实验一斜面培养基制作-课件
项目1配制斜面培养基
项目1 配制斜面培养基微生物同其他生物一样，需要不断从外界吸收营养物质，经过一系列的生物化学作用，获得能量并形成新的细胞物质、代谢产物，同时排出副产物及废物。
不同的微生物对营养物质的需求也不一样。
培养基就是人工配制的供微生物或动植物细胞生长、繁殖、代谢和合成所需产物的营养物质和原料，当然，除此之外，培养基也为微生物等提供合适的生长环境条件。
常用的培养基都必须满足或符合一些基本要求，包括含有作为合成细胞成分的原料、满足生化反应的条件、一定的pH等。
因此，培养基的组成和配比是否恰当对微生物等的生长、繁殖、产物的形成、提取分离工艺的选择、产品质量和产量等都有很大的影响。
优良的培养基可以充分发挥微生物细胞的生物合成能力，产生最好的效果。
1 基础知识1.1 微生物细胞的化学组成及胞外代谢产物1.1.1 微生物细胞的化学组成微生物营养物质的确定，主要依据细胞的化学组成及所代谢产物的化学组成。
因此，分析微生物细胞的化学组成是了解微生物营养的基础。
表1-1列出了几种微生物细胞的化学组成。
由表可知，微生物细胞含有80％左右的水分和20％左右的干物质，它主要是由碳、氢、氧、氮等元素组成，约占全部干物质的90％～97％，此外，还含有各种无机矿物质。
而在微生物细胞的干物质中，碳约占45％～55％；氮在细菌和酵母中含量较高，约占7％～13％，在霉菌中含量较低，约占5％。
一般来说，碳和氮在微生物细胞化学组成中的比例大约为5：1。
而无机矿物质约占全部干重的3％～10％，其中以磷的含量最高，大多数微生物细胞中磷的含量可达全部灰分的50％，其次是钾、镁、钙、硫、钠等，铁、锌、锰、硼、钼、硅等的含量极微。
1.1.2 微生物胞外代谢产物微生物在生长过程中，除利用外源营养物质合成新的细胞外，还会产生一些有机化合物分泌到微生物的体外，这些胞外代谢产物的种类繁多，且因微生物的种类而异。
因此，了解这些代谢产物的化学组成，极有助于微生物培养时的营养物质的选择和代谢产物的积累。
细菌培养基的制备、灭菌及接种、培养技术ppt课件
目的要求
掌握从环境中分离培养细菌的方法，从 而获得若干种细菌纯培养技能。 掌握几种接种技术。
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实验材料
无菌培养皿(直径90mm)10套、无菌移液管1mL2
支、10mL1支。
营养琼脂培养基1瓶，活性污泥或土壤或湖水1瓶， 无菌稀释水90mL1瓶、9mL5管。 其它：接种环、酒精灯、恒温箱。
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c. 第三次蒸煮之后基本无菌，但为了确保无菌仍要放 在37℃恒温条件下培养24h，确定无菌才能使用。
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实验程序4
（培养基和玻璃器材的灭菌方法）
过滤除菌法： 不能用加热灭菌的 液体物质（如维生 素、血清），一般 可用细菌过滤器进 行除菌。
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第二部分 细菌纯种分离、培养和接
种技术
目的要求 实验材料 实验程序
9
实 验 程 序2
（培养基的配制方法和步骤） 3. 调pH值：用10％ NaOH调pH至7.6，用精 密pH试纸对照。 4. 分装：将培养基分装于5支试管，其余全部 倒入250mL锥形瓶中，分别塞上棉塞。注意 不要污染棉塞和瓶口。 5. 包扎成捆，挂上标签，注明何种培养基。 6. 灭菌备用：培养基灭菌后必须在37℃下恒 温培养24h，确定无菌生长，方可使用。
实验二
细菌培养基的配制、灭 菌及接种、培养技术
1
第一部分 细菌培养基的制备、灭菌
目的要求 实验材料 实验程序
2
目的要求
熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备。 掌握培养基和无菌水的制备方法。 掌握高压蒸气灭菌技术。
3
实验材料
药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水等。
高压蒸气灭菌锅、烘箱、细菌过滤器、酒精灯。 其它：培养皿、试管、移液管、锥形瓶、烧杯、玻 璃珠等。
实验一斜面培养基制作 ppt课件
装量以不超过其容积的一半为宜）。注意 管口或瓶口不要沾染培养基。
（4）制棉塞 棉花以白色长绒脱脂棉为宜。 根据试管口大小取棉，将其卷成棉塞，最 好 外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉 塞塞入试管2/3。制做棉塞要求外表光滑， 外包的纱不能折、松紧适宜等。
方法步骤：
精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
一.实验目的 1、 掌握食用菌固化培养基的配制。 2、学会棉塞
的制作方法。
二、基本原理
食用菌母种分离、移接和斜面保存菌种都必须 要制作相应的培养基，以备食用菌的培养、分离 和保存之用。
