用电阻抗法进行细菌种类鉴别试验
低酸性罐头食品商业无菌电阻抗法检测研究

低酸性罐头食品商业无菌的电阻抗法检测研究摘要:低酸性罐头食品在生产的环节中可能会产生各种常见的菌类,对其采用电阻抗法来进行检测是最为常用也是最为有效的一种手段,应用这种方法建使检测的速度与效率都大幅提高。
采用电阻抗法可以在三天之内检测完毕,并且检测的结果也是非常的准确可靠、灵敏与快速,是比较适用于低酸性罐头食品商业无菌检测的方法。
关键词:电阻抗法;罐头;食品;商业无菌一、概况根据罐头的ph值的不同,可以将其分成酸性罐头和低酸性罐头两类。
低酸性罐头指的是,除了酒精饮料以外,在杀菌后水活性值大于0.85、ph值大于4.6的罐头食品,水果或者是蔬菜在原来属于低酸性的,在杀菌之后要加酸使ph值降低的,则是属于酸化了的低酸性罐头食品。
现在在国内,对罐头食品检验的时候一般都是采用常规法。
不管是我国,还是国外的一些国家比如美国,对罐头食品商业无菌的检验采用的都是同一种方法,那就是对其样品进行五到十天的保温观察,在对其进行感官检查、显微镜检查和ph值检查,主要检查在罐头中是否含有致病菌,同时检查在常温下可在罐头中可以繁殖的非致病性的微生物。
采用电阻抗法,主要是通过测量微生物在代谢过程中引起培养基的电导率变化,来对微生物含量进行快速检测的一种方法,这种方法在国内外都被广泛的应用。
不过在国内,还没有发现有报道说采用应用电阻法对罐头食品商业无菌进行快速检测。
研究该实验,主要是结合了在罐头食品主要的原因菌进行分析,同时结合试验的菌株收集情况,选择了较为有代表性的大肠杆菌作为研究的对象,探索电阻抗法检测低酸性罐头食品商业无菌的应用方法,希望可以帮助建立一种快速检测的方法。
二、材料和方法(一)设备和仪器emd chemicals inc.公司生产的ph值试纸,梅特勒-托利多仪器有限公司生产的sg2型ph值计,olympus公司生产的bx51型生物显微镜,上海跃进医疗器械厂生产的hh·b11型电热恒温培养箱,奥地利sy-lab公司生产的微生物自动快速检测系统bactrac4300,灭菌开罐刀。
抗菌测试检测标准

抗菌测试检测标准
抗菌测试是评价物质抑制或杀灭细菌或其他微生物能力的方法。
下面是常见的抗菌测试方法和相关的标准:
1. 纸片扩散法(Disk diffusion method):根据CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute)标准进行抗菌活性测试。
该
标准包括了对不同细菌株和药物的测试方法和结果解读标准。
2. 最小抑菌浓度法(Minimum Inhibitory Concentration, MIC):根据CLSI或欧洲常用测试方法(EUCAST,European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing)进行细菌的
药敏性测试。
该测试可以确定药物对细菌的最低有效抑制浓度。
3. K-B法(Kirby-Bauer method):也是一种常用的纸片扩散法,测定细菌对抗生素的药敏感性。
除了上述各种抗菌测试方法外,还有许多其他的标准和指南可供参考,例如:
- 美国药典(USP,United States Pharmacopeia)中的相关方法
规范。
- 欧洲抗菌药物开发委员会(EUCAST)的药敏性测试指南。
- 中国药典(ChP,Chinese Pharmacopoeia)中的抗菌药物相关标准。
这些标准和指南提供了在实验室中进行抗菌测试的具体步骤和结果的解释。
根据不同的应用领域和目的,选择合适的标准进行抗菌测试非常重要。
病原微生物检验新技术

