培养基的质量控制

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培养基质量控制

培养基质量控制

培养基质量控制引言概述:培养基质量控制是微生物学实验中非常重要的一部份,它直接影响到实验结果的准确性和可靠性。

培养基质量控制的目标是确保培养基的成份和性能符合实验要求,从而提供一个适宜的环境来培养和研究微生物。

本文将从五个方面详细阐述培养基质量控制的重要性和方法。

一、培养基成份的准确性1.1 确保培养基成份的准确称量:每种成份的质量应该准确称量,避免因误差导致培养基成份含量不许确,影响微生物的培养。

1.2 选择合适的培养基成份:根据所研究的微生物的需求,选择适合的碳源、氮源、无机盐等成份,以提供微生物生长所需的营养物质。

1.3 避免污染:确保培养基成份的纯度,避免有害微生物或者其他杂质的污染,影响实验结果。

二、培养基性能的稳定性2.1 pH值的调节:根据微生物的生长要求,调节培养基的pH值,维持在适宜的范围内,以促进微生物的生长。

2.2 温度的控制:根据微生物的生长温度要求,控制培养基的温度,保持在适宜的范围内,以提供一个合适的生长环境。

2.3 氧气的供应:根据微生物的需求,提供适量的氧气,或者提供无氧条件,以满足微生物的生长需求。

三、培养基的质量检测3.1 pH值的测定:使用pH计等仪器,准确测定培养基的pH值,确保其符合实验要求。

3.2 纯度的检测:进行无菌培养基的接种和培养,观察是否有菌落生长,以判断培养基的纯度。

3.3 营养物质含量的检测:使用化学分析方法,测定培养基中各种营养物质的含量,确保其符合实验要求。

四、培养基的保存和管理4.1 无菌保存:将制备好的培养基进行高温高压灭菌,然后密封保存,避免细菌或者其他微生物的污染。

4.2 有效期的确定:根据培养基成份的稳定性和保存条件,确定培养基的有效期,避免使用过期的培养基。

4.3 记录和管理:建立培养基使用记录和管理制度,及时更新培养基的使用情况和库存情况,以确保培养基的及时补充和更新。

五、培养基质量控制的重要性5.1 实验结果的准确性:培养基质量控制的好坏直接影响到实验结果的准确性和可靠性,保证实验结果的可重复性。

培养基的质量控制

培养基的质量控制

培养基的质量控制培养基的质量控制一、引言在微生物培养实验中,培养基的质量控制是非常重要的。

良好的培养基质量可以保证实验结果的准确性和可重复性。

本文档将介绍培养基质量控制的各个方面,包括原材料的选择、制备过程的控制、质量检测等。

二、培养基原材料的选择1-碱性物质:如氢氧化钠和氢氧化钾,用于调节培养基的pH值。

2-碳源:如葡萄糖、果糖等,提供微生物生长所需的能量。

3-氮源:如氨基酸、蛋白胨等,供应微生物合成蛋白质所需的氮元素。

4-矿物质:如硫酸镁、氯化钠等,提供微生物生长所需的微量元素。

5-生长因子:如维生素、氨基酸等,对某些微生物的生长具有促进作用。

6-内源物质:如酵母提取物、动物胎盘提取物等,可提供微生物生长所需的特殊营养物质。

三、培养基制备过程的控制1-每个批次制备培养基前,应进行必要的设备消毒和操作台面清洁。

2-按照配方比例和工艺要求,精确称取原材料。

3-将需要溶解的原材料按照指定的顺序加入适量的水溶解。

4-配置好的培养基溶液应在高温高压条件下进行灭菌处理。

5-灭菌后的培养基溶液应在无菌条件下快速冷却,并避免二次污染。

6-制备好的培养基应密封保存,避光防潮,以确保质量稳定。

四、培养基质量检测1-pH值的检测:使用pH试纸、pH计等工具,确保培养基的pH 值符合要求。

2-清晰度的检测:观察培养基是否有悬浮物或沉淀物,以及是否清澈透明。

3-粘度的检测:使用粘度计等工具,检测培养基的粘度是否符合要求。

4-营养成分的检测:使用适当的检测方法,确定培养基中各种营养成分的浓度是否符合要求。

5-菌落计数和菌种鉴定:通过培养基接种菌落计数和分子生物学方法等手段,确定培养基的污染情况和菌种的纯度。

附件:1-培养基配方表:包括各种培养基的成分和配比。

2-培养基制备记录表:记录每次制备培养基的具体操作步骤和检测结果。

法律名词及注释:1-营养成分:指培养基中的碳源、氮源、矿物质等供给微生物生长所需的营养物质。

2-溶液:指将固体或气体溶解在液体中形成的均匀混合物。

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培养基质量控制