培养基是根据各种食用菌在生长繁殖过程中对 营养物质需求制成的，它可供给食用菌的C源、N 源、水分、各种无机盐及生长物质等。
1．配方（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g， 琼脂15~20g，自来水1000ml，pH自然。
2．制作方法
（1）制滤液： 马铃薯刮去粗皮，去芽眼， 切成碎块，称量后放锅中，加水 1200~1300ml，将其煮沸20min。用双层 纱布过滤，取1000ml滤液。
（2）化琼脂： 将滤液加热至将沸腾时加入 琼脂，不断搅拌，注意控制火力不要使培 养基溢出或烧焦。待琼脂完全融化后加入 剩余原料，并使其溶解（用热水补足水 量）.
A.正确; B.不正确
ห้องสมุดไป่ตู้
实训四液体、半固体、平板、斜面等培养基的制备
感谢您的观看
THANKS
液体培养基
优点是能够提供充足的营养 物质和氧气，适用于大规模 生产；缺点是需要搅拌或摇 动以保持悬浮状态。
半固体培养基
优点是能够观察微生物的运 动性，适用于研究微生物的 运动规律；缺点是操作较为 繁琐。
平板培养基
优点是能够形成单菌落，适 用于分离纯种微生物；缺点 是操作较为繁琐，需要无菌 操作。
斜面培养基
琼脂 葡萄糖
酵母膏
培养基原料
水等 各种维生素和矿物质
灭菌设备
01
高压蒸汽灭菌锅
02
电热恒温培养箱
03
干热灭菌器
04
紫外线灭菌灯
微生物菌种
大肠杆菌 酵母菌
枯草芽孢杆菌 霉菌等
其他辅助材料
玻璃器皿（试管、培养皿、 吸管等）
塑料器皿（培养皿、吸管等）
02
01 03
胶塞或棉塞
滤纸
04
05
标签和记号笔等
04
实训结果与分析
观察微生物在不同类型培养基上的生长情况
液体培养基
微生物在液体培养基中 生长良好，形成均匀的
菌落。
半固体培养基
微生物在半固体培养基 中生长，形成半透明的
菌膜。
平板培养基
斜面培养基
微生物在平板培养基上 生长，形成圆形、凸起
的菌落。
微生物在斜面培养基上 生长，形成连续的菌苔。
分析不同类型培养基对微生物生长的影响
将各种成分按比例混合后加热溶解， 调节pH值，加入琼脂粉并搅拌均匀， 分装于培养皿中，灭菌。凝固后即可 使用。
培养基的制备ppt课件
2.普通琼脂平板培养基
第3.4.5.6组:各100ml
每组倒7枚平板供6小组下次用
6
四、方法
1.肉膏汤培养基的配制: ⑴称样： 牛肉膏0.5g 蛋白胨1g 氯化钠0.5g
加至100ml蒸馏水 中，加热溶化
(2) 待冷至40～50℃时，矫正酸碱度为pH7.6
(3) 分装于试管内（每管约2ml）置高压蒸汽 灭菌器内灭菌(121.3-20min)。
3
三、材料 牛肉膏、蛋白胨 氯化钠、蒸馏水 琼脂，10%NaOH pH试纸、三角烧瓶 量筒，天平 酒精灯、等。
4
四、方法 培 养 基 配 制 步 骤
⑴调配成分 ⑵溶解 ⑶调节 pH ⑷ 分装 ⑸灭菌 ⑹质量检验 ⑺保存
5
各组所需要配制的培养基
1.肉膏汤培养基 3.普通斜面培养基
第1组:各100ml （ 先分装7支）
半固体斜面培养基的制备细菌培养基的制备一目的掌握培养基的制备方法二原理培养基是人工合成的一种混合营养料用以分离细菌
食品微生物学实验
实验四
1
实验项目
细菌培养基的制备
肉膏汤培养基的制备 普通琼脂平板培养基的制备 半固体斜面培养基的制备
2
一、目的
掌握培养基的制备方法 二、原理
培养基是人工合成的一种混合营养料， 用以分离细菌。基础培养基中含有大多数 常见菌生长繁殖所需要的营养物质，并可 制成液体、半固体、固体三种不同的性状 以供选用。
配制出以下培养基： 1.肉膏汤培养基 2.普通琼脂平板培养基 3.普通斜面培养基
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六、实验报告要求 实验报告中描述本组所配制的培养基。
七、思考题
何谓培养基？ 培养基的制备过程有哪几个步骤？
斜面培养基的制作方法
斜面培养基的制作方法
斜面培养基是一种常用于细菌培养的培养基。
它的特点是表面呈斜面形状，使得细菌在培养过程中能够自然地向上生长。
这样可以使得细菌在培养过程中更容易被观察和检测。
制作斜面培养基的方法如下：
1.准备所需的原料：培养基粉末、蒸馏水、烧杯、烧杯架、烧瓶、
温度计、制备烧瓶的抗菌膜。
2.将培养基粉末加入蒸馏水中，按照说明书上的比例进行配制。
一
般情况下，每克培养基粉末需要加入50-100毫升的蒸馏水。
3.将配制好的培养基倒入烧杯中，用烧杯架将烧杯放在烧瓶中。
4.用温度计测量培养基的温度，当培养基温度降到40-50°C时，放
入制备好的抗菌膜。
5.将烧瓶盖上，并在烧瓶上方用胶带粘贴一个斜面模板。
6.将烧瓶放置在37°C的恒温槽中，使培养基保持在37°C的温度
下进行培养。
7.在培养过程中，定期观察细菌的生长情况，并记录下来。
《培养基的制备》课件
在制备培养基时，需要将 培养基中的气泡排除，以 确保培养基的质量。
3 除菌
必须对培养基进行严格的 除菌处理，以避免外源性 的微生物污染。
6. 结语
培养基的重要性
培养基是细胞培养和微生物研究的基础，对于科学 研究和产业应用具有重要意义。
