何首乌中二苯乙烯苷提取纯化研究进展
何首乌化学成分研究进展
2.1 薄层扫描法马长华等［5］采用薄层扫描发测定二苯乙烯苷含量，硅胶G预制板，展开剂∶苯∶甲醇∶丙酮（44∶8∶ 4）上行法展开14 cm，于紫外365 nm观察，测定波长为305 nm，参比波长为365 nm,双波长，锯齿扫描，狭缝0.4 mm×0.4 mm，以生何首乌含量为100%，然后计算。此种方法为何首乌质量控制提供了依据。
3 磷脂成分
3.1 分光光度法李军等［12］采用钼蓝比色法用721分光光度计测定。结果显示采收时对磷脂类成分有较大影响。
3.2 薄层色谱法许益民等［13］采用薄层法测定磷脂成分。对磷脂成分提取效率高而且对无机磷成分无干扰的Folch试剂［14］。由于磷脂成分易分解，应避免高温。根据磷脂成分不溶于丙酮［15，16］特征。采用二次同相展层法。先用丙酮展开，将中性脂分开而磷脂留在原点，再用磷脂展开剂将磷脂分开［17］，再用薄层显色剂采用磷脂专属Vaskovsky显色剂试剂，对磷脂类呈蓝色。其不含磷元素不显色，排除干扰。
2.6 高效毛细管电泳法袁海龙等［11］采用毛细管电泳法测定何首乌二苯乙烯苷含量方法。电解液为20 mmol/L硼砂，检测波长为214 nm二苯乙烯苷为对照品，因二苯乙烯苷有四个酚羟基具有酸性可在碱性中电离带负电。所以选用毛细管区带电泳(CZE)模式。二苯乙烯苷及内标的迁移时间随电解值不同而变化。结果20 mmol/L硼砂(pH 9.0)不仅能使二苯乙烯苷及内标的峰完全分离，提取测定分析无干扰峰，且分析时间短，柱效在20 000以上。
2.3 荧光分光光度法姚桂根等［7］，采用荧光分光光度法测定二苯乙烯苷。利用其酚羟基经Dansyl衍生化后具有强烈的荧光特征，就其Dansyl衍生物的荧光条件作了探索，拟定了荧光分光光度法条件。激发波长338 nm，发射波长510 nm，二苯乙烯苷溶液浓度在1.0×107 ～5.0×107 g/ml。范围内衍生化后与荧光强度呈线形关系，荧光强度在2 h内稳定。因其与白藜芦醇苷结构相似，具有相似紫外吸收，因此可选用白藜芦醇苷为对照品。但此法需要除去蒽醌类杂质的干扰。
何首乌中二苯乙烯苷的超声提取工艺研究
维普资讯
第 ｌ 期（ ７ Ｏ 总第 ９期） ２０ ０ ６年 ｌ Ｏ月
农产品加工 ・ 学刊
Ａｃ ｄｅ ｃ Ｐ ｒｏ ｉ ａ ｆＦａ ｍ ｒ ｕ ｔ Ｐ ｏ ｅ ｓ ｎ ａ ｍｉ ｅ ｉｄ ｃ ｌｏ ｒ Ｐ ｏ ｃ ｓ ｒｃ ｓ ｉ ｇ ｄ
摘 要 ：何首 乌中的二 苯乙烯苷 成分具有 明显 的抗 衰老 、降低胆 固醇 和保 肝作用 。利用超声波技术提 取制首乌 中的二 苯乙烯 苷 ，可提 高二 苯乙烯苷 成分 的提取效率 。通过单 因素 和正交试验 ，探讨工艺条件对超声提取 二苯乙烯苷的影 响。结果表明 ，超声 波提 取二苯乙烯苷 的较佳工 艺条 件为 ：制首乌粉末粒度 ８ ０目、提取溶剂 为体 积分数 ９ ％的乙 ０ 醇 、料液 比为 （ 质量 ： 体积）１： ０ ６ 、提取时间为 ７ｍｉ。 ｎ 关键词 ：制何首乌 ；二苯乙烯苷 ；超声波 ；提取工艺
何首乌提取物二苯乙烯苷药理及临床研究进展
抗生素联合阴道栓剂在非淋菌性宫颈炎治疗中的应用研究朱志敏（保定市妇幼保健院，河北 保定 071000）【摘要】目的：探讨抗生素联合阴道栓剂在非淋菌性宫颈炎治疗中的应用研究。
方法：将2018年6月-2019年6月在我院妇科治疗的112例非淋菌性宫颈炎患者随机分为两组，对照组使用阿奇霉素治疗，观察组使用阿奇霉素联合阴道栓剂治疗，比较两组患者的临床疗效、不良反应。
结果：观察组治疗有效率为98.21%，明显高于对照组的76.79%（P＜0.05）；观察组头晕、恶心、头痛、外阴不适等不良反应发生率与对照组相比无明显差异（P＞0.05）。
