柱前衍生高效液相色谱法测定食物中氨基酸含量

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柱前衍生化-超高效液相色谱法快速测定酱油中的18种氨基酸

酱油中１８种氨基酸的加标回收率为９．％～】３７０２０．％。该方法前处理过程简单，离时间短，检测酱油中氨基酸分是
的有效手段，用于酱油的质量评定。可关键词：前衍生；高效液相色谱；一基喹啉基一羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯；基酸；油柱超６氨 Ⅳ一氨酱中图分类号：６８０５文献标识码：Ａ文章编号：０ —７３２ｌ）２ｌ５ —４１０８ｌ（００１一ｌ４００
摘要：立了一种６氨基喹啉基一羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯（Ｑ柱前衍生，高效液相色谱（Ｌ对酱油中建一 Ⅳ一ＡＣ）超ＵＰＣ）１氨基酸进行快速分离检测的方法。采用ＢＨＣ８色谱柱分离，２０ｎｔ长下检测，乙酸铵一酸一腈－８种Ｅ１在６ｌ波Ｔ以乙乙水和乙腈一乙酸为流动相．流动相梯度和流速梯度相结合，ｌｎ内实现了ｌ将在２ｍｉ８种氨基酸衍生物的分离。方法的线性回归系数（均大于０９９，出限为００２～．２ｍｇＬ，ｒ）．９检．３０１／日间相对标准偏差（Ｓ为０７％～．５在ＲＤ）．２４０％，
２０年１０１２月
Ｄｅｃｍｂｅ０１ｅｒ２０
色
谱

高效液相色谱法检测食品中氨基酸的方法研究

[检验医学]高效液相色谱法检测食品中氨基酸的方法研究仲岳桐,何彩,陈春晓摘要:目的应用高效液相色谱法测定食品中氨基酸。

方法使用带自动衍生功能的自动进样器进行在线衍生,梯度分离,利用二极管阵列-荧光检测器串联分析。

结果在线衍生技术克服了离线手工衍生的偏差,双检测器联用技术能有效提高定性的可靠性和定量的准确性。

结论研究的方法测定重复性好,灵敏度高,定性定量准确,结果满意。

关键词:高效液相色谱;氨基酸;食品中图分类号:TQ460.7 文献标识码:B 文章编号:1009-9727(2008)1-132-03Determination of amino acids in foods by high performance liquid chromatography.ZHONG Yue-tong,HE Cai,C HEN Chun-xiao.(Shenzhen Municipal Center for Disease Control and Prevention,Shenzhen518020,Guangdong,P R China) Abstract:Objective To determine amino acids from foods by high performance liquid chromatography Methods Food samples were collected and determined by using autoinjector with online derivati on function,gradient elution program and tandem de tectin g technicque Results The online derivation technicque overcame the deviation arised from manual operating and serial de tectin g technicque could enhance both reliabili ty and accuracy of determinati on Conclusion The method is accurate,quati tativelyand qualitatively as well as a reproductive and satisfactory resultsKey w ords:High performance liquid chromatography;Amino acids;Foods氨基酸分析是食品成份分析的重要组成部分,其研究对象可分为生理体液和食品两大部分,检测方法一般可分为氨基酸分析仪法、离子色谱法、高效液相色谱法等。

