11.血清学的特殊的检验 Microsoft Office PowerPoint 简报

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输血前免疫血清学检查PPT课件

输血前免疫血清学检查PPT课件
经典方法,加LISS(低离子介质溶液)的方法 凝聚胺法 微柱凝胶试验(卡式配血)
———— 各有优缺点
※ 盐水法简便、快捷、价廉,但有局限性:
只能检出ABO、P、Lewis、MN等系统的抗体,此类 抗体属天然抗体,属IgM;
不能检出Rh、Kell、Kidd、Duffy等系统的抗体,此 类抗体由免疫产生,属IgG。
序 Rh-hr Kidd MNSs Duffy Diego Kell Lewis P
号 D C E c e JKa JKb M N S s Mur Fya Fyb Dia Dib K k Lea Leb P1 1 ++00+ 0 + ++0+ 0 + + 0 + 0 +0 + 0
2 +0++0 + + 0+0+ / + 0 0 + 0 +0 + 0
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
主侧交叉配血不相合的原因
患者或供者ABO血型定型不正确; 患者血清中存在同种抗体,与供者红细胞上相应抗原起反应; 患者血清中存在自身抗体,与供者红细胞上相应抗原起反应; 患者血清中白蛋白与球蛋白比例不正常引起的缗钱状假凝集; 血浆扩容剂的影响或试剂被污染等。
主侧(+)、自身(-)、抗体筛选(-),可能原因:
出现异常结果的处理办法
正反定型不一致应重新检测(应使用洗涤红细胞) 如果重新检测结果仍然异常,请资深工作人员协助 当检测结果与以往记录不一致时,应重新采集血标本 再一次检测
如果一时无法找到正反定型结果不一致的原因,患者 又需紧急输血,此时可输注Rh(D)同型的O型红细胞

第九章血清学反应 58页PPT文档

第九章血清学反应 58页PPT文档

补体没有特异性,它能与任何抗原抗体复合物相 结合,但不能与游离的抗原或抗体相结合。
补体与抗原抗体的复合物结合后,可出现溶血反 应、溶菌反应、补体结合反应、凝集反应、免疫黏
膜试验等。由于补体具有这一特性,故常用其来检
验抗原或抗体是否发生特异性结合,特异性抗原或
抗体是否存在。
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二、溶解试验
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(正向)间接凝集反应原理示意图
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(反向)间接凝集反应原理示意图
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间接凝集抑制反应原理示意图
A:标本中含抗原 B:标本中不含抗原
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第四节 与补体有关的试验
一、补体的性质
补体是存在于正常动物血清中的一组蛋白质。
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特点:简便、敏感性低、耗时、应用最 广
用途:常用于细菌、病毒的鉴定,抗血 清效价的测定,抗原组分的分析及传 染病的诊断等,如马传染性贫血病的 诊断。
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第三节 凝集试验
细菌、红细胞等颗粒状态的抗原与相应的 抗体结合后,在电解质存在时相互凝集成絮 片状团块,这种试验称为凝集试验 (Agglutiation test)。
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一 液相沉淀试验
1.环状沉淀试验
原理:试管内,下层沉淀素与上层
沉淀原在液界面应形成白色沉淀环。
用途:检测皮毛中的炭疽
杆菌抗原(Ascoli试验)
2.絮状沉淀试验
抗原与抗体在试管内混合,在电解质的存在下抗
原抗体复合物可形成絮状凝聚物。此法多用于毒