结论：抗生素联合阴道栓剂在非淋菌性宫颈炎治疗中的应用效果显著，能有效杀灭病原菌，且不良反应轻微，具有积极的临床意义。
【关键词】非淋菌性宫颈炎；抗生素；阴道栓剂；应用效果【中图分类号】R711 【文献标识码】A 【文章编号】2095-4808（2020）08-022-01非淋菌性宫颈炎是一种常见妇科疾病，由非淋菌感染引起的一种宫颈炎症，感染的病原菌主要为支原体和衣原体。
患者一旦感染后，会出现下腹坠痛、白带异常、排尿疼痛等症状，若未得到及时有效的治疗，病原菌可上行感染盆腔，导致病情更为复杂难治。
抗生素治疗是本病的常用治疗方法，但存在病原菌耐药的情况，导致疗效有限。
局部阴道栓剂可直接作用于宫颈、阴道内，提高药物浓度，增强杀菌之力[1]。
本研究进一步分析抗生素联合阴道栓剂在非淋菌性宫颈炎治疗中的应用，现具体汇报如下。
1.资料与方法1.1一般资料将2018年6月-2019年6月在我院妇科治疗的112例非淋菌性宫颈炎患者随机分为两组。
观察组56例，年龄24-48岁，平均年龄（32.7±6.8）岁，病程2-8d；对照组56例，年龄22-47岁，平均年龄（32.3±7.1）岁，病程2-6d；所有患者均符合非淋菌性宫颈炎诊断标准，经阴道分泌物检查、宫颈刮片检查等确诊，均有不同程度的下腹坠痛，白带呈粘稠乳状，可伴有血性白带；其中，支原体感染62例、衣原体感染50例；排除其他病原菌感染、药物过敏、严重肝肾功能障碍；比较两组患者的年龄、病程、感染病原菌类型等无明显差异，具有可比性。
高效提取高纯度何首乌二苯乙烯苷的新工艺
树脂柱层析 、反渗透浓缩 、加组合盐助析 、重结晶等技术 ，与
现有技术相 比，具有工艺流程简单 ，生产周期短 ，生产成本低 的优 势。
３１ 双组 分 纤维素 酶前 处理 及渗 漉提 取 工艺 ．
将粉碎 的何首 乌原 料置于渗 漉罐 中 ，加 入双组 分纤 维素 酶。用 双组 分纤 维素酶水解 、破坏何首乌细胞壁 ，增加细胞通 透性 ，使 二苯乙烯苷更加容易溶 出，有利于渗漉 。 渗 漉提取的渗漉速度为 ０８Ｂ ／，渗漉 １ 。与传统醇提 ． Ｖｈ ０ｈ 取工艺相 比，新 工艺节省成本 ，有利 于工业化大生产 ；与一般
（）将何首乌洗脱液置于一定 的温度下 ，达到饱和后 ，让 ３
饱 和溶 液析 出二苯 乙烯苷 晶体 ，经过结 晶与重结 晶工序 ，可获 得 高纯度 的二苯 乙烯苷 。
２３ 主要技 术 指标 ．
用本 技术工 艺制得 的二苯 乙烯 苷含量 ｉ９ ％ ，提 取率 ≥ ＿ ５ － ８ ％，达到企 业标 准。标 准名称 为何 首乌 提取物 ，标 准号 为 ５
［］孙文基 ，谢世 昌．天 然药物成 分定量分析 ［ ． 北京：中国 医药 ３ Ｍ］
科 技 出版社 ，２ ０ ：６． ０３ ８
［ 吕丽爽，汤坚 ，何其傥．何首鸟 中二苯 乙烯苷的制备及抗 氧化机 ４ ］ 理研 究［ ． 无锡 ：江南大学博士论文 ， ０ ６ ７ ２ ，４ — ７ Ｄ］ ２ ０ ：２ — ８ ６ ４ ，
残留＜． ３５×１ ｍｇ ｇ ０ ／。 ｋ
（） 筛选适 宜孔径 、极性 的大孔 吸附树脂 。确定渗 漉液 ２
过柱 的速 度 、浓度 、时间和 温度 。强极 性吸 附树脂对二 苯乙
烯 苷具有很好 的选择性 吸附作 用 ，可 以提高分 离纯化及 脱色
制首乌化学成分及药理作用研究进展
功效 。制 何首 乌 为何首 乌 的炮 制 品 ， 有补 肝 肾 、 具 益 精血 、 须发 、 乌 强筋 骨 的功效 。 现代研 究表 明 ， 何首 乌 在炮 制过 程 中 ，化 学成 分 和药理 作用 都发 生 了 明显 的改 变 ，药效 也 随之 改变 ，临床 生 用与 制用 功效 各
