08人工种子和种质资源保存
种质资源保存
种质保存的方式:
原地保存 异地保 存
原地保存主要通过建立自然保护区、 原地保存主要通过建立自然保护区、天然公园来实现种 质保存的目的； 质保存的目的； 异地保存则通过建立植物园、种质资源圃、 异地保存则通过建立植物园、种质资源圃、种子库以及 离体保存等方法来实现。 等方法来实现。
离体保存的意义:
超 低 温 库
马铃薯限制生长离体试管苗保存技术
（一）试管苗培 养 （二）延长试管 苗保存期 1.培养基中 培养基中 添加脱落酸 和甘露醇 2.用塑料薄 用塑料薄 膜封闭试管 口 3.加入适当 加入适当 多量的培养 基
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种质资源离体保存
离体保存方法： 离体保存方法： 低温保存 超低温保存 生长抑制剂保存
项目介绍
种质是亲代通过生殖细胞或体细胞传递给子代的遗传物质。 种质是亲代通过生殖细胞或体细胞传递给子代的遗传物质。 是亲代通过生殖细胞或体细胞传递给子代的遗传物质 植物种质资源即为携带各种不同遗传物质的植物总称， 植物种质资源即为携带各种不同遗传物质的植物总称，又称 即为携带各种不同遗传物质的植物总称 遗传资源或品种资源，包括栽培， 遗传资源或品种资源，包括栽培，野生及人工创造的各种 植物的品种或品系。 植物的品种或品系。 种质资源保存是指在天然或人工创造的适宜环境条件下， 种质资源保存是指在天然或人工创造的适宜环境条件下，贮 是指在天然或人工创造的适宜环境条件下 存植物种质，使其保持生命力与遗传性的技术。 存植物种质，使其保持生命力与遗传性的技术。
再培养法
（5）再培养 ）
指将已解冻的材料重新置于培养基上使其恢复生长 的过程。 的过程。再培养是检验冷冻保存效果或确定保存方 法是否合适的最根本方法。 法是否合适的最根本方法。
组织材料
种质资源的保存方法
种质资源的保存方法
种质资源的保存方法有以下几种：
1. 冷冻保存：将种子、胚胎、胚乳、芽等种质资源放入低温环境中进行保存，常见的冷冻保存方法包括液氮冷冻、超低温冷冻等。
2. 冷谷保存：将种质资源放入干燥的低温环境中保存，例如在干燥剂中保存。
3. 真空保存：将种质资源放入真空中进行保存，可以减少氧气的作用，减缓种质资源的老化和分解。
4. 无菌保存：将种质资源置于无菌条件下进行保存，防止微生物的污染和传播。
5. 酶处理保存：通过添加酶来保护种质资源，例如添加抗氧化酶来延缓氧化反应，添加脱水酶来抑制水分的作用等。
6. 组织培养保存：将种质资源进行组织培养，使其在人工培养基上生长和繁殖，以便长期保存。
7. 动物胚胎冻存：将种质资源保存在胚胎的形态中，通过冷冻来延长胚胎的存活时间，从而保存种质资源。
以上是常见的种质资源保存方法，不同的种质资源和保存目的可以选择适合的方法进行保存。
农作物种质资源保存及开发利用
农作物种质资源保存及开发利用农作物种质资源是农业发展中至关重要的一部分，它包括了各种农作物的遗传信息和多样性。
保护、保存和开发这些作物种质资源是保障农业可持续发展的关键。
本文将讨论农作物种质资源的重要性以及如何有效地保存和开发利用它们。
首先，农作物种质资源的保存对于确保农作物遗传多样性和适应性至关重要。
农作物的遗传多样性是它们在适应不同环境和抵抗病害方面的关键特征。
种质资源保存可以通过保存种子、胚胎和组织培养等技术手段来实现，以确保在不同的环境变化和病虫害侵袭下，仍然能够保持作物的遗传多样性。
此外，保存种质资源还可以避免部分作物品种的灭绝和遗失，确保农作物的可持续发展。
其次，农作物种质资源的开发利用对于增加农作物的产量和品质具有重要意义。
科学家和农业研究机构可以利用种质资源中的有益基因进行育种，培育出具有抗病虫害、适应力强和高产量的新品种。
这对于提高全球农作物产量以满足不断增长的人口需求至关重要。
此外，通过开发利用农作物种质资源，还可以增加农作物的品质，提高其在市场上的竞争力。
为了有效地保存和开发利用农作物种质资源，需要采取一系列的政策和措施。
首先，国家和地方政府应制定相关的法律和法规来保护农作物种质资源。
