吉姆萨染色液Giemsa stain
吉姆萨染色的原理
吉姆萨染色的原理吉姆萨Giemsa染色法：吉姆萨染液由天青;伊红组成..染色原理和结果与瑞特染色法基本相同..嗜酸性颗粒为碱性蛋白质;与酸性染料伊红结果;染粉红色;称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性;与碱性染料美蓝或天青结合;染紫蓝色;称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合;染淡紫色;称为中性物质..PH对细胞染色有影响..细胞各种成分均不蛋白质;由于蛋白质系两性电解质;所带电荷随溶液PH而定;在偏酸性环境中下在电荷增多;易与伊红结合;染色偏红；在偏三性环境中负电荷增多;易与美蓝或天青结合;染色偏蓝..因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感;染色用正经片必须清洁;无酸碱污染..配制顼特液必须用优质甲醇;稀释染色必须用缓冲液;冲洗用水应近中性;否则可导致各种细胞染色反应异常;以致识别困难;甚至造成错误..一般性操作技术血涂片制备；细胞染色；显微检查；血液病诊断；染色不良；瑞特Wright染色法；酸性染料；伊红；碱性染料；亚甲蓝；吸附作用；PH对细胞染色的影响；甲醇；吉姆Giemsa染色法春天要常用润肤剂;它含有松香油脂酸和丰富维生素a;常用可加快皮肤血液循环;剌激面部细胞分泌;有效改善皮肤生理环境;减少气候对皮肤的危害..第二节血涂片的制备和细胞染色血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法;临床上应用极为广泛;特别是对于各种血液病的诊断具有重要的价值;近年来血细胞分析仪的广泛应用;血涂片的观察也可作为判断仪器结果的简易方法..比台观察10个高倍视野血涂片中白细胞和血小板数大致估计血内这些细胞的数量;借以作为仪器结果分析后质控的参考..但积压涂片制备和染色不良;常使细胞鉴别发生困难;甚至导致错误结论..例如;血膜过厚细胞重叠缩小;血膜太薄白细胞多集中于边缘;细胞分布不匀；染色偏酸或偏碱均可使细胞染色反应异常..因皮制备厚薄适宜;分布均匀;染色良好的血涂片是血液学检查的重要革本技术之一..血涂片制备方法及注意事项将在实习指导中详细介绍..1．瑞特Wright染色法：为发观察细胞内部结构;识别各种细胞及其异常变化;血涂片必须嘲行染色..血涂片的各种染色方法大多是罗氏染色法衍变来的..目前常用瑞特染色法..1瑞特染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成有复合染料..亚甲蓝为四甲基硫堇染料;有对醌型和邻醌型两种结构..通常为氯盐;即氯化美蓝..美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料..市售美蓝中部分已被氧化为天青..伊红通常为钠盐..即伊红和伊混合后;产生一种憎液性胶体伊红美蓝中性沉淀;即瑞特染料..2细胞的染色既有物理的吸附作用;又有化学的亲和作用;各种细胞成分化学性质不同;对各种染料的亲和力也不一样..因此;用本染料液染色后;在同一血片上;可以看到各种不同的色彩;例如血红蛋白;嗜酸性颗粒为碱性蛋白质;与酸性染料伊红结果;染粉红色;称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性;与碱性染料美蓝或天青结合;染紫蓝色;称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合;染淡紫色;称为中性物质..3PH对细胞染色有影响..细胞各种成分均不蛋白质;由于蛋白质系两性电解质;所带电荷随溶液PH而定;在偏酸性环境中下在电荷增多;易与伊红结合;染色偏红；在偏三性环境中负电荷增多;易与美蓝或天青结合;染色偏蓝..因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感;染色用正经片必须清洁;无酸碱污染..配制顼特液必须用优质甲醇;稀释染色必须用缓冲液;冲洗用水应近中性;否则可导致各种细胞染色反应异常;以致识别困难;甚至造成错误..新鲜配制的染料偏碱;须在室温或是37℃下贮存一定时间;待染料成熟;主要是美蓝逐渐转变为天青B后才能使用;贮存时愈久;染色效果愈好..EAM GILLILAND等采用吸光度比值作为顼特染液的质量规格..rA测定方法如下：取瑞特染液15-25μl视染液浓度而定;加甲醇10ml稀释;混匀后以甲醇为空折管;分别以波长650nm和25nm比色..Ra=a650/a525.因为美蓝吸收峰小组长为650nm;伊红吸收峰波长为525nm ;天青B吸收峰也为650nm但吸光度A约为美蓝的一半..所以新配染料rA接近2;随着美蓝逐渐氧化为天青B;RA也相应下降..RA下降到1.3±0.1时即可使用..瑞特染液贮存过程中;必须塞严;以防止甲醇挥发和被氧化成甲酸..有人主张在配方中加入甘油30ml;防止甲醇挥发;关可合细胞染色清晰..甲醇必须纯净;如甲醇中丙酮含量过多;染色偏酸;使白细胞着色不良..2．吉姆萨Giemsa染色法：吉姆萨染液由天青;伊红组成..染色原理和结果与瑞特染色法基本相同..但本法对细胞核和寄生虫着色较好;结构显示更不清晰;而胞质和中性颗粒则着色较差..为兼顾二者之长;可用复合染色法..即以稀释吉姆萨液代替缓冲液;按瑞特染色法染10min..或先用瑞特染色法染色后;再用稀释吉姆萨复染..。
