核酸习题
第2章第3节
一、选择题
1．大豆细胞中的核酸包括
() A．脱氧核糖核酸
B．脱氧核糖核酸和核糖核酸
C．核糖核酸
D．脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸
答案：B
解析：大豆属于高等的绿色植物，细胞中的核酸包括脱氧核糖核酸——DNA和核糖核酸——RNA两种。其中DNA主要分布于细胞核内，另外在细胞质中的线粒体和叶绿体中也存在少量DNA。RNA主要分布在细胞质中。故正确答案为B。
2．下列关于核酸的叙述正确的是
() A．组成核酸的基本单位是脱氧核苷酸
B．核酸由C、H、O、N元素组成
C．核酸是一切生物的遗传物质
D．病毒没有核酸存在
答案：C
解析：A错，组成核酸的基本单位是核苷酸。而脱氧核糖核苷酸是组成脱氧核糖核酸—DNA的基本单位。B错，核酸由C、H、O、N、P元素组成。D错，病毒是由核酸(DNA 或RNA)和蛋白质共同构成的，有核酸的存在。C对，核酸是一切生物的遗传物质。
3．右图表示核酸的基本组成单位之一，它的全称是
()
A．尿嘧啶核糖核苷酸B．尿嘧啶核糖核酸
C．尿嘧啶脱氧核糖核酸D．鸟嘌呤核糖核苷酸
答案：A
解析：核酸包括DNA和RNA，二者的基本组成单位都是核苷酸。但二者不同点之一是组成核苷酸的五碳糖不同，组成DNA的核苷酸中，五碳糖为脱氧核糖，而组成RNA的核苷酸中，五碳糖为核糖；二是组成核糖核苷酸的碱基中由U代替脱氧核糖核苷酸中的T。
4．作为遗传物质的DNA，与蛋白质的根本区别在于
() A．有一定的空间结构
B．能精确地复制自己并传给后代
C．相对分子质量大小
D．分子结构相对稳定
答案：B
解析：蛋白质和核酸都是大分子物质，分子结构都有相对的稳定性，有一定的空间结构，相对分子质量都很大。但是核酸能够精确地复制自己并传给后代，蛋白质不能。
5．原核生物的遗传物质是
() A．DNA
B．RNA
C．蛋白质
D．核苷酸
答案：A
解析：原核生物如大肠杆菌、蓝藻等细胞中既有DNA又有RNA。但是DNA是遗传物
质，RNA不是。故选择A。
6．由A、G、U三种碱基构成的核苷酸共有
() A．3种
B．4种
C．5种
D．6种
答案：C
解析：核苷酸是组成核酸的基本单位。每个核苷酸是由一分子磷酸、一分子五碳糖和一分子含N的碱基所组成。由于五碳糖的不同把核苷酸分为脱氧核糖核苷酸(五碳糖是脱氧核糖)和核糖核苷酸(五碳糖是核糖)。组成脱氧核糖核苷酸的碱基是A(腺嘌呤)、T(胸腺嘧啶)、C(胞嘧啶)、G(鸟嘌呤)四种；组成核糖核苷酸的碱基是A(腺嘌呤)、U(尿嘧啶)、C(胞嘧啶)、G(鸟嘌呤)四种，由于碱基的不同，把核苷酸区别为4种脱氧核糖核苷酸和4种核糖核苷酸。由上述可知，脱氧核糖核苷酸中不含碱基U。所以由A、G、U三种碱基构成的核苷酸共有5种。
7．下列选项中关于脱氧核糖核苷酸各成分间的连接关系，正确的是
() A．磷酸——脱氧核糖——碱基
B．磷酸——核糖——碱基
C．磷酸——碱基——脱氧核糖
D．脱氧核糖——磷酸——碱基
答案：A
解析：首先明确脱氧核糖核苷酸含有的五碳糖是脱氧核糖而不是核糖，所以排除B项。再明确磷酸、脱氧核糖和碱基之间的连接关系是磷酸和碱基都连接在脱氧核糖上，并且在脱氧核糖上呈间位排列，如图所示：
8．DNA分子结构的多样性主要取决于
() A．碱基数量的不同
B．碱基比例的不同
C．碱基序列的不同
D．碱基种类的不同
答案：C
解析：DNA分子结构的多样性由不同碱基序列所决定。不同的DNA分子其碱基的种类都是相同的(A、G、C、T)。相同数量和比例的碱基可形成不同碱基序列的DNA。
9．不同生物细胞的蛋白质和核酸分子，其组成和结构
() A．都相同
B．蛋白质相同，核酸不同
C．都不相同
D．核酸相同，蛋白质不相同
答案：C
解析：蛋白质是生命活动的主要承担者；核酸是一切生物的遗传物质，二者都具有物种的特异性。都因生物种类的不同而不同。
10．下列选项中对DNA的叙述正确的是
()
①在人的肌肉细胞中，DNA上含有人的全部遗传信息②一个DNA分子可以控制许多性状③同种个体之间的DNA是完全相同的④转录时是以DNA分子的一条链为模板⑤DNA是一切生物的遗传物质
A．①③⑤
B．②③⑤
C．①③④
D．①②④
答案：D
解析：本题5个观点中，①是正确的，因为在人体的体细胞中，每个有核的体细胞中都含有相同的DNA分子，也就是说，每个细胞内的DNA都含有此人全部的遗传信息；②是正确的，因为控制生物性状的基本单位是基因，基因是DNA上具有遗传效应的片段，它在DNA上呈线性排列，也就是说，一个DNA分子上有很多个基因，所以一个DNA分子可以控制许多性状；③是错误的，同种个体之间的DNA分子也不是相同的，这样，同种个体之间才会有性状上的差异，这也说明DNA分子的多样性和特异性；④是正确的，转录时，DNA 以其双链中的一条链为模板，而另一条链并不参与转录；⑤是错误的，我们只能说，绝大多数生物的遗传物质是DNA，因为有些生物如烟草花叶病毒、艾滋病病毒等生物的遗传物质是RNA而不是DNA。因此，综上所述，我们知道①②④是正确的。
11．由一分子含氮碱基、一分子五碳糖、一分子磷酸组成的化合物是
() A．核酸
B．核苷酸
C．核糖核酸
D．脱氧核糖核酸
答案：B
解析：依题意可知，一分子含氮碱基、一分子五碳糖、一分子磷酸组成的化合物应当是核苷酸，核苷酸是核酸的基本组成单位。
12．所有病毒的遗传物质是
() A．都是DNA
B．是DNA和RNA
C．都是RNA
D．是DNA或RNA
答案：D
解析：病毒是一类非细胞形态的，只有DNA(或RNA)和蛋白质分子构成生物。大多数病毒所含的核酸是DNA，这种类型的病毒以DNA作为遗传物质；少数病毒所含的核酸是RNA，这类病毒以RNA作为遗传物质。所以说，所有病毒的遗传物质是DNA或RNA。
13．下列叙述不正确的是
() A．只含有RNA的生物，遗传物质是RNA
B．只含有DNA的生物，遗传物质是DNA
C．既含有DNA又含有RNA的生物，遗传物质是DNA和RNA
D．既含有DNA又含有RNA的生物，遗传物质是DNA不是RNA
答案：C
解析：实验证明核酸是一切生物的遗传物质。既含有DNA又含有RNA的生物，其遗传物质只是DNA，因此C选项错误。
14．在观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中，通过染色、观察等步骤一次性显示DNA和RNA在细胞中的分布情况，需用的染色剂是
() A．仅有吡罗红
B．先用甲基绿，后用吡罗红
C．甲基绿、吡罗红混合染色剂
D．仅有甲基绿
答案：C
解析：通过教材可知：甲基绿和吡罗红在使用时要混合，利用混合染色剂将细胞染色。甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗
红使RNA呈现红色。
15．吡罗红、甲基绿染色剂的成分应该是
()