这些法律和法规可以确保农民和农业研究者的权益，防止非法获取和使用种质资源。
其次，建立完善的种质资源保存和管理机构至关重要。
这些机构可以负责收集、保存和管理种质资源，并提供给研究者和农民使用。
此外，投入足够的资金和人力资源来支持种质资源保存和开发利用也是非常重要的。
为了更好地开发利用农作物种质资源，还需要进行相关的研究和创新。
农业研究机构可以利用现代生物技术和基因工程技术来挖掘和利用种质资源中的有益基因。
此外，还可以利用高通量筛选技术来加速新品种的培育和筛选过程。
同时，加强国际合作和交流也是非常重要的。
不同国家和地区拥有不同的农作物种质资源，通过国际合作可以共享资源，并进行更有效的开发利用。
在开发利用农作物种质资源的过程中，还需要注重合理利用资源的可持续性。
植物种质资源的保存
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三、保存方式的利弊
1、 原生境保存和异地保存
弊：需耗费巨大的人力、物力和土地，在实际中很难实施， 而且易受自然灾害、虫害和病害的侵袭，造成植物资源 的丧失。
2、 种质库（种子）保存
弊：1）生活力随储存期的延长逐渐丧失；2）无性繁殖的
植物（如苹果、柑橘等）难于采用种子保存；3）采用
无性繁殖来保持其优良性状的植物（许多果树），用种
第十章 植物种质资源的离体保
存
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概述
一、定义
➢ 植物种质资源（又称品种资源、遗传资源或基因资源）
是指携带各种不同遗传物质的植物总称，包括栽培，野 生及人工创造的各种植物的品种或品系。是生物多样性 的重要组成部分，是选育优质、高产、抗病（虫）、抗 逆新品种的物质基础，是生物技术研究取之不尽的基因 来源。
子繁殖后代会发生变异；4）顽拗型种子植物（芒果、
椰子、油棕等）因其种子不易干燥脱水和低温储藏，不
宜用种子保存或保存难度很大；5）有些植株不产生种
子，如脐橙、香蕉；6）易遭自然灾害袭击而使种质资
源丢失。
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三、保存方Байду номын сангаас的利弊
3、离体保存
是将植物外植体在无菌环境下进行组织培养， 并贮存在各类生长抑制条件下，使其缓慢生长或 停止生长，以达到长期保存的目的，而在需要利 用时可迅速恢复正常生长。
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第三节
植物物种资源的超低温保存
一、物种资源超低保存的发展概况 二、物种资源超低温保存的原理 三、超低温保存的基本程序 四、超低温保存的实例
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一、物种资源超低保存的发展概况
如何利用培育技术进行植物种子长效保存与种质资源保护工程
如何利用培育技术进行植物种子长效保存与种质资源保护工程利用培育技术进行植物种子长效保存与种质资源保护工程植物种子是植物繁衍后代的关键，也是植物种质资源的核心。
然而，环境污染、人类活动以及气候变化等因素，都对植物种子的生存和保存带来了威胁。
因此，利用培育技术进行植物种子长效保存与种质资源保护工程显得尤为重要。
种子的长效保存是种质资源保护的关键环节之一。
在过去，植物种子保存主要依靠干燥和低温环境条件，如干燥剂和冷冻设备等。
然而，这些保存方法容易造成种子活力的流失，同时也存在储存条件可能受到自然灾害等因素的威胁。
因此，为了增加种子保存的成功率，并确保种子的生存力，研究人员开始探索利用培育技术，如细胞培养和冷冻技术等进行种子保存。
细胞培养技术被广泛应用于植物种子的保存。
利用细胞培养技术，可以将种子细胞分离并进行无菌培养，以提高种子的保存率。
首先，通过对种子进行消毒处理，去除表面杂菌，然后将种子分离成单个的种胚，将其放置在富含培养基和激素的培养皿中。
在适宜的温度和湿度条件下，种子细胞会分化并生成新的植株，从而达到种子长效保存的目的。
