植物的组织培养
植物组织培养的一般过程
植物组织培养的一般过程
以下是有关植物组织培养的一般过程：
1.植物组织培养的一般过程
（1）在无菌条件下，将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下，用纤维素酶和果胶酶处理以去除细胞壁，使之露出原生质体。
（2）然后放在适当的人工培养基上进行培养，这些器官和组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。
不过这种组织没有发生分化，只是一团薄壁细胞，称为愈伤组织。
（3）在合适的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下，愈伤组织便开始分化，分化成植物的各种器官和组织，进而发育成一株完整的植株。
2.植物组织培养的特点
（1）培养条件可以人为控制，组织培养采用的植物材料完全是在人为提供的培养基和小气候环境条件下进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响，且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产。
（2）生长周期短，繁殖率高，植物组织培养是由于人为控制培养条件，根据不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培养条件，因此生长较快，另外，植株也比较小，往往20~30天为一个周期。
所以，虽然植物组织培养需要一定设备及能源消耗，但由于植物材料能按几何级数快速繁殖生产，故总体上成本低廉，且能及时提供规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。
（3）管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。
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植物的组织培养方法
植物的组织培养方法植物组织培养是一种无性繁殖技术，通过培养植物的各种器官组织，包括种子、茎、叶和根的细胞和组织，使其在适当的条件下进行生长和分化，从而产生新的植株。
这项技术已被广泛应用于农业、园艺、林业和植物学研究中。
以下是植物组织培养的一般步骤和方法：1. 材料准备：首先，选择适合的植物作为材料，常用的包括水果、蔬菜和花卉植物。
收集新鲜的种子、茎、叶或根，并进行消毒处理，以防止细菌、真菌和其他病原体的污染。
2. 植物组织的分离：将植物材料切成小块或将细胞分离开来。
对于植物的种子，可以直接将种子表面进行消毒处理后，在培养基上进行培养；对于茎、叶和根等组织，则需要进行切割处理。
3. 培养基的准备：制备适当的培养基是进行植物组织培养的重要步骤。
培养基通常由无机盐和有机添加剂组成，以提供植物生长所需的营养物质。
根据组织的不同类型，可以使用不同种类和浓度的培养基。
4. 培养基的调整：将分离的组织放入培养基上，可以将培养基涂覆在组织表面上，或者将组织植入培养基中。
然后，在无细菌的条件下，将组织培养在适当的温度、湿度和光照条件下。
5. 激素的添加：植物生长激素是控制植物生长和分化的关键因素。
在组织培养中，可以根据实验的需要添加适量的激素来促进细胞分裂和分化。
常用的激素有生长素、细胞分裂素和愈伤组织生成素等。
6. 愈伤组织的诱导：愈伤组织是植物组织培养中产生的一种可分化细胞。
通过搅拌、震荡或辐射等途径，诱导组织分化成愈伤组织，然后将其继续培养。
7. 植株的再生：通过培养基中激素的平衡调节，可以使愈伤组织再生为整个植株。
在培养基中，植株的幼苗养分丰富，需要的培养基成分和激素浓度可能与之前的不同。
