HPLC―MSMS法测定鸭肉中氯霉素类药物残留8页
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定
动物源性食品中氯霉素类药物残留的测定是一项重要的检测工作，这些药物残留的存在可能对人体健康产生一定的危害。
准确、快速地检测这些残留物的含量是非常必要的。
氯霉素类药物是一种广谱抗生素，常用于预防和治疗动物的感染病。
如果动物在屠宰前一段时间内使用了这些药物，残留物可能会在食品中存在。
对于人类来说，摄入这些残留物可能会引起过敏反应、中毒甚至诱发耐药菌株。
第一种是高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）。
该方法具有快速、准确、灵敏、选择性高等特点。
将样品进行提取，利用有机溶剂将残留物从食品中分离出来。
然后，使用HPLC将残留物进行分离，并通过串联质谱进行定性和定量分析。
该方法可以同时测定多种氯霉素类药物的残留，且可以达到非常低的检测限。
第二种是酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
该方法是通过抗体与药物残留物结合来进行检测的。
将样品中的残留物与标记有酶的抗体结合，在搅拌的条件下进行反应。
然后，通过酶标仪检测残留物与酶的结合程度，从而确定残留物的含量。
由于该方法操作简便、快速，且具有较高的灵敏度和选择性，因此广泛应用于动物源性食品中氯霉素类药物残留的测定中。
测定动物源性食品中氯霉素类药物残留的方法有很多种，每种方法都有其优缺点。
在具体实验中，需要根据实际需要选择合适的方法进行测定，以确保结果的准确性和可靠性。
HPLC-MSMS法检测动物源性食品中氯霉素类药物残留研究
氟甲砜霉素2.净化方法选用Q u E C h E R S方法进行样品的净化。
本实验比较了吸附剂1（P S A 50m g，中性氧化铝50m g，无水硫酸镁500m g），吸附剂2（P S A 100m g，无水硫酸镁500mg），吸附剂3（PSA 50mg，C18 50mg，无水硫酸镁500mg）在三种不同基质1.0μg/kg水平加标时的平均回收率和精密度。
吸附剂1的回收率最佳（回收率详情见表3）。
3. 线性范围，检出限与定量限将氯霉素类药物混合标准溶液稀释成浓度为0.1n g/m l，0.5ng/ml，1.0ng/ml，5.0ng/ml，10n g/m l，内标浓度为1.0n g/m l 的系列标准溶液，得到线性回归方程在0.1~1.0n g/m l的浓度范围内线性关系良好，氯霉素：Y=1.427X+0.001943，R2=0.9979；甲砜霉素:Y=275X-0.02534，R2=0.9982；氟甲砜霉素：Y=12560X-0.08704，R2=0.9973，平行测定20次空白样品，得到空白值的标准偏差S b，仪器的测定低限为C L=3S b/b（b为标准曲线的斜率），方法的测定低限为C L乘以稀释倍数除以样品质量，确定本方法中三种氯霉素类药物的检出限均为0.1μg/kg，定量限均为0.3μg/kg（详见表4）。
4. 回收率与精密度向阴性基质样品中添加3个浓度水平的混合标准溶液，按照本试验优化所得的样品前处理方法及仪器条件进行试验（n=6）。
氯霉素类药物的回收率为95.7%~101%，相对标准偏差为4.38%~7.33%，符合相关国家标准和法律法规的要求（详情见表5）。
三、结论QuEChERS方法与传统方法相比，处理步骤简单快速，提取溶剂与净化吸附剂接触充分，回收率较好，通过调整提取溶剂和净化吸附剂的比例，优化了动物源性食品中的氯霉素类药物残留测定方法。
定性分析和定量分析都满足要求。
[参考文献][1]李俊锁, 邱月明, 王超. 兽药残留分析[M].上海：上海科学技术出版社, 2002.[2] 赵汉取, 王雨晨, 韦肖杭，等. 新一代抗生素——氟苯尼考及其在水产养殖中的应用[J]. 水产科技情报, 2007, 34(4):165-168.[3] 李鹏, 邱月明, 蔡慧霞，等. 气相色谱-质谱联用法测定动物组织中氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素的残留量[J]. 色谱, 2006,24(1)：2.[4] 王志杰, 冷凯良, 孙伟红，等. 水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素残留量高效液相色谱-串联质谱内标测定方法的研究[J].