唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文
淀粉活性测定实验报告

一、实验目的1. 掌握淀粉酶活性的测定原理和方法。
2. 了解不同条件对淀粉酶活性的影响。
3. 学会使用比色法测定淀粉酶活性。
二、实验原理淀粉酶是一种水解淀粉的酶,可以将淀粉分解成葡萄糖、麦芽糖等小分子糖类。
在实验中,淀粉酶将淀粉水解成还原糖,还原糖与3,5-二硝基水杨酸(DNS)反应生成红色复合物。
通过测定该复合物的吸光度,可以计算出淀粉酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 材料:淀粉酶、淀粉、DNS试剂、硫酸铜、无水碳酸钠、盐酸、氢氧化钠、蒸馏水、待测样品(如唾液、植物组织等)。
2. 仪器:恒温水浴锅、移液器、容量瓶、试管、试管架、吸管、比色计、电子天平。
四、实验步骤1. 准备DNS试剂:称取DNS试剂0.1g,加入50ml蒸馏水溶解,再加入0.5g硫酸铜和0.5g无水碳酸钠,搅拌均匀。
2. 标准曲线制作:准确配制一系列浓度的麦芽糖标准溶液(如0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.6mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml),各取2ml加入试管中,加入2ml DNS试剂,沸水浴10分钟,取出冷却,用分光光度计在波长540nm处测定吸光度,以麦芽糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
3. 待测样品处理:准确称取一定量的待测样品,加入适量的蒸馏水,搅拌均匀,离心取上清液。
4. 测定淀粉酶活性:取2ml待测样品和2ml淀粉溶液(浓度根据实际情况调整)加入试管中,置于恒温水浴锅中,保持一定温度(如37℃)反应一定时间(如30分钟),取出后立即加入2ml DNS试剂,沸水浴10分钟,取出冷却,用分光光度计在波长540nm处测定吸光度。
5. 计算淀粉酶活性:根据标准曲线,计算出待测样品中还原糖的浓度,再根据反应时间、温度、待测样品浓度等参数,计算淀粉酶活性。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制:以麦芽糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线,计算相关系数,验证标准曲线的线性关系。
酶学实验实验报告唾液

一、实验目的1. 了解唾液淀粉酶的生物学特性及其在消化过程中的作用。
2. 掌握酶活性测定的基本原理和方法。
3. 通过实验观察和分析唾液淀粉酶活性受温度、pH值等因素的影响。
二、实验原理唾液淀粉酶是一种消化酶,主要存在于唾液中,负责将食物中的淀粉分解为麦芽糖,为后续消化提供能量。
酶活性是指酶催化反应的能力,受多种因素的影响,如温度、pH值、底物浓度等。
本实验通过测定不同条件下唾液淀粉酶对淀粉的分解速率,观察酶活性变化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 新鲜唾液- 淀粉溶液- 碘液- pH试纸- 温度计- 烧杯- 试管- 移液器2. 实验仪器:- 恒温水浴箱- 酶标仪- 移液器四、实验步骤1. 唾液淀粉酶活性测定:(1)取两只试管,分别加入2mL淀粉溶液。
(2)用移液器取1mL唾液,加入第一只试管中,混匀。
(3)将第一只试管放入37℃恒温水浴箱中,观察淀粉分解情况。
(4)每隔5分钟,用移液器取1mL反应液,加入碘液中,观察颜色变化。
(5)记录淀粉分解所需时间。
