专业检验人员计数两次并取均值。
3、无任何抗凝剂抽血立即上机，血小板结果也是可以供参考。
4、瑞氏染色涂片镜检看血小板的聚集情况再估算其数量。
5、预稀释仪器法:采新鲜指血20ul，加入稀释液120ul，进行1:7稀释后，在1h内用预稀释法进行测定。
6、对这类患者采血之前抗凝剂中添加阿米卡星纠正。
警惕“EDTA依赖性假性血小板减少症”
警惕“EDTA依赖性假性血小板减少症”EDTA即乙二胺四乙酸，是常用血常规检测的抗凝剂已被ICSH 认定,并得到了广泛应用。
我们平时在病房进行全血细胞分析（血常规）检验时，使用的是紫帽真空管。
这种真空管中就装有EDTA盐抗凝剂。
在因不同理由需要检测血常规的人群中，有极少数人，当其抽出的血液放入紫帽真空管中与EDTA接触，大约十几秒后他的血小板就会发生聚集。
当把这管标本放在全自动血液分析仪上检测，就可能出现假性血小板减少，随着这一标本存放时间的延长，所检测出的血小板计数可能会更低。
另外，由于聚集的血小板在体积上与白细胞相近，还可能会被血液分析仪，误当成白细胞计数，造成白细胞计数的假性增高。
这种现象我们称之为EDTA依赖性假性血小板减少症（EDTA- dependent pseudo thrombocytopenia，PTCP）。
如果这种现象没有被及早识别，可能会给临床工作带来很大的困扰，如延误手术，增加不必要的辅助检查，增加患者的身心痛苦与经济负担等等。
令人欣慰的是，近年来，检验科已经“破获”多起EDTA依赖性假性血小板减少症。
那么，如何识别呢？在临床工作中，凡遇到没有出血表现、但血小板计数却明显减少的患者，均可列入可疑对象进行鉴别。
可使用如下方法：1、同时用紫帽真空管与蓝帽真空管（内含有枸橼酸钠抗凝剂，平时用于检测凝血功能）采血复查，可以发现两根采血管的血小板计数的差别，蓝帽真空管中的血标本检测结果，血小板计数在正常范围内，而紫帽真空管中的血标本检测结果，血小板计数低于正常。
2、用手工法重新进行血小板计数或把血涂片进行瑞氏染色后，直接在显微镜下观察血小板分布情况及其是否有血小板凝集现象进行鉴别。
EDTA-K2造成假性血小板减少，分析其原因有以下两点：1、EDTA-K2可使血液发生免疫介导，产生冷抗血小板抗体，使血小板互相发生凝集现象，这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体还能直接作用于血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa上，同时这种与血小板结合后的自身抗Fc端又可与淋巴细胞或单核细胞膜上Fc 受体结合，出现卫星现象。
EDTA依赖性血小板假性减少
EDTA依赖性血小板减少症是由于用EDTA盐作为抗凝剂的抗凝血在全自动血细胞计数仪上检测时,发生假性血小板计数减少的现象。
这种假性低血小板计数会导致临床无故增加其他不必要的辅助检查,甚至引起临床误诊误治。
临床上假性血小板减少的发生率约为0.09%~0.21%,其主要原因是由于EDTA盐作为抗凝剂诱导抗凝血中血小板互相聚集、堆积和发生卫星现象,致使全自动血细胞计数仪不能确认血小板而使血小板计数偏低。
假性血小板减少无任何病理、生理意义,也与特殊药物使用无关。
故对临床上无任何出血症状与体征、出血和凝血时间正常而血小板计数明显减少者,建议改用肝素化血或手工计数血小板,以免因EDTA所致的假性血小板减少而贻误手术时机,或作一些不必要的针对血小板减少症的治疗。