渔业科学进展, 2009，30(2):115-119.（作者单位：中检科（上海）测试技术有限公司）提取溶剂猪肉鸡肉鱼肉平均回收率%96.495.798.1平均回收率%84.188.793.5平均回收率%10194.396.7精密度%6.536.174.38精密度%7.315.025.31精密度%6.113.374.26乙腈（1%氨水）丙酮（1%氨水）乙酸乙酯（1%氨水）表2 不同提取溶剂回收率（n=6）表3 不同吸附剂回收率（n=6）提取溶剂猪肉鸡肉鱼肉平均回收率%96.495.798.1平均回收率%92.190.495.2平均回收率%93.188.790.6精密度%6.536.174.38精密度%8.146.223.82精密度%4.173.662.83吸附剂1吸附剂2吸附剂3表5 氯霉素类药物的回收率和相对标准偏差样品添加水平μg/kg 平均回收率% RSD%猪肉0.10.21.097.696.096.46.956.336.53鸡肉0.10.21.096.796.295.77.336.56.17鱼肉0.10.21.0101.097.998.15.715.324.38表4 三种氯霉素类化合物的线性方程和测定低限氯霉素甲砜霉素氟甲砜霉素线性方程Y=1.427X+0.001943Y=275X-0.02534Y=12560X-0.08704LODμg/kg0.1μg/kg0.1μg/kg0.1μg/kgLOQμg/kg0.3μg/kg0.3μg/kg0.3μg/kgR20.99790.99820.9973《质量与认证》2020 ·11 79。
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定
氯霉素是一种广谱抗菌药，常用于治疗动物疾病。
过量使用氯霉素类药物可能导致残留物在动物源性食品中积累，对人体健康产生潜在风险。
准确测定动物源性食品中氯霉素类药物残留量成为保障公众健康的重要问题。
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法有多种，包括色谱法、质谱法和免疫学法等。
高效液相色谱法（HPLC）被广泛应用于测定氯霉素类药物的残留量。
第一步：样品处理
将待测样品（如肉类、奶类等）称取适量，加入磷酸盐缓冲液中，进行均匀混合。
然后，使用离心机进行离心，将澄清的上层液体转移至新的离心管中。
第二步：萃取
将第一步得到的上层液体与乙酸乙酯混合，进行振荡和离心分离。
离心后，将乙酸乙酯层取出，并使用氮气吹干。
第三步：溶解
将第二步得到的干燥残留物用甲醇溶解，得到测试溶液。
第四步：色谱分析
将测试溶液通过HPLC进行分析。
选择适当的色谱柱和移动相，设置合适的流速和检测波长。
根据氯霉素类药物的特征峰进行定量分析。
根据已知浓度的标准品制备多个浓度的标准曲线，从而计算待测样品中氯霉素类药物的浓度。
第五步：结果判断
根据分析结果，判断待测样品中氯霉素类药物的残留量是否符合国家标准要求。
如果超过标准限量，则建议不使用该样品，以防止对人体健康造成潜在风险。
HPLC是一种常用于测定动物源性食品中氯霉素类药物残留量的方法。
通过样品处理、萃取、溶解和色谱分析等步骤，可以准确测定残留物的含量，并对公众健康提供保障。
同时测定食品中氯霉素类药物的残留量
ELISA 方法使用酶联免疫检验试剂盒，如荷兰推出的测定氯霉素残留的酶联免疫测定 试剂盒 Quik-card，又称 La card test 试剂盒，该试剂盒用于测定牛、猪、羊等肌肉中氯霉素 残留，也可检测牛奶中氯霉素的残留，另外还有用它检测鸡蛋、尿液中氯霉素的报道[2]。一 般来说 ELISA 用于快速大规模筛选，在基层实地检测较多见，氯霉素的检出限只能达到 10 µg/kg，远低于欧盟的 0.3 µg/kg 的要求，由于抗体的批次不同，测定结果将出现一定差异， 重复性差，也可能出现微小差异，精密度也达不到要求，而且它的特异性很强，不能进行多 残留检测，试剂昂贵，易出现假阳性结果[3,4]。
0
100
6
12
0
100
6
12.10
75
25
6
24.50
75
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6
25
END
1.5 质谱条件： 离子源(Source)：ESI(-); 毛细管电压(Capillary)：3.80kV；锥孔电压(Cone)：70V；离子
