超临界流体色谱-Agilent

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《超临界色谱》课件

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校准
定期对仪器设备进行校准,确保检测 结果的准确性和可靠性。
保养记录
建立保养记录,记录仪器设备的维护 和保养情况,方便追踪和管理。
03
超临界色谱的实验技术
实验前的准备
确定实验目标
准备色谱柱
明确实验目的,如分离纯化、检测分析等 ,以便选择合适的色谱条件和材料。
根据实验需求选择合适的色谱柱,确保其 稳定性和重现性。
准备样品
准备超临界流体
对样品进行预处理,如溶解、过滤、稀释 等,以满足实验要求。
选择合适的超临界流体,如二氧化碳、甲 醇等,并进行纯化和调节。
实验操作步骤
01
安装色谱柱
将色谱柱正确安装在色谱仪中,确 保密封性和稳定性。
进样分析
将样品注入色谱仪,开始进行分离 分析。
03
02
调节实验条件
根据实验目标和样品性质,调节温 度、压力、流速等实验参数。
04
超临界色谱的分离机制
分离机制的原理
流体在超临界状态下具有高扩散系数和低粘度, 有利于溶质的快速传递和扩散。
超临界流体对溶质的溶解能力随压力的增加而增 强,从而实现溶质的分离。
通过调节压力、温度等参数,实现对不同溶质的 分离。
分离机制的应用
01
在食品、药品、环保等领域用于分离和纯化天然产 物、药物成分和有害物质。
收集数据
记录色谱图、峰形等信息,以便后 续分析。
04
实验结果分析
数据处理
对收集的数据进行整理、分析和处理,提取 有用的信息。
结果解释
根据数据处理结果,解释样品的组成和性质 ,评估分离效果和纯度。
结果验证
通过重复实验或对比实验,验证结果的可靠 性和准确性。

安捷伦的非水反相色谱柱

安捷伦的非水反相色谱柱

安捷伦的非水反相色谱柱1.引言1.1 概述非水反相色谱(reversed-phase liquid chromatography,简称RP-LC)是一种常用的色谱技术,广泛应用于药物分析、天然产物分离纯化、环境监测、食品安全等领域。

