布鲁氏菌病诊断标准及处理原则
布病的诊断与防治
２６
山西农业·畜牧兽医
２００８·１２
宰工人、皮毛工等明显高于一般人 群。
３ 临床症状 本病的潜伏期长短不一，短的两
周，长的可达半年之久。家畜患病后 症状基本相似，多数病例为隐性感 染。早期出现结膜炎和体温升高等。 妊 娠 母 畜 流 产 （ 多 在 妊 娠 ２～ ８个 月），多为死胎或弱仔。但大多数流 产经两个月后可以再受孕。畜群中关 节炎、子宫内膜炎、胎衣不下和不孕 症增多。公畜睾丸肿大，触之热、 痛。鸡、鸭等家禽的症状表现为腹泻 和虚脱，有时产蛋量下降。人患布病 潜伏期为１～３周，易转为慢性。轻者 出现低热、无力、疲乏，全身酸痛， 关节肿大、疼痛，焦躁不安和神经过 敏。颈部和腹股沟淋巴结肿大，脾脏 肿大用手可摸到。雄性患畜常见单侧 睾丸或附睾炎；雌性患畜有时可发生 特异性乳腺炎、卵巢炎、子宫内膜 炎，孕畜可发生流产。多数病例有长 期起伏的发热，称“波状热”。
白细胞减少，中性粒细胞增多，中性 粒细胞减少和单核细胞增多者较少 见；慢性病例的白细胞总数增多，主 要为嗜中性粒白细胞增多，血小板减 少，但没有出血倾向。 ５．２．２ 实验室检查：显微镜检出病原 体或血清抗体滴度升高才能确诊。 ５．３ 治疗
感染病例，可用磺胺嘧啶（Ｓ Ｄ）、甲氧苄氨嘧啶（ＴＭＰ并增加饮 水此外）、磺胺－６－甲氧嘧啶或磺酰 氨苯砜（ＳＤＤＳ）。 ５．４ 预防
４．３ 预防 ４．３．１ 在疫区，要做好犬体的防蜱灭 蜱工作。可应用杀虫药，如２ ５ ｐｐｍ溴 氰菊酯溶液，每隔７～１ ０天喷淋１次犬 体。 ４．３．２ 对 病 犬 应 做 到 早 发 现 、 早 诊 断、早治疗。发现病例后，可应用三 氮脒、咪唑苯脲的治疗剂量对其他健 康犬进行药物预防。
布鲁氏菌病诊断的金标准
布鲁氏菌病诊断的金标准
布鲁氏菌病的金标准诊断方法是通过分离和鉴定布鲁氏菌。
具体诊断布鲁氏菌病的步骤包括：
1. 临床症状分析：布鲁氏菌病的典型症状包括发热、关节痛、乏力、头痛等，临床医生根据患者的症状进行初步判断。
2. 实验室检查：通过采集患者的血液、骨髓、尿液、淋巴组织或其他体液或组织进行培养。
3. 分离布鲁氏菌：将采集到的样本进行无菌条件下的培养处理，将培养基上的菌落进行进一步的鉴定。
4. 鉴定布鲁氏菌：通过对分离的菌落进行生理生化试验，如氧化酶试验、嗜碱性试验、免疫荧光试验、PCR等，判断菌株
是否为布鲁氏菌。
金标准诊断布鲁氏菌病的主要依据是从患者体液或组织样本中成功分离和鉴定出布鲁氏菌。
但由于布鲁氏菌的培养和鉴定过程较为复杂，诊断通常需要时间，并且技术要求高，因此常常需要结合临床症状、实验室检查及其他辅助诊断方法来综合判断。
布鲁氏菌病磁共振诊断标准
布鲁氏菌病磁共振诊断标准
布鲁氏菌病是一种由布鲁氏菌引起的传染病，通常通过接触感染的动物或其分泌物而传播给人类。
磁共振成像（MRI）在诊断布鲁氏菌病时发挥着重要作用。
磁共振成像可以显示出脑膜炎、脑炎、脑脓肿、脑脊液异常等情况，有助于确诊和评估病情严重程度。
磁共振诊断布鲁氏菌病的标准通常包括以下几个方面：
1. 脑膜炎和脑炎的表现，磁共振成像可以显示出脑膜炎和脑炎的特征性改变，如脑脊液增多、蛛网膜下腔积液、脑实质水肿等。
2. 脑脓肿的形态和位置，布鲁氏菌病在磁共振成像上可以显示出脑脓肿的形态和位置，有助于了解病变的范围和严重程度。
3. 脑脊液异常，磁共振成像可以辅助观察脑脊液的情况，如蛋白质含量、细胞数目等，从而帮助医生进行综合判断。
除了以上几点，磁共振成像在布鲁氏菌病的诊断中还可以结合临床症状、实验室检查等综合判断。