培养基质量控制引言概述:培养基质量控制在生物科学研究和工业生产中起着至关重要的作用。

它涉及到培养基的配制、质量评估和调整等方面。

本文将从培养基配制、质量评估、调整、储存和记录等五个大点来详细阐述培养基质量控制的重要性和方法。

正文内容:1. 培养基配制1.1 确定培养基成分:根据所需培养细胞或微生物的特性,确定培养基成分,如碳源、氮源、无机盐等。

1.2 量化培养基成分:根据配方比例,精确称取各种成分,确保培养基的准确配制。

1.3 消毒处理:通过高温高压灭菌或化学消毒方法,确保培养基无菌。

2. 培养基质量评估2.1 pH值测定:测定培养基的pH值,确保适合细胞或微生物的生长。

2.2 渗透压测定:测定培养基的渗透压,确保适合细胞或微生物的生长。

2.3 营养成分测定:测定培养基中各种营养成分的含量,确保满足生物生长的需求。

3. 培养基调整3.1 pH调整:通过添加酸碱溶液,调整培养基的pH值,使其适合细胞或微生物的生长。

3.2 营养成分调整:根据生物生长的需要,添加或调整培养基中的营养成分。

3.3 温度调整:根据细胞或微生物的生长温度要求,调整培养基的温度。

4. 培养基储存4.1 无菌储存:将配制好的培养基经过消毒处理后,密封保存,避免细菌或真菌的污染。

4.2 低温储存:将培养基存放在低温环境中,如冰箱或冷冻库,延长其有效使用期限。

4.3 避光储存:将培养基存放在避光的环境中,避免光照引起的化学反应和降解。

5. 培养基记录5.1 记录配制过程:详细记录培养基的配制过程,包括成分、量化、消毒处理等,方便后续的质量评估和调整。

5.2 记录使用情况:记录培养基的使用情况,包括使用时间、使用量、使用者等,方便追溯和质量控制。

5.3 记录质量评估结果:记录培养基的质量评估结果,包括pH值、渗透压、营养成分等,方便后续的质量调整和改进。

总结:培养基质量控制是生物科学研究和工业生产中不可或缺的一环。

通过正确的培养基配制、质量评估、调整、储存和记录等措施,可以确保培养基的质量稳定和可靠性,为生物实验和生产提供良好的基础条件。

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培养基质量控制

培养基质量控制一、引言培养基质量控制是微生物学和细胞生物学等领域中至关重要的一项工作。

培养基的质量直接影响到实验结果的准确性和可重复性。

因此,建立一套科学严谨的培养基质量控制标准是非常必要的。

本文将详细介绍培养基质量控制的目的、内容和方法,以及一些常见的质量控制指标。

二、目的培养基质量控制的目的是确保培养基的成分准确、稳定,并且符合实验要求。

通过建立科学的质量控制标准,可以提高培养基的质量,减少实验误差,保证实验结果的可靠性。

三、内容1. 成分控制:培养基中各种成分的含量需要严格控制,包括碳源、氮源、无机盐等。

成分控制的关键在于确保每个批次的培养基成分相同,以及成分的浓度符合实验要求。

2. pH值控制:培养基的pH值对于微生物和细胞的生长有重要影响。

因此,培养基的pH值需要在一定范围内进行控制。

常见的pH控制方法包括使用缓冲液和自动调节pH的设备。

3. 温度控制:培养基的温度也是影响微生物和细胞生长的重要因素。

不同的微生物和细胞对温度的要求不同,因此,培养基的温度需要根据实验要求进行控制。

4. 储存条件控制:培养基的储存条件直接影响到培养基的质量和有效期。

培养基应存放在干燥、阴凉、避光的地方,避免受到湿气、阳光和污染物的影响。

5. 检测方法控制:培养基的质量控制还包括对培养基进行一系列的检测方法的控制。

常见的检测方法包括菌落计数、菌液浓度测定、菌群分析等。

四、方法1. 建立质量控制标准:根据实验要求和相关规范,建立培养基质量控制的标准。

标准应包括培养基成分、pH值、温度要求、储存条件以及检测方法等方面的要求。

2. 采购原材料:根据质量控制标准,选择合适的原材料进行采购。

原材料的质量应符合相关标准,并且要有供应商提供的质量证明。

3. 制备培养基:按照质量控制标准,精确称量和混合原材料,制备培养基。

制备过程中要注意卫生和操作规范,避免外界污染。

4. 检测培养基质量:使用标准的检测方法对制备好的培养基进行质量检测。

培养基质量控制

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培养基质量控制培养基质量控制是保证细胞培养成功的关键步骤之一。

