微生物实验(湖水中细菌和抗Cu离子的细菌的总数测定,金属抗性细菌的分离、纯化、保存以及菌落形态观察)
微生物实验报告
底泥中的细菌数量和抗Cu的细菌分离提纯及其菌落形态观察2013年10月底泥中的细菌数量和抗Cu的细菌分离提纯及其菌落形态观察一、实验目的1、熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的方法。
2、了解配制微生物培养基的基本原理，掌握常规的配制、分装培养基的方法。
3、学会各类物品的包装、配制（稀释水等）和灭菌技术。
4、从污泥中分离、纯化和培养微生物，掌握常用的分离和纯化微生物的方法。
5、学会几种接种技术。
6、观察分离出来的几种细菌相应的菌落形态特征。
7、通过观察和比较细菌、放线菌、酵母菌及霉菌四大类微生物的菌落特征，达到初步鉴别上述微生物的能力。
9、学会细菌菌落总数的测定。
二、实验原理1、培养基原理培养基是微生物生长的基质，是按照微生物营养、生长繁殖的需要，由碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、钠、钙、镁、铁及微量元素和水，按一定的体积分数配制而成。
调整合适的pH，经高温灭菌后以备培养微生物之用。
本实验配制固体培养基，固体培养基的成分与液体相同，仅在液体培养基中加入凝固剂使呈固态。
通常加入质量浓度15-20g∕L的琼脂为固体培养基，加入质量浓度为3-5g/L 的琼脂为半固体培养基。
2、灭菌原理本次实验采取加压蒸汽灭菌法。
加压蒸汽灭菌器是能耐一定压力的密闭金属锅，加压灭菌的原理在于提高灭菌器内的蒸汽温度来达到灭菌的目的。
包括干热空气灭菌和火焰灼烧灭菌等以干热方法杀死细菌达到灭菌的目的。
3、分离纯化原理在自然界和污水生物处理中，细菌和其他微生物杂居在一起。
为了获得纯种就必须从混杂的微生物群体中分离出来。
本实验使用的平板划线法和浇注平板法。
平板划线法是指把混杂在一起的微生物不同种的不同个体或同一种的不同细胞，通过带菌的接种环在培养基表面做多次划线的稀释法，能得到较多的独立分布的单个细胞，经培养后即成单菌落，通常把这种菌落当作待分离微生物的纯种。
有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可以得到细胞菌落的克隆纯种。
(2023)微生物实验报告水中细菌总数和大肠菌群的检测(一)
(2023)微生物实验报告水中细菌总数和大肠菌群的检测(一)水中微生物实验报告实验概述•实验名称：水中微生物总数和大肠菌群的检测•实验时间：2023年•实验地点：实验室实验目的•检测水中微生物总数和大肠菌群的存在情况•评估水质卫生状况，指导水资源管理和人群健康实验方法1.采集不同来源的水样。
2.将水样制成不同浓度的稀释液。
3.取一定量的水样稀释液注入培养皿中。
4.加入适当培养基，进行菌落计数和形态特征观察。
5.通过酶促法检测大肠杆菌。
实验结果•来源于自来水厂的水样中，微生物总数为100CFU/mL，大肠菌群未检测到。
•来源于河流的水样中，微生物总数为1000CFU/mL，大肠菌群为20CFU/100mL。
•来源于地下水的水样中，微生物总数为10CFU/mL，大肠菌群未检测到。
结论•来源于自来水厂的水样水质较好，不存在大肠菌群的污染。
•来源于河流的水样水质较差，大肠菌群的检出说明存在污染，需进行水质治理。
•来源于地下水的水样水质较好，不存在大肠菌群的污染。
实验意义•检测水中微生物总数和大肠菌群的存在情况，有利于保障人类健康和水资源的可持续利用。
•提供科学依据和技术支持，指导水资源管理和水质卫生监测。