需要指出的是，磁共振成像在诊断布鲁氏菌病时并非特异性，因此需要结合临床资料和其他检查
结果来进行综合判断。
总的来说，磁共振成像在布鲁氏菌病的诊断中扮演着重要的角色，能够帮助医生观察病变情况，辅助临床诊断，但诊断时仍需综合考虑临床表现和其他检查结果。
布鲁氏菌病
布鲁氏菌病布鲁氏菌病（Brucellosis简称布病）是由布鲁氏菌属（Brucella）的细菌（简称布氏菌）侵入机体，引起传染－变态反应性的人畜共患的传染病。
是《中华人民共和国传染病防治法》规定报告的乙类传染病。
自1887年（Bruce）首次从因布病死亡士兵脾中分到布氏菌迄今已百余年。
据80年代末的报告，在世界200多个国家和地区中已有160多个存在人畜布病，分布于世界各大洲。
我国自1905年首次在重庆报告两例布病以来，现已在全国29个省市区发现有不同程度的流行。
於50～60年代在我国人畜中有较重流行，自70年代布病疫情逐年下降，至90年代初人间感染率仅为0.3%，发病率只有0.02/10万。
这个状况明显好于某些发达国家的布病疫情。
但自1993年布病疫情出现了反弹，1996年我国部分省区疫情明显回升。
1991年我国布病暴发点为零，1996年上升为76个；这个现象与世界上部分地区的布病疫情遥相呼应。
该状态已引起世界和我国有关部门的关注。
一、病原学1、布氏菌的形态和染色特点布氏菌是一组微小的球状、球杆状、短杆状细菌。
包括猪种、牛种、羊种、犬种、绵羊附睾种和沙林鼠种6个种。
普通显微镜下，常呈单个排列，极少数呈两个相连或短链状、串状排列。
布氏菌可被所有的碱性染料所着色，革兰氏染色阴性，姬姆萨染色呈紫红色。
2、布氏菌的培养特性布氏菌培养的最大特点是生长缓慢。
适宜的PH为6.6～7.4，适宜温度20～40℃，最适温度37℃，超过42℃不生长。
绵羊附睾种和牛种菌的某些生物型菌（5～10%），其余菌种均在普通大气环境生长。
需严格的CO23、布氏菌的抵抗力布氏菌对干燥、低温有较强的抵抗力，对湿热、紫外线、常用的消毒剂、抗生素等比较敏感。
布氏菌对湿热非常敏感，湿热100℃1～4分钟便可将其杀灭。
0.1%新洁尔灭、3%来苏儿、2.5%漂白粉溶液均能在5分钟内杀死布氏菌。
4、布氏菌毒力和致病性一般说来，羊、牛、猪种布氏菌各生物型的某些菌株多为强毒株。
布鲁氏菌病诊疗方案(2023年版)
附件8布鲁氏菌病诊疗方案（2023年版）布鲁氏菌病（Brucellosis，简称布病）又称“波状热”，是由布鲁氏菌（Brucella）感染引起的人畜共患传染病，我国主要在北方地区流行，近年来南方地区的流行强度亦有所增加，局部地区时有疫情发生。
布鲁氏菌病为《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病。
为进一步规范临床诊治工作，在2012年原卫生部印发的《布鲁氏菌病诊疗指南（试行）》基础上，结合国内外研究进展和诊疗经验，制定本诊疗方案。
一、病原学布鲁氏菌属是一组微小的球状、球杆状、短杆状细菌，共有12个种，包括羊种、牛种、猪种、犬种、沙林鼠种、绵羊附睾种、鲸种、鳍种、田鼠种、人源种和赤狐种。
其中羊种、牛种、猪种和犬种布鲁氏菌可造成人感染。
电镜下羊种布鲁氏菌为明显的球形，大小约为0.3~0.6µm，牛种和猪种布鲁氏菌多呈短杆状或球杆状，大小约为0.6~2.5µm。
布鲁氏菌没有鞭毛，不形成芽胞和荚膜。
布鲁氏菌形态易受外界环境因素的影响而发生改变，呈现多态性，细胞壁可增厚，也可变薄，或者脱落。