瑞氏-吉姆萨染液配法
英文拼写 Wright's stain是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料，溶于甲醇。
后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。
使用方法瑞氏（Wright's staim；美蓝－伊红Ｙ）染色：1．瑞氏染料是由碱性染料美蓝（Methvlem blue）和酸性染料黄色伊红（Eostm Y）合称伊红美蓝染料即瑞氏（美蓝－伊红Ｙ）染料。
2．用甲醇作瑞氏染料溶剂，即成瑞氏染液。
甲醇是瑞氏染料良好溶剂，有两种作用：（1）甲醇使瑞氏染料中美蓝（M）与伊红（E）在溶液中离解，可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色。
甲醇ME（瑞氏染料）----→M+ + E-在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青，美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色，但不能使胞浆染为蓝色，多余美蓝就可以使胞浆染成蓝色，染色主要是化学作用，是离子彼此结合的反应。
（2）甲醇具有强大的脱水力，可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积，提高细胞对染料吸收作用，同时由于甲醇吸附染色液中的水，使染色液升温，加速染色反应。
染液配制(1) 瑞氏染液配制：瑞氏染料 830gm或1g甲醇（AR）500ml或600ml○先称干燥（事先放入温箱干燥过夜）瑞氏染料放置乳钵内，用乳棒轻轻敲碎染料成粉末，再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末，加少许甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸内显“一面镜”光泽，而无染料粉粒沉着。
○再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮，静置片刻，将上层液体倒入一清洁储存瓶内（最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重复数次，至乳钵内染料及甲醇用完为止，摇匀，密封瓶口。
○存室温暗处，储存愈久，则染料溶解、分解就越好，一般储存3个月以上为佳。
(2) 缓冲液：●缓冲液作用：○染色对氢离子浓度是十分敏感的，据观察pH值的改变，可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解。
○缓冲液须保持一定的pH使染色稳定，PBS的pH 一般在6.4~6.8，○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用，偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用，使pH恒定。
吉姆萨染色的原理
吉姆萨染色的原理吉姆萨（Giemsa）染色法：吉姆萨染液由天青，伊红组成。
染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。
嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结果，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。
PH对细胞染色有影响。
细胞各种成分均不蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液PH而定，在偏酸性环境中下在电荷增多，易与伊红结合，染色偏红；在偏三性环境中负电荷增多，易与美蓝或天青结合，染色偏蓝。
因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感，染色用正经片必须清洁，无酸碱污染。
配制顼特液必须用优质甲醇，稀释染色必须用缓冲液，冲洗用水应近中性，否则可导致各种细胞染色反应异常，以致识别困难，甚至造成错误。