①吡罗红、甲基绿②吡罗红、甲基蓝③清水④蒸馏水⑤0.9%NaCl溶液⑥乙酸钾⑦乙酸⑧乙酸钠⑨盐酸
A．①③⑥⑦
B．②④⑧⑨
C．②③⑦⑧
D．①④⑦⑧
答案：D
解析：吡罗红、甲基绿染色剂的成分是：吡罗红、甲基绿粉加入蒸馏水溶解。乙酸钠用蒸馏水溶解；乙酸用蒸馏水稀释。综上所述，正确选项为D。
二、非选择题
16．根据“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验，回答下列问题：
(1)实验原理：DNA主要分布在细胞核内，RNA大部分存在于细胞质中。甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的__________不同，甲基绿__________，吡罗红__________。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示__________。盐酸能够改变__________，加速__________，同时使__________与__________分离，有利于__________。
(2)把取出的口腔上皮细胞放入0.9%的生理盐水中，而不是放入蒸馏水中，原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
(3)在酒精灯上将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干时应注意哪些问题？
________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
答案：(1)亲和力使DNA呈现绿色使RNA呈现红色DNA和RNA在细胞中的分布细胞膜的通透性染色剂进入细胞DNA蛋白质DNA与染色剂结合(2)保持口腔上皮细胞形态，放入蒸馏水中细胞则吸水涨破(3)①在酒精灯火焰上方来回移动载玻片，使受热均匀；②烘干至细胞吸附住即可
17．某科研小组对禽流感病毒的遗传物质进行如下实验：
实验原理：(略)
实验目的：探究禽流感病毒的遗传物质是DNA还是RNA。
材料用具：显微注射器，禽流感病毒的核酸提取物，活鸡胚，DNA酶，RNA酶等。
实验步骤：
第一步：取等量活鸡胚两组，运用显微注射技术分别向两组活鸡胚细胞中注射有关物质。
第二步：在适宜条件下培养。
第三步：分别从培养后的鸡胚中抽取样品，检测是否产生了禽流感病毒。
请将相关内容填入下表：
解析：本探究实验研究禽流感病毒的遗传物质是DNA还是RNA。若是DNA，在DNA 酶作用下，DNA水解，将用酶处理过的核酸注射入活鸡胚细胞中，鸡胚细胞中无禽流感病毒；若用RNA酶处理，DNA不水解，注射入活鸡胚细胞中，鸡胚细胞中有禽流感病毒。若禽流感病毒的遗传物质是RNA，经相同的处理，结果相反。
细菌感染性疾病的直接核酸诊断试验
细菌感染性疾病的直接核酸诊断试验 Florence Paillard, PhD, and Craig S. Hill, PhD 准确和快速的诊断是及时采取治疗措施和防止感染性疾病扩散的关键。理想的感染性疾病的诊断试剂应该能够给临床医生提供快速、灵敏度高和特异性强的实验结果。检测试剂如果灵敏度不高则可能导致疾病的漏检，使患者不能得到及时的治疗，还可造成疾病的扩散；同样，试剂如果特异性较差则可能出现假阳性结果，假阳性的出现不仅会导致不必要的治疗，还可能给人们带来心理上的阴影。不论对个人还是公共卫生部门，因检测方法的不可靠所导致的错误诊断都有可能造成严重的后果。令人欣慰的是，近年来分子诊断技术的发展已使得人们可以研制出比传统方法更为灵敏、特异和快速的用于感染性疾病的诊断试剂。 一、细菌感染性疾病诊断方法述评 数十年来，检测细菌的的标准方法是培养（液体和/或固体培养基）和染色，如用于结核分枝杆菌的抗酸染色和淋病奈瑟菌的革兰染色。其它一些方法还包括采用抗体技术检测细菌抗原的酶免疫测定（EIA）和直接荧光抗体技术（DFA）等。 采用分子生物学技术检测微生物核酸成分的核酸检测（NATs）技术的发展为临床诊断方法带来了革命性的变化。目前用于微生物鉴定的NA Ts主要有两种类型：培养确认检测试剂和直接检测试剂。培养确认的NA Ts试剂主要用来对培养基上生长的微生物进行确认；直接NA Ts试剂可以直接检测标本中的微生物，无需培养。与培养确认探针试剂相比，由于直接NATs试剂完全不需要培养这一步骤，所以可以更快地给出检测结果；直接NATs试剂一般来说其准确性也高于直接免疫检测方法。美国FDA批准的第一个非放射性直接NA Ts试剂是Gen-Probe PACE试剂，用来检测衣原体和淋球菌感染。 对直接NATs试剂而言，一个至关重要的改进在于加入了目标扩增步骤，即探针检测前将目标序列进行扩增。第一个用于沙眼衣原体检测的核酸扩增试剂（NAA Ts）于1993年获得了FDA的批准。此后，随着核酸扩增技术的不断改进，出现了可以将样品成分的抑制作用降为最小的第二代NAA Ts，它的操作流程也得到了相应改进。 本文将就已经商品化并得到FDA批准的用于检测五种细菌感染的直接NATs试剂进行述评。这五种感染为：链球菌性咽炎、肺结核（TB）、阴道炎、衣原体（CT）和淋球菌（GC）感染。 二、直接NAT方法学 非扩增直接NATs（表1）：大多数商品化的直接NA Ts试剂都采用特异性针对出现在被测生物体内的一段独有的核酸序列（目标序列）的核酸探针。这种探针通常采用荧光或化学发光标记。所测样品需进行处理以使其能够释放出核酸。检测时，标记的DNA探针可以和靶序列特异性结合，形成一个稳定的探针-目标序列杂交体。该杂交体被从非杂交探针中分离或区别开后，标记物散发出信号。 在直接检测临床标本中的微生物时，NATs可以采用不同的方式来提高试剂的灵敏度。Gen-Probe采用的一项专利技术是将rRNA作为检测目标，rRNA在大多数微生物体内是以数以千计的拷贝量存在的。例如，沙眼衣原体中的rRNA可达2000拷贝，而DNA中有用的靶序列在每个细菌体内的量仅有一个或数个拷贝。因此以rRNA为检测目标可以大大提高试剂的灵敏度。除此之外，Gen-Probe由于在杂交检测中还采用了杂交保护检测（HPA）方法，使其试剂的灵敏度得以进一步提高。检测rRNA和HPA技术的结合使得第一个DNA探针检测试剂被临床实验室广泛用于培养的确定和直接检测。 第二个用于提高DNA探针检测灵敏度的方法是对信号分子进行放大，如杂交捕获试剂（Hybrid Capture assay）。它采用针对RNA:DNA杂交体的抗体来检测杂交形成，每个抗体都带有酶标记物。每个酶分子都会产生多种着色分子用于与之结合的每个杂交分子。这种从
实验九-动物组织中核酸的提取和鉴定