8. 培养环境的控制：为了使植物组织正常生长和分化，需要控制培养环境的参数。
例如，可以调节培养基的pH值、光照强度、温度和湿度等因素。
9. 组织转化：经过培养，植物组织中可以引入外源基因，使其具有某种特定的性状，这被称为转基因。
植物组织培养
1.植物组织培养（离体培养）：是指在无菌条件下，将植物体的任何一部分，培养在人工配制的培养基上，并给予适宜的培养条件，使之发育形成完整植物体的过程。
2、植物组织培养的类型（1）根据培养基的类型分为:固体培养液体培养半液半固体培养（2）根据培养材料（外植体类型）分为：植株培养器官培养组织培养原生质体培养胚胎培养细胞培养（3）按培养过程分：初代培养继代培养生根培养3、植物组织培养的一般工作流程1.准备阶段：（1）查阅资料，制定培养方案；（2）清洗组培用器皿、工具；（3）配制所需试剂和培养基；（4）试剂、培养基与器皿、工具的灭菌。
2.外植体的选择与消毒；3.初代培养；4.继代培养；5.生根培养；6.炼苗移栽4、植物细胞的全能性概念：指植物体的每个活细胞都携带有该物种的全套遗传信息，在适宜条件下，离体细胞都具有发育为一个完整植株的潜在能力。
注意：（1）活细胞（2）离体细胞（3）细胞全能性表达的难易程度取决于细胞的分化程度5、细胞全能性的强弱表现：（1）植物细胞全能性根据细胞的性质不同由强到弱：营养生长中心＞形成层＞薄壁细胞＞厚壁细胞（木质化细胞）＞特化细胞（导管等）（2）植物细胞全能性根据所处的组织不同由强到弱：顶端分生组织＞侧生分生组织＞居间分生组织＞薄壁组织＞厚角组织＞输导组织＞厚壁组织6、植物组织培养中全能性表达的条件：1.无菌条件；2.离体条件；3.一定的营养物质；4.植物生长调节物质；5.适宜的外界条件。
7、胚性细胞的特点：未分化状态；细胞具有旺盛分裂能力；具有两极性8、脱分化：指在一定条件下，已分化成熟的细胞、组织或器官恢复到未分化的分生状态，并进行细胞分裂形成未分化的细胞团，如愈伤组织的形成过程。
9、愈伤组织形成的三个时期：（1）诱导期又称启动期（最难）。
（2）分裂期（3）分化期10、优良愈伤组织的特征：（1）具有旺盛的增殖能力；（2）容易散碎；（3）具有高度的胚性或再分化能力，便于植株再生；（4）经过长期的继代保存而不丧失胚性。
植物组织培养
植物组织培养的含义：将植物的离体材料（器官、组织、细胞、原生质体等）无菌培养，使其生长、分化、繁殖，再生出完整植株或生产次生代谢物质的技术。
植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性：指一个完整的植物细胞拥有形成一个完整植株所必需的全部遗传信息，在适宜条件下具有发育成完整植株的能力。
外植体：在植物组织培养中，在活体植物上提取下来的，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等均称为外植体。
外植体选择的原则：①、再生能力强；②、遗传稳定性好；③、来源丰富；④、灭菌容易。
植物组织培养的类型：根据培养材料（即外植体）的不同，可将植物组织培养划分为植株、胚胎、器官、组织、细胞和原生质体五个水平上的培养类型。
愈伤组织：原指植物在受伤后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组织培养中，则指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
植物组织培养的特点：①、培养材料经济；②、培养条件可以人为控制；③、生长周期短，繁殖率高；④、管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。
White（1943）撰写的《植物组织培养》是第一部有关植物组织培养的专著。
