实验2培养基的制备 细菌接种方法
细菌接种实验步骤
细菌接种实验步骤实验目的：细菌接种实验是为了观察细菌在不同条件下的生长情况，进而了解细菌的生物学特性和对不同因素的响应。
实验材料：1. 培养基：含有必需营养物质的培养基，如琼脂、葡萄糖、氯化钠等。
2. 细菌菌种：选择已知种类的细菌菌株，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
3. 培养皿：用于培养细菌的平底培养皿。
实验步骤：1. 准备工作：将培养基加热至溶解，然后冷却至适宜温度（通常为50-60℃），并倒入培养皿中。
待培养基凝固后，进行下一步操作。
2. 细菌接种：取一支已经保存良好的细菌菌株，用无菌的铁环沾取菌液，然后将铁环轻轻划过培养基表面，使菌液均匀分布在培养基上。
3. 培养条件：将接种好的培养皿盖好，放置在适宜的温度下（通常为37℃），并避免阳光直射。
不同种类的细菌对温度要求不同，因此需根据菌株的特性进行调整。
4. 培养时间：根据所要观察的现象和实验目的，确定培养时间。
通常细菌接种后的第一天是菌落形成的初始阶段，第二天开始菌落逐渐扩大，第三天开始菌落逐渐稳定。
5. 观察记录：在培养过程中，要定期观察和记录细菌的生长情况。
可以记录菌落的形状、颜色、大小等特征，并观察是否有溶解现象或其他异常情况。
6. 结果分析：根据观察记录，进行结果分析。
可以比较不同条件下细菌生长情况的差异，进一步探究影响细菌生长的因素。
注意事项：1. 实验过程要注意无菌操作，避免外界细菌的污染。
2. 实验室环境应保持清洁，避免灰尘等杂质进入培养皿。
3. 实验结束后，要妥善处理培养皿和细菌菌株，避免对环境和人体造成危害。
实验结果：通过细菌接种实验，我们可以观察到不同细菌菌株在不同条件下的生长情况。
例如，我们可以发现某些细菌在高温下生长迅速，而在低温下生长缓慢；或者某些细菌对特定营养物质有较强的需求，只有在提供了这些营养物质的情况下才能正常生长。
这些结果为我们进一步研究细菌的生态、抗菌剂的开发等提供了基础。
细菌接种实验是微生物学中常见的实验方法，通过此实验可以更好地了解细菌的生长特性和生态习性，为疾病的预防和治疗提供理论依据。
实验二.培养基的配制及灭菌
实验二培养基的配制及灭菌一、实验目的：1. 掌握常用培养基的制备方法；2. 了解培养基的成分、类型及特点；3. 学会玻璃仪器的洗涤和灭菌前的准备工作。
4.了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程和分装方法。
二、实验原理人工配制的培养基是植物组织培养的营养基础，不同材料对培养基的要求不尽相同，适当地设计和选用培养基对组织培养是至关重要的，一个完整的培养基配方应包含有无机盐、有机营养、水、植物生长调节剂、琼脂及其他成分。
培养基的主要成分的详细内容见课本p26~29。
为了省时和减少多次称量的误差，一般先将药品配制成浓缩一定倍数的母液，用时稀释，储存于冰箱低温（2~4摄氏度）中待用。
基本培养基有8中母液，即大量元素母液、微量元素母液、有机物母液、钙盐母液、铁盐母液、肌醇母液、镁元母液、生长调节物质母液，基本培养基的配制方法有两种：一是可以将培养基的每种成分配成单一化合物的母液，便于配制不同种类的基本培养基时使用；二是配成几种不同的混合液，这样在大量配制同一种培养基时更省时、省力。
在配制母液时应注意防止沉淀产生。
绝大多数生长调节物质不溶于水，可以加热并不断搅拌促使溶解，必要时加入稀酸或稀碱等物质促溶。
各类植物生长调节物质的用量极小,它们对外植体愈伤组织的诱导和根、芽等器官分化起着重要和明显的调节作用。
通常使用的浓度单位是mg/L。
配制好的培养基应在24h之内完成灭菌工作，以免造成杂菌大量繁殖。
灭菌方法有：高温高压灭菌、过滤除菌、射线除菌等方法。