实验七动物组织中核酸的提取和鉴定 【原理】 动物组织细胞中的核糖核酸(RNA)与脱氧核糖孩酸(DNA)大部分与蛋白质结合形成核蛋白。核蛋白可被三氯醋酸沉淀，再用95％乙醇加热可以除去附着在沉淀上的脂类杂质，然后用10％NaCl溶液提取出核酸的钠盐，加入醇可使核酸钠沉淀析出。 先用水由动物肝中提出核蛋白，再籍酚将核酸与蛋白质之间的结合键断裂，并用乙醚抽提去蛋白质及其它杂质，最后用乙醇将核酸沉淀。 核酸(RNA、DNA)可被硫酸水解产生磷酸。有机碱（嘌岭、嘧啶）和戊糖（核糖、脱氧核糖）。 此三类化合物可用下列方法鉴定之。 1、磷酸：能与钼酸试剂作用生成磷钼酸，后者在还原剂的作用下。还原成兰色的钼兰。常用的还原剂有氨基苯磺酸、氯化亚锡，维生素C等。 H3PO4＋12H2MoO4→H3PO4·12MoO3 + 12H2O H3PO4·12MoO3H3PO4·6MoO3·3Mo2O5 2、嘌呤碱：能与苦 味酸作用形成针状结晶 3、戊糖： (1)核糖：经与强酸 (盐酸与硫酸)共热生成 糠醛，后者可与3;5二羟 甲基苯缩合成绿色化合 物。 (2)脱氧核糖：在强 酸中加热，可生成ω—羟 基γ—酮基戊醛，后者再 与二苯胺作用生成一蓝 色化合物。 上述二反应如下 【操作】
(一)核酸提取 l、用酚提取法： （1）取小白鼠一只，断头处死，剖腹取肝，置于研钵中，加入玻璃少许，研磨至糊状后，加入蒸馏水3ml，继续研磨约三分钟。 （2）于该研钵中再加酚液5ml，研磨约十分钟后，倒入—-圆底离心管中，离心5分钟（约2000转/分钟）。 （3）用毛细管将上液吸出，置于一圆底离心管中，加乙醚2ml，用拇指将管口按住，用力振摇1—2分钟(提出酚)，离心5分钟后，用毛细滴管吸取全部下层液于一圆底离心管中。 （4）于该管中加入95％乙醇2ml，用玻棒搅拌约2分钟，离心3分钟，取出．去上清液，沉淀部分即为核酸。 2、用三氯醋酸提取法 （1）杀兔；取肝，称重，按每克肝脏4ml比例加入1％三氯醋酸，制成肝匀浆。每组量取肝匀浆5ml于带塞离心管中，3000转／分离心5分钟。 （2）将离心后的上清液倾去，于沉淀中加95％乙醇5ml充分混匀，在水浴中加热至沸2分钟，注意酒精沸腾后将火关小，避免酒精蒸汽燃烧。冷却后离心。 （3）倾去上层乙醇液。于沉淀中再加入10％NaCI溶液4ml，置沸水浴中8分钟，并用玻棒不断搅拌，取出；冷却后再离心， （4）将上清液倾入另一离心管中，再离心一次，除去可能存在的微量残渣，将上清液倒入一试管。 取等量95％的乙醇，逐滴加入到上清液中，即可见白色沉淀逐渐出现，静置10分钟后。将其内容物摇匀后倒入一圆底离心管中，离心5分钟，将上液倾去，所得白色沉淀即为核酸钠。 (二)核酸的水解： 在有核酸沉淀的离心管中加入蒸馏水2ml。振摇至沉淀溶解后，加入10％H2SO42mL摇匀，于沸水浴中加热10分钟，即得核酸水解液，用流水冷却后进行下列定性试验。 (三)鉴定： l、嘌呤碱的鉴定： 取中试管一支，加入饱和苦味酸约2ml，再加入核酸水解液4—6滴，摇匀。静置于室温中，观察有无黄色针状结晶出现，。 2、脱氧核糖的鉴定：
核酸检测基本 知识
核酸检测基本知识 1.什么是核酸检测 核酸的定义：核酸是由核苷酸或脱氧核苷酸通过3′，5′-磷酸二酯键连接而成的一类生物大分子。 核酸具有非常重要的生物功能，主要是贮存遗传信息 和传递遗传信息。 2.核酸的分类 核酸大分子可分为两类：脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。 3.核酸的组成
DNA和RNA都是由一个一个核苷酸(nucleotide)头尾相连而形成的，由C、H、O、N、P，5种元素组成。DNA是绝大多数生物的遗传物质，RNA是少数不含DNA的病毒（如HIV病毒，流感病毒，SARS病毒等）的遗传物质。RNA平均长度大约为2000个核苷酸，而人的DNA却是很长的，约有3X10^9个核苷酸。 4.核酸的功能 在蛋白质的复制和合成中起着储存和传递遗传信息的 作用。核酸不仅是基本的遗传物质，而且在蛋白质的生物 合成上也占重要位置，因而在生长、遗传、变异等一系列 重大生命现象中起决定性的作用。 DNA与RNA都是核酸，它们在化学组成上有什么区别如 下： DNA与RNA的比较DNA RNA 主要存在部位细胞核细胞质 基本组成单位脱氧核苷酸核糖核苷酸碱基种类A、G、C、T A、G、C、U 五碳糖种类脱氧核糖核糖 核苷酸链两条脱氧核苷酸链一条核糖核苷酸链 5.检测方法 核酸检测方法，主要通过同时进行靶核酸扩增和可检 测信号的生成来检测样品中的靶核酸。可应用于临床微生
物学、血液筛选、遗传病诊断和预防、法医学等领域的核 酸检测。 目前主要使用的方法有以下几种： a.核酸序列依赖性扩增法 NASBA是由一对引物介导的、连续均一的、体外特异性 核苷酸序列等温扩增RNA的新技术。反应在42℃进行,可在2h内将RNA模板扩增约109倍。NASBA原理是提取病毒RNA,加入AMV逆转录酶、RNA酶H、T7RNA聚合酶和引物进行扩增。 整个反应分非循环相和循环相:在非循环相中,引物I与模板RNA退火后在AMV逆转录酶的作用下合成cDNA,形成RNA:DNA 杂合体,随即RNaseH降解RNA,引物Ⅱ与cDNA退火,在反转录酶作用下合成第2条DNA互补链。双链DNA可在T7RNA聚合酶的作用下,经其启动子序列起动而转录RNA，RNA又可在反转录酶的作用下反转录成DNA，进入循环相,对模板进行大量 扩增。 b.转录介导的扩增技术 TMA技术原理与NASBA基本一致，略有不同之处是TMA利用的是MMLV逆转录酶及T7RNA聚合酶两种酶，MMLV逆转录酶既有逆转录酶的活性又具有RNA酶H活性。反应在41.5℃进行,可在1h内将RNA模板扩增约109倍。 c.连接酶酶促链式反应(LCR) LCR是基于靶分子依赖的寡核苷酸探针相互连接的一种
核酸检测实验室应急预案SICOLAB
核酸检测实验室应急预案SICOLAB SICOLAB主要分7个步骤： 织织体系建设、生物安全事件分类、事件报告、应急处置方案、应急措施、预案管理 一、参考依据 《中华人民共和国传染病防治法》 《中华人民共和国国境卫生检疫法》 《中华人民共和国突发事件应对法》 《突发公共卫生事件应急条例》 《病原微生物实验室生物安全管理条例》 《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定》 《人间传染的病原微生物名录》、《医疗机构临床实验室管理办法》 《国家突发公共卫生事件应急预案》 《广州市突发公共卫生事件应急预案》 各地区卫生系统病原微生物实验室生物安全事件应急预案相关标准 二、预案基本内容及建设程序 1、织织体系建设 医务部：对感染者进行医疗救治及生物安全事件的应急处理工作。 预防保健科、医院感染管理科：医学观察及预防用药，并上报卫生行政部门及CDC机构。 感染科：对感染者和可疑接触者进行临床诊治、实施医学观察及预防用药。 临床检验中心及各实验室：成立生物安全应急小分队；检测工作；现场清洁消毒工作。保卫科：对发生泄漏的现场进行封锁，并按有关规定向公安部门报告。 总务科、设备科、药学部：储备、提供相应的防护用品、设备、必备的救助、消毒药品，协助有关科室进行环境的清洁、消毒工作等。 2、生物安全事件分类 重大生物安全事件：实验室人员确诊感染《人间传染的病原微生物名录》规定的第一、