布鲁氏菌对湿热、紫外线、常用的消毒剂等比较敏感；对干燥、低温有较强的抵抗力。
55℃湿热1小时或者60℃湿热10~20分钟、75%酒精、0.1%新洁尔灭和含氯消毒剂可将其灭活。
二、流行病学（一）传染源。
感染的羊、牛、猪是主要传染源，其次是鹿、犬、啮齿动物等。
（二）传播途径。
1.接触传播：主要通过皮肤黏膜直接接触带菌动物的组织（如胎盘或流产物等）、血液、尿液或乳汁等感染，也可通过间接接触污染的环境及物品感染。
2.消化道传播：食用含菌的生奶、水及未加工熟的肉制品等食物感染。
3.呼吸道传播：可通过吸入病菌污染环境中的气溶胶感染。
（三）易感人群。
人群普遍易感。
农牧民、兽医、皮毛加工及屠宰工的感染率比一般人群高。
三、发病机制布鲁氏菌侵入人体后，被巨噬细胞吞噬，在局部淋巴结生长繁殖并形成感染灶，约2~3周后突破淋巴结屏障而侵入血液循环产生菌血症，表现出发热、乏力等感染中毒症状。
布鲁氏菌病诊断标准及处理原则
布鲁氏菌病诊断标准及处理原则1 主题内容与适用范围本标准规定了人群布鲁氏菌病(简称布病)的诊断和疫区处理原则。
本标准适用于各类医疗、卫生防疫机构。
2 术语皮肤过敏试验：受布氏菌感染后，再受到布氏菌过敏原刺激，皮肤出现的迟发型过敏反应。
布病疫区：凡有新病人发生，或有疫畜检出的自然村(屯)或畜牧场(队)均视为布病疫区。
检疫：用特异性的血清学，皮肤试验，分离细菌等方法对人畜布病的检查。
淘汰：对查出的阳性畜进行屠宰处理。
3 布病诊断布病是一种严重地危害人民健康和畜牧业发展的人畜共患的传染病，染疫的家畜是人和畜间布病的主要传染源。
3.1 流行病学：发病前病人与家畜或畜产品，布氏菌培养物有密切接触史，或生活在疫区的居民，或与菌苗生产、使用和研究有密切关系者。
3.2 临床表现：出现持续数日乃至数周发热(包括低热)，多汗，肌肉和关节酸疼，乏力，兼或肝、脾、淋巴结和睾丸肿大等可疑症状及体征。
3.3 实验室检查：布病玻片或虎红平板凝集反应阳性或可疑，或皮肤过敏试验后24、48h分别观察1次，皮肤红肿浸润范围有一次在2.0cm×2.0cm及以上(或4.0cm(上标始)2(上标终)以上)。
3.4 分离细菌：从病人血液、骨髓、其他体液及排泄物中分离到布氏菌。
3.5 血清学检查：标准试管凝集试验(SAT)滴度为1∶100及以上；对半年内有布氏菌苗接种史者，SAT滴度虽达1∶100及以上，过2～4周后应再检查，滴度升高4倍及以上；或用补体结合试验(CFT)检查，CFT滴度1∶10及以上；抗人免疫球蛋白实验(Coomb＇s)滴度1∶400及以上。
疑似病例：具备3.1、3.2和3.3者。
确诊病例：疑似病例加3.4或3.5中任何一种方法阳性者。
4 疫区处理原则4.1 核实诊断：对确诊的病人应依据流行病学资料，临床表现和实验室检查结果进行核实诊断。
4.2 检疫和淘汰处理疫畜：对疫区内全部羊，牛和猪用血清学方法进行检疫，检疫后1个月再检一次。
布鲁氏菌病诊断标准
布鲁氏菌病诊断标准WS268-20071范围本标准规定了人群布鲁氏菌病的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。
本标准适用于各级各类医疗卫生机构及其工作人员对布鲁氏菌病诊断与报告。
2诊断依据2.1 流行病学史发病前病人与家畜或畜产品、布鲁氏菌培养物有密切接触史，或生活在疫区，或与疫苗生产、使用和研究有密切关系。
其他流行病学参见附录A。
2.2 临床表现2.2.1 出现持续数日乃至数周发热(包括低热)，多汗，乏力，肌肉和关节疼痛等。
