实验四 培养基的制备、器具包扎和.
【报告】培养基制备实验报告
【关键字】报告培养基制备实验报告篇一：培养基的制备与灭菌实验报告陕西师范大学远程教育学院生物学实验报告报告题目培养基的制备与灭菌姓名刘伟学号专业生物科学批次/层次指导教师学习中心培养基的制备与灭菌一、目的要求1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
2. 掌握培养基的配置原则和方法。
3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。
二、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基：是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌：主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。
待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。
此时蒸汽不溢出，压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。
三、实验材料1. 药品：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/L的NaOH和HCl溶液。
2. 仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。
3. 其他物品：药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。
四、操作步骤（一）玻璃器皿的洗涤和包装1．玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。
将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中．用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸馏水冲净。
移液管先用含有洗涤剂的水浸泡，再用自来水及蒸馏水冲洗。
洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。
2．灭菌前玻璃器皿的包装（1）培养皿的包扎：培养皿由一盖一底组成一套，可用报纸将几套培养皿包成一包，或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内，加盖灭菌。
包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。
（2）移液管的包扎：在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉)，它的作用是避免外界及口中杂菌进入管内，并防止菌液等吸入口中。
培养基制备实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的基本成分和配制方法。
2. 熟悉培养基的灭菌操作流程。
3. 了解培养基在微生物培养中的应用。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基质，通常由碳源、氮源、无机盐、生长因子和水等组成。
根据微生物的营养需求和实验目的，可以配制不同类型的培养基。
灭菌是保证培养基无菌的关键步骤，常用的灭菌方法包括高压蒸汽灭菌、干热灭菌和过滤灭菌等。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 酵母提取物- 胰蛋白胨- 琼脂- NaCl- K2HPO4- MgSO4·7H2O- 水- 水平式电热灭菌锅- 高压蒸汽灭菌锅- 烧杯- 玻璃棒- 试管- 移液器- 灭菌指示剂- 灭菌棉塞2. 仪器：- 电子天平- 灭菌器- 玻璃器皿四、实验步骤1. 培养基的配制：- 称取酵母提取物10g、胰蛋白胨20g、琼脂15g、NaCl 5g、K2HPO4 1g、MgSO4·7H2O 0.5g，加入适量水溶解。
- 将溶液转移至烧杯中，用玻璃棒搅拌至完全溶解。
- 将溶液转移至锥形瓶中，用移液器定容至1000mL。
- 将锥形瓶置于电热灭菌锅中，进行121℃、20min的高压蒸汽灭菌。
2. 灭菌指示剂的加入：- 在灭菌后的培养基中，加入灭菌指示剂，观察指示剂的变化，确认培养基是否灭菌彻底。
3. 培养基的倒平板：- 将灭菌后的培养基冷却至50℃左右，倒入平板中，待凝固后，用无菌镊子取出平板，标记并放置于培养箱中。