病原微生物检验新技术微生物是在生活中影响人们身心健康的重要因素,随着社会的不断发展,微生物产生的环境逐渐复杂,并且自身的抗药性也在不断的发展,一部分传统的微生物和病菌在灵活多变的市场环境中正在逐渐分离并且衍生出更为新颖的病原体,严重影响人们的身心健康。
1 色谱检测法色谱检测法指的是将不同的细菌混合物在特定的环境中进行相互溶解、解析、吸附、脱附,在以上的环境中进行多次的操作之后能够得到物质的分离现象,并且随之使用不同的检测形式进行细菌内部的检验,能够将细菌甄别到属、种甚至株。
使用这种形式进行检验的过程中能够保证较高的分辨率和较为准确的检验结果,并且分析的速度较快,能够在检验的过程中分析出较为稳定的指标。
在分析中不会收到细菌年龄、生长条件等客观因素的影响,对于细菌的鉴别具有十分重要的作用。
2 电阻抗法这类形式主要是将微生物的新陈代谢转移到培养基中,培养细菌的导电特性,根据导电性发生的变化进而判断细菌中存在的种类和物质。
在培养基中国新陈代谢的细菌能够形成不同的电解质,进而转化为电活性物质、随着微生物数量和种类的不断提升,在既定的培养基中能够转变传统的电惰性分子情况,电活性物质的质量和水平不断提升,培养基中的导电性不断提升,电阻降低。
根据相关的研究表明,导电率在实践推移中出现的变化和波与微生物自身生长和变化的趋势具有十分明显的关系,其中相似性尤为强烈的是二者在发展和变化的过程中均存在缓慢增长期、对数增长期、稳定期和衰退期。
在对微生物进行培养的过程中,由于微生物自身的数量不同,在生长的过程中表现出的趋势也有所变化。
因此,在进行培养的过程中微生物展现出的对抗属性也有所变化,进而也能够成为鉴定的依据和方式。
3 免疫学方法免疫学方法使用的基本流程是将病原体或者微生物中的抗原或抗体进行分析,这种形式能够有效降低传统病原体检测中的过程和步骤,在相关部门的检测中受到了广泛的关注。
当下的市场检测中主要使用以下几种形式抗血清凝集技术、乳胶凝集实验、荧光抗体检测技术、协同凝集试验、酶联免疫测试技术等。
阻抗法快速检测牛奶中菌落总数的研究的开题报告

阻抗法快速检测牛奶中菌落总数的研究的开题报告一、题目:阻抗法快速检测牛奶中菌落总数的研究二、背景及研究意义:牛奶是一种重要的食品,但由于其含水量高,易受到微生物污染。
因此,检测牛奶中的菌落总数对保障消费者食品安全至关重要。
目前常用的检测方法有传统的菌落计数法和基于气相色谱、高效液相色谱等方法,但这些方法都需要样品预处理、样品体积大、检测时间长、成本较高等问题,限制了其广泛应用。
因此,本研究旨在研究一种快速、准确、经济的检测方法,即基于阻抗法的菌落总数检测方法。
阻抗法是一种基于电导和电容的电学测量方法,可以实时、无损、快速地检测样品的微生物变化。
该方法使用的检测器件简单、结构紧凑,操作简便,且具有很高的检测灵敏度和准确性。
三、研究内容:本研究将通过实验探究阻抗法快速检测牛奶中菌落总数的可行性和准确性,主要研究内容包括:1. 确定检测方法的最优参数:包括检测电压、检测频率、样品处理方法等。
2. 构建牛奶菌落总数检测模型:以牛奶中不同浓度的细菌作为样品,利用阻抗法对其进行检测、分析和建模,得到不同菌落总数的电学特征和电学信号。
3. 优化检测方法,提高检测精度和稳定性:包括加强检测器件的灵敏度,提高检测精度和可靠性。
4. 验证检测方法的实际应用:根据实际牛奶样品的检测结果,验证检测方法的准确性和可行性。
四、研究方法:1. 实验仪器:包括阻抗法检测仪、牛奶样品处理仪器、菌落总数检测仪等。
2. 实验方案:对不同浓度的牛奶样品进行预处理,将其分成不同的组别,利用阻抗法对每个组别的样品进行检测,记录其电学信号,建立检测模型,并对检测方法进行优化和验证。
五、预期成果:1. 建立基于阻抗法的快速检测牛奶中菌落总数方法。
2. 验证该检测方法的准确性和可行性,并得到实用的检测结果。
3. 对该检测方法进行优化和改进,提高其检测精度、稳定性和可靠性。
