PDA培养基的配制及试管斜面制作
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制
一、食用菌菌种种类
人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。
1）母种（一级菌种）：用孢子分离或组织分 离等培育的菌丝体称为母种。
2）原种（二级菌种）：把母种扩大到木屑、 棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。
3）栽培种（三级菌种）：由原种扩大培养成 为生产上使用的菌种称为栽培种。
4）菌种：实质上就是经过人工培养并进一步 繁殖的食用菌的纯菌丝体。
二、食用菌的制种程序
种菇
孢子分离 组织分离
接种→母种（一级） 接种→培养→原种（二级）
培养
接种→→栽培种（三级）
经过这样三级培养，食用菌菌丝数量大大增加。
一般1支试管菌种可繁殖4~6瓶原种，每瓶原种又 可扩大繁殖60~100瓶栽培种。
母种
原种和 栽培种
三、菌种生产常用的设备和用具 1、接种设备 ⑴ 接种室 ⑵ 接种箱 ⑶ 超净工作台
超净工作台
三、菌种生产常用的设备和用具
2、灭菌设备
Ⅰ
1）手提式：容量小，适于斜面试
高
管及玻璃器皿等；
压 蒸
2）立式： 容量大，投资大；
气 灭
3）卧式：容量大，投资大；
菌
4）家用24或26 cm压力锅：母种、
胡萝卜葡萄糖琼脂培养基胡萝卜200g葡萄糖或蔗糖1820g琼脂20ghpda培养基配制方法马铃薯去皮去芽眼切成片玉米大小称取20g70mlo煮沸1520min双层纱布过滤取滤液并补足100ml琼脂2g熔化葡萄糖2g分装试管不要倒到试管壁上塞上棉塞捆扎灭菌高压蒸气灭菌1530min制成斜面检查灭菌效果即2830培养23d1每人制5支试管斜面
三、菌种生产常用的设备和用具
3、培养设备 ⑴ 培养室 ⑵ 生化培养箱
PDA培养基的配制方法
PDA培养基的配制方法一、目的要求1．学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。
2．学习并掌握棉塞的制作方法。
二、培养基的配制原理培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加上实训和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，但不论是何种培养基，均应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐等。
不同微生物对pH值要求不一样，所以配制培养基时，还应根据不同微生物对pH值的要求，将培养基调到合适的pH值范围。
三、实训材料和用具琼脂，可溶性淀粉，葡萄糖，10﹪NaOH，10﹪HCl，1mol／L NaOH，lmol／L HCl，KNO3，NaCl，K2HPO4·3H20，MgSO4·7H20，FeSO4·7H2O；试管，三角瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，牛角匙，PH试纸，棉花，牛皮纸，记号笔，纱布，四、操作方法与步骤(一) 培养基的配制PDA培养基的配制其配方如下：土豆200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，水1000mL，pH值自然。
(1)称量和熬煮药品实际用量计算后，按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20－30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g（提前搞碎），然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1／5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜；半固体培养基以试管高度的1／3为宜，灭菌后垂直待凝。
pda培养基
pda培养基
PDA（Potato Dextrose Agar）是一种常用的培养基，以马铃薯和葡萄糖为主要成分。
它适用于真菌和霉菌的培养和鉴定。
PDA培养基的配方如下：
- 马铃薯提取物：200 g/L
- 葡萄糖：20 g/L
- 洋葱提取液：1 g/L
- 干酪膜素：0.1 g/L
- 硫酸镁：0.5 g/L
- 琼脂：15 g/L