一般性操作技术血涂片制备；细胞染色；显微检查；血液病诊断；染色不良；瑞特（Wright）染色法；酸性染料；伊红；碱性染料；亚甲蓝；吸附作用；PH对细胞染色的影响；甲醇；吉姆（Giemsa）染色法春天要常用润肤剂，它含有松香油脂酸和丰富维生素a，常用可加快皮肤血液循环，剌激面部细胞分泌，有效改善皮肤生理环境，减少气候对皮肤的危害。
第二节血涂片的制备和细胞染色血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对于各种血液病的诊断具有重要的价值，近年来血细胞分析仪的广泛应用，血涂片的观察也可作为判断仪器结果的简易方法。
比台观察10个高倍视野血涂片中白细胞和血小板数大致估计血内这些细胞的数量，借以作为仪器结果分析后质控的参考。
但积压涂片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论。
例如，血膜过厚细胞重叠缩小，血膜太薄白细胞多集中于边缘，细胞分布不匀；染色偏酸或偏碱均可使细胞染色反应异常。
因皮制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要革本技术之一。
血涂片制备方法及注意事项将在实习指导中详细介绍。
吉萨姆染色原理
吉萨姆染色原理染色原理的介绍在细胞生物学和遗传学中，染色原理是一个非常重要的概念。
吉萨姆染色原理是一种特殊的染色技术，它被广泛应用于细胞与遗传研究中。
本文将详细介绍吉萨姆染色原理的基本概念、原理和应用。
什么是吉萨姆染色原理吉萨姆染色原理，又称吉姆萨染色法（Giemsa staining），是一种细胞染色方法。
它通过染色试剂吉萨姆染料与细胞的某些成分产生特定的亲和作用，使细胞的结构和细胞器得以清晰可见。
吉萨姆染色法是一种常规的细胞染色方法，用于观察细胞形态、细胞器分布和细胞核的形态等。
吉萨姆染色的历史吉萨姆染色法最早由德国科学家吉萨姆（Giemsa）于1904年首次提出。
当时，吉萨姆用染色试剂碱性蓝（Azure A）和染色试剂噻唑啉（Eosin）相互结合，形成了吉萨姆染料。
这种染料对细胞核染色特异，对细胞质和线粒体染色不明显。
后来，吉萨姆染色原理逐渐被应用于临床和实验室中。
吉萨姆染色的原理吉萨姆染色的原理是通过染色试剂与细胞的某些成分发生特异性反应，使细胞可见结构被染色，从而方便观察和研究。
吉萨姆染料的成分吉萨姆染料是由吉萨姆染色试剂和吉萨姆染色剂组成。
吉萨姆染色试剂包含酸性染料和碱性染料，其中酸性染料对细胞核染色，而碱性染料对细胞质染色。
吉萨姆染色剂主要用于改善染色效果，增加显色度。
吉萨姆染色的步骤1.制备吉萨姆染色试剂溶液：将吉萨姆染色试剂和水按一定比例混合制成溶液。
2.固定细胞：将要观察的细胞固定在载片上，可以使用乙醇或甲醛进行固定。
3.染色：将染色试剂溶液滴在载片上，使细胞充分接触染色试剂。
4.清洗：用去离子水或缓冲液洗净载片上的染色试剂。
5.干燥：将载片晾干。
6.观察：将载片放在显微镜下观察并拍照记录。
吉萨姆染色的应用吉萨姆染色法在细胞学和遗传学研究中有广泛的应用。
细胞学应用吉萨姆染色法可用于观察细胞形态和结构。
通过吉萨姆染色，可以清晰地辨别细胞核、核仁、线粒体和细胞质等细胞器。
此外，吉萨姆染色还可用于细胞分类和细胞计数等细胞学研究。
吉姆萨配方
吉姆萨染色方法显示X染色质结构吉姆萨粉1 g ,甘油(AR) 66 mL ,甲醇(AR) 66 mL 。
先将吉姆萨粉溶于少量甘油中,用研钵研磨成匀浆,再将全部甘油倒入。
放入56 ℃温箱中2 h ,取出将甲醇加入混匀,即配成原液,于棕色瓶中密封保存备用。
临用时加入pH为6. 8 的磷酸缓冲液( V∶V = 9∶1) 配成吉姆萨染色剂。
（二）吉姆萨染色法此法可将细胞核与胞质同时染色，故便捷快速；但染液配制技术不易准确掌握，效果常不如HE染色稳定。
1.吉姆萨(Giemsa)染液的配制（1）取1.5g吉姆萨粉末放入50ml甘油，置于60℃温箱，约3h后溶解。
（2）取出后倒入50ml中性甲醇，即为母液。
于棕色瓶可长久保存。
需要注意的是，有的甲醇内含醋酸，会使染液中的伊红沉淀出来，不利染色。
（3）将母液与0.1 mol／LPBS(Ph6.9～7.2)按1:9混合即成工作液。
吉姆萨染液对pH极敏感，偏酸时染色过红，偏碱时则过蓝。
所以，工作液宜现用现配，保存时间不超过48h以免被CO2酸化。
瑞氏－姬姆萨染色方法1、试剂配制：原料:A:瑞氏染粉0.8--1克；吉姆萨染粉0.5克B:甘油33mlC：甲醇500ml配法：将A放入研钵中，加入少量B研磨，再加入少量B磨，再加入少量B磨……倒出，将未溶部分，继续加入B磨……>全溶，加入C，或中间加入C 亦可。
2、染色步骤：滴数滴入玻片盖满标本，30秒，再加入双蒸水或PBS2-3倍染1-3分中，倾去染液，水洗……封片。
