羧肽酶A
Glutamate 270和底物酸性组分形 成的酸酐在下一步过程m此e催to化us机e t制hes中e 的Po作we用rP：oin被t te裂mp解la的tes肽, N键ew的羰 机C指on向tenZtnd2e+s，ign使, 1C0﹦yeOar键s e比xp正eri常enc的e 更为极化，使 羰基C原子更易接受亲核进攻。Zn2+处在非极性 环境促进了诱导偶极子的产生，这增加了它的有 效电荷。Glutamate 270的负电荷的逼近也对羰 基上产生一个大的偶极子作出了贡献。这样， carboxypeptidase A诱导电子应变（底物上的） 以加速催化。
羧肽酶A
诱导变化
welc从om酶e—to甘u氨se酰th酪es氨e 酸Po络w合erP物o的int结te构m能pla推te导s,出N底ew物和 Co酶nt结en合t d的es模ig式n, 。10静y电ea作rs用experience
甘氨酰酪氨酸（glycyltyrosine）是一种能被缓慢水 解的底物，它通过五方面的作用结合到酶上。
被裂解的肽键的羰基氧与Zn2+形成配位键； 底物的末端氨基通过一个插入的水分子 （intervening water molecule）和谷氨酸270的侧链形 成氢键。这种作用在形成ES络合物时或许没有产生， 事实上这可能是glycyltyrosine很慢的水解的原因。
羧肽酶简介
电子张力
welcome Ttoyursoesitnhees2e4P8o的we羟rP基oin给t t予em被pla裂te开s, N的ew Content肽de键sig的n,—10NyHea—rs一ex个pe质rien子ce。
羧肽酶简介
反应式
H请H在此O 添加H段落内容……
··· N
C R
C
N H
O CC CH2 O-
+H2O
羧肽酶
H N
H C R
O
C+
O-
H3+N
H O
CC CH2 O-
OH
OH
羧肽酶A
羧肽酶A能水解蛋白质和多肽底物C端芳香 族或中性脂肪族氨基酸残基，释放除脯氨
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羧肽酶A
活性部位
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Content de精sig氨n, 酸10残ye基ars experience 金属Zn 2+ 酪氨酸残基
羧肽酶A
催化机理
welco①me诱to导us适e 应the（seIPnodwuecrePdoifnitt）tem：pl底ate物s, 的Ne结w Cont合ent伴de随sig着n,酶10结ye构ar的s e重xp大erie改nc变e
羧肽酶A反应机制
羧肽酶简介
根据催化机制分类 w羧el肽com酶e可to分us为e th两es类e ：Po丝we氨rPo酸inCt tePms和pla金tes属, NCePws。 C在on丝ten氨t d酸esCigPns, 中10，ye其ars活ex性pe位rie点nc含e 有1个催化 功能所必需的结构单元，它由Ser，Asp， His按独特顺序构成；而金属CPs的催化则 需要1个锌离子的参与。
② 电子张力（应变）（Electronic Strain）：酶在活性部位含有一个锌原 子和其他基团，它们诱导底物电子云分 布重排，从而使底物更易被水解。
羧肽酶A
催化机理 w在el酶com的e催to化us中e th心es，e PZonw2+e与rPoHinist 1te9m6，plaGtelsu, 7N2e及w CHoinst6e9n结t de合sig，n,它10具ye有ar双s e重xp作eri用enc：e ① 通过Zn2+ -OH键极化1个水分子，使其攻击底物易断 裂的肽键而形成1个四面体过渡态结构；② 通过静电作用稳定过渡态结构中的部分负 电荷。
Thank you!
带负电荷glycyltyrosine的末端羧基 荷arginine145侧链；
带正电
酪氨酸侧链结合到酶的非极性口袋中；
羧肽酶A
诱导变化
welc被om裂e解to的u肽se键th的es-eNHPo上w的er氢Po和inttytreomsipnleat2e4s8,芳N香ew侧链 Co上nt的en-tOdHes基ig形n,成10氢y键ea；rs experience
羧肽酶简介
根据反应底物分类
w羧el肽com酶e可to分us为e th4e类se：P有owAer、PoBin、t teCm及plaYte以s, N酶e原w
Content design, 10 years experience
形式存在于生物体内。 羧肽酶A：是水解由芳香族和中性脂肪族氨 基酸形成的羧基末端。
Co酸nt、ent羟de脯sig氨n,酸10、ye精ar氨s e酸xp和erie赖nc氨e 酸之外的所 有C末端氨基酸，更易于水解具有芳香族侧 链和大脂肪侧链的羧基端氨基酸。比如酪 氨酸，苯丙氨酸，丙氨酸等。 羧肽酶A （carboxypeptidase A）,CPA， 因其底物 的首位字“A”而得名羧肽酶A 。
