禽流感病毒H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对鸡、鸭和鹅的免疫效果研究
目前,用于禽流感强制免疫的疫苗主要有三种：禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rl-H5)、重组禽流感病毒H5亚型二
目前，用于禽流感强制免疫的疫苗主要有三种：禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rl-H5)、重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1，Re-5+Re-4株)、禽流感H5-H9二价灭活疫苗。
不论是活疫苗还是灭活苗，影响禽流感免疫效果的因素很多，实践中应对疫苗种类的选择、防疫程序的制订、接种途径、操作方法给予充分的重视，才能尽量减少免疫失败或不良反应。
1、禽流感疫苗使用前的准备工作1.1制定合理的免疫程序一般在制订禽流感免疫程序时应考虑以下几方面的因素：①当地禽流感疫病的流行情况；②雏鸡的母源抗体水平；③免疫间隔时间；④鸡的免疫应答能力；疫苗的种类；免疫接种的方法；⑤免疫对鸡健康及生产性能的影响等。
鸡禽流感疫苗首免日龄在12~15d，如果日龄太小，鸡免疫系统尚未完全建立，会造成免疫系统损伤，影响免疫效果。
另一方面，母源抗体高滴度时，免疫不仅不能刺激机体产生应有的免疫应答，抗体反而会被中和，结果免疫失败。
最好通过实验室检测禽流感母源抗体水平来确定首免日龄。
说明书中禽流感油乳剂灭活苗免疫保护期为4个月，这是在实验室条件下采用SPF鸡检测得出的数据，而实际生产中影响禽流感疫苗免疫效果的因素很多，如饲养管理、营养水平、日龄大小、健康状况等，导致疫苗的保护期长短不一。
所以，不能机械地照搬说明书中的保护期来推测免疫时间，有条件的，应根据HI抗体检测结果来指导何时免疫。
1.2了解禽流感疫苗要选择合适的疫苗对鸡群免疫接种，由于禽流感病毒血清型众多，不同亚型之间不能完全保护。
在生产实践中应针对当前和本地流行的疫情来选择血清型、病毒株相同的疫苗。
如果疫苗毒株的抗原性与感染病原的差异较大，很难取得良好的防疫效果。
疫苗要妥善保存，禽流感疫苗是生物制品，对温度要求很严格，切忌随便存放，否则对疫苗有直接影响。
灭活疫苗要保存在低温、干燥、阴暗的地方，适宜温度为2~8℃，活疫苗为冻干苗，则在冰箱冷冻室-15℃以下保存，切忌反复冻融。
新支流(Re-9)三联灭活疫苗优势
10.8
10.4
8.9
4.8
2.7
2.8
1.6
表3
组别 新支流（Re-9） A 疫苗 B 疫苗 空白对照 1d 7.8 7.8 7.8
免疫新支流油苗组H9抗体滴度比较
3d 7.6 6.8 6.4 7d 5.6 5 5.6 14d 3.3 2.3 2.1 21d 5.1 3.2 2.8 28d 6.2 5.5 5 35d 7.3 6 5.8
7.8
7.8
5.6
3
1.8
1.1
0.5
表4
组别 新支流（ Re-9 ） A 疫苗 B 疫苗 空白对照 1d 1118 1118 1118 1118
免疫新支流油苗组IB抗体滴度比较
3d 519 942 978 1169 7d 447 246 556 636 14d 397 281 358 236 21d 330 123 78 66 28d 883 233 289 102 35d 1838 1039 1227 154
1毒株优势--基因重组技术
Re-9株： 2个表面基因HA、NA基因来自禽流感（H9N2）病 毒,6个内部基因PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因来自流感（ H1N1）病毒。
H1N1 H9N2 H1N1
H9N2
H1N1
H1N1
1.1毒株优势---强大研发技术
普莱柯：国家兽用药品工程技术研究中心，国家级企业 技术中心。新支流（HL株）三联灭活疫苗，国内首创。 国家禽流感参考实验室（OIE禽流感参考实验室），成熟 的流感病毒基因工程重组技术。
2.国家“863”最新科研成果----新型复合 佐剂
新型复合佐剂：由可降解的多聚物构成 ; 抗原被包 裹在微粒中; 是新一代的佐剂 ; 有发展为单次剂量疫苗 的潜力，可降低疫苗接种量。 作用机制：长期的储存库效应， 长达数周至数月; 脉冲式的释放抗原; 靶向APC；可以模拟传统疫苗的初次 免疫和加强免疫效应。
禽流感病毒H5N1的重组酶介导检测方法学研究