它以疏水相固定相和亲水相流动相作为相互作用的基础,利用样品中溶解物与固定相之间相互作用的差异进行分离。

相比于传统的正相色谱,非水反相色谱具有更广泛的适应性和更高的分离效率。

在非水反相色谱中,疏水相固定相多采用疏水有机化合物修饰的硅胶或高性能液相色谱柱,其表面具有一定的亲水性。

亲水相流动相一般为酸性或碱性溶液,其中溶解有机溶剂,如乙腈、甲醇和水。

安捷伦是一家知名的色谱柱生产厂家,其研发生产的非水反相色谱柱具有许多优点。

首先,安捷伦的非水反相色谱柱具有优异的耐久性和稳定性,能够在高温、高压的条件下仍然保持良好的性能。

其次,该色谱柱具有良好的峰形和峰容,能够提供高分离效率和分离能力。

此外,安捷伦的非水反相色谱柱还具有较低的液相流速,可以减少溶剂消耗。

总的来说,安捷伦的非水反相色谱柱是一种优秀的分析工具,广泛应用于各个科研领域和实验室环境。

它能够快速、准确地分离和定量目标分析物,为科研人员提供有力的支持和保障。

随着科技的不断进步和需求的不断增长,安捷伦的非水反相色谱柱在未来将有更广阔的应用前景。

1.2 文章结构文章结构部分主要是对整篇文章的组织和布局进行介绍,以指导读者对文章内容的理解和阅读。

本文的结构主要包括引言、正文和结论三个部分。

引言部分是文章的开端,目的是引导读者进入主题,并提出文章的概述、结构和目的。

在本文的引言部分,首先会概述非水反相色谱柱的基本原理和应用领域,以及介绍安捷伦的非水反相色谱柱在该领域的特点和优势。

接下来,将说明本文的结构,即引言、正文和结论部分的内容和顺序。

正文部分是对非水反相色谱柱的基本原理和安捷伦的非水反相色谱柱的特点进行详细阐述。

在2.1小节中,将详细介绍非水反相色谱柱的基本原理,包括其与传统的水相反相色谱柱的区别和优势。

超临界CO2流体萃取技术

超临界CO2流体萃取技术

超临界CO2流体萃取技术随着中国城镇化和工业化的加快,超临界CO2流体萃取技术就成了不可缺少的一种技术了。

这是店铺为大家整理的,仅供参考!超临界CO2流体萃取技术篇一超临界CO2流体萃取软体家具中的新型溴系阻燃剂摘要:本文以软体家具中的溴系阻燃剂为研究目标,建立了超临界CO2流体萃取/气相色谱-质谱联用法测定2,2’,4,4’,5,5’-六溴联苯(BB-153)和1,2-二溴-4-(1,2-二溴乙基)环己烷(TBECH)的检测方法。

建立的方法灵敏、可靠、环保,可用于软体家具用软质阻燃聚氨酯泡沫中溴系阻燃剂的检测。

关键词:新型溴系阻燃剂,超临界CO2流体萃取,气相色谱-质谱联用法随着中国城镇化和工业化的加快,建筑材料的需求增长迅速。

由于溴系阻燃剂具有非常出色的阻燃性能,在电子产品、纺织品、塑料等产品中大量使用。

据统计,2005年-2010年,中国每年溴系阻燃剂的产量为7.0×107kg-8.7×107kg,未来还将以7%-8%的速度增长[1]。

研究表明某些溴系阻燃剂对人体神经系统、内分泌系统和生殖系统产生较大的危害。

斯德哥尔摩已把六溴联苯、八溴联苯醚、十溴联苯醚列入持久性有机污染物禁用名单[2]。

软体家具包括沙发、床垫、汽车内饰材料,主要成为聚氨酯。

2010年11月上海静安区一正在进行外墙节能改造的教师公寓发生大火,造成了58人死亡。

2013年12月广州建业大厦发生火灾,损失4000万。

这其中聚氨酯材料的燃烧占据了大部分原因。

由于聚氨酯具有较大的火灾危险性,众多厂家都把提高其阻燃性能列为重要目标。

国外对溴系阻燃剂的添加有严格的限制,而国内标准制定滞后,目前还没有对软质聚氨酯使用何种阻燃剂提出具体的要求,这就加大了溴系阻燃剂滥用可能性,软体家具中随着使用过程溴系阻燃剂有可能接触到人体,造成潜在伤害。

因此建立软质聚氨酯材料中的溴系阻燃剂检测方法非常有必要。

1 实验部分1.1原料与试剂聚醚多元醇(PPG-5623,羟值28.0 KOHmg/g,官能度为3,中海壳牌),白聚醚(POP CHF-628,羟值28.0KOHmg/g,官能度为3,江苏长化聚氨酯科技有限公司),甲苯二异氰酸酯(TDI 80/20,官能度为2,上海巴斯夫),二月桂酸二丁基锡(PUCAT L-33,佛山市普汇新型材料有限公司),辛酸亚锡(YOKE T-9,江苏雅克科技股份有限公司),硅油 L-540/STL DR, 2,2’, 4,4’,5,5’-六溴联苯(BB-153)和1,2-二溴-4-(1,2-二溴乙基)环己烷(TBECH)(百灵威科技有限公司),去离子水(自制)、甲醇(≥95% AR)、乙醇(≥95%,AR)、丙醇(≥95%,AR)购自广州化学试剂厂。

超临界流体色谱法的原理

超临界流体色谱法的原理

超临界流体色谱法的原理
超临界流体色谱法(SFC)是一种高效分离技术,它将超临界流体作为载气相。

超临界流体是指在临界点以上,同时具有气态和液态特性的物质。

超临界流体具有高扩散系数、低黏度、可调节的溶解性和高气相密度等优点,因此能够提供高效的质谱离子化和分离结果,是一种高效分离分析技术。

SFC原理主要是利用超临界流体作为移动相,样品被分装入较短的管柱或固相萃取柱中,通过超临界流体的压缩和调节,将样品获得良好的溶解度,然后通过柱相互作用分离样品成分,实现不同化合物的分离。