2. 温度对唾液淀粉酶活性的影响:(1)设置不同温度(如25℃、37℃、50℃、65℃)的水浴箱。
(2)重复步骤1,观察不同温度下淀粉分解所需时间。
3. pH值对唾液淀粉酶活性的影响:(1)用pH试纸测定唾液的pH值。
(2)调整唾液的pH值至不同水平(如4、5、6、7、8、9)。
(3)重复步骤1,观察不同pH值下淀粉分解所需时间。
五、实验结果与分析1. 唾液淀粉酶活性测定:在37℃恒温水浴箱中,淀粉分解所需时间为10分钟。
2. 温度对唾液淀粉酶活性的影响:随着温度升高,淀粉分解所需时间逐渐缩短,说明唾液淀粉酶活性随温度升高而增强。
在50℃时,淀粉分解所需时间最短,说明50℃为唾液淀粉酶的最适温度。
3. pH值对唾液淀粉酶活性的影响:随着pH值升高,淀粉分解所需时间逐渐缩短,说明唾液淀粉酶活性随pH值升高而增强。
在pH值为7时,淀粉分解所需时间最短,说明pH值为7为唾液淀粉酶的最适pH值。
口腔唾液测定实验报告

一、实验目的1. 了解口腔唾液的基本特性。
2. 掌握唾液淀粉酶活性的测定方法。
3. 分析影响唾液淀粉酶活性的因素。
二、实验原理唾液是一种无色、无味、无臭的黏稠液体,主要由水分、电解质、有机物和酶等组成。
其中,唾液淀粉酶是一种消化酶,主要参与食物的消化过程。
本实验通过测定唾液淀粉酶活性,了解唾液的基本特性,并分析影响唾液淀粉酶活性的因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:唾液样本、淀粉溶液、碘液、酚酞指示剂等。
2. 实验仪器:恒温水浴锅、移液器、试管、烧杯、滴定管等。
四、实验方法1. 唾液样本的采集:请实验参与者吐出唾液,收集于无菌试管中,充分混合后备用。
2. 唾液淀粉酶活性的测定:(1)取一定量的唾液样本,加入适量的淀粉溶液,充分混合。
(2)将混合液置于37℃恒温水浴锅中,定时取样。
(3)用碘液滴定剩余的淀粉,直至溶液呈现蓝色。
(4)根据消耗的碘液量,计算唾液淀粉酶活性。
3. 影响唾液淀粉酶活性的因素分析:(1)pH值对唾液淀粉酶活性的影响:设置不同pH值的缓冲液,测定唾液淀粉酶活性。
(2)温度对唾液淀粉酶活性的影响:设置不同温度的恒温水浴锅,测定唾液淀粉酶活性。
(3)激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响:加入适量的激活剂或抑制剂,测定唾液淀粉酶活性。
五、实验结果与分析1. 唾液淀粉酶活性测定结果:(1)实验参与者A:唾液淀粉酶活性为X U/ml。
(2)实验参与者B:唾液淀粉酶活性为Y U/ml。
2. 影响唾液淀粉酶活性的因素分析结果:(1)pH值对唾液淀粉酶活性的影响:在pH值为X时,唾液淀粉酶活性最高。
(2)温度对唾液淀粉酶活性的影响:在37℃时,唾液淀粉酶活性最高。
(3)激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响:加入激活剂后,唾液淀粉酶活性明显提高;加入抑制剂后,唾液淀粉酶活性明显降低。
六、实验结论1. 唾液淀粉酶是唾液中的重要成分,参与食物的消化过程。
2. pH值、温度、激活剂与抑制剂等因素对唾液淀粉酶活性有显著影响。
实验二、唾液淀粉酶活性观察

暗褐色
红棕色
黄色(碘本身颜色)
【试剂与器材】 1. 0.5%淀粉溶液 2. 碘液 3. 不同pH值溶液,蒸馏水 4. 1%的CuSO4溶液 5. 0.9%NaCl溶液 6. 比色板,恒温水浴箱。。。
PH值对酶活性的影响
• ①号试管放置pH为3.8的缓冲溶液,②号试管放置pH为6.8 的缓冲溶液,③号试管放置pH为8.0的缓冲溶液。 • 37℃水浴中保温5min • 每隔一分钟,从②号试管中取出一滴溶液放置白瓷板上, 用碘液检查淀粉水解程度,待溶液不再变色时,从水浴中 取出所有试管
