培养基质量检查方法
培养基的灵敏度测试
培养基的灵敏度测试培养基的灵敏度测试是其质量控制的一个重要检测部分。
方法如下：1.用于菌数计数的半固体琼脂培养基促菌生长（灵敏度）检查的方法：对每个不同批号的脱水培养基均应进行灵敏度检查（促菌生长检查）。
取预先制备好的琼脂培养基平皿3~5个，用表面涂布法每块平板表面接种30~100个试验菌，同时用已知质量保证的同型号培养基平皿3~5个（如较著名的如MERCK，DIFICOL产品）做对照试验，待培养基表面的菌液被琼脂培养基吸干或风干后，将培养皿倒置于培养箱的使用温度下培养48~72小时，（也可采用浇碟法进行）取出培养后的平皿点计菌落数。
样品培养基上的微生物数量应不得低于对照培养基上微生物生长数量的70%。
否则，需重新检查，或该培养基被视为不符合促生长要求。
2.用于控制菌检查的富集培养基的促菌生长（灵敏度）检查的方法：对每个不同批号的脱水培养基均应进行灵敏度检查。
每100ml培养基内分别接入试验菌小于100cfu，每个菌种接种两瓶培养基，将接过种的培养基置于指定条件下培养。
应在16~18小时后可明显观察到培养基内有微生物生长，则证明此培养基合格。
原则上无论是采用脱水培养基还是按相关处方配制的培养基，一旦制成成品培养基，则应对每个配制批号培养基进行促菌生长（灵敏度检查）试验，以考察培养基的质量。
按脱水培养基的生产批号做灵敏度检查是基于培养基的灭菌程序已经经过验证。
如果实验室使用的是商购的成品培养基，供应商应随培养基提供相应批次的培养基质量检测报告，报告包括培养基的PH值、无菌检查结果和促菌生长（灵敏度）试验结果等项目。
建议在使用某一新的成品培养基（新供应商或新培养基品种）时，应至少考察三个不同批次的培养基质量，只有三批质量均合格方可使用该培养基。
微生物限度检查用成品培养基一旦初试确认合格后，可审查供应商的质检报告，而不必每批再作无菌检查和灵敏度检查，但半年应至少检查一次，以复核其质量。
用于无菌检查试验的每批培养基，均必须按规定进行灵敏度检查试验，此规定同样适用于实验室自行配制的培养基。
控制菌检查用培养基适用性检查操作规程
控制菌检查用培养基适用性检查操作规程一、引言本操作规程旨在规范采用适用性检查方法验证控制菌检查用培养基的适用性的操作过程，确保检查结果准确可靠，提高微生物控制的有效性。
二、范围本操作规程适用于生物药品、食品、化妆品等行业的微生物控制实验室。
三、设备和试剂准备1.培养皿和管子：采用符合国家标准的试剂器皿。
2.培养基：根据实际需要选择合适的培养基，确保培养基的质量符合相关标准。
3.培养基密度标准液：用于调整培养基的密度。
4.液体融化装置：用于融化固体培养基。
5.无菌纸片和无菌棒：用于为菌液接种提供无菌工具。
6.灭菌器：用于灭菌培养器皿和试剂。
7.放射源：用于灭菌工作区域。
8.荧光显微镜：用于观察菌落生长。
9.消毒液和洗涤剂：用于清洗工作台和培养器皿。
四、操作步骤1.准备工作台和操作区域，进行必要的消毒和清洁。
2.准备所需的培养基和试剂。
3.确保培养基质量合格，根据需要使用培养基密度标准液调整培养基的密度。
4.打开培养基瓶盖，将培养基倒入清洁的培养皿或管子中，尽量避免有气泡产生。
5.放入灭菌器中进行灭菌，确保培养器皿和试剂的无菌状态。
6.露肩接种法将待测菌液接种于培养皿表面，接种菌液的体积应适量，避免过多或过少。
7.使用灭菌的无菌棒均匀涂抹接种菌液，确保菌液均匀分布在培养基表面。
8.均匀涂抹后，用无菌纸将菌液多余部分吸干。
9.将接种好的培养皿密封，放入恒温培养箱中进行培养，温度和时间根据具体培养基要求确定。
10.培养箱内的培养皿应避免震动和突然变化的温度。
11.培养一定时间后，取出培养皿进行观察。
12.使用荧光显微镜观察菌落生长情况，记录菌落数量和形态特征。
13.根据培养基的功能和使用要求，进行结论判断。
14.清洗灭菌培养器皿和试剂，彻底清洗工作区域，确保无菌状态。
五、质量控制1.确保培养基和试剂的质量符合相关标准。
2.使用灭菌的无菌器皿和试剂，避免污染。
3.严格控制接种菌液的体积，避免过多或过少的接种量。
