兽医生物制品检验技术的标准化
兽药GMP检查验收项目(生物制品)
兽药 GMP 检查验收工程〔生物制品〕序号*001 002003 *004 005 章节条款内容企业应建立生产和质量治理机构，明确各类机构和人员的职责。
应建立生产治理和质量治理人员的个人档案。
企业主管生产治理的负责人和质量治理的负责人应具有兽医、生物制药等相关专业大专以上学历，并具有生产、质量治理工作阅历。
生产治理部门的负责人和质量治理部门的负责人应具有兽医、生物制药等相关专业大专以上学历，有兽医生物制品生产、质量治理阅历。
生产治理和质量治理负责人应由专职人员担当，不得相互兼任。
负责部门结果行政部行政部行政部行政部行政部06机构直接从事生产操作的人员应具备高中以上文化程度，其根底理论学问和实际操作技能应符合制品生产需要。
行政部07与08人员09101112*013014015厂房016与017设施018019 应制定年度人员培训打算，并应依据人员、制品、法律法规变化等实际状况调整培训内容。
从事与高风险性微生物和高毒性物质有关制品的生产、检验人员，应经相应专业的技术培训。
生产、检验人员上岗前应经过相应的岗位培训。
企业负责人和部门负责人应定期承受有关法律、法规培训。
专职质量检验人员应具有本专业中专以上文化程度，并经卫生学、微生物学等培训，具有根底理论学问和实际操作技能，持有中国兽医药品监察所核发的培训合格证。
专职质量检验人员数量应符合制品检验和有关治理需要。
有关人员的理论考核和现场操作考核结果应符合要求。
质量治理部门负责人任命、变更应报中国兽医药品监察所和省级兽药监察机构备案。
厂区四周不应有影响生物制品质量的污染源；企业生产环境应干净，其地面、路面、空气、场地、水质等应符合要求。
生产、仓储、行政、生活和关心区的总体布局应合理，不得相互阻碍。
生产区域的布局要顺应工艺流程，削减生产流程的迂回、来回，人流、物流应分开，走向应合理。
同一厂房内不同生产区域之间的生产操作应不相互阻碍。
干净区内不同操作间之间相互联系应符合工艺需要，必要时要有防止穿插污染的措施。
兽医生物制品生产的基本技术
兽医生物制品生产的基本技术【知识目标】·熟悉① 兽医生物制品菌(毒)种的概念及保存；② 病毒增殖方法；③ 实验动物的分类及特点； ④ 实验动物的概念； ⑤ 实验动物的正确选择。
·理解 ① 细菌的生长繁殖规律； ② 病毒的组织细胞培养。
·掌握① 细菌培养方法及培养基的制备；② 禽胚培养技术；③ 掌握实验动物的捕捉、保定和采血技术。
·了解① 兽医生物制品菌种、毒种的分类及选育与鉴定；② 细菌生长繁殖的营养要求；③ 实验动物的繁育与生产管理。
【能力目标】·能进行细菌培养、禽胚培养等操作；·能应用动物实验技术。
第一节 菌种与毒种选育技术一、菌(毒)种的概念与分类菌(毒)种是国家的重要生物资源，世界各国对这项资源都极为重视，并设置各种专业性保藏机构，现在不少国家的菌种与毒种中心都采用计算机进行管理。
我国于1980年成立了兽医微生物菌种保藏管理中心，设在中国兽药监察所(简称中监所)，专门从事兽医微生物菌种的收集、保藏、管理、交流和供应。
(一)、菌(毒)种的概念兽医生物制品的菌种与毒种是指应用于兽医生物制品生产、检定和研究的细菌菌种、病毒毒种以及分类地位在原虫以下的生物种，主要指兽医生物制品生产、检定用的菌种与毒种。
(二)、菌(毒)种的分类兽医生物制品用的菌(毒)种，按其存兽医生物制品生产、检定过程中的用途可分为四类：1．生产用的菌(毒)种(1) 直接生产用的菌(毒)种生物秀—专心做生物！ｗｗｗ．ｂｂｉｏｏ．ｃｏｍ易生物－领先的生物医药商务平台ｗｗｗ．ｅｂｉｏｅ．ｃｏｍ生物秀论坛－学术交流，资源共享，互助社区ｗｗｗ．ｂｂｉｏｏ．ｃｏｍ／ｂｂｓ／直接用本微生物或其产物制备疫苗、类毒素、诊断抗原等生物制品，参与制品的加工与处理，如制备新城疫油佐剂火活疫苗的新城疫病毒，制造破伤风类毒素的破伤风棱菌，生产鸡白痢全血玻板凝集抗原的鸡白痢沙门氏菌等。