考研药学综合(生物化学)历年真题试卷汇编5(题后含答案及解析)
考研药学综合（生物化学）历年真题试卷汇编5(题后含答案及解析)题型有：1. 判断题请判断下列各题正误。
2. 简答题 3. 名词解释题 4. 填空题5. 单项选择题 6. 多项选择题1．人体及哺乳动物能制造多种脂肪酸，但是不能向脂肪酸引入超过△9的双键。
( )A．正确B．错误正确答案：A解析：该考点主要考查大家对必需脂肪酸的概念，必需脂肪酸主要包括两种，一种是(1)一3系列的α一亚麻酸(18：3)，一种是ω一6系列的亚油酸(18：2)。
只要食物中α一亚麻酸供给充足，人体内就可用其合成所需的ω一3系列的脂肪酸，如EPA、DHA(深海鱼油的主要成分)。
也就是说α一亚麻酸是ω—3的前体。
ω—6系列的亚油酸亦同理。
知识模块：生物化学2．已知填鸭或猪的储存脂肪很丰富，而他们的饲料以糖为主，所以动物体内能将糖转化为脂肪的。
( )A．正确B．错误正确答案：A解析：填鸭和猪能将多余的糖类转化为脂肪。
知识模块：生物化学3．以干重计量，脂肪比糖完全氧化产生更多的能量。
( )A．正确B．错误正确答案：A解析：甘油三酯完全氧化为9．3kcal／g，糖或蛋白质为4．1kcal儋，则脂类产能约为糖或蛋白质的二倍。
知识模块：生物化学4．鸟氨酸循环的基本过程。
正确答案：过程：二氧化碳和氨在线粒体中经氨基甲酰磷酸合成酶Ⅰ催化下生成氨基甲酰磷酸，再与鸟氨酸缩合成瓜氨酸，瓜氨酸在胞液中与天冬氨酸经精氨酸代琥珀酸合成酶催化下生成精氨酸代琥珀酸，后者裂解为精氨酸和延胡索酸，而精氨酸进一步分解为尿素和鸟氨骏形成循环。
涉及知识点：生物化学5．尿素循环正确答案：肝脏是动物生成尿素的主要器官，由于精氨酸酶的作用使精氨酸水解为鸟氨酸及尿素。
精氨酸在释放了尿素后产生的乌氨酸，和氨甲酰磷酸反应产生瓜氨酸，瓜氨酸又和天冬氨酸反应生成精氨基琥珀酸，精氨基琥珀酸被酶裂解，产物为精氨酸及延胡索酸。
由于精氨酸水解在尿素生成后又重新反复生成，故称尿素循环。
涉及知识点：生物化学填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。
羧肽酶A
7. 与锌离子配位 的水在Glu270的 帮助下进行质子 转移，电离为金 属离子键合的羟 基
＋
靠近
2.底物的疏水残基 落入疏水口袋中
3.底物肽 键的羰基 与锌离子 配位
5.由于锌离子和 精氨酸正电荷的 作用，肽键羰基 被极化和伸长， 使羰基的碳原子 1.多肽链进入活性部位， Arg145的侧链移动与带 呈正电性 负电的羧基端生成盐键
催化机理
Tyr248的羟基给予被裂 开的肽键的-NH一个质 子
羟基亲核进 攻羰基碳原 子，肽键断 裂
由于谷氨酸羰基端负电荷的静电 斥力与产物羧基端负电荷的静电 斥力，产物被驱出活性部位。
锌离子的作用
• 被裂解的肽键的羰基指向锌离子，锌离子起吸电 子的作用，使C=O键比正常的更为极化，使羰基 C原子更易接受亲核进攻 • 锌离子处在非极性环境促进了诱导偶极子的产生， 增加了它的有效电荷 • Glu270的负电荷的逼近也对羰基上产生一个大 的偶极子做出了贡献。 • 从而羧肽酶A诱导底物上的电子应变以加速催化。
• 存在于哺乳动物的胰脏 • 存在于牛胰脏的羧肽酶A为单一的多肽链，约有300个 氨基酸残基，分子量为34.5kDa • 每个酶分子含有一个 • 其前体为以亚基双聚体或三聚体形式存在的羧肽酶原A。 在胰蛋白酶的激活下释放出大约60个氨基酸残基的N末端裂解物成为羧肽酶A。
羧肽酶A的活性中心
羧肽酶A的活性中心
羧肽酶A
应化1003班 杨杰 李开成 庄原 刘漫
氨肽酶
肽链端解酶
肽 酶
肽链内切酶
羧肽酶A：水解由芳香族和中性脂肪族氨基酸形 成的羧基末端。比如酪氨酸，苯丙氨 酸，丙氨酸等。 羧肽酶
羧肽酶B：主要水解碱性氨基酸形成的羧基末端
。。。
生化简答题及论述题
简答题及论述题1、请描述沃森和克里克在1953年提出的DNA双螺旋结构模型1、两条反平行链，右手螺旋；碱基在链内侧，戊糖磷酸在外侧，碱基垂直于螺旋轴，碱基与糖垂直。
10个核苷酸形成一个螺旋，螺距3.4nm。
碱基互补配对，一个A对应一个T，一个G对应一个C。
2、某些金属和非金属离子以及一些有机小分子对酶的结构和功能有何影响？2、（1）通过结合底物为反应定向。
（2）通过可逆地改变金属离子的氧化态调节氧化还原反应。
（3）通过静电效应稳定或屏蔽负电荷。
（4）作为辅酶或者辅基起到电子或原子的传递作用。
3、使酶活力降低或丧失的可能因素有哪些？3、（1）温度升高（2）酸碱变化（3）有机溶剂或重金属离子4、试比较酶的变性与失活有什么异同4、酶是由蛋白质组成的，所以具有蛋白质的性质。
即在高温、过强的酸、碱环境下会发生组成或是结构的改变，这就是变性。
由于组成或者结构改变，酶的功能也会受到破坏。
酶的变性往往是不可逆的。
当温度或者酸碱度达到一个程度时，酶的活性持续下降，当把条件恢复到初始状态时，酶活并没有恢复，这说明酶已失活。
但是酶的结构或组成没有发生改变。
在经过特殊处理后，酶活能够得到恢复。
