ELISA实验Levey-Jennings室内质量控制分析处理方法

重新取用新的试剂 ， 室温平衡足够时间后 拆开使用
试剂因素
试剂（酶结合物、显 全 板 色剂等）在室温平衡 显 色 时间不够，造成酶标 浅 板实际反应不足 酶失效（酶污染长菌、 全板 保存不当等各种原因 显 色 导致效价降低） 浅 酶标板失效（包装拆 全 板 封时间长、没有密封 显 色 保存等） 浅 试剂盒存在质量问题 不 显 低 使用在室温充分平衡的试剂 重新检测
失控原因分析及处理方法记录
对失控原因的分析是发现误差来源的途径，

对失控的处理方法则是纠正误差的关键。
实验室详细地记录对质量控制失控的分析处 理过程是十分重要的，是判断实验室对实验 过程进行质量控制真实有效的重要法律依据。
无需重新检测病人标本的失控
经分析确信影响因素不会影响到病人标本的 检验结果，则无需立即重新检测病人标本。 如下表：
取用质控品批号错 质 控 孔 显 高 或 更换同批号 误 色加深或 低 质控品 变浅
质控品因素
质 控 品 过 期 ， 效 质控孔显色 低 价降低 变浅 更换同批号 质控品
质 控 品 过 期 ， 污 质控孔显色 高 或 更换同批号 染 加深或变浅 低 质控品
质 控 品 使 用 不 当 质控孔显色 高 或 更换同批号 （如未摇匀） 加深或变浅 低 质控品
操作因素
设置 CO 公式错 S/CO值错误 高 或 未超过比色时间， 误 低 修正公式，重新 比色 选择比色波长 OD值低 不正确 一 般 未超过比色时间， 为低 纠正比色波长， 重新比色
上表因质控品因素所致的失控需纠正失控原 因后采用相同的方法重新检测质控品，若结 果在控，确信无其他质量隐患后可以发出检 验报告。
低 更换新的符合质量要求的酶 重新实验
低 注意拆封后的保存方法和使 用期限，使用合格的酶标板， 重新实验 低 更换质量可靠的试剂，加强 色 或 对制剂盒质量的监测，必要 部 分 时重新评价实验室 RCV ，或 孔 显 重新计算RCV 色
设置CO公式错误，或选择比色波长不正确，
未超过比色时间，可纠正错误后重新比色，
不必对质控品进行复检；如果超过了比色时
间，则应重新进行实验（包括质控品和病人
标本）。
需重新检测病人标本的失控
经分析发现的影响因素会影响到病人标本的 检验结果，则同时需重新检测质控品和病人 标本。
表2 需重新检测病人标本的失控分析（非竞争 法）及处理方法
质控品因素
忘记加入质控品 质控孔不 低 显色 重新检测质控 品
加入质控品量错误（多 质 控 孔 显 高 或 重 新 检 测 质 控 色加深或 低 品 或少） 变浅
加样器不准，加入质控 品量不准确（使用全自 动系统加样，手工加入 质控品时） 加样头未固定好，加入 质控品量不准确（使用 全自动系统加样，手工 加入质控品时） 质 控 孔 显 高 或 校准或使用新 色加深或 低 的加样器具， 变浅 重新检测质控 品 质控孔显 低 加样头应充分 色变浅 固定在加样器 上
室内质量控制分析处理方法 的基本原则
实事求是的原则
室内质量控制分析的处理方法必须实事求是， 充分认识实验过程中可能影响到检验结果可 靠性的各种问题，逐一进行分析、纠正。
不与实验原理和试剂盒 使用说明相抵触的原则
对质量控制结果的分析和处理必须符合试剂 盒的设计原理，并不得与试剂盒使用说明书 相抵触，没有根据的分析和处理过程是不被 认可的。
ELISA实验Levey-Jennings室内 质量控制分析处理方法
袁 红 黄文方 杨明清 (四川省临床检验中心，四川成都)
Levey-Jennings质控图目前广泛应用于抗原抗 体的定性测定，是ELISA实验中最重要的质量 控制方法。ELISA实验中绘制Levey-Jennings 质控图的最终目的是发现并纠正失控。如何分 析、处理和记录质控结果则是质控科学可靠， 记录规范全面，质控过程得到认可的核心内容， 同时也是目前临床实验室质量管理的薄弱环节。
试剂因素
试剂过期 全板显色 低 浅 更换有效试剂 ，重新 实验
更换试剂批号
试剂因素
全板显色 高或 加深或变 低 浅 试剂保存不当（如 全 板 显 色 低 置入冷冻层、室温 浅 保存等）
试剂酶标板拆开时 全 板 显 色 低 在室温平衡时间不 浅 够，造成酶标板包 被物潮解
对新批号试剂进行适 当评价，重新计算RCV 选用保存妥当的试剂 或购买合格的试剂 ， 重新实验
质控品因素
加样器吸入过快、排出 质 控 孔 显 低 过快或未排至第二停点 色变浅 使加入质控品量不准确 （使用全自动系统加样， 手工加入质控品时） 加入质控品时间不准确 质 控 孔 显 高或低 色加深或 变浅 质控品开启时间过长， 质 控 孔 显 低 待检物效价降低 色变浅 质控品反复冻融，待检 质 控 孔 显 低 物效价降低 色变浅 采用适当的吸、 排液操作方法
不与临床检验操作规程和质量管理 体系体系相抵触的原则
整个分析处理过程务必科学、全面，不与临
床检验操作规程和质量管理体系体系相抵触，
要足以为相关举证工作提供依据。
复检确认的原则
几种可能的失控，如假失控，无需立即重新检测病 人标本的失控，或者需要立即重新检测病人标本的 失控，原则上都必须对质控品进行复检以验证失控 原因分析和处理是否正确，以及失控原因是否得以 纠正。只有极少数情况，如设置CO公式错误，或选 择比色波长不正确，又未超过比色时间，可纠正错 误后重新比色，不必复检确认。
重新检测质控 品，严格控制 反应时间 更换同批号质 控品 更换同批号质 控品
质控品因素
质控品污染 质 控 孔 显 高 或 更换同批号 色加深或 低 质控品 变浅 质控品密封不好， 质 控 孔 显 高 更换同批号 水份挥发 色加深 质控品 质 控 品 保 存 不 当 一 般 为 质 一 般 更换同批号 （如上次使用后未 控 孔 显 色 为低 质控品 放置冰箱） 变浅
正常结果记录
对没有出现失控的室内质控结果仍需进行适 当的分析记录，以证明室内质控程序足以保 证检验结果的可靠性。
此类记录可以是概括性的，例如：“实验过 程无异常情况发生，空白、阴性、阳性对照 显色及CO值计算结果满足试剂盒要求，实验 酶标板显色正常，质控结果满足设定规则要 求，可以发出检验报告”。同时，实验室应 将实验原始结果作为室内质控的重要记录内 容，加以妥善保存。