当归地上部分中绿原酸和金丝桃苷的含量测定
中药化学当归实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习中药化学的基本实验操作技能。
2. 了解当归的化学成分及其提取方法。
3. 掌握薄层色谱（TLC）在中药成分鉴定中的应用。
二、实验原理当归为伞形科植物当归的干燥根，具有补血调经、活血止痛、润肠通便等功效。
其主要化学成分为挥发油、有机酸、糖类、维生素等。
本实验采用溶剂提取法从当归中提取其有效成分，并利用薄层色谱法对提取物进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 材料：当归药材、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、硅胶G薄层板、碘蒸气、显色剂等。
2. 仪器：电热恒温水浴锅、旋转蒸发仪、薄层色谱仪、分析天平、研钵、滴管等。
四、实验步骤1. 称取当归药材5g，加入适量石油醚，在研钵中研磨，使药材充分混合。
2. 将研磨好的药材转移到索氏提取器中，加入适量石油醚，加热回流提取。
3. 提取液经旋转蒸发仪浓缩至适量体积，转移至锥形瓶中。
4. 向锥形瓶中加入适量乙酸乙酯，搅拌使提取物充分溶解。
5. 将溶解后的提取物通过滤纸过滤，收集滤液。
6. 将滤液转移到蒸发皿中，用旋转蒸发仪浓缩至干，得到当归提取物。
7. 将提取物在薄层板上点样，用正己烷-乙酸乙酯（4:1）为展开剂进行薄层色谱。
8. 取出薄层板，晾干后喷洒碘蒸气，观察色谱斑点。
9. 将薄层板在紫外灯下观察，记录色谱斑点位置及颜色。
五、实验结果1. 通过旋转蒸发仪浓缩提取物，得到当归提取物。
2. 在薄层色谱板上，观察到明显的色谱斑点，斑点颜色为浅黄色。
3. 在紫外灯下，色谱斑点呈蓝色荧光。
六、实验讨论1. 当归药材中有效成分较多，本实验采用溶剂提取法，可提取出部分有效成分。
2. 薄层色谱法是一种简单、快速、灵敏的分离鉴定方法，适用于中药化学成分的鉴定。
3. 本实验中，通过溶剂提取法从当归中提取出部分有效成分，并利用薄层色谱法对其进行了鉴定。
七、实验总结本实验通过溶剂提取法从当归中提取有效成分，并利用薄层色谱法对其进行了鉴定。
实验结果表明，当归中存在有效成分，且薄层色谱法在中药化学成分鉴定中具有较好的应用价值。
HPLC法同时测定2种返魂草药材中金丝桃苷和绿原酸的含量
HPLC法同时测定2种返魂草药材中金丝桃苷和绿原酸的含量马鸿雁;褚夫江;尹永芹【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2013(029)003【摘要】目的采用HPLC法同时测定麻叶返魂草和单麻叶返魂草药材中金丝桃苷和绿原酸的质量分数.方法采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm),以乙腈-0.1％(体积分数)三氟乙酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温为30℃,检测波长为280 nm.结果 2种成分均达到基线分离,金丝桃苷和绿原酸的质量浓度分别在1.03～41.02 μg·mL-1、2.70～43.20 μg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系；平均加样回收率分别为97.2％、99.2％,RSD值分别为3.9％、3.9％.麻叶返魂草中这2种成分的质量分数均高于单麻叶返魂草.结论该方法准确、简便、分离度好,为返魂草药材的质量评价提供了依据.%Objective To develop a HPLC method for simultaneous determination of hyperoside and chlorogenic acid in Senecio cannabifolius andS.cannabifolius var.integrilifolius.Methods HPLC analysis was carried out on Agilent Zorbax SB-C18 column(4.6 mm × 250 mm,5 μm) with acetonitrile-0.1％ trifluoroacetic acid in gradient elution.The flow rate was 1.0 mL · min-1.The column temperature was set at 30 ℃,and the detection wavelength was set at 280 nm.Results Hyperoside was linear in the range from 1.03 to 41.02 μg · mL-1 (r =0.999 9) and the average recovery was 97.2％ (RSD=3.9％).Chlorogenic acid was linear in the range from 2.70 to 43.20μg · mL-1 (r =0.999 3) and the average recovery was 99.2％ (RSD=3.9％).The contents of both them in S.cannabifolius were higher than in S.cannabifolius var.integrilifolius.Conclusion The method is accurate,simple and feasible.It may provide scientific basis for the quality evaluation for Fanhuncao.【总页数】4页(P277-280)【作者】马鸿雁;褚夫江;尹永芹【作者单位】广东药学院中药学院,广东广州510006;广东药学院基础学院,广东广州510006;广东药学院中药学院,广东广州510006【正文语种】中文【中图分类】R917【相关文献】1.HPLC法测定不同产地刺五加叶中绿原酸和金丝桃苷含量 [J], 邵璟;狄留庆;谢新;董宇;赵晓莉;吴灏昕;刘产明2.HPLC法同时测定藏药川西千里光中的绿原酸、金丝桃苷和木犀草苷的含量 [J], 蔡霞;王宇;谭荣;张静;张艺;王毓杰;阿萍3.HPLC法同时测定野马追药材中绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸的含量 [J], 杨琴;包宜康;顾亚琴;郭昀;吴小峰;郦红岩4.高效液相色谱法测定千里光药材中的绿原酸和金丝桃苷含量 [J], 卢李倩;潘红波;徐妮娜;周庆颂5.HPLC法测定不同产地返魂草中绿原酸的含量 [J], 南敏伦;赫玉芳;刘静月;赵全成因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
反相高效液相色谱法测定刺五加叶中绿原酸和金丝桃苷含量
2023年第6期品牌与标准化Determination of Chlorogenic Acid and Hyperin in Acanthopanax SenticosusLeaves by Reversed Phase High-performance Liquid ChromatographyTIAN Guohe,ZHAO Yan,SUN Haitao,HAN Songtao,HAN Xiaohong ,P ANG Huanhuan *(Jilin Provincial Institute for Drug Control and Research,Changchun 130000,China)Abstract :Objective ：To establish a HPLC method for quantitative analysis of chlorogenic acid and hyperoside in the leaves of acanthopanax senticosus from different areas in northeast of China.Method:Three different brands of C18chromatographic columns were used,with mobile phase A being 0.3%phosphoric acid solution and mobile phase B being acetonitrile.Gradient elution:0~3minutes,95%A;3~10minutes,95%~80%A;10~40minutes,80%A;40~50minutes,80%~10%A;Flow rate 1.0mL/min;Column temperature 35℃;Injection volume 5μL;Detection wavelength is 354nm.Results:Chlorogenic acid and hyperoside showed a good linear relationship in the range of 0.39~5.9µg and 0.08~1.2µg;The RSD of precision,stability and repeatability test is less than 1.1%,and the recovery of chlorogenic acid and hyperoside are 102.3%and 98.4%respectively.The content of chlorogenic acid in samples from different areas ranges from 1.01mg/g to 10.71mg/g;The content range