细胞培养技术在植物种子保存中的应用，不仅可以增加保存成功率，还可以保持种子的生物特性和遗传稳定性，为植物种质资源的保护提供了有效的手段。
另一种常见的植物种子保存方法是冷冻技术。
冷冻技术能够延长种子的保存时间，同时降低相对湿度和温度等环境因素对种子的影响。
冷冻保存的基本原理是冷冻的过程中水分结晶，使种子中的细胞脱水，从而降低细胞内的水分含量，减少水分引起的损害。
此外，冷冻技术还可以在长时间保存种子的同时，保持种子的遗传多样性和生理活性。
该方法在植物种子保存和种质资源保护中具有重要的应用价值。
除了细胞培养和冷冻技术，还有一些其他的培育技术可以用于植物种子的长效保存。
例如联合利用细胞培养和冷冻技术，可以将种子进行分离、培养和冷冻，以增加保存率和保存时间。
此外，基因编辑和转基因技术也可以应用于植物种子保存，通过对植物种子的基因进行编辑和改造，提高种子的抗病性和适应性，从而增加保存率和保存时间。
第10章 人工种子和种质资源
海藻酸钠作包埋介质的操作程序是： 在配制好的海藻酸钠溶液中，按一定比例加入繁殖 体并混匀 然后将其逐滴滴入2.0%～2.5%的CaCl2溶 液中，经20～30 min的离子交换作用，即能形成含有 繁殖体并具有一定刚性的小球珠（bead） 再用水漂 洗20 min以终止反应。此时的人工种子是一种胶囊状 结构，将其晾干后可贮存或播种。
（3）对生育周期长的多年生植物（果树、观赏树木、林木）；育性不良 的难于有性繁殖的植物（甘薯、球根和宿根花卉、芋类等）可用人工 种子技术进行繁殖；遗传性不稳定的杂交F1代无需等待其稳定，可用 人工种子技术繁殖，性状优良者直接应用于生产。
（4）人工种子体积小，贮藏运输方便。 （5）人工种子如天然种子一样，具有坚硬的种皮，适于机械化播种
某些材料。
离体保存的植物材料种类多样，有：试管苗、愈伤组 织、悬浮细胞、幼芽生长点、花粉、花药、体细胞、 原生质体、幼胚、组织块等。
根据离体保存的环境条件或使用的化学试剂，离体保 存方法为：低温保存 超低温保存或冰冻A， 后用限制性内切酶将DNA切成多片断并与载体连接，再 导入大肠杆菌或酵母中繁殖，使得生物体内所有基因 都得到保存。 当需要某个基因时，通过一定方法进行提取。这种保
存方法既可以长期保存该物种的遗传资源，还可以通
过反复培养繁殖、筛选、获得各种基因。
二、种质资源的离体保存
优越性：所占空间小、保存数量大、成本低、不受病 虫害侵袭。 理想的保存条件是使培养物处于无生长或缓慢生长状 态，需要时能迅速恢复正常生长。
离体保存方法： 低温保存 超低温保存 生长抑制剂保存
1、人工种子的概念 指将植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包埋在含
种质资源库的保存方法
种质资源库的保存方法植物种质资源保存主要有原地保存、异地保存和设施保存3种方式。
设施保存的场所又称种质资源库，英文意译为”种质银行“，是当前最有效、最安全的保存方式，它包括种子低温保存、超低温保存及种质离体保存等方法。
种质库保存以种子为主体的作物种质资源及其近缘野生植物，这些材料可随时提供给科研、教学及育种单位研究利用及其国际交换。
种质库在接纳到种子后，需对种子进行清选、生活力检测、干燥脱水等入库保存前处理，然后密封包装存入-18℃冷库。
入库保存种子的初始发芽率一般要求高于85%，种子含水量降至5%～6%。
根据科学家估算，在上述贮藏条件下，一般作物种子寿命可保存50年以上。
型号：TPZY-C林木种质资源保存主要有原地保存、异地保存和设施保存3种方式。
设施保存的场所又称林木种质资源库或林木种子标准样品库，英文意译为”种质银行“，是当前最有效、最安全的保存方式，它包括种子低温保存、超低温保存及种质离体保存等方法。
种质库保存以种子为主体的作物种质资源及其近缘野生植物，这些材料可随时提供给科研、教学及育种单位研究利用及其国际交换。
种质库在接纳到种子后，需对种子进行清选、生活力检测、干燥脱水等入库保存前处理，然后密封包装存入-18℃冷库。
托普仪器已为广大科研院校、教育及育种单位研发建设的林木种质资源库，助力种质资源保存工作。