5、试列举五种测定蛋白质分子量的方法5、渗透压法、化学组成法、沉降分析法、凝胶过滤法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法。
6、什么是蛋白质的二级结构？它主要有哪几种形式？6、蛋白质主链的折叠产生由氢键维系的有规则的构象，成为蛋白质的二级结构。
二级结构包括α螺旋、β折叠、β转角和β突起以及无规则卷曲。
7、什么是抗体？简述其结构特点（可用简图表示）7、机体是在抗原物质刺激下，由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。
抗体是具有4条多肽链的对称结构，其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链)；2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链)。
链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。
8、简述从蛋白质与氨基酸的混合物中分离和鉴定氨基酸的方法8、分配柱层析、纸层析、离子交换层析、薄层层析等，具体见书151到153页。
羧肽酶A的特性及应用
羧肽酶A的特性及应用羧肽酶A（Carboxypeptidase A）是一种具有羧基末端肽酶活性的酶。
它能够识别肽链的C-末端，将C-末端的氨基酸一个一个地从肽链上切割下来，使肽链逐渐缩短。
羧肽酶A在生物体内广泛存在，包括人体、动物体以及微生物体内。
它参与了多种生物学过程，例如：消化系统中的食物分解、蛋白质合成和代谢等。
另外，羧肽酶A还能被广泛应用于工业生产、医学诊断和药物研究等领域。
首先，羧肽酶A在消化系统中起着重要的作用。
它存在于人体胃液和胰液中，能够降解蛋白质和多肽，将多肽分解为短肽或氨基酸。
这个过程是消化系统中蛋白质消化和吸收的关键步骤。
羧肽酶A能够将肽链中的末端氨基酸一个一个地切割下来，使得其中的氨基酸可以被肠道细胞吸收并转运到其他组织中，供能或者合成其他生物分子使用。
因此，羧肽酶A对于人体正常消化和吸收是非常重要的。
其次，羧肽酶A在工业生产中应用广泛。
由于其特殊的肽链切割能力，它能够用来制备生物活性肽和药物。
例如，在生产抗生素的过程中，羧肽酶A可以用来切割蛋白质链中的特定肽段，得到具有生物活性的药物分子。
此外，羧肽酶A 还可以用于食品工业中，用于加工肉制品和奶制品等，改善其口感和质地。
通过使用羧肽酶A，可以使肉类中的蛋白质分解为更小的肽段，使得肉质更嫩滑，更易消化。
第三，羧肽酶A在医学诊断中具有重要的应用价值。
由于其对肽链末端的特异性切割能力，羧肽酶A可以用来分析和检测多肽和蛋白质的结构和功能。
例如，在蛋白质组学研究中，羧肽酶A可以用来鉴定复杂混合样品中的蛋白质，并确定其序列和修饰。
此外，羧肽酶A还可以用于药物代谢动力学研究，通过分析药物中残留的肽段，了解药物在体内的代谢途径和代谢产物，为药物的研发和治疗提供科学依据。
最后，羧肽酶A还可以应用于蛋白质工程和药物研究中。
通过对羧肽酶A的结构和功能的研究，可以设计和合成新型的酶活性位点和底物结合位点，从而创造具有特殊功能和活性的蛋白质。
此外，羧肽酶A还可以用来合成多肽药物和蛋白质药物的前体，为药物的研发和生产提供技术支持。
肥大细胞羧肽酶A研究进展
１ 羧 肽 酶 Ａ 的编 码 基 因 、 陈章权等㈣以人 的新 鲜包皮组织 为材料 ， Ｒ — Ｅ 用 Ｔ Ｐ Ｒ法成功地获 得了 ＨＭＣ ｃ — Ｐ的编码区基因 ， 基因全长为 １５ ｂ ， 中包含 ４ ｂ ２ １ｐ 其 ５ｐ的信 号肽编码 区，８ ｂ ２ ２ ｐ活化肽 编码区和 ９ ８ｐ的成熟 酶编码 区 ，共编码 ０ｂ ４ ７个氨基酸。在编码羧肽酶的基 因中， Ａ Ｇ开始的前 ４ １ 从 Ｔ ５个核苷酸 为信号肽编码区 ， ４ — ２ 第 ６ ３ ７个核苷酸为活化肽 编码 区 ， ３ ８ １５ 个 第 ２—２ １ 核 苷 酸 为 成 熟 酶 编 码 区 。 由于 对 ＨＭＣ Ｃ — Ｐ的研 究 报 道 不 多 ， ＨＭＣ Ｃ —Ｐ 编码 区基 因 的 获得 将 会 推 动 对此 酶 功 能 方 面 的研 究 。 ２ 羧 肽 酶 Ａ的 结构 、 羧肽酶 Ａ的分子量 约为 ３ ｋ 由 ３７个 氨基酸残基构成 ， ５ Ｄ， ０ 是依赖 ｚ “的金属外肽酶。羧肽酶 Ａ外形 紧密 ， ｎ 是一个 ５０ ｍ× ． ｍ×３８ ｍ ．ｎ ４２ ｎ ． ｎ 的椭圆形球体 ，大约含有 ３ ％ｃ螺旋 ，７ ３ ８ ￣ １％１折叠片 ，ｎ 与 Ｇｕ 的 一 ｚ Ｉ 羧基位于活性中心 ， 还有 Ａｒ１ 和 Ｃ端氨基酸侧链的疏水性 口袋 。ｚ 。 ｇ５ ４ ｎ 对酶的活性很重要 ，同 Ｈｓ，ｉ ｉ９ ｓ ６Ｈ 和 Ｇｕ ｌ 的两个羧基氧原子配位， ｎ ｚ
羧肽酶a和b处理什么氨基酸
羧肽酶a和b处理什么氨基酸
羧肽酶是催化水解多肽链含羧基末端氨基酸的酶。
酶活性与锌有关。
羧肽酶A：是水解有芳香族和中性脂肪族氨基酸形成的羧基末端。