血清学实验技术课件

血清学实验技术课件
•本质:间接凝集试验
•原理:不完全抗体(单价抗体)与颗粒抗原结合不出现可见凝集反应,用单价抗体免
疫动物,将获得的抗抗体与结合有单价抗体的颗粒载体混合,出现可见的凝集反应 •应用:初生动物自身免疫溶血性贫血诊断,布氏杆菌病的不完全抗体检测,抗组织细 胞不完全抗体的检测
Step 1 Step 2
+
不完全Ab
原分析和疾病诊断的基础;但不同微生物的 部分共同抗原或不同抗原的相同表位可出现 交叉反应,后者是区分血清型或亚型重要依 据
• 结合比例:抗原抗体结合在比例适当时才出现 明显可见反应,抗原或抗体过多可抑制可见反 应,称为带现象
• 可逆性:抗原抗体结合力与非共价键性质、数
量和距离有关,形成的复合物可以解离, 离解 常数(K)反映抗体与抗原之间的亲合力,高亲
=
颗粒性抗原 如:RBCs
+
=
Anti-AbFc
第14页,幻灯片共36页
沉淀试验分类
液体沉淀试验 沉淀试验
凝胶内沉淀试验
絮状沉淀试验 环状沉淀试验 免疫浊度测定
免疫扩散试验 免疫电泳 对流免疫电泳 火箭免疫电泳
第15页,幻灯片共36页
环状沉淀试验
• 在小口径玻璃管内进行 • 主要用于抗原的定性检测(如诊断
• 分类 • 凝集试验:细菌、红细胞等颗粒性抗原或与颗粒性载体
(红细胞、乳胶等)结合的可溶性抗原与相应抗体结合, 在电解质参与下形成肉眼可见的凝集团块 • 沉淀试验:可溶性抗原与相应抗体结合,在电解质参与 下形成肉眼可见的沉淀物
第8页,幻灯片共36页
凝集试验分类
直接凝集性试验 凝集性试验 间接凝集性试验
(Enzyme-linked immunosorbant assay, ELISA)

输血前血型血清学检验PPT课件

输血前血型血清学检验PPT课件
抗-
B试剂不应该与获得性B抗原反应。
.
4
ABO、RhD血型卡检 测
每个血型检测卡都带自身质控(ctl)对照,实质就是一 个阴性质控。如果是阳性,则检测结果无效。
优点为:
避免病人自身凝集引起误判结果。
监控操作规范性。
监测试剂卡质量。
.
5
ABO、RhD血型卡检 测
• 操作步骤 a.制备1%待检红细胞生理盐水(1mlN.S+10ul压积
• 由肠梗阻、结肠或直肠癌和其他低位肠道有关的 疾病引起。
• 肠壁渗透性增加,细菌多糖吸附到红细胞上产生 B特异性。
• 也见于普通变形杆菌引起的败血症。
.
15
红细胞血型抗原减弱或消失
• A亚型和/或B亚型 • 白血病、何杰金氏病等 • 某些疾病引起的血型物质增多,如胃癌,胰腺癌
.
16
ABO正反定型矛盾
dcp 表示混合凝集外观,部分红细胞凝集颗粒集结. 于凝胶表层,部分红细胞沉于胶底。
7
ABO、RhD血型抗原检测卡
• 混合凝集外观:一般出现在嵌合体血型中
多发生在异型输血、异卵双生、双精受精和异 型骨髓移植后。异型输血、异型骨髓移植属于 暂时性嵌合(人工嵌合),双卵双生、双精受 精是遗传嵌合属于永久性嵌合。
▪给患者输入不相容的血液成分导致严重不良后果:
✓急性溶血反应:多由ABO血型不相容输血引起,人 为差错是其主要原因;
✓迟发性溶血反应:多由ABO以外血型不相容输血所 致,输血前检验不规范是其主要原因。
.
3
ABO、RhD血型抗原检测
▪常规ABO血型鉴定应包括正反定型,二者起到