of hyperoside is 0.25mg/g to 1.49mg/g.Conclusion:The established HPLC method can effectively investigate the content of multi-component in the leaves of acanthopanax senticosus,and the content of chlorogenic acid and hyperoside is different in different regions.Key words :acanthopanax senticosus leaves;chlorogenic acid;hyperoside;reversed phase high-performance liquid chromatography反相高效液相色谱法测定刺五加叶中绿原酸和金丝桃苷含量田国贺，赵艳，孙海涛，韩松涛，韩晓红，逄焕欢*（吉林省药品检验研究院，吉林长春130033）【摘要】目的：建立HPLC 法定量分析东北地区不同产地刺五加叶中绿原酸和金丝桃苷的含量。
绿原酸含量测定[最新]
![绿原酸含量测定[最新]](https://img.taocdn.com/s3/m/7a2eea9282d049649b6648d7c1c708a1284a0a07.png)
绿原酸提取与测定绿原酸（chlorogenic acid）是一种从双子叶植物（如忍冬叶、咖啡豆、向日葵）的叶和果实分离得到的酚类,也是许多中草药（如杜仲、金银花、茵陈等）及中药复方制剂抗菌消炎、清热解毒的主要活性成分，目前已成为中草药制剂质量控制的主要指标之一。
绿原酸是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。
它是一种由咖啡酸(caffeic acid)与奎尼酸(鸡纳酸,quinic acid,即1-羟基六氢没食子酸)缩合而成的缩酚酸,异名咖啡鞣酸,化学名3-O-咖啡酰奎尼酸(3-O-caffeoylquinic acid),分子式为C16H18O9,分子量:345.30，半水合物为针状晶体，110℃时变为无水化合物，易溶于水、乙醇、丙酮，微溶于乙酸乙酯，常温下呈淡黄色固体。
绿原酸在植物中分布广泛,从高等双子叶植物到蕨类植物均有报道，但含量较高的植物不多，主要存在于忍冬科忍冬属(Lonicera)、菊科蒿属(Artemisia)植物中，其中包括杜仲、金银花、向日葵、咖啡、可可树。
植物的不同品种、发育阶段、同一植株的不同部位、存放时间、生长环境等均能影响植物中绿原酸的含量。
以杜仲为例：叶中绿原酸的含量高于皮中含量数倍之多；用不同干燥方法对绿原酸含量的影响研究中,用阴干、晒干、直接烘干所测绿原酸含量分别是2.21%、2.17%和2.24%;鲜叶绿色含绿原酸3.52%,放臵1年后,叶色棕绿,绿原酸含量为2.47%。
由于绿原酸是极性较强的有机酸，易溶于醇、水，难溶于氯仿、乙醚,因此绿原酸的提取方法较多，有醇（甲醇、乙醇）溶法、水提醇沉、醇提铅沉、石灰乳沉淀法及聚酰胺柱层析法等。
下面介绍几种提取方法。
醇溶法：先用氯仿进行连续提取至流出液呈无色;再改用95%工业乙醇提取,提尽绿原酸;将所得乙醇提取液减压浓缩成浸膏,与干净细沙拌合后,用热水提取数次,使绿原酸转溶于水中,弃去残渣;所得水溶液用乙醚萃取,进一步除去脂溶性杂质;向脱脂后的水溶液中加入饱和无机盐溶液,至沉淀完全,并稍有过量为止。
高效液相色谱法测定千里光药材中的绿原酸和金丝桃苷含量
The determination of chlorogenic acid and hyperoside in senecio by HPLC LU Li-qian，PAN Hong-bo，XU Li-na，et al. School of Pharmacy，Jiangxi Science & Technology Normal University，Nanchang 330013，China.
2.4 千里光供试品的制备
建立测定千里光药材中的绿原酸和金丝桃苷的 HPLC 方法，并
精密称取千里光末 2.5 g，置于烧杯中，用 80% 乙醇溶解，
对该方法的方法学进行考察。
称定质量，80℃回流提取 1.5 h，放冷，再称定质量，以 80% 乙醇补
1 材料与方法
足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液过 0.45 μm 微孔滤膜，即得。
（目赤肿痛）、皮肤科（湿疹、痈肿疮毒）、胃肠道（泄泻痢疾）及呼 不低于 5 000。
吸道感染等病症的治疗，效果显著，且毒副作用小 [2]。千里光药
2.3 对照品储备液的制备
材中含有生物碱、酚酸、皂苷、挥发油等多种化学成分。研究表
精密称取干燥恒重的绿原酸 16.40 mg 和金丝桃苷 7.50 mg，分
42 中国处方药 第 17 卷 第 1 期
·实验研究·