CHINA PORT SCIENCE AND TECHNOLOGY禽流感病毒H5N4的重组酶介导检测方法学研究陈淑丹I廖静I王玲I罗鹏I郭利川2郑伟广吴忠华I应清界2摘要采用逆转录-重组酶介导核酸扩增技术(Reverse Transcription Recombinase-aided amplification,RT-RAA)建立检测禽流感病毒H5N1的快速方法，根据禽流感病毒H5N1保守序列设计引物及探针，将H5N1RNA逆转录为cDNA,然后以cDNA作模板.扩增检测病毒核酸序列本研究构建了带有H5N1核酸序列的质粒，以此为模板检测不同浓度的质粒.分析该方法的灵敏度，对已知样本进行检测来验证方法的特异性.设计的H5N1特异性引物和探针，能在3『C恒温下，10-30min可有效扩增岀相应病毒的核酸.与其他流感病毒无交叉反应；对质粒的检测灵敏度可达10拷贝建立的RT-RAA检测禽流感病毒H5N1方法灵敏度和特异性均较髙.且该方法操作简单，适用于禽流感病毒H5N1的快速检测关键词禽流感病毒H5N1；逆转录-重组酶介导核酸扩增技术(RT-RAA)；分子检测Rapid Detection of H5N1Avian Influenza Virus Based onRAA Fluoresce n ee AssayCHEN Shu-Dan1LIAO Jing1WANG Ling1LUO Peng1GUO Li-Chuan*12ZHENG Wei1,WU Zhong-Hua1YING Qing-Jie2Abstract A quick assay of detecting H5N1avian influenza virus was established through reverse transcription recombinase-aided amplification assay(RT-RAA).H5N1avian influenza virus RNA was transcribed into the cDNA by a reverse-transcription reaction,which served as template for RAA amplification.We design universal primer and probe according to the conserved nucleic acid sequence of H5N1virus.Then constructed plasmid and clinical samples were used to evaluate the specificity and sensitivity of the method.The results showed that nucleic acids of H5N1could be well amplified with specific primer and probe,while nucleic acids of other viruses had negative amplification results.The whole reaction was completed within30minutes under constant temperature of 39°C.The study indicates that the RT-RAA method is very sensitive and able to detect10copies.The established RT-RAA assay had high sensitivity and specificity,ready-to-hand for rapid detection of H5N1avian influenza virus.Keywords H5N1avian influenza virus；reverse transcription recombinase-aided amplification(RT-RAA)；molecular detectio n基金项目:海关总署科研项目(2019HK139)通讯作者：郑伟(1979-),男，汉族，杭州人，博士，主任医师.主要从事口岸病原体检测工作，E-mail：*************** 1•杭州国际旅行卫生保健中心(杭州海关口岸门诊部)杭州3100122.江苏奇天基因生物科技有限公司无锡2141351.Hangzhou Intemationai Travel Healthcare Center(Hangzhou Customs Port Outpatient Departments),Hangzhou3100122.Jiangsu Qitian Gene Bio-Sci&Tech Co.Ltd,Wuxi2141354中国口岸科学技术禽流感病毒可通过空气传播，引起急性呼吸道感染高致病性禽流感H5N1曾在亚洲、欧洲和非洲引起大量家禽的流感暴发野生鸟类包括海鸟、海鸥和家鸭被认为是病毒的天然宿主。
蛋鸡场常用疫苗的作用与用途、用法与用量、休药期及有关规定
颈背部皮下注射。18～20周龄鸡1.2ml/只
休药期28d
2℃～8℃保存，有效期为6个月
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鸡传染性支气管炎疫苗
鸡传染性支气管炎活疫苗（H120株）