PH值最适5.6，高温、高压灭菌后PH值会降低，配制时一般为5.7~5.8，若PH值偏高，培养基会偏硬，会不利于植物材料吸取营养；PH值偏低，培养基凝固不好，不利于植物材料的固定。
MS培养基特点：①、无机盐成分很高，硝酸盐、NH+、K+含量高；②、元素平衡较好；③、缓冲性能也比较好；④、微量元素、有机成分丰富、齐全。
无机盐母液适度冷藏保存。
维生素等有机营养元素在—20℃保存，使用前用温水溶解。
MS培养基母液的成分：大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、有机物母液。
CuSO4、CuCl2取25mg溶于10mL，制成2.5mg/mL溶液，配制50mL微量元素母液，吸取该溶液0.05mL。
灭菌的条件：培养基的成分：1、水分2、无机盐①、大量元素：指植物生长发育所需浓度大于0.5mmol/L的营养元素。
植物组织培养
矮牵牛茎尖离体培养培养
大蒜根尖培养及植株 再生
微型月季茎段离体培养
叶诱导愈伤组织
台湾百合离体培养
菊花体细胞胚胎发生及植株再生
矮牵牛茎尖离体培养培养
牡丹成熟胚的离体培养与快速繁殖
非洲紫罗兰叶片培 养
优化培养基
无蔗糖
1%蔗糖
5%蔗糖
无BAP
BAP 0.1mg/l
BAP 5.0mg/l
无NAA
种质资源的离体保存
体细胞无性系变异筛选
花粉、花药培养产生单倍体植株
幼胚拯救克服远缘杂交障碍
用于基因工程技术创造植物新种质。
3、大规模植物细胞、组织和器官培养生产次 生代谢物质；
根培养:正常根培养， 毛状根培养
4、用于植物生长发育理论研究，包括生理学、 病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等。
1972年，Carlson等利用原生质体融合在两个烟草属中进行种间杂交。
1974年，Murashige等利用细胞分裂素诱导茎尖侧芽分枝。Zaenen和 Larebeke分别发现土壤农杆菌（Agribacterium）中的根瘤诱导的主 要成分是Ti质粒。 1978年，Melchers等进行了番茄和马铃薯的体细胞杂交。
五、植物组织培养技术的应用
1、优质种苗的快速无性繁殖： （1）无性繁殖作物及不易繁殖作物的快速繁殖
园艺植物种苗工厂化生产
兰科植物生产
A
B
C
E
F
G
花烛属植物
厥类植物
盆栽及切花植物的繁殖
珍贵树种
无菌苗快速繁殖
无菌苗驯化
组培苗驯化移栽
茎、芽和小植株的规模培养
经济植物快速繁殖
（2）通过茎尖培养生产脱毒健康种苗：如草莓、香蕉、
植物组织培养
（3）肌醇 又叫环己六醇，在糖类的相互转 化中起重要作用。 使用浓度：一般为lOOmg／L。 作用：适当使用肌醇，能促进愈 伤组织的生长以及胚状体和芽的形 成。对组织和细胞的繁殖、分化有 促进作用，对细胞壁的形成也有作 用。
（4）氨基酸 (almino acide） 作用：蛋白质的组成部分，也是一种有机氮化 合物。是很好的有机氮源，可直接被细胞吸收利用。 种类：最常用的是甘氨酸，其他的如精氨酸、 谷氨酸，谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等 半胱氨酸及多种氨基酸的混合物（水解酪蛋白、水 解乳蛋白）等。
（11）再分化 经脱分化的组织或细胞在一定 的培养条件下可又转变为各种 不同细胞类型的能力。 （12） 分化培养 经过脱分化阶段的外植体（形 成愈伤组织），转移到另一培 养基上分化出芽（或小球茎） 或胚时，则称为分化培养，所 用的培养基为分化培养基。
（13） 增殖培养 已分化芽、小球茎或无性幼胚再继续进行增殖，即
1. 培养条件可人为控制，周年生产
植物组织培养中的植物材料完全是在人为提供的 培养基及小气候环境下生长的，摆脱了大自然中 四季、昼夜气温频繁变化及灾害性气候等外界不 利因素的影响，且条件均一、对植物生长极为有 利。因此植物组织培养不受气候和季节的限制， 可周年进行生产。
