聚肌胞对禽流感油乳剂疫苗的体液免疫增强作用研究
禽流感病毒的免疫研究进展
禽流感病毒的免疫研究进展禽流感病毒是一种严重威胁禽类健康和人类健康的病原体。
近年来，各国对禽流感病毒的免疫研究取得了一系列重要进展。
疫苗是预防禽流感的一种重要措施。
传统的禽流感疫苗主要采用灭活病毒或者鸡胚疫苗，虽然有一定的预防效果，但是由于疫苗生产过程复杂且昂贵，限制了疫苗的大规模应用。
近年来，研究人员使用基因工程技术，开发了重组疫苗。
重组疫苗是通过将禽流感病毒的关键基因片段进行重组，得到的疫苗具有更好的稳定性和免疫效果。
科学家利用重组DNA技术构建了禽流感病毒衣壳蛋白基因，并且通过植入毕赤酵母表达系统进行高效表达，获得了高度免疫原性的禽流感重组疫苗。
除了传统的疫苗方法，部分研究人员尝试使用核酸疫苗预防禽流感。
核酸疫苗是通过直接注射目标疫苗基因的核酸片段，利用机体的自身机制进行表达和免疫应答。
近年来，研究人员通过注射疫苗基因的DNA片段或者mRNA片段，成功预防了禽流感病毒感染。
相比传统疫苗，核酸疫苗制备简单、成本低，而且能够引发强烈的免疫应答，具有广阔的应用前景。
禽流感病毒的免疫研究还涉及到免疫辅助治疗。
研究人员发现，某些天然产物或者合成小分子化合物可以改善机体的免疫应答，提高对禽流感病毒的抗体水平。
研究人员发现，金藻蓝素可以有效抑制禽流感病毒的复制和侵染，提高机体免疫反应，从而预防感染。
研究人员还通过基因编辑技术（如CRISPR-Cas9）研究禽流感病毒的感染机制，发现了病毒与机体宿主之间的相互作用关系，从而为研究疫苗和药物开发提供了新的思路和目标。
禽流感病毒的免疫研究取得了诸多重要进展，包括重组疫苗的开发、核酸疫苗的应用、免疫辅助治疗的发现以及基因编辑技术的应用等。
这些研究成果为预防和控制禽流感病毒的传播提供了新的手段和理论基础，对于维护人民群众的生命健康具有重要意义。
油乳剂灭活疫苗的应用原理
油乳剂灭活疫苗的应用原理1. 什么是油乳剂灭活疫苗？油乳剂灭活疫苗是一种常见的疫苗类型，广泛应用于预防和控制多种传染病。
它包含了灭活病原体和乳化剂，通过注射进入人体，诱导免疫系统产生特异性抗体，以提供免疫保护。
2. 油乳剂灭活疫苗的制备方法•步骤1: 选取目标病原体，如病毒或细菌。
•步骤2: 在实验室条件下，培养和繁殖大量病原体。
•步骤3: 使用化学物质或物理方法进行灭活，以确保病原体失去复制和致病能力。
•步骤4: 将灭活的病原体与乳化剂混合，形成油乳剂灭活疫苗。
•步骤5: 经过严格的质量控制检测，确保疫苗的安全性和有效性。
3. 油乳剂灭活疫苗的工作原理油乳剂灭活疫苗的工作原理基于人体的免疫系统。
当疫苗注射到人体中时，病原体的灭活形式会刺激机体产生免疫反应，从而培养出特异性抗体来抵抗可能的感染。
4. 油乳剂的作用油乳剂在疫苗中起到多重作用: - 改善疫苗的稳定性: 油乳剂可以稳定疫苗中的灭活病原体，防止其丧失活性。
- 促进抗原递呈: 油乳剂能够激发免疫系统对病原体抗原的识别。
- 增加疫苗的持久性: 油乳剂能够延长抗原在注射部位的滞留时间，从而增加免疫反应的持续时间。
- 改善免疫效应: 油乳剂的存在可以增强免疫效果，提高产生抗体的效率。
5. 油乳剂灭活疫苗的优缺点5.1 优点•高效性: 油乳剂灭活疫苗能够引起免疫系统的强烈反应，产生丰富的特异性抗体。
•安全性: 灭活的病原体减少了感染的风险，避免了可能的疾病传播。
•稳定性: 油乳剂在疫苗中可以稳定灭活的病原体，保持其活性。
•经济性: 制备油乳剂灭活疫苗相对较简单，成本相对较低。
5.2 缺点•需要多次注射: 油乳剂灭活疫苗通常需要多次注射才能获得充分的免疫效果。