六、研究意义:1. 为保障消费者食品安全提供更快速、准确的检测方法。
2. 对阻抗法在微生物检测中的应用进行了初步探索,为其在该领域中的深入应用奠定了基础。
电阻抗法检测食品细菌总数

4 %。为描述 因微生 物 的显著生长而造成培养基 阻抗的下降 ,设定 M 值 的 阈值 ,从测量
开 始 到 设 定 阈值 需 要 的 时 间定 为 阻抗 检 测 时 间一 C Fu。 阈值 的 设 定 根 据 培 养 基 所 测 样 品 的 不 同而 异 ,在 一 定 范 围 内 菌 落形 成单 位 ( F C U) 的对 数 1gC U 与 I 0 F DT呈 直 线 关 系 ,
将 培 养基 阻 抗 变 化 的相 对 值 定 为 M :
M :T -Z×10 Z o 0
其 中 :z 为 开 始 测 量 时培 养 基 阻抗 值 ;Z为 任 意 时 刻 培养 基 的 阻 抗 值 。 o 培 养基 的阻 抗 值 受 多种 因 素 的影 响 ,除 微 生 物 代 谢 活动 外 ,物 理 化学 因素 也 能造 成 系 统 的阻 抗 变 化 。对 大 多 数 微 生 物 ,培 养 基 的 阻 抗 值 自接 种 时 起 至 生 长 稳 定 期 约 下 降
文章 编 号 :10 —0 2 (0 2 3—0 1 —0 0 9 9 4 2 0 )0 03 6
电 阻 抗 法 检 测 食 品 细 菌 总 数
王 少 林
( 林粮 食 高等 专科 学校 科研 处 , 吉林 长春 吉 10 6 ) 3 0 2
摘 要 :电 阻 抗 法 是 新 发 展 起 来 的应 用 于 食 品 细 菌 检 验 的 一 项 电 化 学 技 术 。 目 前 电 阻 抗 法
每个样品需做 6 ~8个平板 ,每 当样 品数很 多时 ,检测 工作 量相 当大 。另外 平板 计数 法 需用 4 h才 能获 得 结 果 ,确 实 不 能 满 足 食 品检 验 准 确 、 快 速 的要 求 。 8
实验报告细菌感染与抗生素敏感性测试

实验报告细菌感染与抗生素敏感性测试实验报告:细菌感染与抗生素敏感性测试一、引言细菌感染是临床上常见的疾病之一,严重威胁着人类的健康。
抗生素作为治疗细菌感染的重要手段,其合理使用对于提高治疗效果、减少耐药菌的产生至关重要。
本实验旨在研究细菌感染的类型以及常用抗生素的敏感性,为临床合理用药提供依据。
二、实验材料与方法(一)实验材料1、临床标本:收集来自不同患者的各类感染标本,如血液、尿液、痰液等。
2、培养基:选用适宜的培养基,如血平板、麦康凯平板等。
3、抗生素药敏纸片:包括青霉素、头孢菌素、氨基糖苷类、喹诺酮类等多种常用抗生素。
(二)实验方法1、细菌培养:将临床标本接种于相应的培养基上,置于 37℃恒温培养箱中培养 18 24 小时,观察菌落生长情况。
2、细菌鉴定:通过形态学观察、生化反应等方法对培养出的细菌进行鉴定。
3、药敏试验:采用纸片扩散法(KB 法)进行抗生素敏感性测试。
将待测细菌均匀涂布于培养基上,贴上药敏纸片,37℃培养 18 24 小时后,测量抑菌圈直径,根据标准判断细菌对各种抗生素的敏感性。
三、实验结果(一)细菌感染类型共鉴定出多种细菌感染类型,其中以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等较为常见。
(二)抗生素敏感性1、金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺等保持较高的敏感性,对青霉素的耐药率较高。
2、大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素(如亚胺培南、美罗培南)敏感性较好,对头孢菌素类抗生素的耐药情况较为严重。