良好的培养基质量可以提供适宜的环境,促进细胞的生长和增殖,确保实验结果的准确性和可重复性。

本文将详细介绍培养基质量控制的标准格式,包括培养基配制、消毒和质量检测等方面。

1. 培养基配制培养基的配制是培养基质量控制的基础。

按照以下步骤进行培养基的配制:1.1 准备所需的培养基成分,包括无菌水、培养基粉末、添加剂等。

1.2 使用无菌技术将培养基粉末加入无菌水中,按照指定比例进行配制。

1.3 充分搅拌混合,确保培养基成分均匀分布。

1.4 调节pH值,根据不同细胞类型和实验要求进行调整。

1.5 过滤消毒,使用无菌滤器将培养基过滤,去除潜在的污染物。

2. 培养基消毒培养基消毒是防止细菌、真菌和其他微生物污染的关键步骤。

以下是培养基消毒的标准操作流程:2.1 准备所需的消毒剂,如75%酒精、过氧化氢等。

2.2 将培养基瓶或培养皿放入无菌工作台中。

2.3 使用无菌棉签蘸取消毒剂,擦拭培养基瓶或培养皿的外表面。

2.4 打开培养基瓶或培养皿盖子,将消毒剂蒸汽进入瓶内或皿内,保持一定时间。

2.5 关闭培养基瓶或培养皿盖子,确保密封,避免污染。

2.6 将消毒后的培养基存放在无菌条件下,避免再次污染。

3. 培养基质量检测培养基质量检测是判断培养基是否符合要求的重要步骤。

以下是常见的培养基质量检测方法:3.1 pH值检测:使用pH计测量培养基的pH值,确保其在适宜范围内。

3.2 渗透压检测:使用渗透压计测量培养基的渗透压,确保与细胞的渗透压匹配。

3.3 营养成分检测:使用化学分析方法检测培养基中各种营养成分的含量,确保满足细胞的生长需求。

3.4 毒性检测:使用细胞毒性试验等方法检测培养基中是否存在有害物质,确保培养基对细胞无毒。

3.5 无菌性检测:使用无菌培养技术将培养基接种到无菌培养基上,观察是否有菌落生长,判断培养基的无菌性。

4. 培养基保存培养基的保存也是培养基质量控制的重要环节。

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培养基质量控制

培养基质量控制引言概述:培养基质量控制是微生物实验室中至关重要的一环。

它涉及到培养基的制备、质量检测、贮存等多个方面。

良好的培养基质量控制能够确保实验结果的准确性和可重复性。

本文将从培养基制备、质量检测、贮存、使用和记录等五个大点详细阐述培养基质量控制的重要性和方法。

正文内容:1. 培养基制备1.1 选择适当的配方:根据实验需求选择合适的培养基配方,包括碳源、氮源、无机盐、维生素等成分。

1.2 精确称量:使用精密天平进行精确称量,确保每个成分的比例准确。

1.3 溶解和调节pH:将成分溶解在适当的溶剂中,并使用pH计调节溶液的pH 值至理想范围。

1.4 灭菌:使用高温高压灭菌器或滤器对培养基进行灭菌,以杀灭其中的细菌、真菌和病毒。

2. 培养基质量检测2.1 pH值测定:使用pH计测定培养基的pH值,确保其在理想范围内,以维持微生物生长的最佳条件。

2.2 渗透压测定:使用渗透计测定培养基的渗透压,确保其与微生物细胞内外的渗透压相适应。

2.3 灭菌效果检测:将一部分培养基接种不同的微生物,观察其生长情况,以确认培养基的灭菌效果。

2.4 营养成分检测:使用化学分析方法检测培养基中各种营养成分的浓度,确保其满足微生物生长的需求。

3. 培养基贮存3.1 适当的温度:将培养基贮存于适当的温度下,通常为4℃,以防止其中微生物的生长和培养基成分的分解。

3.2 防止污染:使用无菌技术操作,避免培养基受到外界细菌和真菌的污染。

3.3 包装密封:将培养基装入无菌试管或瓶中,并严密封闭,以防止湿气和细菌的进入。

4. 培养基使用4.1 培养条件控制:根据不同微生物的生长要求,控制培养基的温度、湿度、光照等条件。

