小麦T型细胞质雄性不育系与相应保持系线粒体DNA的RAPD分析 RAPD Analysis of Mitochondria DNAs o
作物育种总论试题及答案
第一章绪论《作物育种学》课程考试样卷1三、选择题(每小题 1 分，共11分)1.杂合基因型的作物，自交后代的生活力（）；⑴衰退⑵增强⑶不变⑷难以确定2.由胚珠或子房壁的二倍体细胞经过有丝分裂而形成胚，和由正常胚囊中的极核发育成的胚乳而形成种子，这种生殖方式称为（）。
⑴无孢子生殖⑵二倍体孢子生殖⑶不定胚生殖⑷单性生殖3. 纬度相近的东西地区之间引种比经度相同的南北之间引种成功的可能性（）一些。
⑴大⑵小⑶不好确定4.纯系学说认为，在自花授粉作物原始品种群体中选择（）⑴有效⑵无效⑶有的人选择有效，有的人选择无效⑷难以确定5.从理论上讲，杂交育种工作中，所用亲本越多越（）⑴好⑵不好⑶易行（成本越低）⑷难以育出好品种6.杂种优势的遗传基础是（）⑴显性假说⑵显性假说和超显性假说⑶超显性假说⑷纯系学说7.作物诱变育种中，主要处理植物的（）⑴植株或植株的局部⑵花粉⑶种子⑷都可以8.普通小麦×硬粒小麦杂交，是（）⑴种间杂交⑵属间杂交⑶种内不同类型杂交⑷）亚种间杂交9. 小种分化明显的的病原菌群体，实由若干个毒性有所不同的小种组成，其中比例较小的小种，称为（）⑴优势小种⑵次要小种⑶生理小种⑷）毒性小种10.群体改良有各种不同的方法，常用的是（）。
⑴不同变异类型的形成⑵作物雄性不育性的利用⑶轮回选择⑷）回交育种11．迄今为止，一切基因工程的载体都是由（）来充任。
⑴细菌质粒或病毒⑵线状DNA ⑶细菌质粒⑷）病毒《作物育种学》课程考试样卷2三、选择题(每小题 1 分，共10分)1.杂合基因型的作物，自交后代的生活力（）；⑴衰退⑵增强⑶不变⑷难以确定2.纬度相近的东西地区之间引种比经度相同的南北之间引种成功的可能性（）一些。
⑴大⑵小⑶不好确定3.纯系学说认为，在自花授粉作物原始品种群体中选择（）⑴有效⑵无效⑶有的人选择有效，有的人选择无效⑷难以确定4.从理论上讲，杂交育种工作中，所用亲本越多越（）⑴好⑵不好⑶易行（成本越低）⑷难以育出好品种5.杂种优势的遗传基础是（）⑴显性假说⑵显性假说和超显性假说⑶超显性假说⑷纯系学说6.作物诱变育种中，主要处理植物的（）⑴植株或植株的局部⑵花粉⑶种子⑷都可以7.普通小麦×硬粒小麦杂交，是（）⑴种间杂交⑵属间杂交⑶种内不同类型杂交⑷）亚种间杂交8. 小种分化明显的的病原菌群体，实由若干个毒性有所不同的小种组成，其中比例较小的小种，称为（）⑴优势小种⑵次要小种⑶生理小种⑷）毒性小种9.群体改良有各种不同的方法，常用的是（）。
作物育种总论试题及答案 (1)
《作物育种学》课程考试样卷1一、名词解释(每小题2 分，共10 分)DUS，选择育种，聚合杂交，杂种优势，体细胞杂交二填空题（每空1分共15分）1.现代农业对作物品种性状的要求主要有高产、⑪、⑫、适应性强；2.根据作物品种的繁殖方式、商品种子生产方法、遗传基础、育种特点和利用形式等可将作物品种区分为下列类型⑬、⑭、群体品种和⑮；3.种质资源工作的内容包括收集、保存、⑯、⑰、⑱；4.轮回选择的方法包括群体间改良和⑲；5.配合力是自交系的一种内在属性，受多种基因效应支配，农艺性状好的自交系不一定就是配合力高，只有配合力高的自交系才能产生强优势的杂交种。
试用格子方试验计算SCA和GCA填表（表格在最后）。
三、选择题(每小题 1 分，共11分)1.杂合基因型的作物，自交后代的生活力（）；⑪衰退⑫增强⑬不变⑭难以确定2.由胚珠或子房壁的二倍体细胞经过有丝分裂而形成胚，和由正常胚囊中的极核发育成的胚乳而形成种子，这种生殖方式称为（）。
⑪无孢子生殖⑫二倍体孢子生殖⑬不定胚生殖⑭单性生殖3. 纬度相近的东西地区之间引种比经度相同的南北之间引种成功的可能性（）一些。
⑪大⑫小⑬不好确定4.纯系学说认为，在自花授粉作物原始品种群体中选择（）⑪有效⑫无效⑬有的人选择有效，有的人选择无效⑭难以确定5.从理论上讲，杂交育种工作中，所用亲本越多越（）⑪好⑫不好⑬易行（成本越低）⑭难以育出好品种6.杂种优势的遗传基础是（）⑪显性假说⑫显性假说和超显性假说⑬超显性假说⑭纯系学说7.作物诱变育种中，主要处理植物的（）⑪植株或植株的局部⑫花粉⑬种子⑭都可以8.普通小麦×硬粒小麦杂交，是（）⑪种间杂交⑫属间杂交⑬种内不同类型杂交⑭）亚种间杂交9. 小种分化明显的的病原菌群体，实由若干个毒性有所不同的小种组成，其中比例较小的小种，称为（）⑪优势小种⑫次要小种⑬生理小种⑭）毒性小种10.群体改良有各种不同的方法，常用的是（）。