3、肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素和喹诺酮类抗生素有一定的敏感性,但对部分头孢菌素类抗生素存在耐药。
四、结果分析(一)耐药机制探讨1、产生灭活酶:某些细菌能产生β内酰胺酶等灭活酶,使抗生素失去活性。
2、改变药物作用靶点:细菌通过改变抗生素作用的靶点,如青霉素结合蛋白的结构,导致抗生素无法发挥作用。
3、降低细胞膜通透性:细菌细胞膜通透性的改变,使抗生素难以进入细胞内发挥作用。
(二)临床意义1、指导临床用药:根据药敏结果,选择敏感的抗生素进行治疗,提高治疗效果。
乳制品中细菌总数、酵母菌和霉菌快速检测方法的研究

乳制品中细菌总数、酵母菌和霉菌快速检测方法的研究一、本文概述乳制品作为人们日常饮食中重要的营养来源,其品质与安全性一直受到广泛关注。
细菌总数、酵母菌和霉菌等微生物指标是衡量乳制品卫生质量的重要参数。
然而,传统的微生物检测方法不仅耗时,而且操作繁琐,难以满足现代乳制品生产快速、准确的检测需求。
因此,研究乳制品中细菌总数、酵母菌和霉菌的快速检测方法具有重要意义。
本文旨在探讨乳制品中细菌总数、酵母菌和霉菌的快速检测方法,包括传统方法与现代生物技术的比较,以及新型快速检测技术的开发与应用。
通过综述相关文献和实验研究,本文旨在分析各种检测方法的优缺点,为乳制品行业提供一种快速、准确、可靠的微生物检测手段,以提高乳制品的品质与安全性,保障消费者的健康。
二、材料与方法本研究所用的乳制品样品包括牛奶、酸奶、奶酪等多种类型,均采自市场及乳制品生产企业,确保样品的多样性和实际应用价值。
研究所用培养基包括营养肉汤、孟加拉红培养基等,用于细菌、酵母菌和霉菌的培养。
试剂包括生理盐水、无菌水、无菌棉签等,均为实验室常用试剂。
研究所用仪器包括恒温培养箱、显微镜、菌落计数器、无菌操作台等,设备齐全,满足实验需求。
将采集的乳制品样品进行预处理,包括均质化、稀释等步骤,以便后续的检测操作。
采用平板菌落计数法,将处理后的样品接种于营养肉汤培养基,恒温培养一定时间后,观察并计数菌落数,以CFU/mL表示。
采用孟加拉红培养基,将处理后的样品接种于培养基上,恒温培养一定时间后,观察并计数酵母菌和霉菌的菌落数,以CFU/mL表示。
对实验数据进行整理、统计和分析,采用适当的统计方法进行差异比较和相关性分析,得出实验结果。
本研究采用平板菌落计数法检测乳制品中的细菌总数、酵母菌和霉菌,方法简单、快速、准确,可为乳制品的质量控制提供有效的技术支持。
通过对不同乳制品样品的检测,可以了解各类乳制品中微生物污染的状况,为乳制品的安全生产和消费提供参考依据。
抗生素微生物检定标准操作规程

抗生素微生物检定标准操作规程1 简述抗生素微生物检定法系在适宜条件下,通过检测抗生素对微生物的抑制作用,计算抗生素活性(效价)的方法。
依试验设计原理不一致,可分为稀释法、比浊法与琼脂扩散法。
后二者被列为抗生素微生物检定的国际通用方法。
中国药典也使用这两种方法。
抗生素微生物检定管碟测定法系琼脂扩散法,是利用抗生素在摊布特定试验菌的固体培养基内成球面形扩散,形成含一定浓度抗生素球形区,抑制了试验菌的繁殖而呈现出透明的抑菌圈。
此法系根据抗生素在一定浓度范围内,对数剂量与抑菌圈直径(面积)呈直线关系而设计,通过检测抗生素对微生物的抑制作用,比较标准品与供试品产生抑菌圈的大小,计算出供试品的效价。
抗生素微生物比浊法是将一定量的抗生素加至接种有试验菌的液体培养基内,混均后,经培养,测量培养基浊度。
此法系根据抗生素在一定的浓度范围内,其浓度或者浓度的数学转换值与试验菌生长产生的浊度(浊度与细菌群体质量及细菌细胞容积的增加之间存在直接关系)之间存在线性关系而设计,通过测定培养后细菌浊度值的大小,比较标准品与供试品对试验菌生长抑制的程度,计算出供试品的效价。
抗生素效价以“单位(u)”或者“微克(µg)”表示。