二类病原微生物，或出现有关症状、体征，临床诊断为疑似感染《人间传染的病原微生物名录》规定的第一、二类病原微生物及样本漏失、流失事件。 一般生物安全事件：实验室人员确诊感染《人间传染的病原微生物名录》规定的第三类病原微生物，或出现有关症状、体征，临床诊断为疑似感染《人间传染的病原微生物名录》规定的第三类病原微生物及样本漏失、流失事件。 生物恐怖事件：病原微生物实验室设施被蓄意破坏；感染性样本或其他感染性材料被盗；在实验室内故意播撒高致病性病原微生物菌(毒)种或样本；病原微生物实验室出现不明原因或人为造成的火灾、断电、爆炸事故。 3、事件报告 报告单位：医院各科室 时限：2小时内向同级卫生局 报告内容：医院名称、实验室名称、事件发生地点、发生时间、涉及病原体名称、涉及的地域范围、感染或暴露人数、发病人数、死亡人数、密切接触者人数、发病者主要症状与体征、可能原因、已采取的措施、初步判定的事件级别、事件的发展趋势、下一步应对措施、报告单位、报告人员及通讯方式等。 4、应急处置方案 即关闭事件发生的实验室； 对周围已经污染或可能污染的环境进行封闭、隔离； 组织专业消毒人员消毒现场； 核实在相应潜伏期时间段内进出实验室人员及密切接触感染者人员的名单； 对被感染人员进行医学观察，对在事件发生时间段内、相应潜伏期时间段内进出实验室人员进行医学观察，必要时进行隔离和预防接种；提供微生物实验室布局、设施、设备、实验人员等情况；配合有关部门做好感染者救治及现场调查和处置工作。 如怀疑生物恐怖事件，要立即同时上报天河区卫生局、天河区公安局和国家安全部门。 5、应急措施 实验室生物安全事件发生后，立即组织生物安全应急小分队成员和相关专家穿用防护装进入现场了解事件信息、处理污染、评估危害。离开现场时，必须脱去防护装、严格手消毒，不得将污染、可疑污染物带离控制区域，消除污染扩散可能性。
核酸检测技术的应用
核酸检测技术的应用 规ELISA检测。部分标本因为ELISA检测项目不合格直接被淘汰而未 进入到核酸检测环节，有303616份标本分别实行混样核酸检测（191222人份）和单人份核酸检测（112394人份）。⑴混样核酸检测：按照试剂盒说明书要求，筛选ELISA检测合格标本实行8个标本混样 核酸检测，无反应性pooling的8个标本视为该项目核酸检测合格， 有反应性pooling实行标本的拆分单检，拆分无反应性的标本判为合格，拆分亦有反应性的标本判为该项目核酸检测不合格。⑵单人份核 酸检测：采用单个标本核酸检测模式，按照试剂盒和全自动核酸检测 设备要求实行检测，检测无反应性的标本视为HBVDNA、HCVRNA、HIV- 1RNA项目联检合格，检测有反应性的标本则视为HBVDNA、HCVRNA、 HIV-1RNA项目联检不合格。 1.2统计学处理采用x²检验,比较各项目不合格率的差异， p<0.05为差异有统计学意义。 2结果 其中112394人份采用单人份核酸检测系统实行检测，检出单独NAT不 合格数148例，不合格率为1.32‰；191222人份标本采用另外的混样 核酸检测系统实行检测，检出单独NAT不合格数63例，不合格率为 0.33‰.两者不合格率比较，有显著性差异（P<0.05）。 单采血小板标本中，采用ELISA方法检测全血标本278214人份，HBsAg、抗-HCV、抗-HIV-1/2三项不合格数2536例，不合格率为 9.1‰；采用ELISA方法检测单采血小板标本27698人份，HBsAg、抗-HCV、抗-HIV-1/2三项不合格数78例，不合格率为2.8‰.两者不合格 率比较，有显著性差异（P<0.05）。 类，一类为NAT反应性而ELISA无反应性，即为单独NAT不合格结果, 此类不合格的检出即为NAT在血液筛查中所发挥的检测效能。另一类 为NAT反应性ELISA亦为反应性。303616份标本中全血标本和单采血
SICOLAB核酸检测实验室设计建设重点
SICOLAB核酸检测实验室设计建设重点核酸检测实验室在系统运行中必须保证实验室内的负压和压力梯度稳定，为防止任何一个误动作或故障的发生，在极短的时间内诊断故障和应急处理尤为重要。 1、电源保证。为确保安全，实验室在工作期间不得停电，应考虑多线（源头）供电，并充分考虑最大供应量和有足够的负荷余量，设置应急电力供应系统，做到三路以上电源 保障。 ①双路供电：应确保供电来自2个不同的上级变电站。 ②备用发电机组：在双路供电发生故障或断电时提供电力保障。主要保障实验室通风空调系统、负压通风设备、自动控制系统、压缩空气系统、实验室关键工艺仪器设备等用电， 在双路供电断开时可自动切换。 ③UPS：保障在主供电源断电而备用发电机启动和电压稳定前（约10～30s）的不间断供电，与主供电源并联设置。 2、通风系统保障。通风系统是生物安全实验室最核心的设备，维持稳定的负压和压力梯度与通风系统的性能密切相关，通风系统一旦出现故障，稳定的负压和压力梯度很快就会被打破，导致实验室正压或超负压，造成危害生物因子的外逸，甚至围护结构的损坏，导致意外事故的发生。因此，送排风机组均需一用一备，送排风机的容量一定要有余量，当出现防压力故障时，可通过电动风量调节阀以及调节送排风量，维持稳定的负压和压力梯度。 3、（必要时）生命维持系统。为实验人员提供稳定、舒适的呼吸空气；一旦断供，正压服压力将失衡，实验人员将出现头晕、憋气症状；一旦出现负压，实验人员将可能遭受危害生物因子的污染。因此，生命维持系统压缩空气供应装置必须为2套独立的双空气气源，保持可靠的一用一备运行状态和应急供应状态，并有压力报警装置，压缩空气储罐容量要考虑在压缩机故障情况下保证实验人员至少维持15min的用量（正常退出实验室的时间）。
核酸检测实施方案
