实验一 淀粉酸水解制糖与还原糖的测定
淀粉水解化学实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解淀粉水解的基本原理和实验方法。
2. 掌握淀粉水解实验的操作步骤。
3. 通过实验观察淀粉水解过程中的现象,验证淀粉水解反应的发生。
4. 探讨影响淀粉水解反应的因素。
二、实验原理淀粉是一种天然高分子碳水化合物,主要由葡萄糖单元通过α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键连接而成。
淀粉水解是指将淀粉分解成较小的糖类物质,如麦芽糖、葡萄糖等。
在酸性条件下,淀粉与水发生水解反应,生成葡萄糖。
实验原理方程式如下:(C6H10O5)n + nH2O → nC6H12O6三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 淀粉- 稀硫酸- 碘液- 氢氧化钠溶液- 新制氢氧化铜悬浊液- 银氨溶液- 碱性溶液2. 实验仪器:- 试管- 烧杯- 滴管- 酒精灯- 玻璃棒- 铁架台- 酒精喷灯四、实验步骤1. 准备淀粉溶液:称取一定量的淀粉,加入适量的蒸馏水,搅拌溶解,备用。
2. 水解反应:- 将淀粉溶液倒入试管中,加入适量的稀硫酸,搅拌均匀。
- 将试管放入烧杯中,用酒精灯加热,观察溶液的变化。
- 加热过程中,每隔一段时间取样,用碘液检测溶液中的淀粉含量,观察溶液颜色的变化。
3. 检验水解产物:- 当溶液颜色由蓝色变为淡黄色,表明淀粉已基本水解。
- 停止加热,用氢氧化钠溶液中和溶液中的稀硫酸,使溶液呈碱性。
- 加入新制氢氧化铜悬浊液,观察是否有砖红色沉淀生成,以验证葡萄糖的存在。
4. 验证淀粉水解程度:- 取少量水解后的溶液,加入碘液,观察溶液颜色的变化,以判断淀粉是否完全水解。
五、实验结果与分析1. 实验结果:- 在加热过程中,溶液颜色由蓝色逐渐变为淡黄色,说明淀粉发生了水解反应。
- 当溶液颜色由蓝色变为淡黄色时,停止加热,加入氢氧化钠溶液中和稀硫酸,使溶液呈碱性。
- 加入新制氢氧化铜悬浊液后,观察到砖红色沉淀生成,说明水解产物中含有葡萄糖。
- 加入碘液后,溶液颜色未发生明显变化,表明淀粉已基本水解。
2. 结果分析:- 实验结果表明,在酸性条件下,淀粉发生了水解反应,生成了葡萄糖。
淀粉、总糖、还原糖的测定方法

淀粉、总糖、还原糖的测定方法淀粉的测定方法---蒽酮法一( 原理用乙醇将烟叶中可溶性糖浸出并分离出去,而后烟叶中淀粉用适量Hcl,因淀粉在稀酸作用下被水解成葡萄糖,再按葡萄糖测定进行。
根据葡萄糖的含量从而算出淀粉含量。
二( 仪器设备三角瓶50ml 容量瓶100ml 移液管10ml、1ml 漏斗圆底烧瓶1000ml 离心管和离心机水浴锅温度计烘箱滤纸天平分光光度计三( 试剂盐酸乙醇氢氧化钠蒽酮四、试剂的配制和标准曲线的绘制1. 葡萄糖标准液的配制称取无水葡萄糖(AR级)0.1g溶于蒸馏水中,定容至100毫升,用前取此液10毫升,再用水稀释至100毫升。
2. 标准曲线的绘制取6支干洁刻度试管,依次移入葡萄糖标准液(100μg/ml)0,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00ml后,再从1至6试管依次补加1.0,0.8,0.6,0.4,0.2,0ml蒸馏水后,再分别加入蒽酮试剂5毫升,于沸水中加热10分钟,冷却后在620nm波长处比色,记录OD值,以吸光值为纵坐标,糖含量为横坐标,绘出标准曲线 3. 80%乙醇的配制取400毫升乙醇加水定容至500ml4. 1当量的盐酸配制 43毫升浓盐酸加水定容至500ml5. 10%氢氧化钠配制 10g氢氧化钠溶于100ml水中6. 蒽酮试剂:1克蒽酮溶于72%的HSO1000ml(98%的HSO+240的蒸馏水),棕色瓶冰箱2424保存2,3周。