五、实验结果与分析1. 培养基灭菌效果：- 通过观察灭菌指示剂的变化，确认培养基灭菌彻底。
2. 培养基平板制备：- 倒平板过程中，注意无菌操作，防止污染。
六、实验讨论1. 培养基的配制过程中，应注意称量准确，避免误差。
2. 灭菌过程中，应控制好温度和时间，确保培养基灭菌彻底。
3. 倒平板过程中，应注意无菌操作，防止污染。
七、实验总结通过本次实验，我们掌握了培养基的基本成分和配制方法，熟悉了培养基的灭菌操作流程，了解了培养基在微生物培养中的应用。
微生物实验
微生物学实验实验一一、目的要求二、基本原理➢➢➢三、实验材料每组同学需要准备以下材料（2人/组）：●●●●●●●●●●●●●●四、实验内容（一）、培养基的配制：注意：标签用铅笔书写，以防高温灭菌时蒸汽模糊字迹。
操作图示：四、实验内容培养基配方：1．配制肉汤斜面培养基50 mL 2．配制麦芽汁斜面培养基3．注意事项：◆◆◆◆（二）培养基灭菌四、实验内容（三）包扎1．培养皿：2．吸管：3．三角玻扒：五、实验报告思考题：◆◆◆◆◆◆◆◆实验二一、目的要求➢➢二、基本原理三、实验材料1．各组所需的物品●●●●2．注意事项：①②①②③④四、实验内容1．微生物的斜面接种技术：斜面接种的操作方法：转下页接种菌名及接种划线方式、接种工具：细菌：霉菌：酵母菌：图2-1 各种无菌操作接种技术示意图图2-2 穿刺接种操作过程示意图2．生物的培养技术——培养箱恒温培养法3. 为下次实验准备平板培养基：注意：标签用铅笔书写，以防高温灭菌时蒸汽模糊字迹。
培养基配方：(1)配制肉汤平板培养基100 mL(2)配制麦芽汁平板培养基配制好的培养基进行灭菌！五、实验报告1．观察记录实验结果:微生物琼脂斜面上的生长状况。
2．思考题:◆◆实验三一、目的要求●●二、基本原理三、实验材料1、各组所需物品：•••••2、平板的制备：四、实验内容1. 平板混合分离法：大肠杆菌，枯草杆菌，单球菌（3皿）图3-1 混合倒平板操作法示意图四、实验内容2. 平板划线分离法：（3皿）图3-2 平板划线分离操作法示意图图3-3 平板划线菌落分离效果图四、实验内容3. 平板涂布分离法(3皿)：图3-4 涂布平板操作法示意图四、实验内容4. 平板点殖：黑曲霉，黄曲霉，根霉（3皿）四、实验内容5. 生物的培养技术：培养箱恒温培养法➢➢五、实验报告1、观察记录实验结果：微生物的菌落特征注:菌落特征描写方法参考如下：五、实验报告2、思考题:实验四一、目的要求二、基本原理转下页二、基本原理三、实验材料1. 菌种：2. 每组制片用具：3. 染色剂1套：四、实验内容四、实验内容3.细菌、酵母菌、霉菌的制片技术及个体形态观察：●●●图4-10 涂片制备过程四、实验内容4 注意事项：●●●●。
常用培养基的制备及注意事项
常用培养基的制备及注意事项一、实验目的了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法;二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物;培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水;根据微生物的种类和实验目的不同,培养基也有不同的种类和配制方法;牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基;由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供微生物生长繁殖之用; 干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果;三、试剂与器材1.器材试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、培养基、分装器、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH度纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、注射器、微孔滤膜过滤器、镊子等;2.试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂四、实验内容1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌五、关键步骤及注意事项1.要严格按配方配制;2.调pH不要过头;3.干热灭菌要注意物品不要堆放过紧,注意温度的时间控制,70oC以下放物、取物;4.高压灭菌要注意物品不要过多,加热后排除冷空气,到时降压回零取物;5.过滤除菌要注意各部件灭菌,压滤时,压力要适当,不可太猛太快,滤膜要注意清洗保存;。
培养基的制备、器具包扎和灭菌