全面推行核酸检测试运行工作方案 为预防和控制经血传播疾病的发生，保障临床用血质量和安全，经研究决定我站将全面开展核酸检测。为稳步推进核酸全面检测，不影响血液批放行，满足临床用血需求，制定本试运行方案。 一、组织管理 为顺利开展全面核酸检测工作，成立核酸检测工作小组，工作组负责全面推行核酸检测试运行工作，协调处理试运行过程中的相关问题。核酸检测工作小组由田站长总负责，分管站领导和相关科室积极配合。 二、工作目标 根据卫计生发〔2013〕22号，国家卫生和计划生育委员会关于印发全面推进血站核酸检测工作实施方案（2013—2015年）提出的工作目标，到2015年，血液筛查核酸检测基本覆盖全国。2014年5月27日，山东省卫计委又下发了“关于全面推进供血核酸检测工作的通知”，要求各市要按照原卫生部《全面推进血站核酸检测工作实施方案（2013-2015年）》要求，迅速开展核酸检测工作。确保2014年下半年在全省全面开展供血核酸检测。为全面推进我站核酸检测工作，目前前期准备工作已就绪，人员、设备、资金已到位。经研究决定自2014年7月1日开始对我站所有献血员标本（包括沂源采血点）进行核酸检测。 三、保障措施 1、资源保障：器械科购买进口核酸采血管，仅供沂源采血点使用，为沂源采血点配备标本离心机二台（一台备用），购买标本运输箱3个（hiv送检一个，沂源采血点一个，备用一个）。（确认号之后到位，前完成） 2、沂源采血点标本的运送：沂源采血点工作人员严格按《血液标本留取程序 》留取标本和离心，置于2-6℃冰箱保存。标本由计划送血人员运回。根据工作需要，沂源计划送血增加一次，同时减少一次急症送血。即每周二、四、六计划送血三次，中午下班时由送血司机把标本及原料血捎回。为保证核酸标本检测不超48小时，沂源采血点工作人员工作时间调整，接血当日下午采血点工作人员休息，周日休息。 3、机采血小板计划的下达：血液供应科提前和临床沟通，说明我站下一步的工作目标和任务（全面核酸检测并纳入批放行）及造成的血液供应时间的变更，达成共识，取得谅解。合理安排血小板预约和采集计划，血小板采集计划截止到每天下午16：00点之前。？？？？？？ 4、机采血小板标本的交接：机采成分科按照血液供应科下达的采集计划预约献血员，安排献血员第二天早上7：30分之前到达血站，血小板标本必须于每天上午9：30之前分别与酶免实验室和核酸实验室当面交接。 5、全血标本的交接：各采血点2014年7月1日起，所有采集的血液同时留取核酸标本和酶免实验室标本。待检室每天早上与酶免实验室和核酸实验室当面交接标本，未检、待检和待放行的原料血和成分血分别存放并标识。 四、核酸检测 1、核酸实验室与酶免实验室同步对当天采集的单采血小板标本和前一天接回的沂源采血点的标本进行血筛三项检测，并对酶免实验室前一天初次检测无反应性的标本进行血筛三项的检测，对酶免实验室前一天初次检测单试剂呈反应性的标本进行血筛三项的单检模式，每天15:30前完成实验。若遇拆分标本，及时与相关科室沟通，调整放行和血小板发放时间，并且完成当天拆分检测，保证该批试验中不留待测的标本。若遇突发应急事件，核酸实验室和酶免实验室同步检测。每天核酸检测完毕后出具书面检测报告交血液质量控制科、血液成分制备科和献血服务科机采成分。 2、质量保证：核酸实验室应建立室内质控标准操作规程，实验室的每一批检测应至少有一个弱阳性室内质控品，该室内质控品应参与混样、核酸纯化、拆分或联检及鉴别检测的全过程。实验结束后，依据室内质控的判定规则对实验结果进行分析和审核，保证检测结果准确可靠。
病毒核酸检测流程
病毒核酸检测流程 展开全文 病毒核酸实验室检测步骤 具体操作如下： 1. 病毒采样：取病人唾液或者鼻咽拭子于病毒采样管保存 2. 核酸提取：提取病人唾液或者鼻咽拭子样本里的遗传物质，如果病人携带病毒，则样本里就会有该病毒的遗传物质RNA,使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于-20℃保存，RNA和需长期
保存的DNA应置于-70℃或液氮保存。 3.逆转录合成cDNA:进行提取液中RNA的逆转录，把RNA 逆转录成cDNA 逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA 酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中，在规定的温度和时间下进行逆转录反应。建议使用商品化RT-PCR 一步法试剂进行第一轮扩增反应。逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中，在规定的温度和时间下进行逆转录反应。使用商品化RT-PCR一步法试剂进行第一轮扩增反应。 3. PCR扩增反应（使用二次扩增的套式PCR扩增方法）:用病毒cDNA的特异性引物进行PCR扩增 PCR反应需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶（如Taq酶等）、缓冲液、和适量无RNA/DNA酶超纯水、以及模板（DNA 或cDNA）。在扩增仪中，按照设定的程序进行扩增。使用二次扩增的套式PCR扩增方法。 5. 结果分析判定：
若有扩增出病毒的DNA条带，则判定病人体内有该病毒 若没有扩增出DNA条带，则判定病所取样本无该病毒 实验注意事项： ①每一次检测需同时做两个阳性对照、两个阴性对照，只有阳性对照扩增出预期的片段、阴性对照没有扩增出任何片段、双份平行样品结果一致的情况下实验才成立，可以作出核酸阳性或阴性反应结果的判定。 ②核酸检测阳性：发现核酸阳性反应，应该重复采集样品进行复测，复测结果呈核酸阳性反应则判定为核酸阳性，复测结果为核酸阴性反应则判为不确定结果，需进一步随访检测。 ③核酸检测阴性：只可报告本次实验结果阴性。
核酸检测和抗 体检测
核酸检测和抗体检测 核酸检测和抗体检测 究竟什么是病毒核酸检测？什么是抗体检测？为什么可以用核酸检测结果作为新型冠 状病毒肺炎的确诊依据？我们来了解一下这些问题。 病毒核酸检测是什么？ 病毒核酸检测是常见的病毒感染检查方法，并不局限于新型冠状病毒。在埃博拉、流感、禽流感等多种病毒性疾病诊断中，都会应用到病毒核酸检测技术，区别就在于所检测的病毒 特异性基因不一样。 核酸检测是实验室确诊的主要方法。可通过实时荧光PCR检测咽拭子、痰液或血液等标 本中2019-nCoV核酸阳性，或通过病毒基因测序，如与已知的2019-nCoV高度同源即为病原 学阳性。 它既不需要开刀也不需要打针，采集人体分泌物后，进行留样保存，在实验室条件下， 利用PCR技术进行检测，进行临床病原学的确诊。 抗体检测是什么？ 血清抗体检测，简称抗体检测。血清检测大多使用三类方法：间接免疫荧光（IIFT）、间接法 ELISA 和胶体金法。 血清抗体检测冠状病毒感染并不能像病毒核酸检测阳性一样作为病毒感染的“金标准”，因为抗体检测的准确性受制于检测方法、灵敏度、特异性、血样制备等因素。 如何判断有没有新冠病毒？ 最直接的方法就是通过分子生物学技术检测出属于新型冠状病毒的RNA，这就像法医找到嫌疑人的DNA一样，是可以帮助我们找到“幕后凶手”的直接证据。目前检测新型冠状病 毒核酸的方法主要包括实时荧光RT-PCR（简称为定量PCR）检测和基因测序，而新型冠状病毒核酸检测试剂盒就基于前者，也是最常用的方法。 核酸检测的流程 新型冠状病毒核酸检测样本一般来自咽拭子。检测时，医生会用一个像棉签一样的拭子 去擦拭扁桃体和咽隐窝附近的分泌物，也可以通过鼻腔取鼻咽后部的分泌物，然后放到试管里面，再交给检验部门做相应的病毒核酸的检查。因此，咽拭子采样前应提前漱口。 核酸检测需要经过取样、留样、保存、核酸提取、上机检测五个步骤。
核酸检测考核试题和答案大全