抗生素管碟测定法2 仪器与用具2.1 操作室光线明亮,操作室应分为两部分,彼此分开,其中一部分为通常操作室,一部分为半无菌操作室。
半无菌操作室应设有紫外线灭菌灯,并附设空气净化(空气净化级别为100级~10,000级)及空调设备,操纵室温在20~25℃之间,达到无菌或者半无菌状态。
操作台应稳固,台面用玻璃板,并用水平仪调节至水平。
注意操作,避免室内抗生素污染。
2.2 双碟内径约90mm,高16~17mm硬质玻璃或者塑料培养平皿,碟底厚薄均匀,水平透明,无色斑气泡。
碟底平度检查,可将双碟放在水平台上,下垫一张白纸,碟内加水2~3ml,再滴加蓝墨水,观察蓝色深浅是否一致。
用过的双碟经高压灭菌倒出培养基后,置清洗液中浸泡过夜,冲洗,沥干,至150℃~160℃干热灭菌2小时或者高压121℃蒸气灭菌30分钟,备用。
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[文章编号] 1671-2846(2003)01-0066-05* 实验研究 *传统的细菌种类鉴别试验是用细菌培养的方法进行。
通过细菌接种,多种细菌在培养基内长成肉眼可见的菌落,挑取不同菌落,再进行细菌分离培养,直至形成纯培养,对纯培养的细菌培养基进行细菌菌落形态特征观察和生理生化指标等项目的实验,最终才可能形成对细菌种类的鉴别[1]。
传统的细菌种类鉴别试验所需时间较长,一般在24~48小时,实验过程较为烦杂,操作技术要求较高,而且对强致病菌操作还具有一定的危险性。
另外,实验室强致病菌种的安全保存也较困难,存在有安全隐患等问题。
如何快速的、安全的对细菌进行研究和细菌种类鉴别是医学上和微生物学领域迫切需要解决的问题[3]。
笔者进行了电阻抗法用于细菌种类鉴别试验的尝试。
利用微生物在生长繁殖过程可使培养基的电阻抗值减低的现象,通过测量和记录将电阻抗值的变化情况描绘成“阻抗曲线图谱”(见图1)。
用这些 “阻抗曲线图谱”的形态差异进行细菌种类鉴别,试验研究取得了预期的结果,现介绍如下;1 试验原理用电阻抗法进行细菌种类鉴别试验,其试验原理是微生物在生长繁殖过程中由于微生物的代谢活动而使培养基的电阻抗值降低, 即电导率升高(以Ωcm 值表示)。
即微生物在生长繁殖过程中将培养基中导电性较差的糖脂、蛋白质等营养物质,通过微生物的代谢活动,转变成导电性能较好的各种尾产物,如胺类,丙酮酸、各种有机无机盐类、尿酸和有机物等成分[2],这些尾产物使得培养基的导电性能大大的提高,这种导电性的改变可以通过测量培养基随时间变化的电阻抗变化值反映出来,表现形态为“阻抗曲线图谱” [4](见图1)。
2 材料与装置2.1 细菌菌种:大肠杆菌,沙门氏菌,金黄葡萄球菌(西南民族学院生命科学与技术学院微生物实验室提供)。
2.2 专用培养基:SM1H 、SM2H 、SM3H 。
培养基详细配方略。
2.3 微生物电阻抗传感器:由微生物电极和特制培养皿两部分组成(自制),详细结构说明略[5]。
2.4 专用恒温培养箱:是由普通恒温培养箱经改造制成[6]。
在内加装微生物电极外接口和连收稿日期:2003年1月26日作者简介: 王洪志,(1959-),副教授。
用电阻抗法进行细菌种类鉴别试验王洪志 王爱华(西南民族学院生命科学与技术学院 成都 610041)[摘 要] 将电阻抗法应用于细菌种类鉴别试验。
笔者用自制的微生物传感器和电阻抗测量装置等,在一定条件下,利用微生物在生长繁殖过程可使培养基的电阻抗值减低的现象,通过测量接种细菌的培养基电阻抗值,并将细菌在培养期间内取得的所有电阻抗值数据描记成“阻抗曲线图谱”。
试验证实,不同种类细菌所形成的阻抗曲线图谱是不相同的,是该种细菌所特有的。
我们可以根据这些 “阻抗曲线图谱”的形态差异进行细菌种类鉴别,试验研究取得了预期的结果。
[关键词] 电阻抗、曲线、细菌、试验线,以及连接各分支微生物电极的内插孔。