源温度（Source Temperature）：100℃；锥孔反吹气流量(Cone Gas Flow)：60 L/hr；脱溶剂 气温度（Desolvation Temperature）：350℃；脱溶剂气流量（Desolvation Gas Flow）：400L/hr。
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定随着社会经济的不断发展，人们对食品安全和质量的关注也越来越重视。
动物源性食品是人们日常生活中必不可少的一部分，而在动物养殖过程中使用的药物残留问题一直备受关注。
氯霉素类药物是一类常见的抗生素，被广泛用于畜禽的预防和治疗疾病。
如果动物源性食品中残留有氯霉素类药物，就会对人体健康产生潜在的威胁。
对动物源性食品中氯霉素类药物残留量进行准确测定是非常重要的。
一、氯霉素类药物的常见种类和用途氯霉素是一种广谱的抗生素，常见的氯霉素类药物包括氯霉素、土霉素、金霉素等。
这些药物在畜禽养殖中主要用于预防和治疗细菌感染疾病，可以有效地保障动物的健康。
但是长期使用或过量使用会导致药物在动物体内积聚，最终导致药物在动物源性食品中残留，这对人体健康构成威胁。
二、动物源性食品中氯霉素类药物残留的危害动物源性食品是人们饮食的重要组成部分，如果其中残留有氯霉素类药物，就会对人体健康产生危害。
据研究表明，长期摄入氯霉素类药物残留的动物食品，会引发人体对抗生素的耐受性，降低人体的免疫力，还可能产生过敏反应、药物过敏等不良后果。
合理监测和控制动物源性食品中的氯霉素类药物残留量就显得尤为重要。
三、动物源性食品中氯霉素类药物残留的检测方法在动物源性食品中检测氯霉素类药物残留量的方法多种多样，其中包括生物学方法、物理化学方法和免疫学方法。
高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS/MS）是一种比较常用的方法，具有高灵敏度、高选择性和准确性的特点。
通过该技术，可以快速高效地定量检测动物源性食品中氯霉素类药物残留的含量，并对不同类型的动物源性食品进行分析。
四、动物源性食品中氯霉素类药物残留的监测标准为了保障食品安全和人民健康，国家对动物源性食品中氯霉素类药物残留的监测标准非常严格。
根据《食品安全国家标准-动物源性食品中氯霉素类药物残留限量》（GB31650-2019）规定，不同类型的动物源性食品中氯霉素类药物残留的限量标准是不同的。
高效液相色谱-串联质谱测定熟肉制品中氯霉素药物残留
高效液相色谱-串联质谱测定熟肉制品中氯霉素药物残留作者：肖植国，梅群，孔维芬，张馨来源：《现代食品》 2018年第12期摘要：目的：建立同时测定熟肉制品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的液质联用方法。
方法：样品经乙腈提取，饱和乙腈正己烷脱脂，以甲醇水作为流动相，通过高效液相色谱，采用负离子模式多反应监测，氯霉素用同位素内标定量，甲砜霉素、氟甲砜霉素用外标法定量。
结果：本方法线性范围为0.25 ～20.0 μg/L，相关系数＞ 0.999，检出限0.01 μg/kg，定量限0.1 μg/kg，3 种物质添加水平分别为0.5、2.5、5.0 μg/kg，加标回收率分别为氯霉素82.2% ～ 103%，甲砜霉素81.8% ～ 108%，氟甲砜霉素67.6% ～ 104%，RSD ＜ 10%。
结论：该方法具有简单快速、灵敏度高、准确性强等特点，适用于测定熟肉及熟肉制品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的含量。
关键词：氯霉素；甲砜霉素；氟甲砜霉素；熟肉制品；高效液相色谱- 质谱法Abstract：Objective to establish a method for simultaneous determination of chloramphenicol,sulfosfamycin and flumosulfamycin in cooked meat products. Methods samples extracted by acetonitrile,saturated acetonitrile n-hexane degreasing, with methanol as mobile phase, the water by HPLC, adopt