•容易引起注射部位反应: 在注射部位可能出现局部疼痛、发红等不适反应。
•对制备过程要求高: 制备油乳剂灭活疫苗需要非常严格的实验操作和质量控制。
6. 油乳剂灭活疫苗的应用领域油乳剂灭活疫苗被广泛应用于多种疾病的预防和控制，包括但不限于: - 流感疫苗 - 脊髓灰质炎疫苗 - 百日咳疫苗 - 风疹疫苗 - 乙脑疫苗7. 油乳剂灭活疫苗使用的注意事项•接种者应该注意接种时间，遵循接种计划。
聚肌胞是通过以下方面发挥抗病毒作用的
①通过诱导IFN间接产生抗病毒作用。当干扰素被诱导生成后，干扰素可以识别同种细胞膜上的受体系统，激活受体系统中的糖蛋白，然后通过第二信使cAMp使受体细胞产生一种特异性蛋白质因子(PF), PF与抗病毒基因上的抑制蛋白信号多肤结合，激活抗病毒基因，使它产生抗病毒mRNA。抗病毒mRNA迅速转移到细胞质以后，便翻译成几种抗病毒蛋白(例如蛋白激酶、2'-5’腺苷酸合成酶和2'一磷酸二酷酶)，进而通过干扰病毒蛋白质的合成，降解病毒mRNA等方式起到抗病毒的作用。
②通过直接的抗病毒作用。不同病毒对聚肌胞的敏感性不一样，一般认为疱疹病毒和流感病毒对聚肌胞最为敏感。
③通过ห้องสมุดไป่ตู้强和调节免疫作用产生抗毒活性。聚肌胞是一种很好的免疫增强剂，是一种非专一性免疫激发剂，通过增强巨噬细胞的吞噬活性、增强NK细胞的细胞毒作用、促进抗体的产生及诱导机体产生Mx蛋白等起到抗病毒的作用。
鸡使用油乳剂疫苗应注意的几个问题
鸡使用油乳剂疫苗应注意的几个问题
随着养鸡业的发展，鸡病发生的种类也越来越复杂，疫苗的使用也越来越多，其中油乳剂灭活疫苗具有安全、免疫期长等优点。
但使用不当也会造成一些危害，现提出一些应注意的问题。
一、鸡油乳剂灭活疫苗一般不宜进行颈部皮下和腿部肌肉注射。
鸡颈部皮下组织非常疏松，且神经、血管丰富，胸腺也位于两侧。
由于油乳剂疫苗很难吸收，注射后在颈部造成大面积水肿，并形成油滴结块，压迫和损害神经、血管、胸腺，引起不食、扭头、瘫痪、免疫力下降，甚至死亡。
腿部肌肉注射也会引起瘸腿。
油乳剂灭活疫苗应进行胸部肌肉注射。
二、油乳剂灭活疫苗不宜进行紧急预防免疫。
由于油乳剂疫苗释放较慢，一般２—３周后才能达到较高的抗体水平。
紧急预防注射起不到相应的预防效果，还会因免疫注射而激发疫病传播，应使用弱毒活疫苗进行紧急接种。
三、病毒性油乳剂灭活疫苗最好与弱毒活疫苗结合使用。
由于油乳剂灭活疫苗产生的免疫作用较慢，且不会产生局部外周免疫作用。
在注射油乳剂疫苗的同时，或前、后５天内结合使用弱毒活疫苗，可增强免疫反应，提高抗病能力。
四、应用油乳剂灭活疫苗与应用弱毒活疫苗的免疫程序不同。
由于油乳剂疫苗释放较慢，免疫期长，其下一次免疫时间应推后。
但由于局部免疫作用差，也不能完全按抗体水平推算免疫接种时间。
五、油乳剂灭活疫苗不能冷冻保存，应冷藏保存。
如在存放过程中出现油水分离现象时，其疫苗不宜再使用。
双链聚肌胞在兽药方面的应用
双链聚肌胞在兽药方面的应用
【应用概况】
预防和治疗家禽、家畜病毒性疾病
1、主要用于激活免疫细胞淋巴细胞，双链聚肌胞是一种干扰素诱导剂，不仅可以刺激机体产生白介素-2和干扰素，还可以刺激机体产生非特异性抗体。
2、广谱抗病毒药，可用于：
鸡：传支、传喉、新城疫、流感、法氏囊病、鸡痘。
鸭：鸭瘟、鸭病毒性肝炎等。
猪：猪无名高热病（蓝耳病变异株）、圆环病毒、蓝耳病、猪繁殖与呼吸综合症、猪病毒性腹泻、非典型猪瘟等。
3、双链聚肌胞可用于免疫功能受损引起的疾病，具有增强动物机体免疫力、提高药物的疗效。
【双链聚肌胞特点】
1、使用方便、广泛：可以与许多药物同时使用, 与黄芪多糖、左旋咪唑、利巴韦林配伍，有明显的增效作用；与部分抗生素配伍具有协同或相加作用。