培养基验收
培养基验收一、引言在生物学研究中，培养基是非常重要的实验工具，它为细胞、组织或微生物的生长提供了必要的营养物质和环境条件。
培养基的质量对于实验结果的准确性和可重复性起着至关重要的作用。
因此，在使用培养基进行实验之前，需要对培养基进行验收，以确保其质量和适用性。
本文将介绍培养基验收的目的、方法和注意事项。
二、培养基验收的目的培养基验收的主要目的是确保培养基的质量和适用性，以保证实验的准确性和可重复性。
培养基的质量问题可能导致实验结果的不准确或不可靠，甚至影响实验的进行。
因此，通过培养基验收，可以及早发现和解决培养基的质量问题，提高实验的可靠性和科学性。
三、培养基验收的方法1. 外观检查：首先，对培养基的外观进行检查。
正常的培养基应该呈现均匀的颜色，无明显的颗粒或悬浮物，并且无异味。
如果发现培养基有明显的颜色变化、颗粒或悬浮物，或有异味，说明培养基可能存在污染或变质的问题，不宜使用。
2. pH值检测：pH值是培养基重要的理化指标之一，对于不同类型的细胞或微生物而言，其适宜的生长pH范围是有区别的。
因此，对培养基的pH值进行检测是必要的。
可以使用酸碱指示剂或pH仪进行检测，确保培养基的pH值在适宜的范围内。
3. 营养成分检测：培养基的营养成分直接影响细胞或微生物的生长和繁殖。
因此，需要对培养基的营养成分进行检测。
可以使用化学分析方法或生化检测仪器检测培养基中的蛋白质、糖类、氨基酸等营养成分的含量，确保其符合实验需求。
4. 纯度检测：培养基的纯度是指培养基中是否存在其他微生物或细胞的污染。
为了确保实验结果的准确性，需要对培养基的纯度进行检测。
可以通过在无菌条件下将培养基接种于不同的培养基上，并观察是否有生长的微生物或细胞来判断培养基的纯度。
四、培养基验收的注意事项1. 实验操作要规范：在进行培养基验收时，需要保持实验操作的规范性，严格遵守操作规程，以防止人为操作带来的污染或误差。
2. 培养基保存要注意：培养基在使用前应储存于适当的温度和湿度条件下，避免暴露在光线或高温环境中。
支原体检验及其培养基的质量控制
2.pH值
2.1用pH仪测量pH值
培养基名称 改良Frey氏液体培养基 改良Frey氏固体培养基
支原体液体培养基 支原体固体培养基 无血清支原体培养基 3.无菌检验：应无菌生长。
结果 pH7.6-7.8
培养基质控
4.灵敏度检查和微生物促生长实验
4.1质控菌种及培养基
培养基质控
质控菌种 CVCC菌种编号 ATCC菌种编号
阴性
CO2培养箱
5%CO2 35~37℃ 潮湿的环境
5-7日
标准：如果接种的固体培养基平板上有支原体菌落生长且个数在1-50个之间，且阴性对照没有任何菌落生 长，判定该固体培养基微生物促生长试验符合规定，其他情况判为不符合规定。
支原体检验及其培养基的质控
缪 2020. 09
CONTENTS
目 录
0 检验步骤 1
0 培养基质控 2
1.实验前准备
1) 穿戴好工作服，口罩，帽子和手套。 2) 检查超净工作台上次清场记录，如清场不符合 规定则再行清场处理。 3) 用75%酒精棉，或消毒药水浸湿的纱布，顺着 同一方向对超净台面进行擦拭。 4) 打开超净工作台紫外灯，消毒30 min。 5) 关闭紫外灯，开启风机净化15 min。 6) 将待检样品和培养基移入超净工作台中并摆放整 齐，标记好检品名称，日期和批号。 7) 在检验操作之前，点燃酒精灯，再用75%酒精消 毒双手（手套），将镊子经酒精灯上烤炙灭菌，夹 取酒精棉对样品瓶口表面进行消毒。
检验步骤
2.样品处理
1）每批制品（毒种）取样5瓶。 2）液体制品：混合后备用； 3）冻干制品：加液体培养基或生理盐水复原成混悬液后混合； 4）血清制品：用血清直接接种。
×5
检验步骤
培养基的灵敏度测试
培育基的灵敏度测试培育基的灵敏度测试是其质量掌握的一个重要检测部分。
方法如下：1.用于菌数计数的半固体琼脂培育基促菌生长（灵敏度）检查的方法：对每个不同批号的脱水培育基均应进行灵敏度检查（促菌生长检查）。