(2) 免疫用的菌(毒)种主要用于生产免疫血清和诊断血清，如制备小鹅瘟免疫血清的小鹅瘟病毒，制备炭疽沉淀素的炭疽杆菌。
第四章兽医生物制品监察制度与质量检验课件
2021/10/26
新制品是指我国创制或首次生产用于畜禽等动物疾病预防、治 疗和诊断用的生物制品；对已批准的生物制品所使用的菌毒种 和生产工艺有根本改进的，亦属于新制品管理范畴。
第一类：我国创造的制品；国外仅有报道而未批准生产的 制品。
第二类：国外已批准生产，但我国尚未生产的制品。 第三类：对我国已批准的生物制品使用的菌毒种和生产工
艺有根本改进的制品。
2021/10/26
第二节 兽医生物制品的质量检验
一、无菌检验或纯粹检验 二、安全检验 三、效力检验 四、其它检验项目
2021/10/26
一、无菌检验或纯粹检验（test or purity test）
2021/10/26
⑵定量免疫变量强毒攻击法 把动物分为两大组，一为免疫组，一为对照组，两大组
又各分为相等的若干小组，每小组的动物数相等。免疫 动物均用同一剂量的制品接种免疫，经一定时间后，与 对照组同时用不同稀释倍数强毒攻击，比较免疫组与对 照组的存活率。
2021/10/26
⑶变量免疫定量强毒攻击法 将疫苗稀释为各种不同的免疫剂量并以之接种动物，间
即最小免疫量:半数保护量（PD50）/半数免疫量（ImD50）
2021/10/26
（二）效力检验的方法和要点
1.动物保护力试验 ★ ★ ★ ★ ★ ⑴ 定量免疫定量强毒攻击法；⑵ 定量免疫变量强毒攻击法 ；⑶ 变量免疫
定量强毒攻击法 ；⑷ 被动免疫抗体测定 2.活菌计数与病毒量的滴定
⑴ 活菌计数; ⑵ 病毒量的滴定 3.血清学方法
①加速老化法：疫苗于37℃贮存10-30d不破乳。 ②离心加速分层法：在一个半径为10cm的离心器中装油乳剂，3000r/min离心 15min不分层，相当于保存1a以上不破乳。 ⑷乳剂类型的测定 ①Robertson的染料法：用“SudanⅡ油溶性染料”和“亮蓝FCF”水溶性染料， 分别加入两份乳剂中，轻轻摇动，若是整个乳剂染油溶性染料即外相为油（W/O）， 若整个乳剂染水溶性染料即外相为水（O/W）。 ②冲淡或滴于冷水表面：此法是根据乳状液搀合的物质（油或水）来确定外相的性质。 ③电导法：因为多数的油皆是不良导体，而水则是良导体，用万能电表把两极分开插 入乳剂中，能导电者外相为水，为水包油乳剂；不能导电者外相为油，为油包水乳剂。 ⑸粒度大小及分布的测定：用显微镜直接观察，或用光散射法和透射法或微计测定之， 以直径10um均匀颗粒的乳剂为较好。
农业部发布兽用生物制品管理办法
农业部发布兽用生物制品管理办法第一条为了加强兽用生物制品管理工作，根据《兽药管理条例》和《兽药管理条例实施细则》，制定本办法。
第二条凡在我国境内从事兽用生物制品研究、生产、经营、进出口、监督、使用等活动的单位和个人，必须遵守本办法。
第三条兽用生物制品是应用天然或人工改造的微生物、寄生虫、生物毒素或生物组织及代谢产物为原材料，采用生物学、分子生物学或生物化学等相关技术制成的，其效价或安全性必须采用生物学方法检定的，用于动物传染病和其他有关疾病的预防、诊断和治疗的生物制剂。
包括疫（菌）苗、毒素、类毒素、免疫血清、血液制品、抗原、抗体、微生态制剂等。
其中疫（菌）苗、类毒素为预防用生物制品。
农业部根据需要可以增减预防用生物制品的品种。
第四条农业部负责全国兽用生物制品的管理工作。