托普林木种质资源库主控系统功能：1.全新动态恒温恒湿控制系统，响应快，精度高。
2.任意设定的温度、湿度控制参数，自动构成局部的微气候环境。
触摸屏尺寸不小于5.7英寸,所有的参数显示和设定均可在触摸屏上进行，在全彩色触摸屏上进行参数设置等操作的功能，可根据种子种类的不同选择最佳制冷或除湿的运行模式，可在触摸屏上直接设置温度，湿度，时间，模式等参数, 具有实时温湿度，历史温湿度数据曲线，设备运行状态显示，故障图形代码显示等专用功能。
3.整个控制系统具有计算机通讯接口，如有需要可以安装上位机软件对整个控制过程进行全程监控，对库房的的温湿度数据进行电脑数据显示、曲线显示、数据记录以及打印等。
第八章植物种质资源保存
（3）预冷冻法
分步冰冻法
• 此法将快速和慢速2种冰冻方法结合起来。首先用较慢的速度 （0.5～4℃/min）使植物材料从0℃降至一定的预冷温度（一 般为-40℃）并停留一段时间（一般10min左右），使细胞进行 适当的保护性脱水，然后再浸入液氮冷冻。
• 种质资源保存(germplasm conservation)是指在天
然或人工创造的适宜环境条件下，贮存植物种质， 使其保持生命力与遗传性的技术。
种质资源保存的必要性：
➢种质资源或称基因库是选育新品种的最基本的原 始材料。
➢ 植物种质资源的多样性由于自然灾害和人为活动 受到严重影响，作物品种资源日益匮乏
《重要野生植物种质资源收集保存的标 准化及共享试点》（2004DKA30430）
红河学院参与
100份植物标本 种子
DNA材料
清华大学核能与新能源技 术研究院环境工程专业博 士研究生
香港大学博士研究生
大学生创业楷模
第二节 种质资源离体保存
• 自1975年Henshaw和Morel 首次提出离体保存 (conservation in vitro)植物种质的策略以来，该项 技术受到植物界的极度重视。
拥有妥善保存多种多样的种质资源成为人类十分 关注的问题
第一节 种质资源保存类型
种质资源的保存方式有两种，即原生境保存和 非原生境保存。 ➢原生境保存（原地保存）：将植物的遗传材料保 存在它们的自然环境中。
云南国家级（17个，全国329个，截止10
年2月）
• 哀牢山国家级自然保护区 • 高黎贡山国家级自然保护区 • 大山包黑颈鹤国家级自然保护区 • 大围山国家级自然保护区 • 金平分水岭国家级自然保护区 • 黄连山国家级自然保护区 • 文山国家级自然保护区 • 无量山国家级自然保护区 • 西双版纳国家级自然保护区 • 西双版纳纳版河流域国家级自然保护区 • 苍山洱海国家级自然保护区 • 白马雪山国家级自然保护区 • 南滚河国家级自然保护区 • 长江上游珍稀、特有鱼类国家级自然保护区* • 药山国家级自然保护区 • 会泽黑颈鹤国家级自然保护区 • 永德大雪山国家级自然保护区
种质资源保存与利用
种质资源保存与利用：种质资源保存与利用是农业发展的重要基础，也是现代农业科技创新的重要领域之一。
种质资源是指具有实际或潜在利用价值的遗传资源，包括经过人工创造或天然存在的各种动植物、微生物资源等。
种质资源保存的目的是保持遗传资源的多样性和可持续性，防止资源流失和灭绝。
通过建立种质资源库和种质资源保护区，可以长期保存种质资源，并保证其可持续利用。
同时，加强种质资源的鉴定评价和保护利用，可以挖掘具有重要应用价值的遗传资源，为现代农业发展提供物质基础。
在种质资源的利用方面，加强农业种质资源国际合作交流、建立农业种质资源便利通关机制、完善农业种质资源分类分级保护名录、开展农业种质资源中长期安全保存等工作非常重要。
这些措施可以有效提高农业种质资源的保护水平和利用效率，为农业生产提供更加可靠的保障。
同时，为了提升种业竞争力，推进开发利用也是必要的。
组织实施优异种质资源创制与应用行动、推进良种重大科研联合攻关、深入推进种业科研人才与科研成果权益改革、建立国家农业种质资源共享利用交易平台等措施可以有效促进农业种质资源的开发利用，提升我国农业的国际竞争力。
种质资源保存方法
种质资源保存方法种质资源保存是指通过某种方式将植物、动物或微生物的遗传信息保存下来，以供未来利用。
种质资源的保存对于农业、畜牧业、渔业、草业和微生物资源的研究和利用至关重要。