⑪不同变异类型的形成⑫作物雄性不育性的利用⑬轮回选择⑭）回交育种11．迄今为止，一切基因工程的载体都是由（）来充任。
辣椒细胞质雄性不育系与其保持系基因组DNA的RAPD分析
辣椒细胞质 雄性不 育 系与其保 持 系基 因组 Ｄ Ａ的 Ｒ Ｐ Ｎ Ａ Ｄ分 析
王述彬 ， 刘金兵 ， 宝贵 潘
（ 苏省农业科学院蔬菜研究所 ， 京 ２０１） 江 南 １０ ４
摘 要： 利用 ＲＡＰ Ｄ技术对细胞质雄性不育 系 ２ Ａ与其相应保持系 ２ Ｂ的基因组 ＤＮ １ １ Ａ进行了 比较 分析 ， 共使用 了 ３ ０个随机 引物 ， 中有 ２ ３个引物在两 系之 间都得 到了扩增产物 ， ８ 其 １ 不育 系 ２Ａ 与相应保持系 ２ Ｂ基 １ １ 因组 ＤＮ 用 ２ ３个 引 物 扩 增后 有 ６ 主 差 异 带 ， Ａ １ 条 主要 表 现 为条 带 数 目 、 带 位 置 和 条 带 强 弱 的 差 异 。 找 到 了辣 条 椒 细 胞 质 雄 性 不 育 系 ２Ａ 基 因组 ＤＮ 特异 的 Ｒ Ｄ 片 段 Ｃ ５ｏ、 ＭＳＢ ５５和 Ｃ Ｇ１ ， 对 这 些 １ Ａ ＡＰ ＭＳＹ１５ Ｃ Ｅ ｏ 。 ＭＳＢ 并 特 异 片 段 的 来 源及 其 在细 胞 质 雄 性 不 育 中的 作 用进 行 了讨 论 。 关 键 词 ： 椒 ； 胞 质 雄 性 不 育 ； 因组 ＤＮ Ｒ Ｄ 辣 细 基 Ａ； ＡＰ 中图 分 类 号 ： ６ １３ Ｑ ４ ． Ｓ４ ． ； ３ ３ ３ 文献标识码 ： Ａ
ＲＡＰ （ａ ｄ ｍ．ｍｐｉｅ ｏｙ ｒｈｃＤＮＡ） Ｄ ｒｎ ｏ ａ ｌ ｄｐ ｌ ｉ ｆ ｍｏｐ ｉ
细胞 质雄 性不育 （ ＭＳ是作 物杂 种优势利用 的一条重 要途径 。 自 １２ 年 Ｂ ｔｓｎ等 ＿在亚麻 中发现第 Ｃ ） ９１ ａｅｏ １ ］ 例Ｃ ＭＳ以来 ， 多研 究者对 Ｃ 从 形态学 、 许 ＭＳ 组织 学 、 细胞 学 、 遗传 学 和生物 学等方 面进行 了深 入 的研究 ， 为揭示 Ｃ 机制 和 Ｃ ＭＳ ＭＳ利用奠定 了理论 基础 。植物 Ｃ ＭＳ表现为母性遗 传 ， 核质基 因互作所决 定 。不育 受 系的育成通 常采用 回交转育 的方法 ， 它的保 持依赖 于相应 的保 持 系。２ ０世纪 ８ ０年代 以来 ， 分子 生物 学的快 速发展 为 比较 Ｃ 与其相应 保持系 的 Ｄ Ａ差 异提供 了有力 的技术 手段和工具 ， 其是 Ｒ Ｄ技 术［ 诞生 ＭＳ Ｎ 尤 ＡＰ ２ ］ 后， 因其快速 、 经济 和有效而得到 了广泛应用 ， 而促 进了对 Ｃ 从 ＭＳ分子机理 的研究 ｌ 。范 昌发等 ｌ 以高粱不 ＿ ３ ］ ＿ ４ ｊ 育 系及其保持 系为材料 ， 利用 Ｒ Ｄ技 术对 核 Ｄ Ａ、 Ｄ Ａ 及 ｃＤＮ ＡＰ Ｎ ｍｔ Ｎ ｐ Ａ进 行分 析 比较发现 ， 不育 系和保 持 系的核 Ｄ Ａ 上有可能存在差异 。郭骁 才ｌ对 核基因组在 Ｃ Ｎ ＿ ５ ］ ＭＳ中的作用 进行 了评述 。迄 今 ， 对辣 椒细胞 质 雄性不育 系基 因组 ＤＮ 的分子标记研究 尚未见 报道 。本 研究 利用 Ｒ Ｄ技术 以辣 椒 Ｃ １ 及其 相应 Ａ ＡＰ ＭＳ２Ａ 的保持 系 ２Ｂ为材料 ， １ 以期筛选到 Ｃ ＭＳ基因组 Ｄ Ａ与 雄性不育性相关 的分 子标记 。 Ｎ
遗传学_复旦大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年
遗传学_复旦大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年1.关于Agouti小鼠，以下描述错误的是？答案:当ASP编码基因的调控元件发生低甲基化，可关闭基因表达，小鼠呈现黑色，并发症减少。
2.有些基因并非与其他基因协作，而是直接影响其他基因的功能，导致表型效应改变，这些基因被称为？答案:修饰基因3.相比正常二倍体，增加了一条染色体的个体(染色体组成为2n+1)称为？答案:三体4.由基因频率和基因型频率推测，以下哪个群体不属于平衡群体？答案:AA(20%); Aa(60%); aa(20%)5.乌龟的性别是由受精卵的孵化温度决定的，这种性别决定方式是属于？答案:环境性别决定6.以下关于关联分析的描述，错误的是？答案:有关联的非等位基因之间一定存在连锁关系。
7.平衡致死系是利用__________片段抑制交换，从而保证杂合状态在世代传递中不发生分离。
答案:倒位8.以下孟德尔遗传模式中，哪一种最符合“双亲表型正常，子女发病率为25%，且没有性别分布差异”这一特点？答案:常染色体隐性遗传9.常染色体上，半同胞婚配的近交系数为？答案:1/810._______指的是具有两个着丝粒的变异染色体。