经验总结
制备培养基时要注意操作规范，保持实验环境的清 洁，确保培养基的质量。
4. 培养基的贮存
1
贮存时间
不同类型的培养基有不同的贮存期限，要根据需要及时更新。
2
贮存温度
培养基应该在指定的温度下储存，避免因温度过高或过低而导致变质。
3
细菌培养
使用培养基时，必须遵循无菌操作，确保细菌的纯度和培养环境的卫生。
5. 培养基的常见问题
1 氧化
2 消泡
培养基暴露在空气中会发 生氧化反应，影响培养效 果，需在贮存时防止氧化。
《培养基的制备》PPT课 件
这是一个关于培养基制备的PPT课件，课件内容包括前言、培养基的组成、培 养基的配制、培养基的贮存、培养基的常见问题以及结语。
1. 前言
培养基是一种用于细菌、真菌和细胞培养的人工培养环境。它提供了细胞生长所需的营养物质和调节因子。
2. 培养基的组成
基Hale Waihona Puke 成分包括碳源、氮源、矿物质和生长因子等。
辅助成分
提供额外的营养物质和调节剂，如洋菜、琼脂和血清等。
酸碱度调节剂
控制培养基的酸碱度，维持适宜的生长环境。
3. 培养基的配制
1
操作步骤
按照特定的步骤和顺序，将不同成分加
器材准备
2
入适量的溶液中，并进行搅拌和消毒处 理。
准备好所需的培养皿、量杯、瓶子、搅
斜面培养基的制备
斜面培养基的制备1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，最后补足所需水分。
对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。
2、配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。
并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。
2、调节pH值用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。
3、过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。
用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。
4、分装已过滤的培养基应进行分装。
如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。
如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。
分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。
分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。
装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。
一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。
每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。
5、加棉塞分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。
堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。
棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
制作棉塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同时左手食指与拇指稍稍紧握，就会形成1个长棒形的棉塞。
棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。
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三.实验准备
1.器具： 天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、 量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、漏斗 架、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、棉 花、线绳、牛皮纸、皮筋、纱布、电炉、菜刀、 菜板、小铝锅等。
2．材料： 马铃薯、葡萄糖或蔗糖、琼脂、水。
四、实验内容
过程：制马铃薯滤液→融化琼脂→培养基的分装 →棉塞的制作
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3、越是没有本领的就越加自命不凡。 20.12.1 101:44: 3701:4 4Dec-20 11-Dec-20