2.5 电阻抗测量装置组成:由电阻抗检测仪、交流信号发生器、时间程序分配控制器、微生物传感器、计算机系统、辅助分析电路等组成。
电阻抗测量装置电路原理方框图见图2。
3 试验方法3.1 细菌菌种处理:将纯分离大肠杆菌、沙门氏菌,金黄葡萄球菌菌种进行扩种培养[1](细菌分离和提纯过程略)。
3.2 专用培养基配制:筛选和配制专门适用于电阻抗测量要求的液体培养基[1]。
现通过反复实验,筛选出了三种专用培养基SM1H 、SM2H 和SM3H ,专用培养基配方略。
3.3 电阻抗测量细菌接种:按细菌接种的要求和操作规程,首先将专用培养基SM1H 3毫升注入各微生物电阻抗传感器的特制培养皿内,将扩种培养的各种细菌接种到这些专用培养基中,本试验每种细菌培养都做了重复试验组,同时也作对照组试验,然后将微生物电极放入特制培养皿中,随后将微生物电阻抗传感器放入专用恒温培养箱中,在37°C 环境连续培养20小时。
培养期间定时采集数据,接种具体情况详见表1 。
图1 阻抗曲线图谱图2 实验装置电气方框图 培养基大肠杆菌组 沙门氏菌组 金黄葡萄球菌组试验类型 组号 SM1H SM1HDC1 SM1HSM1 SMIHPT1 试验组 1SM1H SM1HDC2 SM1HSM2 SMIHPT2 重复试验组 2 对照组SM1HB SM1HB SM1HB 对照组 3表1 微生物电阻抗传感器专用培养皿接种情况4 数据记录将接种后的微生物电阻抗传感器放入专用恒温培养箱内37°C环境连续培养20小时,其间时间程序分配控制器每间隔10分钟,对每一个微生物电阻抗传感器顺序检测读取数据一次,直至培养结束。
因时间程序分配控制器每间隔10分钟对每一个微生物电阻抗传感器顺序读取数据一次,所以在20小时内所获取的数据记录非常多,本文难以全部列出,故在表2中只简列了每2小时时间点读取的数据值,详见表2 。
5 阻抗曲线图谱与分析5.1 细菌阻抗曲线图谱根据数据记录描绘的细菌阻抗曲线图谱和对照组曲线图谱见图3。
从中可以看到,SM1HDC1、SM1HSM1、SM1HPT三个培养基在培养期间所形成的曲线各不相同,各自形态各异,与对照组SM1HB曲线图谱相比较,其Ωcm值都明显升高,这表明Ωcm 值升升高与细菌在培养基内的生长繁殖有直接关系,但不同种类细菌的曲线形态是不相同的,这是因为不同种类细菌在其它条件相同的培养下,单位时间内细菌的适应性和生长繁殖速度及尾产物是不尽相同的,这种不相同,引起了其培养基电阻抗的差别,反映在Ωcm值不同,所以形成了细菌各自完全不同的阻抗曲线图谱。
5.2 细菌阻抗曲线图谱的重复性 用相同的培养基,相同的细菌菌种,相同类型的微生物电阻抗传感器,作电阻抗法进行细菌鉴别的重复性试验。
图4是大肠杆菌培养基(SMIHDC1、SMIHDC2)在相同的条件下两次重复试验的阻抗曲线图谱。
两组阻抗曲线图谱从形态上观察非常相似或接近,所记录的Ωcm值的范围也很接近。
沙门氏菌和金黄葡萄球菌重复试验的阻抗曲线图谱也与大肠杆菌的情况相似,在此本文没有给出。
培养基 读取数据时间(小时)02468101214161820 大肠杆菌组SM1HDC10:2302:3054:3236:3388:32010:33512:34214:35816:34018:32520:335 SM1HDC20:2302:3034:3176:3358:33010:34012:34014:36016:34618:31920:320 沙门氏菌组SM1HSM10:2302:3524:3716:4188:42110:42212:42914:40616:40818:40320:395 SM1HSM20:2302:3504:3676:4158:41810:42012:43214:40316:41018:40320:380 