2.2.2 多数患者淋巴结、肝、脾和睾丸肿大，少数患者可出现各种各样的充血性皮疹和黄疸；慢性期患者多表现为骨关节系统损害。
具体临床表现参见附录 B。
2.3 实验室检查（操作方法见附录 C)2.3.1 实验室初筛2.3.1 .1 平板凝集试验(PAT)(见C.1.1)或虎红平板凝集试验(RBPT)(见C.1.2)结果为阳性或可疑。
2.3.1 .2 皮肤过敏试验(见C.2)后24h、48h分别观察1次，皮肤红肿浸润范围有一次在2.0cm×2.0cm及以上(或4.Ocmn2以上)。
2.3.2 血清学检查2.3.2 .1 试管凝集试验(SAT)(见C.1.3)滴度为1：l00++及以上，过2周-4周后应再检查，滴度升高4倍及以上）。
2.3.2 .2 补体结合试验(CFT)(见C.1.4))滴度2.3.2 .3 抗人免疫球蛋白试验(Coomb’s)(见2.3.3 分离细菌1：lO++及以上。
C.1.5) 滴度l：400++及以上。
从病人血液、骨髓、其他体液及排泄物等任一种培养物中分离到布鲁氏菌。
3诊断原则布鲁氏菌病的发生、发展和转归比较复杂，其临床表现多种多样，很难以一种症状来确定诊断。
对人布鲁氏菌病的诊断，应是综合性的。
即结合病人流行病学接触史，临床表现和实验室检查。
4诊断4.1疑似病例应同时符合2.1.2.2和2.3.l 中任一项者。
4.2确诊病例疑似病例和2.3.2或2.3.3中任何一项者。
布鲁氏菌病诊断方法、疫区判定和控制区考核标准-
布鲁氏菌病诊断方法、疫区判定和控制区考核标准正文：---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 布鲁氏菌病诊断方法、疫区判定和控制区考核标准（１９８８年１０月２５日）一、诊断方法和标准（一）人间布病诊断方法和判定标准１．人的布病诊断是综合性的，主要依据：（１）流行病学接触史：密切接触家畜、野生动物（包括观赏动物）、畜产品、布鲁氏菌培养物等或生活在疫区内的居民。
（２）临床症状和体征应排除其他疑似疾病。
（３）实验检查：病原分离、试管凝集试验、补体结合试验、抗人球蛋白试验。
（虎红平板凝集试验，皮内变态反应试验仅供初诊用）。
凡具备（１）、（２）项和第（３）项中的任何一项检查阳性即可确定为布病病人。
对已确诊的慢性布病病人和接种过菌苗的人，应以临床症状为主要依据，血清学试验效价高低，皮内变态反应强弱仅供参考。
２．实验检查阳性判定标准（１）病源分离：检出布鲁氏菌。
（２）试管凝集试验：１∶１００（＋＋）及以上，即１００国际单位／毫升及以上。
（３）补体结合试验：１∶１０（＋＋）及以上。
（４）抗人球蛋白试验：１∶４００（＋＋）及以上。
（５）虎红平板凝集试验：血清０．０３毫升，检查出现可见凝集。
（６）皮内变态反应：皮试后２４、４８小时分别各观察一次，皮肤红肿浸润范围有一次在２．５×２．５厘米及以上（或６．２５平方厘米及以上）。
（二）畜间布病检验方法和判定标准１．家畜布病的诊断是综合性的，主要依据：（１）流行病史（２）临床症状（３）实验检查：Ａ、病源分离Ｂ、血清学及其他试验ａ、初筛试验：虎红平板凝集试验、平板凝集试验、全乳环状试验（牛）、皮内变态反应（羊）、任选一种或多种进行初筛。
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布鲁氏菌病诊断标准及处理原则1 主题内容与适用范围本标准规定了人群布鲁氏菌病(简称布病)的诊断和疫区处理原则。
本标准适用于各类医疗、卫生防疫机构。