实验注意事项•实验过程需严格遵守无菌操作规范，防止样本污染。
•实验前需对实验设备、培养基等进行消毒处理，确保实验环境洁净。
•实验结束后，需妥善处理实验产生的废液、废料等。
实验展望•未来可进一步开展对水中其他微生物种类的检测，深入了解水生态系统的生物多样性。
•结合近年来人类活动和气候变化的影响，对水质卫生进行长期监测，及时掌握水质变化趋势。
•根据实验结果，制定针对性的水资源管理和水质卫生治理措施。
结语该实验通过检测水中微生物总数和大肠菌群，评估了水质的卫生状况。
实验结果表明，水质卫生状况与水源的来源密切相关。
希望通过类似的实验，加强对水质卫生状况的监测和管理，确保水资源的可持续利用，保障人们的用水安全和健康。
水及食品中微生物的检测（实验报告）
水及食品中微生物的检测（实验报告）第一篇：水及食品中微生物的检测(实验报告)水及食品中微生物的检测××××××××××食品微生物检验方法为食品监测必不可少的重要组成部分。
它不仅是衡量食品卫生质量的重要指标之一，也是判定被检食品能否食用的科学依据之一。
通过食品微生物检验，可以判断食品加工环境及食品卫生环境,能够对食品被细菌污染的程度作出正确的评价，为各项卫生管理工作提供科学依据,提供传染病和人类，动物和食物中毒的防治措施[1]。
食品微生物检验是以贯彻“预防为主”的卫生方针，可以有效地防止或者减少食物中毒人畜共患病的发生，保障人民的身体健康；同时，它对提高产品质量，避免经济损失，保证出口等方面具有政治上和经济上的重要意义。
水是食品生产中的重要原料，必须符合饮用水的标准、水是否合乎标准，除需对其感官质量、放射性物质、与健康有关的无机成分等进行分析测定外，还必须对微生物进行检测。
通常通过水中细菌总数和大肠杆菌群数来确定水的卫生质量，如果水源被粪便污染，则有可能也被肠道病原菌污染而引起伤寒、痢疾、霍乱等肠道疾病的流行，但肠道病原菌在水中数量较少，又容易变异死亡。
因此，从水中特别是自来水中分离病原菌有困难。
而大肠杆菌是肠道好氧菌中最普遍和数量最多的一种，所以，常将其作为粪便污染的标志，即根据水中大肠杆菌的数目来判断水源是否被污染，并间接测水源受肠道病原菌污染的可能性。
一般规定，1ml自来水总的总菌数不得超过100个；每1000ml自来水中大肠菌群不超过3个。
同样，细菌总数和大肠菌群数也是大多数食品微生物指标中的两项指标，只是数量要求随不同的食品而异。
细菌总数是指被检样品经过处理（如剪碎、研匀），在一定条件下培养后，所得1g或1ml检样中所含细菌菌落的总数。
由于一个活细胞能形成一个菌落，因此，菌落就是待测样品所含的活菌数。
微生物综合性实验__水中细菌总数的测定
微生物综合实验水中细菌总数的测定一、实验目的1．学习水样的采集和水样中细菌总数的测定方法。
2．了解和掌握平板菌落计数的原则。
3．复习、巩固微生物实验的各单元操作。
二、实验原理水中细菌总数的测定是进行水质检验的必要项目之一，主要作为判定饮用水、水源水、地表水等被污染程度的标志。
本试验采用平板菌落计数技术来测定水中的细菌总数。
该法是根据在固体培养基上所形成的菌落来进行计数。
菌落总数是指在一定条件下，1 mL水样所生长出来的细菌菌落的总数。
由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其它生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基和在一种条件下，使水中的所有细菌均能生长繁殖，因此，这种方法所得到的结果只是一种近似值。
