选用和设计培养基的原则

一、选用和设计培养基的原则和方法

（一）配制培养基的4个原则

1.目的明确

培养不同的微生物必须采用不同的培养条件；培养目的不同，原料的选择和配比不同；例如枯草芽孢杆菌：

一般培养：肉汤培养基或LB培养基；

自然转化：基础培养基；

观察芽孢：生孢子培养基；

产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基；

根据不同的工作目的，微生物不同的营养需要，运用自己丰富的生物化学和微生物学知识来配制最佳的培养基。

2.营养协调

微生物细胞组成元素的调查或分析，是设计培养基时的重要参考依据。

微生物细胞内各种成分间有一较稳定的比例。

在大多数化能异养菌的培养基中，各营养要素间在量上的比例大体符合以下十倍序列的递减规律：

要素：H2O＞C源+能源＞N 源＞P、S＞K、Mg＞生长因子

含量：(～10-1) (～10-2) (～10-3) (～10-4) (～10-5) (～10-6)

A.选择适宜的营养物质,实验室的常用培养基：

细菌：牛肉膏蛋白胨培养基（或简称普通肉汤培养基）；

放线菌：高氏1号合成培养基培养；

酵母菌：麦芽汁培养基；

霉菌：查氏合成培养基；

实验室一般培养：普通常用培养基；

遗传研究：成分清楚的合成培养基；

生理、代谢研究：选用相应的培养基配方；

B.营养物质浓度及配比合适

营养物质的浓度适宜, 营养物质之间的配比适宜；

高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长，反而起

到抑制或杀菌作用。

培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和（或）代谢产

物的形成和积累，其中碳氮比（C／N）的影响较大。

真菌需C／N比较高的培养基；（素食）

细菌（动物病原菌）需C／N比较低的培养基；（荤食）

发酵生产谷氨酸时：

碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；

碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。

NH3 ＞ CO(NH2)2 ＞ NH4NO3 ＞ (NH4)2CO3 ＞ (NH4)2SO4

含氮量（82％）（46％）（35％）（29.2％）（21％）

这说明在同样重量时，在以上各氮源中含氮量以氨为最高，尿素次之，硝酸铵和碳酸铵更次之，而硫酸铵则最低。

3.理化适宜

指培养基的pH值、渗透压、水活度和氧化还原电势等物理化学条件较为适宜。

包括：pH、渗透压和水活度、氧化还原电位

(1) pH

各大类微生物都有其生长适宜的pH范围，培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类

型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。

通常培养条件：（初始pH ）

细菌： pH 7.0~8.0

放线菌：pH 7.5~8.5

酵母菌： pH 3.8~6.0

霉菌：pH 4.0~5.8

藻类： pH 6.0~7.0

原生动物： pH 6.0~8.0

嗜极菌（extremophiles）

在微生物的生长、代谢过程中会产生引起培养基pH改变的代谢产物，为了维持培养基pH的相对恒定，通常要进行pH的调节。

pH的调节包括pH的内源调节和pH的外源调节。

a.pH的内源调节:通过培养基内在成分所起的调节作用，就是pH的内源调节。

第一种是采用磷酸缓冲液进行调节。

［K2HPO4］/［KH2PO4］＝1时，溶液的pH稳定在6.8。

调节K2HPO4和KH2PO4两者浓度比可获得pH 6.0～7.6间的一系列稳定的pH。

反应原理：

K2HPO4＋HCl→KH2PO4＋KCl KH2PO4＋KOH→K2HPO4＋H2O

第二种以CaCO3作“备用碱”进行调节。CaCO3（不溶于水又是沉淀性的，在培养基中分布不均匀）、NaHCO3均可用来调节培养基的pH。

反应是：

b.pH的外源调节:

这是一类按实际需要不断从外界流加酸或碱液，以调整培养液的方法。

(2) 渗透压和水活度

渗透压（osmotic pressure）是某水溶液中一个可用压力来量度的一个物化指标。

它表示两种浓度不同的溶液间被一个半透性薄膜隔开时，稀溶液中的水分子会因水势（water potentiality）的推动而透过隔膜流向浓溶液，直到浓溶液产生的机械压力足以使两边水分子的进出

达到平衡为止，这时由浓溶液中的溶质所产生的机械压力，即为它的渗透压值。

与微生物细胞渗透压相等的等渗溶液最适宜微生物的生长；

高渗溶液会使细胞发生质壁分离；

低渗溶液则会使细胞吸水膨胀，形成很高的膨压，这对细胞壁脆弱或丧失的各种缺壁细胞，例如原生质体、球状体或支原体来说，则是致命的。

水活度即aw（wateractivity）是一个比渗透压更有生理意义的一个物化指标。它表示在天然或人为

环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含量。

各种微生物生长繁殖范围的aw值在0.998～0.6之间：

（3）氧化还原电势（redox potential）

又称氧化还原电位，是度量某氧化还原系统中还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的一种指标。

一般以Eh表示，它是指以氢电极为标准时某氧化还原系统的电极电位值，单位是V （伏）或mV（毫伏）。

不同类型微生物生长对氧化还原电位的要求不同:

好氧性微生物：+0.1伏以上时可正常生长，以+0.3～+0.4伏为宜；

厌氧性微生物：低于+0.1伏条件下生长；

兼性厌氧微生物：+0.1伏以上时进行好氧呼吸，+0.1伏以下时进行发酵。

氧化还原电位与氧分压和pH有关,也受某些微生物代谢产物的影响:

增加通气量(如振荡培养、搅拌)提高培养基的氧分压，或加入氧化剂，从而增加Eh 值在培养基

中加入巯基乙醇、抗坏血酸（Vc，0.1%）、硫化氢(0.025%)、半胱氨酸（<0.05%）、谷胱甘肽、铁

屑、二硫苏糖醇、庖肉（瘦牛肉粒）等还原性物质可降低Eh值。

测定氧化还原电势除用电位计外，还可在培养基中加入化学指示剂刃天青（resazurin）进行间接测定。

刃天青在无氧条件下呈无色（Eh＝-40 mV）；在有氧条件下，其颜色与溶液的pH相关；（中性——紫色；碱性——蓝色；酸性——红色）；在微量氧时，它呈粉红色。

4.经济节约

配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成份,特别是在发酵工业中,以降低

生产成本。

(1)以粗代精：对微生物来说，各种粗原料营养更加完全，效果更好。而且在经济上也节约。大量

的农副产品或制品，如麸皮、米糠、玉米浆、酵母浸膏、酒糟、豆饼、花生饼、蛋白胨等都是常用

的发酵工业原料。

(2)以“野”代“家”：以野生植物原料代替栽培植物原料，如木薯、橡子、薯芋等都是富含淀粉

质的野生植物，可以部分取代粮食用于工业发酵的碳源。

(3)以废代好：以工农业生产中易污染环境的废弃物作为培养微生物的原料。

例如，糖蜜(制糖工业中含有蔗糖的废液)、乳清(乳制品工业中含有乳糖的废液)、豆制品工业废

液、黑废液(造纸工业中含有戊糖和己糖的亚硫酸纸浆)等。

工业上的甲烷发酵主要利用废水、废渣作原料,在我国农村，已推广利用粪便及禾草为原料发酵生

产甲烷作为燃料。

(4)以简代繁：某制药厂改进链霉素发酵液中的原有配方，设法减去30-50%的黄豆饼粉、25%的葡萄

糖和20%硫酸铵，结果反而提高了产量。

(5)以氮代朊：以大气氮、铵盐、硝酸盐或尿素等一类非蛋白质或非氨基酸廉价原料用作发酵培养基

的原料，让微生物转化成菌体蛋白质或含氮的发酵产物供人们利用。

(6)以纤代糖：开发利用纤维素这种世界上含量最丰富的可再生资源。将大量的纤维素农副产品转变

为优质饲料、工业发酵原料、燃料及人类的食品及饮料。

(7)以“国”代“进”：以国产原料代替进口原料，尽量减少工业成本。国内青霉素发酵工业的迅速发展，依赖于找到了富有中国特色的培养基配方，即用廉价的棉子饼（或花生饼）和白玉米粉代替玉米浆和乳糖。

混凝土配合比设计的基本原则

混凝土配合比设计的基本原则 1. 1 坚固性坚固性是指混凝土的强度指标,因为混凝土的质量在目前是以抗压强度指标为主要依据的。影响混凝土抗压强度的因素很多,主要有水泥强度等级及水灰比、骨料种类及级配、施工条件等。 1) 水泥强度等级:水泥强度等级大致代表了水泥的活性,即在相同配合比的情况下,水泥强度等级越高,混凝土的强度等级也越高。在混凝土配合比设计中,主要从经济合理的角度来选择水泥强度等级,如果对水泥强度等级和品种没有选择的余地,那只能靠在配合比设计中调整比例,掺加外加剂等综合性措施加以解决。 2) 水灰比:混凝土单位体积中所用水的重量和水泥的重量比被称为水灰比。水灰比越大,混凝土的强度越低,为此,在满足和易性的前提下,混凝土用水量越少越好,这是混凝土配合比设计中的一条基本原则。 3) 骨料的种类及级配:砂子、石子在混凝土中起骨架作用,因此统称骨料。砂石由石材的品种、颗粒级配、含泥量、坚固性、有害物质等指标来表示它的质量。砂石质量越好,配制的混凝土质量越好。当骨料级配良好,砂率适中时,由于组成了密实骨架,可使混凝土获得较高的强度。 4) 施工条件:如果施工条件较好,并有一定的管理措施时,可适当降低混凝土的坍落度;反之,如现场施工条件较差时,应适当提高混凝土的坍落度。

1. 2 和易性混凝土的和易性是指在一定施工条件下,确保混凝土拌合物成分均匀,在成型过程中满足振动密实的混凝土性能。常用坍落度和维勃稠度来表示。不同类型的构件,对和易性的要求在施工验收规范中已有规定,但还要结合施工现场的设备条件和管理水平来确定。影响混凝土和易性的因素很多,但主要一条就是用水量。增加用水量,混凝土的坍落度是增加了,但是混凝土的强度也下降了。因此,采用使用减水剂的方法成了改善混凝土和易性最经济合理和最有效的方法。 1. 3 耐久性混凝土的耐久性是它抵抗外来及内部被侵蚀破坏的能力,新疆(北疆) 地处严寒地带,夏季炎热干燥,冬季严寒多雪,混凝土受大气的侵蚀很严重,所以,施工验收规范对最大水灰比和最小泥用量都作了规定,但是仅仅执行这些规定还不能完全满足耐久性的要求。为了提高混凝土的耐久性,就必须在配合比设计中考虑采取相应的措施,如水泥品种和强度等级的选择,砂石级配和砂率的调整,但最主要的是用混凝土外加剂和掺合料来提高混凝土的耐久性。 1. 4 经济性混凝土配合比的设计应在保证质量的前提下,省工省料才是最经济的。水泥是混凝土中价值最高的材料,节约水泥用量是混凝土配合比设计中的一个主要目标,但必须是采用合理的措施达到综合性的经济指标才是行之有效的。首先,使用混凝土外加剂和掺合料,使用减水剂既可以改善混凝土的和易性,也可以达到节约水泥的目的,掺加粉煤灰可以代替部分水泥,并改善混凝土的性能。其次,加强技术管理,提高混凝土的匀质性。最后,根据当地的砂石质量情况采用合理砂率和骨料级配。 2 混凝土配合比设计的步骤 2. 1 熟悉现行的规范和技术标准普通混凝土配合比设计的方法和步骤,应该遵守国家建设部发布的行业标准J GJ 5522000 普混凝土配合比设计规程。该标准规定了配合比设计应分三个步骤。 1) 配合比的设计计算;2) 试配;3) 配合比的调整与确定。该标准给出了许多全国性统一用的技术参数,如混凝土试配强度计算公式、混凝土用水量选用表、混凝土砂率选用表等。此外,配合比设计还必须掌握GB 5020422002 混凝土结构工程施工及验收规范和GB J107287 混凝土强度检验评定标准。 2. 2 原材料的准备和检验混凝土由四种材料组成:水泥、砂子、石子和水。目