在粉、散剂等许多品种中添加本品，具有明显提高原有产品疗效的作用,同时不干扰原产品的检测；本品无种属特异性，可广泛在家禽、猪、牛等动物上使用。
2、使用安全：
1，是使用双链聚肌胞后不影响机体抗体水平，可用于预防肉仔鸡后期常发的病毒性疾病，避免了由于加强免疫引起的抗体水平过高及疫苗应激反应和避免或降低药残，影响家禽产品出口；
2，是抗病毒谱广，毒性小、安全范围大。
3、可以与疫苗同时使用，能起到弥补免疫空白期、缓解疫苗应激反应、增强免疫效果的作用。
【双链聚肌胞规格】
1%含量原料；注射级纯粉。
【双链聚肌胞包装】注射级纯粉1 kg /袋；1%含量25kg/桶双链聚肌胞可常温保存，不需冷藏。
文章来源：
河北和美生物科技有限公司
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禽流感H5油乳剂灭活苗、H5重组鸡痘冻干苗不同免疫方式效果研究-.
禽流感H5油乳剂灭活苗、H5重组鸡痘冻干苗不同免疫方式效果研究-核心提示：禽流感H5油乳剂灭活苗、H5重组鸡痘冻干苗不同免疫方式效果研究禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽的传染病，近几年来世界上有许多国家相继发生。
自我们国家研制出禽流感灭活苗以来，我们地区每年春秋进行两次禽...禽流感H5油乳剂灭活苗、H5重组鸡痘冻干苗不同免疫方式效果研究禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽的传染病，近几年来世界上有许多国家相继发生。
自我们国家研制出禽流感灭活苗以来，我们地区每年春秋进行两次禽流感集中免疫，常年开展免疫抗体监测工作，并收到了很好的效果。
由于油乳剂苗注射免疫对肉鸡胸肌肉质有一定影响，因此我们于2005年12月，搞了禽流感H5油乳剂苗、H5重组鸡痘冻干苗对肉鸡免疫抗体跟踪监测实验，现将情况总结如下：一、试验材料1.器械及试剂：1ml、5ml注射器，刺种针，1ml、10ml吸管，5ml一次性试管，试管架，96孔微量板，取样器，滴管，平皿，离心机等（以上均备足实验用）；2%枸缘酸钠溶液，0.9%生理盐水，PH值7.4的PBS液。
2.禽流感H5疫苗：禽流感H5油乳剂灭活疫苗（H5N1亚型，Re-1株），成都精华生产，批号为：2005009；H5重组鸡痘冻干苗（rFPV-H5）, 哈兽研生产，批号为200505。
3.HI监测抗原：禽流感H5亚型抗原和阳性血清，均由哈兽研生产，批号为2005040503。
4.试验动物，10日龄罗曼肉仔鸡3000只，鸡群健康活泼，发育良好，个体差异不显著，全群采用网上平养，全封闭管理。
二、实验情况1.实验动物分组：本实验选取10日龄肉鸡，随机抽样，分成三组，每组40只，第一组胸肌注射H5油苗，每只0.5ml；第二组胸肌注射H5重组鸡痘冻干苗，每只1羽份，第三组翅膀皮下刺种H5重组鸡痘冻干苗，将每瓶500羽份的疫苗用15 ml生理盐水稀释后，用刺种针沾取一滴（约0.03 ml）每只刺种一次。
禽流感(H9亚型)油乳剂灭活疫苗的研究