thenegative ion mode multiple reaction monitoring, chloramphenicol, using isotope internal standard quantitativethiamphenicol toxin, fluorine thiamphenicol drug quantitative byexternal standard method. Results the methodof linear range: 0.25 ～20.0 μg/L,the correlation coefficient > 0.999, the detection limit of 0.01μg/kg,quantitative limit of 0.1μg/kg, three kinds of material added level were0.5, 2.5, 5.0 μg/kg, the recoveryrate of chloramphenicol respectively 82.2% ～103%, thiamphenicol 81.8% ～ 108%, fluorine thiamphenicol67.6% ～ 104%, RSD ＜ 10%. Conclusion this method is simple, fast, sensitive and accurate, and it issuitablefor the determination of chloramphenicol, methylamycin and flumethylamycinin cooked meat and cookedmeat products.Key words：Chloramphenicol; Sulfamycin; Fosfomycin; Cooked meat products; HPLC - massspectrometry中图分类号：O657.63氯霉素类药物具有广谱抗菌能力，在水产养殖和畜牧养殖中都广泛应用。
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定动物源性食品是人们日常饮食中重要的一部分，然而其中可能存在着一些潜在的危险因素，比如动物体内的残留药物。
氯霉素类药物是一类广泛使用的抗生素，用于治疗动物的疾病。
大量使用氯霉素类药物可能导致其在动物体内残留，并通过食品链进入人体，对人体健康造成潜在威胁。
对动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定是非常重要的。
目前，国内外对动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法有很多种，常用的方法有高效液相色谱法、气相色谱法、质谱联用技术等。
这些方法在检测灵敏度、准确性和可操作性等方面各有优势，但也存在一些局限性，例如部分方法需要昂贵的设备和专业的操作技能。
在选择合适的测定方法时需要根据具体的实验条件和需要进行综合考虑。
高效液相色谱法是一种目前应用较为广泛的氯霉素类药物残留测定方法。
该方法操作简便，准确度高，且可以同时测定多种氯霉素类药物的残留量。
其原理是利用高效液相色谱仪对样品中的氯霉素类药物进行分离和检测，通过比对标准曲线来计算出样品中的氯霉素类药物残留量。
但是该方法也存在一些局限性，比如需要使用高昂的仪器设备，操作技能要求较高等。
在选择合适的氯霉素类药物残留测定方法时，需要根据实际情况进行综合考虑。
对于一般的常规检测工作，可以选择高效液相色谱法或气相色谱法进行分析；对于对检测结果精度和灵敏度要求较高的情况，可以选择质谱联用技术进行分析。
在进行氯霉素类药物残留测定时，还需要严格按照标准操作程序，进行严格的质量控制和质量保证，确保检测结果的准确性和可靠性。
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定是一项十分重要的工作。
尽管不同的测定方法各有优势和局限性，但在实际工作中需要根据具体情况选择合适的方法，并严格按照标准操作程序进行操作，以保证检测结果的准确性和可靠性。
只有这样，才能确保动物源性食品的安全性和健康性，保障人民群众的身体健康。
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定