动物生物化学实验报告
唾液淀粉酶的活性观察 班级:动科1143 姓名:李胜浩 学号:201411331312 ——
【实验目的】 1. 了解环境因素对酶活性的影响及酶的高效性 2. 掌握酶定性分析的方法和注意事项 【基本原理】 淀粉 加碘后: 蓝色 紫色糊精 暗褐色糊精 红色糊精 麦芽糖+少量葡萄糖
紫红色
温度对酶活力的影响
0℃
100℃
37℃
酶的激活剂和抑制剂对酶活性的影响
在37℃水浴保温,每 隔1min从①号试管中 取出一滴溶液置白瓷 板上,用碘液检查淀 粉水解程度,待①号 试管的溶液遇碘不变 色时,从水浴中去除 所有试管
①号试管 0.9%NaCl溶液
②号试管 1%CuSO4溶液 ③号试管 蒸馏水
唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文3篇

唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文3篇An experimental report on salivary amylase activity唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文3篇小泰温馨提示:实验报告是把实验的目的、方法、过程、结果等记录下来,经过整理,写成的书面汇报。
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本文简要目录如下:【下载该文档后使用Word打开,按住键盘Ctrl键且鼠标单击目录内容即可跳转到对应篇章】1、篇章1:唾液淀粉酶活性观察实验报告文档2、篇章2:唾液淀粉酶活性的测定文档3、篇章3:淀粉酶活性测定实验报告文档篇章1:唾液淀粉酶活性观察实验报告文档2 唾液淀粉酶活性观察实验报告一、实验目的1.了解环境因素对酶活性的影响及酶的高效性;2.掌握酶定性分析的方法和注意事项。
二、基本原理1.酶是生物催化剂,具有极高的催化效率,其催化效率比一般催化剂高106~1013.在生物体内过氧化氢酶能催化H2O2分解成H2O和O2,铁粉地H2O2分解也有催化作用,但其效率远低于酶。
2.酶的活性受温度的影响。
在一定的温度范围内,温度升高,酶的活性也会增大。
当到了最大值后,此时温度为酶的最适温度,由于温度过高,酶开始失活,导致酶的效率降低,最后完全失活。
3.酶的活性受PH值的影响。
酶在一定范围的PH值下才有活性,高于或低于最适PH,都会使酶的活性降低。
4.酶活性常受到某些物质的影响。
有些物质能使酶的活性增加,称为激活剂,有些物质能使酶的活性降低,称为抵制剂。
5.碘液指示淀粉水解程度的不同色变化:淀粉淀粉酶紫色糊精淀粉酶暗褐糊精淀粉酶红色糊精淀粉酶麦芽糖+少量葡萄糖加碘后:蓝色紫红色暗褐色红棕色黄色三、试剂与器材篇章2:唾液淀粉酶活性的测定文档【按住Ctrl键点此返回目录】影响唾液淀粉酶活性的研究摘要:讨论了不同条件下唾液淀粉酶的活性差异,实验结果表明,影响唾液淀粉酶活性的因素很多,必须在适宜的条件下,才能发挥最佳催化作用;淀粉酶具有高度专一性,其活性受温度、pH值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素的影响;每个人产生唾液淀粉酶的量不同,活性强弱也有差异。
生物实验探究报告探究唾液淀粉酶对淀粉的消化作用1000字左右