禽流感(H9亚型)油乳剂灭活疫苗的研究韩正博;刘芳悦;郭兴福;马世华;邬立权;李宝臣;胡海军;戴秀莉;潘兴广【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2001(035)006【摘要】将H9亚型禽流感病毒尿囊液,经甲醛灭活,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗.疫苗物理性状良好,接种鸡无不良反应,接种疫苗后14d,禽流感病毒HI GMT(Log2)为7.7～7.8,21d为8.9～9.3,于接种疫苗后14、21、30、60d攻击同型禽流感病毒,接种疫苗鸡全部获得保护.现地实验取得了良好地免疫效果,证明制备的油乳剂灭活疫苗安全,免疫原性良好.【总页数】4页(P4-7)【作者】韩正博;刘芳悦;郭兴福;马世华;邬立权;李宝臣;胡海军;戴秀莉;潘兴广【作者单位】黑龙江省生物制品一厂,黑龙江,哈尔滨,150069;黑龙江省生物制品一厂,黑龙江,哈尔滨,150069;黑龙江省生物制品一厂,黑龙江,哈尔滨,150069;黑龙江省生物制品一厂,黑龙江,哈尔滨,150069;黑龙江省生物制品一厂,黑龙江,哈尔滨,150069;黑龙江省生物制品一厂,黑龙江,哈尔滨,150069;黑龙江省生物制品一厂,黑龙江,哈尔滨,150069;黑龙江省生物制品一厂,黑龙江,哈尔滨,150069;黑龙江省生物制品一厂,黑龙江,哈尔滨,150069【正文语种】中文【中图分类】S859.797【相关文献】1.鸭H9亚型禽流感油乳剂灭活疫苗的免疫原性 [J], 刘宇卓;李银;张敬峰;顾玉美2.鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联油乳剂灭活疫苗免疫效力试验 [J], 白军;刘淑红;焦铁军;王运宏;黄建斌;李河林;马建玲;赵希斌;于三科3.禽流感(H5、H9亚型)二价油乳剂灭活疫苗试验研究 [J], 赵雪丽;李明义;范根成4.禽流感(H5、H9亚型)二价油乳剂灭活疫苗试验研究 [J], 李明义;范根成;杜元钊;张文学5.鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联油乳剂灭活疫苗最小免疫剂量试验 [J], 王宏俊;姜北宇;校海霞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
禽流感H_9亚型油乳剂灭活疫苗的改进
禽流感H_9亚型油乳剂灭活疫苗的改进陈瑞爱;温志芬;唐满华;潘洪波;李琳【期刊名称】《中国兽医科技》【年(卷),期】2004(34)1【摘要】用新引进的 6株禽流感病毒 (AIV )H9亚型和现制苗用的AIV H9毒株分别制备AIV H9、AIV H5、NDV二联三价油乳剂灭活疫苗 ,免疫 5日龄和 10日龄雏鸡 ,于免疫当日直至 80日龄鸡出栏期间定期采血 ,用HI法检测相应的AIV H9、AIV H5和NDV抗体。
结果表明 ,10日龄免疫鸡的AIV H9抗体效价最高 ,5日龄和 10日龄免疫鸡的AIV H5抗体效价差别不明显 ;用引进的 3号AIV H9毒株制备的联苗对 10日龄雏鸡免疫后 2 0d产生AIV H9保护性抗体 ,一直持续到 80日龄以上 ,期间的抗体平均效价为 6 .72 (lb) ,而现制苗用的AIV H9毒株制备的联苗免疫力较差 ;现制苗用的AIV H5毒株制备的联苗免疫效力仍较好 ;分别接种 0 .2 5、0 .30mL/只联苗的雏鸡AIV H5抗体效价没有明显差别 ,而AIV H9抗体效价以接种 0 .30mL/只剂量的为高 ;不同日龄、不同免疫剂量的试验鸡NDV抗体效价没有明显差异。