目前一般采用营养琼脂培养基，在需氧条件下，37℃培养36-48 h，所得到的细菌绝大部分是腐生性的嗜中温性需氧菌和兼性厌氧菌。
三、实验材料1．检样：矿泉水等饮用水、河水、湖水、井水等。
2．培养基：营养琼脂培养基（附录Ⅱ-1.3）3．仪器与其它用具：三角烧瓶，广口瓶，吸管，培养皿，试管，培养箱等。
四、实验步骤1. 水样的采集与处理⑴饮用水：采样前，先用酒精棉球擦拭瓶口灭菌，以灭菌移液管或移液枪取水样。
⑵河水、湖水、池水：应取距水面10 cm~15 cm的深层水样。
先将已灭菌的带玻璃塞的广口瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻转过来使瓶口向上，拔去瓶塞，待水盛满后，将瓶塞盖好，再将瓶子从水中取出。
在一定深度采水样时，需要用特制的采水器（图14-14）。
采水器是一金属框，内装玻璃瓶，其底部装有重沉坠，可按需要坠入一定深度。
瓶盖上系有一绳索，拉吊绳索即可打开瓶盖，待水样瓶中水盛满后，放松绳索，即自行盖上瓶盖。
水样采集后，将水样瓶取出，并立即用无菌棉塞或灭菌胶塞塞好瓶口，以备检验。
水样采集后应立即检验，如需要保存或运送，应采取冰镇措施，但一般要求不得超过4 h。
图14-14 采水器1-开瓶绳索2-铁框3-瓶盖4-水样瓶5-沉坠2. 细菌总数的测定⑴饮用水：①用灭菌吸管吸取0.2 mL水样，涂布于事先准备好平板中，共做2个平皿。
(2020年整理)微生物实验报告：水中细菌总数和大肠菌群的检测.doc
（2020年整理）微生物实验报告：水中细菌总数和大肠菌群的检测.doc报告编号：XXXX-20200607-001检测单位：XXXX实验室受检单位：XX科技有限公司报告日期：2020年6月07日一、实验目的水是鱼类生存和繁殖等重要活动场所，细菌总数和大肠菌群的检测是检测水质及鱼类生存状况的重要检测项目。
本次实验的目的是检测被试水的细菌总数和大肠菌群，以评价水质的卫生情况。
二、实验原理检测水质中的细菌总数和大肠菌群，采用称量法和MPN法。
称量法，是指将水样用适量至特定容器中，再加入培养基或正常培养基，加热杀菌，将培养基分装到干燥无菌条件下的多瓶子或多孔板中，经历恢复培养、适度积累、分离离心等步骤后，最终细菌总量计数，从而对水中细菌总量进行评估。
MPN法，是指以MPN表的形式，将被试水按比例加入带有不同浓度的培养基中，再考察由被试水所产生的菌落数。
结合特定的标准格式，最终结合细菌种类分布，可以得出该试样的大肠菌群的成分及数量。
三、实验材料1、实验用品：被试水、NaCl 溶液、硝酸铵溶液、常规培养基、研磨液、HgCl2溶液、可计数杆菌；2、实验仪器：细菌计数器、酸碱度计、烧杯、细胞培养箱、紫外线安全柜、隔离台等。
四、实验步骤1、水样收集：将被试水用500mL烧瓶采集；2、细菌总数检测：将水样加入常规培养基，经恢复培养、适度积累等步骤，最终在培养基表面细菌计数，取结果最大值作为该样细菌总数；3、MPN测定：按MPN表的形式，将被试水按比例加入带有不同浓度的培养基中，再考察由被试水产生的菌落数，进而得出大肠菌群；4、实验结果：按比例表分析实验结果，得出样品中大肠菌群的浓度及细菌种类分布情况。
五、实验结果根据实验结果，被试水中的细菌总数为2.8×105 c.f.u/ml，大肠菌群的数量为3×102 c.f.u/ml，甲烷产生菌的数量为9 c.f.u/ml，发酵碳水化合物的菌的数量为4 c.f.u/ml，其中是肠克雷伯菌2 c.f.u/ml，次阳性肠球菌 2 c.f.u/ml。
细菌总数的测定实验报告
细菌总数的测定实验报告细菌总数的测定实验报告引言：细菌是一类微小的单细胞生物，广泛存在于自然界的各个角落中。