2. 生长周期短，繁殖速度快
植物组织培养可根据不同植物、不同器官、不同 组织的不同要求而提供不同的培养条件，满足其 快速生长的要求，缩短培养周期。一般20~30d就 完成一个繁殖周期.每一繁殖周期可增殖几倍到几 十倍,甚至上百倍,植物材料以几何级数增加。
3. 管理方便，可实现工厂化生产
植物组织培养是在人为的提供一定温度、光照、 湿度、营养和植物生长调节剂等条件下进行的， 不受自然界中病、虫、杂草等有害生物危害，生 产微型化、精细化、高度集约化，重复性强，便 于标准化管理和自动化控制，真正实现了种苗的 工厂化生产。与田间栽培、盆栽等相比，省去了 中耕除草、浇水施肥、病虫防治等一系列繁杂劳 动，可大大节省人力、物力及田间种植所需要的 土地。
植物组织培养的方法
植物组织培养的方法植物组织培养（Plant tissue culture）是指利用无菌条件下培养植物细胞或组织，以实现繁殖、繁育新品种、生物合成化合物、环境污染处理等目的的技术。
其不仅可以大幅度提高植物材料的品质和数量，还可以在无限制地产生同一种植物。
方法一：赤潮法（Embryogenesis）这一方法是利用赤潮细胞发生器官（如胚性板）的细胞分化，诱导植物组织的胚胎发生，进而实现植物再生。
该方法适用于很多种植物，如玉米、大麦、水稻等。
步骤为：1. 准备培养基：含有赤潮素、氨基酸、维生素、植物激素和适当的糖类和盐类的基础培养基。
2. 处理材料：将植物的姿态板或种子材料在高温（35-40C）下进行消毒，使其无菌。
3. 材料分离：将消毒材料放入无菌条件下进行材料分离。
4. 培养细胞：将细胞或组织放入含有培养基的无菌培养皿中，保持恒定的温度、湿度和光照条件，促进发生素感应化。
5. 发生胚胎体：促进胚胎形成，通过培养发生胚胎胶囊或胚胎体。
6. 块茎冷藏：利用低温存储胚胎体或胚胎胶囊。
方法二：组织培养（Organogenesis）组织培养方法是通过培养植物的基本组织如叶片、茎尖、芽分根进而再生整个植株。
步骤为：1. 材料处理：对种子或植株进行表层消毒处理。
2. 制备组织片：将消毒好的植株切成组织片段，如茎尖、叶片等。
3. 培养基准备：准备无菌的培养基，其中含有植物的必需胰凡陈列如糖类、氨基酸、维生素、生长因子和植物激素等。
4. 组织分化：将组织片段放入含有培养基的培养皿中，使其分化成根、茎、叶等。
5. 干涸与移栽：将培养的加上适量水后，移栽到含有生长素适量的培养基中，促进植物以正常生长的形式营养。
方法三：悬浮细胞培养（Suspension Culture）在此方法中，使用悬浮培养细胞进行植物细胞或组织的生物合成和生物转化。
步骤为：1. 培养基准备：通常使用植物基础培养基加入氨基酸、维生素和植物激素等。
2. 细胞处理：将细胞分散在含有培养基的匀浆器中，使其悬浮在培养基中。
植物组织培养(1)
0.1.3 植物组织培养的研究类型和任务
• 组织培养：分生组织、形成层组织、薄壁组织、韧皮部组 织等。
• 器官培养：根、茎、叶、花、果实、种子。 • 胚胎培养：幼胚、成熟胚、胚乳、胚珠、子房等。 • 细胞培养：单细胞或较小细胞团，如性细胞、叶肉细胞、
1. Thimann和Wickson
• 1958年，他们发现腋芽（当顶芽存在时为休眠状态） 的生长，可以通过外源细胞分裂素的应用而启动。这 样，将茎段培养在含有细胞分裂素的培养基上，就可 以在一个具有完整顶芽的生长中的茎上诱导侧芽的形 成。这将消除顶端优势，得到大量不定芽。
Thimann
2. Morel－脱毒、快繁商业化