五实验步骤1. 分离出水溶性糖0.1g样置于离心管中加入8毫升80%乙醇 80?水浴浸提30分钟冷却后离心(3600转)5分钟残渣再加入8ml80%乙醇。
重复三次2. 水解残渣用1当量的盐酸15ml洗入50ml三角瓶,摇匀后烘箱105度加热3.5小时,冷却后加10%氢氧化钠6ml中和,过滤,蒸馏水定容100ml。
3. 测定取滤液1ml(空白用1ml蒸馏水代替),加入蒽酮试剂5ml,摇匀,于沸水浴中加热10分钟,冷却后在620nm波长处比色六结果的计算与表述C=AN*0.9/WC—样品淀粉含量(μg/g) W—样品重量(g)A—标准曲线查得的糖量(μg) N—样品提取液占样品反应液的倍数蒽酮比色法测总糖:实验步骤:1、可溶性糖的提取:准确称取烟叶样品0.100克,置于离心管中,加入8毫升80%乙醇,于80?水浴浸提30分钟,冷却后于4000转离心5分钟,收集上清液,残渣再加入8毫升80%乙醇,再次浸提,重复两次,将三次提取的上清液合并于100毫升容量瓶中并定容至100毫升。
淀粉活性测定实验报告

一、实验目的1. 掌握淀粉酶活性的测定原理和方法。
2. 了解不同条件对淀粉酶活性的影响。
3. 学会使用比色法测定淀粉酶活性。
二、实验原理淀粉酶是一种水解淀粉的酶,可以将淀粉分解成葡萄糖、麦芽糖等小分子糖类。
在实验中,淀粉酶将淀粉水解成还原糖,还原糖与3,5-二硝基水杨酸(DNS)反应生成红色复合物。
通过测定该复合物的吸光度,可以计算出淀粉酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 材料:淀粉酶、淀粉、DNS试剂、硫酸铜、无水碳酸钠、盐酸、氢氧化钠、蒸馏水、待测样品(如唾液、植物组织等)。
2. 仪器:恒温水浴锅、移液器、容量瓶、试管、试管架、吸管、比色计、电子天平。
四、实验步骤1. 准备DNS试剂:称取DNS试剂0.1g,加入50ml蒸馏水溶解,再加入0.5g硫酸铜和0.5g无水碳酸钠,搅拌均匀。
2. 标准曲线制作:准确配制一系列浓度的麦芽糖标准溶液(如0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.6mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml),各取2ml加入试管中,加入2ml DNS试剂,沸水浴10分钟,取出冷却,用分光光度计在波长540nm处测定吸光度,以麦芽糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
3. 待测样品处理:准确称取一定量的待测样品,加入适量的蒸馏水,搅拌均匀,离心取上清液。
4. 测定淀粉酶活性:取2ml待测样品和2ml淀粉溶液(浓度根据实际情况调整)加入试管中,置于恒温水浴锅中,保持一定温度(如37℃)反应一定时间(如30分钟),取出后立即加入2ml DNS试剂,沸水浴10分钟,取出冷却,用分光光度计在波长540nm处测定吸光度。
5. 计算淀粉酶活性:根据标准曲线,计算出待测样品中还原糖的浓度,再根据反应时间、温度、待测样品浓度等参数,计算淀粉酶活性。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制:以麦芽糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线,计算相关系数,验证标准曲线的线性关系。
淀粉中还原糖含量的测定实验报告

淀粉中还原糖含量的测定实验报告实验目的:了解淀粉中还原糖的含量测定方法,掌握其操作技能。
实验原理:淀粉在加热过程中会被分解为半乳糖单元,再由半乳糖单元与水分解产生葡萄糖和果糖,这些糖叫做还原糖。
还原糖会与硝酸铜溶液发生化学反应,生成蓝色沉淀。
利用这一特性,可以用硝酸铜法测定淀粉中还原糖的含量。