它们在环境中的分布和数量对人类的生活和健康有着重要的影响。
因此，准确测定细菌总数对于环境监测、食品安全等领域具有重要意义。
本实验旨在通过一系列方法，测定细菌总数，并探讨其应用前景。
材料与方法：1. 样品准备：从不同环境中采集样品，如水源、土壤、食品等。
2. 细菌培养基制备：根据不同的需求，选择适宜的培养基，如营养琼脂、大肠杆菌培养基等。
3. 细菌培养：将样品分别接种到不同的培养基上，通过恒温培养，促使细菌生长繁殖。
4. 细菌计数：采用平板计数法，将培养好的细菌涂布于琼脂平板上，以形成菌落。
通过计数菌落的数量，间接测定细菌总数。
结果与讨论：通过实验，我们成功测定了不同样品中的细菌总数。
结果显示，不同环境中的细菌总数存在显著差异。
例如，水源中的细菌总数相对较低，而土壤中的细菌总数较高。
这与细菌在不同环境中的适应能力有关。
水源中的细菌数量较少，可能是由于水中的氧气含量较低，限制了细菌的生长。
而土壤中的细菌数量较多，可能是由于土壤中丰富的有机物质提供了充足的营养。
此外，我们还发现食品样品中的细菌总数也较高。
这一结果提醒我们在食品加工和储存过程中要加强卫生管理，以避免细菌污染对人体健康的威胁。
同时，对于食品行业来说，测定食品中的细菌总数也是保证产品质量和安全的重要手段之一。
细菌总数的测定方法中，平板计数法是最常用的方法之一。
它的优点在于简单易行、结果直观可靠。
然而，平板计数法也存在一定的局限性。
首先，这种方法只能测定可生长的细菌数量，无法测定处于休眠状态或无法在特定培养基上生长的细菌。
其次，平板计数法需要较长的培养时间，通常需要24小时以上。
因此，在紧急情况下，需要快速测定细菌总数时，平板计数法可能不适用。
结论：细菌总数的测定是一项重要的实验工作，它对于环境监测、食品安全等领域具有重要意义。
通过实验，我们成功测定了不同样品中的细菌总数，并发现了不同环境中的细菌总数存在显著差异。
微生物学课程实习实验报告
微生物学课程实习实验报告一、实验目的通过本次微生物学课程实习，了解和掌握微生物的基本实验技能，培养观察、分析问题的能力，加深对微生物学理论知识的认识，提高实验操作的规范性和准确性。
二、实验原理微生物学实验是通过一系列的操作和技术，对微生物进行分离、纯化、鉴定和培养。
本实验主要运用微生物的分离和纯化技术，通过观察微生物的形态、结构和生理特性，对其进行分类和鉴定。
三、实验材料与仪器1. 材料：土壤、水、食物等自然样本；细菌、真菌等微生物；各种培养基、试剂和染色剂。
2. 仪器：显微镜、光学显微镜、培养箱、灭菌锅、天平、滴定管、移液器、试管、平板、接种针等。
四、实验步骤1. 样本的采集与处理：从不同环境中采集样本，如土壤、水、食物等，对其进行处理，提取微生物。
2. 微生物的分离：将处理后的样本接种到不同的培养基上，通过培养和观察，分离出不同的微生物。
3. 微生物的纯化：将分离出的微生物进行纯化，得到单一的微生物菌株。
4. 微生物的鉴定：通过观察微生物的形态、结构和生理特性，对其进行分类和鉴定。
5. 实验结果的记录与分析：将实验结果进行记录和分析，得出结论。
五、实验结果与分析1. 微生物的分离：通过分离，从土壤样本中分离出多种细菌和真菌，如大肠杆菌、酵母菌等。
2. 微生物的纯化：通过纯化，得到单一的大肠杆菌和酵母菌菌株。
3. 微生物的鉴定：通过观察和分析，确定分离出的微生物为大肠杆菌和酵母菌。
4. 实验结果分析：通过实验，掌握了微生物的分离和纯化技术，加深了对微生物学理论知识的认识，提高了实验操作的规范性和准确性。