高效液相色谱法测定千里光药材中的绿原酸和金丝桃苷含量
卢李倩，潘红波，徐妮娜，周庆颂＊ （江西科技师范大学药学院，南昌 330013）
【摘要】目的 通过高效液相色谱法对千里光药材中的指标成分绿原酸和金丝桃苷含量进行测定。方法 采用 Kromasil ODS C18 色谱柱，以乙 腈－ 0.4% 磷酸水溶液（16 ∶ 84）作为流动相，检测波长 345 nm，流速为 1.0 mL/min。结果 绿原酸在 6.56 ～ 32.80 μg/mL 范围内、金丝桃苷在 6.00 ～ 24.00 μg/mL 范围内线性关系良好；检测方法的精密度和准确度符合要求。经测定，千里光药材中的绿原酸含量为 0.026 07%，金丝桃苷含 量为 0.017 09%。结论 所建立的方法精密、准确、灵敏度高，适用于千里光药材中的指标成分绿原酸和金丝桃苷的测定。
当归地上部分鉴定学研究及当归叶茶的研制
当归地上部分鉴定学研究及当归叶茶的研制目的:为了充分利用当归资源,本研究以开发利用甘肃道地药材当归为出发点,用当归叶为主要原料,运用现代科技手段,研究当归叶的最佳采收期,优化当归叶茶炒制工艺,开展当归叶茶质量评价研究,制定质量标准草案,同时分析不同月份当归根、茎、叶活性成分变化规律,为当归其他部位开发利用奠定基础。
方法:在当归主产区岷县采集实验样品,经初步处理后,对不同月份当归根、茎、叶、花、果实样品进行鉴定学研究。
依据《中国药典》(2015版)四部方法对样品中水分(甲苯法)、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物(热浸法)进行测定;采用UV法测定总黄酮和多糖含量;采用HPLC测定样品中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、阿魏酸的含量,确定当归叶最佳采收期;采用正交试验设计优化当归叶茶炒制工艺,确定最佳炒制工艺。
开展质量评价研究,制定质量标准草案。
采用SPSS21.0对数据进行统计分析。
结果:1.地上部分显微结果显示:当归茎横切面维管束群排列成月牙型,正对木质部束,环绕在皮层外侧。
维管束外韧型,薄壁细胞椭圆形或近圆形;粉末:淡绿色或绿白色,导管常见,多为螺纹导管;纤维散在或成束;薄壁细胞长方形。
当归叶片上表皮气孔较少见;当归叶片下表皮气孔较多,且多为不定式;粉末:绿色,薄壁细胞纺锤形;气孔较常见,主要为不定式,副卫细胞3~4个,少见5个;导管多为梯纹、螺纹导管,直径6.20~33.44μm。
2.薄层色谱结果显示:在与芦丁相同位置上,当归茎、叶中有荧光斑点,而根中没有荧光斑点,推测茎、叶中含有芦丁,根中芦丁含量较少或无;当归根、茎、叶中均含绿原酸,根据荧光斑点强弱可推测,当归根中绿原酸含量较少,而地上部分茎、叶及花中含量较多。
3.不同月份当归根、茎、叶、花、果实样品中总灰分、酸不溶性灰分及水浸出物、醇浸出物的测定结果分别为:总灰分含量分别在6.03%~6.46%、9.56%~10.32%、7.03%~7.21%、6.52%、6.79%~7.00%之间;酸不溶性灰分含量在1.18%~1.45%、2.89%~3.25%、2.00%~2.25%、1.70%、1.90%~1.99%之间;水浸出物含量分别在49.37%~63.95%、25.12%~34.74%、30.83%~38.11%、41.21%、30.74%~32.20%之间;醇浸出物含量分别在44.64%~55.01%、17.20%~30.18%、26.01%~33.52%、40.69%、24.82%~28.01%之间。
中药当归有效成分分离及含量测定
１ ５
中药 当归有效成分分 离及含量测定
吴梓春 刘 肖林 （ 佛山 市第一 人民 医院 药剂科 佛山 ５ ２ ８ Ｏ Ｏ Ｏ ）
摘 要： 目的 ： 探讨近年来 中药 当归有 效成分的分 离及其含量的测定方法。 方法 ： 对中药当归中有效成分阿魏 酸、 多糖、 挥发油的分 离 方式和含量测定进行 归纳。结果 ： 当归 中的有效成分含量 多采 用高效液相 色谱法进行测定 ， 阿魏 酸含 量则采用毛细管电泳法进行 测定。结论 ： 对 中药当归的产地及处理方式的差异体现 了含量的差异 ， 其 中阿魏酸 的含量测 定采 用了毛 细管电泳法 ， 该方法精确 ， 简便 ， 是 一 种 有 效 的测 定手 段 。 关键词 ： 当归 高效 液 相 阿魏 酸 多糖 毛 细 管 电泳 法
取温度为 ６ ０ ℃～ ５ ０ ℃～ ４ ５ ℃。 １ ． ５其他成分 ： 当归总黄酮具有抗氧化 的活性 ， 具有较 高的开发 利用价值 ，目前 较为广泛 的提取纯化工艺 主要采用正交试验方 法， 通过 Ｎ ａ Ｎ Ｏ 一 Ａ Ｉ （ Ｎ Ｏ ） ， 一 Ｎ ａ Ｏ Ｈ法测定当归总黄酮 的含量 。总 黄酮分离 的最佳工艺为提取温度为 ８ ０ ￣ Ｃ ，乙醇浓度为 ７ ５ ％， 提 ２ ． ２其他成分含量测定 ： 有研究报道 中药 当归 中含有 的微量元 素较 多 ， 以Ｆ ｅ 、 ｃ ａ 、 Ｚ ｎ 、 Ｋ、 Ｍ ｇ 、 Ｎ ａ等 的含 量最 高 ， 当归 中微量 元 素 的含量测定结果见表 ３ 。
