生物化工专业实验
生物化学试验_百度文库
※实验一糖的性质实验糖的颜色反应※实验一（1）【实验目的及要求】1. 掌握莫式（Molisch）试验鉴定糖的原理和方法。
2. 掌握塞式（Seliwanoff）试验鉴定酮糖的原理和方法。
【实验原理】1．莫式试验：糖经无机酸（浓硫酸、浓盐酸）脱水产生糠醛或糠醛衍生物，后者在浓无机酸作用下，能与а-萘酚生成紫红色缩合物。
2．塞式试验：酮糖在浓酸的作用下，脱水生成5-羟甲基糠醛，后者与间苯二酚作用，呈红色反应；有时亦同时产生棕红色沉淀，此沉淀溶于乙醇，成鲜红色溶液。
【实验仪器及用品】仪器：水浴锅。
器皿：吸管、试管。
实验药品：蔗糖、葡萄糖、淀粉、果糖、阿拉伯糖、半乳糖、а-萘酚、浓硫酸、95%乙醇、间苯二酚、盐酸、间苯三酚。
【实验试剂】莫式试剂：а-萘酚5g,溶于95%乙醇并稀释至100ml。
现用现配，并贮于棕色试剂瓶中。
塞式试剂：间苯二酚50mg，溶于100ml盐酸（VH2O：VHCl=2:1），现用现配。
【实验内容及步骤】一、莫式实验于4支试管中，分别加入1 ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素（棉花或滤纸浸在1 ml水中），然后各加莫式试剂2滴，摇匀，将试管倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5 ml（切勿振摇！），硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层，观察液面交界处有无紫色环出现。
二、塞式试验于4支试管中，分别加入0.5 ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%果糖溶液，然后各加塞式试剂2.5ml，摇匀，同时置沸水浴内，比较各管颜色及红色出现的先后顺序。
【实验现象观察并记录】仔细观察实验中的颜色变化，对于塞式试验和杜式试验还需记录下颜色变化的时间。
※实验一（2）【实验目的及要求】掌握糖的还原反应来鉴定糖的原理和方法。
【实验原理】费林(Fehling)试剂和本尼迪(Benedict)试剂均为含Cu2+的碱性溶液，能使具有自由醛基或酮基的糖氧化，其本身则被还原成红色或黄色的Cu2O，此法常用作还原糖的定性或定量测定。
生物化工实习实训报告
一、实习背景与目的随着生物化工技术的飞速发展，生物化工在国民经济中的地位日益凸显。
为了提高我的专业素养，增强实际操作能力，我在2023年暑假期间参加了为期一个月的生物化工实习实训。
本次实习旨在让我深入了解生物化工的基本原理、工艺流程以及实验室操作规范，为我今后的学习和工作打下坚实的基础。
二、实习单位及内容本次实习单位为我国某知名生物化工企业。
实习期间，我主要参与了以下内容：1. 生物化工原理学习：在指导老师的带领下，学习了生物化工的基本原理，包括发酵工程、酶工程、生物催化等。
2. 工艺流程参观：参观了企业的生产线，了解了生物化工产品的生产过程，包括原料处理、发酵、分离纯化、后处理等环节。
3. 实验室操作训练：在实验室学习了生物化工实验的基本操作，如无菌操作、离心、过滤、层析等。
4. 设备操作与维护：学习了实验室设备的操作和维护方法，包括发酵罐、离心机、层析柱等。
5. 数据处理与分析：学习了实验数据的处理和分析方法，包括实验数据的记录、整理、统计和图表制作。
三、实习过程与收获1. 理论知识学习：通过实习，我对生物化工的基本原理有了更加深入的了解，为今后的学习和研究打下了坚实的基础。
2. 实践操作能力提升：在实验室操作训练中，我掌握了生物化工实验的基本操作技能，提高了自己的动手能力。
3. 团队合作精神培养：在实习过程中，我与同学们相互帮助、共同进步，培养了良好的团队合作精神。
4. 职业素养提升：通过参观企业生产线，我了解了生物化工行业的现状和发展趋势，提高了自己的职业素养。
四、实习总结1. 理论知识与实际操作相结合：在实习过程中，我深刻体会到理论知识与实际操作相结合的重要性。
只有将所学知识运用到实践中，才能真正提高自己的能力。
2. 严谨的实验态度：在实验室操作中，我认识到严谨的实验态度对于实验结果的准确性至关重要。
3. 不断学习，勇于创新：生物化工技术发展迅速，我们要不断学习新知识，勇于创新，为我国生物化工事业贡献力量。
生物化学实验(整理版)
生物化学实验（整理版）一、实验目的1. 了解生物化学实验的基本原理和方法。
2. 掌握实验操作技能，提高实验技能。
3. 培养科学探究能力，提高分析问题和解决问题的能力。
4. 深入了解生物体的化学组成、结构、功能及其相互关系。
二、实验内容1. 氨基酸的分离与鉴定2. 蛋白质的结构与性质3. 酶的催化作用与活性测定4. 糖类的分离与鉴定5. 脂类的提取与鉴定6. 核酸的分离与鉴定7. 代谢途径的探究三、实验操作1. 实验前的准备工作：了解实验原理、实验目的、实验步骤、实验所需试剂和仪器等。