选用和设计培养基的原则

一、选用和设计培养基的原则和方法（一）配制培养基的4个原则 1.目的明确培养不同的微生物必须采用不同的培养条件；培养目的不同，原料的选择和配比不同；例如枯草芽孢杆菌：一般培养：肉汤培养基或LB培养基；自然转化：基础培养基；观察芽孢：生孢子培养基；产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基；根据不同的工作目的，微生物不同的营养需要，运用自己丰富的生物化学和微生物学知识来配制最佳的培养基。 2.营养协调微生物细胞组成元素的调查或分析，是设计培养基时的重要参考依据。微生物细胞内各种成分间有一较稳定的比例。在大多数化能异养菌的培养基中，各营养要素间在量上的比例大体符合以下十倍序列的递减规律：要素：H2O＞C源+能源＞N 源＞P、S＞K、Mg＞生长因子含量：(～10-1) (～10-2) (～10-3) (～10-4) (～10-5) (～10-6) A.选择适宜的营养物质,实验室的常用培养基：细菌：牛肉膏蛋白胨培养基（或简称普通肉汤培养基）；放线菌：高氏1号合成培养基培养；酵母菌：麦芽汁培养基；霉菌：查氏合成培养基；实验室一般培养：普通常用培养基；遗传研究：成分清楚的合成培养基；生理、代谢研究：选用相应的培养基配方； B.营养物质浓度及配比合适营养物质的浓度适宜, 营养物质之间的配比适宜；高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长，反而起到抑制或杀菌作用。培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和（或）代谢产物的形成和积累，其中碳氮比（C／N）的影响较大。真菌需C／N比较高的培养基；（素食）细菌（动物病原菌）需C／N比较低的培养基；（荤食）发酵生产谷氨酸时：碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。 NH3 ＞ CO(NH2)2 ＞ NH4NO3 ＞ (NH4)2CO3 ＞ (NH4)2SO4 含氮量（82％）（46％）（35％）（29.2％）（21％）这说明在同样重量时，在以上各氮源中含氮量以氨为最高，尿素次之，硝酸铵和碳酸铵更次之，而硫酸铵则最低。 3.理化适宜指培养基的pH值、渗透压、水活度和氧化还原电势等物理化学条件较为适宜。包括：pH、渗透压和水活度、氧化还原电位

教学设计的依据和原则

教学设计的依据和原则每个学段或每个年级都会有纲或标进行定性，因而教学设计要围绕纲或标进行，要以学生为中心设计教学活动，以内容为依据变通教学环节，善于抓住课堂中生成的新的教学资源和意想不到的结果进行灵活教学。下面我就新课标理念下的小学语文教学设计依据和原则发表自己的一点见解。教学设计的依据有： 1、现代教学理论要求教学设计的方案和策略要符合教学规律，不得在课堂教学中随意发挥，影响课堂教学质量。 2、系统科学的原理与方法在教学设计过程中，设计者应遵循系统科学的基本原理，以系统方法指导设计，不断提高教学设计的水平。 3、教学目标的确定与表述在教学设计时，应先明确教学任务和教学目标，认真的分析和分解，使之成为可操作的具体要求。在此基础上，综合考虑各种教学因素，选择和设计必要的教学策略和评价手段。 4、学生分析

教师必须把学生身心发展的特点和规律作为教学设计的重要依据，在决定教什么以及如何教时，应当全面考虑学生的需求、认识规律和学习兴趣，着眼于辅助、激发、促进学生的学习。 5、教师的教学经验教学设计，不能完全依据经验行事，但也不能排斥教学经验的作用。只有将科学的理论和方法与好的教学经验相结合，才能达到科学性和艺术性的有机统一。教学设计的原则： 1、以教材为凭借，在尊重教材的基础上，调整或补充教材内容，使教学更具有丰富的教育内涵。 2、教学设计必须考虑学生的年龄特点、已有知识基础和师资水平。根据学生现状，确定学生通达到的目标，循序渐进。将教学和学生已有的知识联系起来，重新认识，组建新知识。 3、不鼓励学生死记硬背，不限制学生思考的角度和方向，让学生通过问题的解决和活动中体验，来获取知识、能力、情感。 4、在教学中，对学生参与教学过程及活动，教师要及时做出信息反馈，让学生获得成就感。教学成效考评目的是为了获取反馈信息，以修正、完善原有的教学设计。

设计要素和原则(参照材料)

设计要素和原则设计的要素和原则都是基本的可视化工具，它们包含了各个可视化设计原则中的设计手法。要素构成了可视化设计的基本词汇表，而原则构成了设计作品中更深入的结构层面。这些概念和要素驱动了那些有意识的设计策略：设计的要素线线是由动点构成的，如铅笔或笔刷。平面图和立体图的边缘也构成线。这些是在纸上打草稿的基础。直线和曲线是二维图形的基本模块，比如设计一所房子。颜色颜色是美术中最具表现力的要素，同时它也是光在物体表面的反射。颜色会造成距离上的错觉，比如红色似乎有涌出的感觉，而蓝色有沉退的感觉。颜色，尤其是对比鲜明的颜色，也通常用来对图像的特定部分提请注意。在某些室内设计的例子中，颜色可以用来增加视觉吸引力，如木质碗柜的自然色彩。颜色可以为家庭装饰增加视觉吸引力，就像色彩鲜艳的花朵可以装扮大草原一样。平面图平面图是一个由封闭的直线或曲线构成的区域。它是二维的并且可以是几何的或者有机的。重要的是，平面图会在它周围自动创建一个负空间（实体周围的空白）。在房屋装修和室内设计中，平面图可以给设计加上趣味、风格和主题，比如一个门设计。室内设计中的平面图取决于对象的功能，比如设计一个橱柜门。木材或石材自然形成的平面会有助于增加室内设计的视觉吸引力。立体图立体图是三维的。他们占用空间或给他们所占用的空间造成错觉。立体图，如家具或艺术等，可以帮助增加多样性以减少单调（裸视）外观并在室内设计中增加视觉吸引力。

纹理和抛光纹理是面料、颜色和房间配件的触觉和视觉感受。有两种纹理类型：触觉，或视觉纹理，即你五官可以察觉到的纹理。像草铺在墙上或白色的鹅卵石嵌在水泥墙上这样的纹理可以让墙体有三位效果和一些颜色的渐变。纹理是表面粗糙的材料。表面相同或相似的纹理像大理石瓷砖的壁炉和干砌墙通常看起来更俱视觉吸引力。表面抛光的品质在家庭室内设计领域，甚至在汽车领域都是重要的。大理石瓷砖光亮的表面也是一种纹理，而且高质量的抛光可以提高自然材质的视觉吸引力，像墙上的大理石瓷砖。浴室大理石台面的镜面反射可以增强其视觉效果。明暗度明暗度是指你所使用的颜色的明度或暗度。明暗度也被称为基调。设计原则设计就是为了某个目的对一个或多个要素和原则所做的排列组合（例如：线的颜色或纹理）。对设计中这些要素和原则的认知程度是创造成功的视觉作品的第一步。这些原则（有可能重叠）可用于所有的可视化设计领域，包括平面设计、工业设计、建筑和美术。设计的原则包括有关现代设计的各种看法。他们的差别来自不同学校的设计理念，以及不同设计师的个人实践。这些原则掌控着所使用的要素间的关系，并把各个部分组成一个整体。设计的成功之处在于兼顾使用原则和要素，从而满足设计师的目的和视觉目标。这里没有使用的规则，完全由设计师的目的和意图来驱动作出决定，以达到适当的规模和比例以及要素之间的和谐度。设计原则就是尝试创造家居建筑及室内设计之美的一种技术的和人工的方法。设计的原则包括：

