实验一斜面培养基制作-课件
细菌的培养实验报告斜面培养基
细菌的培养实验报告斜面培养基细菌的培养实验报告斜面培养基。
这个可以用于，平板培养，加盖，灭菌这几点来做吧！一般都会采取自然干燥或者是高压蒸汽灭菌等方式，但是相对来说都不是特别适合用于斜面培养。
因为这样有时候会影响到底物分布和菌落形成情况。
最好还是用高温高压灭菌法比较好一些！每个培养皿中放入四只菌种，分别注明名称，数量。
按照常规配置的酸碱度进行分装。
大多都是在经过高压灭菌后备用的。
其他就是如果选择水平仪培养箱的话，记得调整温度计读书，大概是32-35度左右吧。
当然了我们都知道细菌生长最佳温度为25-30度，并且，实际操作中，将细胞密度保持在10x10*0.3-0.5 mL 之间的最佳范围内，是提升细胞密度的关键。
所以，只需要每天进行调节即可。
把一支菌液接种至少十六支相同大小的平板上（选择菌株编号末尾是1的作为模板）。
并使之均匀混合，之后便放入培养箱中进行培养。
日常管理主要就是观察和清洁两部分。
不同培养皿需不定期更换平板位置，否则容易造成污染而导致细菌死亡。
总结下来就是消毒。
灭菌。
培养。
这三步骤。
我觉得消毒是最重要的。
也是必须做的。
希望你能采纳。
那么在开始接种之前呢？肯定就是先要对我们使用的器材设备进行消毒啦。
准备好培养皿、三角瓶等器具。
通过专业的测试温度与湿度的工具（通常是烤箱）或是其它科学仪器进行恒温恒湿的预热处理。
再将平皿装满冷却至室温的细菌悬浮液，以待正式接种。
至此细菌菌种制备完毕。
下面就是细菌菌种的分离培养环节。
首先要进行的是消毒工作。
原则上要求严格无菌操作。
才能确保实验结果的精确性。
目标菌的挑取:把从显微镜载玻片挑取出的子实体直接转接到试管斜面上，接种数量大约在10x10*0.2-0.3μm 之间。
之后便进行密封培养，第一次菌液接种应该在培养皿倒扣过夜后进行。
而后边摇晃平板，让沉降到最下层的菌膜能够被充分摇散，使之尽快达到融合状态。
继续密封培养两天。
斜面培养基的制作方法
斜面培养基制作方法(仅供参考)1斜面培养基斜面培养基（agarslantculture-medium ）：固体培养基（solid culture medium ）的一种形式；制作时应趁热定量分装于试管内，并凝固成斜面的称为斜面培养基，用于菌种扩大转管及菌种保藏。
其制作流程图如下图1.图12操作要点倒入培养基的体积以试管1/4左右为宜，斜面的长度不超过试管的一半，一般用15 ×150mm 试管，其容量为5ml。
2.1定型棉塞将制作松紧适宜的棉塞塞进试管，然后放进鼓风的干热灭菌箱中于160℃定型2小时。
定型后切记不能立即打开干热灭苗箱，否则棉塞易燃烧。
要让其冷至100℃以下才能打开，接近室温打开更理想。
这样制作的棉塞，便于培养基分装及接种，还有利于减少污染。
棉塞的制作方法见下图2.图2-a图2-b2.2分装试管将配制好的培养基按常规方法分装试管，在此过程中切勿将培养基沾到度管上部。
若沾到上部，一是影响试管的外观，二是易污染棉塞。
如下图3.图32.3捆扎试管管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。
在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。
如下图4.图42.4灭菌将手提式高压锅内的水换成干净的自来水，水按要求加入，不能过多。
将捆成把的试管立放装进高压锅的内桶中，在试管顶上放适量棉花使之成凸形，再在上面盖上一层牛皮纸，盖上盖进行高压灭菌，在灭苗放冷气的过程中，要尽量慢，以免减压过快，培养基沸腾，打湿棉塞。
冷气放彻底后，待压力达到灭苗要求时，稳压一定时间（培养基种类不同，灭苗时间要求不一样）。
当达到灭菌时间后、最好让压力自然下降至零时再打开高压锅。
打开高压锅时，移去试管上面的牛皮纸和棉花，然后盖上锅盖，并使锅留一条缝隙，让锅内余热烘干棉塞。
2.5摆斜面试管内的凝聚水主要是高温游离水在培养基凝固过程中遇外界温差过大形成的凝结水和摆放斜面时没有足够的热量烘干棉塞上的水分所致，要摆出高质量的斜面试管，必须在培养基凝固过程中避免温差过大，让其缓慢降温，使高温施离水被培养基所吸收，摆出的斜面才不会出现湿棉塞。
实验一斜面培养基制作 ppt课件
装量以不超过其容积的一半为宜）。注意 管口或瓶口不要沾染培养基。
（4）制棉塞 棉花以白色长绒脱脂棉为宜。 根据试管口大小取棉，将其卷成棉塞，最 好 外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉 塞塞入试管2/3。制做棉塞要求外表光滑， 外包的纱不能折、松紧适宜等。