柱前衍生高效液相色谱法测定蚕蛹提取物中氨基酸含量

柱前衍生高效液相色谱法测定蚕蛹提取物中氨基酸含量梁卫青;魏克民;浦锦宝;祝永强;郑军献;胡轶娟【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2008(37)8【摘要】目的用柱前衍生法测定蚕蛹提取物中氨基酸含量,方法以磺酰氯二甲胺偶氮苯(DABS-CL)作衍生剂,采用柱前衍生高效液相色谱法(RP-HPLC),YMC-Pack ODS-A柱(250mm×4.6mm,5mm),流动相A为25mol/L KH2PO2,流动相B为乙腈:甲醇=70:30;流速1.5 ml/min梯度洗脱,检测波长436nm,柱温35℃,结果各种氨基酸均具有良好的线性关系(相关系数,=0.9989～0.9999)、精密度(RSD<1.50%)、稳定性(RSD<3.50%)、平均回收率(98.83%～107.83%),测定蚕蛹提取物中氨基酸含量,其含有人体必需氨基酸占总氨基酸含量的40%以上,结论该方法简便实用,分析结果准确可靠,适用于动植物中富有氨基酸含量的测定.【总页数】4页(P42-45)【作者】梁卫青;魏克民;浦锦宝;祝永强;郑军献;胡轶娟【作者单位】310007,杭州,浙江省中医药研究院;310007,杭州,浙江省中医药研究院;310007,杭州,浙江省中医药研究院;310007,杭州,浙江省中医药研究院;310007,杭州,浙江省中医药研究院;310007,杭州,浙江省中医药研究院【正文语种】中文【中图分类】R2【相关文献】1.AccQ-Tag柱前衍生反相高效液相色谱法测定谷物及食糜中氨基酸含量 [J], 韩粉丽;韩飞;李爱科;陈曦;宋歌;范柳萍;余治权2.柱前衍生-反相高效液相色谱法测定柞蚕蛹蜕中氨基酸 [J], 杨彬;阮长春;刘志;孙光芝3.柱前衍生高效液相色谱法测定中韩泡菜中的氨基酸含量 [J], 贾载凯; 毛新刚; 苏晓岚; 张云; 洒荣波4.柱前衍生高效液相色谱法测定中韩泡菜中的氨基酸含量 [J], 贾载凯;毛新刚;苏晓岚;张云;洒荣波5.柱前衍生高效液相色谱法测定注射用骨肽中15种氨基酸含量 [J], 张雪艳;郭雷;周长明;张建敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

柱前衍生反相液相色谱法测定饲料中氨基酸含量

ｃｍｐｉｅｔｉ５ｍｉｙｕｉｇＣ１ｏｕ．ＲＰ—ＨＰＣｆｌｗｅｙＦＤｄｔｃｉｎｏｌｈｄｗｉｎ２ｎｂｓｎ８ｃｌｍｎｓｈＬｌｄｂＬｅｅｔ．Ｗｈｎｔｅａｉｏａｉｏｃｎｒｔｎｏｏｏｅｎｃｄｃｎｅｔａｉｈｍｏｒｎｅｔｉ０一ｌ０ｐｌｕ，ｈｏｒｌｔｎｃｅｉｉｎｓｏｍｉｏａｉｅｋａｅｏａｎｃｄｃｎｅｔａｉｎｗｒｌａａｇｄｗｉｎ１ｈＯ０ｍｏ／ｌｔｅｃｒｅａｉｏｆｃｅｔｆａｎｃｄｐａｒａｔｍｉｏａｉｏｃｎｔｅｅａｌ — ｏｒｏｂｖ９６．ａｄｔｅｒｃｖｒｅｃｎａｅｏｔｎａｄａｄｔｎｏｍｉｏａｉｒ３９一ｌ９．％．Ｔｅｍｅｈｄｉｓｍｐｅ，ｏｅ０．９ｎｈｅｏｅｙｐｒｅｔｇｆｓａｄｒｄｉｏｆａｎｃｄｗｅｅ８．％ｉＯ８ｈｔｏＳｉｌ
（Ｍ０ＣｃｌｒｅＦｈｏｄ）ｗａｓｄｉｈｔｄｎｔｅｄｔｒｎｔｎｏｍｉｏａｉｓｉｅｄｂｉｓｕｅｎｔｅｓｙｏｈｅｅｍｉａｉｆａｎｃｄｎｆｅｙＲＰ—ＨＰＬｕｏＣ．Ｔｅａａｙｉｗａｃｈｎｌｓｓｓａ —
ｂｔｔＳｓｎｉｌｎｃｕａｅｎｏｌｅａｐｉｄｆｒｄｔｒｉａｉｎｏｉｏａｉｎｆｅ．ｕｅｓｂｅａｄａｃｒｔ．ａｄｃｕｄｂｐｌｏｅｅｎｔａｎｃｄｉｅｄｉｉｅｍｏｆｍ

