实验二 果蝇唾腺染色体
果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告
果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告一、实验原理双翅目昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫期的唾腺细胞很大，其中的染色体称为唾腺染色体。
这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um，长约400um，相当于普通染色体的100—150倍，因而又称为巨大染色体。
唾腺染色体处于体细胞染色体联会配对状态。
并且唾腺染色体经过多次复制而并不分开，每条染色体大约有1000—4000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体。
多线染色体经染色后，出现深浅不同、密疏各别的横纹，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征；如染色体有缺失、重复、倒位．易位等，很容易在唾腺染色体上识别出来。
各染色体的异染色质的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心；横纹有深浅、疏密的不同，各自对应排列，这意味着基因的排列。
唾腺染色体广泛应用于细胞遗传学、发生遗传学、进化遗传学及分子遗传学的研究中。
二、实验材料果蝇的三龄幼虫三、实验器材双目解剖镜，生物显微镜，解剖针，载玻片，盖玻片，滤纸条，废物缸，托盘等。
四、实验试剂生理盐水，盐酸，蒸馏水，改良苯酚品红染色液等。
五、实验步骤1.剥离唾腺：在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。
每只手各持一个解剖针，在解剖镜下进行操作。
由于果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持解剖针按压住虫体前端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。
剔除脂肪体并弃除无关物质。
2.解离：加一滴45%乙酸溶液于腺体上，作用5-7s。
用滤纸吸干溶液。
在唾腺组织上滴一滴1mol/lLHCl，解离30-40s，以松软组织，利于染色体的分散。
3.吸去 HCl，用水冲洗2-3次.4.染色：滴加改良苯酚品红染液染色30min,染色时间不可过长，否则背景也着色。
遗传学 实验材料 果蝇
实验一：果蝇唾液腺染色体制片与观察
试剂：乙醚、生理盐水、蒸馏水、1mol盐酸、石炭酸品红
器材：恒温培养箱、高压灭菌锅、显微镜、天平、培养瓶、棉塞、滤纸、载片、盖片、镊子、解剖针
实验二：果蝇饲养
试剂：乙醚、培养基
器材：放大镜、麻醉瓶、玻璃片、毛笔、石棉网、恒温培养箱、高压灭菌锅、显微镜、天平、培养瓶、棉塞、滤纸、载片、盖片、镊子、解剖针、牛皮纸
实验三：果蝇杂交实验
试剂：同上
器材：恒温培养箱、高压灭菌锅、显微镜、天平、培养瓶、棉塞、滤纸、载片、盖片、镊子、解剖针、烧杯、量筒、牛皮纸
果蝇培养基
水1000ml
玉米粉105g
红糖75g
琼脂7.5-10g
苯甲酸0.75g
酵母粉5-10g
配制方法：配制时先将水分成两份：一份用于加热溶解琼脂和糖，另一份煮玉米粉，玉米粉要先用冷水搅拌，再加到煮沸琼脂红糖溶液中，边倒边搅拌。
继续煮15-20分钟，关掉火后再加入苯甲酸(用少量酒精促溶) ，要充分搅拌后再分装培养瓶。
每瓶培养基厚度在2-3cm，置121℃高压蒸汽灭菌15分钟。
待培养基冷却后，在培养基的表面滴加新鲜酵母液，插上一块经灭菌后的滤纸片做为幼虫化蛹的干燥场所。
2 果蝇幼虫唾液腺染色体标本的制备与观察
果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与观察摘要果蝇幼虫唾腺细胞染色体是一种特化的巨大染色体，由于其外形具横纹与胀泡等结构，可作为物种区别标志与基因定位标志。
实验采用普通果蝇的三龄幼虫，剥离出其唾腺，通过固定、染色与压片等步骤制成果蝇幼虫唾腺染色体标本，在显微镜下观察，最终对果蝇幼虫唾腺染色体的外形、结构、特征做出简要描述。