方法步骤：
精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
一.实验目的 1、 掌握食用菌固化培养基的配制。 2、学会棉塞
的制作方法。
二、基本原理
食用菌母种分离、移接和斜面保存菌种都必须 要制作相应的培养基，以备食用菌的培养、分离 和保存之用。
培养基是根据各种食用菌在生长繁殖过程中对 营养物质需求制成的，它可供给食用菌的C源、N 源、水分、各种无机盐及生长物质等。
1．配方（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g， 琼脂15~20g，自来水1000ml，pH自然。
2．制作方法
（1）制滤液： 马铃薯刮去粗皮，去芽眼， 切成碎块，称量后放锅中，加水 1200~1300ml，将其煮沸20min。用双层 纱布过滤，取1000ml滤液。
（2）化琼脂： 将滤液加热至将沸腾时加入 琼脂，不断搅拌，注意控制火力不要使培 养基溢出或烧焦。待琼脂完全融化后加入 剩余原料，并使其溶解（用热水补足水 量）.
A.正确; B.不正确
ห้องสมุดไป่ตู้
实训四液体、半固体、平板、斜面等培养基的制备
感谢您的观看
THANKS
液体培养基
优点是能够提供充足的营养 物质和氧气，适用于大规模 生产；缺点是需要搅拌或摇 动以保持悬浮状态。
半固体培养基
优点是能够观察微生物的运 动性，适用于研究微生物的 运动规律；缺点是操作较为 繁琐。
平板培养基
优点是能够形成单菌落，适 用于分离纯种微生物；缺点 是操作较为繁琐，需要无菌 操作。
斜面培养基
琼脂 葡萄糖
酵母膏
培养基原料
水等 各种维生素和矿物质
灭菌设备
01
高压蒸汽灭菌锅
02
电热恒温培养箱
03
干热灭菌器
04
紫外线灭菌灯
微生物菌种
大肠杆菌 酵母菌
枯草芽孢杆菌 霉菌等
其他辅助材料
玻璃器皿（试管、培养皿、 吸管等）
塑料器皿（培养皿、吸管等）
02
01 03
胶塞或棉塞
滤纸
04
05
标签和记号笔等
04
实训结果与分析
观察微生物在不同类型培养基上的生长情况
液体培养基
微生物在液体培养基中 生长良好，形成均匀的
菌落。
半固体培养基
微生物在半固体培养基 中生长，形成半透明的
菌膜。
平板培养基
斜面培养基
微生物在平板培养基上 生长，形成圆形、凸起
的菌落。
微生物在斜面培养基上 生长，形成连续的菌苔。
分析不同类型培养基对微生物生长的影响
将各种成分按比例混合后加热溶解， 调节pH值，加入琼脂粉并搅拌均匀， 分装于培养皿中，灭菌。凝固后即可 使用。
培养基的制备ppt课件
2.普通琼脂平板培养基
第3.4.5.6组:各100ml
每组倒7枚平板供6小组下次用
6
四、方法
1.肉膏汤培养基的配制: ⑴称样： 牛肉膏0.5g 蛋白胨1g 氯化钠0.5g
加至100ml蒸馏水 中，加热溶化
(2) 待冷至40～50℃时，矫正酸碱度为pH7.6
(3) 分装于试管内（每管约2ml）置高压蒸汽 灭菌器内灭菌(121.3-20min)。
3
三、材料 牛肉膏、蛋白胨 氯化钠、蒸馏水 琼脂，10%NaOH pH试纸、三角烧瓶 量筒，天平 酒精灯、等。
4
四、方法 培 养 基 配 制 步 骤
⑴调配成分 ⑵溶解 ⑶调节 pH ⑷ 分装 ⑸灭菌 ⑹质量检验 ⑺保存
5
各组所需要配制的培养基
1.肉膏汤培养基 3.普通斜面培养基
第1组:各100ml （ 先分装7支）
半固体斜面培养基的制备细菌培养基的制备一目的掌握培养基的制备方法二原理培养基是人工合成的一种混合营养料用以分离细菌
食品微生物学实验
实验四
1
实验项目
细菌培养基的制备
肉膏汤培养基的制备 普通琼脂平板培养基的制备 半固体斜面培养基的制备
2
一、目的
掌握培养基的制备方法 二、原理
培养基是人工合成的一种混合营养料， 用以分离细菌。基础培养基中含有大多数 常见菌生长繁殖所需要的营养物质，并可 制成液体、半固体、固体三种不同的性状 以供选用。
配制出以下培养基： 1.肉膏汤培养基 2.普通琼脂平板培养基 3.普通斜面培养基
16
六、实验报告要求 实验报告中描述本组所配制的培养基。
七、思考题
何谓培养基？ 培养基的制备过程有哪几个步骤？
《培养基的制备》课件
在制备培养基时，需要将 培养基中的气泡排除，以 确保培养基的质量。
3 除菌
必须对培养基进行严格的 除菌处理，以避免外源性 的微生物污染。
6. 结语
培养基的重要性
培养基是细胞培养和微生物研究的基础，对于科学 研究和产业应用具有重要意义。