培养基常采取高压灭菌的方法，灭菌时间一般是在0.105MPa压力下，温度121摄氏度时，灭菌时间应根据容积的体积确定，所需最少时间见课本P32表2ˉ2。
培养基必需保证绝对无菌，否则因其营养丰富细菌、真菌极易滋生而导致植物死亡。
灭菌后的培养基不宜马上使用，以免造成培养材料的损失。
（一）、组成培养基的五类成分目前，大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成的。
实验2培养基制备和灭菌技术_基础生物学实验(安徽大学研究生复试用,生物 生命科学)
实验二培养基制备和灭菌技术一、实验目的1．学习一般培养基的制备方法。
2．掌握高压蒸汽灭菌技术，了解几种常用的灭菌方法。
二、实验原理（一）培养基培养基是按照微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工的方法配制而成的一种基质。
它是微生物的生活环境，各种微生物对养分和培养基的物理、化学要求条件不一样，为了分离、培养、鉴定、保藏和研究不同种类的微生物，就应当根据它们的需要，配制合适的培养基。
微生物在培养基上生长发育，必须在一定的最适酸碱度范围才能表现出它们最好的生命活动力。
不同的微生物对酸碱度的要求不同，因此，我们在配制培养基时，必须调节培养基的pH值。
培养基的种类繁多，根据培养基的成分、物理性状不同，可分为天然培养基、合成培养基、半合成培养基、固体培养基、半固体培养基和液体培养基。
1．天然培养基:主要成分是复杂的天然有机物质配制而成，如马铃薯、玉米粉、豆芽汁、牛肉膏、蛋白胨、血清等，这些复杂天然有机物质的成分不完全了解，每次所用的原料，其中各成分的数量也不恒定的天然有机物质配制成的培养基，如牛肉膏蛋白胨、马铃薯、麦芽汁培养基。
它适用于生产上大规模培养微生物。
2．合成培养基:合成培养基是用化学成分完全了解的纯化合物药品配制而成的培养基，也称化学成分明确的培养基，例如高氏一号培养基、查氏培养基等。
一般适用于在实验室范围内研究微生物的形态、代谢、分类鉴定、生物测定、菌种选育和遗传分析等工作。
3．半合成培养基:在以天然有机物作为微生物营养来源的同时，适当补充一些成分已知的化学药品所配制的培养基叫半合成培养基。
大多数微生物都能在此种培养基上生长，因此，应用广泛，如马铃薯葡萄糖(蔗糖)培养基，大多数霉菌都生长良好。
4．固体培养基:在液体培养基中加入凝固剂即为固体培养基，常用凝固剂有洋菜、明胶、硅胶，硅胶用于配制自养微生物的固体培养基；对于其他多数微生物来讲，洋菜最为合适，一般加入1.5～2.5%即可凝固成固体，如牛肉膏蛋白胨培养基等。
培养基的制备与细菌的接种的实验报告
培养基的制备与细菌的接种的实验报告篇一：细菌的分离纯化和接种实验环工综合实验细菌的分离纯化和接种实验实验报告环境科学与工程学院实验中心篇二：微生物实验报告细菌微生物实验报告题目年级专业实验者学号小组成员指导老师一、实验目的脓汁和粪便标本中病原菌的检测 2021级临床医学八年制1.了解细菌生长的基本营养条件，熟悉培养基的类型，学习并掌握培养基的原则与方法。
2.掌握无菌操作技术，掌握病原菌的分离与培养方法。
3.了解并比较细菌在固体、半固体和液体培养基的生长特征。
4.学习并掌握空气及人体细菌检测学方法。
5.掌握细菌涂片标本的制备以及革兰染色法，熟悉不同类型细菌的基本形态。
6.掌握糖发酵实验、抗菌素敏感性实验和血浆凝固酶实验的原理与方法。
7.从脓汁和粪便标本中分离培养和检测出病原体。