相验证和质控的作用。
▪ABO正定型采用单克隆抗-A、抗-B血型试剂,

免疫血清学实验ppt课件

免疫血清学实验ppt课件
原之间的异同点
两个样品为同一抗原
存在三种不同的抗原 两个样品部分相同
二、凝集反应
原理
颗粒性抗原(完整的病原微生物或红细胞等)与相应抗 体特异性结合,在有电解质存在的条件下,形成肉眼可见 的凝集团块。
基本类型
直接凝集反应、间接凝集反应、凝集抑制反应等。
直接凝集实验(ABO血型鉴定)
主要材料
A 抗
A
B 抗
B
结果判断
血型 抗A试剂
抗B试剂
A
Байду номын сангаас
+
-
B
-
+
0
-
-
AB
+
+
注意事项
• 注意无菌操作 • 滴加血液时,不要使枪头尖触及试剂
感谢下 载
64100l100l100l100l100l100l100l检查抗原和免疫血清的特异性纯度或浓度比较抗原之间的异同点两个样品为同一抗原存在三种不同的抗原两个样品部分相同二凝集反应原理颗粒性抗原完整的病原微生物或红细胞等与相应抗体特异性结合在有电解质存在的条件下形成肉眼可见的凝集团块
双向免疫扩散试验 直接凝集试验
g
3
间孔加入抗原
• 琼脂板放入湿盒内,置4℃,24-48小时后
4
观察结果。
倍比稀释法
样品 100管µL第一 管
10管0µL第二
100µ L
100µ L
100µL
1:4
1:8
1:16
100管µL第四
100µ L 1:64
结果判断
1
6
2
5
3
4
应用
• 测定抗体的效价 • 用特异性抗体检测抗原 • 检查抗原和免疫血清的特异性、纯度或浓度,比较抗
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Phase 3慢性时期的症状Chronic phase 1)最主要就是球蛋白病 2)血液学的改变: 关节炎 肾小球的病变
会有两个血球相以上的下降 神经症状
3)造成脑部血管的出血:
只要两个血球相的下降,外面都没有症状,就要 怀疑是这个病。
治疗艾利希体的药物: 1)Oxytetracycline(OTC)或Tetracycline 疗程要五个月以上 5mg/kg/bid 通常不使用 2)Doxycycline多西环素
口服药: Dipyridamole双嘧达莫1mg/kg/po/bid. Diltiazem地尔硫卓0.5mg/kg/po/bid Furosemide呋噻米1mg/kg/po/bid
Spironolactone螺内酯1mg/kg/po/bid Aspirin阿斯匹林5mg/kg/po/bid Doxycyclin多西环素5mg/kg/bid/po
BASOPHILIC RUBRICYTES
• 有时候会看到单核球会把红血球吃进来.
3.变成慢性的时期
最主要就是: 球蛋白病
慢性的关节炎
关节肿起来
怎么诊断这个病?
1.直接关节曩采样:
做抹片或离心后做残渣的抹片 2.测抗体: ELISA的检验 间接的荧光抗体的检验 染色 螺旋菌
治疗: 1)Doxycycline多西环素10mg/kg/bid/30day 2)Amoxicilline阿莫西林20mg/kg/tid/30day
病原消灭掉以后,抗体就会渐渐的消化掉. 免疫反应依照个体会有差异,有一些感染经过1-2 个星期,可能就自然恢复了,就把病原排除掉了. 大部份艾利希体感染以后21天,抗体才会出来,而 持续到80天,大概3-4个月.
治疗以后,这病原去除掉了,这抗体力价就会下来. 把病原去除掉以后,经过6-9个月,才可能变成阴性.
Phase 2没有症状的时期Subclinical
急性发作的时期 没有什么症状
没有症状的时期:
除了血液学发生改变:
会看到可能持续性的白血球很低,可能只有400, 或700,一直都是很低. 这是病原堆积在骨髓里面,造成骨髓的抑制,骨髓 的增生不良.