4.2 培养时间控制:根据微生物的生长速度和实验需求,控制培养时间,以获取适当的菌落数量。

4.3 培养方法标准化:制定培养方法的标准操作规程,确保每次实验的培养条件和操作步骤一致。

5. 培养基记录5.1 培养基配方记录:详细记录每个培养基的配方,包括成分名称、质量和比例等信息。

培养基质量控制

培养基质量控制

培养基质量控制培养基质量控制是指在实验室环境中对培养基的质量进行监控和控制,以确保培养基的质量符合实验要求,从而保证实验结果的准确性和可重复性。

培养基质量控制包括培养基的配制、质检和贮存等环节。

一、培养基配制1. 培养基成分准备:根据实验要求,选择合适的培养基配方,并准备所需的成分。

成分的选择应根据实验目的和培养物的生长需求来确定。

2. 成分称量:按照配方中各成分的比例和质量要求,将所需成分准确称量。

3. 成分溶解:将称量好的成分逐一溶解于适量的去离子水中,确保溶解彻底、无明显沉淀。

4. pH调节:根据培养物的生长要求,调节培养基的pH值,通常使用NaOH或HCl溶液进行调节。

5. 培养基配制:将各成分按照一定比例混合,并加入适量的去离子水,搅拌均匀,最终得到符合要求的培养基液体。

二、培养基质检1. pH测定:使用pH计测定培养基的pH值,确保其在合适的范围内,通常为pH 7.0-7.4。

2. 渗透压测定:使用渗透压计测定培养基的渗透压,确保其与培养物的生理渗透压相匹配。

3. 灭菌效果检测:将培养基装入试管或培养瓶中,进行高温高压灭菌,然后培养一定时间,观察是否有细菌或真菌的生长。

4. 培养试验:将培养基用于培养指定的微生物,观察其生长情况和形态特征,验证培养基的适用性。

三、培养基贮存1. 培养基分装:将配制好的培养基液体分装到适量的试管或培养瓶中,每瓶或每管的容量视实验需求而定。

2. 标签标注:在每个试管或培养瓶上标注培养基的名称、配制日期、配制人员等信息,以便追溯和管理。

3. 贮存条件:根据培养基的特性和要求,选择合适的贮存条件。

一般来说,常用的贮存方式有冷藏、冷冻和冻干等。

4. 贮存期限:根据培养基的稳定性和使用要求,确定培养基的贮存期限,并在期限到期前进行检测和验证。

通过以上的培养基质量控制措施,可以确保培养基的质量稳定和可靠性。

在实验中,合理的培养基质量控制可以提高实验结果的准确性和可重复性,为科研工作的顺利进行提供有力的保障。

培养基质量控制

培养基质量控制

培养基质量控制培养基质量控制是指在细胞培养过程中,对培养基质量进行严格控制和监测,确保培养基的质量稳定和可靠,以保证细胞培养的成功和结果的准确性。

培养基质量控制涉及到多个方面的内容,包括培养基配制、培养基成分的检测、培养基pH值的调节、培养基渗透压的控制等。

以下是对培养基质量控制各方面内容的详细描述。

1. 培养基配制:培养基的配制是培养基质量控制的第一步,确保培养基的配制过程标准化和精确性。

在配制培养基时,应按照配方中所列的成分和比例,精确称取所需的化学品,并使用纯净水进行配制。

配制过程中要注意消毒操作,使用无菌器具和无菌操作环境,以避免污染。

2. 培养基成分的检测:培养基成分的检测是培养基质量控制的重要环节,通过检测培养基中各成分的含量,可以确保培养基成分的准确性和一致性。

常用的检测方法包括高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法等。

根据实验需求,可以选择合适的检测方法进行培养基成分的检测。

3. 培养基pH值的调节:培养基的pH值对细胞的生长和代谢有重要影响,因此对培养基pH值的调节是培养基质量控制的关键环节之一。