县级以上人民政府农牧行政管理机关负责辖区内兽用生物制品的管理工作。
第二章生产管理第五条开办兽用生物制品生产企业（含科研、教学单位的生物制品生产车间和三资企业）（下同）的单位必须在立项前提出申请，经所在地省、自治区、直辖市农牧行政管理机关（以下简称省级农牧行政管理机关）提出审查意见后报农业部审批。
第六条经批准开办兽用生物制品生产企业的单位必须按照《兽药生产质量管理规范》（以下简称兽药GMP）规定进行设计和施工。
农业部负责组织兽用生物制品生产企业的GMP验收工作，并核发《兽药GMP合格证》。
省级农牧行政管理机关凭《兽药GMP合格证》核发《兽药生产许可证》。
本办法实施前已经取得《兽药生产许可证》的兽用生物制品生产企业必须按照兽药GMP规定进行技术改造，并在农业部规定期限内达到兽药GMP标准。
禁止任何未取得生产兽用生物制品《兽药生产许可证》的单位和个人生产兽用生物制品。
第七条兽用生物制品生产企业必须设立质量管理部门（以下简称质管部），负责本企业产品的质量检验及生产过程的质量监督工作。
质管部应当配备相应的技术人员。
质管部人员不得兼任其他行政或生产管理职务。
兽用生物制品管理办法
兽用生物制品管理办法 The document was prepared on January 2, 2021兽用生物制品管理办法《兽用生物制品管理办法》已于2001年9月17日业经农业部常务会议审议通过，现予发布。
本办法自2002年1月1日起施行，原1996年农业部6号令同时废止。
部长杜青林二○○一年十月十六日第一章总则第一条为了加强兽用生物制品管理工作，根据《兽药管理条例》和《兽药管理条例实施细则》，制定本办法。
第二条凡在我国境内从事兽用生物制品研究、生产、经营、进出口、监督、使用等活动的单位和个人，必须遵守本办法。
第三条兽用生物制品是应用天然或人工改造的微生物、寄生虫、生物毒素或生物组织及代谢产物为原材料，采用生物学、分子生物学或生物化学等相关技术制成的，其效价或安全性必须采用生物学方法检定的，用于动物传染病和其他有关疾病的预防、诊断和治疗的生物制剂。
包括疫(菌)苗、毒素、类毒素、免疫血清、血液制品、抗原、抗体、微生态制剂等。
其中疫(菌)苗、类毒素为预防用生物制品。
农业部根据需要可以增减预防用生物制品的种类。
第四条农业部负责全国兽用生物制品的管理工作。
县级以上人民政府农牧行政管理机关负责辖区内兽用生物制品的管理工作。
第二章生产管理第五条开办兽用生物制品生产企业(含科研、教学单位的生物制品生产车间和三资企业)(下同)的单位必须在立项前提出申请，经所在地省、自治区、直辖市农牧行政管理机关(以下简称省级农牧行政管理机关)提出审查意见后报农业部审批。
第六条经批准开办兽用生物制品生产企业的单位必须按照《兽药生产质量管理规范》(以下简称兽药GMP)规定进行设计和施工。
农业部负责组织兽用生物制品生产企业的GMP验收工作，并核发《兽药GMP合格证》。
省级农牧行政管理机关凭《兽药GMP合格证》核发《兽药生产许可证》。
本办法实施前已经取得《兽药生产许可证》的兽用生物制品生产企业必须按照兽药GMP规定进行技术改造，并在农业部规定期限内达到兽药GMP标准。
兽用生物制品质量标准、检测技术及
0 引言
当前时代背景下，兽药在畜牧业发展中发挥着至关 重要的作用[1]。为合理规避兽药因质量差而诱发其他问 题的情况，针对兽医生物制品加大质量控制力度至关重 要。
1 质量管理与控制现状
近年，我国越来越重视兽医产品。很多企业在经营 发展中也随机抽取兽用生物制品并进行检查，旨在和 农业农村部颁布的相关工作计划保持高度一致。结合 2021年6月抽查结果，这964批有机产品中，合格率是 92.9%，没有达到合格标准的产品有89批。由此可知， 我国有机产品质量还处于相对安全的状态。通常，在我 国技术生产条件有所提高的时候，合格率也会随之提 升，将来会有很大的发展，质量会得到更好的保证。