体检时意外发现单纯血小板减少,无明显出血和不适，鉴别诊断考虑的常见原因为:（1）血小板生成障碍：再生障碍性贫血、白血病、巨幼细胞性贫血、骨髓纤维化、放射线损伤等；（2）血小板破坏过多或消耗过多：免疫性或原发性血小板减少性紫癜、系统性红斑狼疮、恶性淋巴瘤、药物过敏引起的血小板减少、弥散性血管内凝血等；（3）血小板分布异常：脾功能亢进。
故进行骨髓穿刺和活检等形态学检查，明确是否患白血病、骨髓增生异常综合征(MDS)、巨幼细胞性贫血、遗传性血小板减少症等；同时应进行自身免疫性疾病筛选检查，以除外其他自身免疫性疾病；行腹部B超或CT检查明确有无脾大,脾功能亢进。
EDTA-K2抗凝剂致血小板假性减少的原因及对策
EDTA-K2抗凝剂致血小板假性减少的原因及对策摘要：目的探讨EDTA-K2抗凝剂致血小板假性减少的原因及对策。
方法选取2015年2月～2017年2月来我院体检并被确诊为EDTA-K2抗凝剂导致血小板聚集患者22例，设为观察组，另选取50例健康体检者设为对照组。
采用全血细胞分析仪检测两组的EDTA-K2抗凝静脉血、枸橼酸钠抗凝静脉血，同时进行末梢血血小板手工计数。
比较两组在15min、30min、60min时的血小板计数测定结果。
结果观察组在15min、30min、60min时的EDTA-K2抗凝血血小板计数与手工血小板计数、枸橼酸钠抗凝血血小板计数相比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。
随着时间延长，EDTA-K2抗凝血血小板计数逐渐降低，呈现不稳定状态，而手工血小板计数和枸橼酸钠抗凝血血小板计数结果则无明显变化。
结论 EDTA-K2抗凝剂可导致血小板发生聚集，引起检测指数假性减少，临床上可采用枸橼酸钠抗凝剂代替EDTA-K2抗凝剂进行血小板计数检测，避免因血小板计数假性减少造成的误诊。
关键词：EDTA-K2抗凝剂；血小板假性减少；枸橼酸钠抗凝剂；手工计数全血细胞计数为临床常见检测项目，常采用乙二胺四乙酸二钠（EDTA-K2）抗凝剂进行全血标本抗凝。
血小板对血栓形成及止血有重要作用，因此其检测结果的准确性显得十分重要。
近年来临床研究发现，用血球计数分析仪分析全血标本时，EDTA-K2抗凝剂可引起血小板聚集，导致血小板计数结果假性减少，其发生机制受到广泛关注，纠正EDTA-K2抗凝导致的血小板假性减少具有重要的临床意义[1]。
为了进一步分析EDTA-K2抗凝剂致血小板假性减少的原因及对策，笔者特作此次研究，具体内容如下。
1 资料与方法1.1一般资料选取2015年2月～2017年2月来我院体检并被确诊为EDTA-K2抗凝剂导致的血小板聚集患者22例，设为观察组，另选取50例健康体检者设为对照组。
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5例EDTA抗凝剂引起的假性血小板减少的原因探讨
发表时间：2015-08-06T16:25:14.640Z 来源：《世界复合医学》（下）2015年第1卷总第6期作者：苍忠齐辛洁徐成轩蔡奕蓉[导读] 5例来自我院住院患者，其中男性3例，女性2例。
标本符合血小板数＜70×109/L，同时做血涂片瑞氏染色镜检确认有血小板聚集。
苍忠齐辛洁徐成轩蔡奕蓉
（空军航空医学研究所附属医院检验科，北京 100089）
[摘要] 目的探讨EDTA抗凝剂用sysmex XT-2000i检测时导致血小板假性减少的原因及纠正。
方法 5例EDTA-K2抗凝血选用sysmex XT-2000i检测血小板数＜70×109/L，并且血小板直方图有聚集的标本，做血涂片瑞氏染色镜检确定是聚集，再采末梢血血小板手工计数（20?l末梢血+0.38ml草酸铵血小板稀释液）。