滴鼻或饮水接种。用于初生雏鸡的首免，不同品种鸡均可使用，至1～2 月龄时，须用H52 疫苗
21
鸡传染性支气管炎疫苗
鸡传染性支气管炎活疫苗（H120株）
9
鸡新城疫活疫苗（CS2株）
用于预防鸡新城疫，专供已经鸡新城疫低毒力活疫苗接种过的鸡使用，免疫期为1年
按瓶签注明的羽份，用灭菌生理盐水或其他适宜的稀释液稀释，皮下或胸部肌肉注射1ml（应在在产蛋前或休产期进行接种）
①本疫苗系用中等毒力株制成，专供已经鸡新城疫低毒力活疫苗接种过的1月龄以上的鸡使用，不得用于初生雏鸡。②(-15)℃以下保存，有效期为75株）
用于预防鸡传染性法氏囊病
用于14日龄鸡饮水接种。将1000羽份疫苗稀释于15升饮水中，持续搅拌直至溶解后，用于接种1000只雏鸡。雏鸡可在7日龄时进行接种，但一般情况下应在14日龄时首免，可在4周龄时加强接种
2℃～8℃保存，有效期为36个月
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鸡传染性法氏囊病活疫苗（CJ-801-BKF株）
①疫苗稀释后应放冷暗处，限4h内用完。②饮水接种时，忌用金属容器，饮水前应停止2h～4h。③用过的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等应进行无害化处理
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鸡传染性支气管炎活疫苗（W93株）
用于预防嗜肾性鸡传染性支气管炎病毒感染。接种后5日产生免疫力，一次接种的免疫期为3个月，两次接种的免疫期为5个月
按瓶签注明羽份，用生理盐水稀释，每1000羽份加生理盐水30～50 ml，每只鸡滴鼻0.03～0.05 m1，饮水接种或在发病初期(越早越好)紧急接种时，接种量应加倍。饮水接种时，饮水量视鸡龄大小、品种、季节而定，5～10日龄5～10 m1；20～30日龄10～20 m1；成鸡，20～30 ml。炎热季节的饮水量应适当增加
夏季如何做好动物疫病预防
夏季如何做好动物疫病预防作者：王飞龙孙华来源：《新农村》2012年第20期夏季是动物疫病的高发季节，也是消灭传染源的最佳时机，科学规范地做好规模场、散养户畜禽防疫工作，确保畜牧业健康发展。
下面从两方面谈谈如何做好夏季动物疫病预防。
一、夏季动物免疫1.免疫病种有国家强制免疫的和江苏省新增加的，如：猪瘟、高致病性猪蓝耳病、口蹄疫、高致病性禽流感、新城疫、猪链球菌病、羊痘、狂犬病等。
2.免疫对象指辖区内所有新补栏的或超过免疫保护期的健康畜禽。
3.免疫程序与方法（1）高致病性禽流感a.对辖区内所有鸡全部用重组禽流感H5N1亚型，Re-4株+Re-6株二价苗，胸部肌注。
对首次免疫的种（蛋）鸡3～4周后再进行一次加强免疫。
b.肉鸡7～14日龄时，用重组禽流感H5N1亚型，Re-4株+Re-6株二价苗免疫一次，每只0.3ml。
c.对种（蛋）鸭、种（蛋）鹅，用H5N1亚型（Re-6株）禽流感灭活苗免疫。
对新生雏鸭或雏鹅14～21日龄时初免，每只0.5ml，间隔3～4周，再进行一次加强免疫，每只1ml.d.肉鸭（鹅），7～10日龄用H5N1亚型（Re-6株）禽流感灭活苗进行免疫，肉鸭免疫一次即可，每只0.5ml，肉鹅须间隔3～4周，再进行一次加强免疫，每只1ml。
e.对辖区内所有鸡只全部集免疫，其它禽参照鸡的免疫程序进行。
（2）牲畜口蹄疫：猪用O型口蹄疫灭活苗强制免疫，牛、羊用O型-亚洲I型口蹄疫二价苗强制免疫，对奶牛、种公牛还要使用A型口蹄疫疫苗强制免疫。
a.猪用O型口蹄疫灭活苗，对新生仔猪以及虽已免疫但已过保护期（一般4个月左右）的猪进行免疫，新生仔猪一般在28～35日龄时首次免疫，每头肌注1ml，间隔1个月后进行一次强化免疫。
每头肌注2ml。
b.对新生羔羊、犊牛以及虽已免疫但已过保护期（一般4个月左右）的羊、牛，使用O型-亚洲I 型口蹄疫二价灭活疫苗进行免疫，对新生羔羊在28～35日龄、新生犊牛在90日龄左右进行初免，每头肌注1ml，间隔1个月后进行一次强化免疫，每头肌注1ml。
流行性感冒ppt课件 (6)全
第五节 人感染高致病性禽流感
二、流行概况
全球概况 1997年5月 香港3个农场发生家禽H5N1流感，该 月在当地从3岁男孩体内分离到H5N1病毒 2003年2月 H5N1病毒开始在部分东南亚国家禽 类中广泛循环，数月内迅速波及8个国家 截至2006年8月23日 全球共报道241例确诊人 禽流感病例，死亡141例
第 二 十 二 章
流行性感冒是一个古老的、第一个实行全球 性监测的、病毒性急性呼吸道传染病。
今后相当长一段时期仍然无法完全控制它的 传播和流行。
随着近年来禽流感疫情的爆发和蔓延，流行 性感冒已越来越成为人们关注的焦点。
2
第一节 病原学 第二节 流行特征 第三节 流行过程 第四节 预防策略与措施 第五节 人感染高致病性禽流感
3
第一节 病原学
流感病毒的基本结构 抗原变异 分类 致病力 免疫力
4
第一节 病原学
一、流感病毒的基本结构
流感病毒属正粘病毒