吉姆萨染色液贮备液配制：吉姆萨粉1g，加甘油60ml，加热并搅拌，待溶解冷却至室温，再加甲醇33ml吉姆萨(Giemsa)氏母液将吉姆萨粉末1g先溶于少量甘油，在研钵内研磨30min以上，至看不见颗粒为止，再将全部(66mL)剩余甘油倒入，于56℃温箱内保温2h。
然后再加入甲醇(66mL)，搅匀后保存于棕色瓶中。
母液配制后放入冰箱可长期保存，一般刚配制的母液染色效果欠佳，保存时间越长越好。
dna的染色方法 -回复
dna的染色方法-回复DNA的染色方法，是指将DNA分子与染色剂结合，使其在显微镜下可见，并能通过颜色变化来研究DNA的组成和结构。
DNA染色是分子生物学和遗传学研究中非常重要的技术手段之一。
本文将一步一步介绍DNA的染色方法，包括常用的吉姆萨染色法、DAPI染色法和荧光原位杂交技术。
首先，吉姆萨染色法（Giemsa staining）是DNA染色的经典方法之一。
该方法可以用于染色体的核型分析、细胞遗传学研究和病原体的检测等。
下面是吉姆萨染色法的具体步骤。
第一步，制备Giemsa染液。
将吉姆萨染液溶于磷酸缓冲液中，浓度通常为5至10。
第二步，处理细胞或染色体。
将需要染色的细胞或染色体进行固定，常用的固定方法包括醋酸甲酯固定、甲醛固定和凝胶固定等。
固定后，用磷酸缓冲液进行洗涤。
第三步，染色。
将固定的细胞或染色体放入Giemsa染液中，在37摄氏度下浸泡20至30分钟，然后用磷酸缓冲液淋洗。
洗净后的细胞或染色体可以直接在显微镜下观察。
其次，DAPI染色法是一种特异性染色方法，主要用于染色DNA分子。
DAPI（4',6-二氨基-2-苯基吡啶）是一种蓝色荧光染料，可以与DNA分子的腺嘌呤核苷酸结合。
下面是DAPI染色法的步骤。
第一步，制备DAPI染液。
将DAPI溶于磷酸缓冲液中，浓度通常为1微克/毫升。
第二步，处理细胞或组织样本。
将样本进行固定，常用的固定方法包括乙酸溶液和甲醛溶液固定。
固定后，用磷酸缓冲液进行洗涤。
第三步，染色。
将固定的细胞或组织样本放入DAPI染液中，室温下孵育15至30分钟，然后用磷酸缓冲液淋洗。
洗净后的样本可以通过荧光显微镜观察，DAPI染色的DNA呈现出明亮的蓝色荧光。
最后，荧光原位杂交技术（FISH）是一种高分辨率的DNA分子定位方法，可以用于检测染色体异常、确定基因组组装和研究DNA序列的位置等。
下面是FISH技术的步骤。
第一步，准备探针。
选择合适的DNA片段作为荧光标记的探针，可以使用放射性同位素或荧光染料标记。
吉姆萨染色的原理
吉姆萨染色的原理吉姆萨（Giemsa）染色法：吉姆萨染液由天青，伊红组成。
染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。
嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结果，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。
PH对细胞染色有影响。
细胞各种成分均不蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液PH而定，在偏酸性环境中下在电荷增多，易与伊红结合，染色偏红；在偏三性环境中负电荷增多，易与美蓝或天青结合，染色偏蓝。
因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感，染色用正经片必须清洁，无酸碱污染。
配制顼特液必须用优质甲醇，稀释染色必须用缓冲液，冲洗用水应近中性，否则可导致各种细胞染色反应异常，以致识别困难，甚至造成错误。
一般性操作技术血涂片制备；细胞染色；显微检查；血液病诊断；染色不良；瑞特（Wright）染色法；酸性染料；伊红；碱性染料；亚甲蓝；吸附作用；PH对细胞染色的影响；甲醇；吉姆（Giemsa）染色法春天要常用润肤剂，它含有松香油脂酸和丰富维生素a，常用可加快皮肤血液循环，剌激面部细胞分泌，有效改善皮肤生理环境，减少气候对皮肤的危害。
第二节血涂片的制备和细胞染色血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对于各种血液病的诊断具有重要的价值，近年来血细胞分析仪的广泛应用，血涂片的观察也可作为判断仪器结果的简易方法。
比台观察10个高倍视野血涂片中白细胞和血小板数大致估计血内这些细胞的数量，借以作为仪器结果分析后质控的参考。
但积压涂片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论。
例如，血膜过厚细胞重叠缩小，血膜太薄白细胞多集中于边缘，细胞分布不匀；染色偏酸或偏碱均可使细胞染色反应异常。
因皮制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要革本技术之一。