查。针对病毒性种子，需开展细菌等检查，并且对最小 感染量和安全性等内容予以确定，针对弱毒种毒组织开 展毒力返强试验活动。按照规定要求保存基础种子，详 细记录其鉴定过程和结果，并且做好审核及存档工作， 只有达到合格条件才可下放。 3.4.3 生产、检验用细胞的质量控制
关于细胞系，需进行3类系统的搭建，一是原始细 胞库，二是主细胞库，三是工作细胞库系统，并且还需 组织开展系统鉴定等活动。在这一过程中需完整准确的 记录相关信息，将细胞来源、制备方法等内容囊括在 内，在具体实践中贯彻落实细胞种子批制度。不管是显 微镜检查还是支原体检验或是细胞鉴别等都是主细胞库 细胞鉴定的主要内容，注意的是相关工作的开展需和规 定要求保持一致。正常组织会在通过诸多代次后具有致 瘤性，这也是细胞系的主要来源，所以，在实验时可使 用无胸腺小鼠，并且开展病理学检查，保证其不具有致 癌的特性。 3.4.4 原代细胞的质量控制
健康动物的正常组织应是原代细胞的主要来源。细 胞和传代细胞系都需在显微镜下进行观察，并且实施细 菌和霉菌检验，还需涵盖支原体检验等环节，这些工作 的开展都需和规定要求保持一致，尤其是在选择细胞来 制备活疫苗时，最为主要的条件是不能涉及到污染外源 病原。
第十章 兽医生物制品的质量管理与控制
另一方面，质量不好或者有问题的制品，不仅在使用后得不到应 有的效果，甚至可能带来十分严重的后果。
2、同批冻干制品分若干柜冻干者，应以柜为单位， 每柜抽样5瓶；
3、诊断液每批抽样5瓶。
4、效力检验，同批疫苗分为若干组分装时应逐组随 机抽样检验，抽取样品数依需要而定。
二、无菌检验与纯粹检验
生物制品（除另有规定者外）都不应有外源微生物 污染，灭活疫苗不得含有活的本菌或本毒。
（一）检验用培养基
不同产品所用的培养基和检验方法不同，通常选择 最适宜于各种易污染细菌生长而对活菌制品细菌不适 合生长的培养基。
一、兽医生物制品的管理体系
1、《兽医生物制品制造及检验规程》
1952年，农业部颁布了第一部《兽医生物制品制造及检验规 程》，统一了兽医生物制品的质量标准，建立了兽医生物制品 监察制度，设立了中国兽药监察所（原名为中央农业部兽医生 物制品监察所，简称中监所）。
中监所是我国兽医生物制品质量监督、检验和鉴定的国家级 专业技术机构，由农业部领导，负责全国兽医生物制品质量监 督、抽检制品和对制品质量检验和鉴定的最终技术仲裁；负责 检验用标准品、参照品和生产、检验用菌（毒、虫）种的研究、 制备、标定、鉴定、保管和供应，培训技术人员，开展学术交 流活动等。
厌氧性及需氧性细菌的检验：硫乙醇酸盐培养基 （T.G）、酪胨琼脂培养基（G.A）；
霉菌及腐生菌检验：葡萄糖蛋白胨水培养基 （G.P）。
（二）检验方法及结果判定
1、含甲醛、苯酚和汞类等防腐剂及抗生素的制品
兽用生物制品技术标准文件编写要求
兽用生物制品技术标准文件编写要求按照“科学合理、把控关键、促进创新”的原则，优化、简化兽药注册质量标准等技术标准文件（包括质量标准、工艺规程、说明书和内包装标签，下同）内容。
现将兽用生物制品（以下简称“制品”）技术标准文件编写要求说明如下。
一、质量标准编写要求质量标准为产品注册标准，是注册检验和监督检验的依据，是制品有效期内应符合的标准。
（一）质量标准项目和内容。
申请人根据制品特性、工艺特点、质量控制要求，参照现行《中国兽药典》等收载的同类制品质量标准项目，自行确定相关项目和内容。
1. 预防、治疗用制品一般应包括：制品名称、概述、性状、装量检查、无菌检验/纯粹检验、支原体检验、外源病毒检验、鉴别检验、安全检验、效力检验、剩余水分测定、真空度测定、甲醛和汞类防腐剂残留量测定等。