比如酪氨酸，苯丙氨酸，丙氨酸等
羧肽酶B：主要水解碱性氨基酸形成的羧基末端。
羧肽酶A可以切割C端除了Lys、Arg、Pro的氨基酸
羧肽酶B可以切割C端的Lys或Arg
但如果倒数第二个氨基酸为Pro两种羧肽酶均不能作用
羧肽酶是一种消化酶。
可专一性地从肽链的C端开始逐个降解，释放出游离氨基酸的一类肽链外切酶。
以酶原形式存在于生物体内。
常用的有A、B、C及Y ，4种羧肽酶。
羧肽酶A能水解蛋白质和多肽底物C端芳香族或中性脂肪族氨基酸残基，释放除脯氨酸、羟脯氨酸、精氨酸和赖氨酸之外的所有C末端氨基酸，更易于水解具有芳香族侧链和大脂肪侧链的羧基端氨基酸。
比如酪
氨酸，苯丙氨酸，丙氨酸等。
羧肽酶A （carboxypeptidase A）,CPA，因其底物的首位字“A”而得名羧肽酶A 。
羧肽酶A的活性部位：精氨酸残基金属Zn 酪氨酸残基
精氨酸残基含有一个胍基，胍基是一种非常好阴离子络合点。
可在非常宽的PH范围内（pKa=13.5）都可以保持其质子化形式，并能与阴离子羧基、磷酸根、硫酸根等参与形成双氢键。
羧肽酶A 终极版
分子量约为 34397D，由307 个氨基酸残基构 成一条肽链。 ρ =1.339/cm3， pI=6.0。
5
羧肽酶A（Carboxypeptidase A） 一级结构
2015-6-21
羧肽酶A（Carboxypeptidase A） 二级结构以及跟高级结构 （软件示意）
九个α-螺旋，占蛋白质结构35.83%； 呈现筒形包含在蛋白质外侧，且在螺旋中每相隔 1-2个氨基酸残基便出现一个赖氨酸或者是其他 的亲水性氨基酸；
羧肽酶A（Carboxypeptidase A）
16
Zn能否被同晶置换？
实验表明：Zn2+能够被Co2+、Fe2+置换而保持酶的活性。 被Co2+置换时，酶的活性得到进一步增强；被Mn2+、Cd2+ 置换时，酶的活性下降。Ni2+、Pb2+、Hg2+置换时仅仅保 持部分活性。 没有金属辅基的脱辅酶无活性。
九个β-折叠，占蛋白质结构14.66%，位于蛋白质 的内部；
一个二硫键，是半胱氨酸138和161位键合而成。
7
①更易于水解具有芳香族侧链和大脂肪侧
链的羧基端残基。比如酪氨酸、苯丙氨 酸等. ②释放除脯氨酸、羟脯氨酸、精氨酸和 赖氨酸之外的所有C末端氨基酸.
羧肽酶A（Carboxypeptidas一种消化酶。可专一性地从肽链 的C端开始逐个降解，释放出游离氨基酸的 一类肽链外切酶。以酶原形式存在于生物 体内。
羧肽酶
羧肽酶A ：切割C 端除Lys 、Arg、 Pro的氨 基酸
羧肽酶B ：可以 切割C端 的Lys或 Arg
羧肽酶C ：专门 水解C端 倒数第 二位是 Pro形成 的肽键
9
Zn2+与His196 ，Glu72和 His69结合。 还有一个留 给了水分子 或者羟基阴 离子。
山西大学生物化学历年考研真题
山西大学硕士争辩生入学考试试题科目：生物化学1997 年试题一.是非题〔20 分〕1.胰岛素的 A、B 两条肽链是通过链间两条二硫键连接而成.2.蛋白质多肽分子中,连接氨基酸残基的共价键只有肽键.3.利用氨基酸,可将酸分解某一蛋白质的氨基酸组成全部测出.4.维持蛋白质高级构造稳定性的疏水作用力主要是由于疏水集团间的相互作用导致ΔS 降低.5.K m 为2×10^-3mol/L 的A 酶比Km 为2×10^-5 的B 酶催化反响速度慢.6.双关酶和双功能酶都能催化一个以上的化学反响.7.有两种核酸酶制剂,A 的A260/A280=2.0,B 的A260/A280=1.0,所以 A 比B 纯度高.8.蛋白质中的β转角也是由 3.6 个氨基酸残基组成.9.h nRNA 是蛋白质基因表达的初级产物.10.生物体内全部编码蛋白质的基因都可依据其核甘酸序列推导出蛋白质中氨基酸序列.11.能以 mRNA 拷贝的酶是 DNA 聚合酶.12.糖原的分解与合成主要靠肾上腺素的调整.13.当脂肪组织发动时,产生的大量游离脂肪酸可间接抑制三羧酸循环和脂肪酸的生物合成.14.酪氨酸代谢中,缺乏尿黑酸氧化酶可引起白化病,苯丙氨酸代谢障碍在儿童时期可引起智力迟钝.15.排尿素动物在肝脏切除后,就不再有尿素排出.16.生物体内 mRNA 链上的起始密码子都是 AUG.17.原核生物 DNA 转录中,不同启动子需要不同的σ因子.18.真核生物第一个基因家族的全部成员都位于同一染色体上.19.氨基酰-tRNA合成酶存在于细胞质中.20.染色体中的 DNA 主要是以组蛋白结合成复合体的形式存在,并形成串珠核小体构造.二.选择题(14 分)1.蛋白质变性是由于( )A.一级构造的转变B.空间构造的转变C.辅基的脱落D.亚基的解聚2.常用于测量多肽链氨基末端的试剂为( )BrB.6 N HClC.丹磺酰氯DNSD.胰蛋白酶3.胰核糖核酸酶水解RNA 得到的产物为( )A.3’-核苷酸B.5’-核苷酸C.3’-核苷酸与寡核苷酸D.仅有寡核苷酸4.不以酶原形式分泌的酶是( )A.核糖核酸酶B.胰蛋白酶C.羧基肽酶D.胃蛋白酶5.催产素和加压素的构造稳定性取决于分子中的( )A.