【总页数】5页(P45-49)【关键词】禽流感;H9亚型油乳剂灭活疫苗;病毒;AIV;雏鸡;抗体效价;免疫;剂量;日龄【作者】陈瑞爱;温志芬;唐满华;潘洪波;李琳【作者单位】广东温氏食品集团有限公司;华南农业大学动物科学学院【正文语种】中文【中图分类】S858.315.3【相关文献】1.鸭H9亚型禽流感油乳剂灭活疫苗的免疫原性 [J], 刘宇卓;李银;张敬峰;顾玉美2.禽流感H5亚型2价油乳剂灭活疫苗免疫鸡群后HI抗体消长规律的测定 [J], 肖丽辉;宋凤香;陆桂英3.禽流感(H5、H9亚型)二价油乳剂灭活疫苗试验研究 [J], 赵雪丽;李明义;范根成4.禽流感H5亚型油乳剂灭活疫苗免疫丹顶鹤抗体消长规律 [J], 李洪彬;王文峰;李忠;刘力威;张显光;黄宇翔;王志强;邹跃5.禽流感(H_9亚型)油乳剂灭活疫苗的血凝抑制(HI)抗体动态变化的研究 [J], 陈一兵;刘岳龙;刘雷;解增俊;印继华;丛华;沈海蜂因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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聚肌胞对禽流感油乳剂疫苗的体液免疫增强作用研究黄艳艳;李悦;张琳;马鑫鑫;许传田;张秀美;刘思当;吴家强【摘要】为了研究聚肌胞是否能够增强油乳剂灭活疫苗免疫后鸡群的体液免疫应答,将3个不同来源的聚肌胞产品与H5亚型禽流感病毒灭活抗原相混合,使用轻质矿物油乳化制备疫苗,分别免疫21日龄SPF鸡,同时设置添加抗菌肽的疫苗免疫组、常规油乳剂疫苗免疫组以及不免疫对照组.在免疫后第14、21、28、35 d分别翅下静脉采集SPF鸡抗凝血,通过血凝抑制试验检测鸡血清中禽流感抗体的水平,使用统计学方法评价疫苗中添加聚肌胞对鸡群体液免疫反应的影响.结果发现,添加了聚肌胞或抗菌肽的疫苗免疫后,鸡血清中禽流感抗体水平显著高于普通油苗组.另外,不同来源的聚肌胞产品(PIC-l、PIC-2和PIC-3)免疫增强作用存在差异,以PIC-1免疫增强效果最好.在PIC-1疫苗免疫后,鸡血清抗体增长快,且可维持较高水平.总之,本研究表明聚肌胞是良好的禽病毒性疫苗免疫增强剂;不同厂家的聚肌胞产品质量有差异,应择优使用.%To ev aluate the efficacy of poly I∶ C (PIC) as adjuvant for avian influenza vaccines,three different sources of PIC were mixed withviral antigens of H5 avian influenza virus,and oil emulsion vaccines were developed.Twenty-one-day-old specific-pathogen-free (SPF) chickens were vaccinated with either vaccine.Meanwhile,an unvaccinated chicken group,a cecropin-added oil emulsion vaccine group and a common oil emulsion vaccine (vaccine control) group were set.Chicken blood was collected on the 14th,21st,28th and 35th day after vaccination to test serum antibody levels against avian influenza by hemagglutination inhibition assay.Statistic analysis showed that chickens vaccinated with PICs or cecropin adjuvant developed significantly higher antibody level compared to the vaccinecontrol