答案:双着丝粒染色体11.马和驴杂交，得到的骡可育性极低。
这种现象属于？答案:受精后生殖隔离12.缺失造成的弧状结构的内部是______的染色体部分。
答案:正常13.真核生物基因的编码序列在染色体上的排列特点是？答案:不是连续排列的14.已知A与a、B与b、C与c这三对等位基因自由组合，基因型分别为AaBbCc、AabbCc的两个体进行杂交。
下列关于杂交后代的推测，正确的是？答案:表现型有8种，aaBbCc个体的比例为1/1615.在常染色体隐性遗传疾病中，野生型等位基因相对突变基因完全______，杂合子Aa表现为_____型。
答案:显性；野生16.1961年，法国分子生物学家Jacob和Monod提出了________，说明了大肠杆菌在环境因素的调控下，如何在转录水平改变结构基因的表达。
作物育种期末考试总复习----农业大学农学专业
1、作物育种学是研究___选育____和___繁殖_____作物优良品种的理论与方法的科学。
2、从进化角度来看，作物育种实际上就是_作物的人工进化3、作物有性繁殖可分为自花授粉、异花授粉和常异花授粉（棉花）三种常见的方法。
此外，还包括自交不亲和性____和___雄性不育性__两种特殊方式。
4、育种实践中，作物的高产育种主要涉及_矮杆育种、理想株型育种和高光效育种三个方面。
5、种质资源保存方式可分为___种植保存__、_贮藏保存_、__离体保存_和基因文库技术四大类。
6、作物品种自然变异的原因类型主要有__自然异交引起的基因重组__、__自然变异_和新育成的品种群体的变异。
7、杂交育种通过基因重组、基因累加和基因互作三种遗传机制方式来选育新品种。
8、核质互作雄性不育系中，S(rr)代表是不育系，N(rr)代表保持系。
今有水稻雄性不育系甲，用乙品种授粉后，发现乙对甲无恢复力。
现要用甲转育成新不育系乙”，应以甲为母本，乙为父本进行杂交，在F1代用乙为父本给F代授粉回交，回交若干代以后，就可以得到性状与乙相近的不育系，多次回交亲本就是它的保持系。
9、与品种间杂交相比，其远缘杂种分离特点有分离规律不强、分离类型丰富且有向两亲分化的倾向和分离世代长，稳定慢。
10、测定作物的自交系配合力有两种,即顶交法、双列式轮交、侧配结合法。
测试种选用自交系、单交种11、作物辐射育种实践中，通常用致死剂量、半致死剂量或_临界剂量_来表示辐射敏感性。
12、作物杂种优势要在生产上加以利用，必须满足强优势的杂交组合、异交结实率高和繁殖与制种技术简单易行3个基本条件。
13、多倍体诱导的化学方法中，以化学试剂秋水仙碱诱变效果最好。
15、作物群体改良中，选择和重组是群体进化主要助力14、分子标记SSR指一类由1～6个碱基组成的基序串联重复而成的DNA序列、SNP指单个核苷酸的变异引起的DNA序列多态性1、农作物的品种，一般都有3个基本特性，即特异性、一致性和稳定性。
辣椒英文文献已读
2001年,C. Djian-Caporalino · L.Pijarowski · A. Fazari M. Samson · L.Gaveau · C.O’Byrne · V. Lefebvre C. Caranta · A. Palloix · P. Abad发表文章High-resolution genetic mapping of the pepper (Capsicum annuumL.)resistance loci Me3 and Me4 conferring heat-stable resistance to root-knot nematodes (Meloidogyne spp.)采用从C. annuum F1代得到的双单倍体(DH)群体构建了两张种内图谱,主要采用AFLP 和RAPD标记。
图谱长度1,582 cM ,共227 标记,18个连锁群,覆盖了67%的辣椒基因。
本研究采用的材料是C. annuum parents ‘Yolo Wonder’(‘YW’) and‘PM687’。
抗性品系PM687来源于印度,从PI322719群体中获得,YW是一个感病品种,Me3和Me4都是抗根结线虫基因。
PM687和YW杂交F1代有103个单双倍体(DH),163株F2代个体,‘Perennial’, another inbred line of C. annuum (see Table 1)used to generate the DH200 pepper map,另外一个亲本。