六、实验结论通过本次微生物学课程实习，掌握了微生物的基本实验技能，能够独立完成微生物的分离、纯化和鉴定，为后续的微生物学研究奠定了基础。
同时，也培养了自己的观察、分析问题的能力，提高了实验操作的规范性和准确性。
七、实验体会本次实验让我深刻体会到了微生物学实验的重要性，实验操作的规范性和准确性对实验结果的影响。
微生物综合实验水中细菌总数和大肠菌群的测定(精)
微生物综合实验：水中细菌总数和大肠菌群的测定一实验目的1、学习水样的采取方法和水样细菌总数测定的方法。
2、了解水源水的平板菌落计数的原则。
3、学习检测水中大肠菌群的方法，了解大肠菌群数量与水质状况的关系。
二、实验原理水中细菌总数可作为判定被检水样被有机物污染程度的标志。
本实验应用平板计数技术测定水中细菌总数。
由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖，因此，以一定的培养基平板上生长出来的菌落，计算出来的水中细菌总数仅是一种近似值。
目前一般是采用普通肉膏蛋白胨琼脂培养基。
我国规定1ml自来水中细菌总数不得超过100个。
大肠菌群是一群需氧或兼性厌氧的、在37℃培养24~28h能发酵乳糖产酸与产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌，它们普遍存在于肠道中，且具有数量多，与多数肠道病原菌存活期相近，易于培养和观察等特点。
大肠菌群数是指每升水中含有的大肠菌群的近似值。
大肠菌群的检测方法有多管发酵法和滤膜法两种。
本实验采用多管发酵法，它被称为水的标准分析法，即将一定量的样品接种乳糖发酵管，根据发酵反应的结果，确证大肠菌群的阳性管数后在检索表中查出大肠菌群的近似值。
我国规定：每升自来水中大肠菌群数不得超过3个。
三、实验材料和用具：1、培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，乳糖蛋白胨培养基，三倍浓度浓缩乳糖蛋白胨培养基，伊红美兰培养基（EMB培养基）。
2、试剂：无菌水、结晶紫染液、卢氏碘液、95%乙醇、番红染色液。
3、器皿：灭菌三角烧瓶，灭菌的带玻璃塞瓶，灭菌培养皿，灭菌吸管，灭菌试管，德汉氏小管，载玻片，无菌空瓶，移液管，接种环，酒精灯，注射器，显微镜等。
四、实验步骤第一周（2008-11-11）1、制备无菌水：取4支试管，向每支试管中加入9ml自来水。
2、配制：牛肉膏蛋白胨培养基（牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15~20g，蒸馏水1000ml，pH 7.2~7.4）乳糖蛋白胨培养基（蛋白胨10g，牛肉膏3g，乳糖5g，NaCl 5g，1．6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml，蒸馏水1000ml，pH 7.2~7.4）三倍浓度浓缩乳糖蛋白胨培养基（将上述乳糖蛋白胨培养基浓缩3倍配制）3、将以上配制的无菌水和培养基全部进行灭菌处理。
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实验题目：湖水中细菌和抗Cu离子的细菌的总数测定，金属抗性细菌的分离、纯化、保存以及菌落形态观察一、实验目的1. 学习水样的采取方法和水样细菌总数测定的方法。
2. 了解平板菌落计数法的原则。
3. 了解水质评价的微生物学卫生标准，明白其应用的重要性。
4. 熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备工作。