表 ２ 市售 当归及其炮制品中有效成分 的含量 （ ｍｇ ／ １ ０ ０ ｇ ）
用于多糖类干扰成分的提取 。将干扰杂质去除后采用水提取或 者水提取醇沉工艺。主要操作步骤为采用正交实验设计得到 当 归多糖 的最佳工艺 为浸提温 度为 ８ ５ ℃、 浸 提时 间为 ３ ． ０ ｈ 、 浸提
高效液相色谱串联质谱法测定当归芍药散提取物和含药血清中3种活性成分含量
高效液相色谱串联质谱法测定当归芍药散提取物和含药血清中3种活性成分含量宋祯彦1，何攀2，李富周1，贺春香1，余婧萍1，成绍武11.中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室，湖南中医药大学，湖南长沙 410208；2.中南粮油食品科学研究院有限公司，湖南粮食集团有限责任公司，湖南长沙 410005摘要：目的 建立测定当归芍药散提取物和含药血清中3种活性成分含量的高效液相色谱串联质谱方法。
方法 药物提取物样品经甲醇-水（1∶1，V/V）溶液溶解、离心、净化后过0.45 μm滤膜，血清样品适当稀释、过膜后用高效液相色谱串联质谱法测定。
色谱柱为Agilent Poroshell 120 EC-C18（100 mm×2.1 mm，2.7 μm），茯苓酸流动相为乙腈-0.5 mmol/L乙酸铵水溶液（9∶1，V/V），阿魏酸和芍药苷以乙腈-5 mmol/L乙酸铵水溶液为流动相梯度洗脱，流速0.4 mL/min，柱温35 ℃，进样量5 μL，采用电喷雾离子源，负离子模式，干燥气温度350 ℃，干燥气流速12 L/min，检测方式为多反应监测。
结果 当归芍药散中阿魏酸、芍药苷和茯苓酸分别在0.1～20.0 μg/mL、1～100 μg/mL、0.1～20.0 μg/mL范围内线性关系良好，加样回收率高，重复性好。
当归芍药散提取物中阿魏酸、芍药苷和茯苓酸含量分别为（127.6±14.9）μg/g、（6081.8±468.0）μg/g和（14.7±0.75）μg/g，当归芍药散含药血清中阿魏酸和芍药苷含量分别为（0.026±0.004）μg/g和（0.61±0.07）μg/g。
结论 本研究建立的方法样品处理简单，方法特异性强，精确度高，重复性偏差小，回收率高，可用于当归芍药散提取物和含药血清中活性成分的质量控制。
关键词：高效液相色谱串联质谱法；阿魏酸；芍药苷；茯苓酸；当归芍药散；含药血清中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2021)01-0092-08DOI：10.19879/ki.1005-5304.202005099 开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Content Determination of Three Active Components in Danggui Shaoyao Powder Extractsand Its Drug-containing Serum by HPLC-MS/MSSONG Zhenyan1, HE Pan2, LI Fuzhou1, HE Chunxiang1, YU Jingping1, CHENG Shaowu11. Key Laboratory of Hunan Province for Integrated Traditional Chinese and Western Medicine on Prevention andTreatment of Cardio-cerebral Diseases, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410208, China;2. Research Institute of Zhongnan Grain and Oil Foods, Hunan Grain Group Co., Ltd, Changsha 410005, ChinaAbstract:Objective To establish a method for the determination of three active components in Danggui Shaoyao Powder extracts and its drug-containing serum by HPLC-MS/MS. Methods The extract samples were dissolved in methanol-water (1:1, V/V) solution, centrifuged and purified, and then passed through a 0.45 μm filter membrane. Serum samples were