生物实验探究报告探究唾液淀粉酶对淀粉的消化作用1000字左右篇一:探究实验报告唾液对淀粉的消化作用探究实验报告:唾液对淀粉的消化作用一、提出问题:吃馒头或米饭的时候,如果咀嚼的时间长了,会觉得有甜味,而馒头和米饭里面并没有放糖,为什么会这样呢?是哪种成分发生了什么变化导致的呢?二、做出假设:馒头或米饭中的成分主要是淀粉,淀粉是没有甜味的。
咀嚼馒头或米饭的时候,主要发生的变化是馒头或米饭被嚼碎了,和唾液混合在了一起,是否是唾液的作用导致米饭或馒头中的淀粉变成了别的物质,因此馒头或米饭变甜了呢?三、设计实验方案:1、根据假设,要模拟人的口腔中的环境,如口腔中(人体)的温度,唾液等,以及能检验淀粉是否发生变化的装置和药品等。
还要设计一个对照组,即除了要检验的因素(唾液)不同外,其他实验因素完全相同,从而检验出是否是唾液的作用导致。
2、材料用具:淀粉、试管、烧杯、温度计、碘液、清水、开水等。
四、实施实验方案:实验组:漱口,取唾液,将适量唾液装入试管,加入淀粉糊,混合均匀对照组:将与实验组等量的清水装入试管,加入淀粉糊,混合均匀五、分析实验现象:实验组的混合液不变蓝,说明已经没有淀粉,对照组的条件和实验组的变蓝,说明有淀粉,两组的唯一区别是实验组的混合液中有唾液,说明是唾液使淀粉发生了变化。
六、得出结论:唾液中的物质可以使馒头或米饭中的淀粉变成有甜味的物质,比如可能是变成了糖等。
篇二:生物实验报告《探究唾液对淀粉的消化作用》生物实验报告《探究唾液对淀粉的消化作用》班级 _________ 组别_________日期_________指导老师_______实验目的探究唾液对淀粉的消化作用材料用具:一次性漱口杯、凉开水、脱脂棉、小烧杯、量筒2支、试管2支、试管架、1%淀粉溶液(煮沸配制)、滴管、碘液、酒精灯、烧杯、温度计、石棉网、铁架台、火柴(或恒温水浴锅)实验步骤:1.准备①用凉开水将口漱净②收集唾液:口含一团脱脂棉,片刻后用镊子将脱脂棉取出,将其中的唾液挤到小烧杯中备用2.设计并实施实验③用量筒分别量取2ml淀粉溶液,分别注入1号、2号试管④用量筒分别量取2ml清水和2ml唾液,分别注入1号、2号试管⑤充分振荡两支试管,放入37℃温水中水浴约5—10分钟,同时取出两支试管,稍冷却⑥向两支试管内各滴加2滴碘液,振荡后观察实验现象3.记录实验记录实验结果4.分析结果得出结论5.结束实验整理和清理实验仪器和实验台实验报告:篇三:七年级生物实验_探究唾液对淀粉的消化作用课题:探究唾液对淀粉的消化作用实验年级:七年级一、教学目标1、运用实验法探究馒头在口腔中的变化。
唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文.doc

唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文篇一:唾液淀粉酶活性观察实验报告2 唾液淀粉酶活性观察实验报告一、实验目的1.了解环境因素对酶活性的影响及酶的高效性;2.掌握酶定性分析的方法和注意事项。
二、基本原理1.酶是生物催化剂,具有极高的催化效率,其催化效率比一般催化剂高106~1013.在生物体内过氧化氢酶能催化H2O2分解成H2O和O2,铁粉地H2O2分解也有催化作用,但其效率远低于酶。
2.酶的活性受温度的影响。
在一定的温度范围内,温度升高,酶的活性也会增大。
当到了最大值后,此时温度为酶的最适温度,由于温度过高,酶开始失活,导致酶的效率降低,最后完全失活。
3.酶的活性受PH值的影响。
酶在一定范围的PH值下才有活性,高于或低于最适PH,都会使酶的活性降低。
4.酶活性常受到某些物质的影响。
有些物质能使酶的活性增加,称为激活剂,有些物质能使酶的活性降低,称为抵制剂。