group.Further,PIC of different sources (PIC-1,PIC-2 and PIC-3) showed varied immune-enhancing effects and that of PIC-1 was the best.After vaccinated with PIC-1,the serum antibody of chickens increased fast and could maintain at higher level.In conclusion,PIC is a better promising adjuvant for chicken viral vaccine,and its efficacy may vary due to the sources.【期刊名称】《山东农业科学》【年(卷),期】2017(049)012【总页数】4页(P100-102,143)【关键词】聚肌胞;免疫增强剂;鸡;禽流感;疫苗【作者】黄艳艳;李悦;张琳;马鑫鑫;许传田;张秀美;刘思当;吴家强【作者单位】山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100【正文语种】中文【中图分类】S852.4禽流感是危害我国养禽业的一类重要传染病，我国采取灭活疫苗免疫和扑杀相结合的措施应对高致病性禽流感在家禽中的传染[1]。
疫苗的普遍采用极大程度上降低了禽流感易感家禽的比例，对禽流感的防控起到了积极作用。
油乳剂灭活疫苗与活疫苗相比，免疫保护产生得慢，因此生产上迫切需要改进型的禽流感灭活疫苗，以缩短疫苗免疫后的保护空白期，提高疫苗对鸡群的保护效率。
新型免疫增强剂如干扰素、白介素、细胞模式识别受体激动剂等可有效增强机体的细胞/体液免疫应答，缩短疫苗使用后的免疫保护空白期，因此成为近年来的研究热点[2,3]。
聚肌胞(poly I∶C, PIC)是人工合成的病毒双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)类似物，可替代病毒dsRNA用作Toll样受体3(TLR3)和维甲酸诱导基因I 受体(RLR)的激动剂[4]，目前已有多个含PIC的抗病毒和抗肿瘤药物的报道[5]。
本课题组以鸡源细胞和SPF鸡为模型所做的试验表明，PIC转染后可迅速激活细胞和鸡体的固有免疫应答，引起细胞模式识别受体(TLR3和MDA5)和细胞因子(IFN-β、IFN-γ和IL-6)基因转录水平的迅速上调(另文报道)。
此外，有研究表明PIC对获得性免疫也有显著增强作用[6]。
国内也有将PIC用作家禽抗病毒药物和疫苗佐剂的报道，但应用效果不一[7-11]。
本研究中，笔者在禽流感油乳剂灭活疫苗中添加不同来源的聚肌胞，检测其对鸡体液免疫应答的影响，为禽流感灭活疫苗的改进提供依据。
1 材料与方法1.1 免疫增强剂溶液的配制丁胺卡那霉素耦合聚肌胞PIC-1、PIC-2和PIC-3分别购自国内3个生产厂家，使用pH 7.4 PBS配制2 mg/mL的溶液。
作为对照的天蚕素抗菌肽(Cecropin)为中农颖泰产品，使用灭菌生理盐水配制2 mg/mL的溶液。
置于-20℃保存备用。
1.2 病毒、抗原、白油和疫苗配制H5亚型禽流感油乳剂疫苗(普通油苗)和添加免疫增强剂的禽流感油乳剂疫苗，均在某疫苗公司定制，使用进口低粘度白油作为佐剂(法国道达尔公司产品)。
血凝抑制试验(hemagglutinin-inhibitation test, HI)抗原亦由上述疫苗公司提供。
添加免疫增强剂的禽流感油乳剂疫苗的制备工艺如下：将聚肌胞或抗菌肽分别与含4%Tween-20的病毒抗原混合作为疫苗水相，白油中加入Span-80作为油相，水相和油相以2∶5的比例混合，乳化制苗。