appropriately diluted, passed through the membrane and determined by HPLC-MS/MS. The column was Agilent Poroshell 120 EC-C18 (100 mm × 2.1 mm, 2.7 μm). The mobile phase of porcine acid was acetonitrile- 0.5 mmol/L ammonium acetate aqueous solution (9:1, V/V), and the mobile phase of ferulic acid and paeoniflorin was acetonitrile- 5 mmol/L ammonium acetate aqueous solution (gradient elution). The flow rate was 0.4 mL/min; the column temperature was 35 ℃; the injection volume was 5 μL. Electrospray ion source and negative ion mode were used; drying gas temperature was 350 ℃; drying gas flow rate was 12 L/min; detection method was multiple reaction monitoring. Results The linear relationship of ferulic acid, paeoniflorin and基金项目：国家自然科学基金（81774129、82004184）；湖南省自然科学基金面上项目（2018JJ2296）；湖南省自然科学基金青年基金（2019JJ50441）；湖南省高校创新平台开放基金项目（19K065）；湖南省教育厅科学研究项目（18B246）；湖南创新型省份建设专项（2019RS1064）通讯作者：成绍武，E-mail：****************.cnpachymic acid in Danggui Shaoyao Powder was good in the range of 0.1–20.0 μg/mL, 1–100 μg/mL, and 0.1– 20.0 μg/mL, respectively. The standard recovery was high and the repeatability was good. The contents of ferulic acid, paeoniflorin and pachymic acid in Danggui Shaoyao Powder extracts were (127.6±14.9)μg/g, (6081.8±468.0)μg/g, and (14.7±0.75)μg/g, respectively. The contents of ferulic acid and paeoniflorin in Danggui Shaoyao Powder- containing serum were (0.026±0.004) μg/g and (0.61±0.07) μg/g, respectively. Conclusion The method established in this study is simple in sample processing, strong in method specificity, high in accuracy, small in repeatability deviation, and high in recovery rate, and can be used for the quality control of the active components in the Danggui Shaoyao Powder extracts and drug-containing serum.Keywords: HPLC-MS/MS; ferulic acid; paeoniflorin; pachymic acid; Danggui Shaoyao Powder; drug-containing serum当归芍药散出自《金匮要略》，全方由当归、芍药、川芎、茯苓、白术和泽泻6味药组成，具有滋补肝肾、活血化瘀、化痰通络功效。
高效液相色谱法测定贯叶连翘中的4种成分
Ｊ＿ Ｌ ＿ Ｃｊ
同
效 液 相 色 谱 法 测 定 贯 叶 连 翘 中 的 ４种 成 分
唐 静 ， 薛洪宝 ， 刘海峰 ， 甲甲， 杨 李 晖
（ 四川大 学化学 工 程学 院 ， 四川 成都 ６０６ ） １０５
摘要 ： 本文利用高效液相色谱法 同时测定 中药 贯叶连翘 中绿原酸 、 芦丁 、 金丝 桃苷和槲皮素 四种成分 的含 量。