科，是多形性有包膜病
毒，多为球形，直径80 ～120nm
核糖包膜 : 核糖蛋白 (NP) -RNA (7 or 8 片 断 ) 基质蛋白 (M)
脂质双分子层 血凝素 (HA) 神经氨酸酶 (NA)
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第四节 预防策略与措施
一、流感的流行病学调查
调查原则 注意研究样本
对从不同地区不同研究样本得来的资料进行综合分析时应特 别注意，差异较大时应分别描述，研究单位宜小不宜大。
临床病例的确诊
无论在平时对流感的监测，还是对流感流行的诊断均须注意 要有明确的诊断依据。
减少错误分类
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第四节 预防策略与措施
病原上表现出乙型病毒株活动增强，而甲型病 毒株活力相对减弱的趋势
黄芩提取物治疗肉仔鸡白痢效果
281 制定适合自己鸡场的 免疫程序 根据本地流行病学的 情况， 雏鸡母源抗体的水 平 ，制 定 出 适 合 自 己 鸡 场 的 免 疫 程 序 ，适 合 的 免 疫 程 序 是成功的关键 。
我国区域广 大 ，气 候 差 异 大 ，各 地 流 行 病 的 发 生 有 所 区 别 ，免 疫 程 序不能千篇一律 。
一般认为 以下几种疾病在我国各地 均 有 发 生 ，比 如:马 立 克 、新 城 疫 、 支 气 管 、 法 氏 囊 、鸡 痘 、减 蛋 综 合 症 、低 致 病 性 禽流感、 高致病性禽流感， 这些病的预防在各地免疫 程序制定时都必须考虑 。
其 他疾病如： 传染性喉气管 炎 、传 染 性 脑 脊 髓 炎 、传 染 性 鼻 炎 、支 原 体 等 在 不 同 季 节、 不同区域流行区别较 大 ， 可根据情况加以选择 。
2 选择质量可靠的疫苗 建 议 ，有 条 件 的 鸡 场 在 使用疫苗时首先将疫苗检 测 ，不 但 检 测 疫 苗 本 身 的 抗 原 效 价 ，还 要 检 测 疫 苗 中 是 有网状内皮增生和白血病 病毒等疫苗容易携带的免 疫抑制病病毒 。
尽量杜绝苗 源 性 污 染 ，避 免 疫 苗 免 疫 同 时 接 种 其 他 疾 病 ，造 成 鸡 群 发病 。
油苗的选择根据饲养 鸡群的代次选择不同疫苗， 种 鸡 尽 量 选 择 进 口 疫 苗 ，商 品鸡一般选择国内大公司 生产的疫苗就可以 。
3 疫苗的保存 疫苗在运输和保存过 程 中 ，要 避 免 温 度 过 高 和 直 接 暴 晒 ，通 常 冻 干 活 疫 苗 保 存在 -15℃ 条 件 下 , 保 存 期 为 1~2 年 ; 保 存 在 0℃ ~4℃ 条 件 下 , 保存期为 8 个月 ， 活苗一 定避免反复冻融 。
4 疫苗的使用兽药大观目前在高致病性禽流感的强 制免疫中 ， 主要使用的是重组禽流 感 病 毒 H5 亚 型 二 价 灭 活 苗 （H5N1 ，Re-5+Re-4 株 ）（ 以下简称 灭活苗 ） 和禽流感 - 新城疫重组二 联 活 疫 苗 （rl-H5 型 ）（ 以 下 简 称 活 疫苗 ）。
流行性感冒病毒感染
2．流感肺炎型
➢患者高热持续不退，迅速出现呼吸困难、发 绀、剧咳、有少量泡沫痰或泡沫黏液痰、或 痰中带血。 胸片见肺部双侧呈散在性絮状阴影， 由肺门向四周扩散。
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3．胃肠型
患者多为儿童，以恶心、呕吐、腹泻、 腹痛为主要症状，一般2～3d即可恢复。
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4．脑膜脑炎型
极少见。病毒侵入神经系统，引起病毒 性脑炎的表现，如高热、昏迷，谵妄，抽 搐等，并出现脑膜刺激征，脑脊液细胞数 可轻度增加。
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甲型流感病毒
甲型流感病毒大多呈球形，直径80～120nm，有囊 膜。基因组为单股负链RNA，在丙烯酰胺-琼脂糖-
尿素凝胶上电泳可得到8个基因片断。
依其外膜血凝素（H）和神 经氨酸酶（N）蛋白的抗原 性，目前可分为16个H亚型 （ H1 ～ H16 ） 和 9 个 N 亚 型 （N1～N9）。
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HA及NA的各自变异不断组合成新的变异株，足 够大的变异使人群中对原有流行株所建立的免疫 屏障不再能发挥有效的保护作用。 当人群充分易感时，变异株的攻击就引起疫情暴 发，这是导致流感大流行反复发生的重要原因。 显著的变异主要发生于甲型流感病毒，乙型流感 病毒则少见得多，而丙型流感病毒一般不发生。
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流感病毒感染后可以激发机体的免疫 保护反应。 感染2周内即可产生针对 HA的IgM、IgA、IgG抗体。