在世界各地，种质资源保存已经成为保护生物多样性和可持续发展的重要措施之一。
种质资源保存方法有多种，包括冷冻冷藏、冷冻干燥、显微冻干、液态氮冻存、遗传变异保存和活体保存等。
下面将对几种常见的种质资源保存方法进行详细介绍。
1. 冷冻冷藏：冷冻冷藏是一种经济、简单且广泛应用的种质资源保存方法。
它利用超低温条件将种子、胚胎、花粉或细胞等种质资源冷藏保存，减缓其新陈代谢过程，从而延长其保存寿命。
冷冻冷藏通常在零下18至零下196的冷库中进行。
由于在冷冻过程中可能出现冰结晶的问题，因此在保存前需要对种质资源进行预处理，如加入保护剂、脱水或将其包裹在冷冻保护胶中。
2. 冷冻干燥：冷冻干燥是一种将水分从种质资源中去除的方法。
它通过将种子或胚胎置于低温下，然后将其暴露在低压环境中，使水分以固体的形式从种质资源中转变为气态，达到干燥的效果。
冷冻干燥可以有效防止冰结晶损伤，同时减缓种质资源的新陈代谢速度。
冷冻干燥需要高度精确的设备和操作技术，因此在实践中相对较少使用。
3. 显微冻干：显微冻干是一种将种质资源在显微镜下进行冻干的方法。
它使用显微镜将种质资源放置在微小观察盒中，然后将其冷冻并暴露在低压环境下进行干燥。
显微冻干可以保持种质资源的原始形状和结构，避免了冻干过程中可能出现的形变和损伤。
这种方法主要适用于细胞和微生物等微小种质资源的保存。
4. 液态氮冻存：液态氮冻存是一种将种质资源置于极低温度下保存的方法。
液态氮的温度为零下196，是一种非常冷的物质。
液态氮冻存可以有效地保护种质资源，防止其发生任何生物、化学或物理变化。
液态氮冻存被广泛用于保存胚胎、细胞、酵母菌、昆虫等种质资源。
5. 遗传变异保存：遗传变异保存是指通过人为调控和利用种质资源的遗传变异来保存这些资源。
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第二节 试管保存
细胞工程——邢朝斌
第八章 植物种质保存
四、常温抑制生长保存与中低温调控生 长保存相结合
培养基中添加生长抑制剂或提 高渗透压，培养温度降低，使继代 时间延长。
第三节 超低温保存
细胞工程——邢朝斌
第八章 植物种质保存
一、超低温保存的基本原理和主要环节
在液氮中（-196℃），几乎所有的 细胞代谢活动停止，仅保存细胞的活力 和形态发生的潜力。当解冻后，能够恢 复再生能力。 注：超低温通常指低于- 80 ℃的低温，保存 介质或容器有干冰(- 79℃)、超低温冰箱 (-80— -150 ℃)、液氮(-196℃) 等。
第三节 超低温保存
细胞工程——邢朝斌
第八章 植物种质保存
二、超低温保存技术 4、材料冷冻的方法 材料冷冻保存的原理：冷冻时，细胞外 的溶液水分子，先形成冰晶中心，而冰 晶形成的速度与溶液成分、降温速度有 关。一般在-20℃—-60℃范围内，晶体中 心增长最快，形成大块冰晶体之后，慢 慢减速，到-140℃时完全停止增长。
第二节 人工种子制备的技术要点
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
一 、 繁殖体培养技术 3.芽
保持原有植物的品 种特性 不能进行脱水处理， 但必需筛选生长健 壮、组织充实的芽 进行包埋。
第二节 人工种子制备的技术要点
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
二 、繁殖体的包埋 1、包埋介质的要求：
第二节 人工种子制备的技术要点
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
二 、繁殖体的包埋 3、包埋的方法
液胶包埋法 干燥包埋法 水凝胶法
第二节 人工种子制备的技术要点
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
二 、繁殖体的包埋 4、以海藻酸钠作包埋剂 的操作程序： 繁殖体与海藻酸钠 混匀。 滴入2.0%-2.5%的 CaCl2溶液中。 用无菌水漂洗20min. 以终止反应。
第一节 种质资源保存类型
细胞工程——邢朝斌