血涂片制备方法及注意事项将在实习指导中详细介绍。
吉姆萨染色的原理
吉姆萨染色的原理吉姆萨（Giemsa）染色法：吉姆萨染液由天青，伊红组成。
染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。
嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结果，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。
PH对细胞染色有影响。
细胞各种成分均不蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液PH而定，在偏酸性环境中下在电荷增多，易与伊红结合，染色偏红；在偏三性环境中负电荷增多，易与美蓝或天青结合，染色偏蓝。
因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感，染色用正经片必须清洁，无酸碱污染。
配制顼特液必须用优质甲醇，稀释染色必须用缓冲液，冲洗用水应近中性，否则可导致各种细胞染色反应异常，以致识别困难，甚至造成错误。
一般性操作技术血涂片制备；细胞染色；显微检查；血液病诊断；染色不良；瑞特（Wright）染色法；酸性染料；伊红；碱性染料；亚甲蓝；吸附作用；PH对细胞染色的影响；甲醇；吉姆（Giemsa）染色法春天要常用润肤剂，它含有松香油脂酸和丰富维生素a，常用可加快皮肤血液循环，剌激面部细胞分泌，有效改善皮肤生理环境，减少气候对皮肤的危害。
血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对于各种血液病的诊断具有重要的价值，近年来血细胞分析仪的广泛应用，血涂片的观察也可作为判断仪器结果的简易方法。
比台观察10个高倍视野血涂片中白细胞和血小板数大致估计血内这些细胞的数量，借以作为仪器结果分析后质控的参考。
但积压涂片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论。
例如，血膜过厚细胞重叠缩小，血膜太薄白细胞多集中于边缘，细胞分布不匀；染色偏酸或偏碱均可使细胞染色反应异常。
因皮制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要革本技术之一。
血涂片制备方法及注意事项将在实习指导中详细介绍。
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吉姆萨/姬姆萨染色液(Giemsa stain,1:9)
产品简介：
吉姆萨染液由天青2与伊红混合而成。
染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同，姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳，常与故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。
嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结果，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。
Leagene Giemsa stain以进口的吉姆萨/姬姆萨色素为主要原料，通过研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果。
经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。
Giemsa stain(1:9)的特点在于，由Giemsa stain储存液(10×)和磷酸盐缓冲液组成，1:9混合成工作液后使用；亦可以分开使用，即先用Giemsa stain染色液染色，再经磷酸盐缓冲液处理，亦可以得到满意的染色效果。
产品组成：
主要成分：
试剂(A): 主要由吉姆萨色素、甲醇等组成。
试剂(B): 主要由磷酸盐等组成。
自备材料：
1、载玻片
2、蒸馏水或去离子水
3、甲醇
4、染色架
5、显微镜
6、0.1～0.5%的乙酸
操作步骤（仅供参考）：
(一)一步法涂片染色
1、Giemsa stain工作液的配制：
按试剂(A):试剂(B)=1:9混合，即取1份的Giemsa stain储存液(10×)加入到9份的磷酸盐缓冲液中充分混匀，即为Giemsa stain工作液。
配制后Giemsastain的工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。
2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定1～3min。