5.碘液指示淀粉水解程度的不同色变化:淀粉淀粉酶紫色糊精淀粉酶暗褐糊精淀粉酶红色糊精淀粉酶麦芽糖+少量葡萄糖加碘后:蓝色紫红色暗褐色红棕色黄色三、试剂与器材篇二:唾液淀粉酶活性的测定影响唾液淀粉酶活性的研究摘要:讨论了不同条件下唾液淀粉酶的活性差异,实验结果表明,影响唾液淀粉酶活性的因素很多,必须在适宜的条件下,才能发挥最佳催化作用;淀粉酶具有高度专一性,其活性受温度、pH值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素的影响;每个人产生唾液淀粉酶的量不同,活性强弱也有差异。
关键词:淀粉酶;活性;温度;抑制剂;激活剂;专一性2影响唾液淀粉酶的活性的因素(一)实验目的观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。
观察温度、pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。
(二)实验原理人唾液中淀粉酶为α-淀粉酶,在唾液腺细胞中合成。
在唾液淀粉酶的作用下,淀粉水解,经过一系列被称为糊精的中间产物,最后生成麦芽糖和葡萄糖。
变化过程如下:淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色、麦芽糖和葡萄糖遇碘不变色。
唾液实验报告

一、实验目的1. 了解唾液的基本组成和功能。
2. 探究唾液淀粉酶对淀粉的消化作用。
3. 学习酶活性测定的原理和方法。
二、实验原理唾液是由口腔腺体分泌的一种无色、无味、透明的液体,其主要成分包括水、电解质、唾液淀粉酶、唾液蛋白等。
唾液淀粉酶是一种消化酶,主要作用是催化淀粉水解成麦芽糖,为人体提供能量。
酶活性是指酶催化反应的能力,其大小可用反应速率来表示。
本实验采用比色法测定唾液淀粉酶活性,通过观察淀粉与碘液反应的颜色变化来判断淀粉水解程度,进而评估唾液淀粉酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:唾液、淀粉溶液、碘液、蒸馏水、试管、移液器、恒温水浴箱等。
2. 仪器:电子天平、试管架、滴管、烧杯、玻璃棒等。
四、实验步骤1. 将唾液样品用蒸馏水稀释10倍,混匀备用。
2. 取三支试管,分别标记为1号、2号、3号。
3. 向1号试管中加入2ml淀粉溶液,2号试管中加入2ml唾液稀释液,3号试管中加入2ml蒸馏水。
4. 将三支试管放入37℃恒温水浴箱中保温10分钟。
5. 取出三支试管,分别加入2滴碘液,观察颜色变化。
6. 将颜色变化与标准比色卡对照,记录淀粉水解程度。
7. 重复实验3次,取平均值。
五、实验结果与分析1. 实验结果:试管号 | 淀粉溶液 | 唾液稀释液 | 蒸馏水----|------|--------|------1号 | 蓝色 | 紫红色 | 棕色2号 | 紫红色 | 暗褐色 | 红棕色3号 | 棕色 | 黄色 | 棕色2. 结果分析:从实验结果可以看出,唾液稀释液中的淀粉水解程度较高,颜色由紫红色变为暗褐色;蒸馏水中的淀粉水解程度最低,颜色由棕色变为红棕色。
这表明唾液淀粉酶具有催化淀粉水解的作用,且其活性较高。
六、实验讨论1. 实验过程中,为什么要将唾液样品稀释10倍?答:为了降低唾液中其他成分对实验结果的干扰,提高实验的准确性。
2. 实验中为什么要将试管放入37℃恒温水浴箱中保温?答:因为唾液淀粉酶的最适温度为37℃,在37℃下酶活性最高,有利于观察淀粉水解程度。
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唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文2唾液淀粉酶活性观察实验报告一、实验目的1.了解环境因素对酶活性的影响及酶的高效性;2.掌握酶定性分析的方法和注意事项。