2 术语皮肤过敏试验：受布氏菌感染后，再受到布氏菌过敏原刺激，皮肤出现的迟发型过敏反应。
布病疫区：凡有新病人发生，或有疫畜检出的自然村(屯)或畜牧场(队)均视为布病疫区。
检疫：用特异性的血清学，皮肤试验，分离细菌等方法对人畜布病的检查。
淘汰：对查出的阳性畜进行屠宰处理。
3 布病诊断布病是一种严重地危害人民健康和畜牧业发展的人畜共患的传染病，染疫的家畜是人和畜间布病的主要传染源。
3.1 流行病学：发病前病人与家畜或畜产品，布氏菌培养物有密切接触史，或生活在疫区的居民，或与菌苗生产、使用和研究有密切关系者。
3.2 临床表现：出现持续数日乃至数周发热(包括低热)，多汗，肌肉和关节酸疼，乏力，兼或肝、脾、淋巴结和睾丸肿大等可疑症状及体征。
3.3 实验室检查：布病玻片或虎红平板凝集反应阳性或可疑，或皮肤过敏试验后24、48h分别观察1次，皮肤红肿浸润范围有一次在2.0cm×2.0cm及以上(或4.0cm(上标始)2(上标终)以上)。
3.4 分离细菌：从病人血液、骨髓、其他体液及排泄物中分离到布氏菌。
3.5 血清学检查：标准试管凝集试验(SAT)滴度为1∶100及以上；对半年内有布氏菌苗接种史者，SAT滴度虽达1∶100及以上，过2～4周后应再检查，滴度升高4倍及以上；或用补体结合试验(CFT)检查，CFT滴度1∶10及以上；抗人免疫球蛋白实验(Coomb＇s)滴度1∶400及以上。
疑似病例：具备3.1、3.2和3.3者。
确诊病例：疑似病例加3.4或3.5中任何一种方法阳性者。
4 疫区处理原则4.1 核实诊断：对确诊的病人应依据流行病学资料，临床表现和实验室检查结果进行核实诊断。
4.2 检疫和淘汰处理疫畜：对疫区内全部羊，牛和猪用血清学方法进行检疫，检疫后1个月再检一次。
凡检出的阳性家畜均应立即屠宰(或隔离饲养)。
至少在一年内停止向外调运牛、羊、猪。
畜产品均应在原地存放和消毒，暂不外运。
4.3 消毒：被病畜的流产物污染的场地、用具、圈舍及尚未食用的奶制品均应进行消毒处理。
4.4 免疫：经两次检疫呈阴性反应的家畜，以及疫区周围村受威害的畜群，应连续3年以畜用菌苗进行免疫，每年免疫覆盖率不应低于90％。
4.5 临床监测及治疗：对疫区内接触家畜及畜产品的人员进行血清学及皮肤过敏试验，查明人群感染情况，凡确诊的病人均应进行系统治疗。
4.6 宣传教育：对疫区的居民及职业人群进行布病的危害、临床表现及防治知识的宣传教育。
4.7 疫区处理效果验证：在疫区处理后的第二年始，连续三年对疫区及疫区周围地区进行验证，验证方法按照农业部和卫生部共同制定的《布病疫区控制考核标准》的要求进行。
附录A布鲁氏菌病诊断的特异性实验室检查技术(补充件)A1 从可疑布病患者分离布鲁氏菌A1.1 血培养A1.1.1 双相培养基培养：无菌从可疑病人静脉取血液4～5mL，在酒精灯火焰附近将血液注入5～6支含双相培养基的中试管内，或2～4只含双相培基烧瓶中，轻轻混合倾斜，使被检血液分布在琼脂斜面上，置37℃温箱培养，如果怀疑病人是牛种布鲁氏菌感染时，应有一半标本置CO(下标始)2(下标终)环境中培养，三天后观察结果，如未见布氏菌生长，可按上法再倾斜，使血液涂在琼脂斜面上，继续培养，每隔一天观察一次，如有可疑布鲁氏菌落，可用铂金耳勾出接种到琼脂试管培基，获得纯培养，进一步作布氏菌鉴定，血培养二十天仍不出菌，可定为阴性。