经验总结
制备培养基时要注意操作规范，保持实验环境的清 洁，确保培养基的质量。
4. 培养基的贮存
1
贮存时间
不同类型的培养基有不同的贮存期限，要根据需要及时更新。
2
贮存温度
培养基应该在指定的温度下储存，避免因温度过高或过低而导致变质。
3
细菌培养
使用培养基时，必须遵循无菌操作，确保细菌的纯度和培养环境的卫生。
5. 培养基的常见问题
1 氧化
2 消泡
培养基暴露在空气中会发 生氧化反应，影响培养效 果，需在贮存时防止氧化。
《培养基的制备》PPT课 件
这是一个关于培养基制备的PPT课件，课件内容包括前言、培养基的组成、培 养基的配制、培养基的贮存、培养基的常见问题以及结语。
1. 前言
培养基是一种用于细菌、真菌和细胞培养的人工培养环境。它提供了细胞生长所需的营养物质和调节因子。
2. 培养基的组成
基Hale Waihona Puke 成分包括碳源、氮源、矿物质和生长因子等。
辅助成分
提供额外的营养物质和调节剂，如洋菜、琼脂和血清等。
酸碱度调节剂
控制培养基的酸碱度，维持适宜的生长环境。
3. 培养基的配制
1
操作步骤
按照特定的步骤和顺序，将不同成分加
器材准备
2
入适量的溶液中，并进行搅拌和消毒处 理。
准备好所需的培养皿、量杯、瓶子、搅
斜面培养基的制作方法
斜面培养基制作方法(仅供参考)1斜面培养基斜面培养基（agarslantculture-medium ）：固体培养基（solid culture medium ）的一种形式；制作时应趁热定量分装于试管内，并凝固成斜面的称为斜面培养基，用于菌种扩大转管及菌种保藏。
其制作流程图如下图1.图12操作要点倒入培养基的体积以试管1/4左右为宜，斜面的长度不超过试管的一半，一般用15 ×150mm 试管，其容量为5ml。
2.1定型棉塞将制作松紧适宜的棉塞塞进试管，然后放进鼓风的干热灭菌箱中于160℃定型2小时。
定型后切记不能立即打开干热灭苗箱，否则棉塞易燃烧。
要让其冷至100℃以下才能打开，接近室温打开更理想。
这样制作的棉塞，便于培养基分装及接种，还有利于减少污染。
棉塞的制作方法见下图2.图2-a 图2-b2.2分装试管将配制好的培养基按常规方法分装试管，在此过程中切勿将培养基沾到度管上部。
若沾到上部，一是影响试管的外观，二是易污染棉塞。
如下图3.图32.3捆扎试管管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。
在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。
如下图4.图42.4灭菌将手提式高压锅内的水换成干净的自来水，水按要求加入，不能过多。
将捆成把的试管立放装进高压锅的内桶中，在试管顶上放适量棉花使之成凸形，再在上面盖上一层牛皮纸，盖上盖进行高压灭菌，在灭苗放冷气的过程中，要尽量慢，以免减压过快，培养基沸腾，打湿棉塞。
冷气放彻底后，待压力达到灭苗要求时，稳压一定时间（培养基种类不同，灭苗时间要求不一样）。
当达到灭菌时间后、最好让压力自然下降至零时再打开高压锅。
打开高压锅时，移去试管上面的牛皮纸和棉花，然后盖上锅盖，并使锅留一条缝隙，让锅内余热烘干棉塞。
2.5摆斜面试管内的凝聚水主要是高温游离水在培养基凝固过程中遇外界温差过大形成的凝结水和摆放斜面时没有足够的热量烘干棉塞上的水分所致，要摆出高质量的斜面试管，必须在培养基凝固过程中避免温差过大，让其缓慢降温，使高温施离水被培养基所吸收，摆出的斜面才不会出现湿棉塞。
斜面培养基的制备
斜面培养基的制备1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，最后补足所需水分。
对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。
2、配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。
并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。
2、调节pH值用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。
3、过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。
用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。
4、分装已过滤的培养基应进行分装。