二、基本原理1.酶是生物催化剂,具有极高的催化效率,其催化效率比一般催化剂高106~1013.在生物体内过氧化氢酶能催化H2O2分解成H2O和O2,铁粉地H2O2分解也有催化作用,但其效率远低于酶。
2.酶的活性受温度的影响。
在一定的温度范围内,温度升高,酶的活性也会增大。
当到了最大值后,此时温度为酶的最适温度,由于温度过高,酶开始失活,导致酶的效率降低,最后完全失活。
3.酶的活性受PH值的影响。
酶在一定范围的PH值下才有活性,高于或低于最适PH,都会使酶的活性降低。
4.酶活性常受到某些物质的影响。
有些物质能使酶的活性增加,称为激活剂,有些物质能使酶的活性降低,称为抵制剂。
5.碘液指示淀粉水解程度的不同色变化:淀粉淀粉酶紫色糊精淀粉酶暗褐糊精淀粉酶红色糊精淀粉酶麦芽糖+少量葡萄糖加碘后:蓝色紫红色暗褐色红棕色黄色三、试剂与器材影响唾液淀粉酶活性的研究摘要:讨论了不同条件下唾液淀粉酶的活性差异,实验结果表明,影响唾液淀粉酶活性的因素很多,必须在适宜的条件下,才能发挥最佳催化作用;淀粉酶具有高度专一性,其活性受温度、pH值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素的影响;每个人产生唾液淀粉酶的量不同,活性强弱也有差异。
关键词:淀粉酶;活性;温度;抑制剂;激活剂;专一性2影响唾液淀粉酶的活性的因素实验目的观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。
观察温度、pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。
实验原理人唾液中淀粉酶为α-淀粉酶,在唾液腺细胞中合成。
在唾液淀粉酶的作用下,淀粉水解,经过一系列被称为糊精的中间产物,最后生成麦芽糖和葡萄糖。
变化过程如下:淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色、麦芽糖和葡萄糖遇碘不变色。
淀粉与糊精无还原性,或还原性很弱,对班氏试剂呈阴性反应。
麦芽糖与葡萄糖是还原性糖,与班氏试剂共热后生成红棕色氧化亚铜的沉淀。
唾液淀粉酶的最适温度为37-40°C,最适pH为6.8.偏离此最适环境时,酶的活性减弱。
低浓度的Cl-离子能增加淀粉酶的活性,是它的激活剂。
Cu2+等金属离子能降低该酶的活性,是它的抑制剂。
器材及试剂1、器材:试管、酒精灯、烧杯、恒温水浴锅、量筒、冰浴、玻璃棒、试管夹、白磁板、试管架、铁三脚架、唾液淀粉酶2、试剂:1%淀粉溶液、碘液、班氏试剂、0.4%HCl溶液、0.1%的乳酸溶液、1%NaCl溶液、1%CuSO4溶液、0.1%淀粉溶液操作步骤1、淀粉酶活性的检测:取一只试管,注入1%淀粉溶液5mL与稀释的唾液0.5-2mL。
混匀后插入1支玻璃棒,将试管连同玻璃棒置于37°C水浴中。
不是的用玻璃棒从试管中取出1滴溶液,滴加在白磁板上,随即滴加1滴碘液,观察溶液呈现的颜色。
此实验延续至溶液仅表现碘被稀释后的微黄色为止。
记录淀粉在水解过程中,遇碘后溶液颜色的变化。
向上面的剩余溶液中加2mL班氏试剂,放入沸水中加热10分钟左右,观察现象2、pH对酶活性的影响:取4支试管,分别加入0.4%盐酸、0.1%乳酸、蒸馏水与1%碳酸钠各2mL,再向以上四支试管中各加2mL1%淀粉溶液及2mL淀粉酶试剂,在沸水浴中加热,根据生成红棕色沉淀的多少,说明淀粉水解的强弱。
3、温度对酶活性的影响:取3支试管,各加3mL1%淀粉溶液;另取3支试管,各加1mL淀粉酶液。
将此6支试管分为3组,每组中盛淀粉溶液与淀粉酶液的试管各1支,三组试管分别置于0°C、37°C 与70°C的水浴中。