肽键B.氢键C.疏水作用D.二硫键6.在适合条件下,核酸分子两条链牢靠以下哪种作用相互杂交形成双螺旋( ).A.序列的重复B.碱基序列的互补C.不同的熔点D.化学修饰7.与双链DNA 分子结合产生猛烈荧光的物质是( ).A.丹磺酰氯B.溴酚蓝C.溴化乙锭D.茚三酮8.细胞色素氧化酶的抑制剂是( ).A.氰化钾B.抗霉素AC.安密妥D.鱼藤酮9.在多糖和寡糖的生物合成中,葡萄糖的活性形式是( ).A.G-1-PB.G-6-PC.尿苷二磷酸GD.3-甲基G10.脂肪酸合成中,参与链延长的物质是( ).A.乙酰辅酶AB.草酰乙酸C.甲硫氨酸D.丙二酸单酰辅酶A11.血糖浓度较低时,脑仍靠摄取葡萄糖,而肝脏则不能,由于( ).A.G 激酶的Km 低B.己糖激酶的Km 低C.胰岛素的作用D.G 激酶的特异性12.D NA 复制需要以下酶参与:①DNA聚合酶Ⅲ②解链蛋白③DNA聚合酶Ⅰ④DNA 指导的RNA 聚合酶⑤DNA连接酶,它们的作用挨次为( ).A.④③①②⑤B.④②①⑤③C.②④①③⑤D.②③④①⑤13.假设翻译时可以从任一核苷酸起始读码,人工合成的(AAC)n(n为整数)多聚核苷酸,能翻译出几种多聚氨基酸( ).A.一种B.二种C.三种D.四种14.真核生物RNA 转录的场所是( ).A.细胞质B.内质网C.核糖体D.细胞核仁三.填空题(36 分)1.羧肽酶A 不能水解蛋白质或多肽分子C-末端的、和.2.C ech 和 Altman 因觉察核酶而获得年诺贝尔化学奖.3.有一个含100 个氨基酸的多肽链,其中α-螺旋占60%,剩余局部全为伸展状态, 该肽的长度为.4.与大多数蛋白质相比,胶原中和氨基酸含量最高.5.很多酶在体外发挥作用需要金属离子关心,如羧肽酶需Zn2+,酶需Mg2+.6.别构酶的活性中心负责酶对底物的和催化,别构中心则负责调整酶的反响速度.7.核酸的变性是指核酸的,并不涉及的断裂.8.限制性内切酶是分析DNA 的解剖刀,也是DNA技术的重要工具.9.人的皮肤含有,经过紫外线激活后转化为维生素,维生素 E 的化学名称为,它与试验动物的生育有关.10.肾上腺素是第一个在分子水平上已经了解其作用机理的激素 ,通过作用不仅使血糖,也使脂肪组织形成.11.糖类物质氧化分解时所产生的二氧化碳和所消耗的是相等的,所以糖的呼吸商为.12.猛烈运动时,酵解作用是重要的产能方式,而积存在肌肉中的可由血液运至肝中生成.13.酮体是肝中氧化时的正常中间代谢物,是肌肉尤其是组织的重要能源.14.乙酰CoA 是体内合成脂肪酸的原料,但在合成过程中直接参与合成的仅有分子,其它均需羧化生成之后才参与合成.15.大肠杆菌DNA 聚合酶Ⅰ除具有3’→5’核酸外切酶活性外,还兼有酶的作用,3’→5’核酸外切酶起着功能.16.蛋白质生物合成中,除了形成肽键外,每个主要步骤都与水解为和无机磷有关.17.阻遏作用是指小分子物质与结合后形成的复合物对转录的抑制,结果使蛋白质和酶的合成也受到抑制.四.问答题(30 分)1.乳酸脱氢酶和醇脱氢酶均以 NAD+为辅酶,肌肉组织中含丰富的乳酸脱氢酶,肝脏中含丰富的醇脱氢酶,分析以系中反响能否进展,并解释.(1)乳酸+透析后的肌肉匀浆→(2)乳酸+煮沸的肝匀浆→2.蛋白质化学争辩中常用的试剂有以下一些:尿素、β-巯基乙醇、异硫氢酸苯酯、2,4-二硝基氟笨、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶等,请选用最适宜的一种试剂完成以下试验,并解释缘由.(1)一个小肽氨基酸挨次的测定(2)一个没有二硫键的蛋白质的可逆变性(3)碱性氨基酸残基的羧基一侧肽链的水解.3.什么是解链温度?影响核苷酸分子Tm值大小的因素是什么?试解释4.什么是酶 RNA?有何生物学意义?5.解释生物进化过程中,为何不直接将己酸氧化生成二氧化碳 ?而要选择三羧酸循环(至少提两种缘由).6.解释 SDS- 分别蛋白质的作用原理及使用范围.1998 年试题一.是非题1.蛋白质磷酸化和去磷酸化是互为逆反响,该可逆反响有同一种酶催化.2.全部别构酶都是寡聚酶.3.在酶的催化反响中,要使[S]>>[E],[S]必需相当于20Km.4.H is 构造上的咪唑基可以在 PH6.5 解离,是由于基上的氢原子具有推动作用.5.变性剂、脲胍等物质可以破坏蛋白质的氢键、疏水键、范德华力等,从而导致构造分散.6.胰岛素在体内是先分别合成A、B两链,再通过二硫键连接起完整分子.7.Z-DNA 分子是一种左手螺旋构造,每圈螺旋约含 12 个 bp.8.具有对底物切割功能的都是蛋白质.9.某蛋白质在大于 PI 的 PH 中电泳向阳极移,小于时向阴极移.10.DNA 连接酶能将两条游离的 DNA 单链连接起来.11.脯氨酸不能参与α-螺旋的形成,它可以使α-螺旋转变,在肌红蛋白和血红蛋白的多肽链中,每个转弯并不肯定有脯氨酸,但是每个脯氨酸处都有一个转弯.12.全部来自 HMP 途径的复原力都是在循环的前三步反响中产生的.13.生物体内全部编码蛋白质的基因都可依据其核苷酸序列推导出蛋白质中的氨基酸序列.14.