糖苷 （ ， ， ， ｔｔ ｈ ｄｏｙｔｂ ｎ 一 — 一 － 一 ２ ３ ５ ４ 一ｅｒ ｖ ｒｘｓ ｌｅ ｅ ２ ０ （＂ ０ 一 ａ ｉ
Ｄ ｇ ｃ ｐ ｎ ｓ１一 一 — ｌｅｐ ｒｎ ｓ ｅ 。 — ｌ ｏ ｙｒ ｏｙ） １ Ｄ ｇｕ ｏ ｙａ ｏ— ｉ ） ｕ ａ ３ ｄ １ 脂肪 酸 类 ． ４ 古 巴烯 （ｏ ａｎ ）（ ， ） ，一 二 烯醛 （ Ｅ ｃｐ ｅ ｅ ，反 反 ２ ４ 癸 Ｅ， ）
ｔ ｍ ｔｙ一 一ｐ ｎａ ｅ ａｏ ｅ ， 六 碳 烷 酸 甲酯 （ ｅ— ｒ ｅｈｌ２ ｅｔｄ ｃｎ ｎ ） 十 ｉ ｈｘ ａ ｅ ａｏｃａ ｉ ｍｅ ｙ ｅｔｒ ，十六碳 烷 酸 乙ｆ （ ｅ— ｄ ｃｎ ｉ ｃ ｔ ｌ ｓ ） ｄ ｈ ｅ ｌ ｈｘ ￣ ａｅ ａｏｃａｉ ｔｙ ｅｔｒ ，二 十碳 酸 甲酯 （ｃａ ｅ ｄ ｃｎ ｉ ｃ ｅ ｌ ｓ ） ｄ ｈ ｅ ｏｔ — ｄ
≯ 霄酝 ｔ ｔ隧学诼
一 。 一
一
讲 与述 座综
… … … … … … … … … … 一 一
．
一
一
～
—
—
—
—
—
—
—
—
—
—
—
—
—
—
—
—
一
２Ｏ １２ Ｖ ｏ１ １３ Ｎ ｏ． ． ２
制 首乌化学成分及药理作用研究进展
何首乌有效成分及其研究
何首乌的有效成分及其研究中文名：何首乌科：蓼科属：蓼属使用部位：根历史：何首乌在中国传统医药中用于治疗肝脏和肾脏不适已有很长的历史，因为在古中药理论中认为其具有滋补阴气的能力，其可维持健康人体的平衡。
而且古代中医认为“头发之光泽与肾功能有关”，何首乌因其使头发黑亮的能力而被作为化妆品通过口服或外用而得到广泛应用。
何首乌主要含三类有效成分:二苯乙烯苷类化合物、蒽醌类化合物及聚合原花青素。
此外还含有卵磷脂和多种微量元素。
1、二苯乙烯苷类化合物二苯乙烯苷是何首乌中特有的生物活性成分，它具有良好的水溶性，同时具有抗氧化清除自由基的功能，作为抗衰老的一种有效成分极具研究价值。
本文从二苯乙烯苷的结构和性质入手，以其抗氧化性为重点，对二苯乙烯苷诸方面的研究做以下概述。
（1）二苯乙烯苷的结构和理化性质天然的二苯乙烯苷主要以二苯乙烯苷元侧链结合一个单糖基的形式存在。
其化学名为2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（TSG）。
二苯乙烯苷为白色无定形粉末，易溶于水、甲醇、乙醇，分子量为406.39。
糖苷类物质在自然界中相对比较稳定。
其苷元结构分析可知，在苯环的二、三位有两个邻位酚羟基，邻位酚羟基易于脱氢，自身之间形成氢键。
从而形成稳定的自由基中间体，具有很强的抗氧化、清除自由基功能，但苷元的稳定性大大降低。
但是如果以糖苷的形式存在，在一定程度上提高了其稳定性。
同时糖苷在酸、酶的作用下极易水解，这样在人体肠胃中可以以苷元形式发挥其抗氧化功效。
（2）二苯乙烯苷的提取与分离纯化二苯乙烯苷的提取二苯乙烯苷属多羟基化合物，具有较强的分子极性，易溶于低分子醇类溶剂、丙酮等，难溶于亲脂性有机溶剂。
目前，二苯乙烯苷的提取溶剂多选用乙醇溶液，其提取工艺主要采取室温冷浸法、碱浸酸沉法、加热回流法、微波辐射法以及超声萃取法等。
其中，室温冷浸法和加热回流法是常用的规模化提取方法。
二苯乙烯苷的纯化随着二苯乙烯苷检测技术的发展，其功效作用被不断发现。
何首乌的化学成分和药理作用研究进展
61348% , 广西百色产的含量最低 01143%。
在应用中亦有用薄层扫描 及紫 外比色 法的 ,
姚桂根等 [ 19 ]用 751 型紫外分光光度计 , 以白藜芦
醇苷为标准品 , 在 306nm 波长处测定了何首乌中
二苯乙烯苷的含量 , 白藜芦醇苷浓度在 01001012
～01012168mg /mL 之 间 线 性 关 系 良 好 。陆 蕴 如