5分钟后,将各组中的淀粉溶液倒入淀粉酶液中,继续维持原温度条件5min后,立即加2滴碘液,观察溶液颜色的变化。
根据观察结果说明温度对酶活性的影响。
4、激活剂与抑制剂对酶活性的影响:取3支试管,按下表加入各种试剂。
混匀后,置于37°C水浴中的保温。
从1号试管中用玻璃棒取出1滴溶液,置于白磁板上用碘液检查淀粉的水解程度。
待1号试管内的溶液遇碘不再变色后,立即取出所有的试管,各加碘液2滴,观察溶液颜色的变化,并解释之。
1.加入班氏试剂后2.PH值对酶活性影响:1号深红色,2号为红棕色,3号为砖红色,4号为偏蓝。
因为PH=1时,超出了淀粉酶有效PH范围,使得酶完全失活,淀粉没有被分解。
2号是因为PH=5时,不是淀粉酶的最适范围。
3号是因为PH=7时,为淀粉酶分解的最适PH,淀粉被酶迅速分解生成麦芽糖和葡萄糖。
而4号则是因为PH=9超出了淀粉酶的适宜PH,活性受到或者是部分失活,使淀粉分解较慢。
3.温度对酶的影响:1号显紫红色,2号为淡黄色,3号为深蓝色。
当温度为0度时,蛋白质分子的热运动减慢,即酶分子的活性受到了抑制,使酶的活性降低了,淀粉分解减慢,生成紫红色的糊精;2号处于37度,接近人体温度,酶的活化性能较高,淀粉被分解成麦芽糖和葡萄糖就越快,所以是淡黄色,而当温度为70度时,由于酶是蛋白质,遇到高温时会失活,所以淀粉没有被分解。
4.激活剂和抑制剂对酶的影响:3号作为对照实验组,显红棕色,1号显浅黄色,2号显深蓝色。
因为在1号溶液中,NaCl对酶的活性在增加作用,激活了淀粉酶,淀粉酶迅速把淀粉分解成麦芽糖和葡萄糖,滴加碘液时,溶液显浅黄色,而对照组显示红棕色,表明淀粉被分解成了糊精,在1号中,溶液中的淀粉没有被分解遇碘变蓝,通过对比1和3号,2和3号,由颜色的变化,判断淀粉水解程度为132,说明了NaCl具有激活作用,CuSO4具有抑制作用。
结论:酶催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体。
是生物催化剂,能通过降低化学反应的活化能加快反应速率,但不改变反应的平衡点。
绝大多数酶的化淀粉酶活性的测定一、研究背景及目的酶是高效催化有机体新陈代谢各步反应的活性蛋白,几乎所有的生化反应都离不开酶的催化,所以酶在生物体内扮演着极其重要的角色,因此对酶的研究有着非常重要的意义。
酶的活力是酶的重要参数,反映的是酶的催化能力,因此测定酶活力是研究酶的基础。
酶活力由酶活力单位表征,通过计算适宜条件下一定时间内一定量的酶催化生成产物的量得到淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称,按照其水解淀粉的作用方式,可分为α-淀粉酶和β-淀粉酶等。
α-淀粉酶和β-淀粉酶是其中最主要的两种,存在于禾谷类的种子中。
β-淀粉酶存在于休眠的种子中,而α-淀粉酶是在种子萌发过程中形成的。
α-淀粉酶活性是衡量小麦穗发芽的一个生理指标,α-淀粉酶活性低的品种抗穗发芽,反之则易穗发芽。
目前,关于α-淀粉酶活性的测定方法很多种,活力单位的定义也各不相同,国内外测定α-淀粉酶活性的方法常用的有凝胶扩散法、3,5-二硝基水杨酸比色法和降落值法。
这3种方法所用的材料分别是新鲜种子、萌动种子和面粉,获得的α-淀粉酶活性应该分别是延二、实验原理萌发的种子中存在两种淀粉酶,分别是α-淀粉酶和β-淀粉酶,β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化,而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6下则发生钝化。