好， 应用于贯叶连翘及制剂样 品的测定 ， 结果令 人满量 ； 高效液相色谱法
中 图分 类 号 ： ６ ７７ ０５．２ 文 献标 识 码 ： Ａ
ＨＰＬＣ ｉ ｕｌａ ｅ ｕ ｔｒ ｉ ｔｏ ｏ ｏ ｎ ｒ ｄ ｅ ｓ ｓｍ ｔ ｎ ｏ ｓ ｄｅｅ ｍ ｎａ ｉｎ ｆｆ ｕｒ ｉ ｇ ｅ ｉｎｔ
～
３ ５
（ ＝０９ ９ ） 平均 回收率 （１ ） ｒ ．９１ ， ／＝５ 分别 为 ９ ． ％ （ Ｓ ． ８４ Ｒ Ｄ＝１４ ％ ） ｌ１８％ （ Ｓ ．８ ，Ｏ ． Ｒ Ｄ＝０ ７ ％ ） ．４ ，
１３ ７ （ Ｓ ０ ７ ％） １３５ （ Ｓ ０ ． ％ Ｒ Ｄ＝ 。 ７ ，０ ． ％ Ｒ Ｄ＝１２ ％ ） ． ８ 。方法线 性范 围宽 、 相对 标准 偏差低 、 密度 高 、 精 重现 性
第２ ２卷第 ５期
２１ ０ ０年 ５月
化 学 研 究 与 应 用
Ｃ ｅ ｃ ｌＲ ｓ ａ ｃ ， ｐ ｉａ ｉｎ ｈ ｍｉａ ｅ ｅ ｒ ｈ ａｌ Ａｐ ｌ ｔ ｄ ｃ ｏ
Ｖｏ ． ２， ． １２ Ｎｏ ５
Ｍａ ２ ０ ｙ， ０１
文章 编号 ：０ ４ １５ （ ０ ０ ０ －６ ４０ １０ —６ ６ ２ １ ） ５０ ３ －５
（ ｃｏｌ ｆ ｈｍｃ ｎｉｅｒ ｇ ＳｃｕｎＵ ｉ ｒｔ，Ｃ ｅｇｕ６ ０ ６ ， ｈ ａ Ｓｈｏ ｏ ｅ ｉ Ｅ ｇｎｅｉ ，ｉｈａ ｎｖ ｓｙ ｈｎｄ １０ ５ Ｃ ｉ ） Ｃ ｌ ａ ｎ ｅｉ ｎ
当归质量标准及检验操作规程
XXXXXXXX有限公司原料质量标准及检验操作规程1 品名：1.1 中文名：当归1.2 汉语拼音：Danggui2 代码：3 取样文件编号：4 检验方法文件编号：5 依据：《中国药典》（2020年版一部）、团体标准（T/CATCM 003-2018）。
6 质量标准：7 检验操作规程：7.1 试药与试剂：乙醚、乙醇、当归对照药材、正己烷、乙酸乙酯、碳酸氢钠、盐酸、甲醇、阿魏酸对照品、藁本内酯对照品、环己烷、二氯甲烷、甲酸、乙腈、磷酸。
7.2 仪器与用具：显微镜、超声波清洗器、三用紫外分析仪、恒温鼓风干燥箱、离心沉淀器、马福炉、水浴锅、硅胶G薄层板、高效液相色谱仪。
7.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。
7.4 鉴别：7.4.1 取本品制片置10×10显微镜下做显微观察。
7.4.2取本品粉末0.5g，加乙醚20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
另取当归对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。
照薄层色谱法（附录7）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4 ：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
7.4.3取本品粉末3g，加1%碳酸氢钠溶液50ml，超声处理10分钟，离心，取上清液用稀盐酸调节pH值至2～3，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
另取阿魏酸对照品、藁本内酯对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录7）试验，吸收上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（4 ：1 ：1 ：0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
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当归地上部分中绿原酸和金丝桃苷的含量测定
【摘要】目的建立当归地上部分中绿原酸与金丝桃苷的含量测定方法。
方法采用高效液相色谱法，色谱柱为GRACE C18 （250 mm×4.6 mm， 5 μm）；流动相为乙腈（A）0.5%甲酸水溶液（B）梯度洗脱；流速 1.0 ml/min；检测波长为325 nm（绿原酸）和355 nm（金丝桃苷）。
结果绿原酸和金丝桃苷的线性范围分别为0.29～5.8μg/μL（R2=0.9996），0.1～2.0μg/μL（R2=0.9999）；平均加样回收率分别为为97.34%（RSD=4.77%），101.70%（RSD=3.07%）。
结论该方法准确可靠、简便可行，可用于当归地上部分药材的质量控制。
【关键词】当归；绿原酸；金丝桃苷；含量测定
当归为伞形科植物当归Angelica sinensis （Oliv.）Diels.的干燥根，是一种常用中药，具有补血活血，调经止痛，润肠通便之功效[1]。
另一方面，在亚洲各国当归还被广泛用作食材，并且在欧美也是一种重要的膳食补充剂[2，3]。