二、实验器材1.培养基的制备：干粉培养基、天平、蒸馏水、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、电炉、试管、洗耳球、试管筐、移液管、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、手套、石棉网2.空气与人体体表细菌学检查：琼脂培养基、酒精、碘酒3.细菌的分离培养：脓汁标本、粪便标本、伊红美蓝平板、营养琼脂平板、接种环、酒精灯、打火机4.细菌的纯培养：接种环、酒精灯、打火机、中性笔、斜面培养基5.细菌的形态学检测：斜面培养物、营养肉汤、生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、显微镜、接种环、酒精灯、打火机、中性笔、革兰染色试剂、液体培养基6.细菌的生化试验：葡萄糖发酵管、乳糖发酵管、接种针、酒精灯、打火机、中性笔、菌液、营养琼脂平板、接种环、药物纸片（青霉素、庆大霉素、头孢曲松）、玻片、兔血浆、生理盐水7.细菌的血清学试验：玻片、福氏志贺菌诊断血清、生理盐水、接种环、酒精灯三、实验方法与步骤1.培养基的制备称量琼脂粉→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→罩上硫酸纸、牛皮纸→ 用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室（洗刷室）→灭菌2.空气与人体体表细菌学检查2.1空气的细菌学检查每组1个营养琼脂平板，选择实验楼女厕所→将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边→平板暴露于空气中15分钟→平板倒扣盖上→作标记→37℃温箱培养24小时→观察结果。
细菌培养基的制备灭菌及接种培养技术(共34张PPT)
2.半合成培
养基：有一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。
3.天然培养基：利用天然来源的有机物配制而成。
从培养基的物理状态可分为
1.
液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。
2.固体培养
基：在液体培养基中加入15～30g/L左右的琼脂。
3.半固体培养基：在液体培养基中加入3～5g/L左右的琼脂。
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实验程序4
（培养基和玻璃器材的灭菌方法）
过滤除菌法： 不能用加热灭菌的液 体物质（如维生素、 血清），一般可用细 菌过滤器进行除菌。
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第二部分 细菌纯种分离、培养和接
种技术
目的要求
实验材料
实验程序
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目的要求
掌握从环境中分离培养细菌的方法，从 而获得若干种细菌纯培养技能。 掌握几种接种技术。
注意：器物不能装得太满。 3. 接通电源，进行加热。 4. 排除高压锅内的冷空气，可将排气阀打开，待温度计指示 温度为100℃时关闭排气阀；或当排出的蒸气相当猛烈且微 带蓝色时关闭排气阀。
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实验程序4
（培养基和玻璃器材等的灭菌） 22) ，延长时间。
6. 灭菌时间一到，切断电源，待压力降至零时，才能打开 排气阀，然后打开灭菌器盖，取出物品，排出锅内剩余水 。 7. 待培养基冷却后置于37℃恒温箱内培养24h，若无菌生长 则放入冰箱或阴凉处保存备用。
④ 取对照无菌培养皿，倒平板待凝固后，打开皿盖10min后盖上，倒置于30℃培养24～48h，然后观察结果。
其它：接种环、酒精灯、恒温箱。 实验程序4
（培养基和玻璃器材等的灭菌）
① 取10套无菌培养皿编号， 10－4、10－5、10－6各3个，另一个为空气对照。
细菌接种 实验报告
细菌接种实验报告细菌接种实验报告一、引言细菌是微生物界中最为常见的生物体，它们广泛分布于自然界的各个角落，包括水体、土壤、空气中等。
细菌的研究对于人类的健康和环境保护具有重要意义。