实验仪器:试管、恒温水浴、移液管、手持离心机、比色皿、分光光度计等。
实验材料:淀粉溶液、葡萄糖标准品、醋酸钠-醋酸酸钠缓冲液、硝酸铜试液、碱式氯化钾溶液。
实验步骤:1.准备工作:将硝酸铜试液浓度稀释至0.1mol/L,将酸性醋酸钠-醋酸酸钠缓冲液PH值调至4.5,将碱性氯化钾溶液稀释至10%。
2.样品制备:取1ml淀粉溶液加10ml酸性醋酸钠-醋酸酸钠缓冲液混合,放至沸水中加热5分钟,冷却至室温后离心取上清液,加50ml水调至粘度适宜。
3.标准品制备:取30mg葡萄糖溶于50ml水中,称取1、2、3、4、5ml混合溶液,并分别转移至不同的试管中,加入2ml酸性醋酸钠-醋酸酸钠缓冲液中。
4.加入试液:取淀粉样品0.5ml放入离心管中,加入2.5ml缓冲液和2.5ml硝酸铜溶液混合均匀,置于60℃水浴中加热15分钟后冷却,加入2.5ml碱性氯化钾溶液,静置10分钟。
5.比色测定:将标准品和样品离心管中的试液吸入移液管中,分别加入不同比色皿中静置10分钟后,用660nm的波长分光光度计检测蓝色产物溶液的吸光度值。
实验结果:样品试验:A值 = 0.45标准品试验:第一组:1ml葡萄糖,A值 = 0.12第二组:2ml葡萄糖,A值 = 0.24第三组:3ml葡萄糖,A值 = 0.37第四组:4ml葡萄糖,A值 = 0.49第五组:5ml葡萄糖,A值 = 0.60计算:以葡萄糖标准曲线计算样品中还原糖含量。
样品中还原糖含量 = (A值 - A0) / S其中,A0是淀粉试样的吸光度,S为标准曲线斜率。
计算得出样品中还原糖含量为3.5mg/ml。
食品中淀粉的测定-酸水解法讲解学习

食品中淀粉的测定-酸水解法淀粉的测定----酸水解法【内容摘要】样品经乙醚除去脂肪,乙醇除去可溶性糖类后,用酸水解淀粉为葡萄糖,按还原糖测定方法测定还原糖含量,再折算为淀粉含量。
淀粉的测定淀粉是由多个葡萄糖缩合而成的多糖,测定淀粉的方法有酸水解法、酶水解法和旋光法等。
酸水解法此法操作简单,但选择性和准确性不够高。
适用于淀粉含量较高,而半纤维素和多缩戊糖等其他多糖含量较少的样品。
对富含半纤维素、多缩戊糖及果胶质的样品,因水解时它们也被水解为木糖、阿拉伯糖等还原糖,测定结果会偏高。
1.原理样品经乙醚除去脂肪,乙醇除去可溶性糖类后,用酸水解淀粉为葡萄糖,按还原糖测定方法测定还原糖含量,再折算为淀粉含量。
2.仪器①回流冷凝管。
②水浴锅。
③高速组织捣碎机。
④回流装置。
3.试剂①乙醚。
②85%乙醇。
③6 tool·L叫盐酸溶液。
④10 tool·L叫氢氧化钠。
⑤2.5 tool·L-i氢氧化钠。
⑥甲基红指示剂:称取2 g甲基红,用乙醇溶解稀释至100 mL。
⑦精密pH试纸。
⑧20%中性醋酸铅溶液。
⑨lO%硫酸钠溶液。
其余试剂同“还原糖的测定”中高锰酸钾法或直接滴定法中的试剂。
4.测定步骤①样品提取a·粮食、豆类、糕点、饼干、代乳粉等较干燥、易研细的样品:称取2.O~5.0 g(含淀粉0.5 g左右)磨碎过40目筛的样品,置于铺有慢速滤纸的漏斗中,用30 mL乙醚分三次洗去样品中的脂肪,再用150 mL 85%乙醇分数次洗涤残渣以除去可溶性糖类。
以100 mL水把漏斗中残渣全部转移至250 mL锥形瓶中。
b-蔬菜、水果、粉皮、凉粉等水分较多,不易研细、分散的样品:先按1:1加水在组织捣碎机中捣成匀浆(蔬菜、水果需先洗净、晾干,取可食部分)。
称取5~10 g(含淀粉0.5 g左右)匀浆于250 mL锥形瓶中,加30 mL乙醚振荡提取脂肪,用滤纸过滤除去乙醚,再用30 mI。
淀粉的水解及其产物的检验实验

淀粉的水解及其产物的检验实验
一、实验目的
掌握淀粉水解反应原理及检验淀粉水解产物的方法。
二、实验原理
淀粉是由α-葡萄糖分子组成的多糖,其化学结构为线性链和支链。
淀粉酶能够催化淀粉分子中α-1,4-糖苷键的水解,形成含有2-10个葡萄糖分子的低聚糖。