在培养基配制过程中,可以使用酸或碱溶液进行调节,通过pH计测量培养基的pH值,并根据需要进行调整,使其达到适合细胞生长的范围。

4. 培养基渗透压的控制:培养基渗透压对细胞的渗透调节和细胞膜的稳定性具有重要影响,因此对培养基渗透压的控制是培养基质量控制的重要内容之一。

在配制培养基时,可以通过调整培养基中添加的溶质的浓度来控制渗透压。

常用的溶质包括葡萄糖、甘油等,根据实验需求选择适当的溶质进行调节。

5. 培养基的无菌操作:培养基的无菌操作是培养基质量控制的基本要求,确保培养基的无菌性和纯度。

在培养基配制和使用过程中,必须保持无菌操作环境,使用无菌器具和无菌操作技术。

培养基配制完成后,应进行无菌性检测,可以通过培养基接种菌液后观察是否有菌落生长来判断培养基的无菌性。

6. 培养基质量控制记录:为了确保培养基质量控制的可追溯性和可复现性,应对培养基质量控制过程进行记录。

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5.2.2.1.2 半定量方法
半定量方法采用生态测量技术在平板上划线,平板板连续划线区域得分的总和即为生长指数G,G值不应超过标准规定的允许范围。
5.2.2.1.3 定性方法
定性方法采用划线法观察。
5.2.2.2选择性
将浓度为104CFU/mL~106CFU/mL的非目标菌工作菌株悬浮液接种至选择培养基和参考培养基中,培养基的选择性应达到规定值。
TSA
定量
PR≥0.7
具沉淀带的粉色菌落
选择性
37℃48h
大肠杆菌ATCC25922
——
定性
全部抑制
——
特异性
37℃48h
枯草芽胞杆菌ATCC6633
——
定性
——
不具沉淀带的粉色菌落
惠山疾控
作 业 指 导 书
编号:HSCDC/GC-76-2009
培养基质量控制规程
版本 / 修改次:1/0
第3页 共6页
——
定性
全部抑制
——
VRBL(紫红胆汁乳糖)
[S]
生长率
30℃20h
大肠杆菌ATCC25922/8739
TSA
定量
PR≥0.5
带有或不带沉淀带的淡紫色菌落
选择性
30℃20h
粪链球菌ATCC29212/19433
——
定性
全部抑制
——
特异性
30℃20h
铜绿假单胞菌ATCC27853
——
定性
--
无色至浅棕色菌落
TSA
定量
PR≥0.5
黑色/灰色菌落,周围为一混浊带,其外有透明带
选择性
37℃48h
大肠杆菌ATCC25922/8739
——
定性
全部抑制
——
特异性
37℃24-48h
表皮葡萄球菌ATCC12228
——
定性
——
黑色/灰色菌落,周围为一混浊带,其外无透明带
MYP
[S]
生长率
30Байду номын сангаас24-48h
腊样芽胞杆菌ATCC11778
5.2.2.2.1定量方法
选择因子SF:SF=DO-DS
DO:能在参考培养基上生长至少10个菌落的最高稀释度
DS:能在测试培养基上显示生长的最高稀释度
要求:非目标菌在选择性培养基上的SF至少为2 ;半定量和定量法中,非目标菌应部分或全部被抑制。
5.2.3生理生化特性(选择性和特异性)
规定培养基的基本特性,使用一套适当的测试菌株对培养基上的目标菌的生理生化特性(菌落形态、大小等)和非目标菌的被抑制程度进行测试。
5.1物理指标控制
5.1.1测试20℃~25℃的pH值
5.1.2琼脂层厚度;色泽;透明度和(或)是否存在肉眼可见杂质;凝胶稳定性、粘稠度和湿度。
5.2微生物学指标控制
可根据要求选用定量方法、半定量方法或定性方法(详见表1-表)对培养基性能进行测试,具体操作方法详见作业指导书“培养基性能测试指南”。
5.2.1微生物污染的控制
4.3.4制备好的成品培养基应建立“ 成品培养基目录清单”,每次使用前应检查:颜色是否发生变化?/是否蒸发/脱水?/是否有微生物生长 ?等。如果发生上述异常情况,则不应再使用。