1.临床实验室若对检测系统进行性能核实,需要进行以下哪组实验(单项该题正确答案: A.精密度、准确 2.基因芯片技术的本质是(单项)该题正确答案: A、核酸分子杂交技术 3.新型冠状病毒肺炎患者行有创机械通气时,正确的方法是(。(单项)该题正确答案: D.小潮气量和低吸气压力 4.合成RNA的原料是:(单功该题正确答案: C、NTP 5.个人防护装置是用于防止人员个体受到生物性、化学性或物理性等()伤害的器材和用品。(单项该题正确答案:A危险因子 6.标记的参与杂交反应的已知核酸序列是(单项该题正确答案 探针 7.级A1型和A2型生物安全柜的通风连接是使用:(单项该题正确答案 A套管“或“伞型罩“连接 8.第三代测序技术的特征(单项该题正确答案 E、单分子测序 9.新冠病毒核酸检测实验室中,不属于净化实验室专用门特点的是:(单项该题正确答案D 以上均不是 10.以下对应关系正确的是()(单项)该题正确答案: B.敏感性一一真阳性/真阳性+假阴性)*100% 11.目前的DNA自动化测序技术可以一次性读取的序列长度约(单项) 该题正确答案D、1000bp 关于分子信标技术的描述,不正确的是(单项该题正确答案 E、分子信标设计简单 13.国内的生物安全实验室一定要按照国务院发布的()进行管理。(单项)该题正确答案: A《病原微生物实验室生物安全管理条例》 14.从鼻咽拭子中提取的检测新型冠状病毒的剩余核酸提取物不可用于哪种病原体诊断(单项该题正确答案 D丙型肝炎病毒 15.退火温度是决定PCR反应特异性的关键因素,通常退火温度为()该题正确答案 C.Tm减5℃ 16.实验室人员培训的主要内容:0(单项该题正确答案E以上都是 17.下列关于Taq DNA聚合酶的描述,正确的是(单项该题正确答案 E、在引物的3-OH末端加入脱氧单核苷酸,形成3',5磷酸二酯键 18.下列关于恒温金属浴的使用说法错误的是()(单项该题正确答案 D孔位不足时,可将0.5mEP管放入1.5m加热孔中进行热裂解,加热时间不变。 9.脱卸三级防护装备的顺序是:0(单项该题正确答案: A.鞋套→护目镜→外层手套→防护服→帽子→内层手套→口罩 20.下列哪项不是临床分子生物学检验分析前质量控制的内容()(单功该题正确答案 E.进行核酸提取的有效性评价 21.在核酸检测体系中加入内质控,其作用不是监控的是(单项)
核酸检测实施方案
全面推行核酸检测试运行工作方案 为预防与控制经血传播疾病得发生，保障临床用血质量与安全,经研究决定我站将全面开 展核酸检测。为稳步推进核酸全面检测，不影响血液批放行，满足临床用血需求，制定本试运 行方案。 一、组织管理 为顺利开展全面核酸检测工作，成立核酸检测工作小组，工作组负责全面推行核酸检测 试运行工作,协调处理试运行过程中得相关问题。核酸检测工作小组由田站长总负责，分管站 领导与相关科室积极配合. 二、工作目标 根据卫计生发〔2013〕２2号,国家卫生与计划生育委员会关于印发全面推进血站核酸 检测工作实施方案(2013—２０1５年）提出得工作目标，到201５年,血液筛查核酸检测基本 覆盖全国.201４年５月27日，山东省卫计委又下发了“关于全面推进供血核酸检测工作得通知”，要求各市要按照原卫生部《全面推进血站核酸检测工作实施方案(2013-２015年)》要求，迅速开展核酸检测工作。确保２0１４年下半年在全省全面开展供血核酸检测。为全面推 进我站核酸检测工作,目前前期准备工作已就绪,人员、设备、资金已到位.经研究决定自２０ １4年7月1日开始对我站所有献血员标本(包括沂源采血点)进行核酸检测。 三、保障措施 1、资源保障:器械科购买进口核酸采血管，仅供沂源采血点使用，为沂源采血点配备标 本离心机二台(一台备用）,购买标本运输箱3个（hｉv送检一个，沂源采血点一个,备用一个).（确认6、20号之后到位,6、30前完成) 2、沂源采血点标本得运送:沂源采血点工作人员严格按《血液标本留取程序 》留取标本与离心，置于2－6℃冰箱保存。标本由计划送血人员运回。根据工作需要, 沂源计划送血增加一次，同时减少一次急症送血.即每周二、四、六计划送血三次，中午下班 时由送血司机把标本及原料血捎回。为保证核酸标本检测不超４8小时，沂源采血点工作人员 工作时间调整,接血当日下午采血点工作人员休息，周日休息。 ３、机采血小板计划得下达:血液供应科提前与临床沟通，说明我站下一步得工作目标与 任务（全面核酸检测并纳入批放行)及造成得血液供应时间得变更，达成共识，取得谅解.合 理安排血小板预约与采集计划，血小板采集计划截止到每天下午16：０0点之前。？??？？? 4、机采血小板标本得交接:机采成分科按照血液供应科下达得采集计划预约献血员，安 排献血员第二天早上7：30分之前到达血站,血小板标本必须于每天上午9:30之前分别与酶 免实验室与核酸实验室当面交接。 5、全血标本得交接：各采血点2014年7月１日起，所有采集得血液同时留取核酸标本 与酶免实验室标本.待检室每天早上与酶免实验室与核酸实验室当面交接标本，未检、待检与 待放行得原料血与成分血分别存放并标识。 四、核酸检测 1、核酸实验室与酶免实验室同步对当天采集得单采血小板标本与前一天接回得沂源采血 点得标本进行血筛三项检测，并对酶免实验室前一天初次检测无反应性得标本进行血筛三项得 检测，对酶免实验室前一天初次检测单试剂呈反应性得标本进行血筛三项得单检模式，每天1５:30前完成实验。若遇拆分标本，及时与相关科室沟通,调整放行与血小板发放时间,并且 完成当天拆分检测，保证该批试验中不留待测得标本。若遇突发应急事件,核酸实验室与酶免 实验室同步检测。每天核酸检测完毕后出具书面检测报告交血液质量控制科、血液成分制备科与献血服务科机采成分。 2、质量保证:核酸实验室应建立室内质控标准操作规程,实验室得每一批检测应至少有 一个弱阳性室内质控品，该室内质控品应参与混样、核酸纯化、拆分或联检及鉴别检测得全过程。实验结束后，依据室内质控得判定规则对实验结果进行分析与审核,保证检测结果准确可靠。 五、隔离放行
xxx实业发展公司核酸诊断试剂项目立项申请书(总投资14160万元)
核酸诊断试剂项目立项申请书 第一章基本信息 一、项目承办单位基本情况 （一）公司名称 xxx实业发展公司 （二）公司简介 顺应经济新常态，需要公司积极转变发展方式，实现内涵式增长。为此，公司要求各级单位通过创新驱动、结构优化、产业升级、提升产品和 服务质量、提高效率和效益等路径，努力实现“做实、做强、做大、做好、做长”的发展理念。 公司依托集团公司整体优势、发展自身专业化咨询能力，以助力产业 提高运营效率为使命，提供全方面的业务咨询服务。 上一年度，xxx投资公司实现营业收入25671.47万元，同比增长 24.59%（5066.89万元）。其中，主营业业务核酸诊断试剂生产及销售收入为21614.10万元，占营业总收入的84.20%。