在分离过程中,超临界流体的压力和温度控制很重要,它们影响着超临界流体的性质和分离效率。

此外,选择合适的柱、填料和移动相等因素也会影响分离效果。

总之,SFC利用超临界流体和柱相互作用的分离机理,实现了高效分离和分析,具有分离效率高、选择性好、操作简单等优点。

在生物、化学、环保等领域有广泛的应用。

超临界CO2流体萃取技术在天然物提取上的研究进展

超临界CO2流体萃取技术在天然物提取上的研究进展

萃取茉莉精油时, 添加甲醇和丙酮等夹带剂 ! 结果发现 茉莉香料的特征组分, 顺 + 茉莉酮 ( %&*+G:*C/9-) 的萃取
[4H] E==! 徐海军 率提高了 $<< 等人对 012 过程中, 夹带剂的
作用及其机理和选择原则作了详细的评述 ! 但是, 夹带剂一般是液体, 它们会与被萃物相互 混溶, 因此萃取后, 必须设法除去精油中的夹带剂 ! !!%
[4D] 酮等 ! F:/ 在 4$= >?:、 用超临界 "#$ 流体 6= @ 下,
系统 ! 其典型流程见图 4 ! 原料加入萃取器中形成固定 床, 超临界 "#$ 流体用泵连续的从萃取器的底部通入 萃取器, 萃取后含有精油的超临界 "#$ 流体从萃取器 的顶部引出, 进入分离器中, 减压, 分离出萃取物 !
[,] [-] [/%] 展 和萧效良 等人对 ?@A 技术在香料工 ’ 葛发欢
出特定的成分的新型分离技术
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临界温度 ($/ ’ /B ) 和临界压力 (& ’ $*& CD8) 较低, 故操 作条件相对较温和 ’ 由于超临界 !"# 流体密度接近于 液体, 因而具有很大的溶解能力, 而粘度却接近于气 体, 其扩散能力又比液体大 /%% 倍以上 ’ 并且, 其溶解 能力和选择性很方便的通过改变压力和温度进行调 节, 萃取速率快, 操作时间短, 所以一直受到大家的重 视’ 医药、 香料和天然色素等领域的 ?@A 技术在食品、 天然物提取分离上的应用研究, 一直是 ?@A 技术研究 国外这方面 最活跃的领域 ’ 受历史和传统习惯的影响, 的研究主要集中在天然香味物、 调味品和天然色素的
[44] [46 A 4<] 者 也使用同样的流程来除去超临界 "#$ 流体在 萃取精油时共萃的蜡质和其它大分子化合物杂质 ! 比

超临界流体色谱-Agilent

超临界流体色谱-Agilent

超临界流体色谱超临界流体色谱基础导论Terry A. Berger本文中的信息、说明和指标如有变更,恕不另行通知。

© 安捷伦科技公司,20152015 年 7 月 1 日,中国印刷5991-5509CHCN目录目录 III前言 VI作者简介 XI引言 XIII符号 XIV缩写 XIV1 超临界流体色谱简介 11.1 什么是 SFC 11.2 为什么采用 SFC 21.3 SFC 能够分离哪些化合物 121.4 这一名称的含义 162 流动相 192.1 为什么使用 CO2 192.2 使用 100% CO2 212.3 改性剂或共溶剂 232.4 添加剂 312.5 添加水以扩展溶质极性 343 固定相 353.1 材料 353.2 非手性键合相 353.3 固定相比较 403.4 填料粒径与色谱柱尺寸之间的关系 413.5 推荐的色谱柱尺寸 453.6 用于手性分离的色谱柱 48III4 流动相变量对保留值和选择性的影响 494.1 改性剂浓度 494.2 温度 504.3 压力 534.4 流速 554.5 可控变量对保留时间和选择性的影响概述 575 方法开发 585.1 溶质与固定相极性的匹配 585.2 极性窗口 605.3 入门指南 605.4 极性溶质 615.5 低极性溶质 645.6 多变量方法 656 非手性分离 666.1 案例研究 1 —典型的低极性样品 666.2 案例研究 2 —中等极性样品 716.3 案例研究 3 —磺胺类药物 836.4 其他结果 897 手性分离 907.1 背景 907.2 对映体过量率测定 917.3 用于手性分离的正相技术 917.4 可控变量对手性分离的影响 937.5 开发手性方法 98 IV8 SFC 定量分析 103 8.1 验证阶段 103 8.2 开发方法用于定量分析饮料和食品中的山梨酸盐、苯甲酸盐和咖啡因 105 8.3 校正 108 8.4 苯甲酸盐、山梨酸盐和咖啡因的定量分析结果总结 1168.5 手性分离 1169 仪器注意事项 121 9.1 泵 121 9.2 UV 检测器优化 124 9.3 双梯度 137 9.4 自动进样器注意事项 138 9.5 其他 146 9.6 SFC 的超高性能 148 9.7 在 SFC 与 HPLC 之间切换的混合型系统 150 9.8 质谱接口 154 9.9 其他检测器 156参考文献159V前言作者 Terry Berger 在我们如今称之为超临界流体色谱 (SFC) 的领域中拥有独特的丰富经历,是撰写本基础导论的不二人选。