可根据产品特性进行增减。
2. 兽医诊断制品一般应包括：制品名称、概述、性状、敏感性检验、特异性检验等。
根据产品特性设定必要组分的无菌检验。
装量检查一般不要求。
可根据产品特性适当增加检验项目。
3. 质量标准中的“作用与用途、用法与用量/用法与判定、注意事项、规格、贮藏与有效期”等内容，与说明书中相关内容相同的，质量标准中不再重复编写。
（二）具体要求。
1. 质量标准效力检验项下，原则上均应有本动物攻毒检验法（与替代检验法同时使用或者选择使用）。
当替代检验方法已得到公认或已证实替代检验方法与本动物攻毒检验方法具有十分可靠的平行关系或同品种《中国兽药典》标准中无本动物攻毒检验法时，可仅列替代检验方法，无需本动物攻毒检验法。
2. 质量标准中涉及的检验方法，如所用方法《中国兽药典》已收载，附注中不再列出；如为特殊方法的，应在附注中列出。
如该方法只适用于生产企业，监督检验、注册检验时并不使用，可不编写或简要编写检验方法和判定标准。
3. 兽医诊断制品质量标准中敏感性和特异性检验等项目涉及“用法与判定”等说明书内容的，可描述为：按《说明书》中“用法与判定”进行操作。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
目录
兽医生物制品质量与检验的关系 兽医生物制品检验标准操作规程（SOPs） 的制定与应用 生物标准物质的制备和应用
2020/11/24
2020/11/24
1.1 兽医生物制品质量的特殊性和重要 性
第一，所有预防制品如疫苗都是用于健康动物群 ，特别是用于大量幼龄动物免疫接种，其质量的 优劣，直接关系到动物健康和免疫效果； 第二，所有治疗制品如血液制剂、抗毒素、免疫 血清或免疫调节制剂，都是通过非胃肠途径，直 接用于特定患病动物，其质量关系到患病动物的 疗效和安全； 第三，即使是体外用诊断试剂如诊断菌液、诊断 血清或免疫标记诊断试剂，其质量则关系到能否 对试样作出特异、敏感地正确诊断，而不至误判 ，导致不应有的不良后果。
2020/11/24
举例
兽医生物制品中心和国家兽医局实验室检 验文件血凝抑制试验检测马流感抗体
兽医生物制品中心（CVB）和国家兽医局 实验室（NVSL）检验文件鸡新城疫疫苗、 鸡传染性支气管炎疫苗和鸡新城疫、鸡传 染性支气管炎二联疫苗病毒含量测定
2020/11/24
美国农业部sops.doc美国农业部兽医生 物制品中心检验SOPs
2020/11/24
1.4兽医生物制品检验技术标准化的重要意义
技术标准已经成为保持产业与区域竞争优 势的一个关键因素，世界各国和地区高度 重视科技创新和技术标准工作，纷纷制定 和实施技术标准战略，我国科技部在本世 纪初提出人才专利技术标准三大战略。
2020/11/24
检验(测量)是人类认识自然和改造自然的 一种基本手段，是人们为了解物质的属性 与特征而进行的工作。当对物质某一特性 进行多次检验(测量)，结果重复性好，而 且不存在任何系统误差时，则可认为检验( 测量)是正确的。正确的检验(测量)如实地 反映了客观事物所处的状态及变化，使人 们了解到事物的真实属性和特征。
2020/11/24
“质量是生产出来的，不是检验出来的”
其目的是强调生产质量管理的重要性，告诫人们 检验结果是产品质量的客观反映，低质量产品是 不可能检验出高质量结果的。但另一方面，我们 也不应忽略质量形成过程中的 “工艺检验”和“ 成品检验”两个环节的重要作用。如果没有通过 检验特别是生产过程的检验，是无法了解质量和 控制质量的，所以,检验对于保证和提高兽医生物 制品质量是不可替代的手段,贯穿于GMP的全过程.