教学设计的依据和原则

教学设计的依据和原则Newly compiled on November 23, 2020

材料选用原则设计

5.3.3 材料统计规定 a）工艺安装专业材料统计内容包括管道材料、涂漆材料、绝热材料、管道支架材料；b）材料统计范围以装置边界线为准； 5.3.4 管道组件管子 a) 输送流体用无缝钢管执行GB/T 8163-1999，无缝钢管尺寸、外形、重量级允许偏差执行GB/T17395-1998 中系列2（小外径）尺寸。除与设备连接外，管子公称直径应按以下系列优先选用： 15、20、25、40、50、80、100、150、200、250、300、350、400、450、500、600、700、800、900、1000mm, 公称直径大于1000mm 时，宜按200mm 递增。 b) 除仪表连接管、蒸汽伴热管和特殊要求者外，管子最小公称直径应为15mm，且管子内径不应小于6mm。 c) 最小选用壁厚应符合下表5.1 规定。度参数较高或承受机械振动、压力脉冲及温度剧烈变化的管道，应选用无缝钢管。碳钢、低合金钢无缝钢管应符合《输送流体用无缝钢管》（GB/T8163 -1999）、《高压锅炉用无缝钢管》（GB5310-95）、《化肥设备用高压无缝钢管》（GB6479-86），不锈钢无缝钢管应符合现行《输送流体用不锈钢无缝钢管》（GB/T14976-94）的规定。 e) 常用钢种的无缝钢管使用温度，不宜超过下列范围： 10#、20# -20～450℃ 16Mn -40～450℃ 09Mn2V -70～100℃ 12CrMo ≤525℃ 15CrMo ≤550℃ 1Cr5Mo ≤600℃ 奥氏体不锈钢-196～700℃ 阀门 a) 除设计另有规定外，工艺物料及有毒、可燃介质如油品、油气、液化石油气、氢气、添加剂和化学药剂等介质管道用闸阀、截止阀、球阀和止回阀，应选用严密性好、安全可靠的石油化工专用阀门。阀门的基本要求应符合国标阀门的标准（GB12232、GB1223、GB12234、GB12235、GB12236、GB12237、GB12238、GB12239、GB12240、GB12241、GB12242、GB12243、GB12244、GB12246 和ZBJ16006 ）规定。 b) 管道阀门全部选用钢阀，不能选用铸铁阀。 c) 用于切断管内流体的阀门宜选用闸阀、球阀、旋塞阀；用于调节流量的阀门宜选用截止阀、节流阀。 d) 用于工艺物料及剧毒、可燃介质管道的球阀、旋塞阀及其他通用结构的特种阀门，宜有防火防静电结构。 e) 具有软质密封的阀门，其密封的压力温度参数应满足设计条件的要求。

设计的基本原则

同学们，对于世界上一些知名的建筑，你们一定不是特别的陌生吧，埃及的金字塔、中国的长城、中国的兵马俑、古罗马竞技场、埃菲尔铁塔、美国的白宫、悉尼歌剧院、马来西亚双塔、泰姬陵，对于这些，你们不一定到现场去触摸过，但是你们一定在书上或者电视上看到过，你们看到了这些设计师们的成果，你们想一想，那些设计师在设计它们的时候是否要遵循一些原则呢？同学们回答的非常好，在长期的设计实践中，人们形成了对设计的共性要求。设计不仅要反映“以人为本”的本质目的，还要考虑自然条件和经济条件，遵循客观规律。就如刚才同学们所说，设计必须具备科学性、实用性、创新性等等各种原则。那我们现在来更加细化的了解设计的各个原则。一、科学性原则你们细心观察一下周围的事物，为什么飞机、汽车、快艇的外形都是呈流线型？从中就可以看出，一切的设计要遵循科学性原则。比如加拿大魁北克大桥（1904～1918）这座大桥本该是著名设计师库帕的一个真正有价值的杰作。库帕曾称他的设计是“最佳、最省的”。可惜，它没有建成。库帕自我陶醉于他的设计，而忘乎所以地把大桥的长度由原来的500米加到600米，以成为世界上最长的桥。桥的建设速度很快，施工也很完善。正当投资修建这座大桥的人士开始考虑如何为大桥剪彩时，人们忽然听到一阵震耳欲聋的巨响——大桥的整个金属结构垮了：19000吨钢材和86名建桥工人落入水中，只有11人生还。由于库帕的过分自信而忽略了对桥梁重量的精确计算，导致了一场事故。在1922年，加拿大七大工程学院一起出资将大桥的残骸买下，打造成一枚枚戒指，分发给学院毕业的学生，一方面纪念事故中被夺去的生命，另一方面警示将来从事工程的毕业生。同学们，你们能举出因设计违反科学原理而带来的不良影响的实例吗? 桌椅之间高度差不当，会造成近视或驼背，它违反了什么原理？人机工程学：人在使用物品时，人与物品之间存在的关系。违反科学原理的案例：永动机（能量守恒定律）二、实用性原则比如说你们一回家必定会离不开电视的，估计你们从出生到现在都没有看过以前那种靠按钮或旋钮来实现开关和选台的传统电视机，那种老电视机已被逐步淘汰，那同学们你们能说出个原因吗？遥控电视与手动电视一个产品如果失去了基本功能，也就没有了价值，设计始终是以实用性为根本原则的。实用的设计，满足了人们生产、生活的实际需要，因而受到人们的青睐。三、创新性原则考大家一个脑筋急转弯： 1、前面有一片草地。（打一植物）答案：梅花（没花） 2、前面又有一片草地。（打一植物）答案：野梅花（也没花） 3、来了一群羊。（打一水果）答案：草莓（草没） 4、来了一群狼。（打一水果）答案：杨梅（羊没） 5、有一天一只乌龟背上盖了一间房子. ——盖中盖一段时间后这只乌龟把房子拆了,又盖了一间房子, ——新盖中盖

培养基的配制

培养基: 培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多，根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基；根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行灭菌，通常有高温灭菌和过滤灭菌。培养基由于富含营养物质，易被污染或变质。配好后不宜久置，最好现配现用。培养基的配制：一、配制用水培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，

若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。三、血清培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。四、抗菌素为防止培养时期细菌的污染，可在培养基中添加适当抗菌素，一般用量与组织细胞培养相同：卡那霉素100单位/毫升，或双抗--青霉素100单位/毫升，链霉素100微克/毫升。五、植物血凝素（PHA）非增殖期的细胞不能制备染色体，如人外周血淋巴细胞，但在离体培养过程中，在PHA的作用下，可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。 PHA有粘多糖，蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂，蛋白质起凝集作用。PHA激活的细胞数随其浓度而增加，直至全部免疫活性细胞均被激活为止，但PHA浓度过高会引起凝集，一般采用4%浓度为好。