取预先制备好的琼脂培育基平皿3~5个，用表面涂布法每块平板表面接种30~100个试验菌，同时用已知质量保证的同型号培育基平皿3~5个（如较闻名的如MERCK,DIFICoL产品）做对比试验，待培育基表面的菌液被琼脂培育基吸干或风干后，将培育皿倒置于培育箱的使用温度下培育48~72小时，（也可采纳浇碟法进行）取出培育后的平皿点计菌落数。
样品培育基上的微生物数量应不得低于对比培育基上微生物生长数量的70%。
否则，需重新检查，或该培育基被视为不符合促生长要求。
2.用于掌握菌检查的富集培育基的促菌生长（灵敏度）检查的方法：对每个不同批号的脱水培育基均应进行灵敏度检查。
每100ml培育基内分别接入试验菌小于100cfu,每个菌种接种两瓶培育基，将接过种的培育基置于指定条件下培育。
应在16~18小时后可明显观看到培育基内有微生物生长，则证明此培育基合格。
原则上无论是采纳脱水培育基还是按相关处方配制的培育基，一旦制成成品培育基，则应对每个配制批号培育基进行促菌生长（灵敏度检查）试验，以考察培育基的质量。
按脱水培育基的生产批号做灵敏度检查是基于培育基的灭菌程序已经经过验证。
假如试验室使用的是商购的成品培育基,供应商应随培育基供应相应批次的培育基质量检测报告，报告包括培育基的PH值、无菌检查结果和促菌生长（灵敏度）试验结果等项目。
建议在使用某一新的成品培育基（新供应商或新培育基品种）时，应至少考察三个不同批次的培育基质量，只有三批质量均合格方可使用该培育基。
微生物限度检查用成品培育基一旦初试确认合格后，可审查供应商的质检报告，而不必每批再作无菌检查和灵敏度检查，但半年应至少检查一次，以亚核其质量。
用于无菌检查试验的每批培育基，均必需按规定进行灵敏度检查试验，此规定同样适用于试验室自行配制的培育基。
RA培养基适用性检查方案
RA培养基适用性检查方案RA培养基是一种用于培养和繁殖细菌、真菌和其他微生物的培养基，其主要成分包括碳源、氮源、矿物质、维生素等。
在微生物学领域，RA培养基被广泛应用于微生物的分离、培养和鉴定工作中。
为了确保RA培养基的质量和适用性，需要进行适用性检查。
一、设备和试剂1.成分齐全的RA培养基2.不同种类的微生物菌种3.恒温培养箱4.显微镜5.消毒器具6.常规实验室设备和仪器二、检查步骤1.准备RA培养基将RA培养基按照配方准确称取所需成分，并按照要求将培养基冷冻或冷藏保存。
确保培养基的成分齐全和质量良好。
2.细菌培养选取不同种类的微生物菌种，分别接种到RA培养基上，并置于恒温培养箱中进行培养。
观察不同菌种在RA培养基上的生长情况，包括生长速度、菌落形态等。
3.细菌鉴定通过显微镜观察不同菌种在RA培养基上的形态特征，比如细胞形态、颜色、大小等，结合生物化学反应进行初步鉴定。
4.抗菌试验对RA培养基进行抗菌试验，检测其对常见抗生素的敏感性。
分别在RA培养基中加入不同浓度的抗生素，观察不同菌种的生长情况，并判断其敏感性。
5.质量控制对RA培养基制备过程进行质量控制，包括原料检验、制备过程的卫生控制、灭菌过程的有效性等。
确保培养基的质量符合标准要求。
6.结果分析对上述步骤的检查结果进行综合分析，评估RA培养基的适用性和质量。
根据不同菌种的生长情况和鉴定结果，判断RA培养基是否符合实验需求。
三、结果评估1.生长情况观察不同微生物菌种在RA培养基上的生长情况，包括生长速度、菌落形态、颜色等。
根据生长情况评估RA培养基的适用性。
2.鉴定结果通过显微镜和生物化学反应对不同菌种进行初步鉴定，判断RA培养基是否适合进行微生物鉴定工作。
对鉴定结果准确性进行评估。
3.抗菌试验结果根据抗菌试验的结果，判断RA培养基对抗生素的敏感性，评估其在抗菌试验中的适用性。
四、结论与建议通过以上适用性检查方案，对RA培养基的质量和适用性进行评估，得出结论并提出建议。
培养基适用性检查记录A
培养基适用性检查记录A一、引言培养基的适用性检查是指通过相关试验和分析，对培养基的成分、性质和质量进行评估，以确认其适用性和可靠性。
本报告记录了对培养基A 的适用性检查结果。
二、试验目的本次检查的目的是评估培养基A在不同温度、pH值和气氛条件下的生长性能，以确定其适用范围和最佳条件。