A1.1.2 接种未受精鸡卵法：取新鲜鸡蛋两个，把鸡蛋放在固定架上，锐端向上，以碘酒和酒精依次消毒蛋壳，用眼科手术刀在顶部穿一小孔，用三厘米长注射针头将被检血液徐徐注入卵黄中，每个鸡蛋接种血液0.2mL，立即用灭菌石蜡将孔密封，置37℃温箱中培养，五天后把接种血液的鸡蛋无菌打开，用灭菌的毛细管把接种血液部分的卵黄及蛋清吸出0.5～0.6mL，接种2～3支斜面培养基上，置37℃培养，2～3天观察一次，15天仍不见可疑菌落生长，定为阴性。
A1.2 骨髓培养用灭菌的导尿管将尿液导出放入灭菌容器中，为浓缩细菌，提高检出率，可在尿液中加入1％～3％的高价布鲁氏菌免疫血清，混合后，置37℃温箱2h，高速离心沉淀，取沉淀物0.5mL接种在选择性培基上培养，或注射豚鼠，用生物学法分离布鲁氏菌。
A1.3 其他病原材料培养由乳，脑脊液，关节液和滑囊液分离布鲁氏菌，将液体标本无菌地接种到琼脂斜面上，或培养平板上，涂布于培基表面，参照血培养法观察结果，15天仍无可疑菌生长，定为阴性。
A1.4 生物学分离布鲁氏菌法为了提高对布鲁氏菌的检出率和从污染的材料中分离布鲁氏菌，将被检材料(固体标本加灭菌的生理盐水研碾成浆液态)经皮下或腹腔注射豚鼠或小白鼠，豚鼠接种1mL，小鼠接种0.5mL，接种豚鼠，即可观察血清变态反应情况，又可作细菌分离培养，小鼠感染后二十天解剖取脏器培养，豚鼠接种后三十天解剖取脏器培养。
A2 特异性血清学检查A2.1 平板凝集试验(PAT)A2.1.1 器材及试剂赫德逊氏凹玻板或一块清洁无油脂玻璃板，平板凝集抗原，被检血清，已知阴性和阳性血清，0.1mL吸管或微量加样器，牙签或细铁丝。
A2.1.2 操作方法A2.1.2.1 备方形洁净的玻璃板，划成25个方格(或更多)，横数5格，纵数5格，第一列各格写下血清号码。
A2.1.2.2 用0.1mL吸管按下列剂量加受检血清于任何一行(横格)的各格中：第一格0.08mL，第二格0.04mL，第三格0.02mL，第四格0.01mL。
A2.1.2.3 加平板凝集抗原0.03mL于各血清格中，用牙签或细铁丝混合，由血清量最小的格混起，每份血清用一根牙签混合即可，用后烧毁，若用细铁丝混合时，每份血清混合后用酒精棉球擦净，然后再用作另一份血清。
A2.1.2.4 混匀后将玻璃板置于酒精灯火焰或凝集反应箱上，均匀加温，使其达到30℃左右，5min内记录反应结果。
A2.1.2.5 每次试验用阴、阳性血清各1份作对照。
A2.1.2.6 按下列标准用加号记录反应强度：＋＋＋＋：出现大的凝集片或小的粒状物，液体完全透明，100％凝集。
＋＋＋：有明显的凝集片，液体几乎完全透明，75％凝集。
＋＋：有可见的凝集片，液体不甚透明，50％凝集。
＋：液体混浊，只有少量粒状物，25％凝集。
－：液体均匀混浊。
A2.1.2.7 平板凝集反应与试管凝集反应的关系：0.08mL 血清量出现凝集相当于试管法1∶25的血清稀释度，0.04mL相当于1∶50，0.02mL相当于1∶100，0.01mL相当于1∶200。
A2.1.3 判定人血清0.02mL出现＋＋及以上凝集程度判为阳性，人血清0.04mL出现＋＋及以上凝集程度判为可疑。
A2.2 虎红平板凝集试验(RBPT)A2.2.1 器材及试剂清洁脱脂玻片或有凹型孔的玻片，0.1mL吸管或微量加样器，牙签或细铁丝，虎红平板凝集抗原，被检血清。
A2.2.2 操作方法在玻片上加0.03mL被检血清，然后加入虎红平板抗原0.03mL，摇匀或用牙签混匀，在5min内判定结果。
A2.2.3 判定判定凝集程度(－至＋＋＋＋)同平板凝集反应亦可只分为(＋)阳性，(－)阴性两类。
A2.3 试管凝集试验(SAT)A2.3.1 器材及试剂试管凝集抗原，被检血清，0.5％的石碳酸生理盐水，吸管，凝集试管，温箱和试管架等。