AQC柱前衍生化高效液相色谱法测定宝乐果中的游离氨基酸

AQC柱前衍生化高效液相色谱法测定宝乐果中的游离氨基酸刘博;韩晓东;张敏婷;徐方方;周文;焦红【摘要】To determine and analyze free amino acids in Borojo.The sample was derivatized with 6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate (AQC) and then was analyzed with high-performance liquid chromatography (HPLC).HPLC was performed on a Phenomenex C18 (250mm × 4.6 mm,5 μm) column with gradient elution of deionized water (A),acetonitrile (B) and 10 mmol/L ammonium acetate buffer solution (adjusted to pH 5.10 with glacial acetic acid) (C) at the flow rate of 0.8 ～1.0 mL/min,detected with Ultra Voilet (UV) at 248 nm.Linear relationship equations were obtained with 18kinds of amino acids in the range of0.02 ～ 0.5 mmoL/L,and their correlation coefficients were in the range of 0.998 3 ～ 0.999 2.Fourteen amino acids were detected and average recoveries of those added were in the range of 96.9 ％～ 106.9 ％ and RSD values were in the range of 0.67 ％～ 3.07 ％.The method could be used for determination of content of free amino acids in Borojo.%为了测定宝乐果中游离氨基酸的种类以及含量.该文的样品用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯(AQC)柱前衍生后进行高效液相色谱(HPLC)分析.采用Phenomenex Luna C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,柱温为35℃；流动相A为去离子水,流动相B为乙腈,流动相C为10 mmol/L醋酸铵缓冲液(以冰醋酸调至pH 5.10),梯度洗脱,流速为0.8～1.0 mL/min;检测波长为248 nm,同时测定宝乐果中的游离氨基酸.结果得:18种氨基酸在0.02～0.5 mmol/L浓度范围内有良好的线性关系,r 均在0.998 3 ～0.999 2之间；宝乐果中测得14种游离氨基酸,其含量范围为0.087 ～2.680 mg/g,平均加样回收率为96.9％～106.9％,RSD为0.67％～3.07％.该方法可用于检测宝乐果中游离氨基酸含量,测定的结果为宝乐果质量研究和评价提供了依据.【期刊名称】《中山大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2013(052)004【总页数】5页(P100-104)【关键词】宝乐果;AQC;游离氨基酸;柱前衍生法【作者】刘博;韩晓东;张敏婷;徐方方;周文;焦红【作者单位】广州中医药大学第二附属医院,广东广州510006;广州中医药大学第二附属医院,广东广州510006;广州中医药大学第二附属医院,广东广州510006;广州中医药大学第二附属医院,广东广州510006;广州中医药大学第二附属医院,广东广州510006;广东出入境检验检疫局,广东广州510623【正文语种】中文【中图分类】O657.7宝乐果 (Borojoa sorbilis Cuter.)是茜草科林果属植物Borojoa patinoi Cuatrec.和Borojoa sorbilis Cuatrec.的成熟果实，产于拉丁美洲厄瓜多尔气候的热带雨林，呈棕褐色，直径达7～12 cm，质量达700～1000 g，88%以上为果浆，黏性很强，味道酸涩［1］，有特殊果香。

邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱法检测珍珠粉中的氨基酸含量

邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱法检测珍珠粉中的氨基酸含量【摘要】目的测定珍珠粉中的氨基酸含量。

方法邻苯二甲醛（OPA）柱前衍生反相高效液相色谱法，采用荧光检测，梯度洗脱。

结果该法在28 min之内分离出15种氨基酸。

结论该法样品用量少、灵敏度高、线性范围宽、重现性好，适于分离大量样品。

【关键词】高效液相色谱；柱前衍生法；氨基酸；珍珠粉Determination of the Contents of Amino Acids in Pearl Powder by RP-HPLC after Pre��column Derivation with O��Phthaldialdehyde (OPA)Abstract：ObjectiveIn this paper， we determined amino acids in pearl powder. Methods A manual pre-column derivation procedure has been developed by reversed-phase HPLC with O-phthalaldehyde and fluorescence detector. Results More than 15 amino acids were separated within 28 min. Conclusion The method is sensitive， precise and shows good repeatability.Key words：High��performance liquid chromatography；Pre��column derivation； Amino acids； Pearl powder随着生命科学和生物工程的发展，氨基酸作为组成生物大分子的基本单元，其分析方法受到重视。