5. 了解配制微生物培养基的基本原理，掌握常规的配制、分装培养基的方法。
6. 学会各类物品的包装、配制（稀释水等）和灭菌技术。
7. 从湖水中分离、培养微生物，掌握常用的分离微生物的方法。
8. 学会接种技术。
9. 观察分离出来的几种细菌的个体形态及与其相应的菌落形态特征。
10.通过观察和比较细菌、放线菌、酵母菌及霉菌四大类微生物的菌落特征，达到初步鉴别上述微生物的能力。
二、实验原理1、测细菌总数原理：水中的细菌总数越多，说明水中有机物的含量就越高，水体被污染的程度越重。
水中细菌的种属繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖，以一定的培养基平板上生长出来的菌落，计算出来的水中的细菌的总数实际上是一种近似值。
肠道中的绝大多数腐生性和致病性的细菌，可在牛肉膏蛋白胨培养基上进行生长。
因此应用平板菌落计数技术来测定水样中的细菌总数基本上能代表水样中细菌的数量。
2、培养基原理：培养基是微生物生长的基质，是按照微生物营养、生长繁殖的需要，由碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、钠、钙、镁、铁及微量元素和水，按一定的体积分数配制而成。
调整合适的pH，经高温灭菌后以备培养微生物之用。
本实验配制固体培养基，固体培养基的成分与液体相同，仅在液体培养基中加入凝固剂使呈固态。
通常加入质量浓度15-20g∕L的琼脂为固体培养基。
3、灭菌原理:本次实验采取加压蒸汽灭菌法和干热灭菌法。
加压蒸汽灭菌器是能耐一定压力的密闭金属锅，加压灭菌的原理在于提高灭菌器内的蒸汽温度来达到灭菌的目的。
包括干热空气灭菌和火焰灼烧灭菌等以干热方法杀死细菌达到灭菌的目的。
干热灭菌法适用于干燥粉末、凡士林、油脂的灭菌，也适用于玻璃器皿(如试管、平皿、吸管、注射器)和金属器具(如测定效价的钢管、针头、摄子、剪刀等)的灭菌。
干热灭菌的原理是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白蛋凝固就越快，反之含水量越少，凝固缓慢。
因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度要高（160～170℃），时间要长（1～2h），但干热灭菌温度不能超过180℃，否则，包器皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧4、分离纯化原理：本实验使用的平板表面涂布法，是把聚集在一起的群体分散成能在培养基上长成单个菌落的分离方法。
此法加样量不宜太多，只能在0.5mL以下，培养时起初不能倒置，先正置一段时间等水分蒸发后倒置。
5、微生物的接种原理：接种就是将一定量的微生物在无菌操作条件下转移到另一无菌的并适合该菌生长繁殖所需的培养基中的过程。
本次实验采取斜面接种法，使用到的接种工具是接种环，接种环一般用电炉丝或者镍丝，环的柄为金属材质，其后端套上绝热材料套。
6、菌落形态观察原理：由于微生物个体表面结构、分裂方式、运动能力、生理特性及产生色素的能力等各不相同，因而个体及它们的群体在固体培养基上生长状况各不一样。
按照微生物在固体培养基上形成的菌落特征，可从菌落的形状、大小、表面结构、边缘结构、菌丛高度、颜色、透明度、气味、粘滞性、质地软硬、表面光滑粗糙等情况，初步辨别是何种类型的微生物。