将凝胶上的 RNA 转移到硝酸纤维素膜上的技术叫 Southern 印迹.15.DNA 复制时,前导链可以是连续合成,也可以是不连续合成,而后随链总是不连续合成的.16.核糖体是细胞内蛋白质合成的部位.17.真核细胞内的 DNA 聚合酶一般都不具有核酸外切酶活性.18.信息大分子 DNA 的合成与生物小分子不同,除需底物、能量、酶外,还需要模板.19.无论在体内还是在体外,RNA 聚合酶都能使 DNA 的两链同时进展转录.20.假设在线粒体内的 ADP 浓度较低时参加解偶联剂,将减慢电子传递的速度.二.选择题1.胰蛋白酶专一水解蛋白质中的肽链部位是( )A.碱性残基N 端B.酸性残基N 端C.碱性残基C 端D.酸性残基C 端2.RNA 经 NaOH 水解后,其产物是( )A.5’-核苷酸B.2’-核苷酸C.3’-核苷酸D.2’和3’核苷酸混合物3.以下四种DNA 分子的分子量一样,电泳时谁跑得快?( )A.线性DNAB.双链开环状DNAC.闭环超螺旋DNAD.无规卷曲DNA4.热变性DNA 的特征是( )A.形成三股螺旋B.G-C 对的含量直接影响Tm 值C.260nm 处光吸取下降、粘度下降5.线粒体基质中脂酰辅酶A 脱氢酶的辅酶是( )A.NAD+B.FADC.NADP+D.GSSG(氧化型谷胱甘肽)6.细胞色素氧化酶的抑制剂是( )A.安密妥B.抗霉素AC.氰化钾D.鱼藤酮7.血氨上升的缘由是( )A.食入蛋白质过高B.肝的功能障碍C.肾功能障碍D.以上都不是8.丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制效应是( )A.Vmax 不变Km 上升B.Vmax 不 Km 下降C.Vmax 变小Km 不变D.Vmax 和Km 都变小9.E.coli 在乳酸作为唯一细胞源的培育基上生长,基因型是 1.2.9,然后参加 G 会发生( )A.无变化c RNA 不再合成C.E.coli 不再利用lacD.阻碍蛋白质与操纵基因结合10.对一个克隆的DNA 纯度作物理图谱分析需要用( )A.核酸外切酶B.DNA 聚合酶ⅠC.DNA 连接酶D.限制性内切酶三.填空题1.首次测定一级构造的蛋白质是,含个氨基酸,为完成的.2.R tbozyme 的理论试验是和完成的,因此获诺贝尔奖.3.构造域是蛋白质三级折叠中的一个层次,与三级构造相比,它仅仅是实体,最常见的构造域约含个氨基酸残基.4.血红蛋白是聚体,与肌红蛋白相比,其功能除运输外,还能运输和5.有机溶剂引起蛋白质沉淀的主要缘由是和脱去水化层.6.酶的可逆抑制中最主要的是,其抑制可逆过程7.温度上升使DNA 变性时,称为,其变性特点是, 常用Tm 表示.8.限制性内切酶的生物学功能在于降解,而不是降解,主要缘由是.9.当肝细胞内供给充分时,酵解途径中限速酶被抑制,从而使作用增加.10.真核基因表达调控的一个主要环节是将断裂基因的转录产物通过拼接 ,去除和成为连续序列.11.在 PH=0.3 时,用离子交换树脂分别氨基酸,与树脂结合最结实的是,因此最先洗脱下来的是.12.用 PCR 扩增 DNA 片段,在反响中除了 DNA 作为模板外,还需假入、和.13.不同代谢途径通过穿插关系代谢中间物进展转化.在糖、脂、蛋白质和核酸的相互转化过程中,三个最关键的代谢中间物是、、14.E.coli 的染色体DNA 有bp,分子量为D,DNA 分子松散时长度约为.15.真核细胞中mRNA 前体加工成熟时,一般需、、主要步骤.四.问答.1.以抑制剂队对酶促反响的影响,解释有机磷酸农药中毒和解毒的反响.2.运用糖代谢有关学问,解释下面试验结果.(1)把C4 标记的丙酮酸加到肝脏可溶性抽提物中,经 C4 均匀标记三软脂酰甘油.(2)当把柠檬酸加到上述抽取物中时,能加速软脂酸的合成.3.简述 DNA 的半保存不连续复制过程及相关的酶的作用.4.从激素的作用原理,简述糖尿病的发病机理.5.假设在 PH2.0、6.5、10.0 三种不同条件下进展电泳,试分析以下四肽的泳动方向.(1)Lys-Gly-Ala-Gly (2)Lys-Gly-Ala-Glu(3)His-Gly-Ala-Glu (4)Arg-Lys-Ala-Glu1999 年试题一.是非题(20 分)1.Edman 降解能顺着多肽链的的氨基端将残基一个一个地脱下来.2.溴化氰只在甲硫氨酸残基的羧基端水解多肽链.3.蛋白质分子的亚基也称构造域.4.肌红蛋白和血红蛋白亚基在一级构造上有明显的同源性 ,它们的构象和功能格外相像,所以它们的氧结合曲线也是相像的.5.黄嘌呤氧化酶的底物是黄嘌呤,也可以是次黄嘌呤.6.核糖体是体内进展蛋白质合成的部位.7.DNA 分子中的两条链在体内都可能转录成 RNA.8.酶促反响中,低物类似物的抑制作用和过量底物抑制作用的机理根本上是全都的.9.变构酶并不遵循米氏方程式.10.氧化作用和磷酸化作用是由质子梯度偶联起来的.11.糖异生作用并非糖酵解作用的逆转.12.羧肽酶 A 是一个含锌的蛋白水解酶.13.