20世纪70年代以后，反相高效液相色谱技术在氨基酸分析中得到广泛应用，使分离时间缩短。

高效液相色谱柱前自动衍生法测定氨基酸含量

河北医科大学学报JO U RN A L OF HEBEI M ED ICA L U NI VER SI T YV o 1.17　No .3　1996高效液相色谱柱前自动衍生法测定氨基酸含量许彦芳　许新民　王永利药理教研室(050017) 摘　要　本文利用高效液相色谱(HP L C )柱前邻苯二甲酝酿(OP A )自动衍生、自动进样程序测定脑组织中谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、牛磺酸和r -氨基丁酸含量。

该法的最低检出限为10nmol /ml ,5种氨基酸峰面积测定值的变异系数平均为2.0±1.3%,线性相关系数平均为0.97±0.03。

关键词　HPL C;氨基酸;OP A ;自动衍生;自动进样HPLC -PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHIC DETERMINATION OFAMINO ACIDS BY AUTOMATIC PRECOLUMN DERIVATIZATIONXu Yan fang Xu Xinmin Wang YongliDep artment of Ph armacologyABSTRACT Glutamate,asparate,glycine,taurine and GABA in brain w ere seperated and determined by HPLC system of the autom atic processes of precolum n o -phthaldialdehydeder iv atization and injection .Average co efficient o f variatio n for peak areas of 5amino acids w as 2.0±1.3%w ith the detectio n lim it o f 50ng.Av erag e line co orelatio n coefficient w as 0.97±0.03.KEY WORDS HPLC ;o -phthaldialdehyde ;amino acids ;automatic derivatizatio n ;au-tom atic injection 生物样品中的微量氨基酸测定在医学领域中占重要地位。

柱前衍生化高效液相色谱法测定百合中的氨基酸含量

Ａｂｓｒｅ：ＲＰＨＰＣｔｏｏｈｅｅｍｉａｉｎｏｍｉｏａｉｎＬⅢｕｗａｓａｌｈｄＯＤＳｐｒｉＣ１ｏｕ（ｔａｔＡＬｍｅｈｄｆｒｔｅｄｔｒｎｔｏｆａｎｃｄｉｍｓｅｔｂｉｅＡｓ２Ｈｙｅｓ１８ｃｌｍｎ４６ｍｍｘ５２０ｍｍ．５ｐｗａｍ）ｓ
ｍ
２～６６ｍｉ．ｆｍ５％－０％：６６３ｎｆｏ８３６２．ｎｆｏ６８２～２ｍｉ．ｒｍ０％～５％ＴｅｒｓｌｈｗｅｈｔｌｉｄｆａｎｃｄｒｂａｎｄｉｌｍｓｅｉｌｒＡｍｉｏ９ｈｅｕｔｓｏｄｔａｋｎｓｏｍｉｏａｉｓｗｅｅｏｔｉｅｎＬｉｕｅｐｃａｌＰｏｓ３ｉｙｎ
ｕｅｔｏｕｉｎＡｆａｃｔｉｔｙａｉｅＴＨＦｎＯＡｃａｅｏｉｉｅｍｅｈｎｌａｂｌｈｓＣｏｕｎｔｍｐｒｔｒ５ ℃ ａｄｄｔｃｉｎａ３ｍＴｈｓｄｗｉｓｌｔｏＡ — ｅｈｌｍｎ．ｈｏＮｒａｄＢｆＮａ — ｃｔｎｔｌ．ｔａｏｓｍｏｉｐａｅｒｅｌｍｅｅａｕｅ３ｎｅｅｔｔ０ｎｏ３ｅＶｏｕａｔｎｏｏｉｈｓｓｒｇａｌｍｎｆｃｉｆＢｍｂｌｐａｅｗａｏｒｍｍｅｎａｌｅｔｎｓｆｌｗｓ０２ｎｆｏ — ０％：２２ｉ．ｒｍＯ％～０％：３２ｉ，ｒｍ０％－５％：ｒｏｅｐｄｌｅｒｉｓｃｉｓａｏｌｉｙｎｏｏ：－２ｍｉ．ｒｍ０％４２～３ｍｎｆｏ４６２－３６ｍｎｆｏ６６