采用RAPD和AFLP标记,分析产生了与Me3连锁的8个相斥性标记和4个相引性标记。
在基因两边最近的距离是0.5,1.0,1.5和3cm,Me4与Me3相距100cm,Me3最近的基因名为Q04-0.3,距RAPD标记10.1cm,名为CT135d的距RFLP标记2.7cm.。
辣椒细胞质雄性不育系与其保持系线粒体DNA的RAPD分析
雄性不育系 ２ １ Ａ线粒体 Ｄ Ａ与雄 性不育性 相关 的 Ｒ Ｐ Ｎ Ａ Ｄ标记 Ｃ Ａ ３ 。 ＭＳ Ｇ 关键词 ： 辣椒 ；细胞质雄性不育 ；黄化苗 ；ｏ Ｄ ｅｗ ｅ ｉｇｔ ｉｅｅ ｃ ｆ ｈ ｍｔ ＮＡ ｂ ｔ ｅ ｎ ＣＭＳ ２ Ａ ａ ｄ ｉ ｉｎ ａｎ ｒ １ ｙ ｍｅ ｎ ｆ １ ｎ ｓｍａ ｔ ｉｅ Ｂ ｂ ａ ｓｏ ｔ ２ ＲＡＰ ｅ ｈ ｉｕ ．Ａｍｏ ｇ ｔ ｅ ８ ｐ ｍ－ Ｄ ｔｃ ｎ ｑ ｅ ｎ ｍ ｒ ｈ ｉ
（．ｎｔｕ ｅｅ ｂｅＣｏｓ ｎｓ ｃｄｍ ｆＡ ｒ ｕ ｕａ ｃ ｎｅ， ａｊｎ １０ ４ ｈｎ １Ｉｓｉｔ ｏ ｇｔ ｌ ｒ ， ｇｕＡ ａｅ ｙｏ ｇｉ ｌ ｒｌ ｉ ｃ Ｎ ｎｉ ２０ １ ，Ｃ ｉａ；２ Ｃ ｌｇ Ｈ ｒｃｌ ｒ，Ｎ ｎｎ ｇｉ ｌ ｒｌＵ ｉ ｔ ｅ ｆＶ ａ ｐ ｃｔ Ｓｅ ｓ ｇ ． ｏ ｅｏ ｏｔｕｔ ｅ ａｊ ｇＡ ｒ ｕｔ ａ ｎ－ ｅ ｌ ｆ ｉ ｕ ｉ ｃ ｕ
Ａｂ ｔ ａ ｔ ｓｒ ｃ ： Ｔ ｅ ｍｉ ｃ ｏ ｄ ｉ ｎ ＤＮＡ ｒ ｘｒ ｃｅ ｏ ｃ ｌ ｒｓｓｐ ｐ ｅ ｅ ｄ ｉｇ ｔ１ ｈ ｔ ｈ ｎ ｒ ａ ｄ ｍｔ ｏ ａ ｓｗｅｅ ｅ ｔ ｔ ｄｆ ｍ ｈ ｏｅ ｉ ｅ ｐ ｒｓ ｅ ｌ ｓ ａ ０—１ ｆＣ ｐ ｅ ａ ｒ ｎ ５ ｄ ｏ ＭＳ ｐ ｐ ｒ ｅ ２１ ｎ ｔ ｉｔ ｉｅ １ Ａ ａ ｄ ｉ ｍａｎ ａｎ ｒ ２ Ｂ． Ｔ ｅ ｍｉ ｃ ｏ ｄ ｉ ｆ ｐ ｐ ｅ ｔｉ ｅ ｙ ＰＩ ｕ ｄ ｒ ｔｅ ｔ ｎ ｍｉｓｏ ｌｃｒ ｎ ｍｉ ｒｓ ｒｐ ｓ ｈ ｔ ｈ ｎ ｒａ ｏ ｏ ｅ ｐ ｒ ｓ ｎ ｄ ｂ ’ ｎ ｅ ｈ ｒ ｓ ｓ ｉｎ ｅｅ ｔ ｃ ｏ ｃｏ ａ Ａ ａ ｏ ｅ ｓ ｏ ｄ ｉ ｔｃ ｈ ｐ ．ｅｌ ｓ ｉ ｎ ｓ ｍｐ ｒ ｙ ｌｃ ｒ ｐ ｏ ｅ ｉ ｅ ｅ ｔ ｄ ｑ ｉ ｕ ｅ ｍｉ ｃ ｏ ｄ ｉ Ａ ｔ ｏ ｄ ｇ ｎ ｒ－ ｈ ｗｅ ｎａ ｔｓ ａ ｅ ｌ ｐ ｏｄ ａ ｄ ｌ ｓｉ ｕ ｔ ．Ｅ ｅ ｔｏ ｈ ｒ ｓｓｄ ｔ ｃｅ ｕ ｔ ｐ ｒ ｔ ｈ ｎ ｒａ ＤＮ ｉ ｅ ｉ ｅ ｏ ｌ ｌ ｎ ｅ ｅ ｅ ａ ｌ ｔ ｎ ａ ｄ ｃ ｎ ｅ ｔａｉｎ ｏ ０—５ ｓ ｗｈｃ ｏ ｌ ｅ ｕ ｅ ｒＲ Ｄ ａ ａｙ ｉ．１ ０ ｒ ｄ ｍ ｒ ｒ ｒ ｓ ｄ ｆｒａ ａｙ ｉ ｏ ｃ ｎｒｔ ｆ ｏ ｎ ｏ ２ ０ｎ ／ ｉｈ ｃ ｕ ｄ ｂ ｓ ｄ ｆ ＡＰ ｌｓｓ ０ ａ ｏ ｐ ｍｅ ｓｗｅ ｅ ｕ ｅ ｌ ・ ｏ ｎ ｎ ｉ ｏ ｎ
分子标记技术及其在作物育种中的应用
分子标记技术及其在作物育种中的应用王斌【摘要】简述了几种常用分子标记的原理和特点,以及它们在构建遗传图谱、遗传多样性分析、基因定位等方面的应用,同时介绍了近等基因系及数量性状位点在作物育种中的应用。
【期刊名称】《农业科技通讯》【年(卷),期】2012(000)006【总页数】4页(P126-129)【关键词】分子标记;RFLP;RAPD;AFLP;SSR;近等基因系;数量性状位点【作者】王斌【作者单位】甘肃省农业科学院,兰州730070【正文语种】中文【中图分类】S33伴随着遗传学的发展，遗传标记(geneticmarker)经历了形态学标记、细胞学标记、生化标记和DNA分子标记4个阶段，其中DNA分子标记诞生于20世纪80年代中期[1]，与其他遗传标记相比，它具有如下优点：（1）直接以DNA的形式表现，在生物各个组织，各个发育时期都可以检测到，不受季节、环境的限制；（2）数量多，遍及整个基因组；（3）多态性高，并且自然存在许多的等位变异，不需专门创造特殊的变异材料；（4）与不良性状无必然连锁，不影响目标性状的表达；（5）表现为共显性，能区分杂合型、纯合型基因型，能提供完整的遗传信息；（6）能在早代进行选择，加速育种进程[2－3]。
分子标记的这些优点，在作物遗传育种的研究与应用中得到了广泛的体现，相对于传统的遗传育种研究中的形态性状评价具有无可比拟的优越性。