实验五培养基的制备、器具包扎和灭菌一、实验目的1、了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。
2、了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。
3、熟悉分离、培养微生物前的有关准备工作及操作方法。
二、实验原理①培养基分类：据组成成分可分为:1.合成培养基：由各种纯化学物质按一定比例配制而成。
2.半合成培养基：有一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。
3.天然培养基：利用天然来源的有机物配制而成。
据用途可分为1.选择培养基：用来从环境中筛选微生物的培养基加富培养基：加入某种微生物生长繁殖所需的营养物质，使其快速生长，便于分离抑制性培养基：加入某种物质抑制其他微生物生长，使目标微生物得到富集，便于分离2.鉴别培养基：用来检测微生物的某些代谢特性，以便鉴别。
据培养基的物理状态可分为：1.液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。
2.固体培养基：在液体培养基中加入2%左右的凝固剂的固体状态的培养基或农副产品培养基。
3.半固体培养基：在液体培养基中加入0.2—0.5%凝固剂而成的半固体状培养基。
②配置好的培养基必须立即进行灭菌③实验室常用加压蒸汽灭菌法三、实验材料药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、马铃薯、蔗糖；可溶性淀粉、K2HPO4、KNO3、MgSO4•7H2O、FeSO4•7H2O等。
高压蒸汽灭菌锅、恒温干热灭菌箱。
其它：天平、牛角匙、电磁炉、1N HCl、1N NaOH、pH试纸、刻度搪瓷杯、量筒、玻棒、带玻璃珠的三角瓶、带塞子的无菌试管、培养皿、枪头、枪头盒、标签等。
四、实验步骤1、培养基的配制2、分离培养微生物常用器皿的准备3、培养基和玻璃器材的灭菌培养基的配制方法和步骤：1.称量：按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。
2.溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。
3.调pH值：用NaOH或HCl调pH，用pH试纸对照。
4.加琼脂溶化：加热过程中要不断搅拌，可适当补水。
实验四 培养基的制备、器具包扎和
制备无菌水
无菌水为下一次微生物分离实验中所需要 的材料。 250mL三角烧瓶（装有玻璃珠），装自来 水45mL，试管中装9.0mL自来水，塞上棉 塞，包扎、灭菌备用。
物品的准备
三角烧瓶、试管、培养皿、吸管 等的包扎准备。
现场演示
思考题
固体培养基加琼脂后加热溶化时要注意哪些问 题？ 培养基中加琼脂的作用是什么？ 干热灭菌、高压蒸彻底？
3 ．调 pH 在未调 pH 前，先用精密 pH 试纸测量培养基的原始 pH 值，如果 pH 偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入 1mol/L NaOH ，边加边搅 拌，并随时用 pH 试纸测其 pH 值，直至达到所需 pH 值。反之， 则用 1mol/L HCL 进行调节。注意 pH 值不要调过头，以避免回调， 否则，将会影响培养基内各离子的浓度。 4 ．过滤 趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果的观察。一般无特殊要求 的情况下，这一步可以省去。 5 ．分装 按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装 过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起 污染。 （ 1 ）液体分装 分装高度以试管高度的 1/4 左右为宜。 （ 2 ）固体分装 分装试管，其装量不超过管高的 1/5 ，灭菌后制成 斜面，分装三角瓶的量不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
9 ．搁置斜面 将灭菌的试管培养基冷至 50 ℃ 左右，将试管棉塞端搁在玻棒上， 搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
10 ．无菌检查 将灭菌的培养基放入 37 ℃ 的温室中培养 24 — 48 小时，以检查灭菌是否彻底。
培养基的配制方法和步骤
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基