第八章 植物种质保存
三、种质保存的方法
按照保存的具体方法 , 可分源保存类型
细胞工程——邢朝斌
第八章 植物种质保存
三、种质保存的方法
1、 种植保存 每隔一定时间播种一次 种植条件尽可能与原产地相似 避免或减少天然杂交和人为混杂 播种和收获时取样要有代表性 来自自然条件悬殊地区的品种资源 , 可分 别在不同生态地点异地种植保存。
体细胞胚 人工种皮 人工胚乳
第一节 人工种子的概念 三、人工种子分类
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
裸露或休眠的繁殖体 人工种皮包被的繁殖体 水凝胶包埋再包被人工 种皮的繁殖体
第一节 人工种子的概念 四、不同繁殖体的比较
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
体细胞胚
形成阶段： 第一阶段，在含高生长 素浓度的培养基中， 诱导培养胚性细胞； 第二阶段，在较低生长 素或无生长素的培 养基中形成体胚。
第一节 种质资源保存类型
细胞工程——邢朝斌
第八章 植物种质保存
二、种质保存的意义
物种消失或濒临灭绝 经过长期进化而来的物种，一旦失去不 会再来。
第一节 种质资源保存类型
细胞工程——邢朝斌
第八章 植物种质保存
三、种质保存的方法
按保存的地理位置分为： 原地保存：是在原来的生态环境条件下 , 就地 保存 , 自我繁殖品种资源。 一般野生品种资源 采用这种方式பைடு நூலகம்存。 异地保存：是将种子或植株保存于该品种资源 原产地以外的地区。 这种保存可采用植物园、 种质园、种质库等形式或采用试管保存形式。
第二节 试管保存
第三节 超低温保存
第一节 种质资源保存类型
细胞工程——邢朝斌
第八章 植物种质保存
一、概念
种质：是决定生物遗传性状，并将遗传信息 从亲代传递给子代的遗传物质。 种质库：是指以种为单位的群体内的全部遗 传物质，它有许多个体的不同基因所组 成。又称基因库。 种质资源：具有种质并能繁殖的生物体统称 为种质资源或遗传资源。
第七章 人工种子
二 、 繁殖体培养技术 1.体细胞胚 满足一定的数量。 体细胞胚形成 后进行后熟培养， 然后脱水干燥，将 畸形胚选出后才能 进行包埋。
第二节 人工种子制备的技术要点
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
一 、 繁殖体培养技术 2.微型变态器官
光照 温度 培养基蔗糖浓度 激素 不能过度脱水、 进行表面消毒
第八章 植物种质保存
二、超低温保存技术 4、材料冷冻的方法 （3）预冷冻法 投入液氮前，需经过短暂时间的低 温锻炼的方法 ①两步冷冻：慢速冷冻至-40 ℃，停留一 段时间，快速冷冻。 ②逐级冷冻：材料通过不同温度等级降 温至-40 ℃，停留一段时间，投入液氮快 速冷冻。
第三节 超低温保存
细胞工程——邢朝斌
第三节 超低温保存
细胞工程——邢朝斌
第八章 植物种质保存
二、超低温保存技术 1、保存材料的选择 2、冷冻前材料预处理 3、添加冷冻防护剂 4、材料冷冻的方法（预冷） 5、材料保存 6、保存材料解冻 7、保存材料复苏培养
第三节 超低温保存
细胞工程——邢朝斌
第八章 植物种质保存
二、超低温保存技术 1、保存材料的选择 花粉、茎尖分生组织、芽、种胚、 小植株、愈伤组织、体细胞胚等 均可以作为保存材料。
第二节 人工种子制备的技术要点
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
一 、 繁殖体培养技术 1.体细胞胚 所需体细胞胚的标准： 其一，形态正常，具有 完整的胚结构； 其二，与母体植物的基 因型基本相同； 其三，具有较好的成熟 性，能耐一定程度 的脱水。
第二节 人工种子制备的技术要点
细胞工程——邢朝斌
第二节 人工种子制备的技术要点
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
三、人工种皮的装配 理想的人工种皮应该是：
封闭性和透气性 坚硬度 无毒无害 配制简单，成本低