5.制备好的成品培养基的质量控制
新购的不同批次的商品化培养基在使用前应进行培养基性能测试,符合要求后使用。
成品培养培养基的质量控制应包括物理指标和微生物指标的测试,根据测试结果及时填写“实验室制备培养基测试结果记录单”。
4.3 贮存及使用前质量确认
4.3.1商品化培养基应严格按供应商提供的贮存条件、有效期进行贮存。
4.3.2验收合格的培养基应建立“商品化干粉培养基目录清单”,使用前对容器密闭性进行复查。
4.3.3开封的脱水培养基,每次使用前应对其质量进行检查,通过粉末的流动性、均匀性、结块情况和色泽变化等判断培养基的质量变化。若发现培养基受潮或物理性状发生明显改变则不应再使用。
5.3性能评价和结果解释
按照规定得到的所有测试菌株的性能均符合规定,则该批培养基品质优良;若只有物理指标和微生物指标符合规定,则该批培养基可被接收。
表1 计数用选择性培养基
培养基
用途
培养条件
测试菌株
参考培
养基
控制方法
判定标准
特征反应
Baird-
Parker
[S]
生长率
37℃24-48h
金黄色葡萄球菌ATCC6538/25923
5.2.2.1.1定量方法
生长率PR的计算:PR=NS/NO
NS:从一个或多个待测培养基平板上得到的菌落总数。
N0:从一个或多个规定的参考培养基平板上获得的菌落总数(该菌落总数应≥100cfu )。
要求:非选择性培养基上目标菌的生长率最低应为0.7,该类培养基应易于目标菌生长;选择性培养基上目标菌的生长率最低应为0.1;每平板(或每试管)的接种水平为10CFU~100CFU。
从每批制备好的培养基中选取至少一个(或1%)平板或试管,置于37℃或按特定标准中规定的温度培养18h。
5.2.2生长特性
5.2.2.1生长率
惠山疾控
作 业 指 导 书
编号:HSCDC/GC-76-2009
培养基质量控制规程
版本 / 修改次:1/0
第2页 共6页
将适量测试菌株的工作培养物接种至固体、半固体和液体培养基中,每种培养基上菌株的生长率应达规定的最低限值。
惠山疾控
作 业 指 导 书
编号:HSCDC/GC-76-2009
培养基质量控制规程
版本 / 修改次:1/0
第 1 页 共6页
1.目的
规范本中心微生物实验室培养基的内部质量控制工作。
2.适用范围
适用于实验室微生物培养基使用前的质量验收、使用过程中的质量控制。
3. 职责
3.1 检验人员:按照本规程规对培养基使用前及使用过程中进行质量控制,确保培养基符合相关标准的要求。
表1计数用选择性培养基(续)
培养基
用途
培养条件
测试菌株
参考培
养基
控制方法
判定标准
特征反应
VRBG(结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂)
[S]
生长率
37℃24h
大肠杆菌ATCC25922/8739
TSA
定量
PR≥0.5
带有或不带沉淀带的粉红色或红色菌落
鼠伤寒沙门菌ATCC14028
选择性
37℃20h
粪链球菌ATCC29212/19433
CT-SMAC(改良山梨醇麦康凯琼脂)
3.2 科室负责人:负责指导、监督检验人员对培养基进行质量控制。
4.使用前的质量控制
4.1生产企业提供的材料
培养基生产厂家随产品应提供下列文件:
培养基、独立成分、添加成分名称;批号;使用前的pH;储藏信息和有效期;性能评价和所用测试菌株;技术数据清单;质控证书/必要的安全、危害数据。
4.2验收
实验室收到培养基后,应填写“培养基验收检查记录单”,检查包装及完整性,标识是否清晰等,验收合格后按照“培养基编码系统使用规程”对培养基进行编号。
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