（用于分离和培养细菌，是一种天 然培养基）配方如下：
培养基的制备实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的基本制备原理和方法。
2. 学会牛肉膏蛋白胨培养基的配制过程。
3. 了解培养基灭菌的重要性及常用灭菌方法。
4. 熟悉实验室无菌操作的基本规范。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基质，主要由碳源、氮源、无机盐、生长因素和水等成分组成。
根据微生物的种类和实验目的，培养基可以有不同的配方和种类。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌基础培养基，适用于培养大多数细菌。
三、实验材料与仪器实验材料：- 牛肉膏- 蛋白胨- 氯化钠- 琼脂- 蒸馏水- pH试纸- 灭菌棉塞- 高压蒸汽灭菌锅- 三角瓶- 烧杯- 量筒- 移液管- 玻璃棒- 培养皿- 等等。
四、实验步骤1. 称量：根据牛肉膏蛋白胨培养基的配方，准确称取牛肉膏、蛋白胨、氯化钠等成分。
2. 溶解：将称量好的牛肉膏、蛋白胨等成分放入烧杯中，加入适量的蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其充分溶解。
3. 调整pH值：用pH试纸测定溶液的pH值，根据需要加入适量的1M盐酸或氢氧化钠溶液调整pH值至7.2-7.6。
4. 灭菌：将溶解好的培养基转移至三角瓶中，加入灭菌棉塞，用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，灭菌时间为15-20分钟。
5. 冷却：灭菌后，待培养基冷却至50-60℃，加入适量的琼脂，充分搅拌使其溶解。
6. 分装：将冷却后的培养基分装至培养皿中，待凝固后备用。
7. 无菌操作：在无菌操作条件下，用移液管吸取适量的菌液，接种至培养基中。
五、实验结果与分析1. 培养基制备：成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基，颜色呈淡黄色，透明度高。
2. 灭菌效果：通过高压蒸汽灭菌，确保了培养基的无菌状态，避免了微生物污染。
3. 接种结果：接种后，培养基上出现了菌落生长，表明培养基对细菌具有良好的培养效果。
六、实验讨论1. 在培养基的制备过程中，称量、溶解、调整pH值等步骤对培养基的质量至关重要，应严格按照实验步骤进行操作。
2. 灭菌是防止培养基污染的关键环节，应选择合适的灭菌方法，确保灭菌效果。
无菌操作技术—用品的清洗、包扎、灭菌及培养基的配制
无菌操作技术—用品的清洗、包扎、灭菌及培养基的配制无菌操作技术是实验室中非常重要的技术，可以保证实验结果的准确性和可靠性。
以下是用品的清洗、包扎、灭菌以及培养基的配制的一些建议和步骤：用品的清洗在进行无菌实验前，确保所有用品是干净的，没有任何污染物。
1. 使用洗碗液和温水彻底清洗所有用品，包括培养皿、试管、移液器等。
2. 用专用的刷子和洗涤剂清洗玻璃器皿，保证器皿内外表面完全清洁。
3. 用去离子水或者超纯水冲洗所有用品，以除去洗涤剂和其他杂质。
4. 沥干并摆放用品在干净的工作台上。
用品的包扎包扎是为了防止用品在操作过程中受到外界污染。
1. 在无菌环境下，将用品放在无菌纸上。
2. 使用无菌纸或箔纸将用品包裹好，封口处用无菌胶带固定。
3. 将包扎好的用品放入无菌中，并密封。
用品的灭菌灭菌是为了杀死用品上的细菌和其他微生物。
1. 使用常见的灭菌方法包括高温干热灭菌和湿热灭菌。
2. 对于耐高温的器皿，如玻璃器皿，可以选择高温干热灭菌。
将器皿放入预热至160°C的高温灭菌器中，保持30分钟。
3. 对于耐湿热的器皿，如塑料器皿，可以选择湿热灭菌。
将器皿放入预热至121°C的压力灭菌器中，保持15-20分钟。
培养基的配制培养基是进行微生物培养的基础，配制过程需要严谨操作。
1. 根据需要的培养基种类和配方，准备所需的培养基成分。
2. 使用称量器具准确称量所需成分，并将其加入无菌中。
3. 向无菌中添加适量的热蒸馏水，并搅拌混合，直到成分溶解彻底。
4. 根据需要调整pH值，并使用pH计进行测量和校准。
5. 分装培养基到无菌培养皿或试管中。
6. 对于固体培养基，添加适量琼脂糖，并将其加热至混合溶解。
然后将培养皿冷却，直到琼脂糖凝固。
以上是无菌操作技术中用品的清洗、包扎、灭菌以及培养基的配制的基本步骤和建议。
通过严格遵循这些步骤，可以提高实验的可靠性，并避免实验结果的污染和误差。