• 1922 年 ， 植 物 离 体 组 织 培 养 取 得 了 一 些 进 展 。 德 国 人 Kotte和美国人Robbins两人同时分别独立地将分生组织作 为外植体。Kotte研究切下的根尖，如豌豆、玉米根尖， 将它们放在含有Knop溶液盐成分、葡萄糖、含氮化合物 如天冬酰氨酸、丙氨酸以及肉汁的各种营养液中。Kotte 观察到根尖生长持续了2周，但他没有进行继代培养。另 一方面Robbins通过继代，将玉米根尖离体培养了更长的 时间，但随着时间延长，生长量减少，最后消失。
• 1952年， Morel和Martin提出了植物脱毒（virus free）技 术，通过分离已被病毒感染的大丽花个体的根尖，并将其 离体培养，重新获得了无病毒的大丽花。
• 1960年，Morel利用兰花茎尖培养，实现了脱毒和快速繁殖 （rapid clone propagation）的两个目的。这一技术导致欧 洲、美洲和东南亚许多国家“兰花工业”的兴起。
0.2 植物组织培养的形成和发展
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三、我国花卉组培苗产业化存在 问题
1、培养程序过于繁琐,成本高,科研成果不 易向产业化方向发展
唐菖蒲用花蕾外植体建立脱毒苗后,需分别继 代于分化培养基和生根培养基,分化培养基中 必须附加NAA、6-BA和腺嘌呤,生根培养基中 须附加IBA,培养周期为65天左右。 脱毒微型薯在基本MS培养基中既能生长茎叶 又能生根,不需要外加激素,培养周期为20天左 右,生产工艺程序简单、生产成本低。 这就是脱毒微型薯组培容易形成产业化,而兰 花、唐菖蒲等花卉不易形成产业化发展的原因 之一。
铁 盐 单 独 配 制 ， 其 配 法 为 5.57g 的 硫 酸 亚 铁 （ Fe SO4.7H2O）和7.45g乙二胺四乙酸二钠（Na2-EDTA）溶于 1L水中，用时每配1L培养基，取该溶液5ml。
IAA 、 IBA、 NAA 等可用少量的乙醇溶解，然后在加 水定容。2,4-D可用1 N的Na OH 溶解然后再定容； KT和 6-BA应先定容于少量的 1 mol/L 的HCl中，再加水定容。 玉米素应该溶于95% 的乙醇中再定容。 pH值对培养基的凝固情况和植物材料的生长有很大的 影响，因此，等培养基配好后，应该立即调整培养基的 pH ,最好用酸度计，既快又准。培养基配好后应该立即分 装，体积一般为容器的 1/4 或者1/3为好。
上海交大昂立天然药物工程技术有限公司 目前已开展了铁皮石斛新采集野生蒴果的 组织培养工作。组培苗长势良好，预计年 底可生产100万株苗，并完成10 亩大田的 移栽工作。明年即可得到人工栽培的濒危 珍稀药材铁皮枫斗。
铁 皮 石 斛 组 培 苗
二、我国花卉组培苗产业化现 状
我国农业生物技术工作者对3000多种植物 进行了组培最佳培养基的筛选工作,但真正 应用于大规模产业化的组培植物主要是果树 类作物及一些经济作物,全国已建成葡萄、 苹果、香蕉、马铃薯、甘蔗等快繁生产线 11条,供应试管苗达几千万株,生产的香蕉已 进入国际市场。 目前花卉组培苗产业化发展较快的主要有香 石竹、百合、大花惠兰、马蹄莲的组培苗也 在向产业化方向发展,但规模较小。
操培养基灭菌 11. 打开灭菌锅盖，向锅内加水。 22.加水后，将待灭菌的物品放入锅内，不要放的太多， 以免影响灭菌效果。物品不要近靠锅壁，以免冷凝水顺 壁流入物品中。 33. 加盖旋紧螺旋。 44. 打开放汽阀，加热，自开始产生蒸汽后5分钟，再关 紧放汽阀，此时锅内的冷空气已由排气孔排尽，让温度 随蒸汽压力的增高而上升。 5
2、同一种花卉不同属、不同品种所 用培养基不相同,重现性差
国内外学者对卡特利亚兰组培苗的研究： 美国学者认为卡特利亚兰茎尖或只带一对叶原 基的茎尖分生组织在Knudson‘c附加100mg· L1椰奶液体培养基中培养效果最佳。 中国学者认为MS附加6-BA5mg· L- 1,NAA0.1mg· L-1固 体培养基中培养增殖效果最佳。 其他学者也做过这方面研究,结果不尽相同 。 归结原因主要是不同品种的外植体培养方法不 同,重现性差 。