第二节 人工种子制备的技术要点
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
三、人工种皮的装配 常用的人工种皮材料
4260涂膜：价格昂贵，操作复杂、包裹效果不 尽人意。 二氧化硅：操作简单易行，可机械化操作。 硅酮种衣：可以抗真菌，可渗入水蒸气和氧气。
第三节 超低温保存
细胞工程——邢朝斌
第八章 植物种质保存
二、超低温保存技术 4、材料冷冻的方法 （2）慢速冷冻法 将植物材料从0℃ 或者其它预处 理温度以降温速度为1~2 ℃/min从 起始温度降到-100 ℃ ，稳定1h后投 入液氮中保存或以此降温速度降至196 ℃。
第三节 超低温保存
细胞工程——邢朝斌
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
狭义的概念是指植物离体培养中产生的胚状体（包 括体细胞胚和性细胞胚），包裹在含有养分和 具有保护功能的物质中，并在适宜条件下能够 发芽出苗的颗粒体。 广义而言，人工种子是在胚状体或一块组织（顶芽、 腋芽）、一个器官（小鳞茎等）之外加上必要 的营养成分（人工胚乳）后，用具有一定通透 性而无毒的材料将其包裹起来，形成的与天然 种子相似的颗粒体。
第一节 人工种子的概念
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
人工种子的优点：
1、便于快速繁殖和贮藏 2、可以选择人工胚乳、种皮的成分 3、可以固定杂种优势，加速良种繁育 4、可以作为植物基因工程和遗传工程的桥梁 5、可以保存珍贵品种
第一节 人工种子的概念
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
二、人工种子的结构
第三节 人工种子实用化的策略
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
陈正华等（1998）对人工种子的应 用提出了如下策略：
微器官人工种子可能最先用于无性繁殖植物 微器官人工种子可用于天然种子繁殖后代群体 变异大的植物 以体细胞胚为繁殖体应用的可能性及需要注意 的问题
第三节 人工种子实用化的策略
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细胞工程
Cell Engineering
邢朝斌 科技楼0510 Tel:3726238 E-mail:xingzhb@
第七章 人工种子
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
第一节 人工种子的概念
第二节 人工种子制备的技术要点
第三节 人工种子实用化的策略
第一节 人工种子的概念 一、基本概念
无毒、具有一定的缓冲强度。 能够提供类似于胚乳的营养物质。 含有适当的杀菌剂。
第二节 人工种子制备的技术要点
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
二 、繁殖体的包埋 2、常用的人工胚乳液配方
MS（或SH、White）培养基加入1.5%的马铃 薯淀粉水解物； SH（0.5×）培养基加入1.5%的麦芽糖。
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
二、微器官人工种子可用于天然种子繁殖后 代群体变异大的植物
有些植物种子繁殖的植株群体变异大。 以微芽为繁殖体的人工种子技术已经建立。 桉树人工种子的成苗率已达80%以上。
第三节 人工种子实用化的策略
细胞工程——邢朝斌
第七章 人工种子
三、以体细胞胚为繁殖体应用的可能性及局 限性
第三节 超低温保存
细胞工程——邢朝斌
第八章 植物种质保存
二、超低温保存技术 4、材料冷冻的方法 （1）快速冷冻 将植物材料从0℃ 或者其它预处理 温度直接投入液氮中保存的方法。降温 速度为1000 ℃/min。植物体内的水分在 降温冷冻过程中，从-10℃—-140℃范围 内是冰晶形成和增长的危险温度区，到140℃时完全停止增长。
第一节 种质资源保存类型