它们可以阻断流感病毒对宿主细 胞的吸附和穿入，故有中和病毒、阻 止感染的作用。
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一、流行性感冒（influenza）
简称流感，是一种由流感病毒所致的急性 发热性呼吸道传染病；通过飞沫传播，具 有高度传染性，几乎每年都会在世界某个 地区暴发流行。
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禽流感病毒H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对鸡、鸭和鹅的
免疫效果研究
曾显营;陈化兰;钟功勋;李雁冰;施建忠;姜永萍;王彦妮;万晓鹏;毛胜刚;田国彬
【期刊名称】《中国预防兽医学报》
【年(卷),期】2010(032)010
【摘要】为系统评估禽流感病毒(AIV)H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对家禽的免疫效果,本研究将Re-4株油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡和商品蛋鸡、商品鸭及商品鹅.免疫后每周采集血清测定HI抗体,绘制抗体消长曲线,免疫SPF鸡在免疫后2周、3周和50周时以105 EID50剂量的强毒株(CK/SX/2/06)进行攻毒.研究结果显示,该疫苗对蛋鸡、鸭、鹅均具有良好的免疫效果,而且SPF免疫鸡血清HI抗体在4 log2以上时能够完全抵抗CK/SX/2/06强毒的攻击.因此,根据实验结果推荐该油乳剂灭活疫苗的对上述禽类的免疫程序:商品蛋鸡10日龄颈部皮下注射0.3 mL,60日龄和110日龄(开产前)时依次胸肌注射0.5 mL和1.0 mL进行免疫;商品鸭、鹅在
2周龄均以0.5 mL首免,5周龄和4月龄左右时以1 mL的剂量肌肉注射方式进行
加强免疫.
【总页数】4页(P800-803)
【作者】曾显营;陈化兰;钟功勋;李雁冰;施建忠;姜永萍;王彦妮;万晓鹏;毛胜刚;田国
彬
【作者单位】中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医
研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江,哈
尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医
研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江,哈
尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医
研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江,哈
尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医
研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江,哈
尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,哈尔滨维科生物技术开发公司,黑
龙江,哈尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实
验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
【正文语种】中文
【中图分类】S852.65
【相关文献】
1.H5N1亚型禽流感变异株灭活疫苗种毒Re-4株的生物学特性及免疫原性研究[J], 田国彬;陈化兰;曾显营;钟功勋;姜永萍;李雁冰;施建忠;毛胜刚;冯菊艳;王君伟
2.重组禽流感病毒H5亚型二价灭活苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)的免疫效果评价[J], 陈建祥;袁金钱;孙勇艇;沈奇;李娅;徐小燕
3.重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗（H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株）的不同免疫剂量对融水香鸭免疫效果分析 [J], 韦钰;曾庆伦;蒙文娟;刘佳佳;谢艳林;蒋才淼;覃超林;陈息振;王敏
4.H5N1亚型禽流感变异株灭活疫苗种毒Re-4株的P生物学特性及免疫原性研究[J],
5.重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1，Re-1株＋Re-4株）初步评价会议在京召开 [J],
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