三、试验设备和材料1.培养基A：按照制备方法配制得到的培养基。
2.培养皿：用于培养细菌的培养皿。
3.细菌菌种：选择一种常见的细菌菌种作为试验菌种。
4.灭菌器：用于培养基和培养器具的灭菌处理。
5.恒温培养箱：用于控制培养温度。
6.pH计：用于测量培养基的pH值。
四、试验方法1.培养基质量检查：对培养基进行外观检查，观察是否存在悬浮物、沉淀物或变色等异常情况。
2.培养基成分测试：对培养基进行化学分析，检测关键成分的含量是否符合规定标准。
3.温度适应性试验：将培养基A分装至多个培养皿中，接种细菌菌种后，在不同温度条件下培养一段时间，观察细菌的生长情况。
4.pH适应性试验：将培养基A分装至多个培养皿中，调整pH值到不同水平，接种细菌菌种后，在恒温培养箱中培养一段时间，观察细菌的生长情况。
5.气氛适应性试验：将培养基A分装至多个培养皿中，分别置于不同的气氛条件下，接种细菌菌种后，在恒温培养箱中培养一段时间，观察细菌的生长情况。
五、试验结果与分析1.培养基质量检查结果显示，培养基A外观正常，无悬浮物、沉淀物或变色等异常情况。
2.培养基成分测试结果显示，培养基A关键成分的含量符合规定标准，满足培养需求。
3.温度适应性试验结果显示，培养基A在不同温度条件下均能支持细菌的生长，生长速度和菌落数量与温度呈正相关关系。
4.pH适应性试验结果显示，培养基A在pH值在6~8范围内能够支持细菌的生长，菌落数量在不同pH值条件下有所差异，但均能生长。
5.气氛适应性试验结果显示，培养基A在不同气氛条件下均能支持细菌的生长，但生长速度和菌落数量会受到气氛条件的影响。
培养基质量控制
培养基质量控制引言概述：培养基质量控制在生物科学研究和工业生产中起着至关重要的作用。
它涉及到培养基的配制、质量评估和调整等方面。
本文将从培养基配制、质量评估、调整、储存和记录等五个大点来详细阐述培养基质量控制的重要性和方法。
正文内容：1. 培养基配制1.1 确定培养基成分：根据所需培养细胞或微生物的特性，确定培养基成分，如碳源、氮源、无机盐等。
1.2 量化培养基成分：根据配方比例，精确称取各种成分，确保培养基的准确配制。
1.3 消毒处理：通过高温高压灭菌或化学消毒方法，确保培养基无菌。
2. 培养基质量评估2.1 pH值测定：测定培养基的pH值，确保适合细胞或微生物的生长。
2.2 渗透压测定：测定培养基的渗透压，确保适合细胞或微生物的生长。
2.3 营养成分测定：测定培养基中各种营养成分的含量，确保满足生物生长的需求。
3. 培养基调整3.1 pH调整：通过添加酸碱溶液，调整培养基的pH值，使其适合细胞或微生物的生长。
3.2 营养成分调整：根据生物生长的需要，添加或调整培养基中的营养成分。
3.3 温度调整：根据细胞或微生物的生长温度要求，调整培养基的温度。
4. 培养基储存4.1 无菌储存：将配制好的培养基经过消毒处理后，密封保存，避免细菌或真菌的污染。
4.2 低温储存：将培养基存放在低温环境中，如冰箱或冷冻库，延长其有效使用期限。
4.3 避光储存：将培养基存放在避光的环境中，避免光照引起的化学反应和降解。
5. 培养基记录5.1 记录配制过程：详细记录培养基的配制过程，包括成分、量化、消毒处理等，方便后续的质量评估和调整。
5.2 记录使用情况：记录培养基的使用情况，包括使用时间、使用量、使用者等，方便追溯和质量控制。
5.3 记录质量评估结果：记录培养基的质量评估结果，包括pH值、渗透压、营养成分等，方便后续的质量调整和改进。
总结：培养基质量控制是生物科学研究和工业生产中不可或缺的一环。
通过正确的培养基配制、质量评估、调整、储存和记录等措施，可以确保培养基的质量稳定和可靠性，为生物实验和生产提供良好的基础条件。
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空白对照管应无菌生长，若加菌的培养基管均生长良好，判该培养基的灵敏度检查符合规定。
5．记录保存：
质检部保管5年。
6.相关操作规程
6.1．电热鼓风干燥箱操作规程