① 3 基金项目 : 云南省教育厅科学研究基金项目 (No15Z0473C) ② 收稿日期 : 2006—03—22 修回日期 : 2006—11—09
作者简介 : 王文静 ( 1977 ～) , 女 , 辽宁人 , 助教 , 从事中药化学和中药质量标准研究工作 。 &通讯作者 : 饶高雄 , 0871 - 6212602; E - mail: raowufam @ vip1 sohu1com
样品中未检测到大黄酸 。姚桂根等 [ 16 ]用国产 KYS
型高效液相色谱仪 , Si60硅胶柱 , 以环己烷 2乙酸乙 酯 (80∶20)为流动相 , 在 254nm 处检测何首乌中大
黄素 、大黄素甲醚的含量 。与 前几 种方法 相比 ,
高效液相色谱法测定结果更为准确 、可靠 , 而且
此方法测定结果重视性较好 。从众多的文献测定
何首乌的化学成分和药理作用研究进展 3
王文静 1 , 薛咏梅 1 , 赵荣华 1 , 饶高雄 1, 2&
①② (1. 云南中医学院中药学院 , 云南昆明 650200; 2. 云南省农业科学院药用植物研究所 , 云南昆明 650224)
关键词 : 何首乌 ; 化学成分 ; 药理作用 ; 综述 中图分类号 : R284 文献标识码 : A 文章编号 : 1000—2723 (2007) 03—0060—05
何首乌的研究进展与发展趋势
何首乌的研究进展与发展趋势摘要：本文综述了近年来何首乌化学成分、药理作用、临床应用的研究进展，查阅了近10年来国内外有关何首乌的成分、药理、临床及不良反应研究的文献，进行分析、总结。
发现近年对何首乌的研究比较深入，从何首乌的乙酸乙酯不溶部分及制何首乌的正丁醇萃取部分中各发现了两种新化合物单体。
在药理学方面，何首乌不但有抗衰老、提高免疫力、降血脂、心血管保护等作用，还有神经元保护、抗皮肤脂质过氧化的作用，临床除常用于治疗高脂血症，还可用于治疗老年体衰、动脉硬化、血管性痴呆、脱发及皮肤瘙痒等症。
何首乌的主要不良反应为肝损害。
可见，何首乌作为一味传统中药，有着很大的开发价值，尤其是在降血脂和抗衰老方面，应作进一步的研究和应用。
在对何首乌进行研发的过程中，应对其不良反应予以足够的重视。
关键字：何首乌；化学成分；药理作用；临床应用何首乌始载于《开宝本草》，为蓼科植物何首乌（Poly-gonum multiflorum Thunb）的干燥块根，其性微温，味苦、甘、涩。
临床应用有生首乌和制首乌之别。
生首乌能解毒，消痈，润肠通便。
主治瘰疡疮痈，风疹瘙痒，肠燥便秘。
制首乌功能补肝肾，益精血，乌须发，强筋骨。
主治血虚萎黄，眩晕耳鸣，须发早白，腰膝酸软，肢体麻木，崩漏带下，久疟体虚。
现代中医临床上常用于治疗高脂血症［1，2］。
生制首乌性味相同，功效主治不同。
实验表明其成分、作用毒性均有差异，生首乌经炮制后所含结合型蒽醌可转变为游离型;因而生首乌有轻度泻下作用而制首乌则无;生首乌有明显毒性而制首乌毒性甚小［3］。
1．化学成分何首乌主要含三类有效成分:二苯乙烯苷类化合物、蒽醌类化合物及聚合原花青素。
此外还含有卵磷脂和多种微量元素［4］。
二苯乙烯苷类化合物是一类具有显著药理活性的水溶性成分，其代表成分二苯乙烯苷具有显著的降脂作用［5］。
李建北等［4］从四川产何首乌块根的乙酸乙酯部分得到16个已知化合物，经理化常数和光谱分析，确定为大黄素，大黄素甲醚，大黄素-1，6-二甲醚，大黄素-8-甲醚，ω-羟基大黄素，ω-羟基大黄素-8-甲醚，2-乙酰大黄素，大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷，2-甲氧基-6-乙酰基-7-四基胡桃醌，苜蓿素，穆坪马兜铃酰胺，2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖甙，胡萝卜苷及没食子酸。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