也有可能这血小板一直都很低.
这样的时期会拖一段时间,持续下去,最后就会展 现出慢性时期的症状.
有这种实心的红血球,就表示有抗体附着在 红血球上面.
SPHEROCYTE
POLYCHROMIC RBCS
刚开始发生自体免疫性溶血性贫血,都会有再生性 的贫血.这时候会看到很多这种多染色性的,比较偏 蓝的,嗜碱性的红血球. 再生性贫血
多染色性的红血球
有时会有大小不同的红血球.
ANISOCYTOSIS
检测犬瘟热的Kit,很准确,大部份不会发生伪阳性. 但是有可能会造成伪阴性.
当现在这一个病毒还在病毒血症,还没有到局部 的时候,可能就检测不出来.
Canine distemper inclusion犬瘟热的包涵体
狗怀疑是犬瘟热,在发烧期的时候,抽血检查可能 就可以看到染色比较嗜酸性的,也就是刘氏染色 染起来是比较偏红的这种包涵体.
症状: 1.没有特异性的症状 2.不明原因的发烧
变得比较疲倦
食欲减退 3.脾脏肿大
4.贫血………..
BABESIA CANIS
BABESIA GIBSONI
治疗:
1)Berenil贝尼尔(三氮咪,焦虫灵)
4-7mg/kg/sc 每星期打一次,总共打两次. 打焦虫灵之前20分钟先给Atropine 0.04mg/kg/sc 2)Imidocarb咪唑苯脲
焦虫
类固醇
Spherocyte 球形红血球
ACTIVE MONOCYTE, PHAGOCYTIZED RBC DEBRIES
很贫血的状况,可以看到红血球的凝集反应,这凝集 的红血球都是球型的红血球. 有嗜碱性多染色性的红血球,这表示牠是一种再生 性的贫血.这都跟免疫有关系.
SPHEROCYTES, AUTOAGGLUTINATION,
5mg/kg/sc 每7天给一次,连续给两次.
血巴东虫Haemobartonella
HEMOBARTONELLA CANIS 血巴东虫,狗型
HEMOBARTONELLA FELIS 血巴东虫,猫型
HEMOBARTONELLA FELIS血巴东虫,猫型
治疗: Doxycycin多西环素: 5mg/kg/bid/po Minocin米诺环素: 5mg/kg/bid/po
E.Canis Morula桑葚体
刘氏染色:这个Morula的染色跟Segment的核是不一 样,Morula里面的染色也不是均质的.
E CANIS MORULA INTRA_SEGMENT
这是在淋巴球上面的Morula.
E CANIS MORULA INTRA_LYMPHOCYTE
E CANIS MORULA INTRA_LYMPHOCYTE
BUN CRTN 尿蛋白 快筛Kit 显微镜检查
• 下图这个肺动脉都变得很粗’可以看到结节状的肺脏的病变. 结节样的病变
肺动脉变得很粗
• 主肺动脉MPA的变大.
MPA的变大
• 网状的间质性的肺脏病变.
• • • •
这个是肺脏结节的病变.乍看之下会以为是肺水肿,但去看心脏的 左心房是正常的,今天如果这里是肺水肿的话,左心房应该会鼓起 来,但是现在看起来,左心房还是正常的.所以这个还是属于右心结 节的病变,最主要还是心丝虫造成的.
3)Ampicillin氨苄西林20mg/kg/qid/30day
4)Chloramphenicol氯霉素15-25mg/kg/tid/30day 大部份都选择Amoxicilline.
心丝虫Heartworm
左侧肺动脉 主动脉 右侧肺动脉
前腔大 静脉
后腔大 静脉 左心室
主要的症状:
弓形虫 Toxoplasmosis
症状: 1.食欲不振
2.发烧
3.黄疸 4.神经症状
弓形虫到目前为止也是检测抗体. 有两种:
检测IgM的抗体 检测IgG的抗体