引言果蝇三龄幼虫的唾腺细胞处于永久早期，染色体解旋呈伸展状态．在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂。
复制后的染色单体DNA不分开，这种现象叫做核内有丝分裂，从而形成了多线染色体。
加之唾腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态，而使其比一般分裂中期体细胞中的染色体长100~150倍。
由于在唾腺细胞中8条染色体之间以着丝粒互相连结在一起形成染色盘或异染中心，以及同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。
在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同，被称作明带、暗带的横纹，这些横纹的位置，宽窄、数目都具有物种的特异性。
不同物种，不同染色体的不同部位形态位置是固定的。
因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹特征能准确识别各条染色体。
另外某染色体上出现的变异，在唾腺染色体相应的臂上就能反映出来，这样这些横纹就成了精确基因定位的“坐标”。
将野生型果蝇的带纹与缺失、重复、倒位等突变体的带纹进行比较，就可以将一些基因定位在染色体上。
[1]在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的解旋、膨大形成的疏松区胀泡，其中最大的一个胀泡叫做巴尔比尼氏环。
胀泡富含转录出来的RNA，因此不着色，是基因活动的区域。
在个体发育的不同阶段，胀泡或巴尔比尼氏环在染色体上出现的部位不同，据此研究基因的表达，开展各种染色体变异的研究等等。
本次实验将通过对果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与观察，了解并掌握果蝇三龄幼虫唾腺的剖离技术，掌握唾腺染色体标本的制备方法，了解唾腺染色体的形态结构特点。
遗传实验报告-果蝇唾腺染色体观察
【实验目的】1.练习解剖果蝇幼虫的技术2.掌握果蝇唾腺染色体的制片方法3.了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点【实验原理】果蝇为双翅目完全变态的昆虫，幼虫期分三龄。
其幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的多线染色体。
双翅目昆虫的整个消化管细胞发育至一定阶段后就停止有丝分裂，终止在分裂间期。
但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制而并不分开。
经多次复制后，形成约1000~4000拷贝的染色体丝，比普通中期相染色体大得多（约100~500倍），因此又称为多线染色体。
黑腹果蝇染色体数2n=8，存在体联会。
各染色体的着丝粒互相靠拢形成染色中心，由染色体中心向外伸出5条很长的染色体臂和一条极短的染色体。
（如右图）染色体Ⅰ为端着丝粒染色体，所以它的一端在染色中心上，另一端游离；Ⅱ、Ⅲ染色体为中着丝粒染色体，他们从染色中心呈V字形向外伸展，所以分别能看到2L、2R、3L和3R 4条长而宽的“带状物”；点状的第Ⅳ染色体很短小，为端着丝粒。
因此可以见到5条很长的和一条仅靠染色中心的短小的染色体。
在雄性幼虫中，唾腺染色体上不见Y染色体，他捕鱼X染色体联会，而且其着丝粒及其附近的异染色质参与染色中心的形成。
这可能是雄性幼虫唾腺染色体中的X染色体比其他几对染色体相对狭窄一些的缘故。
果蝇唾腺染色体特点：巨大，是多线染色体；有丝分裂停在间期，DNA不断复制，着丝点不分开；同源染色体紧密配对—体细胞联会，染色体呈单倍数。
整个唾腺染色体上分布着染色深浅不同、粗细各异的横纹，这意味着基因的排列。
这些横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有物种的特异性。
黑腹果蝇的多线染色体具有大约5000条横纹。
染色体各条臂的端部，即远离染色中心的游离端恒定的横纹特征，是准确识别各对染色体的重要依据。