何首乌中二苯乙烯苷提取纯化研究进展二苯乙烯苷为何首乌的主要活性成分，具有抗衰老、神经保护、降血脂、保护肝脏、抗肿瘤等药理作用，而提取与纯化技术是其获得的关键。
本文综述了近年来二苯乙烯苷的提取与纯化技术，主要包括水煎煮法、渗漉法、回流法等提取方法，以及色谱法、重结晶法、萃取法等纯化方法，并探讨其发展前景，为进一步研究及应用提供参考。
Abstract：Stilbene glucoside is one of major active constitutions in Polygoni Multiflori Radix. Stilbene glucoside contributed markedly to resisting caducity，protecting nerve，reducing serum lipids，and protecting liver and antitumor activity. The extraction and purification technology is the key issue to obtain stilbene glucoside. Through research，extraction and purification technology has made a certain progress. The stilbene glycoside could be extracted by water boiling，diacolation，and backflow；then it could be purified by the method of chromatography，recrystallization，and extraction. In this article，the technologies in extracting and purifying stilbene glucoside were reviewed，and the prospect of stilbene glucoside preparation was discussed to lay the foundation for further research and application.Key words：stilbene glucoside；extraction；purification何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根，主要以生品或制何首乌入药。
生首乌具有润肠、解毒功效，制何首乌则具有补肝肾、益精血、乌须发功效。
何首乌的化学成分主要为蒽醌类化合物、二苯乙烯苷类化合物、磷脂类化合物等。
其中二苯乙烯苷因具有多种生物活性及药理作用，已成为临床研究热点，其含量也成为何首乌药材的专属性指标。
随着二苯乙烯苷临床研究的深入，其提取与纯化技术也成为该领域的研究重点。
目前，二苯乙烯苷的提取与纯化方法工艺复杂、效率较低，难以实现产业化。
因此，研究开发高效的提取与纯化工艺对二苯乙烯苷稳定性、药理活性及临床应用等研究的开展具有重要意义。
本文综述近年来二苯乙烯苷的提取与纯化技术研究进展，以期为其开发及应用提供参考。
1 二苯乙烯苷简介二苯乙烯苷，化学名称为2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷，分子式为C20H22O9，分子量为406.39，化学结构式见图1。