结论EDTA-K2导致血小板聚集，引起仪器检测血小板假性减低。
[关键词] 血小板假性减少； EDTA-K2 ；血小板聚集
中图分类号: R595.3 文献标识码:A
血小板假性减少是指由于体外不同原因（如抽血不当、抗凝剂、温度等）导致血小板假性减少而不能真实的反映体内血小板数量的一种现象。
EDTA-K2引起的是指在体外EDTA抗凝全血中，由于EDTA诱导血小板膜表面隐蔽抗原的暴露或者对抗原的修饰，导致血浆中预存的循环自身抗血小板抗体与之发生抗原抗体反应，出现血小板聚集而使血细胞分析仪不能正确计数，造成血小板假性减少，容易引起对患者的误诊误治，检验人员应高度重视。
EDTA-K2引起的聚集具有①需要有EDTA存在的情况下发生，②显微镜下可见血小板聚集现象的特点。
1 资料方法
1.1 资料 5例来自我院住院患者，其中男性3例，女性2例。
标本符合血小板数＜70×109/L，同时做血涂片瑞氏染色镜检确认有血小板聚集。
1.2 方法按sysmex XT-2000i血细胞分析仪操作说明书进行；按条件挑选出抗凝血的血标本制作血涂片，经瑞氏-吉姆萨染色，由有经验的检验人员对血涂片进行人工镜检分类，同时重抽患者的末梢血进行血小板人工显微镜计数。
（方法：取20?l末梢血加入0.38ml草酸铵血小板稀释液中）。
1.3 仪器 sysmex-2000i 全自动血细胞分析仪配套试剂、质控品；显微镜（日本OLYMPUS公司）；瑞氏-吉姆萨染液购自贝索生物有限公司；EDTA-K2真空抗凝管由美国BD公司生产。
1.4 统计与处理检测结果以X±S表示，应用t检验，用SPSS19.0统计分析。
2 结果
仪器检测结果是（50±16）;手工计数是（189±39），二者比较，差异非常显著（t=17.796，p＜0.01）。
用sysmex XT-2000i血细胞分析仪EDTA-K2抗凝血的血小板计数偏低，血涂片瑞氏镜检可见大量的血小板聚集；同时用末梢血人工计数血小板，再做血涂片瑞氏染色显微镜检，可见血小板呈散在分布，无聚集，血小板数量不少。
3 讨论
EDTA-K2引起的血小板聚集，导致血小板假性减少是由于EDTA的作用使血小板膜表面抗原改变或隐蔽抗原暴露引起抗原抗体反应引起血小板聚集的一种现象，导致血小板假性减少的现象发生率较低，常被忽视，造成误诊误治，应必须引起足够重视。
在日常检验工作中我们常常是这样做①患者血小板计数异常减低（＜70×109/L），这种减低与患者病情不符或近期历史计数相差较大；②来源于仪器散点图报警提示有聚集；检验人员要对此标本先进行血涂片瑞氏染色，显微镜下确认是否有血小板聚集，同时排除冷凝聚、抽血不当等因素，然后一定做手工计数血小板数，给临床一个真实的血小板数量。
血小板是研究止血与凝血障碍的重要指标之一，也是其它血小板参数可靠性基础，其结果的可靠性至关重要。
假性血小板减少中以EDTA抗凝剂引起的血小板聚集较多见，这种现象容易让临床医生对检验结果理解错误，对患者误诊误治，检验人员应高度重视。
由于血细胞分析仪原理的限制影响因素较多，血细胞计数结果与实际值有一定的差异，特别是测定血小板时，常会出现假性减少，给病人的诊断和治疗过程带来许多麻烦。
EDTA抗凝剂造成的血小板假性减低，多发生在肿瘤患者，自身免疫病，肺心病，肝病，毒血症及一些不明原因的疾病，容易造成误诊误治。
检验人员应高度重视，检验人员在日常的工作中对血小板数量低和血小板直方图有报警提示的血标本，一定要做进一步的检测，为临床治疗提供一个完善、准确的血小板数量。
参考文献
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