核酸的两个不同制剂A 和B,A 的A260/A280 比B 的A260/A280 大,因此可推断制剂 A 的纯度比制剂 B 的纯度高.14.A TP 是磷酸果糖激酶的底物,因此高浓度的 ATP 可以加快磷酸果糖激酶催化F-6-P 生成F-1,6-2P.15.当DNA 样品枯燥时,其长度会缩短.16.当【S】<<Km时,酶促反响的速度取决于该反响体系中的底物浓度.17.全部生物染色体 DNA 的复制都是在一个起点上开头的.18.与DNA 复制不同,RNA 转录的起始可以随机地在 DNA 模板上进展.19.Ribozyme 是一类核酸性酶的统称.20.某些病毒的基因是由 RNA 组成的.二.填空(30 分)1.蛋白质中的20 种氨基酸,除外,在生理PH 下都没有明显的缓冲容量,由于这些氨基酸的PK 值都不在PH四周.2.镰刀状细胞贫血病是由于正常血红蛋白的β6位上的被替代而引起的分子病.3.蛋白质中的二硫键可被试剂所复原,用可避开反响体系中的二硫键生成.4.酶的活性中心基团可分为和,前者打算酶的,后者打算酶的.5.一个酶活力国际单位定义为,在酶学争辩及生产中通常用来比较每单位重量酶蛋白的催化力量时可承受表示.6.用PCR 方法扩增DNA 片段,在反响中除了用该DNA 片段作为模板外,还需要参加、和.7.核酸变性后的理化性质主要有和的变化.8.生物体内一些维生素可以作为辅酶,如苹果酸脱氢酶的辅酶为,转氨酶的辅酶为.9.电子传递呼吸链在原核细胞中存在于上,在真核细胞中存在于的内膜上.10.糖酵解与糖异生的把握点是的转化,糖酵解和糖异生作用中有个点可能产生无效循环.11.G ln是中性物质,简洁通过细胞膜,是体内的主要运输形式.12.基因组能独立进展复制的单位称为,复制的方向大多是的.13.蛋白质的生物合成中,tRNA在识别密码子时的接头作用主要是指和.三.选择题(15 分)1.一个tRNA 分子上的反密码子是UGA,可识别以下哪个密码子?( )A.ACUB.CUAC.UCAD.UAC2.假尿苷中的糖苷键是( ),A.N-N 键B.C-O 键C.C-C 键D.N-C 键3.以下单股DNA 片段中哪一种在双链状态下可形成回文构造?( )A.ATGCCGTAB.GTCATGACC.GCTATGACD.GTATCTAT4.以下因素中哪项不能加快酶促反响速度( )A.底物存在于酶的外表B.底物的化学键有适当的方向C.供给酸性和碱性侧链作为质子的受体和供体D.利用肽键的能量降低反响的活化能5.唾液淀粉酶经透析后,水解淀粉的力量明显下降,其缘由是( ) A.酶蛋白变性 B.失去了辅酶 C.失去了 Cl- D.酶含量显著削减6.以下哪一种肽链不能形成α-螺旋( )A.-Ala-Phe-Asn-Met-Val-Gln-B.-Asn-Pro-Ala-Met-Tyr-GlnC.-Tyr-Trp-Val-Glu-Ala-Asn-D.-Lys-Ser-Phe-Ala-Gln-Asn-7.向卵清蛋白溶液中参加适当浓度的 NaOH 使溶液呈碱性,加热至沸腾后马上冷却,此时( )A.蛋白变性,但不沉淀B.蛋白变性沉出C.蛋白变性,冷却又恢复D.蛋白质水解为混合氨基酸8.有一样品,由两种蛋白质组成,其等电点分别为4.9 和6.8,在以下哪种PH 条件下电泳,分别效果会最好( )A.PH4.5B.PH5.9C.PH6.5D.PH8.69.胰岛素对物质代谢有广泛的调整作用,在生理浓度下,它不能引起以下哪一种作用增加( )A.G 通过细胞膜B.G 氧化C.脂肪合成D.糖异生10.1mol/L 琥珀酸脱氢生成延胡索酸,脱下的氢通过呼吸链传递,在KCN 存在时, 可生成多少个ATP 及H2O( )A.一个ATP 和一个H2OB.一个ATP 和两个H2OC.两个ATP 和一个H2OD.两个ATP 和两个H2O11.血糖浓度低时闹仍可摄取G,肝脏则不能,缘由是( )A.胰岛素的作用B.血糖屏障在血糖低时不起作用C.G 激酶的Km 低D.己糖激酶的Km 低12.脂肪酸在肝脏中进展β-氧化不能生成以下哪一种化合物( )A.H2OB.NADHC.脂酰 CoAD.乙酰 CoA13.大肠杆菌在乳糖为唯一碳源的培育基中生长,基因型为i z y,然后参加G, 会发生以下哪种状况( )A.没有变化B.细胞不再利用乳糖c mRNA 不再合成D.阻隔蛋白与操纵基因结合14.逆转录酶是一种( )A.DNA 指导的 DNA 聚合酶B.DNA 指导的 RNA 聚合酶C.RNA 指导的 DNA 聚合酶D.RNA 指导的 RNA 聚合酶15.与大多数蛋白质相比,胶原中哪种蛋白质含量较高( )A.HisB.ArgC.LysD.Phe四.问答题(35 分)1.指出承受不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳分别蛋白质时,以下各物质的作用分别是什么?(1)T EMED (2)过硫酸铵(3)40%蔗糖2.解释酶促反响体系中增加酶浓度时,为什么 1/[S]对 1/[V]作图所得直线的斜率会减小?3.说明 DNA 的 Tm 值主要受哪些因素的影响?为什么?4.指出以下多肽或核苷酸用所给方法处理后得到的产物,说明理由.(1)Pro-Phe-Arg-Ala 胰蛋白酶(2)T yr-Gly-Val-Lys 羧肽酶 A(3)p ApCpUpGpA-OH RNaseA5.在甘油、乙酰 CoA、乳酸和丙酮酸中何者既是 G 的分解产物,又是异生为 G 的原料?简述其转变过程.6.解释在绝大多数蛋白质的氨基酸组成中,为什么Met 和Trp 的含量较少?Cys 和His 次之,Leu 和Ser 的含量较多?2023 年试题一．是非题1.用 SDS- 法通常可以测定自然蛋白质的分子量。