1.1 RFLP标记RFLP（Restriction fragment length polymorphisms）即限制性片段长度多态性，是指用限制性内切酶酶切不同个体的基因组DNA后，含有与探针序列同源的酶切片段在长度上的差异。
RFLP标记对DNA需要量较大（5～10μg），所需仪器设备较多，检测步骤多，技术较复杂，周期长，成本高，使其应用受到了一定程度的限制。
RFLP标记被广泛用于植物遗传连锁图谱的构建、遗传关系分析、数量遗传研究、与重要农艺性状紧密连锁的分子标记筛选等方面。
小麦雄性不育系中TaPDC-E1α及其调节酶基因的表达特征
小麦雄性不育系中TaPDC-E1α及其调节酶基因的表达特征张龙雨;袁蕾;杨书玲;张改生;王俊生;宋瑜龙;赵卓军;牛娜;马守才【摘要】To deeply study the mechanism of male sterility induced by gametocide SQ-1 in wheat (Triticum aestivum L.), we isolated TaPDC-E1α gene using silcon cloning technique.The open reading frame of this gene is 1 401 bp in length, putatively encoding 388 amino acids.This gene possesses the conserved TPP domains.Two potential phosphorylation sites of serine residues might be present in the TaPDC-E1α protein of wheat.According to semi-quantitative RT-PCR analysis, the expression levels of TaPDC-E1α in the physiological and genetic male sterile lines were lower than those in fertile pared with fertile lines, the expression of PDK was obviously down-regulated in the physiological male sterile line induced by SQ-1.However, PDK gene was highly expressed in the genetic male sterile lines.The expression levels of PDP gene were similar in fertile and male-sterile lines.These results suggest that the pathway of energy metabolism of sterile line induced by SQ-1 is more susceptible than that of genetic male-sterile line.The upstream signal mechanism of mediating PDK gene may be inconsistent between male-sterile line induced by SQ-1 and genetic male-sterile line.%为进一步研究杀雄剂SQ-1诱导小麦雄性不育的机制,采用电子克隆的方法分离TaPDC-E1α基因,并利用半定量RT-PCR技术分析该基因及其调节酶基因PDK和PDP的表达特性.结果表明,TaPDC-E1α基因编码388个氨基酸,具有TPP保守结构域,可能存在2个丝氨酸磷酸化位点;与可育系相比,TaPDC-E1α基因在生理型不育系和遗传型不育系中表达下调;PDK基因在生理型不育系中表达下调,而在遗传型不育系中表达上调;PDP基因在可育系及不育系中的表达趋势无明显变化.表明经杀雄剂SQ-1诱导形成的生理型不育系在败育过程中其能最代谢途径更容易受到影响,推测对PDK基因进行调节的上游信号机制在小麦生理型不育系与遗传型不育系中可能不一致.