如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。
如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。
分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。
分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。
装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。
一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。
每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。
5、加棉塞分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。
堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。
棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
制作棉塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同时左手食指与拇指稍稍紧握，就会形成1个长棒形的棉塞。
棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
一.实验目的 1、 掌握食用菌固化培养基的配制。 2、学会棉塞
的制作方法。
二、基本原理
食用菌母种分离、移接和斜面保存菌种都必须 要制作相应的培养基，以备食用菌的培养、分离 和保存之用。
培养基是根据各种食用菌在生长繁殖过程中对 营养物质需求制成的，它可供给食用菌的C源、N 源、水分、各种无机盐及生长物质等。
（6）、灭菌 （7）、摆斜面 （8）、存放冰箱（4-6C） 六、作业
1、简述高压灭菌锅的使用。 2、何谓灭菌？简述热力灭菌的类型和原理。 3.何时加入琼脂？融化时注意术要求？菌种培养时管口堵胶塞 或软木塞行吗？为什么？
ppt课件
7
此课件下载可自行编辑修改，此课件供参考！ 部分内容来源于网络，如有侵权请与我联系删除！感谢你的观看！
四、实验内容
过程：制马铃薯滤液→融化琼脂→培养基的分装 →棉塞的制作
方法步骤：
ppt课件
2
1．配方（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g， 琼脂15~20g，自来水1000ml，pH自然。
2．制作方法
（1）制滤液： 马铃薯刮去粗皮，去芽眼， 切成碎块，称量后放锅中，加水 1200~1300ml，将其煮沸20min。用双层 纱布过滤，取1000ml滤液。
培养基的种类很多，本实验学习斜面培养基 （PDA）制作。
ppt课件
1
三.实验准备
1.器具： 天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、 量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、漏斗 架、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、棉 花、线绳、牛皮纸、皮筋、纱布、电炉、菜刀、 菜板、小铝锅等。
2．材料： 马铃薯、葡萄糖或蔗糖、琼脂、水。
ppt课件
3
（2）化琼脂： 将滤液加热至将沸腾时加入 琼脂，不断搅拌，注意控制火力不要使培 养基溢出或烧焦。待琼脂完全融化后加入 剩余原料，并使其溶解（用热水补足水 量）.
（3分装 :通过漏斗装置，趁热将培养基分装于试 中，装量约占试管高度的1/4（分装三角瓶，其
ppt课件
4
装量以不超过其容积的一半为宜）。注意 管口或瓶口不要沾染培养基。
（4）制棉塞 棉花以白色长绒脱脂棉为宜。 根据试管口大小取棉，将其卷成棉塞，最 好 外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉 塞塞入试管2/3。制做棉塞要求外表光滑， 外包的纱不能折、松紧适宜等。
ppt课件
5
A.正确; B.不正确
ppt课件
6
（5） 包扎： 管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分 用牛皮纸包扎。在包装纸上标明培养基名称，制备组别和 姓名、日期等。