安捷伦 Agilent 1290 Infinity ELSD 蒸发光散射检测器说明书

安捷伦 Agilent 1290 Infinity ELSD 蒸发光散射检测器说明书

Agilent 1290 Infinity 蒸发光散射检测器(ELSD)适用于低分子量化合物前言由于不依赖化合物的光学特性,蒸发光散射检测器(ELSD) 非常适合检测没有UV 发色团的分析物。

Agilent 1290 Infinity ELSD 是一款高性能的ELSD ,得益于安捷伦近20 年的ELSD 设计制造经验。

1290 Infinity ELSD 是唯一能够进行低温操作的ELSD ,为热不稳定分析物提供了无可比拟的检测性能。

1290 Infinity ELSD 设计用于分析所有的化合物,蒸发温度可低至10 °C ,能够为30 °C 以下具有显著挥发性的化合物提供最高灵敏度。

进样过程中气流和温度的程序控制消除了溶剂的梯度效应,最大程度提高了响应,可获得更准确的检测结果。

要实现对进样物质中所有成分的高灵敏度检测,1290 Infinity ELSD 是适用于所有应用类型的理想ELSD 。

主要优势•高灵敏度可为低至纳克级的所有化合物提供优异的响应•采用帕尔帖冷却的蒸发管可提供低至10°C 的低温操作,可防止热不稳定化合物(其它ELSD 无法检测)发生降解•进样时通过可编程的Dimension 软件进行实时控制,确保在整个分析过程中保持最高灵敏度•采用Dimension 软件进行实时气体编程,消除了梯度洗脱过程中的溶剂增强效应,可获得出色的定量结果•低扩散性能与高数据输出速率,是快速LC 应用的理想选择•低于2% RSD 的极佳重现性将为您提供可靠而精确的实验结果产品说明实时气体管理,可消除溶剂效应,在梯度过程中保持一致的响应。

标准仪器控制和数据采集兼容多种供应商的软件平台,因此不需要模数转换器。

光源强度的即时调节可有效节约分析时间。

所有这些特性均整合在这一市面上最小巧的ELSD中。

1290 Infinity ELSD 是LC/MS 技术强有力的补充,并且拥有无与伦比的灵活性和灵敏度,是复杂应用的理想ELSD。

超临界流体萃取技术及其应用简介

超临界流体萃取技术及其应用简介

超临界流体萃取技术及其应用简介一、本文概述《超临界流体萃取技术及其应用简介》一文旨在全面介绍超临界流体萃取(Supercritical Fluid Extraction,简称SFE)这一先进的分离和提取技术,以及其在各个领域的广泛应用。

本文将概述超临界流体萃取技术的基本原理、特点、优势以及在实际应用中的成功案例,从而揭示这一技术在现代科学和工业中的重要地位。

超临界流体萃取技术利用超临界流体(如二氧化碳)的特殊性质,通过调整压力和温度实现对目标组分的有效提取。

与传统的提取方法相比,超临界流体萃取具有操作简便、提取效率高、溶剂残留低、环境友好等诸多优点,因此受到广泛关注。

本文将从理论基础入手,详细阐述超临界流体萃取技术的原理及其在不同领域的应用。

通过案例分析,我们将展示这一技术在医药、食品、化工、环保等领域取得的显著成果,以及其对现代工业发展的推动作用。

我们将对超临界流体萃取技术的发展前景进行展望,以期为读者提供全面的技术信息和应用参考。

二、超临界流体萃取技术的基本原理超临界流体萃取(Supercritical Fluid Extraction,简称SFE)是一种先进的提取分离技术,其基本原理是利用超临界状态下的流体作为萃取剂,从目标物质中分离出所需组分。