新课标下教学设计的依据和原则

新课标下教学设计的依据和原则依据教育教学原理，一个完整的教学活动包括教材分析、学生学情分析、设计教学流程、实施教学和教学评价五个方面。要顺利实施教学活动，圆满完成教学任务，达到预期教学目标，教师不仅要明确所教学科目标，还要确定一个单元、一课时的具体教学目标，设计教学任务和教学程序，组织实施并测评。要实现这些教学目标就要分析、选择、确保能实现这些教学目标的技能和策略。教学设计是整个教学活动中不可或缺的有机组成部分。因此，作为实施教育教学活动主导者的教师必须对自己的教学活动进行周密思考和设计。一、教学设计的依据： 1、教育理念即课标精神它是进行教育教学活动的先导，一切教学活动必须依据其开展，要进行教学设计首先就要深入理解和把握课标对教学的总体目标和阶段目标的要求。因此教师必须对课程标准进行研究。2、教材分析第一，教材体系的分析；教师首先要明确教材体系的构成；对使用的教材进行整体结构分析和单元结构分析，把握课程的知识体系。第二，单元内容设计。第三，教学内容的确定，要根据课文特点和学段特点，为单元服务，为本课价值服务。 3、学情分析第一，学生的学习基础与认知规律的分析；第二，学生需求与学习动机的分析。 4、教学目标的确定与表述包括单元教学目标、课时目标及三维目标的统一 5、教学过程的设计第一，教学环节的设计（板块式结构：对设计意图的分析）。第二，问题的设计（解决教学内容的设计）；第三，学生的设计（预设对学生学习活动、内容的设计）；第四，板书、课件设计（总结全文线索及背景知识的运用等） 6、教学评价的设计第一，针对单元或课文教学目标的评价设计；第二，试卷编制与分析；第三，教学活动的评价量表设计。二、教学设计的原则：为实施教育教学活动，作为主导者的教师应依据教育教学基础理论和课程标准，重点从以下几个方面对自己的教学活动进行周密思考和设计：一、系统性原则教学设计是一项系统工程，是由教学目标和教学对象的分析、教学内容和方法的选择以及教学评估等子系统所组成，各子系统既相对独立，又相互依存、制约，组成一个有机的整体。在诸子系统中，各子系统的功能并不等价的，其中教学目标起指导其他子系统的作用同时，教学设计应立足于整体，做到整体与部分辩证地统一，系统的分析与系统的综合有机地结合，最终达到教学系统的整体优化。二、程序性原则教学设计是一项系统工程，诸子系统的排列组合具有程序性特点，即诸子系统有序地成等级结构排列，且前一子系统制约、影响着后一子系统，而后一子系统依存并制约着前一子系统。根据教学设计的程序性特点，教学设计中应体现出其程序序的确定及联系性，确保教学设计科学性。三、可行性原则教学设计要成为现实，必须具备两个可行性条件。一是符合主客观条件。主观条件应考虑学生的年龄特点、已有知识基础和师资水平；客观条件应考虑教学设备、地区差异等因素。二是具有操作性。教学设计应能指导具体的实践。四、反馈性原则教学成效考评只能以教学过程前后的变化以及学生作业的科学测量为依据。测评教学效果的目的是为了获取反馈信息，以修正、完善原有的教学设计。

教学设计的理念

教学设计的理念(总3页) -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1 -CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除

答：教学设计是指教师依据教育教学原理，教学艺术原理，为了达到教学目标，根据学生认知结构，对教学过程、教学内容、教学组织形式、教学方法和需要使用的教学手段进行的策略。 1、过程是一个系统，这一系统包括了学法、教师、资源、学习方法、条件、情景等要素。教学设计就是要创设这样一个系统，并利用系统的科学方法来解决教学中的问题。 2、教学设计是从学习者的学习目标为出发点，确定学习者的需求和教学中需要解决的问题，并提出满足学习者需求和解决问题的方法和步骤。 3、教学设计需要以现代教学理论和学习理论为依据，转变传统的备课观，体现教育主体和学习主体的相互作用。教学设计理念和依据一教学设计理论 1、现代教学理论理论的指导是教学设计由经验层次上升到理性、科学层次的基本前提。科学的教学理论是对教学规律的客观总结和表现。依据科学的教学理论和学习原理设计教学活动，实际上就是要求教学设计的教学方案和措施符合教学规律。教育工作者只有自觉运用科学的理论指导教学设计，才有可能是教学摆脱险隘的经验主义，进而追求教学效果的最优化。 2、建构主义理论建构主义认为，学习是建构内在的心理表征的过程，强调的是学习的选择性、体验性、主动性、主观性，将学习看成是学习者对外在信息自主“生成”意义的理解过程。已有的经验是生成性学习的核心因

素。生成性课堂教学能使学生把外部环境中的有关信息直接整合到自己原有认知结构中去的过程，同时又可以使认知结构发生重组与改造，产生新的生成。 3、系统科学原理 (1)整体原理。生成性教学设计也不是一盘散沙，它的设计是把多种因素的内部结构及“边界”作为一个整体来考虑。教学设计是一项系统工程，它是由教学目标和教学对象的分析、教学内容和方法的选择以及教学评估等子系统所组成，各子系统既相对独立，又相互依存、相互制约，组成一个有机的整体。在诸子系统中，各子系统的功能并不等价，其中教学目标起指导其他子系统的作用。同时，教学设计应立足于整体，每个子系统应协调于整个教学系统中，做到整体与部分辩证地统一，系统的分析与系统的综合有机地结合，最终达到教学系统的整体优化。（2）程序性原则教学设计是一项系统工程，诸子系统的排列组合具有程序性特点，即诸子系统有序地成等级结构排列，且前一子系统制约、影响着后一子系统，而后一子系统依存并制约着前一子系统。根据教学设计的程序性特点，教学设计中应体现出其程序的规定性及联系性，确保教学设计的科学性。