- 蒸馏水：1000 mL
1
制备PDA培养基的步骤如下：
1. 将马铃薯洗净去皮，切成小块。
2. 将马铃薯块放入大容器中，加入适量的蒸馏水，煮沸1
小时，然后离心取得汁液。
3. 将马铃薯汁液过滤。
过滤液为马铃薯提取物。
4. 在一烧瓶中加入马铃薯提取物和葡萄糖，搅拌溶解。
5. 在另一烧瓶中加入洋葱提取液和硫酸镁，搅拌溶解。
6. 将两个烧瓶中的溶液混合在一起，调整pH值为5.6-6.2。
7. 在溶液中加入干酪膜素和琼脂，搅拌溶解。
8. 将培养基加热至沸腾，然后倒入培养瓶中。
9. 灭菌培养瓶，通常以121°C高压蒸汽灭菌20-30分钟。
PDA培养基可以用于分离和培养真菌，如酵母菌、霉菌和
子囊菌等。
它提供了合适的营养物质和适宜的条件，促进
真菌的生长和繁殖。
2。
PDA培养基的配制方法
PDA培养基的配制方法一、目的要求1．学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。
2．学习并掌握棉塞的制作方法。
二、培养基的配制原理培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加上实训和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，但不论是何种培养基，均应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐等。
不同微生物对pH值要求不一样，所以配制培养基时，还应根据不同微生物对pH值的要求，将培养基调到合适的pH值范围。
三、实训材料和用具琼脂，可溶性淀粉，葡萄糖，10﹪NaOH，10﹪HCl，1mol／L NaOH，lmol／L HCl，KNO3，NaCl，K2HPO4·3H20，MgSO4·7H20，FeSO4·7H2O；试管，三角瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，牛角匙，PH试纸，棉花，牛皮纸，记号笔，纱布，四、操作方法与步骤(一) 培养基的配制PDA培养基的配制其配方如下：土豆200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，水1000mL，pH值自然。
(1)称量和熬煮药品实际用量计算后，按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20－30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g（提前搞碎），然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1／5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜；半固体培养基以试管高度的1／3为宜，灭菌后垂直待凝。
PDA培养基的配制及试管斜面制作
PDA培养基的配制及试管斜面制作PDA（Potato Dextrose Agar）是一种常用的培养基，用于微生物的培养和鉴定。
下面将详细介绍PDA培养基的配制方法以及试管斜面的制作步骤。
一、PDA培养基的配制方法：-马铃薯提取物：200g-葡萄糖：20g-琼脂：15g- 蒸馏水：1000ml1.将马铃薯削皮并切成小块，然后放入锅中加入足够的蒸馏水，煮沸30分钟，使马铃薯溶解。
2. 用纱布或过滤纸过滤烧开的马铃薯，收集滤液，将滤液浓缩至1000ml。
3.将浓缩后的马铃薯提取物与葡萄糖混合，搅拌均匀。
4.将琼脂加入马铃薯提取物和葡萄糖混合物中，加入足够的蒸馏水。
5.在烧杯中加热混合物，使琼脂完全溶解。
6.用自动调节器调节pH值为7.0-7.27.将混合物分装至试管或琼脂培养皿中。
8.将试管或琼脂培养皿密封并高压灭菌，高压灭菌时间为121°C，15-20分钟。
二、试管斜面的制作步骤：1.配制好的PDA培养基倒入装有试管的架子中，大约倒满1/3左右。
2.将试管架放入预热至沸腾状态的水浴中。
3.等待试管内的培养基开始沸腾，并保持沸腾状态2-3分钟。
4.将试管架从水浴中取出，让试管内的培养基冷却至接近凝固的状态。
5.倾斜试管架，使试管内的培养基斜倒在试管壁上，形成斜面。
6.等待培养基凝固完全。
7.使用无菌的环针或棉签，在斜面上划线隔离待培养的微生物。
8.将试管密封，高压灭菌。
PDA培养基配制和试管斜面制作之后，可以用于各种微生物的培养和鉴定。