超临界流体指的是在温度和压力超过其临界值后,流体既非液体也非气体的状态,具有介于液体和气体之间的独特物理性质,如密度、溶解度和扩散系数等。

在超临界状态下,流体对许多物质表现出很强的溶解能力,这主要得益于其特殊的物理性质。

通过调整温度和压力,可以控制超临界流体的溶解能力和选择性,从而实现对目标组分的有效提取。

常用的超临界流体包括二氧化碳(CO₂)、乙烯、氨等,其中二氧化碳因其无毒、无臭、化学性质稳定且易获取等优点,被广泛应用于超临界流体萃取中。

在超临界流体萃取过程中,目标物质与超临界流体接触后,其中的目标组分因溶解度差异而被选择性溶解在超临界流体中。

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超临界流体色谱超临界流体色谱基础导论Terry A. Berger本文中的信息、说明和指标如有变更,恕不另行通知。

© 安捷伦科技公司,20152015 年 7 月 1 日,中国印刷5991-5509CHCN目录目录 III前言 VI作者简介 XI引言 XIII符号 XIV缩写 XIV1 超临界流体色谱简介 11.1 什么是 SFC 11.2 为什么采用 SFC 21.3 SFC 能够分离哪些化合物 121.4 这一名称的含义 162 流动相 192.1 为什么使用 CO2 192.2 使用 100% CO2 212.3 改性剂或共溶剂 232.4 添加剂 312.5 添加水以扩展溶质极性 343 固定相 353.1 材料 353.2 非手性键合相 353.3 固定相比较 403.4 填料粒径与色谱柱尺寸之间的关系 413.5 推荐的色谱柱尺寸 453.6 用于手性分离的色谱柱 48III4 流动相变量对保留值和选择性的影响 494.1 改性剂浓度 494.2 温度 504.3 压力 534.4 流速 554.5 可控变量对保留时间和选择性的影响概述 575 方法开发 585.1 溶质与固定相极性的匹配 585.2 极性窗口 605.3 入门指南 605.4 极性溶质 615.5 低极性溶质 645.6 多变量方法 656 非手性分离 666.1 案例研究 1 —典型的低极性样品 666.2 案例研究 2 —中等极性样品 716.3 案例研究 3 —磺胺类药物 836.4 其他结果 897 手性分离 907.1 背景 907.2 对映体过量率测定 917.3 用于手性分离的正相技术 917.4 可控变量对手性分离的影响 937.5 开发手性方法 98 IV8 SFC 定量分析 103 8.1 验证阶段 103 8.2 开发方法用于定量分析饮料和食品中的山梨酸盐、苯甲酸盐和咖啡因 105 8.3 校正 108 8.4 苯甲酸盐、山梨酸盐和咖啡因的定量分析结果总结 1168.5 手性分离 1169 仪器注意事项 121 9.1 泵 121 9.2 UV 检测器优化 124 9.3 双梯度 137 9.4 自动进样器注意事项 138 9.5 其他 146 9.6 SFC 的超高性能 148 9.7 在 SFC 与 HPLC 之间切换的混合型系统 150 9.8 质谱接口 154 9.9 其他检测器 156参考文献159V前言作者 Terry Berger 在我们如今称之为超临界流体色谱 (SFC) 的领域中拥有独特的丰富经历,是撰写本基础导论的不二人选。

他早期与 SFC 的接触多属偶然,并未特别关注,但后来逐渐开始了深入了解。

他与 SFC 相关从业人员保持有近 40 年的联系,并拥有 35 年以上的直接经验。

近 60年前(1958 年),Jim Lovelock 率先提出 SFC,他在 20 世纪 80 年代和 90年代与作者就 SFC 进行了大量讨论,成为作者的私人朋友。