氯霉素类药物是一种广泛用于家禽、家畜和水产养殖业的抗生素，它们能够有效地预防和治疗动物疾病。
但是，如果过度使用这些药物，会导致药物残留在动物体内，从而对人们的健康造成威胁。
因此，为了确保食品安全，需要对动物源性食品中氯霉素类药物残留量进行检测。
氯霉素类药物包括氯霉素、磺胺甲基异噁唑、三种青霉素等多个种类，它们对不同的细菌有着不同的危害作用，但都具有较强的药物残留性质。
因此，精确地测定它们的残留量是非常重要的。
测定氯霉素类药物残留量的方法有多种，其中包括高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法等等，这些方法都具有高灵敏度、高准确性的特点。
在现代食品检验实验室中，常用的方法是高效液相色谱法（HPLC）。
高效液相色谱法是一种常用的分离分析技术，它是一种基于液态固定相的分离技术，具有分离速度快、分离效果好、灵敏度高等多重优点。
利用高效液相色谱法可以分离出氯霉素类药物并进行定量分析。
该方法的样品处理步骤主要包括提取、纯化和分离，然后进行定量分析。
首先，将待测样品粉碎和混合，加入特定体积的溶剂进行提取，这样可以将样品中的氯霉素类药物提取出来。
然后，通过过滤和纯化净化样品，删除样品中的杂质，使得氯霉素类药物更加纯净。
接着，将样品注入高效液相色谱仪中进行分离和定量。
最后，根据所得的峰面积和对照品的峰面积计算出氯霉素类药物的含量。
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HPLC―MSMS法测定鸭肉中氯霉素类药物残留[HJ1.3mm]收稿日期：2015-11-16基金项目：江苏省泰州市社会发展项目（编号：TS032）。
通信作者：蒋春茂，博士，教授，主要从事新兽药研究。
E-mail：cmj109@126。
动物源食品（肉、蛋、奶、水产及其制品）的安全是全世界关注的焦点，其中兽药残留问题是影响动物源食品安全的重要因素之一[1]。
氯霉素类药物属于广谱抗生素，对革兰氏阴性及阳性细菌均有抑制作用，主要包括氯霉素（chloramphenicol，CAP）、甲砜霉素（thiamphenicol，TAP）、氟苯尼考（florfenicol，FF）等。
氯霉素可抑制人类骨髓的造血功能，引起再生障碍性贫血，在美国、欧盟及我国均被禁用于食品动物，同时规定了禽肉中甲砜霉素、氟苯尼考的最高残留限量分别为50、100 ng/g。
目前，氯霉素类药物残留的检测方法主要有微生物法[2]、酶联免疫法[3]、共振生物传感器法[4]、气相色谱法[5]、液相色谱法[6]、超高效液相色谱法[7]、气相色谱-质谱法[8]、液相色谱-质谱法[9]、超高效液相色谱-串联质谱法[10-12]等。
目前，动物性食品中氯霉素类及其代谢物的残留检测前处理方法较为传统，药物与杂质间分离度差，且?驮拥那按?理程序影响了样品回收率。
如何简化前处理方法是目前该类药物检测中亟待解决的关键问题。
仅采用HPLC技术或GC技术已无法满足多残留检测的要求，且其在鸭肉残留检测方法中的应用尚未见国内外报道。
鉴于此，本研究拟将快速溶剂萃取（ASE）技术应用于样品前处理，采用HPLC-MS/MS法建立快速、简易、高灵敏、高通量的禽肉中氯霉素类及其代谢物的多残留快速检测技术，为兽药残留监控体系的建立和完善提供先进的技术资料，对于我国动物性食品出口贸易更好地与国际接轨、保障人类健康具有重要意义。
1材料与方法1.1药物与试剂氯霉素对照品购自中国食品药品检定研究所，批号为130555-201203。
甲砜霉素对照品购自中国兽医药品监察所，批号为k0240706。
氟苯尼考对照品购自中国兽医药品[JP2]监察所，批号为k0301305。
7-羟基双香豆素标准品购自Sigma-Aldrich公司，批号为STBD2336V。
氯霉素原料药购自郑州津北化工有限公司。
甲砜霉素粉（5%）、氟苯尼考粉（10%）均购自江苏中牧倍康药业有限公司。
乙腈为色谱纯，购自Fisher scientific公司。
二甲基亚砜（DMSO）为色谱纯，购自国药集团化学试剂有限公司。
乙酸为色谱纯，购自Sigma-Aldrich公司。
1.2仪器与设备API4000 Q-trap型三重四级杆/离子阱质谱仪，包含电喷雾电离源（ESI 源）（美国应用生物系统公司）；1200系列高效液相色谱系统（美国安捷伦科技有限公司）；CTC PAL型自动进样器（CTC Analytics，AG，瑞士）；FA25型高速匀浆机（Fluko公司）。