为了深入了解细菌的特性和行为，我们进行了一系列的细菌接种实验。
本实验报告旨在总结实验过程和结果，并对细菌接种的应用前景进行探讨。
二、材料与方法1. 材料- 高温灭菌器- 灭菌培养基- 细菌培养物- 培养皿- 微量移液器- 显微镜2. 方法- 准备培养基：将灭菌培养基倒入培养皿中，并放入高温灭菌器中进行高温灭菌处理，以确保培养基的无菌状态。
- 细菌接种：使用微量移液器，将细菌培养物均匀地滴在培养皿上的培养基表面，避免形成菌落。
- 培养过程：将接种好的培养皿放置在适宜的温度和湿度条件下，观察细菌的生长情况。
- 观察与记录：使用显微镜观察培养皿中的细菌，记录细菌的形态、数量和分布情况。
三、实验结果经过一段时间的培养，我们观察到细菌在培养皿上形成了可见的菌落。
通过显微镜观察，我们发现这些菌落呈现出不同的形态和颜色。
有的菌落呈现出圆形，有的呈现出分枝状；有的菌落呈现出黄色，有的呈现出白色。
这些细菌的数量和分布情况也有所不同，有的菌落较为密集，有的菌落较为稀疏。
四、讨论与分析1. 细菌形态与特性通过观察不同形态的细菌菌落，我们可以初步了解到细菌的形态特征。
圆形的细菌菌落可能属于球菌，分枝状的菌落可能属于分枝杆菌。
而细菌菌落的颜色差异可能与其代谢产物有关。
黄色可能是由于细菌产生了黄色素，而白色可能是由于细菌没有产生色素。
2. 细菌生长与环境因素细菌的生长受到环境因素的影响。
温度、湿度和营养物质的供应都会对细菌的生长产生影响。
在本实验中，我们提供了适宜的温度和湿度条件，以及充足的营养物质，从而促进了细菌的生长。
然而，不同种类的细菌对环境因素的要求也不尽相同，这需要进一步的研究和探索。
3. 细菌接种的应用前景细菌接种在医学、农业和环境保护等领域具有广阔的应用前景。
细菌的接种与培养—培养基的制备(微生物检验课件)
培养基的主要成分及其作用
营养物质：蛋白胨、肉浸液及牛肉膏、糖类、血液、鸡蛋与动物血清、无机盐、 生长因子
水分 凝固物质：琼脂、明胶、卵白 抑制剂：常用的有胆盐、煌绿等抑制革兰阳性菌生长；亚碲酸盐、四硫磺酸盐
及多种抗生素等 指示剂：为了观察细菌是否利用分解糖类、氨基酸等物质，常在某些培养基中
培养基的制备程序
制备程序：调配、溶化、矫正pH、过滤澄清、分装、灭菌、鉴定7个主要步骤 分装量：琼脂斜面分装量约为试管容量的1/4，斜面长度约为试管长度的2/3；液
体培养基和半固体培养基为试管长度的1/3；琼脂平板平皿内径为9cm，倾注培 养基13-15ml，若内径为7cm，倾注培养基7-8ml 灭菌：高压蒸汽灭菌法最常用
原料称量
加热溶化
pH矫正
水
酚红 指示剂
培养基
培养基
比色管
目视
pH矫正
蒸 待馏 测水 管
标培 准养 比基 色
管
过酸
蒸 待 测馏 水 管
标准比培养基 色
管
相同
蒸 待馏 测水 管
标培 准养 比基 色
管
过碱
培养基分装
培养基的包扎
培养基的包扎
细菌生长繁殖的条件有哪些？ 叙述培养基的制备程序。 简述培养基的种类及用途。
加入一定种类的指示剂，如酚红、溴甲酚紫、增菌培养基 选择培养基 鉴别培养基 厌氧培养基
按物理性状分类 • 液体培养基 • 固体培养基 • 半固体培养基
基础培养基
基础培养基
含有基础生长所需的基本营养成分，最 常用的是肉浸液，俗称肉汤，主要成分 含牛肉浸液和蛋白胨。
生长繁殖方式：无性繁殖方式，即二分裂。 生长繁殖速度：多数细菌分裂一代需20～30min。结核分枝杆菌需
实验二细菌的接种、培养及代谢产物
实验二细菌的接种、培养及代谢产物（B a c t e r i a l I n o c u l e t i o n a n d A r t i f i c a l C u l t u r e a n dM e t a b o i c p r o d u c t s）一、细菌的人工培养（A r t i f i c a l C u l t u r e o f B a c t e r i a）在适当条件下，绝大多数细菌可用人工方法培养，使其繁殖，通过人工培养，获得纯种细菌，是进一步观察研究各种细菌具有不同特性的基础。