根据初步统计测算，公司实现利润总额6749.35万元，较去年同期相比增长827.69万元，增长率13.98%；实现净利润5062.01万元，较去年同期相比增长885.01万元，增长率21.19%。 二、项目概况 （一）项目名称 核酸诊断试剂项目 （二）项目选址 某某新区 （三）项目用地规模 项目总用地面积37425.37平方米（折合约56.11亩）。 （四）项目用地控制指标 该工程规划建筑系数65.60%，建筑容积率1.17，建设区域绿化覆盖率7.31%，固定资产投资强度180.95万元/亩。 （五）土建工程指标 项目净用地面积37425.37平方米，建筑物基底占地面积24551.04平方米，总建筑面积43787.68平方米，其中：规划建设主体工程27226.49平方米，项目规划绿化面积3199.98平方米。 （六）设备选型方案 项目计划购置设备共计138台（套），设备购置费3701.11万元。 （七）节能分析
核酸实验室使用注意事项
核酸实验室使用注意事项 1. 核酸实验室包括PCR前区（314试剂准备间、样本处理间、极低病毒载量处理间）和PCR后区（321病毒载量检测间、测序间；212 PCR扩增间、电泳间）。核酸实验室单向流程，即从PCR前区流向PCR后区，严禁任何物品返回。 2. 核酸实验室所有耗材和试剂由专人负责订购和领取，其中一次性耗材由胡园园负责领取，常规试剂及耗材由马鹏飞负责订购和领取，请在实验前做好计划。 3. 各室冰箱由房间负责人按照需求分配，实验过程中出现的仪器设备使用故障或疑问，请咨询相关房间负责人。 4. 所有核酸实验室的门把手严禁带手套接触。所有房间的自感应水龙头、洗眼器为洁净区，禁止戴手套操作。 5. 生物安全柜使用：先打开外排风机，然后接通安全柜电源，打开安全柜内风机电源，然后等待下降气流及排风量稳定后方可使用，使用安全柜前后请务必清理台面，结束后先关闭安全柜电源，然后在关闭外排风机。（安全柜内污物使用后及时清理）。 6. 污物处理：液体、固体分开处理，液体：废物放入提前加入指定量次氯酸钠的专用容器，固体：放入预先准备好的污物袋中。实验完毕后，将固体废物扎紧，液体废物盖好盖子，然后送至-1层高压间。 7. 实验室的工作服严禁穿出该实验室。 8. 试剂准备间（负责人李喆）：用于PCR体系配置及PCR试剂存放，严禁任何样本和核酸（如PCR模板或产物）带入该室。 9. 样本处理间（负责人苏俊琪），用于核酸提取及样本处理，处理血样样本时需要带双层乳胶手套，并做好相应防护措施。 10. 极低病毒载量处理间（负责人马鹏飞），严禁与实验无关人员进入该实验室。 11. 病毒载量检测间（负责人马鹏飞）：用于病毒载量检测。
核酸检测实验室装修关键要点和要求
RT-PCR是检测新型冠状病毒核酸最广泛、最准确的筛选和确认方法。大规模的核酸检测将不可避免地引起相关机构和单位重视建立标准化的临床PCR实验室。 如何避免污染是临床基因扩增实验室装修设计的关键问题，因此实验室的布局、空调通风系统设计、风量控制等都是围绕这一核心问题展开的。 核酸检测实验室装修要求： 核酸检测实验室有设计理念、装修要求、净化空调系统、通风、自控、工艺设备等几个关键点。 材质：隔墙及吊顶——净化彩钢板、地面——同质透芯PVC地板、净化实验室专用门、观察窗要求： 1.墙面：光洁、不产尘积尘、耐腐蚀，易清洁消毒、无缝隙。 2.地面：防静电、耐腐蚀、无缝隙、无渗漏。 3.阴阳角：均用圆弧角密封处理。 4.门：必须设置自动互锁(机械或电子)。 净化空调、通风系统、自控系统要求： 1.避免交叉污染，采用全新风空调系统。 2.样品制备区严格按照BSL-2设计施工。 3.排风系统全部按照要求采用高效过滤器净化。 4.气流组织：采用上送下排形式。 5.压力梯度控制通过微压差计及精密自控系统控制。 6.实验室入口处显示房间内各项指标参数，并设置偏离报警。
工艺设备要求： 1.实验台下部均留空，无死角。 2.全部采用不锈钢304制作。 3.样品制备区设置洗眼装置，必要时应有应急喷淋装置。 4.非接触式操作理念(感应式水龙头、感应式自动门、互锁传递窗等)。 核酸检测实验室装修关键点： 1.平面布局：不论是组合式还是分散式布置的PCR实验室，各功能房间均宜设置独立缓冲间 2.区域空气流向：为避免交叉污染，PCR实验室空气流向必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。 3.通风空调：为避免交叉污染，各功能用房内空气不能掺混。混合式PCR实验室应采用新风直流空调系统，当采用新风系统有困难时，各区域的空气只能在自己的房间内循环。 4.生物安全：按照新型冠状病毒实验室生物安全指南（第二版）的规定，2019-nCoV病原体暂按照第二类病原微生物进行管理，则样本植被区宜为负压或加强型P2实验室，核酸操作应在生物安全柜内进行。 核酸检测关键技术措施包括： 绝对负压（避免室内潜在污染外泄） 气流组织（室内定向流，从低污染风险区流向高污染风险区）
体外诊断试剂的分类
体外诊断试剂（IVD）分类 1 根据产品风险程度的高低，依次分为三类、二类、一类产品。 （一）第三类产品： 1．与致病性病原体、抗体以及核酸等检测相关的试剂； 2．与血型、组织配型相关的试剂； 3．与人类基因检测相关的试剂； 4．与遗传性疾病相关的试剂； 5．与麻醉药品、精神药品、医疗用毒性药品检测相关的试剂； 6．与治疗药物作用靶点检测相关的试剂; 7．与肿瘤标志物检测相关的试剂; 8．与变态反应（过敏原）相关的试剂。 （二）第二类产品：除已明确为第三类、第一类的产品，其他为第二类产品，主要包括： 1．用于蛋白质检测的试剂； 2．用于糖类检测的试剂； 3．用于激素检测的试剂； 4．用于酶类检测的试剂； 5．用于酯类检测的试剂； 6．用于维生素检测的试剂； 7．用于无机离子检测的试剂； 8．用于药物及药物代谢物检测的试剂； 9．用于自身抗体检测的试剂；
10．用于微生物鉴别或药敏试验的试剂； 11．用于其他生理、生化或免疫功能指标检测的试剂。 （三）第一类产品： 1．微生物培养基（不用于微生物鉴别和药敏试验）； 2．样本处理用产品，如溶血剂、稀释液、染色液等。2 按药品进行管理的体外生物诊断试剂 一、按药品进行管理的体外生物诊断试剂包括： 1．血型、组织配型类试剂； 2．微生物抗原、抗体及核酸检测类试剂； 3．肿瘤标志物类试剂； 4．免疫组化与人体组织细胞类试剂； 5．人类基因检测类试剂； 6．生物芯片类； 7．变态反应诊断类试剂。 按医疗器械管理的体外试剂 1．临床基础检验类试剂； 2．临床化学类试剂； 3．血气、电解质测定类试剂； 4．维生素测定类试剂； 5．细胞组织化学染色剂类； 6．自身免疫诊断类试剂； 7．微生物学检验类试剂。
组织中核酸的提取与组分的鉴定
教案与讲稿 一、教案 2005级医学心理，2005级临床动物组织中核酸的 课程名称授课专业和班级本科9班，2005级临床本科6提取与组分的鉴定 班，2005级药学专科授课学 授课内容纸层析鉴定转氨作用4学时时 2006.11.27， 6、7、 8、9节， 6、 2006.11.30， 7、8、9节， 1、2、授课地点分析实验室日期节次 2006.12.1， 3、4节， 1、2、 3、 2006.12.284节 教学目的熟悉苯酚法提取动物组织中核酸的原理和操作方法；了解核酸的组成，掌握核酸组分的鉴定方法。 教学重点动物组织中核酸提取的原理和操作方法；核酸组分的鉴定