1.2国内花卉组培苗产业化概况
在我国农业、林业、园林等领域里，国家级、 省级、甚至市级、县级的科研单位、大专院 校等几乎都拥有植物组培的实验室或繁殖中 心或育苗工厂或育苗公司 广州花卉研究中心工厂化生产荫生观叶植物 组培苗年产量达千万株以上 浙江亚林所已大量培养唐菖蒲脱毒苗 上海多个科研院所或生产单位培育的香石竹、 勿忘我、扶郎花等组培苗已大批量地推上市 场，有的还外销，年产量达100万株以上
注意事项：
1. 配制培养基时，一定要注意调节pH。 2.外植体不能太小，否则会影响愈伤组织的形成。
结果
外植体经过20天的培养后，长出淡黄色的愈伤 组织。
花卉组培苗产业 化现状与前景
绪论
当今，植物生物技术已发展成为新技术革命 的重要组成部分，在农业、林业、园林等领域运 用生物技术收到了巨大的经济效益和社会效益， 其中组织培养工厂化育苗是运用最广、效果最好 的一项。组织培养快速繁殖种苗，具有无性繁殖 的特点，能较好地保持原种的优良经济性状，繁 殖系数高，便于工厂化生产和集约化经营，以组 织培养快速繁殖技术为手段建立某种或某类植物 商业性地生产体系，被誉为最具有基储备液的配制 成分 20×储备液1（大量元素） NH4NO3 KNO3 CaCl2.2H2O MgSO4.7H2O KH2PO4 200×储备液2（微量元素） KI H3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 200*储备液3（铁盐） FeSO4.7H2O Na2.EDTA.2H2O 200*储备液4（有机成分） 肌醇 烟酸 盐酸吡哆醇 盐酸硫胺素 甘氨酸
容50 ml (浓度为0.2 mg/ml), 用同样的方法配制2，4-D母液。 称取 50 mg 6-BA, 加少量的1 mol/L HCl，使其充分溶解，然后加水至 50 ml (浓度为1 mg/ml) 。
4
3．MS基本培养基的配制：分别吸取MS贮备液30.0 ml（ 大量元素）、3.0 ml微量元素、 3.0 ml铁盐、 3.0 ml有机, 加入1 L的搪瓷缸中，然后称取蔗糖18.0g, 加入琼脂4.8g ，加蒸馏水约550 ml，在电炉上加热，煮沸，融化琼脂 ，然后加水至560ml。
无机微量元素
主要有：铁、硼、锰、锌、铜、钼、钴、氯
有机成分：
糖、 维生素、肌醇、氨基酸及有机附加物。
植物生长调节物质：
生长素类：NAA、IAA、IBA、2,4-D 细胞分裂素类：BAP, KT，TDz，ZT 其他类： GA3, ABA， PP333
琼脂 pH值
配制培养基最方便的方法是预先配制不同组分 的培养基母液，贮藏在冰箱，待配制培养基时取出， 按比例稀释。 配制母液时为了减少工作量可以把几种药品配 在同一母液中，但是应该注意各种化合物的组合以 及加入的前后顺序，应该把钙离子、锰离子、钡离 子和硫酸根和磷酸根例子错开，以免发生沉淀。 把每种试剂单独溶解后再加入后一种化合物。 混合已溶解的各种矿质盐时还应该注意加样顺序。
器材和药品
高压蒸汽灭菌锅、洁净工作台、循环水式真 空泵、电子天平、酸度测定仪、光照培养箱,搪 瓷杯、搪瓷盘、100 ml三角烧瓶（12个/组）、 250 ml三角瓶（2个/组）、试剂瓶、解剖刀柄与 刀片、单面刀片、剪刀、长镊子、培养皿、移 液管、漏斗、量筒、烧杯（50、100、500、 1000 m1），酒精灯、火柴、玻璃棒、吸耳球、 封口薄膜、牛皮纸、线绳、牛皮筋、脱脂棉、 滤纸、pH试纸（5.4-7.0）、标签纸、称量纸、 药勺等。
• 次氯酸钠消毒液, 75%的酒精 ,0.2％的升汞溶液. • 1 N 盐酸,1 N NaOH,0.8%的琼脂,3%的蔗糖.