1.3试验动物及处理雏鸭购自江苏省海安县某孵化场，选择无抗饲料饲养至30日龄。
将鸭分为2组，其中一组给以氯霉素原料药、甲砜霉素粉、氟苯尼考粉，均按说明书剂量拌料给药，连用3 d；另一组为对照组，不给以任何药物。
分别在给药后3 d将其剖杀，取各组肌肉，于-20 ℃保存备用。
1.4试验方法1.4.1系列标准工作溶液的配制精确称取适量氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考标准品，分别置于20 mL 容量瓶中，采用DMSO溶解并定容，超声促溶，充分摇匀，配制成1 mg/mL 的标准储备液。
采用移液枪各取100 μL标准储备液于700 μL乙腈中，配制成100 μg/mL的混合工作液。
采用乙腈梯度稀释至5.000、2.000、1.000、0.500、0.200、0.100、0.050、0.025 μg/mL 的混合系列标准工作溶液。
1.4.2内标工作溶液的配制精确称取适量7-羟基双香豆素标准品，置于10 mL容量瓶中，采用DMSO溶解并定容，超声促溶，充分摇匀，配制成2 mg/mL的标准储备液。
采用乙腈稀释至200 ng/mL，储存备用。
1.4.3空白肌肉匀浆液称取一定量的鸭空白肌肉样品，剪碎，加入10倍体积的50%乙腈，将样品置于冰浴，采用高速匀浆机进行匀浆处理，得到均一的匀浆液。
1.4.4标准工作曲线的前处理取5 μL系列标准工作液（5.000、2.000、1.000、0.500、0.200、0.100、0.050、0.025 μg/mL）加入至50 μL空白肌肉匀浆液中，涡旋振荡 30 s，加入150 μL内标工作溶液，涡旋振荡3 min，使蛋白充分沉淀；于4 ℃、14 000 r/min条件下离心10 min，取150 μL上清液加入至150 μL超纯水中，混合均匀后待进样。
标准曲线的系列浓度为2.50、5.00、10.0、20.0、50.0、100.0、200.0、500.0 ng/mL；肌肉?蚪?为10倍体积匀浆液，因此在肌肉中的定量范围为25.0、50.0、100.0、200.0、500.0、1 000.0、2 000.0、5 000.0 ng/g。
1.4.5给药鸭肌肉样品前处理取给药鸭肌肉匀浆液50 μL，加入5 μL乙腈，使其与空白添加样品（标准曲线）的基质保持一致；加入150 μL含内标的乙腈，涡旋振荡3 min，于4 ℃、14 000 r/min条件下离心10 min，取150 μL上清液加至150 μL超纯水中，混合均匀后待进样。
1.4.6HPLC色谱条件采用CAPCELLPAK型色谱柱（MG，50 mm×2.0 mm，I.D. 5 μm）（日本资生堂），流动相A为01%乙酸，流动相B为乙腈-甲醇（体积比1 ∶[KG-*3]1），进样体积为10 μL，梯度洗脱条件见表1。
质谱条件：采用电喷雾离子源（ESI），应用负离子模式，检测方式为多反应监测（MRM）。
质谱离子源参数分别为CUR 40.00、CAD-2.00、IS-4 500.00、TEM 400.00、GS1 40.00、GS2 50.00、ihe ON。
化合物质谱参数见表2。
采用Analyst 1.4.2质谱采集与分析软件。
1.4.7加标回收率在空白鸭肉中，分别添加25、50、100 g/kg 质量浓度水平的氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考对照品，每个质量浓度水平设3个平行试验，计算3种物质的加标回收率和相对标准偏差（RSD）。
2结果与分析2.1质谱条件的优化氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考的平均分子量分别为 323.13、356.22、358.20，这3个化合物均含有2个Cl-离子。
Cl在自然界中有2种同位素，即35Cl、37Cl，其分子量分别为34.969、36.966，丰度分别为75.77%、24.23%。
为获得更高的灵敏度，以含35Cl的化合物作为目标化合物进行检测，经计算，含35Cl的氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考的准确分子量分别为322、355、357。