生物中科院研究生考试试题汇编
中科院研究生考试试题汇编第一部分氨基酸肽蛋白质一是非题(112题)1 自然界的多肽类物质均由L-构型的氨基酸组成，完全没有例外。
(X )2 某一生物样品，与茚三酮反应呈阳性，用羧肽酶A和B作用后测不出游离氨基酸，用胰凝乳蛋白酶作用后也不失活，因此可肯定它绝非肽类物质。
( X )[羧肽酶A：是水解由芳香族和中性脂肪族氨基酸形成的羧基末端。
比如酪氨酸，苯丙氨酸，丙氨酸等羧肽酶B：主要水解碱性氨基酸形成的羧基末端。
胰凝乳蛋白酶（也叫糜蛋白酶。
）在酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸（都是芳香族氨基酸）的羧基处切断肽键，从而裂解蛋白质。
胰蛋白酶选择地水解蛋白质中所有的由赖氨酸Lys或精氨酸Arg的羧基所构成的肽键。
]3 有四个二硫键的胰脏核糖核酸酶，若用巯基乙醇和尿素使其还原和变性，由于化学键遭到破坏和高级结构松散，已经无法恢复其原有功能。
(X )4 多肽合成中往往以苄氧羰基(C6H5CH2-O-CO-)保护氨基，并可用三氟乙酸轻易的将它去除，羰基可转变成叔丁酯，并用碱皂化去除。
(√)5 细胞核内的组蛋白对阻遏基因的表达起重要作用，所以需要种类繁多的组蛋白与这些基因结合。
(√？？)6胶原蛋白中有重复的疏水性氨基酸序列出现，所以形成大面积的疏水区，相互作用使三股肽链稳定及整齐排列。
（X）7多肽类激素作为信使分子，需便于运转，所以都是小分子。
由于分子小，轻易通过靶细胞膜，可以深入内部，启动生化作用。
（X）8球状蛋白分子含有极性基团是氨基酸残基在起内部，所以能容于水。
片层结构只能存在于纤维状蛋白中，如丝心蛋白，所以不容于水。
（X）9胰岛素的生物合成途径是先分别产生A、B两条肽链，然后通过－S－桥键相连。
（X）10 血红蛋白与肌红蛋白结构相似，均含有一条肽链的铁卟啉结合蛋白，所以功能上都有与氧结合的能力，血红蛋白与氧的亲和力较肌红蛋白更强。
（X ）11 合成的多聚谷氨酸在pH7时，其r -羧基电离为－COO-，由于静电相斥，分子较松散，在pH4时并不电离，容易形成螺旋结构。
LT-3 蛋白质化学 生物化学习题汇编
目录第三章蛋白质化学 (2)一、填充题 (2)二、是非题 (6)三、选择题 (8)四、问答题 (16)五、计算题 (24)第三章蛋白质化学一、填充题1、氨基酸的结构通式为( )。
2、组成蛋白质分子的碱性氨基酸有( )、( )和( )。
酸性氨基酸有( )和( )。
3、在下列空格中填入合适的氨基酸名称。
(1)( )是带芳香族侧链的极性氨基酸。
(2)( )和( )是带芳香族侧链的非极性氨基酸。
(3)( )是含硫的极性氨基酸。
(4)( )或( )是相对分子质量小且不含硫的氨基酸，在一个肽链折叠的蛋白质中它能形成内部氢键。
(5)在一些酶的活性中心中起重要作用并含羟基的极性较小的氨基酸是( )。
4、Henderson-Hasselbalch方程为( )。
5、氨基酸的等电点(p I)是指( )。
6、氨基酸在等电点时，主要以( )离子形式存在，在pH >pI的溶液中，大部分以( )离子形式存在，在pH ＜pI的溶液中，大部分以( )离子形式存在。
7、在生理条件下( pH 7.0 左右)，蛋白质分子中的( )侧链和( )侧链几乎完全带正电荷，但是( )侧链则带部分正电荷。
8、脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生( )色的物质，而其他氨基酸与茚三酮反应产生( )色的物质。
9、范斯莱克(Van Slyke)法测定氨基氮主要利用( )与( )作用生成( )。
10、实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后用碱(NaOH)来滴定( )上放出的( )。
11、通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的( )、( )和( )三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。
12、寡肽通常是指由( )个到( )个氨基酸组成的肽。
13、肽链的形式有( )、( )和( )三种，其中以( )最常见。
14、在一些天然肽中含有( )、( )和( )等特殊结构。
这些结构在蛋白质中是不存在的。
很可能这些结构上的变化可使这些肽免受蛋白水解酶的作用。