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4、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的 错儿。 01:44:3 701:44: 3701:4 4Friday , December 11, 2020
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5、知人者智，自知者明。胜人者有力 ，自胜 者强。 20.12.1 120.12. 1101:4 4:3701: 44:37D ecembe r 11, 2020
2020 1:44:37 AM01:44:372020/12/11
• 11、自己要先看得起自己，别人才会看得起你。12/11/
谢 谢 大 家 2020 1:44 AM12/11/2020 1:44 AM20.12.1120.12.11
• 12、这一秒不放弃，下一秒就会有希望。11-Dec-2011 December 202020.12.11
（3分装 :通过漏斗装置，趁热将培养基分装于试 中，装量约占试管高度的1/4（分装注意 管口或瓶口不要沾染培养基。
（4）制棉塞 棉花以白色长绒脱脂棉为宜。 根据试管口大小取棉，将其卷成棉塞，最 好 外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉 塞塞入试管2/3。制做棉塞要求外表光滑， 外包的纱不能折、松紧适宜等。
哪些？
4. 棉塞的作用有哪些和技术要求？菌种培养时管口堵胶塞 或软木塞行吗？为什么？
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1、有时候读书是一种巧妙地避开思考 的方法 。20.1 2.1120. 12.11Fr iday, December 11, 2020
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2、阅读一切好书如同和过去最杰出的 人谈话 。01:4 4:3701: 44:3701 :4412/ 11/2020 1:44:37 AM
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6、意志坚强的人能把世界放在手中像 泥块一 样任意 揉捏。 2020年 12月11 日星期 五上午 1时44 分37秒0 1:44:37 20.12.1 1
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7、最具挑战性的挑战莫过于提升自我 。。20 20年12 月上午 1时44 分20.12. 1101:4 4December 11, 2020
一.实验目的 1、 掌握食用菌固化培养基的配制。 2、学会棉塞
的制作方法。
二、基本原理
食用菌母种分离、移接和斜面保存菌种都必须 要制作相应的培养基，以备食用菌的培养、分离 和保存之用。
培养基是根据各种食用菌在生长繁殖过程中对 营养物质需求制成的，它可供给食用菌的C源、N 源、水分、各种无机盐及生长物质等。
方法步骤：
1．配方（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g， 琼脂15~20g，自来水1000ml，pH自然。
2．制作方法
（1）制滤液： 马铃薯刮去粗皮，去芽眼， 切成碎块，称量后放锅中，加水 1200~1300ml，将其煮沸20min。用双层 纱布过滤，取1000ml滤液。
（2）化琼脂： 将滤液加热至将沸腾时加入 琼脂，不断搅拌，注意控制火力不要使培 养基溢出或烧焦。待琼脂完全融化后加入 剩余原料，并使其溶解（用热水补足水 量）.
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8、业余生活要有意义，不要越轨。20 20年12 月11日 星期五 1时44 分37秒0 1:44:37 11 December 2020
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9、一个人即使已登上顶峰，也仍要自 强不息 。上午 1时44 分37秒 上午1时 44分01 :44:372 0.12.11
• 10、你要做多大的事情，就该承受多大的压力。12/11/
A.正确; B.不正确
（5） 包扎： 管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分 用牛皮纸包扎。在包装纸上标明培养基名称，制备组别和 姓名、日期等。
（6）、灭菌 （7）、摆斜面 （8）、存放冰箱（4-6C） 六、作业
1、简述高压灭菌锅的使用。 2、何谓灭菌？简述热力灭菌的类型和原理。 3.何时加入琼脂？融化时注意什么问题？分装的技术要求有
• 13、无论才能知识多么卓著，如果缺乏热情，则无异 纸上画饼充饥，无补于事。Friday, December 11, 202011
-Dec-2020.12.11
• 14、我只是自己不放过自己而已，现在我不会再逼自 己眷恋了。20.12.1101:44:3711 December 202001:44