Ernst Klesper 于 1962 年通过实验展示了 SFC,采用高密度氯氟烃作为流动相对金属卟啉进行分离。

作者后来与 Klesper 教授在很多场合有过交流(从 20 世纪 70 年代后期到 80 年代中期在美国和德国),并就 SFC 进行过大量讨论。

在 20 世纪 60 年代和 70 年代,该技术停滞不前,全球每年最多只有十几个研究组做出零星的科学贡献。

应用领域倾向于将气相色谱 (GC) 扩展至分子量更大、沸点更高、相对非极性的溶质。

20 世纪 70 年代早期,作者在印第安纳州普渡大学攻读研究生,当时隔壁实验室是颇受尊敬的色谱专家 L.B.“Buck”Rodgers 的实验室。

自参加过 1971 年的一次科学研讨会之后,他再次决心探索这一全新的色谱形式。

流动相的压力控制是主要的可控变量,压力从低到高的程序是那个时期的常用操作。

那个时期的所有设备都是自制的,仪器控制性较差,人们对流动相的理化特性最多也只是取得初步了解。

Rodgers 利用仓库中的超高压加氢泵,并使用 2 英寸厚的家用泡沫绝缘材料制造了一个看起来像小棺材的约 4 英尺长的柱温箱。

色谱柱为 30 英寸长或更长,并填充以具有宽粒径分布的不规则颗粒。

作者看着这些开发进展,回想当时曾经怀疑这一奇特的色谱形式是否有用。

Rodgers 的结果表明沿着色谱柱柱长的密度梯度是个严重的问题。

这一结果及随后 Milos Novotney 的研究似乎表明该技术不可能得到与当前高效液相色谱 (HPLC) 相媲美的结果。

这一看法在一定程度上阻碍了填充柱 SFC 的后续研究。

VI作者曾于 20 世纪 70 年代早期在伦敦帝国学院接受过有关 HPLC 的培训,那时他开发出了用于 HPLC 的安培电化学检测器。

在巴西教学一年后,他在俄亥俄州克里夫兰参与了大量有关航天仪器的开发项目。

然后,作者于 1979 年开始供职于惠普公司,并加入 Avondale 部门的研究小组。

惠普实验室或 Avondale 部门的所有科学家或工程师 Dennis Gere、Henk Lauer、Doug McManigill 和 Harry Weaver 在当年的匹兹堡会议上就高密度气相色谱做了一系列报告(作者正是在此次会议上获得聘任)。