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6 ．加塞 培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以防止外 界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能。 7 ．包扎 加塞后，将全部试管用麻绳捆扎好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以 防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注 明培养基名称、组别、日期。三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻 绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名 称、组别、日期。 8 ．灭菌 一般培养基是在 1.0 5 ㎏ / ㎝ 2 （ 15 磅 / 英寸 2 ）， 121.3 ℃ ， 15-30 分钟高压蒸汽灭菌。如因特殊情况不能及时灭菌，则应放入 冰箱内暂存。
制备无菌水
无菌水为下一次微生物分离实验中所需要 的材料。 250mL三角烧瓶（装有玻璃珠），装自来 水45mL，试管中装9.0mL自来水，塞上棉 塞，包扎、灭菌备用。
物品的准备
三角烧瓶、试管、培养皿、吸管 等的包扎准备。
现场演示
思考题
固体培养基加琼脂后加热溶化时要注意哪些问 题？ 培养基中加琼脂的作用是什么？ 干热灭菌、高压蒸汽灭菌和间歇灭菌的场合有 何不同？ 如何检查培养基灭菌是否彻底？
间歇灭菌法： 待灭菌的物品放在灭菌器或蒸笼里，每天 蒸煮1次，每次煮沸1h，连续3d重复进行。 在每两次蒸煮之间，将物品（指培养基） 放在370C恒温条件下培养过夜，这样可以 使每次蒸煮后未杀死残留的芽孢萌发成营 养体，以便下次蒸煮时杀灭。 过滤除菌法： 不能用加热灭菌的液体物质（如维生素、 血清），一般可用细菌过滤器进行除菌。
紫外线灭菌法： 一般30W灯管，9m3空间，距地面2m每次打开 紫外线照射0.5h，就使室内空气灭菌。若照射 紫外线时先喷洒石炭酸等化学消毒剂，可增强 灭菌效果。紫外线虽有较强的杀菌力，但穿透 力弱，即使一薄层玻璃或水层就能将大部分紫 外线滤除，因此只适用于空气及表面杀菌。
化学药剂消毒灭菌： 微生物实验室中常用的化学杀菌剂有升汞、甲 醛、高锰酸钾、酒精、碘酒、龙胆紫、石炭酸、 漂白粉、新洁尔灭、煤酚皂溶液，它们有的是 杀菌剂，有的是抑菌剂。
实 验 四
培养求
了解培养基的配制原理和方法，掌握其 配制过程。 了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和 加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。 熟悉分离、培养微生物前的有关准备工 作及操作方法。
实验原理
培养基 据组成成分可分为:
1.合成培养基：由各种纯化学物质按一定比例配制而成。 2.半合成培养基：有一部分纯化学物质和另一部分天然物 质配制而成。 3.天然培养基：利用天然来源的有机物配制而成。 剧用途可分为 1.基础培养基：能满足各种微生物的营养需求 ２.加富培养基：加入某种微生物生长繁殖所需的营养物质， 使其快速生长，便于分离 3.选择培养基：加入某种物质抑制其他微生物生长，使目 标微生物得到富集，便于分离 4.鉴别培养基：用来检测微生物的某些代谢特性。
牛肉膏 蛋白胨 氯化钠 琼脂 自来水 pH 灭菌 3g 5g 3g 20g 1000mL 7.0~7.2 1.05kg/cm2， 25~30min
马铃薯蔗糖琼脂培养基
用于分离和培养真菌之用，是一种半合成培养 基，其配方如下：
去皮马铃薯（或鲜豆芽） 200g 蔗糖 20g 自来水 1000mL 琼脂 20g pH 自然 灭菌：（含蔗糖）1.05kg/cm2 20min
实 验 四 结 束
实验材料
药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、马铃薯、蔗糖； 可溶性淀粉、K2HPO4、KNO3、MgSO4•7H2O、 FeSO4•7H2O等。 高压蒸汽灭菌器、恒温干热灭菌箱、紫外线杀菌灯。 其它：天平、牛角匙、电炉、1N HCl、1N NaOH、pH试 纸、刻度搪瓷杯、量筒、漏斗、漏斗架、玻棒、带玻璃珠 的三角瓶、带棉塞的无菌试管、无棉塞的空试管、培养皿、 吸管、各种包装纸、防水纸、绳索、棉花、标签等。
高氏一号培养基
用于分离和培养放线菌，是一种合成培 养基。配方如下：
可溶性淀粉 KNO3 K2HPO4 MgSO4• 7H2O NaCl FeSO4• 7H2O pH 琼脂 自来水 灭菌： 1.05kg/cm2 20.0g 1.0g 0.5g 0.5g 0.5g 0.01g 7.4~7.6 20g 1000mL 30min