在果蝇的特定发育时期，横纹会出现不连续的膨胀，称为疏松区（puff），目前认为这是该部分基因被激活的标志。
果蝇唾液腺染色体观察实验报告
果蝇唾液腺染色体观察实验报告果蝇（Drosophila melanogaster）是一种常见的模式生物，在遗传学研究中有着重要的应用价值。
果蝇唾液腺染色体观察实验是一种常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化，为遗传学研究提供重要的数据支持。
本实验旨在通过对果蝇唾液腺细胞进行染色体观察，掌握染色体的基本结构和形态特征，为今后的遗传学研究奠定基础。
实验材料和方法。
1. 实验材料，成年果蝇、盐酸乙醇、醋酸乙酯、苏木精、酒精、冰醋酸、苏木素、甲醛、石蜡等。
2. 实验方法：（1）取一只成年果蝇，用镊子夹住果蝇的头部，将果蝇的身体用另一只镊子拔去。
（2）将果蝇头部置于盐酸乙醇中，浸泡5分钟，然后用镊子将头部转移到醋酸乙酯中，浸泡5分钟。
（3）将处理后的果蝇头部转移到苏木精中，浸泡5分钟，然后用酒精逐级脱水，最后转移到冰醋酸中浸泡5分钟。
（4）将果蝇头部转移到甲醛中，固定30分钟，然后用苏木素染色，再经过酒精逐级脱水，最后转移到石蜡中浸泡。
（5）将处理后的果蝇头部置于石蜡中，浸泡30分钟，然后取出制作切片，用显微镜观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构。
实验结果和分析。
经过实验操作，观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以看到染色体呈现出条状的形态，其中可以清晰地看到染色体的着丝粒和染色单体。
染色体的数量在观察的过程中也得到了初步的统计，一般情况下，果蝇唾液腺细胞的染色体数量为8条。
结论。
通过本次实验，我们成功观察了果蝇唾液腺细胞的染色体结构，了解了染色体的基本形态特征和数量变化。
这为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
总结。
果蝇唾液腺染色体观察实验是遗传学研究中常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化。
本次实验的成功进行，为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
《果蝇唾腺染色体的制备及观察》实验综述报告
《果蝇唾腺染色体的制备及观察》实验综述报告
果蝇唾腺染色体的制备及观察实验是一项相对简单的实验，能帮助我们深入地分析生
物体的遗传信息。
它有助于研究基因的定位，可以直接检测果蝇多种遗传现象，如基因重组、遗传连锁等。
同时，它也可以用于对果蝇染色体进行染色，以指导染色体的解剖研究。
本文将对果蝇唾腺染色体的制备及观察实验进行综述，并简要说明该实验的主要操作步骤。
果蝇唾腺染色体的制备及观察实验的前期准备较松散，需要准备的主要物品有果蝇、
固定液或甲醛、盐酸和对果蝇唾腺染色体染色所需要的染色剂。
在准备过程中一定要保证
果蝇是新鲜及易于收集的，以确保实验结果的准确性。
接下来是正式操作步骤：
（1）采集已经准备好的果蝇，在蝇斗背部用盐酸麻醉后放置在显微镜上；
（2）选择感兴趣的唾腺，将其夹紧，用毛笔蘸取染色剂，缓慢地涂抹到唾腺上；
（3）将果蝇用固定液或甲醛固定后放入、在水夹中放置，让蝇子充分固定；
（4）把固定好的果蝇放入蒸气器中，以上水蒸气状态来加强染色剂的渗入，再以滴
管仔细煮沸果蝇，使其外皮脱落；
（5）放入固定液或甲醛中，然后仔细观察标本，观察其染色情况；
（6）最终，用酒精把标本浸泡清除染色剂，待它恢复原色后，将标本用45％乙醇中
保存，打包发成图片，保持它的完整性。
果蝇唾腺染色体的制备及观察实验是一种非常有用的实验，能够帮助我们更好地理解
果蝇的染色体，并且可以应用到许多方面，如分子进化学研究等等。
但是，该实验也有许
多潜在风险，如暴露在有毒药物、辐射等环境中可能会对果蝇造成不良影响，所以在实验
过程中非常注意安全措施，严格控制暴露时间和剂量。
实验二、果蝇唾液腺染色体的制备与观察