电子系统设计的基本原则和方法

电子系统设计的基本原则和设计方法一、电子系统设计的基本原则：电子电路设计最基本的原则应该使用最经济的资源实现最好的电路功能。具体如下： 1、整体性原则在设计电子系统时，应当从整体出发，从分析电子电路整体内部各组成元件的关系以及电路整体与外部环境之间的关系入手，去揭示与掌握电子系统整体性质，判断电子系统类型，明确所要设计的电子系统应具有哪些功能、相互信号与控制关系如何、参数指标在那个功能模块实现等，从而确定总体设计方案。整体原则强调以综合为基础，在综合的控制与指导下，进行分析，并且对分析的结果进行恰当的综合。基本的要点是：（1）电子系统分析必须以综合为目的，以综合为前提。离开了综合的分析是盲目的，不全面的。（2）在以分析为主的过程中往往包含着小的综合。即在对电子系统各部分进行分别考察的过程中，往往也需要又电子局部的综合。（3）综合不许以分析为基础。只有对电子系统的分析了解打到一定程度以后，才能进行综合。没有详尽以分析电子系统作基础，综合就是匆忙的、不坚定的，往往带有某种主管臆测的成分。 2、最优化原则最优化原则是一个基本达到设计性能指标的电子系统而言的，由于元件自身或相互配合、功能模块的相互配合或耦合还存在一些缺陷，使电子系统对信号的传送、处理等方面不尽完美，需要在约束条件的限制下，从电路中每个待调整的原器件或功能模块入手，进行参数分析，分别计算每个优化指标，并根据有忽而

指标的要求，调整元器件或功能模块的参数，知道目标参数满足最优化目标值的要求，完成这个系统的最优化设计。 3、功能性原则任何一个复杂的电子系统都可以逐步划分成不同层次的较小的电子子系统。仙子系统设计一般先将大电子系统分为若干个具有相对独立的功能部分，并将其作为独立电子系统更能模块；再全面分析各模块功能类型及功能要求，考虑如何实现这些技术功能，即采用那些电路来完成它；然后选用具体的实际电路，选择出合适的元器件，计算元器件参数并设计个单元电路。 4、可靠性与稳定性原则电子电路是各种电气设备的心脏，它决定着电气设备的功能和用途，尤其是电气设备性能的可靠性更是由其电子电路的可靠性来决定的。电路形式及元器件选型等设计工作，设计方案在很大程度上也就决定可靠性，在电子电路设计时应遵循如下原则：只要能满足系统的性能和功能指标就尽可能的简化电子电路结构；避免片面追求高性能指标和过多的功能；合理划分软硬件功能，贯彻以软代硬的原则，使软件和硬件相辅相成；尽可能用数字电路代替模拟电路。影响电子电路可靠性的因素很多，在发生的时间和程度上的随机性也很大，在设计时，对易遭受不可靠因素干扰的薄弱环节应主动地采取可靠性保障措施，使电子电路遭受不可靠因素干扰时能保持稳定。抗干扰技术和容错设计是变被动为主动的两个重要手段。 5、性能与价格比原则在当今竞争激烈的市场中，产品必须具有较短的开发设计周期，以及出色的性能和可靠性。为了占领市场，提高竞争力，所设计的产品应当成本低、性能好、

发酵工业用培养基配制的原则及其注意点

第1节发酵工业用培养基配制的原则及其注意点到今天为止，还没有一个现成的方法，可以去建立一个普遍适用的抗生素生产用培养基的设计规范。现在生产用的培养基主要是根据生产经验和一系列发酵试验结果所确定的。近年来，在抗生素生产中，用物料平衡进行培养基设计的方法已普遍采用。虽然如此，实践经验仍然在培养基的设计中起着决定性作用。连续培养方法常用于研究个别营养成分对发酵的影响。尽管用于工业发酵的培养基配制缺乏一定的理论性，但近百年来发酵工业的不断发展和有关学科的发展，为我们提供了相当丰富的经验和理论依据。因此，在考虑某一菌种对培养基的总体要求时，应注意以下几个方面的问题：（1）微生物对底物的利用速率在配制培养基考虑碳源和氮源时，应根据微生物的特性和培养的目的，注意快速利用的碳（氮）和慢速利用的碳（氮）源的相互配合，发挥各自的优势，避其所短。如在抗生素发酵时，作为种子培养时的培养基所含的快速利用的碳源和氮源往往比作为合成目的产物发酵培养时的培养基所含的多。当然也可考虑分批补料或连续补料的方式，以及在基础培养中添加诸如磷酸三镁等称为铵离子捕捉剂的化合物来控制微生物对底物的合适的利用速率，以解除所谓的“葡萄糖效应”来得到更多的目的产物。另外，对于孢子培养基的配制来说，营养不能太丰富（特别是有机氮源），否则只长营养菌丝而不产孢子。这种培养基中所用无机盐浓度要适量，不然也会影响孢子量和孢子颜色。（2）微生物对培养基中碳氮比的要求培养基中碳氮比对微生物生长繁殖和产物合成的影响极为明显。氮源过多，会使菌体生长过于旺盛，pH值偏高，不利于代谢产物的积累；氮源不足，则菌体繁殖量少，从而影响产量。碳源过多，则容易形成较低的pH值；若碳源不足，则易引起菌体衰老和自溶。另外，碳氮比不当还会影响菌体按比例地吸收营养物质，直接影响菌体的生长和产物的形成。微生物在不同的生长阶段，其对碳氮比的最适要求也不一样。一般来讲，因为碳源既作为碳架参与菌体和产物合成又作为生命过程的能源，所以比例要比氮源高。一般工业发酵培养基的碳氮比约为100：0.2-2.0。应该指出的是，碳氮比也随碳水化合物及氮源的种类以及通气搅拌等条件而异，因此很难确定一个统一的比值。

培养基配方及配制方法

培养基配方 1 斜面菌种保存培养基 1.1PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸0.5h，纱布过滤，滤液补足1000ml，再加15g葡萄糖和15-20g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。 1.2麦芽汁琼脂培养基麦芽汁的制备：干麦芽首先进行粉碎（不能太粗，也不必太细。太粗影响糖化效率，过细影响过滤速度），按麦芽重量的3~4倍加水，搅拌均匀后，37℃左右浸泡1小时，然后缓缓加温至55~63℃（在升温过程中应不断搅拌使温度均匀），保温4~6小时（用0.02摩尔/升碘液测定为黄色至无色时），糖化结束。在糖化过程中，应每小时搅拌一次。取过滤后的清液，加1.8%琼脂，分装试管，每试管约5-10ml （视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。 2 基菌落总数检测 2.1平板计数琼脂培养基将胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、琼脂15.0g 加入蒸馏水1000ml中，煮沸溶解后，调pH，然后在121℃下灭菌15min，取出，稍微冷却后，带热倒入培养皿中。 3志贺氏菌检测