【期刊名称】《作物学报》【年(卷),期】2011(037)004【总页数】9页(P620-628)【关键词】小麦;杀雄剂SQ-1;TaPDC-E1α;PDK;PDP;磷酸化位点【作者】张龙雨;袁蕾;杨书玲;张改生;王俊生;宋瑜龙;赵卓军;牛娜;马守才【作者单位】西北农林科技大学/陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室/小麦育种教育部工程研究中心,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学/陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室/小麦育种教育部工程研究中心,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学/陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室/小麦育种教育部工程研究中心,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学/陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室/小麦育种教育部工程研究中心,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学/陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室/小麦育种教育部工程研究中心,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学/陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室/小麦育种教育部工程研究中心,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学/陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室/小麦育种教育部工程研究中心,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学/陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室/小麦育种教育部工程研究中心,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学/陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室/小麦育种教育部工程研究中心,陕西杨凌,712100【正文语种】中文目前, 利用杀雄剂诱导小麦生理型雄性不育以配制杂交种是小麦杂种优势利用的重要途径之一[1],应用杀雄剂 SQ-1已经组配培育出一批超高产、优质、多抗杂交小麦新品种并进行了生产示范种植[2],但对 SQ-1诱导的小麦生理型雄性不育的机制还了解很少。
水稻线粒体DNA中与雄性不育有关特异片段的克隆及序列分析
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杨 剑 波①， 秀 峰 ， 成 松 ， 汪 赵 向太 和 ， 李 莉
（ 徽省 农业科 学 院农业 部水 稻遗 传育 种重 点开 放实 验室 ， 肥 安 合 ２０ ３ ） ３０Ａ Ｄ技 术 ， 野 败 型 、 败 型 和 Ｂ 对 矮 Ｔ型 细 胞 质 雄 性 不 育 系 、 持 系 ， 因 组 Ｄ Ａ 进 行 Ｐ Ｒ扩 增 ， 保 基 Ｎ Ｃ
维普资讯
遗 传 学 报 ，９ ９ ：０ ２ （ ）８ ８～８ ３ ２０ １ ．０ ２
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水 稻 线 粒 体 ＤＮＡ 中 与 雄 性 不 育 有 关 特 异 片 段 的 克 隆 及 序 列 分 析
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遗传 Ｈ ＲＥ Ｔ Ｓ ｅ ｉ ） ４： １ ９ Ｅ ＤＩＡ （ ｉ ｇ １（） ８ Ｂ ｊ ｎ ９ 一１ １ ７ ９
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唱 ・ 争
小麦 Ｔ型细胞质雄性不育系与相应保持系 线粒体 Ｄ Ａ的 Ｒ Ｐ Ｎ Ａ Ｄ分析①
黄 占景 沈银柱 刘植义 何聪 芬
王
柏
斌
峰
马闻师
（ 河北师 范大学生物 系， 家庄 ００ １） 石 ５０ ６
（ ｅ ａｔ ｅ ｔ ｉｌｇ ． ｂｉ ｒ ｌ ｉ ｒ ｔ， ｉａｈａ ｇ ０ １） Ｄ ｐ ｒ ｎ ｏ Ｂｏ ｙ Ｈ ｅ Ｎ ｍａ Ｕ ｖ ｓｙ Ｓ ｊ ｚｕ ｎ ０ ０６ ｍ ｆ ｏ ｅ ｏ ｎ ｅｉ ｈｉ ５
