动物细胞融合和单克隆抗体

单克隆抗体导学案2.2.2

班级姓名

问题生成阶段

【温故知新】

免免

结分泌的，能和抗原 1．抗体的化学本质是，是由合。诱导融合细胞2.动物细胞融合：不同DNA的两种细胞

筛选杂交细胞

3.动物细胞培养：分散的单个细胞制成原代培养

培养

【新知预学】

1．传统抗体的获得

(1)方法：①向动物体内反复注射某种，使动物产生；②从

动物

中分离所需抗体。

(2)特点：、纯度低、。

2．单克隆抗体的制备原理

细胞特点

能产生，但不能B淋巴细胞

能，但不能骨髓瘤细胞

既能融合细胞，又能

单克隆抗体的制备过程3.

(1)制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的，然后从小鼠

获得相应的B淋巴细胞。

1

(2)细胞融合：融合的方法常用聚乙二醇、、电激等，这时得到的融合细胞除了杂交瘤细胞，还有相互融合的细胞和相互融合的细

胞。

(3)筛选：用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞。这时候的杂交瘤细胞既能

同时又能。

(4)克隆化培养和抗体检测：从杂交瘤细胞群中选出能产生的特异性杂交瘤细胞。

相关资料：先在多孔培养皿上培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于该细胞群是由单个杂交瘤

细胞克隆来的，所以产生的抗体一定是化学性质单一、特异性强的单克隆抗体。

(5)培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体：将杂交瘤细胞在条件下做大规模培养或注射到小鼠内增殖，从 ______或小鼠的

______ 中提取单克隆抗体。

4．由上述抗体的产生过程我们可将单克隆抗体的定义归纳为：由

大量繁殖所产生的、的抗体。

5．单克隆抗体的应用

(1)优点：、、并可能大量制备。

(2)应用

①作为诊断试剂，具有准确、、简易、的优点。

②用于和。

问题解决阶段

【合作探究】单克隆抗体的制备 B淋巴细胞？如何得到已免疫的1.

B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合？2.如何诱导效应

融合过程中会出现几种类型的细胞？3.

怎样淘汰我们不需要的细胞？上述过程得到的细胞哪种是我们需要的？其特

点是什么？4.

淘汰后的细胞所产抗体是单一的吗？如何检测？5.

如何获得大量“单克隆抗体”？6.

2

注意：制备单克隆抗体过程中两次筛选的方法及目的

项目第一次筛选第二次筛选

由于小鼠在生活中还受到其他抗筛选诱导融合后得到多种细原的刺激，所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他胞，另外还有未

的细胞原因

抗体的细胞

用特定的选择性培养基筛选：未融用多孔培养板培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始合的细胞和同种细胞融合后形成的筛选克隆化培养和抗体检测，经多次细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞) 方法筛选得到能产生特异性抗体的细都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞胞群 (“B瘤”细胞)才能生长

得到能分泌所需的筛选得到细胞杂交瘤细胞目的

【巩固探究】请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程的图解字母按正确顺序连接起来。

问题拓展阶段联系前后知识学会举一反三

1.由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”，下列对此描述不正确的是（）

A.“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体构成

B.“弹头”由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成

C.“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能

D.“生物导弹”是利用细胞工程制出来的

3

2.已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。人淋巴细胞中有DNA的这两种合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。

请回答：

设计一方法(不考虑机械方法)，从培养液中分离出杂种细胞，并说明原理。

方法：培养液中加入_________________，收集增殖的细胞。

原理：

_____________________________________________________________________ _-___________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ _______________________________________。

3.下图为科研工作者利用小鼠制备H7N9禽流感病毒单克隆抗体的过程,请据图回答有关问题。

。(1)图中将H7N9病毒抗原基因导入受体细胞常用的方法是

一定量中添加在细胞培养液为了防止污染,通常还要受体(2)在细胞的培养过程中,分成的天然基相比,特有养培液与植物组织培养的培养的,其

。是

细胞和X,诱导,与植物体细胞杂交相比(3)图中X细胞一般选用

。Y细胞融合还可采用

选筛养性培基先用特定的选择过的抗体制备过程需要经多次筛选,首克(4)单隆选出符合要求的细胞，的,最终获得足够数量的出

进行增殖培养。,细胞后可在体外条件下或注射到禽流感病毒的快速诊断H7N9(5)利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒,用于准确、这体现了单克隆抗体杂交技术,感染者,这种诊断运用了

的特性。

重庆高考）右图是单克隆抗体制备流程的简明示20134.（意图。下列有关叙述，正确的是（）淋巴细胞TA.①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成B. C.③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群D.

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