目前市面上的都是检测IgG的. 检测IgG阳性,就表示牠有接触到这个病原,现 在是什么状态不晓得.
2-4个星期
抗体力价
急性的发病时期
TROPHOZOITE 弓虫
• 这个形成像网状一样’就是幼虫造成的嗜酸性球的间质 • 性肺炎.
• 做超音波的目的,就是去看虫的位置在那里.
• 下面这个图可以看到虫在肺动脉上面.
心丝虫
• 下图可以看到这个虫在右心房’右心室.
治疗: RM-340 1.低剂量杀虫: 2.2mg/kg,一个月杀虫一次,大约4-6次. 2.正常剂量杀虫: 2.5mg/kg,杀一次,隔一个月,再用2.5mg/kg,今天杀 一次,明天再杀一次,总共三次.
PSEUDOCYST 伪曩
艾利希体Ehrlichiasis
抗体的检测:
感染艾利希体的疾病: Rocky Mountain spotted Fever落基山热 Ehrlichiacanis白细胞型 Kit PCR 检测抗体 检测抗原
Ehrlichia platus血小板型
免疫的反应: 感染以后7天 抗体
八隻腳
六隻腳幼蟲0.5mm
症状: 大部份都没有特异性的症状 1.发烧变得比较疲倦 2.多发性的关节炎
3.淋巴结跟脾脏会肿大 4.可能会有心肌炎
5.造成球蛋白病以后,会造成肾衰竭 6.更严重的会瘁死
从感染到发病: 1.潜伏期是7-21天,这是急性发病的症状. 2.可能变成没有症状,然后就带有这个病原. 这个时期可以长达1-3年
或者一直流口水 体重减轻
治疗: Terbutaline特布他林0.03mg/kg/po/tid Theophylline茶碱1-2mg/kg/tid/po Dexamethasone地塞米松0.15mg/kg/day Doxycyclin多西环素5mg/kg/bid/po
焦虫Babesiosis
在狗: a)心脏方面: 右心的衰竭 b)在肺脏方面: 幼虫 间质性的肺炎
肝脏的淤血 肾脏的淤血 脾脏的淤血
腹水
肺内高血压
肺血管的病变: 肺动脉扭曲
c)肾脏方面:
肺血管栓塞 肾衰竭
心丝虫
球蛋白病
肾小球的病变
感染心丝虫要做的一些检查: a)心电图的检查: 心肌的缺氧 心肌的梗塞 心房心室的阻断 右束支的阻断 b)x光的检查 右心房,右心室变大 肺血管的病变 主肺动脉变大 间质性线性型态的肺炎 c)超音波检查 d)实验室的检查
血清学的特殊的检验
莱姆病Lyme disease
莱姆病Lyme disease: Borrelia是螺旋菌 检验有没有抗体 感染后
1个月
抗体
Borrelia 莱姆病
3-4mm
跑到狗或者人, 在这里吸血 离开第二个 中间宿主到 外面来,在这 里可以活 3~5个月,这 时候会长到 3~4mm.
30天
Enalapril依那普利0.25-0.5mg/kg/bid/po Sucralfate硫糖铝0.25-1gm/bid/po
猫的心丝虫感染
猫感染心丝虫的症状: 1)急性的情况: 突然倒下去 呼吸困难 抽筋 呕吐下痢 心跳速率变得很快 突然失明 晕倒 突然死掉
2)慢性的情况: 咳嗽 呕吐 疲倦 食欲不振 像气喘一样,呼吸很快,甚至呼吸困难.
犬瘟热的包涵体
染色看到这个东西,会怀疑是不是染色的问题,把 H-J body或杂质染成比较红.
这种情况有几个技巧可以分辨: 1.如果在视野上看到像上图这样有一颗这么小, 另一颗那么大,也就是它大小不同,那就不用去考 虑它是H-J body,这个就是CD的包涵体.
2.或者像下图这样,一个红血球里面有很多颗,这 个都是很有力的工具,表示它是包涵体. 如果红血球的染色是正常状况下,也就是颜色是 正常的,看到这种东西比较嗜酸性,也就是比较红, 这个东西要考虑就是包涵体.
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