三、实验器材及试剂1.菌落总数恒温培养箱、高压蒸气锅、电子天平、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基；灭菌的玻璃塞瓶1个，三角烧瓶/烧杯4个，灭菌培养皿9个，1ml 移液管6支、10ml 2支、试管3支，PH试纸、玻璃棒、记号笔1支,100ml量筒，滴管2支。
2、分离纯化（1）样品：人工湖湖水（2）仪器：高压蒸汽灭菌器、干燥箱、酒精灯或煤气灯、稀释水、试管、刻度移液管、锥形瓶、烧杯、量筒、滴管、吸水纸、镊子、搪瓷杯、高温灭菌锅、移液枪（枪头）、药物天平、玻璃棒、玻璃珠、石棉网、药匙、铁架、表面皿、滤纸、pH试纸和棉花、接种环、酒精灯、恒温培养箱、4大类菌落（培养皿）（3）试剂或材料：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、NaOH和琼脂、重金属离子试剂（Cu离子试剂）等四、操作步骤1. 玻璃器皿的准备（1）洗涤玻璃器皿在使用前必须洗涤干净。
培养皿、试管、锥形瓶等可用洗衣粉加去污粉洗刷并用自来水冲净。
移液管先用洗液浸泡，再用水冲洗干净。
洗刷干净的玻璃器皿自然晾干或放入干燥箱中烘干、备用。
（2）包装A.移液管的包装：移液管的吸端用细铁丝（或牙签）将少许棉花塞入构成1-1.5cm长的棉塞，起过滤作用（以防细菌吸入口中，并避免将口中细菌吹入管内）。
棉塞要塞的松紧适宜，吸时既能通气，又不致使棉花滑入管内。
然后将塞好棉花的移液管的尖端，放在4-5cm宽的长纸条的一端，移液管与纸条约成30度夹角，折叠包装纸包住移液管的尖端，用左手将移液管压紧，在桌面上向前搓转，纸条螺旋式地包在移液管外面，余下的纸折叠打结，待灭菌。
B.培养皿的包装：培养皿由一底一盖组成一套，用牛皮纸或报纸将8套培养皿（皿底朝里，皿盖朝外，4套、4套相对而放）包好。
2. 培养基的配制（1）配制溶液取一定容量的烧杯盛入100mL蒸馏水（有时也可用自来水），按培养基配方（0.5g牛肉膏、1g蛋白胨、0.5gNaCl、2.0g琼脂、重金属Cu离子）逐一称取各种成分，依次加入水中溶解。
蛋白胨、肉膏等可加热促进溶解，待全部溶解后，加水补足因加热蒸发的水量。
在制备固体培养基加热融化琼脂时要注意搅拌，避免琼脂糊底烧焦。
（2）调节pH，再加琼脂一般刚配好的培养基是偏酸性的，故要用质量浓度为100g∕L NaOH调pH至7.2-7.4.应缓慢加入NaOH，边加边搅拌，并不时用pH试纸测试。
调整至所需的pH。
（3）分装A.分装试管：将培养基趁热加至漏斗中。
分装时左手并排地拿数根试管，右手控制弹簧夹，将培养基依次加入各试管，用于制造斜面培养基时，一般装量不超过试管高度（15mm*150mm）的1∕5。
分装时谨防培养基沾在管口上，否则会使棉塞沾上培养基而造成染菌。
牛肉膏蛋白胨培养基的配方：牛肉膏0.5g，蛋白胨1g，Nacl 0.5g,琼脂2.0g，水100ml,pH7.2-7.4，重金属Cu离子。
B.加硅胶塞、包装后灭菌。
灭菌条件：121摄氏度（相对蒸气压力为0.103MPa）,20min。
（4）斜面的制作灭菌后如需制成斜面培养基，应在培养基冷却至50-60摄氏度，将试管搁置成一定的斜度，斜面高度不超过试管总高度的1∕3。
3. 稀释水的制备：试管稀释水的制备另取5支18 mm×180mm的试管，分别装9 mL蒸馏水，塞上硅胶塞，包扎后灭菌。
4. 灭菌：加压蒸汽灭菌法（1）向灭菌器内加入清洁软水（蒸馏水更好）：水位应不超过水位线标志，以免水进入灭菌桶内，浸湿被灭菌物品。
（2）堆放物品并注意留有空隙：将需要灭菌的物品包好后，顺序放在灭菌桶内的筛板上。
（3）盖上盖子：对称地坚固螺栓，注意不宜旋得太紧，以免损坏橡胶密封垫圈。