同时,α-1,6-糖苷键也会被切断,使得支链上的葡萄糖分子被释放出来。
最终产生的产物为葡萄糖、麦芽糖和低聚糖等。
三、实验步骤
1.将1g干淀粉加入100ml三角瓶中,加入50ml稀盐酸
(0.5mol/L),摇匀后放置在水浴中加温反应2小时。
2.反应结束后,在试管中取适量反应液,加入少量碘液进行检验。
3.将试管放在白色背景下观察颜色变化。
四、实验注意事项
1.稀盐酸具有强腐蚀性,操作时需戴手套和护目镜。
2.反应过程中需加温,注意不要使水浴沸腾。
3.碘液具有毒性,操作时需小心,避免皮肤接触。
五、实验结果及分析
淀粉水解反应后的产物主要为葡萄糖、麦芽糖和低聚糖等。
在检验产物时,可以使用碘液进行检验。
碘液能够与淀粉形成复合物,在淀粉存在的情况下呈现出蓝黑色。
而在淀粉被水解后,其结构发生改变,无法与碘形成复合物,因此检测出来的颜色会变为红棕色或黄棕色。
六、实验拓展
除了使用碘液进行检验外,还可以使用比色法或高效液相色谱法等方法进行淀粉水解产物的检测。
其中比色法是一种简单易行的方法,只需要将产物溶于水中,并加入苏丹三号试剂后与标准曲线比较即可确定产物种类和含量。
而高效液相色谱法则是一种更为准确、灵敏的方法,能够同时检测多种低聚糖和单糖,具有广泛的应用前景。
淀粉水解实验报告

淀粉水解实验报告篇一:淀粉水解糖的制备淀粉水解糖的制备一实验目的:(1)通过实验,了解淀粉糊化及酶法制备淀粉糖浆的基本原理;(2)掌握淀粉酶解法制备淀粉糖浆的实验方法。
二实验原理水解淀粉为葡萄糖的方法有三种,即酸解法,酶解法,酶酸法及双酶法。
本实验采用的是双酶法将淀粉水解成葡萄糖。
首先利用的是α-淀粉酶将淀粉液化,转化为糊精及低聚糖,使淀粉可溶性增加;接着利用糖化酶将糊精及低聚糖进一步水解,转化为葡萄糖。
三实验器材1,实验材料玉米粉α—淀粉酶(2000u/g)糖化酶(50000 u/g)2,仪器设备恒温水浴槽真空泵抽滤纸及布氏漏斗四操作步骤50克淀粉置于400毫升烧杯中,加水100毫升,搅拌均匀,配成淀粉浆,用5% Na2CO3调节pH=—,加入1毫升5%CaCL2溶液,于90-95℃水浴上加热,并不断搅拌,淀粉浆由开始糊化直至完全成糊。
加入液化型α---淀粉酶1克,不断搅拌使其液化,并使温度保持在70℃。
然后将烧杯移至电炉加热到95℃至沸,灭活10分钟。
过滤,滤液冷却到55℃,加入糖化酶1克,调节pH=,于60-65℃恒温水浴中糖化3-4小时,即为淀粉糖浆,若要浓浆,可进一步浓缩。
称重篇二:实验一淀粉酸水解制糖与还原糖的测定实验一淀粉酸水解制糖与还原糖的测定一、试验目的①掌握酸法制糖的工艺与方法;②掌握还原糖的测定方法。
二、酸水解制糖原理在淀粉酸水解过程中,有如下三种反应:在水解过程中,淀粉的颗粒结构被破坏,α--糖苷键及α--糖苷键在酸的催化下被切断,示踪同位素原子O18研究证明,H+先与H2O结合生成H3O +,H3O+能与糖苷键的氧原子结合生成不稳定化合物Ⅰ,随后C1-O键断裂生成C1正碳离子Ⅱ,H2O与具有正电荷的C1结合,再使C1失去H+,完成糖苷键的水解过程。
三、实验仪器7230型分光光度计、水浴锅或电炉、100mL量筒、100mL或50mL容量瓶9个、10mL与2mL移液管各1支、250mL 烧杯、250mL锥形瓶2个、布氏漏斗、真空泵、牛皮纸。
淀粉 酸水解法

淀粉酸水解法是一种用于测定淀粉含量的方法。
该方法的基本原理是将样品中的淀粉通过酸水解成具有还原性的单糖,然后通过测定还原糖的含量,从而计算出淀粉的含量。
具体操作步骤如下:
1. 样品处理:将样品(如粮食、豆类、糕点、饼干等)磨碎过40目筛,称取
2.0~5.0g置于放有慢速滤纸的漏斗中,用30mL乙醚分三次洗去样品中脂肪,弃去乙醚。
再用150mL 85%乙醇溶液分数次洗涤残渣,除去可溶性糖类物质。