实验二：果蝇唾液腺染色体的制备与观察一、实验目的1、练习果蝇唾液腺的分离方法2、掌握唾液腺染色体的制片技术3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征二、实验原理1、双翅目昆虫（果蝇）幼虫期的唾液腺细胞很大，其中的染色体称唾液腺染色体，相当于一般普通染色体的100－150倍，又称巨大染色体。
2、在幼虫发育过程中，唾液腺染色体仍进行复制，但细胞只生长不分裂，从而产生多线染色体。
多线染色体经染色后，出现深浅不一、宽窄不同的横纹，这些横纹的数目和位置是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征。
如果染色体缺失、重复、倒位、易位等结构变异时，很容易在唾腺染色体上识别出来。
3、多线染色体的特征：a 巨大；b体细胞配对，所以染色体只有半数（n=4）；c 各染色体的异染色质多份额着丝粒部分相互靠拢形成染色中心；d 横纹有深浅、疏密的不同，各自相应排列，这意味着基因的排列。
三、实验材料和用品实验材料：黑腹果蝇的三龄幼虫（选择行动迟缓、肥大、爬上管壁、就要化蛹了的三龄幼虫观察最佳）实验用品：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸。
0.9%生理盐水、1％醋酸洋红。
四、实验步骤1、载玻片置于显微镜下，上面滴加一滴生理盐水，放上果蝇幼虫（有一钝尾和带黑色口器的尖头，可根据其在盐水中爬行方向确定头部），两手各拿一枚解剖针，左手解剖针按住幼虫的后端1/3, 右手解剖针按住头部(尽量靠近口器)用力后拉，把头部从身体拉出，唾液腺随之而出。
（一对双叉形透明的囊状腺体）。
2、除去幼虫其他组织部分，把唾液腺周围脂肪组织（不透明）剥离干净，然后将多余生理盐水吸走，滴一滴醋酸洋红在载玻片上。
3、染色10 分钟，盖上盖玻片，用滤纸轻压一下吸去多余的染色液，然后平放在桌子上，用大拇指适当均匀用力压住，并横向揉几次（勿使盖玻片移动，用力和揉动是一个方向，不能来回揉！）。
4、显微镜观察，先在低倍镜下观察，找到分散好的染色体图像，再高倍镜观察。
用显微镜可以看到四对染色体，第一对染色体（X-）组成一个长条，第二和第三对各自组成了具有左右两臂的染色体对，它们都以中部的着丝区聚集，而第四对染色体很小，分布在着丝区呈点状或盘状。
_遗传实验报告2_果蝇唾腺
果蝇唾腺染色体标本的制备和观察实验日期：2013年3月21日一、实验目的通过实验掌握果蝇唾腺染色体的制片方法，了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点并练习解剖果蝇幼虫的技术。
二、实验原理唾腺染色体是一类存在于双翅目昆虫的幼虫唾液腺内的巨大染色体。
果蝇的唾腺染色体是典型的巨大染色体，它的巨大性的成因是核内有丝分裂造成的。
由于其染色体DNA经过多次复制（可达210～215次），但并未发生细胞核分裂，同时唾腺细胞中的染色体总是处在配对状态即体细胞联会，重复复制后的染色体聚集在一起，所以在显微镜下看到唾腺染色体要比一般的染色体大得多，又称多线染色体。
通过细胞遗传学的研究已经证明多线染色体的带纹与某些特定的基因相联系。
由于它的巨大性及其染色体上带纹清晰可数，根据C.B.Bridges等人的研究，至少已经发现5149条可以区别的带纹并已经建立了带纹分布图。
因此巨大染色体是遗传学上研究染色体形态结构及染色体畸变的好材料。
三、实验材料及仪器1.实验材料：普通果蝇的三龄幼虫。
2.实验仪器：双筒解剖镜、显微镜、解剖针、镊子、生理盐水、载玻片、盖玻片、改良苯酚品红染液、擦镜纸、吸水纸。
四、实验方法及步骤1.幼虫的培养为了在解剖镜下便于操作，使用的幼虫应发育充分而且个体较大。
在实验中，人们通常采用两个措施控制幼虫的生长。
1)良好的培养基提供了果蝇生长发育的必需营养，因此在培养瓶内放置的亲本不易过多，否则将产生过多的卵而造成养分不足。
2)培养果蝇的环境温度应比正常培养时略低一些，一般可控制在16～20℃范围内，低温下生长的果蝇个体较大。
果蝇属于完全变态的昆虫，成虫交尾后将卵产在培养基内。
在适宜的温度下，卵发育为幼虫并经过一、二龄幼虫的发育后，三龄幼虫要爬到瓶壁上化蛹，最后成熟的蛹羽化成为新一代的果蝇。
为了能够在实验时获得较多的幼虫，可以分批将亲本放入培养瓶。
实验时从培养瓶的瓶壁上挑选那些发育良好的、个体较大的幼虫。