3.1 GN增菌液成分：胰蛋白胨：20g，葡萄糖：1g，甘露醇：2g，柠檬酸钠：5g，去氧胆酸钠0.5g，磷酸二氢钾4g，磷酸氢二钾1.5g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml。pH7.0 制法：将上述物品加入蒸馏水中，加热溶解煮沸，调pH为7.0，分装，在115℃高压灭菌15min。 3.2 HE琼脂成分：胨：12g，牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖12g，水杨素2g，胆碱20g，氯化钠5g，琼脂18~20g，蒸馏水1000ml0，0.4%溴麝香草酚蓝溶液16ml，Andrade指示剂20ml.，甲液20ml，乙液20ml。pH7.5 制法：将上述前七种成分加入400ml蒸馏水中作为基础液，将琼脂加入到600ml蒸馏水中加热溶解，加入甲液乙液到基础液中，调pH，再加入指示剂，并与琼脂液合并，待冷却至50~55℃，倾注浇平板。注1：此培养基不能高温灭菌。注2：甲液的配置：硫代硫酸钠：34g，柠檬酸铁钠：4g，蒸馏水：100ml。注3：乙液的配置：去氧胆酸钠：10g，蒸馏水：100ml。注4：Andrade指示剂的配置：酸性复红：0.5g，1mol/l的氢氧化钠溶液：16ml，蒸馏水：100ml。将酸性复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液，数小时后如复红褪色不全，再加氢氧化钠溶液1~2ml。

食品包装材料的选用和设计

食品包装材料的选用和设计 2005-8-9 现代食品包装的设计原则是：根据被包装食品的保护性要求，科学地选用保护功能好的包装材料，进行合理的结构设计和包装装潢设计，配套使用精密可靠的包装机械设备；采用先进的包装技术方法，从而达到保护食品，延长保质期的目的。一、必须了解食品对防护性的要求不同食品的化学成分，理化性质等各不相同，因此不同食品对包装的防护性要求也不同。例如，蛋糕是含油脂较多的、松软的，有一定最佳含水量的要求，因此最起码应符合下面要求：防油高阻氧性（防止渗油及油脂被氧化）、高阻湿性（防止蛋糕失去水分变干变硬）。再如，茶叶的包装应是高阻氧性（防止有效成份被氧化）、高阻湿性（茶叶受潮发霉变质）、高阻光性（茶叶中的叶绿素受日光作用会发生变化）、高阻香气性（茶叶分子香气成分极易散发，而失去茶味。另外，茶叶也极易吸收外界异味），且当前市面上相当部分的茶叶是普通的PE、PP等透明塑料袋包装，大大浪费了茶叶有效成份，茶叶的品质得不到保证。与上述食品相反，果品，蔬菜等采摘后有呼吸作用选择，即要求包装对不同气体有不同的透过率。例如炒咖啡豆包装后还缓慢放出二氧化碳，奶酪在包装后也会产生二氧化碳，因此它们的包装应是高阻氧和高二氧化碳透过性的。果品和蔬菜的包装常常要求是防霉型的，因包装袋内壁上的小雾滴会对果蔬产生一系列不利的生化使用，导致果蔬易褐变，易腐烂。不同品种的果蔬及不同成熟度的同种果蔬对包装材料的透气及选择性要求也不同。生肉、肉加工食品、饮料、小食品、烘烤食品等对包装的保护性要求也有很大差别。例如，肉罐头的涂料应耐硫、水果罐头的涂料应耐酸、充气饮料的容器应能耐一定的压力，酒类的包装容器应耐醇并阻隔香气等等。所以，应根据食品本身的不同性质和水同的保护性要求科学地设计包装。二、选择保护功能适宜的包装材料传统的包装材料主要是玻璃瓶，金属罐、纸盒、纸箱。现代食品包装材料主要有塑料类，纸类，复合材料类（塑/塑、塑/纸，塑/铝，箔/纸/塑等各种类型的多层复合材料），玻璃瓶类，金属罐等。 1、复合材料复合材料是种类最多，应用最广的一种软包装材料。目前用于食品包装的塑料有30多种，而含塑料的多层复合材料有上百种。复合材料一般用2-6层，但特殊需要的可达10层甚至更多层。将塑料，纸或薄纸机，铝箔等基材，科学合理的复合或层合配伍使用，几乎可以满足各种不同食品对包装的要求。例如，用塑料/纸板/铝塑/塑料等多层材料制成的利乐包装牛奶的保质期可长达半年到一年。有的高阻隔软包装肉罐头的保质期可长达3年，有的发达国家的复合材料包装蛋糕保质期可达一年以上，一年后蛋糕的营养、色、香、味、形及微生物含量仍符合要求。设计复合材料包装应特别注意各层基材的选择，搭配必须科学合理，各层组合的综合性能必须满足食品对包装的全面要求。 2、塑料我国用于食品包装的塑料也多达十五、六种，如PE、PP、PS 、PET、PA、PVDC、EV A、PV A、EVOH、PVC、离子键树脂等。其中高阻氧的有PV A、EVOH、PVDC、PET、

工艺设计的基本原则和程序

工艺设计的基本原则和程序一、工艺设计的基本原则水泥厂工艺设计的基本原则可归纳如下： (1)根据计划任务书规定的产品品种、质量、产量要求进行设计。计划任务书规定的产品产量往往有一定范围，设计产量在该范围之内或略超出该范围，都应认为是合适的；但如限于设备选型，设计达到的产量略低干该范围，则应提出报告，说明原因，取得上级同意后，按此继续设计。对于产品品种，如果设计考虑认为计划任务书的规定在技术上和经济上有不适当之处，也应提出报告，阐明理由，建议调整，并取得上级的同意。例如，某大型水泥厂计划任务书要求生产少量特种水泥，设计单位经过论证，认为大型窑改变生产品种，在技术上和经济上均不合理，建议将少量特种水泥安排给某中小型水泥厂生产，经上级批准后，改变了要求的品种。窑、磨等主机的产量，除了参考设备说明和经验公式计算以外，还应根据国内同类型主机的生产数据并参考国内外近似规格的主机产量进行标定。在工厂建成后的较短时期内，主机应能达到标定的产量；同时，标定的主机产量应符合优质、高产、低消耗和设备长期安全运转的要求，既要发挥设备能力，但又不能过分追求强化操作。 (2)选择技术先进、经济合理的工艺流程和设备。工厂的工艺流程和主要设备确定以后，整个工厂设计可谓大局已定。工厂建成后，再想改变其工艺流程和主要设备，将是十分困难的。例如，要把湿法厂改为干法厂，固然困难；要把旧干法厂改为新型干法厂，也非易事。例如，为了利用窑尾废气余热来烘干原料，生料磨系统也得迁移，输送设备等也得重新建设，诸如此类的情况，在某些条件下就不一定可行。在选择生产工艺流程和设备时，应尽量考虑节省能源，采用国内较成熟的先进经验和先进技术；

培养基配制及适用性检查标准操作规程

培养基配制及适用性检查标准操作规程 Document number：NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT

建立培养基配制及适用性检查的标准操作规程，规范实验人员的操作流程。范围：适用于微生物检验人员对培养基的规范管理。依据：《药品生产质量管理规范（2010年修订）》、《中华人民共和国药典》2015年版第四部职责： 1.微生物检验员：负责实验室所需求的培养基管理工作，使日常检验可以顺利进行。 2.微生物检验主管：负责对日常配制培养基的规范操作进行监督。内容 1 培养基的申购根据检验项目、工作量和工作进度的需求，提前一个月进行所需的培养基申购。申购时需指定培养基供应商，必要时进行供应商审计。 2 培养基的验收培养基到货后，微生物室检验员应进行验收。验收内容包括核对品名、数量、规格、生产厂商，应与申购单一致；检查培养基包装有无破损、包装是否完整、产品是否在有效期内。

验收合格后，登记于《培养基领用台账》（附记录文件编号：SMP-10-QC-009-02（00））。 3 培养基的贮藏未开封的脱水培养基贮存于阴凉室，使培养基处于低温、干燥、和避光条件下。已开封的脱水培养基应盖紧，贮存于阴凉库。灭菌好的培养基应进行预培养72h检查无菌后，置4～8℃冷藏保存待用。灭菌后培养基储存期为7天。 4 培养基的配制培养基的配制和使用应填写《培养基配制及使用记录》（附记录文件编号：SMP-10-QC-009-02（00））。培养基配制批号原则：原材料批号-配制日期：比如2011年1月1日配制的培养基，培养基干粉批号000000，配制批号为:000000-110101。配制好的培养基贴《培养基标签》（附记录文件编号：R-SMP-10-QC-009-03）。（注：同一天同一培养基配置多次的，在原批号后加“-”加“数字”表示，如000000-110101-01）培养基配制方法使用商品化脱水合成培养基时，应严格按照厂商提供的使用说明配制，如重量/体积、pH、灭菌条件和操作步骤等。实验室使用各种基础成分制备培养基时，应按照配方准确配制，并记录相关信息如：培养基名称和类型及试剂级别，每个成分物质含量、制造商、批号，pH值，培养基体积/分装体积，灭菌条件（灭菌方式、温度及时间），配制日期、人员等，以便溯源。水、容器具要求：培养基配制均采用纯化水，特殊说明时采用去离子水和蒸馏水。培养基配制所用容器和配套器具应洁净。对热敏感的培养基如糖发酵培养基其分装容器应先进行预灭菌，以保证培养基的无菌性。称量与分装：快速称量所需量的脱水合成培养基（必要时佩戴口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有有毒物质的培养基粉末）。以免吸潮。先加入适量的水，充分混合。注意避免培养基结块，然后加水至所需的量。根据说明书要求选择是否加热。分装体积不超过容器体积的2/3。配制斜面等含琼脂的培养基也需加热煮沸至完全溶解后分装。 pH 值的测定和调整

细胞培养基及其配制方法

【DMEM专题】DMEM细胞培养基（二）配制方法及注意事项配制方法：（1）在一个尽可能接近总体积的容器中加入比预期培养基总体积少5％的双蒸水。（2）在室温（20℃到30℃）的水中加入干粉培养基，轻轻搅拌，不要加热。（3）水洗包装袋的内部，转移全部的痕量干粉到容器内。（4）加NaHCO3到培养基中。（5）用双蒸水稀释到想要的体积，搅拌溶解。注意不要过分搅拌。（6）通过缓慢搅拌加入1N NaOH 或1N HCL调节pH值，由于pH值在过滤时会上升0.1到0.3，因而调节pH值使它比最终想要的pH值低0.2到0.3。培养基在过滤前要保持密封。配制培养基要注意以下问题： ●认真阅读说明书。说明书都注明干粉不包含的成分，常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。这些成分有些是必须添加的，如NaHCO3、谷氨酰胺，有些根据实验需要决定。 ●配制是要保证充分溶解，NaHCO3、谷氨酰胺等物质都要等培养基完全溶解之后才能添加。 ●配制所用的水应是三蒸水，离子浓度很低。 ●所用器皿应严格消毒。 ●配制好的培养基应马上过滤，无菌保存于4度。 ●液体培养基主要是为了科研工作的方便而设计的培养基，它是一种灭菌后保证无菌的溶液，必要时可制成无内毒素等的溶液，可节省科研人员的工作量。

DMEM各种成分都有什么作用一般的基础培养基包括四大类物质：无机盐、氨基酸、维生素、碳水化合物。（1）无机盐：对调节细胞渗透压、某些酶的活性及溶液的酸碱度都是必须的。（2）氨基酸：缬氨酸、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精氨酸、胱氨酸(L型)都是细胞用以合成蛋白质的必需氨基酸，不能由其他氨基酸或糖类转化合成。除此之外，还需要谷氨酰胺(glutamine)。谷氨酰胺具有特殊的作用，对细胞的培养特别重要，能促进各种氨基酸进入细胞膜；它所含的氮是核酸中嘌呤和嘧啶的来源，还是合成—磷酸腺苷、二磷酸腺甘和三磷酸腺苷的原料。细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质，谷氨酰胺缺乏可导致细胞生长不良甚至死亡。在配制各种培养液中都应补加一定量的谷氨酰胺。值得注意的是：谷氨酰胺在溶液中很不稳定，故4℃下放置1周可分解50%，使用中最好单独配制，置-20℃冰箱中保存，用前加入培养液中。（3）维生素：是维持细胞生长的一种生物活性物质，在细胞中大多形成酶的辅基或辅酶，对细胞代谢有重大影响。（4）碳水化合物：是细胞生命的能量来源，有的是合成蛋白质和核酸的成分。体外培养动物细胞时，几乎所有培养基或培养液中都以葡萄糖作为必含的能源物质。（5）葡萄糖和谷胺酰胺：体外培养条件下，葡萄糖主要经糖酵解降解，产生过量的乳酸。减少乳酸生产最常用的方法是限制培养基中葡萄糖的含量，但葡萄糖含量过低可造成细胞营养供应不足，细胞生长抑制。在目前常用的培养基中，葡萄糖和谷胺酰胺是体外培养动物细胞的主要能源，其能量代谢通路与体内完全不同，表现为葡萄糖主要经糖酵解途径为细胞提供能量，谷胺酰胺大部分通过不完全氧化途径，另一小部分通过完全氧化为细胞供能。（6）除了以上与细胞生长有关的物质以外，培养基中一般还要加入酚红（当溶液酸性时pH 小于6.8呈黄色；当溶液碱性时pH大于8.4呈红色），一种pH指示剂。