6.2．HWS-12型电热恒温水浴锅操作规程
6.3．生化培养箱操作规程
6.4．YX手提式压力蒸汽消毒器操作规程
6.5．净化工作台操作规程
7．相关记录
7.1.微生物检验用培养基性能试验记录
编制：
日期：
审批：
日期：
批准：
日期：
有限公司
文件编号
版号
A.0
微生物检验用培养基性能试验方法
页次
生效日期
2020/01/02
液，孢子洗脱，然后吸出孢子悬液（用管口带有薄的无菌无菌棉花或纱布能过滤菌丝的无菌毛细管）至无菌试管内，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每毫升含孢子数小于100 cfu的孢子悬液。
4.3.3培养基接种
取每管装量为12ml的硫乙醇酸盐流体培养基9支,分别接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌、枯草芽孢杆菌菌片各2支,每支接种量为1ml(含菌10～100 cfu)，另1支不接种作为空白对照，30～35℃培养3天；取每管装量为9ml的改良马丁培养基5支,分别接种白色念珠菌、黑曲霉各2支,每支接种量为1ml(含菌10～100 cfu)，另1支不接种作为空白对照，23～28℃培养5天。逐日观察结果。
(5)白色念珠菌(Candida albicans)〔CMCC(F) 98001〕
(6)黑曲霉(Aspergillus niger)〔CMCC(F)98003〕
4.3.2菌液制备
接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基或营养琼脂培养基中，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30～35℃培养18～24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基或改良马丁琼脂培养基中，23～28℃培养24～48小时；上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每毫升含菌数小于100 cfu（菌落形成单位）的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基中，23～28℃培养5～7天，加入3～5ml0.9%无菌氯化钠溶
有限公司
文件编号
WI-03-31
版号
A.0
微生物检验用培养基性能试验方法
页次
生效日期
2020/01/02
1．目的
制订微生物检验用培养基性能试验方法，对从事测试的工作人员进行培训指导，按试验方法操作。
2．适用范围
本方法适用微生物检验用培养基的适用性检查。
3.职责
质检部对本试验方法实施负责。
4．程序
4.1培养基的适用性检查
(1)金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)〔CMCC(B) 26003〕
(2)铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)〔CMCC(B) 10104〕
(3)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)〔CMCC(B)63501〕
(4)生孢梭菌(Clostridium sporogenes)〔CMCC(B) 64941〕
无菌检查用的硫乙醇酸盐培养基及改良马丁培养基等应符合培养基的无菌性检查及灵敏度检查的要求。本检查可在供试品的无菌检查前或与供试品的无菌检查同时进行。
4.2无菌性检查
每批培养基随机取不少于5支（瓶），培养14天，应无菌生长。
4.3培养基的灵敏度检查
4.3.1菌种
培养基灵敏度检Leabharlann 所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保存中心获得的冻干菌种为第0代）并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物学特性。