Ｙａ Ｈｏｇ ｎ Ｊ ｇｈ ｏ ｎ Ｂｎ ｏ ｎ Ｗａｇ ｚａ Ｗａｇ ｉ ｎ ｉ
ＯＰ － ４ ＯＰ － ５ ＯＰ － ６ ＯＰ ０ ， Ｗ － １ ＯＰ － ８ ＯＰ ０ ＋ Ｙ－ ３ ＯＰ ０ ＋ Ｙ－ ５ Ｆ ０ ＋ Ｆ ０ ． Ｆ ０ ＋ Ｆ－ ７ ＯＰ Ｏ ＋ Ｗ ０ ． Ｙ－ ２ ＯＰ ０ ， Ｙ－ ４ ＯＰ ０ ， ＯＰ ０ ＋ Ｙ－ ７ ＯＰ ０ ＋ Ｙ－ ９ ＯＰ Ｙ－ ６ ＯＰ ０ ， Ｙ－ ８ ＯＰ ０ ， Ｙ一１＋ Ｙ一１ 、 ＯＰ ０ ＯＰ １ Ｙ一１ ＋ Ｙ－１ ． Ｙ－１＋ Ｙ一】 ， ２ ＯＰ ３ ＯＰ ４ ＯＰ ５
Ｋ２ｍ ／ １ ， ３℃保温２ （ ｇ ｌ０ｕ ７ ０ ｍ） １ ０ ， 小时， 转移至冰浴 １分钟， ０ 加冷饱和酚， 轻轻摇动３ 分钟， ０ 离心分层取上清， 等 以
体积的 Ｔｉ Ｅ Ａ溶液抽提下层酚一次， ｒ ／ ｓ ＤＴ 合并上清， 酚氯仿抽提两次， 氯仿抽提一次， １ ０ 加 ／１ 体积 ３ ｏ／ ｍ ｌＬ Ｎａ ， ． ２ Ａｌ Ｈ５ ， ｐ ２ ． ５倍乙醇， ２℃保存 ２ －０ 小时以上。离心收集 ｍｔ Ａ， ＤＮ 溶于Ｔ Ｅ后加 Ｒ ｓＡ ３℃保温３ 分钟， Ｎａｅ ， ７ ０ 酚一 氯仿、氯仿各抽提 】 乙醇沉淀， 次， 溶于适量体积的Ｔ Ｅ中备用。 １． Ｒ Ｐ ．２ Ｄ ２ Ａ 反应总体积 ２ｕ 其中包括： ５１ ， 超纯水 １ｕ Ｍｇ １２ｍｍ ｌ Ｌ８ １ ｘ Ｒ缓冲液 ２ 川， ６１ Ｃ２ ５ ｏ／ 川， ０ Ｃ ， （ ） Ｐ ． ５ ｄ Ｐ２ ｍ ｌ Ｌ１ ｕ， ＮＴ （． ｍｏ／ ． ｌ ａ ５ ）５ Ｔ ｑ酶（Ｕ／ １１ １ 川） ， ｕ 引物（ 一２ｎ ／ 川， １ ０ｇ ｐ ６ １ ０ 模板（ ｎ ／ ｍＤＮＡ １ 石蜡油４川‘ １ ｇ Ｉ ５ Ｍ ｔ ） 川， ０ 把以上各成份加人 ０５ Ｅ ｐｎｏｆ ． ｍ１ ｅｄｒ管中在 Ｐ ｐ Ｅ公司热循环仪（ Ａ ｅｍ ｌ ｃ ｒ Ｐ ＲＫ Ｎ ＭＥ ＤＮ Ｔ ｒ ａ ｙｌ ４０ Ｉ Ｅ ｈ ｃ ｅ ８ Ｅ Ｌ Ｒ ＣＴ ） Ｅ ＵＳ上扩增４ ０个循环， 其中每个循环包括：４ ９ ℃变性 Ｉ 分钟，７ ３℃退火 １ 分钟，２ ７℃延伸 ２ 分钟。４ ０个循环后 在７℃保温５ ２ 分钟。反应结束后用 １ ％的琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果。 ． ４
（６ ｏ Ｌ ０ ｍ ｌ 蔗糖，０ ｍ ｌ Ｔｉ Ｈ Ｉ Ｈ ． ２ｍ ｏ／ Ｄ Ａ ０ ％琉基乙醇） ． ／ １ ｏ／ ｒ－ Ｃ， ２ ０ ｍ ｌ Ｅ Ｔ ， ｍ Ｌ ｓ ｐ ７ ， Ｌ ． ２ ， 离心（ ＯＯ） 分钟。向 １ Ｏｇ２ ２ ０
沉淀加 Ｌ液（０ ｍｏ／ ｒ－ Ｉｐ ８０２ｍｍ ｌ Ｌ Ａ ５ｍ ｏ／ Ｃ， ％Ｓ ）Ｏ ｌ加蛋白酶 ５ｍ ｌ Ｌ ｉ ＨＣ， ．， ｏ／ Ｅ Ｔｓ Ｈ ０ ＤＴ ， ｍ ｌ Ｌ ｌ１ ０ Ｎａ ． ＤＳＩｍ， ２
Ｏ Ｙ １＋ Ｐ － ７ Ｏ １＋ Ｐ １ Ｏ Ｙ ２ ＋ Ｆ ０ 。 Ｐ 一 ６ ０ １． Ｙ一 ８ Ｏ Ｙ－ ９和 Ｐ － ０ ＯＰ － １ Ｙ Ｐ
在上述引物中有 ８个单引物未扩增出产物， 出现扩增差异的有： 单引物 ＯＰ － １ ＯＰ －４ ＯＰ －６ Ｂ ０， Ｂ ０， Ｂ ０，
Ｏ Ｂ １， Ｐ － ７ ＯＰ － ９ ＯＰ － ３ Ｏ Ｆ ０ ， Ｐ － ８ ＯＰ １， 引物 ＯＰ ０＋ Ｐ ０． 引物 Ｐ － ４ Ｏ Ｂ １， Ｂ １， Ｆ ０ ， Ｐ － ５ Ｏ Ｗ ０ ， Ｙ－ １ 双 Ｗ－ ８ Ｏ Ｗ－ １各 的序 列如表 １ 。其它 引物（ 括单 引物和 双引物 ） 包 都有扩 增产物 ， 无多态性（ 但 差异 ） ＜
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王京 兆
（ 中国科 学院遗 传研究所 北京 １０ ０ ） ０ １１
摘 要 利用 Ｒ Ｐ Ａ Ｄ技术对小麦 Ｔ型细胞质雄性不育系 ７－ ３９ ５ ３６Ａ和相应保持系７－３９ ５ ３６Ｂ的线粒体 ＤＮ （ ｔ Ａ） Ａ ｍＤＮ 进行了８ 个单引物和 １ 组双引物的多态性研究。结果有 ７ 个单引物和全部的双引物有 １ ４ ３ 扩增结果， 表现出多态性的有 １ ０个单引物和一组双引物。 关键词 Ｔ型不育系， 保持系， ＡＰ Ｒ Ｄ，多态性
小麦 Ｔ型细胞质雄性不育系被发现以来， 人们对其不育机理进行了大量的研究， 如对小饱子发育过程中各阶