其外观为白色无定形粉末，易溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等，可溶于乙酸乙脂，难溶于亲脂性有机溶剂，光照条件下反式二苯乙烯苷转化为顺式二苯乙烯苷[1]，在高温条件（>60 ℃）、酸性溶液中很不稳定，在强酸、强碱条件下，可分别水解为葡萄糖、苷元或醌类化合物。
研究表明，二苯乙烯苷具有延缓衰老[2]、保护肝脏[3]、调节血脂[4]、神经保护[5]、抗肿瘤[6]等作用。
2 二苯乙烯苷提取技术2.1 水煎煮法水煎煮法也称为“水煮法”或“水提法”，是将药材加水煎煮取汁的方法，是中药最早、最常用的制剂方法之一，适用于有效成分能溶于水、在湿和热条件下较稳定的药材，能够提取出相对较多的有效成分。
张振娟等[7]、马红玉等[8]以药材粒度、浸泡时间、煎煮时间、煎煮次数为考察因素，对制何首乌的水煎煮工艺进行优选，最佳工艺为：药材加10倍量水提取3次，每次1.5 h，再经分离纯化制备二苯乙烯苷。
由于二苯乙烯苷对热不稳定，长时间高温操作条件下，在煎煮过程中其成分损失较大，且带来的杂质多。
因此，二苯乙烯苷提取、浓缩干燥、纯化工艺应尽可能在短时间、低温条件下进行。
2.2 渗漉法渗漉法是将粉碎的药材置渗漉筒中，由上部不断添加溶剂，溶剂渗过药材层向下流动过程中浸出药材成分的方法。
渗漉法适用于有效成分遇热不稳定的中药。
卢照凯等[9]开发了双组分纤维素酶前处理及渗漉提取工艺，将粉碎的何首乌原料置于渗漉罐中，加入双组分纤维素酶，从而水解、破坏何首乌细胞壁，增加细胞通透性，使二苯乙烯苷更易溶出，有利于渗漉。
渗漉法提取的渗漉速度为0.8 BV/h，持续10 h，提取液通过大孔吸附树脂柱层析、重结晶等技术分离、纯化二苯乙烯苷。
但渗漉法需常温下不断向粉碎中药材中添加水，消耗水量大、周期长、操作复杂。
2.3 回流法回流法是选取合适的、易挥发的有机溶剂提取药材中有效成分，将浸出液加热蒸馏，其中挥发性溶剂馏出后又被冷却，重复流回浸出容器中浸提药材，直至有效成分回流提取完全的方法。
颜世伦[10]考察了不同溶剂甲醇、乙醇等对二苯乙烯苷提取率的变化，乙醇提取效果最好。
范昊宁[11]、魏宇峰等[12]研究了回流提取次数、乙醇用量、乙醇浓度、提取时间等因素对二苯乙烯苷含量的影响，发现提取次数是影响二苯乙烯苷含量的主要因素，乙醇用量次之，然后是乙醇浓度，提取时间影响最小。
最佳水平工艺条件为用药材8～9倍量的60%乙醇溶液提取2～3次，每次0.5～1 h。
结果表明，乙醇提取效果明顯优于水提取效果，而且与渗漉法比较，回流法提取省溶剂，操作简单，可以有效缩短制备时间，从而降低成本。
2.4 超声萃取法超声辅助萃取法是利用超声波辐射压强产生的强烈空化效应、机械振动、扰动效应、高加速度、乳化、扩散、击碎和搅拌作用等多级效应，增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透力，从而加速目标成分进入溶剂，促进提取的进行。
与传统提取方法室温冷浸法、加热回流法比较，超声萃取法提取二苯乙烯苷效果更好[13]。
田杰等[14]采用超声辅助、水为溶剂高效提取了何首乌中活性成分二苯乙烯苷，提取时间10 min，提取率达1.64%。
在此研究基础上，邓祥等[15]通过超声波辅助乙醇提取何首乌中二苯乙烯苷，提取率高达7.19%。
采用超声波振荡提取1 h即可达到回流法提取2～3 h的提取效果，进一步缩短了提取时间，提高了提取效率，且具有能耗少、操作简单、快速的优势。
此外，超声萃取无需加热，可减少二苯乙烯苷的分解。
因此，超声萃取法显示出较大技术优势，具有工业化前景。