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!"!
样品分析不同食品中氨基酸含量的测定结果见表 3。
表 2 回归方程、线性范围及检测限 Tabie 2 The iinear regression eguation and the iinear ranges of amino acids
氨基酸 Amino acids Asp Ser Giu Giy His Arg Thr Aia Pro Tyr Vai Met Lys Iie Leu Phe 线性回归方程 Linear regression eguation " = 34905 . 19 # + 156824 . 6 " = 44246 . 89 # + 26064 . 99 " = 33442 . 3 # + 100643 " = 56588 . 55 # - 320267 " = 52251 . 17 # + 128165 . 6 " = 83938 . 23 # + 335844 . 3 " = 56982 . 41 # + 110590 . 1 " = 39068 . 44 # + 269224 . 4 " = 45927 . 89 # + 79327 . 17 " = 60066 . 48 # - 22245 . 4 " = 52251 . 17 # + 128165 . 6 " = 61474 . 18 # - 33608 " = 83938 . 23 # + 335844 . 3 " = 56280 . 66 # + 114682 . 6 " = 56982 . 41 # + 110590 . 1 " = 63046 . 17 # - 37357 线性范围 Linear range（ moi / L） ! 10 ~ 80 10 ~ 100 10 ~ 80 10 ~ 100 10 ~ 100 10 ~ 80 10 ~ 100 10 ~ 100 10 ~ 100 10 ~ 100 10 ~ 100 10 ~ 100 10 ~ 80 10 ~ 100 10 ~ 100 10 ~ 100 相关系数 ! Correiation coefficient 0 . 9975 0 . 9996 0 . 9984 0 . 9946 0 . 9980 0 . 9980 0 . 9985 0 . 9914 0 . 9989 0 . 9997 0 . 9980 0 . 9996 0 . 9980 0 . 9986 0 . 9985 0 . 9998
摘要采用柱前衍生高效液相色谱法，测定了食物中天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸等 16 种氨基酸含
量。衍生试剂为 6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯（ AOC），流动相为磷酸盐缓冲溶液、乙腈、水，梯度洗脱。色谱柱为 4 ! 紫外检测。氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性 m 的 Nova-Pak tm C18 柱，关系，相关系数均在 0.99 以上，回收率在 88% ~ 110% 之间，样品测定结果良好。关键词高效液相色谱法，梯度洗脱，柱前衍生，氨基酸
表1 流动相梯度洗脱表
2000-04-30 接受。 ! 1999-11-05 收稿；邮编 265600。 "" 山东省蓬莱市技术监督局，
1092 Tabie 1 Conditions of gradient separation
流速 Fiow rate（mL / min） 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
#
#
#
第9期
苗
虹等：柱前衍生高效液相色谱法测定食物中氨基酸含量
1093
图1 Fig. 1
氨基酸标准及样品的色谱图 The chromatograms of amino acids standard and food sampies
（ amino acids standard）；（ Nestie condensed miik）。1 . aspartate （ Asp），（ Ser）； a. 氨基酸标准 b . 雀巢奶粉 2 . serine 3. （ Giu）；（ Giy）；（His）；（ Arg）；（ Thr）；（ Aia）； giutamate 4 . giycyne 5 . histidine 6 . NH3 ； 7 . arginine 8 . threonine 9 . aianine 10 . （ Pro ）；（ Cys ）；（ Tyr ）；（ Vai ）；（ Met ）；（ Lys ）； 11 . cystine 12 . tyrosine 13 . vaiine 14 . methionine 15 . iysine 16 . proiine （ Iie）；（Leu）；（Phe）。 isoieucine 17 . ieucine 18 . phenyiaianine