A2.3.2 操作方法A2.3.2.1 被检血清的稀释：在一般情况下，每份血清用5支小试管(口径8～10mm)，第一管加入2.3mL石碳酸生理盐水，第二试管不加，第三、四、五管各加0.5mL，用1mL吸管吸取被检血清0.2mL，加入第一管中，混匀。
混匀后，以该吸管吸取第一管中血清加入第二管和第三管各0.5mL，以该吸管将第三管混匀，并吸取0.5mL加入第四管，混匀。
再从第四管吸取0.5mL，弃去。
如此稀释后，从第二管到第五管血清稀释度分别为1∶12.5，1∶25，1∶50和1∶100。
A2.3.2.2 加入抗原：先以0.5％石碳酸生理盐水将抗原原液作适当稀释(一般是作1∶10稀释)。
稀释后的抗原加入各稀释的血清管(第一管不加，作为血清对照)，每管加0.5mL，混匀。
加入抗原后，每管总量1mL，血清稀释度从第二管至第五管分别为1∶25，1∶50，1∶100和1∶200，从第一管再吸出0.5mL，剩1mL。
A2.3.2.3 对照：阴性血清对照，血清稀释后加抗原(与被检血清对照相似)。
阳性血清对照，其血清稀释到原有滴度，再加抗原，抗原对照，适当稀释的抗原加石碳酸盐水。
A2.3.3 判定A2.3.3.1 判定比浊管制备：每次试验须配制比浊管作为判定的依据。
配制方法是：取本次试验用的抗原稀释液5～10mL，加入等量的0.5％碳酸盐水作倍比稀释，按表A1配制比浊管。
表A1 比浊管配制A2.3.3.2 全部试验管，对照管及比浊管充分振荡后置37℃温箱中20～22h，取出后放室温2h，然后以比浊管为标准判定结果。
A2.3.3.3 记录结果：根据各管中上层液体的清亮度记录结果。
特别是50％清亮度(＋＋)对判定结果关系较大，一定要与比浊管对比判定。
＋＋＋＋：完全凝集，上层液100％清亮。
＋＋＋：几乎完全凝集，上层液75％清亮。
＋＋：显著凝集，液体50％清亮。
＋：有微量凝集，液体25％清亮。
－：无凝集，液体不清亮。
确定每份血清滴度是以出现十十及以上的凝集现象的最高血清稀释度。
A2.4 抗人免疫球蛋白试验(COOMBS)A2.4.1 器材及试剂除试管凝集试验所需的一般器材及试剂外，还需抗人免疫球蛋白血清及普通离心机。
A2.4.2 操作方法A2.4.2.1 试管凝集试验阶段：按A2.3进行试管凝集试验。
A2.4.2.2 抗免疫球蛋白的反应阶段：选取试管凝集试验的可疑反应管及全部阴性反应管，记录管号，经4000r/ min离心15min，用生理盐水反复洗涤三次，然后向各管中加入生理盐水0.5mL、一定稀释度(一般是1∶20倍稀释)的抗人免疫球蛋白血清，混匀，将反应管置37℃温箱中20～22h，取出放室温2h后判定结果。
A2.4.2.3 判定：判定结果的标准，程度均同试管凝集试验。
A2.5 补体结合试验(CFT)A2.5.1 器材及试剂37℃水浴箱，普通离心机，普通冰箱，各种容量的吸管，烧瓶，凝集管和试管架，生理盐水，补体(新鲜豚鼠血清，或冻干补体)，2％的绵羊红细胞悬液，溶血素，补体结合抗原，阴性和阳性血清，被检血清。
A2.5.2 操作方法A2.5.2.1 补体滴度：在进行CFT时，必须当天滴定补体，将补体用生理盐水稀释为1∶20，通常在十支凝集管中分别依次加入不同量的1∶20稀释补体0.02～0.2mL，然后各管中加入2个单位的抗原液0.2mL，再用生理盐水把各管补至0.6mL，混匀后放37℃水浴中30min，再加0.2mL的溶血素(2个单位)和2％红细胞0.2mL，混匀，置3 7℃水浴中30min，判定结果(见表A2)。