0.1 mg/ml的2,4-D溶液：取25 mg的 2,4-D，加入 少量95%的酒精和1 N的NaOH溶解，再加蒸馏水 定容至250 ml。 • 0.1 mg/ml 的6-BA溶液：取25 mg的6-BA，用少 量1 N的盐酸溶解，再加蒸馏水定容至250 ml。
1升储备液用量（mg）
每升培养基取用量（ml）
33000 38000 8800 7400 3400
50
166 1240 4460 1720 50 5 5 5560 7460
5
5
20000 100 100 20 400
5
实实验步骤
P培养基的配制
11．母液配制： 按照表 1分别配制，并在4 ℃冰箱中保存。 22. 植物激素配制：称取10 mg NAA,加入少量酒精，并加水定
培养基是植物组织培养中的主要部分， 除了培养材料本身因素外，培养基的种类和 成分等直接影响培养材料的生长和发育，应 根据培养材料的种类和培养部位选择适宜的 培养基。培养基的种类很多，不同的培养基 有其不同的特点。
培养基的主要成分： 水 无机成分： 无机大量元素
氮： 铵态氮、硝态氮混合 磷： 磷酸盐 钾： 钾盐 钙、硫、镁
一、国内外花卉组培苗产业化发 展动态
1.1国外花卉组培苗产业化概况
1960年法国的莫瑞尔（Morel）建立的兰花 组培苗工厂，标志着世界上第一家花卉组 培苗实现规模化生产. 进入80年代以后，花卉组培苗产业化生产 得到了较快的发展。据欧洲及地中海植物 保护组织（EPPO）1991年公报，仅西欧 国家目前共拥有248家植物繁殖公司，其中 从事花卉组培苗生产的占有较大的比重。
3、组培苗移栽成活率差、开花难
天津绿化研究所成功地研究出大花惠兰组 培苗培养基配方和小苗的移栽方法,但对大 花惠兰的开花生理没有完全了解,栽培方法 掌握不好,成苗后不能开花,他们与南韩合作, 所生产的组培盆栽成活后,由韩国栽培开花。
4、花卉市场运转不良是阻碍花卉组 培产业化发展的主要原因
不仅农业生物技术产业化发展受到市场 的限制,其它高科技发展和推广同样受到市 场的挑战。这给我们科技工作者提出了怎 样以市场为导向,努力探索加快我国现有生 物技术成果转化为生产力,并使产业形成一 定规模的新途径。
实验一植物的组织培养
实验原理
植物组织培养是指植物的任何器官、 组织或细 胞，在人工预知的控制条件下，放在含有营养物质和 植物生长调节物质等组成的培养基中，使其生长、分 化并形成完整植株的过程。其理论依据是植物细胞具 有全能性。
组织培养的特点是： 取材少，培养材料经
济；人为控制培养条件，不受自然条件影响；生 长周期短，繁殖率高；管理方便，利于自动化控 制。组织培养不但是进行细胞学、遗传学、育种 学、生物化学和药物学等学科研究的重要手段； 而且在农学、园艺、林业和次生代谢产物工程等 生产领域得到广泛的应用。
4. 不同激素浓度培养基的配制：取200ml烧杯3个，分别
吸取所需要的2,4-D溶液(0.5mg/L, 1mg/L, 2mg/L 所需要的 体积为：1.0，2.0, 4.0ml)，然后加入MS基本培养190ml， 搅拌均匀后，用10%的NaOH调节pH至5.8。 加水定容至 200ml。