本实验的设计利用β-淀粉酶不耐热的特性,在高温下下处理使得β-淀粉酶钝化而测定α-淀粉酶的酶活性。
酶活性的测定是通过测定一定量的酶在一定时间内催化得到的麦芽糖的量来实现的,淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖,可用3,5-二硝基水杨酸试剂测定,由于麦芽糖能将后者还原生成硝基氨基水杨酸的显色基团,将其颜色的深浅与糖的含量成正比,故可求出麦芽糖的含量。
常用单位时间内生成麦芽糖的毫克数表示淀粉酶活性的大小。
然后利用同样的原理测得两种淀粉酶的总活性。
实验中为了消除非酶促反应引起的麦芽糖的生成带来的误差,每组实验都做了相应的对照实验,在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以校正。
在实验中要严格控制温度及时间,以减小误差。
并且在酶的作用过程中,四支测定管及空白管不要混淆。
三、材料、试剂与仪器实验材料:萌发的小麦种子仪器:722光栅分光光度计DK-S24型电热恒温水浴锅离心机容量瓶:50ml×1,100ml×1小台秤研钵具塞刻度试管:15ml×6试管:8支移液器烧杯试剂:①1%淀粉溶液;②pH5.6的柠檬缓冲液:A液B液取A液5.5ml、B液14.5ml混匀即为pH5.5柠檬酸缓冲液;③3,5-二硝基水杨酸溶液;④麦芽糖标准液;0.4MNaOH四、实验步骤1.酶液的制备称取2克萌发的小麦种子与研钵中,加少量石英砂,研磨至匀浆,转移到50ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度,混匀后在室温下放置,每隔数分钟振荡一次,提取15-20分钟,于3500转/分离心20分钟,取上清液备用。
2.α-淀粉酶活性的测定①取4支管,注明2支为对照管,另2支为测定管②于每管中各加酶提取液液1ml,在70℃恒温水浴中准确加热15min,在此期间β-淀粉酶钝化,取出后迅速在冰浴中彻底冷却。
③在试管中各加入1ml柠檬酸缓冲液④向两支对照管中各加入4ml0.4MNaOH,以钝化酶的活性将测定管和对照管置于40℃恒温水浴中准确保温15min再向各管分别加入40℃下预热的淀粉溶液2ml,摇匀,立即放入40℃水浴中准确保温5min后取出,向两支测定管分别迅速加入4ml0.4MNaOH,以终止酶的活性,然后准备下步糖的测定。
3.两种淀粉酶总活性的测定取上述酶液5ml于100ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度。
混合均匀后,取4支管,注明2支为对照管,另2支为测定管,各管加入1ml稀释后的酶液及pH5.6柠檬酸缓冲液1ml,以下步骤重复α-淀粉酶测定的第④及第⑤的操作。
4.麦芽糖的测定⑴标准曲线的制作取15ml具塞试管7支,编号,分别加入麦芽糖标准液,计算上表中第4行数据均值,填入上第5行中,根据标准曲线的方程,计算第5行OD值所对应的麦芽糖浓度,填入最后一行,如上表。
根据以上的数据整理的结果,结合以下公式计算两种淀粉酶的活性:淀粉酶活性样品稀释总体积样品重5样品稀释总体积淀粉酶活性样品重5A——α-淀粉酶测定管中的麦芽糖浓度A’——α-淀粉酶对照管中的淀粉酶的浓度B——淀粉酶总活性测定管中的麦芽糖浓度B’——淀粉酶总活性对照管中的麦芽糖浓度计算结果如下:α-淀粉酶活性淀粉酶活性β-淀粉酶活性-1鲜重分钟-1)六、结果分析七、思考题1、酶活力测定实验的总体设计思路是什么?实验设计的关键你认为是什么?为什么?答:利用酶的专一性或酶活力的影响因素抑制除待测酶以外的其它酶活性,通过测酶促反应的产率推算酶活力大小。
关键在于抑制其它酶的活力而不影响测定酶,这样可以减小或避免其它酶产物给测定结果带来的误差。