3、将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上，滴加Giemsa stain工作液覆盖涂片，室温滴染
15～30min。
4、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。
5、干燥、镜检。
染色结果：
嗜酸性颗粒粉红色
嗜碱性颗粒紫蓝色
中性颗粒淡紫色
(二)两步法涂片染色
1、Giemsa stain工作液的配制：
按试剂(A):蒸馏水或去离子水=1:4配制Giemsa stain工作液，即取1份的Giemsa stain储存液(10×)加入到4份的蒸馏水或去离子水中充分混匀，即为Giemsa stain工作液。
配制后Giemsa stain的工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。
2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定1～3min。
3、将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上，滴加Giemsa stain工作液覆盖涂片，室温滴染
10～15min。
4、加入等量磷酸盐缓冲液，轻轻晃动载玻片，室温静置5～10min。
5、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。
6、干燥、镜检。
染色结果：
嗜酸性颗粒粉红色
嗜碱性颗粒紫蓝色
中性颗粒淡紫色
（三）组织切片染色
1、Giemsa工作液的配制：
按试剂(A): 试剂(B) =1:9配制Giemsa stain工作液，即取1份的Giemsa stain储存液(10×)加入到9份的磷酸盐缓冲液中，充分混匀，即为Giemsa stain工作液。
配制后的Giemsa stain工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。
2、新鲜组织立即置于Regaud固定液固定2天，期间应更换1次固定液。
3、3%的重铬酸钾固定1天。
4、流水冲洗16个小时或过夜。
5、按照常规脱水、包埋。
6、切片，厚度约为5μm。
7、常规脱蜡至水。
8、蒸馏水清洗2次，每次约1min。
9、置于含有Giemsa stain工作液的染缸内，浸染18～24h。
10、蒸馏水稍微清洗。
11、0.1～0.5%的乙酸洗1～2min。
12、自来水稍微冲洗。
13、用无水乙醇迅速脱水3次，每次5～10s。
14、二甲苯透明。
15、中性树脂封固。
染色结果：
细胞核蓝色至紫色
细胞质淡蓝色
嗜铬细胞胞质 黄绿色
结缔组织 淡红色
注意事项：
1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色结果。
2、涂片染色中Giemsa染色后，请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。
3、如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液的浓度。
4、Giemsa涂片染色和组织切片染色中，pH值对染色有一定影响，载玻片应清洁、无酸
碱污染以免影响染色结果。
5、染色液在稀释后液面应有金属光泽，表示染液有染色作用，否则染色液可能失效。
6、Giemsa组织切片染色中，染色后需用大量0.1～0.5%的乙酸急速冲洗，避免浮面沉淀
物污染切片后难以洗脱。
7、0.1～0.5%的冰乙酸分化，常用于Giemsa组织切片染色，如有必要亦可用于细胞涂片，
但其浓度应适量下调。
0.5%的冰乙酸分化切片时，切片呈粉红色即可终止。
8、Giemsa组织切片染色中，无水乙醇脱水要迅速，否则切片易褪色。
9、Giemsa涂片染色和组织切片染色中，如需急速获得结果，可以按Giemsa stain储存液：磷酸盐缓冲液(1×) =1：1配制，即取吉姆萨储存液(10×)1份、磷酸盐缓冲液(1×)1份，充分混匀，即为快速吉姆萨染色工作液，将染色液滴加于细胞涂片或组织切片上，加热染色，20～30s后重新加染色液，反复5～10次，其余步骤同上。
10、染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。
11、Regaud固定液：按3%重铬酸钾水溶液：甲醛=4:1配制，临用前混匀，1～2天后失效。
12、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
13、使用场所应通风，并远离火源。
有效期：24个月有效。
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