金黄葡萄球菌组SMIHPT10:2302:3204:3576:3758:38010:37512:36614:37116:36018:35920:351 SMIHPT20:2302:3224:3536:3708:38010:37012:37014:37116:36518:35520:345 对照组SM1HB0:2352:2814:2716:2708:28210:28212:28214:28216:28218:28220:282表2 时间程序分配控制器记录数据5.3 对照组阻抗曲线图谱对照组(SMIHB)试验是在微生物电阻抗传感器中只加注了3毫升SM1H专用培养基,不接种任何细菌,在其它条件相同的情况下,连续培养20小时后,形成的阻抗曲线图谱。
曲线基本是一条直线,这说明培养基的Ωcm值在这段时间内变化不大,在这段时间内,对照组培养基内基本无细菌生长繁殖现象,因而也没有代谢物及其尾产物的生成和改变,测量培养基的电阻抗值变化很小。
而前0至2小时内的阻抗曲线上升可能是由于培养基的温度从室温升高到37°C时所引起的,其后阻抗曲线基本上成为一条平行于X轴的直线,这和接种细菌所形成的阻抗曲线图谱在形态上有明显的区别(见图3、图4)。
图3 沙门氏菌、葡萄球菌、大肠杆菌及对照组的阻抗曲线图谱图4 大肠杆菌重复试验阻抗曲线图谱的比较6 讨论6.1 试验证实,三种细菌在培养基中生长繁殖所产生的阻抗曲线图谱SM1HDC1、SM1HSM1、SM1HPT是不相同的(见图3),各种类细菌的阻抗曲线图谱有其特定的规律,形成的特异性阻抗曲线图谱,重复性试验的结果也证实了这一点。
这种情况有点相似于人类的指纹,是唯一性的。
可以设想,我们也可称各细菌的标准阻抗曲线图谱为各细菌的“指纹”,是各细菌的身份标志,而不同的细菌有不同的“指纹”。
如果规定一个标准,通过实验获取各种常见细菌的标准“指纹”,并将这些标准“指纹”整理成资料或存储于计算机系统中,那么在对未知细菌进行种类鉴别时,首先用电阻抗法描记该细菌的“指纹”,然后将该“指纹”与资料上或计算机系统中的各种标准细菌“指纹”进行比较和分析,最终找出与之相似的标准“指纹”,这样既可判断未知细菌是哪一种类细菌,完成了对细菌种类的鉴别。
用电阻抗法鉴别大肠杆菌、沙门氏菌和金黄葡萄球菌种类鉴别试验和阻抗曲线图谱的描记还仅仅是一种尝试,还没有完整的理论和实验方法,笔者认为,需要建立一些标准和规则,如培养基配方的标准、微生物传感器的标准和实验操作规程等。
对获取各种常见细菌的标准“指纹”的实验,工作量是相当大的,需要各方面协作来完成。
6.2 与传统的用细菌培养的方法来鉴别细菌种类相比较,利用电阻抗法进行细菌种类鉴别试验有许多优点;一是缩短了试验的时间,传统方法细菌需要24~36小时培养,细菌才能长成肉眼可见的菌落,试验人员才可能根据菌落的形态和大小作出判断[1],而电阻抗法可在20小时以内完成,如将微生物传感器培养皿体积缩小、专用培养基的用量进一步减少(1毫升以下),则检测时间有缩短至5小时以内的潜力。
二是电阻抗法可做到对实验结果的判断客观准确,因用细菌“指纹”代替对菌落形态的判断,这过程可用计算机辅助分析程序自动进行,从而减少和避免了因人为因素而产生的失误,提高了细菌种类鉴别的正确率。
三是电阻抗法对环境和操作人员安全。
因电阻抗法作细菌种类鉴别依赖细菌标准“指纹”进行,所以在一些医院和微生物研究部门在对各种未知细菌进行鉴别实验时,操作人员用不着实际拥有这些细菌,只需拥有各种细菌的标准“指纹”即可,这一点在对未知强致病菌进行鉴别时显得尤为重要,可减少或避免因人为原因引起的致病菌扩散等事故。
6.3 笔者认为,电阻抗法进行细菌种类鉴别试验的原理和实验装置可以发展成一套自动化计算机细菌菌种鉴别和实验分析系统。
该系统的硬件组成应有专用恒温培养箱、计算机系统、信号发生和阻抗测量仪等专用电路、实验废物自动处理装置等。