疫苗中PIC的终浓度为170 μg/mL，抗菌肽的终浓度为15 μg/mL。
1.3 SPF鸡和采血器材21日龄SPF白色来航鸡，购自山东省农业科学院家禽研究所SPF鸡研究中心。
一次性蝶形采血针和EDTA抗凝真空采血管，为北京美科美加生物科技有限公司产品。
1.4 SPF鸡免疫试验试验分为6组(表 1)，其中包括普通油苗免疫组1个、含免疫增强剂油苗免疫组4个以及健康对照组1个，每组各10只鸡。
除健康对照外，其它组别的鸡只通过颈部皮下接种相应的疫苗(0.3 mL/只)。
在免疫后第14、21、28、35 d，分别经翅下静脉采集每只鸡的血液并以EDTA抗凝，然后分离血清，冻存备用。
1.5 疫苗免疫后鸡血清抗体产生情况分析方法HI试验检测鸡血清的禽流感病毒抗体效价，比较不同疫苗免疫后血清抗体产生速度和水平：(1)比较含免疫增强剂油苗和普通油苗免疫后的抗体情况，评价疫苗中添加免疫增强剂对鸡体液免疫的作用；(2)比较含不同免疫增强剂的疫苗免疫后的抗体情况，评价不同免疫增强剂对鸡体液免疫的作用。
使用t检验(Student’s t-test，Microsoft Excel 2007)的单因子方差分析对各试验组抗体水平进行差异显著性分析，P<0.05为差异显著，P<0.01为差异非常显著，P<0.001为差异极显著。
2 结果与分析2.1 试验期间鸡群状况和鸡血清抗体检测结果试验期间，所有鸡只采食、饮水正常，疫苗免疫后鸡群未见有不良反应。
健康对照组的鸡只在4次抗体检测中均未测到禽流感HI抗体，而各免疫组血清抗体水平随着时间推移逐渐增高(表1)。
2.2 禽流感抗体水平差异显著性检验结果表2为单因子方差分析疫苗中添加免疫增强剂的作用结果，表明在免疫后第14 d，PIC-1和PIC-3组抗体水平显著或非常显著高于普通油苗对照组；在免疫后第21 d，添加了聚肌胞的各免疫组血清抗体水平显著或极显著高于普通油苗组；在免疫后第28 d，PIC-1疫苗组的血清抗体水平非常显著高于普通油苗组(P<0.01)；在免疫后第35 d，PIC-1和PIC-2免疫组的血清抗体水平显著或非常显著高于普通油苗组。
不同免疫增强剂组间，在4次检测中PIC-1免疫组HI抗体水平有1～2次显著高于其它免疫增强剂组；而PIC-2、PIC-3和天蚕抗菌肽组之间的血清抗体水平无显著差异(P>0.05)。
表1 疫苗免疫SPF鸡抗体效价检测结果组别免疫增强剂血清抗体效价(lg2平均值±标准差)14d21d28d35d免疫增强剂组PIC-15．1±1．38．6±0．88．7±0．78．7±0．8PIC-24．1±1．77．0±0．98．2±0．68．1±0．7PIC-35．2±1．17．1±1．17．9±0．98．1±1．4Cecropin4．6±1．67．0±1．17．9±0．97．9±1．1普通油苗组3．8±1．06．0±1．27．3±1．17．2±0．9健康对照组0000表2 不同疫苗免疫SPF鸡后禽流感抗体产生水平的差异显著性检验疫苗免疫后天数PIC-1组PIC-2组PIC-3组Cecropin组普通油苗14∗NA∗∗NA21∗∗∗∗∗NA28∗∗NANANA35∗∗∗NANAPIC-114/NANANA21/∗∗∗∗∗28/NA∗∗∗35/NANANAPIC-214/NANA21/NANA28/NANA35/NANAPIC-314/NA21/NA28/NA35/NA 注：*表示差异显著(P<0.05)，**表示差异非常显著(P<0.01)，***表示差异极显著(P>0.001)，NA：差异不显著，/表示不适用。