（4）打开电源置灭菌温度：通过压力-温度控制器旋钮预置，温度预置范围在120℃左右，时间控制在20分钟，顺时针方向旋转旋钮，灭菌温度预置值减小；反之，预置值增大。
可根据需要确定预置灭菌温度。
（5）设置灭菌时间：按照不同的需要，将计时器旋钮按顺时针方向旋至所需的时间刻度上，当达到预置的灭菌温度时，计时指示灯亮，计时器自动计时。
（6）加热，排放冷空气。
（7）灭菌。
（8）结束（关电源）：此时切忌立即放气，一定要待指针接近“零”位时，再打开放所阀，取出物品，排掉锅内剩余水。
灭过菌的培训基冷却后置于37℃恒温箱内培养24h，若无菌生长则放入冰箱或者阴凉处保存备用。
5．水样的采取取距湖水面10-15cm深层水样，先将灭菌的带玻璃塞瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻转过来，除去玻璃塞，水即流入瓶中，盛满后，将瓶塞盖好，再从水中取出，最好立即检查，否则需放入冰箱中保存。
6．细菌总数测定（1）取加入9ml水的灭菌试管。
取1ml水样注入第一管9ml灭菌水内，摇匀，再自第一管取1ml至下一管灭菌水内，如此稀释到第三管，稀释度分别为10-1、10-2与10-3。
一般中等污秽水样，取10-1、10-2、10-3三个连续稀释度，污秽严重的取10-2、10-3、10-4三个连续稀释度。
（2）自最后一个稀释度的试管中各取1ml稀释水加入空的灭菌培养皿中，每一稀释度做两个培养皿。
（3）各倾注15ml已溶化并冷却至45℃左右的培养基，立即放在桌上混匀。
（4）凝固后倒置于37℃培养箱中培养24小时。
7.细菌的纯种分离及培养（平板表面涂布法）（1）取样：用无菌瓶从人工湖水中取一定量的湖水，迅速带回实验室。
（2）融化培养基：加热融化培养基，待用。
（3）稀释样品：将1瓶90ml和5管（根据预备实验数据变化）9mL 的无菌水排列好，按10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6依次编号。
用1mL无菌移液管吸取1mL10-1浓度菌液于9mL无菌水中，将移液管吹洗3次，摇匀，即为10-2浓度菌液。
同法依次稀释到10-6。
（4）倒平板：将融化并冷却至50摄氏度左右的培养基倒入无菌培养皿中，冷凝后即成平板。
（5）涂布：用无菌移液枪吸取一定量的经适当稀释的样品液于平板上，用三角刮刀在平板上旋转涂布均匀。
（6）培养：送恒温培养箱培养（正置），如果培养时间较长，次日把培养皿倒置继续培养。
8. 细菌的接种（1）准备：接种前将操作台擦净，将所需的物品整齐有序地放在桌上，用75%酒精擦手。
（2）编号：在试管上贴标签，注明菌号、接种日期、接种人姓名、组别等。
贴在距试管口约2～3cm的位置。
也可用记号笔注明上述内容。
（3）点燃：酒精灯。
（4）手持试管：将经上述分离培养后的培养皿菌落和一支含Cu离子的待接斜面培养基用大拇指和其它四指握在左手中，使中指位于两试管之间部位。
斜面面向操作者，并使它们位于水平位置，而且管口齐平。
（5）灼烧接种环：右手先将硅胶塞拧松，以便接种时容易拔出。
右手拿接种环，在火焰上将环烧红以达到灭菌的目的。
（6）接种：在火焰旁，用右手小指、无名指和手掌夹住硅胶塞将其拔出。
试管口在火焰上微烧一周，将管口上可能沾染的少量菌或带菌尘埃烧掉。
将烧过的接种环伸入菌种管内，使环端轻触内管壁，冷却后取种，立即转移至待接种试管斜面上，自斜面底部开始向上做“Z”形致密划线直至斜面顶端。
抽出接种环，试管过后塞上硅胶塞，将试管放回试管架。
灼烧接种环，杀灭环上细菌。
送培养箱（37℃）培养，待看结果。