随着现代医药工业的不断发展，各种中药材资源急剧减少，因此，如何合理综合利用现有资源也成了中药研究的热门课题。
传统中当归的非药用部位也被深入研究，并分离得到很多具有显著活性的化学成分，并且发现当归地上部分中含有的绿原酸和金丝桃苷是重要的抗凝血及抗菌活性成分[4]。
为了更好地开发利用丰富的当归地上部分资源，本文首次对其中的绿原酸和金丝桃苷含量测定方法进行了研究。
1 仪器与试剂
Waters 2695高效液相色谱系统（包括四元泵溶剂系统，在线脱气机和自动进样器，2998 PDA 检测器，EmpowerTM工作站）；电子分析天平（BT125D，北京赛多利斯仪器系统有限公司）；超声波清洗器（KH2200B，昆山禾创超声仪器有限公司）。
绿原酸和金丝桃苷对照品购于中国药品生物制品鉴定所。
甲醇为分析出，乙腈为色谱纯；水为超纯水。
当归地上部分样品采自甘肃岷县，经作者鉴定为伞形科植物当归Angelica sinensis （Oliv.）Diels的干燥地上部分。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为GRACE C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈（A）0.5%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0 ～30 min，5% ～35%A）；流速1.0 ml/min；检测波长355 nm（金丝桃苷），325 nm（绿原酸）；柱温25 ℃；进样量20 μl。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取干燥至恒重的绿原酸和金丝桃苷对照品适量，加70 %甲醇制成浓度分别为30 μg/ml和10 μg/ml的混合对照品溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备
精密称取干燥药材粉末1.0 g，置具塞三角瓶中，精密加入70%甲醇50 ml，称定重量，超声45 min，放冷，再称定重量，以70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液过0.45 μm的微孔滤膜，即得。
2.4 检测限与定量限
以信噪比为3：1确定绿原酸的检测限为4.0 ng，金丝桃苷的检测限为5.8 ng；以信噪比为10∶1确定绿原酸的定量限为13.5 ng，金丝桃苷的定量限为18.4 ng。
2.7 稳定性试验取同一批次（20101025）当归地上部分药材粉末约1.0 g，精密称定，按“2.3”项下操作，在上述色谱条件下，分别于0、2、4、6、8、12 h 测定，测得绿原酸和金丝桃苷色谱峰面积，计算相对标准偏差分别为 1.44%和1.20%，结果表明供试品溶液在12 h内稳定。
2.8 重复性试验取同一批次（20101025）当归地上部分药材粉末6份，精密称定，按“2.3”项下操作，在上述色谱条件下进样测定，测得绿原酸和金丝桃苷色谱含量，计算相对标准偏差分别为
3.38%和0.16%。
2.9 加样回收试验
3 讨论
当归为一种药食两用的常用中药材，但在传统用药习惯中当归仅仅以根为入药部位，每年当归采收后都有大量的地上部分废弃，不但造成极大浪费，还会污染环境。
通过对当归地上部分有效成分的研究发现其中含有很多具有显著活性的化学成分，特别是所含有的绿原酸和金丝桃苷是重要的抗凝血及抗菌活性成分[4]。
本文首次对当归地上部分中的绿原酸和金丝桃苷含量测定进行了研究，为当归地上部分的开发利用提供参考。
提取条件的优化通过对提取溶剂，提取方法及提取时间的考察，确定50 ml 70%甲醇，超声45 min，可以完全提取1.0 g当归地上部分药材中的绿原酸和金丝桃苷。
参考文献
[1] 南京新医学院. 中药大辞典. 上海：上海科学技术出版社，2006，1207.
[2] Zhao KJ，Dong TX，Tu PF，et al. Molecular genetic and chemical assessment of radix Angelica （Danggui）in china. J Agric Food Chem，2003，51（9）：25762583.
[3] Deng SX，Chen SN，Yao P，et al. Serotonergic activityguided phytochemical investigation of the roots of Angelica sinensis. J Nat Prod，2006，69
（4）：536541.
[4] Zhou GS，Yang NY，Tang YP，et al. Chemical constituents from the aerial parts of Angelica sinensis and their bioactivities. Chin J Nat Med，2012，10（4）：295298.。