2.调试双筒解剖镜在解剖前一定要先将解剖镜调试好，在调试时，先在载物台上放一张有字的纸作参照，用粗螺旋调节到一个固定位置，以看清载物台纸上的字为准。
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为什么还要对唾腺染色体进行研究呢？
果蝇染色体在科学研究中还有较重要的作用。 1953年发现了DNA的双螺旋结构，当时发现的DNA为B 型DNA，螺旋结构为右旋，每旋转一圈为10个碱基 （右旋结构还包括A型C型等），后来人工合成了左旋 的DNA（CGCGCG），这种DNA称为Z型DNA，每旋转一圈 为12个碱基，那么在自然条件下的生物中是否存在Z 型的DNA呢？ 研究发现部分蛋白可以特异结合左旋DNA，Z型DNA在 注射到动物体内后很快会诱导抗体的产生，而B型DNA 却不易诱导抗体的产生，用人工合成的Z-DNA免疫动 物诱导得到抗体，该抗体用荧光标记以后对果蝇的唾 腺染色体进行杂交，发现部分区域有强的荧光信号， 证实了自然条件下Z-DNA的存在。
（二）实验材料
大果蝇的三龄幼虫 该阶段幼虫体型大，唾腺较大，容易取材，应 取爬上管壁的幼虫为宜
（三）实验步骤
1）分离唾腺；
将幼虫放在含有一滴生理盐水的洁净载玻片上。在解剖镜下观察： 幼虫头部有黑色的口沟，尾端有一对黄色的后气门。双手各持一 枚解剖针，用左手解剖针压住幼虫中部，用右手解剖针自幼虫口 沟后切断头部，体内各器宫便从切口处挤出，一对唾腺也随之而 出。
4. 染色体上出现深浅不同的带纹
染色体中带纹的出现是由于染色体结合染料的深浅不 同导致的，DNA螺旋相对致密的区域染色较深；每条 染色体上带纹的排列通常是恒定的，但是不同发育时 期带纹可能会有变化，显示了基因表达的变化，有时 部分区域的带纹消失，出现染色体的膨胀，称为疏松 区（puff）。
Morgen实验室将不同染色体的带纹进行划分并 进行命名，用染色体带纹的不同检测诱变产生 的突变体，通常可以检测到的突变包括染色体 的缺失、重复、倒位等，可以看到染色体上形 成缺失环、倒位环等。
实验二 果蝇唾腺染色体
（一）实验原理
果蝇等双翅目昆虫幼虫的唾腺细胞很大，其中 的染色体称为唾腺染色体，该染色体比普通的 染色体大很多，又称为巨大染色体。由于体细 胞的染色体通常较小，对其进行研究较为困难， 果蝇巨大的染色体是研究染色体的好材料。
唾腺染色体特征
1. 巨大
唾腺细胞通常认为是处于间期或前期的细胞，其 染色体连续进行多次细胞内复制却不进行细胞的 分裂，染色体的各拷贝不分开，大约有1000-4000 根染色体丝拷贝，是普通染色体的100-150倍。
缺失环
倒位环
多线染色体
果蝇的唾腺染色体中含有多条染色体拷贝，称 为多线染色体（Polytene chromosome）。除 唾腺以外，在消化道等部位也有多线染色体的 存在，但是这些部位的多线染色体复制次数通 常没有唾腺多，因此染色体较唾腺染色体细。 除果蝇以外，在摇蚊等昆虫中也存在多线染色 体。DNA模板量的增加可能是基因表达调控的 一种手段。
唾腺是一对透明的棒状腺体，通常每个腺体上附着一 个白色的脂肪体，是鉴别唾腺的重要标志。
2）将唾腺以外的其他部分以及脂肪体去除备 用。 3）1M盐酸水解3min；水洗三次，每次1-2min； 苯酚品红染色20min 4）压片观察；加盖玻片以后用大拇指用力压 片。可以稍微轻搓一下，但是要向同一个方向， 可能会使细胞分散的更好些。 5）显微镜下寻找分散较好唾腺染色体，观察 唾腺染色体的特点，并绘图。
唾腺染色体特征
3.各染色体着丝粒部分相互靠拢形成染色 中心 果蝇的2,3号染色体为中着丝粒染色体，可 以看到两条染色体臂；4号染色体为点状染 色体，通常不易观察到；X染色体为端着丝 粒染色体，只能看到一条染色体臂；因此 唾腺细胞中通常能看到的染色体是由染色 中心向外伸出五条
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唾腺染色体特征
2. 体细胞配对 果蝇的体细胞中共有8条染色体，其中有3 对常染色体，1对性染色体，唾腺细胞同源 染色体之间相互配对（类似减数分裂前期 I），形成一条染色体，我们称为体细胞配 对，因此在果蝇的唾腺细胞中只能看到四 条巨大的染色体，染色体数只有体细胞的 一半 。