2.5 微波萃取法微波辅助萃取法是利用微波快速加热的特性，结合传统溶剂提取法而形成的一种针对固体样品成分提取的新萃取技术[16]。
针对传统乙醇回流法提取何首乌中二苯乙烯苷加热时间长、消耗溶剂多的问题，王娟等[17]选用微波辅助萃取法改进何首乌提取工艺，溶剂用量减少近50%，提取时间为10 min，减少了溶剂的损耗，缩短了提取时间，有效成分含量高。
在微波辅助萃取法中，传热和传质的方向均由内向外，有利于二苯乙烯苷有效物质的溶出。
2.6 超临界CO2萃取法超临界CO2萃取法是利用超临界状态下的CO2流体做萃取剂，从液体或固体中萃取植物有效成分并进行分离的方法[18]。
具提取效率高、选择性强、处理温度低、无毒、无溶剂残留、溶剂可循环，及热敏成分不易被分解破坏等优点。
张伟业[19]探索了应用超临界CO2萃取法从何首乌中提取二苯乙烯苷的工艺。
向文军等[20]优化了超临界CO2萃取二苯乙烯苷工艺，确定萃取压力35 MPa、温度45 ℃、萃取时间2.5 h、CO2流量12.5 L/h，得率4.64%。
周暄宣[21]进一步优化了该工艺，将何首乌粉碎成粗粉（10～40目），上样于超临界CO2萃取仪的萃取釜中萃取、浓缩，萃取压力30～40 MPa、温度60 ℃，萃取时间1～3 h，必要时可采用70%～90%乙醇作为夹带剂，用量为200～400 mL/h，得萃取液，浓缩。
浓缩液上样于硅胶柱层析（200～300目）纯化，用20%～80%乙醇梯度洗脱，流速为1.0 mL/min，收集洗脱液，蒸除乙醇，得二苯乙烯苷粗品。
二苯乙烯苷见光易分解，在高溫、强碱性条件下不稳定[22-23]，而采用超临界萃取法提取二苯乙烯苷可避免以上问题。
3 二苯乙烯苷纯化技术3.1 色谱法3.1.1 硅胶柱色谱硅胶柱色谱使用范围广，成本低、操作方便，可用于纯化二苯乙烯苷。
王跃飞等[24]开发了一种硅胶柱色谱纯化工艺。
称取二苯乙烯苷提取物，经硅胶搅拌呈松散状，置玻璃柱上面用乙酸乙酯洗脱，经薄层色谱法跟踪监测，合并含有二苯乙烯苷的流份，回收溶剂，干燥得二苯乙烯苷提取物，加纯水加热溶解二苯乙烯苷提取物后冷冻结晶，待其溶化后抽滤，纯水洗涤，可得白色结晶二苯乙烯苷纯品，纯度10%～80%的二苯乙烯苷样品均纯化至96%以上。
但该法存在耗时长、溶剂消耗量大、分离效率低等缺点。
3.1.2 聚酰胺吸附色谱聚酰胺吸附色谱属于氢键吸附色谱，系通过其分子中众多的酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物的酚羟基，或酰胺键上的游离胺基与醌类、脂肪羧酸上的羰基形成氢键缔合而产生吸附。
因此，聚酰胺吸附色谱特别适合分离酚类、醌类和黄酮类化合物。
何竞旻等[25]探索用聚酰胺柱层析法纯化何首乌中多酚羟基物质的新方法，乙醇做洗脱剂，洗脱流速1.0 mL/min，洗脱柱高70 cm，静置吸附时间20 min，其洗脱率为96.80%，但得到二苯乙烯苷纯度不高。
李文[6]对该工艺进行了改进，将聚酰胺柱层析法和结晶法结合，纯化得到二苯乙烯苷晶体。
该方法分离纯化二苯乙烯苷有待于进一步改进。
3.1.3 大孔树脂吸附色谱近年来，大孔吸附树脂广泛应用于天然产物的分离，成为有机化合物尤其是水溶性化合物的有效分离手段。
大孔树脂吸附色谱具有吸附量大、再生容易、可反复使用等优点。
因此，该工艺用于分离纯化二苯乙烯苷的研究较深入，不同大孔树脂的绝对吸附量、吸附量、吸附率、解吸率，洗脱参数等均有报道[26-34]。
上述研究表明，可用于分离纯化二苯乙烯苷的大孔树脂有DA-201、DM130、NKA-9、NKA-II、AB-8、D101、S-8、D600、HPD500、II、ZTC-1、LSA-21等，其中D101、DM130、S-8、D600、HPD500、II、ZTC-1效果较好。