教学难点核酸提取的操作；核酸组分的鉴定 教具黑板、粉笔、实验材料、实验仪器等。 教学方法小班讲课 动物组织中核酸提取的原理和操作方法10分钟 教学过程核酸组分的鉴定10分钟 学生实验操作130分钟实验结果观察及讨论分析10分钟 （1）刘粤梅朱怀荣主编《生物化学实验教程》（人民卫生出版社） （2）张文峰黄林邦主编《分析与实验检测技术》（江西高校出版社）思考题 课后总结影响本次实验的因素？ 参考书籍 二、讲稿 （一）实验原理： 核酸由磷酸、戊糖、含氮碱基化合物组成，根据戊糖的不同可分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）两大类。由于它们在组织细胞中大部分与蛋白质结合成核蛋白，因此，提取核酸时必须使核酸与蛋白质分离开并去掉蛋白质。核蛋白可用水从动物组织（实验中用肝）中提取，再用水饱和的酚去蛋白，释放出核酸，最后用乙醇沉淀出核酸。 核酸可被硫酸水解得到磷酸、戊糖、含氮碱基化合物，根据这三种物质的性质特点可用不同的方法加以鉴定： 1．磷酸： 可与钼酸试剂作用产生磷钼酸，后者在还原剂（如维生素C或氨基萘酚磺酸等）作用下可立即被还原成蓝色的钼蓝，其颜色的深浅与磷的含量成正比。
核酸检测考核试题和答案大全
A.精密度、准确 2.基因芯片技术的本质是(单项)该题正确答案: A、核酸分子杂交技术 3.新型冠状病毒肺炎患者行有创机械通气时,正确的方法是(。(单项)该题正确答案: D.小潮气量和低吸气压力 4.合成RNA的原料是:(单功该题正确答案: C、NTP 5.个人防护装置是用于防止人员个体受到生物性、化学性或物理性等()伤害的器材和用品。(单项该题正确答案:A危险因子 6.标记的参与杂交反应的已知核酸序列是(单项该题正确答案 探针 7.级A1型和A2型生物安全柜的通风连接是使用:(单项该题正确答案 A套管“或“伞型罩“连接 8.第三代测序技术的特征(单项该题正确答案 E、单分子测序 9.新冠病毒核酸检测实验室中,不属于净化实验室专用门特点的是:(单项该题正确答案D以上均不是 10.以下对应关系正确的是()(单项)该题正确答案: B.敏感性一一真阳性/真阳性+假阴性)*100% 11.目前的DNA自动化测序技术可以一次性读取的序列长度约(单项) 该题正确答案 D、1000bp 关于分子信标技术的描述,不正确的是(单项该题正确答案 E、分子信标设计简单 13.国内的生物安全实验室一定要按照国务院发布的()进行管理。(单项)该题正确答案: A《病原微生物实验室生物安全管理条例》 14.从鼻咽拭子中提取的检测新型冠状病毒的剩余核酸提取物不可用于哪种病原体诊断(单项该题正确答案 D丙型肝炎病毒 15.退火温度是决定PCR反应特异性的关键因素,通常退火温度为()该题正确答案 减5℃ 16.实验室人员培训的主要内容:0(单项该题正确答案E以上都是 17.下列关于 Taq DNA聚合酶的描述,正确的是(单项该题正确答案 E、在引物的3-OH末端加入脱氧单核苷酸,形成3',5磷酸二酯键 18.下列关于恒温金属浴的使用说法错误的是()(单项该题正确答案 D孔位不足时,可将管放入加热孔中进行热裂解,加热时间不变。 9.脱卸三级防护装备的顺序是:0(单项该题正确答案: A.鞋套→护目镜→外层手套→防护服→帽子→内层手套→口罩 20.下列哪项不是临床分子生物学检验分析前质量控制的内容()(单功该题正确答案 E.进行核酸提取的有效性评价 21.在核酸检测体系中加入内质控,其作用不是监控的是(单项) 该题正确答案
核酸检测测试 题及答案
新冠病毒核酸检测培训测试 单选题:1. 根据目前掌握的新型冠状病毒生物学特点、流行病学特征、致病性、临床表现等信息，该病原体暂按照病原微生物危害程度分类中（）类病原微生物进行管理？ A. 第一 B. 第二 C. 第三 D. 第四 单选题:2. 可以进行新型冠状病毒检测标本采集人员为? A. 经过生物安全培训，培训合格且具备采样技能的人员 B. 医生 C. 研究所科研人员 D. 实验室管理人员 单选题:3. 新型冠状病毒检测标本首选? A. 呼吸道标本 B. 便标本 C. 尿液 D. 结膜拭子标本 单选题:4. 新型冠状病毒感染的特异性检测不包括? A. 核酸检测 B. 病毒分离 C. 抗体检测 D. 生化检测 单选题:5. 抗体检测最好选用? A. 发病早期血清 B. 空腹血 C. 恢复期血清 D. 发病早期、恢复期双份血清 单选题:6. 新型冠状病毒核酸检测技术不包括? A. 高通量测序 B. 荧光RT-PCR C. 数字PCR技术 D. 病毒分离 单选题:7. 以下哪个条件不能确认新型冠状病毒感染? D
A. 同一份标本中新型冠状病毒2个靶标（ORF1ab、N）实时荧光RT-PCR检测结果均为阳性 B. 两种标本实时荧光RT-PCR检测同时出现单靶标（ORF1ab或N）阳性 C. 同种类型标本两次采样检测重复出现单个靶标阳性（ORF1ab或N） D. 单种标本单次单靶标阳性（ORF1ab或N） 单选题:8. 可在BSL-2级实验室开展的新型冠状病毒相关实验活动不包括? A. 病毒分离 B. 标本分装 C. 标本灭活 D. 核酸检测 单选题:9. 新型冠状病毒感染动物实验可以在（）实验室开展? A. BSL-1 B. BSL-2 C. BSL-3 D. ABSL-3 单选题:10. 鼻拭子采集的关键点是什么？ A. 鼻拭子：待拭子顶端到达鼻咽腔后壁时，轻轻旋转一周 B. 鼻拭子：沿下鼻道的底部向后缓慢深入，待拭子顶端到达鼻咽腔后壁时，轻轻旋转三 周 C. 鼻拭子：沿上鼻道的底部向后缓慢深入，待拭子顶端到达鼻咽腔后壁时即可 D. 鼻拭子：沿中鼻道的底部向后缓慢深入，待拭子顶端到达鼻咽腔后壁时，轻轻旋转三 周 单选题:11. 咽拭子采集部位的关键点是什么？ A. 咽拭子：两侧咽扁桃体和咽后壁上下擦拭至少30秒 B. 咽拭子：两侧咽扁桃体稍微用力来回转动擦拭，然后在咽后壁上下擦拭至少30秒 C. 咽拭子：两侧咽扁桃体稍微用力擦拭，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次 D. 咽拭子：两侧咽扁桃体来回转动擦拭，然后再在咽后壁上下擦拭至少1次 单选题:12. 实验室戴手套的注意事项？ A. 两层普通手套 B. 两层能盖过袖口的手套，每次戴手套前要做充气检查 C. 长袖筒一次性医用橡胶手套两层，手套袖筒必须覆盖住防护服袖口，用充气方法检查 手套是否破损 D. 两层手套，用充气方法检查手套是否破损 单选题:13. 采集新冠病毒呼吸道标本时戴什么级别的口罩？ A. N95及以上口罩 B. N99口罩 C. 医用外科口罩