(一)常用培养基的制备1、肉汤培养基：是常用的液体培养基，也是制备某些其他培养基的基础。
材料：（制备100m l肉汤培养基的用量）(1)培养基的成分：牛肉50g蛋白脂1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾(K2H P04·12H20)0.1g蒸馏水100m1(2)玻皿、试剂、比色管、比色架、吸管、1N与1／20N 的N a O H、三角烧瓶、漏斗、中试管、酚红指示剂、滤纸、卷筒、天平、蒸馏水。
方法：（1）将已去筋膜脂肪并经绞碎鲜牛肉50g，加蒸馏水100m l，放入冰箱中过夜。
（2）加热45—50℃一小时，并煮沸半小时，用数层纱布或滤纸过滤，滤液用蒸馏水补足其量为100m1。
（3）于滤液中加氯化钠0.5g，蛋白脂1g、磷酸氢二钾0.1g，加热使之完全溶化。
（4）测定酸碱度并调整至P H7.6，必要时用滤纸过滤。
（5）按需要分装于试管或烧瓶内，加棉花塞并包装后，置高压蒸汽灭菌器内经15磅／寸220—30分钟灭菌。
（6）灭菌后置37℃温箱，孵育24h，无杂菌生长，即可应用。
或放冰箱备用。
2、普通琼脂培养基它是最常用的固体培养基。
材料：肉汤、琼脂方法：(1)在肉汤中加入2％琼脂，熔化后调整P H7.6，必要时用棉花纱布过滤。
(2)于琼脂凝固前，分装于试管或小烧瓶内，然后加棉塞并包装。
(3)放入高压蒸汽灭菌器内，经15磅/寸220分钟灭菌。
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实验二 细菌培养基的制备
实验项目
细菌培养基的制备
肉膏汤培养基的制备 普通琼脂平板培养基的制备 半固体斜面培养基的制备
细菌的接种方法
手指皮肤细菌检测
一、目的 掌握培养基的制备与细菌的接种方法
二、原理 培养基是人工合成的一种混合营养料， 用以分离细菌。基础培养基中含有大多数 常见菌生长繁殖所需要的营养物质，并可 制成液体、半固体、固体三种不同的性状 以供选用。
三、材料 牛肉膏、蛋白胨 氯化钠、蒸馏水 琼脂，10%NaOH pH试纸、三角烧瓶 量筒，天平 酒精灯、等。
四、方法 培 养 基 配 制 步 骤
⑴调配成分 ⑵溶解 ⑶调节 pH ⑷ 分装 ⑸灭菌 ⑹质量检验 ⑺保存
各组所需要配制的培养基
1.肉膏汤培养基
第1组:各100ml （ 先分装6支） 第2组:100ml
何谓培养基？ 培养基的制备过程有哪几个步骤？ 细菌分区划线法有何意义？
实验课小结
1.各实验小组分析报告本次实验收获体会
2.指导教师进行实验小结
1.细菌的接种方法（分区划线法）
1
(试教)
5 2
4
3
四、方法
细菌的接种方法
(试教制出以下培养基： 1.肉膏汤培养基 2.普通琼脂平板培养基 3.普通斜面培养基
六、实验报告要求 实验报告中描述本组所配制的培 养基；绘图表示分区划线法。 七、思考题
（先分装6支）
3.普通斜面培养基
2.普通琼脂平板培养基
第3.4.5.6组:各100ml
每组倒5枚平板
四、方法
1.肉膏汤培养基的配制: ⑴称样： 牛肉膏0.5g 蛋白胨1g 氯化钠0.5g
加至100ml蒸馏水 中，加热溶化
(2) 待冷至40～50℃时，矫正酸碱度为pH7.6
(3) 分装于试管内（每管约2ml）置高压蒸汽 灭菌器内灭菌(121.3-20min)。
四、方法
2.普通琼脂平板培养基配制：
于100ml肉膏汤培养基中加入2.5g琼脂， 高压蒸汽灭菌，待冷至50～60℃，倒制平板。
3.普通斜面培养基 于100ml肉膏汤培养基中加入1g琼脂， 分装于试管内（每管约3-4ml）置高压蒸 汽灭菌器内灭菌(121.3-20min) .
配制见瓶签说明
四、方法