并滤干乙醇溶液,以100mL水洗涤漏斗中残渣并转移至250mL锥形瓶中。
2. 酸水解:加入30mL 6N盐酸,接好冷凝管,置沸水浴中回流2h。
回流完毕后,立即置流水中冷却。
3. 中和与滴定:待样品水解液冷却后,加入2滴甲基红指示液,先以40%氢氧化钠溶液调至黄色,再以6N盐酸校正至水解液刚变红色为宜。
若水解液颜色较深,可用精密pH试纸测试,使样品水解液的pH约为7。
然后加20mL 20%乙酸铅溶液,摇匀,放置10min。
再加20mL 10%硫酸钠溶液。
4. 还原糖测定:将处理好的样品水解液进行还原糖的测定,并折算成淀粉含量。
通过以上步骤,可以完成淀粉酸水解法的操作。
这种方法具有较高的准确性和可靠性,适用于各种食品中淀粉含量的测定。
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实验一淀粉酸水解制糖与还原糖的测定
一、试验目的
①掌握酸法制糖的工艺与方法;
②掌握还原糖的测定方法。
二、酸水解制糖原理
在淀粉酸水解过程中,有如下三种反应:
在水解过程中,淀粉的颗粒结构被破坏,α-(1, 4)-糖苷键及α-(1, 6)-糖苷键在酸的催化下被切断,示踪同位素原子O18研究证明,H+先与H2O结合生成H3O+,H3O+能与糖苷键的氧原子结合生成不稳定化合物Ⅰ,随后C1-O键断裂生成C1正碳离子Ⅱ,H2O与具有正电荷的C1结合,再使C1失去H+,完成糖苷键的水解过程。
三、实验仪器
7230型分光光度计、水浴锅或电炉、100mL量筒、100mL或50mL容量瓶9个、10mL与2mL移液管各1支、250mL烧杯、250mL锥形瓶2个、布氏漏斗、真空泵、牛皮纸。
四、实验试剂
淀粉(化学纯)、3, 5-二硝基水杨酸(化学纯)、1%硫酸、氢氧化钠(分析纯)、酒石酸钾钠、苯酚(化学纯)、亚硫酸钠(Na2SO3)、葡萄糖(分析纯)、无水酒精、粉末CaCO3。
①配制DNS(3,5-二硝基水杨酸)试剂:取7.5克3,5-二硝基水杨酸,14.0 g氢氧化钠,充分溶解于1000mL蒸馏水中。
再加入酒石酸钾钠216.0克,苯酚(在50℃水浴中融化)5mL,亚硫酸钠6.0克,完全溶解后盛于棕色瓶中。
②葡萄糖标准溶液(1g/L):准确称取干燥衡重的葡萄糖1g,加1mL 1%硫酸(防止微生物生长),以蒸馏水定容至1000mL。
③1%硫酸;④碘-碘化钾溶液
四、实验步骤
(一)葡萄糖标准曲线的制定
管号0 1 2 3 4 5 6
葡萄糖标准液(mL) 0 0.5 1.0 2.0 3.0 5.0 10.0
②将各溶量瓶溶液混匀,在水浴锅或电炉上沸水浴5分钟,取出后立即用冷水冷却至室温,并加水定容,摇匀。
③于550nm 处用分光光计测定吸光度A 值,以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制葡萄糖标准曲线。
(二)还原糖的制备与测定 ①淀粉酸水解工艺
取淀粉5~10g ,加入250mL 锥形瓶,按照固液比1∶10加入1%硫酸,用牛皮纸封好口,在121~125℃水解30min ,取出1、2滴置于白瓷板上,加1滴碘-碘化钾溶液直到不呈蓝色,即为水解终点。
冷却,然后用粉末CaCO 3中和至pH 值4.5~5.0,减压过滤,得到含葡萄糖的样品溶液,测定其体积V 0。
②还原糖的测定
平行取2.0mL 待测样品2份(含糖量为0.2~2.0g/L ),加入100mL 或50mL 容量瓶中,再加入3mL DNS 试剂,沸水浴5min ,冷却至室温后,加水定容摇匀,于550nm 处用分光光计测量吸光度A ,根据标准葡萄糖液所得数据建立的标准曲线,测算待测试样的平均还原糖浓度,计算淀粉的转化率。
③淀粉的转化率计算
0V (L)(mg/L)
=
100%(g)100086% 1.11
⨯⨯⨯⨯⨯原糖液体积原糖液葡萄糖含量淀粉转化率投入淀粉量
注:使用此公式时,应注意测定过程中的稀释倍数。