9 ．搁置斜面 将灭菌的试管培养基冷至 50 ℃ 左右，将试管棉塞端搁在玻棒上， 搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
10 ．无菌检查 将灭菌的培养基放入 37 ℃ 的温室中培养 24 — 48 小时，以检查灭菌是否彻底。
培养基的配制方法和步骤
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基
（用于分离和培养细菌，是一种天 然培养基）配方如下：
实验步骤
培养基的配制 分离培养微生物常用器皿的准备 培养基和玻璃器材的灭菌
培养基的配制方法和步骤
1 ．称量 按培养基配方（见附录）比例依次准确地称取试剂、药品等 放入烧 杯中。牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水 溶化后倒入烧杯。也可放在称量纸上，称量后直接放入水中，这时 如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。蛋白 胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。称药品时严防药品混杂，一把 牛角匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净、擦干，再称取另 一药品，瓶盖也不要盖错。 2 ．溶化 在装有试剂和药品的烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀 ，然后，在石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后，补充水分到 所需的总体积。如果配制固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化的药 品中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊 底使烧杯破裂。最后补足所失的水分。
3 ．调 pH 在未调 pH 前，先用精密 pH 试纸测量培养基的原始 pH 值，如果 pH 偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入 1mol/L NaOH ，边加边搅 拌，并随时用 pH 试纸测其 pH 值，直至达到所需 pH 值。反之， 则用 1mol/L HCL 进行调节。注意 pH 值不要调过头，以避免回调， 否则，将会影响培养基内各离子的浓度。 4 ．过滤 趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果的观察。一般无特殊要求 的情况下，这一步可以省去。 5 ．分装 按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装 过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起 污染。 （ 1 ）液体分装 分装高度以试管高度的 1/4 左右为宜。 （ 2 ）固体分装 分装试管，其装量不超过管高的 1/5 ，灭菌后制成 斜面，分装三角瓶的量不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
消毒：使用理化因素方法杀死物体表面绝大多数微生物的 方法。 灭菌：采用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物的方 法。 干热灭菌法：电热烘箱作为干热灭菌器 加压蒸汽灭菌法其步骤如下： 1.灭菌器内加入一定量的水，将包扎好的物品放入其中。 2.接通电源，进行加热 3. 排除高压锅内的冷空气，可将排气阀打开，待排出大 气后关闭排气阀；或关闭排气阀，待压力上升到 0.5kg/cm2时再打开排气阀，待压力回复到0时再关闭排气 阀。 4.当压力达1.05kg/cm2时，此时灭菌器内的温度为1210C， 维持30min。对热不稳定的培养基如含有葡萄糖、氨基酸 等物时，应适当降低压力，延长时间。 5.灭菌时间一到，切断电源，待压力降至零时，才能打开 排气阀，然后打开灭菌器盖，取出物品。
从培养基的物理状态可分为
1.液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。 2.固体培养基：在液体培养基中加入2%左右的凝固剂 的固体状态的培养基或农副产品培养基。 3.半固体培养基：在液体培养基中加入0.2—0.5%凝固 剂而成的半固体状培养基。
常用凝固剂为琼脂（其次为明胶），又叫洋菜、冻粉。