2020/11/24
在保证检验质量的因素中，人是最重要的因素， 接受过专门的培训，具备相应知识和能力的检验 人员，在保证检验质量中起着关键性的作用。兽 医生物制品检验技术的标准化及具有高素质的人 员，是保证检验质量的基本条件之一。科学的一 大特点就是可重复性。在兽医生物制品检验中， 可重复性也标志着检验技术精确程度的重复稳定 性。只有标准化，才能使得这种技术精确程度可 以稳定地得到重复。因此，兽医生物制品检验技 术的标准化，保证了检验的可重复性。
2020/11/24
质量不好或者有问题的制品
例如，在生产猪瘟细胞苗时，将带有猪瘟野毒的 仔猪肾制备成生产细胞，生产的猪瘟疫苗导致大 量免疫接种猪感染猪瘟，造成严重经济损失。
2020/11/24
1.2 兽医生物制品质量的含义
兽医生物制品的质量含有三个主要特性：
一是安全性，即使用应是安全的，副反应低的 二是有效性，即用于预防或治疗应是有效的，用 于诊断应是准确的； 三是可接受性，即制品的生产工艺、条件，成品 的药效稳定性、外观、包装、使用方法以至价格 等都应是可接受的。
2020/11/24
质量好的兽医生物制品
例如，牛瘟在历史上曾经是威胁牛的重大传染病 ，由于牛瘟苗在全世界各国多年的推广使用，终 于取得了预防免疫的卓越成效，到目前全世界已 经消灭牛瘟。猪瘟活疫苗的问世和推广应用，结 果在很多国家，这种传染病的发病率显著下降， 并基本控制。至于近年推广应用的禽流感疫苗， 也正在各国取得非常满意的免疫效果。
2020/11/24
四个基本条件:
第一必须采用统一的计量单位； 第二使用检定的仪器和量值传递系统； 第三推广标准化的检验(测量)方法(SOPs)； 第四使用标准物质和统一的计量器具。
推广标准化的检验标准操作规程（SOPs ）和使用生物标准物质是保证兽医生物制 品检验结果的正确性和可靠性必须建立的 先决条件。
2020/11/24
质量是一个综合反映系统
即经过设计并形成文件的，已经实施和经过检定 的，并通过人员、设备和其它原料提供保证的， 因而产品（质量）具有适宜于使用目的的连续一 致性（Consistency）强调质量的适用性和稳定性 。
2020/11/24
1.3 兽医生物制品GMP与检验的关系
兽医生物制品不同于一般兽医药品，更不同于 一般工业产品。兽医生物制品的生产涉及到生物材
2020/11/24
2020/11/24
2.1 SOPs制定的指导原则
科学性 可操作性 实用性 细致性 全面性 规范性 一致性 合理性 条理性 简洁性 艺术性 习惯性
2020/11/24
2.1 SOPs的内容及一般格式
标题和统一的SOPs编号 SOPs编写和修改日期 编写和修订SOPs的人员姓名 目的和原理 适用范围 检测设备和试剂 相应的岗位操作方法、程序 安全操作指南或注意事项 附录，包括相关的附加文件如标准表格、设 备说明书等。
2020/11/24
2.4 农业部中国兽医药品监察所检验 SOPs
2020/11/24
2020/11/24
3.1 生物标准物质的重要性
在进行测定时，用已知效价或单位的同一 类生物制品作为标准物质用于定量或者定 性检验。这种标准物质就是标准品，或参 考试剂。