这些报告中的某些成果随后发表于诸如Analytical Chemistry和Science等期刊以及相关的应用简报中。

这些工作引导了一项客户需求,促使了商品化套装的开发,从而使 Hewlett-Packard HP 1084 型 HPLC 仪器转化为SFC 系统。

因此,商品化 SFC 就此诞生。

这一版本的 SFC 使用机械反压调节器、二元泵和组分程序,非常类似于HPLC。

流速、组分、柱温和色谱柱出口压力均独立控制。

与先前的自制仪器不同,该系统不存在压力程序。

随着粒径仅为 3 µm 的球形硅胶颗粒相关大量研究工作的进展,色谱柱更加现代化。

作者所在的研究组承担了该装备的设计工作。

几乎在使用纯 CO2压力程序的毛细管型 SFC 问世的同时,惠普公司推出不兼容 SFC 的 HP 1090 HPLC 仪器,取代了过时的 HP 1084 仪器。

Milos Novotny 和 Milton Lee 是毛细管 SFC 发展的背后推手。

本书作者所在的惠普公司研究小组那时刚刚开发出熔融石英毛细管色谱柱,该型色谱柱能够耐受毛细管 SFC 所必需的高压(400 至 600bar)条件。

Milton Lee 是将固定相键合到毛细管色谱柱这一新领域的学术带头人。

VII由于缺少市售仪器,填充柱 SFC 几乎销声匿迹,而毛细管 SFC 则被视作未来的发展趋势。

当时,人们对流体的理化性质及其与固定相的相互作用还知之甚少。

仅剩的少数填充柱用户与毛细管柱支持者之间展开了许多争论。

作者于 1985 年开始作为高级研究科学家在惠普公司从事 SFC研发工作,被委任解决这些争议问题。

在该过程中,他访问了每位欧洲用户(大约 16 位),就争议问题和发展潜力进行了广泛的讨论。

当时,人们普遍认为密度是主要的可控变量,并且改变流动相密度对保留性能的影响最大。

很遗憾的是,由于 Giddings 的误解,人们认为高密度 CO2 的极性类似于异丙醇1。

如果确实如此,添加醇类改性剂将明显改变流动相的密度,但对溶剂强度的影响则微乎其微。

这一误解数十年来都未受到质疑。

当时,缺乏直接的密度测量手段对 SFC 中所用的甲醇/CO2(或任何其他)混合物的密度进行测量。

二元混合物的状态方程并不准确。

作者随后从特拉华大学借来了比重计,对甲醇/CO2 的密度进行了一些首次测量,发表在文献中。

然后他测量了密度不变的情况下甲醇浓度对保留值的影响,结果表明改性剂确实能够显著提高流动相的洗脱强度。

不久之后,溶剂化变色染料被证明是一种可在 HPLC 中测量染料分子周围溶剂化微球强度和极性的简单方法2。

然后,作者将相同的原理应用于SFC45。

结果表明二元流体的溶剂强度呈现出高度非线性,最初少量的添加剂即可产生过度的影响。

CO2的极性和溶剂强度被证明类似于戊烷。

在密度和溶剂化变色染料测量中,Giddings 的洗脱系列公式1 最终获得了修正(尽管仍有许多追随者)。

结果证明,至少对于改性的流体而言,改变改性剂浓度对保留值的影响远大于压力、温度和密度的影响。

20 世纪 80 年代后期,经广泛证实,使用 CO2和醇类改性剂(甲醇或乙醇)组成二元流路时,许多极性溶质(例如有机酸和碱)洗脱得到的峰形很差或根本无法洗脱出来。

一般认为这一现象表明固定相活性过高或包含与这些极性溶质相互作用过强的活性位点。

当时提议的解决方案是VIII使用低极性的固定相以及进一步的脱活处理,但是该方法根本无效,极性分子通常不发生保留并且严重拖尾。

作者提出使用极性添加剂(例如,强酸和/或碱)与有机改性剂的混合液,同时使用极性更强的色谱柱,此方法被证明能够显著改善峰形。

此类添加剂的使用开启了现代 SFC 的潜能,目前此技术已经能够洗脱和分离包含高达40聚体肽在内的极性溶质。

我们可以至少追溯到“Buck”Rodgers 的论文3,他们存在这样一种看法:色谱柱的压降将导致密度梯度的产生,造成严重的柱效损失。

这一观点在 20 世纪 70 年代中期得到 Novotny 的支持4。

到 20 世纪 80 年代中期,出现了多种竞争理论,其中至少一种理论5 认为填充柱 SFC 无法生成超过大约 20000 的塔板数,因为伴随色谱柱压降将产生密度梯度。

作者将 11根柱长为 20 cm 且填充以 5 µm 填料的色谱柱串联,在高达 250bar 压降的条件下获得了 220000 的塔板数,有力地反驳了大多数争论。

密度梯度的影响仍然是人们感兴趣的一个领域,大量最新的出版物均以此为主题。

作者说服密西西比大学的 Jon Parcher 采用示踪物脉冲 MS 实验测量流动相组分在固定相上的吸附情况。

结果表明大量的吸附涂层对固定相的性质具有显著影响,从而会影响到色谱性能。

澄清了大多数的误解后,作者说服惠普公司管理层投资开发新一代的SFC。

开发出的产品于 1992 年问世,此产品兼具毛细管柱和填充柱性能。

该仪器 (HP G1205A) 能够同时、独立地控制流速、组成、压力和温度,它还能够使用内部状态方程执行密度程序。

自 20 世纪 90 年代早期至中期以来,随着对流动相特性的了解日益深入,人们普遍认为毛细管 SFC 被过分吹嘘,尤其针对极性溶质。

这一认知很大部分来源于对 Giddings 洗脱系列公式的修订。

令人痛心的是,这种情况导致了毛细管 SFC 的消亡,即使该技术经证实与其他技术相比,对极性较低的溶质具有众多优势。

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