在使用PDA培养基时，要注意严格无菌操作，避免外界的污染。
在制作试管斜面时，也要确保试管和培养基的完全无菌，以保证培养的准确性和可靠性。
简述pda培养基的配方及制作方法
简述pda培养基的配方及制作方法PDA（Potato Dextrose Agar）培养基是一种常用的微生物培养基，适用于真菌和细菌的培养和研究。
下面将简要介绍PDA培养基的配方及制作方法。
一、配方：PDA培养基的基本配方包括土豆提取物、葡萄糖和琼脂。
具体配方如下：- 土豆提取物：200克- 葡萄糖：20克- 琼脂：15克- 蒸馏水：1000毫升二、制作方法：1. 准备土豆提取物：将200克土豆削皮，切成小块，放入锅中加水煮沸，煮至土豆变软烂。
2. 过滤土豆提取物：将煮熟的土豆块取出，将土豆提取物过滤获得澄清的液体。
3. 加入葡萄糖和琼脂：将土豆提取物倒入烧杯中，加入20克葡萄糖，搅拌均匀。
然后加入15克琼脂，再次搅拌均匀。
4. 煮沸溶解：将烧杯放入加热板上，加热煮沸溶解琼脂和葡萄糖，搅拌均匀。
5. 装瓶和灭菌：将溶解后的培养基倒入培养瓶中，每瓶约20毫升。
然后用高压灭菌器将瓶内培养基加压灭菌，保持121摄氏度，压力为15磅，时间为15-20分钟。
6. 结果：冷却后，PDA培养基凝固并变成琼脂状，可用于微生物培养。
PDA培养基的配方中土豆提取物富含碳水化合物、蛋白质和维生素，提供了真菌和细菌所需的营养物质。
葡萄糖作为碳源供能，琼脂则使培养基凝固，便于微生物的生长和观察。
制作PDA培养基的过程中需要注意以下几点：- 严格按照配方和比例加入各种原料，确保培养基的质量。
- 加热溶解琼脂和葡萄糖时要充分搅拌，以免结块或糊底。
- 灭菌时要控制好温度、压力和时间，确保杀灭所有的细菌和真菌。
- 倒入培养瓶时要注意卫生，避免污染和外界微生物的侵入。
PDA培养基是一种常用的通用培养基，适用于各种细菌和真菌的培养和研究。
制作PDA培养基的方法简单易行，成本低廉，因此被广泛应用于微生物学实验室和工业生产中。
通过培养基上微生物的生长情况，可以判断其形态、生理特性和代谢活性等，为微生物的研究提供了重要的基础。
PDA培养基的配制方法
PDA培养基的配制方法一、目的要求1．学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。
2．学习并掌握棉塞的制作方法。
二、培养基的配制原理培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加上实训和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，但不论是何种培养基，均应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐等。
不同微生物对pH值要求不一样，所以配制培养基时，还应根据不同微生物对pH值的要求，将培养基调到合适的pH值范围。
三、实训材料和用具琼脂，可溶性淀粉，葡萄糖， 10﹪NaOH，10﹪HCl，1mol／L NaOH，lmol／L HCl，KNO3，NaCl，K2HPO4·3H20，MgSO4·7H20，FeSO4·7H2O；试管，三角瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，牛角匙，PH试纸，棉花，牛皮纸，记号笔，纱布，四、操作方法与步骤(一) 培养基的配制PDA培养基的配制其配方如下：土豆200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，水1000mL，pH值自然。
(1)称量和熬煮药品实际用量计算后，按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20－30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g（提前搞碎），然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1／5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜；半固体培养基以试管高度的1／3为宜，灭菌后垂直待凝。
pda培养基配方
PDA培养基配方及配制方法PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称。
宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。
下面就详细介绍了pda培养基的配方及配制方法及步骤。
1.PDA培养基的配方：马铃薯200克葡萄糖20克琼脂20克蛋白胨5克磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克水1000ml PH自然。
2.PDA培养基的制作工艺流程：设计培养基配方→材料煮汁→补水→琼脂溶解→再次补水→药品溶解→调PH值→分装→灭菌→摆斜面3.PDA培养基的制作步骤a 材料煮汁：1000ml水置于锅中，待烧开后加入200克去皮、切片的马铃薯煮20到30分钟，至薯片软而不烂，用八层纱布过滤，取滤液。
b 琼脂溶解和补水：将马铃薯滤液重新加入到锅中，补水至1000ml，继续加热沸腾而后加入琼脂，继续文火煮沸至琼脂完全溶解，再次补水至1000ml。
c 药品溶解：在琼脂溶解后加入葡萄糖20克，磷酸二氢钾3克，硫酸镁1.5克，蛋白胨5克。
4 分装：a.试管培养基的分装分装所用的容器事先一定要清洗干燥，新购的试管内一般都残留烧碱，应先用稀硫酸在烧杯中煮沸，然后用清水洗干净，口朝下晾干后备用。
不能现洗现用，以免因管壁附有水膜导致培养基在试管口滑动。
分装试管时尽量避免培养液黏附试管口，以免培养基粘附棉塞，增加污染几率。
试管装量：制斜面培养基一般为试管高度的1/4—1/3。
b.平板培养基的分装将配制好的培养基倒入三角瓶，（三角瓶也一定要清洗干净），体积不要超过三角瓶的1/3（否则加热时液体沸腾易把棉塞冲开）5 加棉塞：棉塞要用普通棉花制作，不能用脱脂棉。
棉塞的大小，松紧要适度，过松达不到滤菌的目的，过紧妨碍空气流通，松紧度以于抓棉塞整个试管提起为宜。
标准的棉塞应是塞头略大，不易变形，一般塞入试管口2—3厘米。
占塞总长的2/3—1/3裸露在试管口外，比管口略大。
三角瓶棉塞同样松紧适中，一般塞入三角瓶3~4cm.6 装锅灭菌：将塞好棉塞的试管或三角瓶装进置物桶内，桶未装满用空试管填满以免试管倾倒，即可放入手提式高压灭菌锅中，盖好报纸，防止灭菌时棉塞被冷凝水淋湿，扭紧锅盖，排净锅内冷空气，待温度升至122—124℃之间开始计时30min，灭菌结束。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
PDA培养基的配制及试管斜面制作
1.实验材料
1.1试剂材料
土豆，葡萄糖，琼脂，试管，试管架，天平，注射用硫酸链霉素，注射用青霉素钠，三角瓶，灭菌锅，电磁炉，超净工作台，烧杯，1mL移液器，培养皿
1.2PDA培养基配方
土豆（去皮）200g
葡萄糖20g
琼脂15-20g
蒸馏水1000mL
pH 自然
2.实验方法与步骤
2.1称量和熬煮
将土豆去皮，按自己所需的量（例如配制1L）称取土豆，将土豆切成小块放入锅内，加入适量的蒸馏水，在电磁炉上加热至沸腾，30min后用4层纱布在大量杯上过滤，弃掉滤渣，滤液用蒸馏水补足1L。
2.2溶解
用天平称取20g葡萄糖加入滤液中，用玻璃棒搅拌，使其完全溶解。
2.3分装
称取8-10g琼脂，加入所用三角瓶中，然后将滤液分装到三角瓶中，每瓶500mL，用玻璃棒将琼脂搅匀。
2.4加棉塞
培养基分装完毕后，在三角瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性。
2.5包扎
加塞后，在棉塞外用两层报纸包裹，其外用橡皮筋包扎好，标记。
2.6灭菌
将配制完成的培养基，包好的平板及其他所需用品一起放入灭菌锅灭菌（见灭菌锅使用方法）。
3.试管斜面制作方法与步骤
3.1前两步同2.1，2.1步骤
3.2加热溶解
量取500mL滤液到1000mL的烧杯中，再加入8-10g的琼脂，用玻璃棒搅匀，放入微波炉缓慢加热溶解，加热其间注意不要让培养基溢出烧杯，不时用玻璃棒搅拌。
3.3分装
等琼脂溶解后，将培养基分装到事先准备好的试管中。
分装量约占试管高度的1/4，管口尽量不要沾染培养基。
3.4加塞
培养基分装完毕后，在试管口上塞上棉塞或橡胶塞，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性。
3.5包扎
加塞后，试管7-9支捆用橡皮筋捆好，在塞外用两层报纸包裹，其外用橡皮筋包扎好，标记。
3.6灭菌
将包好的试管和其他所需灭菌物品一同放入灭菌锅灭菌。
3.7摆斜面
灭菌完成后，将试管拿出，在超净工作台下摆成斜面，根据自己需要选择合适的倾斜度。