预先配制50、100、150 ng/mL质量浓度的氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考标准溶液，以流动注射的方式在负离子模式下进行一级质谱母离子全扫描，分子离子m/z分别为320.9、353.9、355.9，其中50 ng/mL分子离子的响应在106 cps附近，即为最佳优化质量浓度。
以50 ng/mL质量浓度在负离子模式下进行自动优化，以确定最高响应二级离子m/z以及相应的DP、CE、CXP参数（表2）。
最终优化ESI源的碰撞电压、离子化温度、气帘气等参数。
2.2色谱条件的优化氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考均为弱极性化合物，极易溶解于甲醇、乙腈。
本研究以含0.1%乙酸作为水相，0.1%乙酸能促进分子的电离，大幅增强检测信号的强度；以等比例甲醇-乙腈作为有机相，随着有机相比例的提高，目标物保留时间缩短，但分离效果较差，如果有机相比例过低，其色谱峰较宽，灵敏度将随之降低。
等度洗脱要将3个目标化合物同时分离，单个样品的检测时间较长，因此最终选择梯度洗脱，可在较短时间内将3个化合物很好地分离，同时提高了分析效率及检测灵敏度。
2.3样品的提取在动物组织样品中，氯霉素类药物的常用提取溶剂为乙腈、甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯等。
本试验采用较为简单的乙腈蛋白沉淀法，过程提取回收率约为95%，符合要求且步骤简单，可大幅提高样品前处理的效率。
2.4方法的线性范围、定量限和检测限标准工作曲线的处理见“1.4.4”节，进样10 μL。
在本方法所确定的试验条件下，采用Analyst 1.4.2软件进行数据的采集与分析。
将各待测化合物和内标峰面积的比值与理论浓度采用一元二次回归方程（quadratic）拟合，得到权重因子为1/x2。
氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考的线性方程、相关系数、线性范围见表3，回归曲线见图1、图2、图3。
氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考的定量下限均为25 ng/g，定量下限的信噪比分别为77.2、53.5、320.4（图4、图5、图6），符合信噪比（RSN）>10作为定量下限的要求。
当信噪比为3时，最低检测限分别为2.50、2.50、1.25 ng/g。
2.5加标回收率3种药物在20、50、100 μg/kg添加水平下的平均回收率为93.26%～97.25%，RSD为0.47%～1.83%（表4）。
可见，本方法可满足鸭肉中同时检测氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考的要求。
2.6给药动物肌肉中药物浓度的测定[CM（24]给药样品经处理后进样，通过Analyst 1.4.2软件计算，[CM）]肌肉样品中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考的平均浓度分别为735、1 470、1 540 ng/g（图7）。
3结论与讨论本研究建立了应用HPLC-MS/MS检测禽肉中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考残留的检测方法，采用负离子选择反应监测模式同时检测3种化合物。
本方法仅取0.5～1.0 g样品，经50%乙腈高速匀浆后，取50 μL匀浆样品，加入5 μL乙腈，以7-羟基双香豆素为内标。
无需脱脂和固相萃取等操作，且无需氮吹浓缩。
该方法简单易行，出峰时间为1～3 min，分析快速，且方法的最低检测限低于国家氯霉素类残留最低检测限（100 ng/g）。
该方法的回收率和准确率高，完全可满足禽肉中氯霉素类药物的残留确?C。
有关鸭肉中氯霉素类药物残留检测的报道很少，但在其他有关动物组织中，氯霉素类药物残留检测方法的报道很多。
陶昕晨等采用HPLC-MS/MS 建立虾肉和猪肉中氯霉素类药物的多残留检测方法，以2%碱性乙酸乙酯提取，其平均回收率为78.17%～99.86%，但保留时间为2.63～3.72 min[13]；本试验的分析时间更短，仅为1～2 min，且样品处理方法更为简单。
[HS2][HT8.5H]希望以上资料对你有所帮助，附励志名言3条：1、生命对某些人来说是美丽的，这些人的一生都为某个目标而奋斗。