段细胞形态学的研究； 同工酶、可溶性蛋白的研究； 细胞化学的研究（ ”， ’ 这些研究都发现不育系和保持系之间 一
存 着差 司 海等通 线 在 异二 智 过对 粒体多 究 ， 肤研 证明 小麦的 性不 线粒 有关〔 ； ｉ， ｂ ｋ 通 雄 育与 体 ４ Ｑｅｅ Ｕ ｅ 等 过 ） ｔ ｕ ｒ ｍｃ 对 不 和 小麦 育系 保持系ｍＤ Ａ酶 析， ｔＮ 切分 证明小 性不 麦雄 育与ｍＤ Ａ有关〔８ Ａ ＤＲｎｏ ｌ ｍｌ ｔＮ ７） ． 。Ｒ Ｐ （ａｄｍｙ ｐ－ Ａ ｉ
２结 果 与 讨 论
２ ． １所用引物及扩增结果
本研究共用单引物（０个核昔酸组成的寡聚核昔酸， ｅｏ １ Ｏｐｒｎ公司）１ 其中包括： Ｂ１２， Ｆ －０ ） 个， ８ ＯＰ － ０ ＯＰ Ｉ２，
Ｏ Ｙ１－ １ Ｏ Ｗ Ｉ ２ ， Ｚ － ０ １－ ０ 除 此 之 外 还 用 了 １ Ｐ ０ １， Ｐ － ０ ＯＰ Ｉ １， ２ ２ ４组 双 引 物 ，包 括 Ｏ Ｆ ０十Ｏ － ３ Ｐ － ２ Ｐ ０． Ｆ
（ ｓｉ ｔｏ Ｇ ｎ ｔｓ Ｔ ｅ ｉ ｓ Ａ ａ ｅ ｏ Ｓｉ ｃｓ Ｂ ｉ ｇ ０ ０ ） Ｉ ｔｕｅ ｅｅｉ ， Ｃｈ ｅｅ ｄ ｍｙ ｃ ｎｅ， ｊ １ １ １ ｎ ｔ ｆ ｃ ｈ ｎ ｃ ｆ ｅ ｅｉ ０ ｎ
Ａ ｓａｔ ｓ ｇ ｓ ｇｅｐｉｅｓ １ ｄ ｕｌ ｐｉｅ ， ｔｐ Ｃ （ ｔｐａｍｃ ｌｓ ｒｅｌｅ ｂｔ ｃ Ｕ ｉ ８ ｉ ｌ ｒ ｒａｄ ｏｂｅ ｒ ｒ Ｔ ｙｅ ｃ ｏ ｌ ｉｍ ｅ ｉ） ｒ ｎ １ － ｍ ｎ ｎ ４ － ｍ ｓ － ＭＳ ｙ ｓ ａ ｔ ｌ ｉ ｅ ｎ
１材 料
１１材料 ．
和
方
法
不育 系 ７－ ３９ ５ ３６ Ａ是 河北 师范 大学 生物 系遗传教 研室 自 １７ 年 开始 转育 的一种稳 定 的 Ｔ型细胞 质雄性 不育 ９５
系，５３６Ｂ为相应的保持系。种子浸种后在 ２℃的条件下催芽并暗培养一周， ７－ ３９ ６ 取黄化苗用以提取ｍｔＮＡ Ｄ ． １２方法 ． １． ｍｔ Ａ的提取 ． １ ＤＮ ２ 取 １０ ０ｇ黄化苗， 剪碎加 ２ －３倍鲜重体积的提取液 Ａ０ ｍｏ／ （． ｌ ３ Ｌ蔗糖，０ ｏ／ ５ｍｍ ｌ Ｌ
Ｔｉ Ｈ Ｉ ． ５ ｍ ｌ Ｌ Ｔ ， ｒ－ Ｃ ｐ ７ ， ｏ／ Ｄ Ａ ０ ％琉基乙 ， ｓ Ｈ ５ｍ Ｅ ， ２ 醇） 用组织匀浆器破碎， 层纱布过滤， ４ 弃渣后３ ｇ ＯＯ离心１分 Ｏ ０
钟． 上清再以 １ ＯＯ 离心 ２ 分钟， ２ ｇ Ｏ ０ 弃上清， 加人 ３ｍ１ ０ ｍｏ／ ０ Ｇ液（． ｌ Ｌ蔗糖，０ ｍｏ／ ｒ－ Ｉｐ ７ ， ３ ５ｍ ｌ Ｔｉ ＨＣ， ． ０２ Ｌ ｓ Ｈ ５ ． ％ 琉基 乙醇）Ｉ ０ ， ％１０体积的 １ ／ ＣＺ １０ｌ ｇ 的 ＤＮａｅ， ｍ ｌ Ｍｇ Ｉ ０ｔ ３ ／ ｏ Ｌ ， ｉ ｍ ｍｌ ｓｌ４ ℃保温 １ －２小时后， ４ｍＳ液 加 ０ｌ
Ｒ Ｐ Ａ ａ ｓ ｏ Ｍｉ ｃｏｄｉ Ｄ ｓ －ｙｅ Ａ Ｄ ｌ ｉ ｆ ｔ ｈ ｎ ｒ ＮＡ ｏ Ｔ ｔｐ ｎ ｙ ｓ ｏ ａ ｆ
ＣＭ Ｓ ｉｅ ｄ Ｍ ａｎａｎ ｒ Ｗ ｈ ａ Ｌ ｎ ａ Ｉｓ ｉｔｉｅ ｉ ｎ ｔ ｎ ｅ ｔ
Ｈｕｎ Ｚ ａｊ ｇ ｈｎ ｉ ｈ Ｌｕ ｉ Ｈｅ ｎ ｆ Ｂ ｔ ｎ Ｍａ ｅｓｉ ａｇ ｎｉ Ｓ ｅ Ｙｎ ｕ ｉ Ｚ ｙ ｈ ｎ ｚ ｈ ｉ Ｃ ｇｅ ｏ ｎ ａ Ｆ ｇ ｅ Ｗ ｎｈ
①河北省基金委 资助项 目 ‘本工作在 中国科学院遗传研究所进行。
４期
黄 占景等 ： 小麦 Ｔ型细 胞质雄 性不育 系与相 应保持 系线 粒体 Ｄ ＮＡ 的 ＲＡ Ｄ 分析 Ｐ
９
探讨 Ｔ型细胞质雄性不育系和保持系 ｍｔ Ａ的扩增差异， ＤＮ 为解开Ｔ型细胞质雄性不育机理之谜积累资料， 并为
开展雄性 不育基 因工程、分离 育性基 因打下基 础。
Ｏ Ｗ－８ＯＰ Ｏ 和Ｏ Ｂ ０ Ｐ ０＋ Ｗ－ ｌ Ｐ －４表现出明显的扩增差异。
１ ０
遗
传 Ｈ Ｒ ＤＩＡ （ｅｉｇ １９ Ｅ Ｅ Ｔ Ｓ ｉｎ） ７ Ｂｊ ９ 表 １ 表现多态性引物的序列
１ ９卷
引 物 名 称
Ｏ Ｂ－０１ Ｐ Ｏ Ｂ－０４ Ｐ
引 物 序 列
Ｇ ＴＴＴＣＧ ＣＴＣＣ Ｇ ＧＡ ＣＴＧ Ｇ ＡＧ Ｔ ＴＧ ＣＴＣＴＧＣ ＣＣ ＴＣＣＧＣ ＴＣＴＧＧ
现选 ２个单引物和 ！ 组双引物的扩增结果为例加以分析‘图 １ 为引物 ＯＰ ０， Ｗ－８ ＯＰ Ｏ 和 Ｗ－８ ＯＰ ０＋ Ｗ－ １ Ｏ Ｗ－ １ Ｐ Ｏ 的扩增结果， ２为引物 ＯＰ －４和 ＯＰ －５的扩增结果 图 Ｂ０ Ｂ０