2.4
实验部分
（AOC）与氨基酸迅速反应生成在 248 nm 有紫外吸收的高稳定性 2.4.1 衍生反应衍生试剂的脲和羟基琥珀酰亚胺（ NHS），过量的试剂可在慢反应中完全水解，过程如下：
R1 R1 HN R2 氨基酸 Amino acid + NH 0 # N NH N # R2 + 0 NHS 0 H0 N
1094
分析化学
第 28 卷
表 3 样品测定结果 Tabie 3 Determination resuits of amino acids in food sampies
氨基酸 Amino acids （mg / g） Asp Ser Giu Giy His Arg Thr Aia Pro Tyr Vai Met Lys Iie Leu Phe 氨基酸总量 Totai amio acid 维维豆奶粉 Weiwei soy miik powder 23 . 92 8 . 22 43 . 57 6 . 82 2 . 68 6 . 10 6 . 07 7 . 61 11 . 17 6 . 50 8 . 87 3 . 22 12 . 70 8 . 71 15 . 96 9 . 94 182 . 07 猪肉松 Meat powder 25 . 27 8 . 59 51 . 51 8 . 12 4 . 58 6 . 05 8 . 14 14 . 05 9 . 73 4 . 71 10 . 98 5 . 33 21 . 01 10 . 02 20 . 25 9 . 93 218 . 28 血粉 Biood powder 74 . 86 31 . 66 95 . 97 28 . 56 30 . 72 13 . 90 31 . 68 63 . 78 29 . 29 27 . 09 45 . 13 14 . 10 68 . 90 26 . 68 82 . 23 45 . 56 710 . 11 雀巢奶粉 Nestie condensed miik 7 . 12 4 . 05 20 . 91 1 . 75 1 . 64 0 . 75 2 . 86 2 . 90 8 . 25 1 . 85 5 . 17 1 . 84 7 . 30 3 . 92 8 . 57 4 . 02 82 . 92 完达山奶粉 Wandashan miik powder 16 . 94 11 . 00 50 . 73 5 . 02 3 . 61 2 . 58 6 . 91 6 . 56 20 . 48 8 . 04 12 . 76 5 . 88 17 . 03 9 . 73 20 . 52 9.8 205 . 99
"
"#!
实验部分
试剂浓盐酸（优级纯）；苯酚（分析纯）；混合氨基酸标准液（ Waters 公司），含 17 种蛋白水解氨基
酸：天冬氨酸（Asp）、丝氨酸（ Ser）、谷氨酸（ GIu）、甘氨酸（ GIy）、组氨酸（ His）、精氨酸（ Arg）、苏氨酸（ Thr）、丙氨酸（AIa）、脯氨酸（ Pro）、胱氨酸（ Cys）、酪氨酸（ Tyr）、缬氨酸（ VaI）、蛋氨酸（ Met）、赖、异亮氨酸（ IIe）、亮氨酸（ Leu）、苯丙氨酸（ Phe）、除胱氨酸浓度为 1.25 mmoI / L 外，其氨酸（ Lys）余 16 种氨基酸浓度各为 2.5 mmoI / L；流动相 A，磷酸盐缓冲溶液（Waters 公司），按 1 1 10 用双蒸水稀释， pH 4 . 95。亦可自行配制， pH 值应准确调节。配制方法： 19.0 g 三水醋酸钠， 1.72 g 三乙胺溶于 1000 mL 水，用磷酸调 pH 至 4 . 95，加适量 EDTA，用 0.45 ! 乙 m 滤膜过滤。流动相 B，腈；流动相 C，双蒸水；硼酸盐缓冲溶液（Waters 公司）；衍生试剂 6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯（AOC）（Waters 公司），用时加入 1 mL 乙腈，混匀于 55C 烘箱加热 10 min 至溶解。仪器 "#" 高效液相色谱仪（ Waters 公司，；真空泵（ WP 600 泵， 2487 紫外检测器， PC800 工作软件）日本）；（昆山市超声波仪器厂）， 15， KO-250 型超声波清洗器 XW-80 型涡旋混合器。 "#$ 色谱条件（Waters 公司）；柱温，检测波长，进样量色谱柱，高效 4 ! m Nova-pak tm C18 柱 37C ； 248 nm；梯度洗脱条件，如表 1。 10 ! L，
! ! ! ! "
#
0 0 AOC
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N
衍生氨基酸 Derivatized amino acid