2. 实验过程中的注意事项：严格按照实验步骤进行操作，注意实验安全，保持实验环境的整洁。
四、实验报告1. 实验报告的格式：包括实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果、实验讨论、实验结论等部分。
2. 实验报告的要求：内容完整、条理清晰、数据准确、分析深入、讨论充分、结论明确。
五、实验拓展1. 结合实验内容，查阅相关文献，了解生物化学领域的最新研究进展。
2. 尝试设计新的实验方案，对生物化学现象进行深入探究。
3. 参加学术讲座、研讨会等活动，拓宽生物化学知识面。
生物化学实验（整理版）一、实验目的1. 了解生物化学实验的基本原理和方法。
2. 掌握实验操作技能，提高实验技能。
3. 培养科学探究能力，提高分析问题和解决问题的能力。
4. 深入了解生物体的化学组成、结构、功能及其相互关系。
二、实验内容1. 氨基酸的分离与鉴定2. 蛋白质的结构与性质3. 酶的催化作用与活性测定4. 糖类的分离与鉴定5. 脂类的提取与鉴定6. 核酸的分离与鉴定7. 代谢途径的探究三、实验操作1. 实验前的准备工作：了解实验原理、实验目的、实验步骤、实验所需试剂和仪器等。
2. 实验过程中的注意事项：严格按照实验步骤进行操作，注意实验安全，保持实验环境的整洁。
四、实验报告1. 实验报告的格式：包括实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果、实验讨论、实验结论等部分。
生物化学实训课实验报告
一、实验名称：蛋白质分子量测定——凝胶层析法二、实验目的：1. 理解凝胶层析法的原理和操作步骤。
2. 掌握蛋白质分子量测定的方法。
3. 分析实验结果，并探讨影响实验结果的因素。
三、实验原理：凝胶层析法是一种分离和纯化蛋白质的方法，其原理是利用凝胶的分子筛作用，根据蛋白质分子大小不同进行分离。
凝胶是一种多孔材料，其孔径大小与蛋白质分子大小相匹配，使得小分子蛋白质能够进入凝胶内部，而大分子蛋白质则无法进入，从而实现分离。
四、实验材料与试剂：1. 蛋白质样品：如鸡蛋清、血清等。
2. 凝胶：如聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶等。
3. 电泳缓冲液：如Tris-HCl缓冲液、硼酸缓冲液等。
4. 标准蛋白质分子量对照品：如已知分子量的蛋白质。
5. 电泳仪、电泳槽、紫外灯等。
五、实验步骤：1. 准备凝胶：将凝胶溶解在适当浓度的缓冲液中，倒入模具中，制成凝胶板。
2. 准备样品：将蛋白质样品与适量的电泳缓冲液混合，加入样品缓冲液，制成样品溶液。
3. 制备标准蛋白质分子量对照品：将已知分子量的蛋白质溶解在电泳缓冲液中，制成标准蛋白质溶液。
4. 加样：将样品溶液和标准蛋白质溶液分别加入凝胶板上的孔中。
5. 电泳：将凝胶板放入电泳槽中，加入电泳缓冲液，接通电源，进行电泳。
6. 显色：电泳完成后，将凝胶板取出，放入含有显色剂的溶液中，进行显色。
7. 测量：用紫外灯照射凝胶板，观察蛋白质条带的位置，并记录下蛋白质分子量。
六、实验结果与分析：1. 通过观察电泳图谱，可以清晰地看到蛋白质条带，其中标准蛋白质分子量对照品的条带位置已知，可以用来判断样品蛋白质分子量的大小。
2. 实验结果显示，样品蛋白质分子量分布较广，存在多个分子量大小不同的蛋白质。
3. 通过比较样品蛋白质条带与标准蛋白质条带的位置，可以估算出样品蛋白质的分子量。
4. 影响实验结果的因素包括凝胶的制备、电泳条件、显色剂的选择等。
七、讨论与心得：1. 凝胶层析法是一种常用的蛋白质分离和纯化方法，具有操作简单、分离效果好等优点。
物化生专业的实验操作与实验流程
物化生专业的实验操作与实验流程一、实验室准备在进行物化生专业的实验操作之前，首先需要进行实验室准备工作。
这包括清洁实验设备、准备实验试剂和材料，并确保实验平台和仪器设备的正常运行。
同时，要做好实验室安全工作，如佩戴实验室服装、戴好手套和护目镜，确保实验环境的安全卫生。
二、实验准备在进行实验操作之前，需要对实验内容进行充分了解和准备。
这包括阅读实验指导书、了解实验原理和目的，以及了解实验方法和步骤。
同时，还需要准备实验所需的化学试剂、实验仪器和设备，并将其摆放整齐，方便实验操作。
三、实验操作1. 实验前准备首先，根据实验的要求和目的，准备好所需的试剂和仪器设备。
然后，根据实验步骤依次进行实验操作。
在进行实验操作之前，要仔细阅读实验指导书上的注意事项和安全提示，确保实验操作的安全性。
2. 实验步骤根据实验的要求和目的，按照实验指导书上的步骤进行实验操作。
在进行实验步骤时，要注意以下几点：(1) 严格按照实验步骤进行操作，确保实验的准确性和可重复性；(2) 控制好试剂和溶液的用量，避免浪费和污染；(3) 在进行实验操作时，要注意仪器设备的正确使用方法，并遵守操作规程；(4) 实验过程中要注意观察、记录和分析实验现象，及时调整实验操作，以确保实验结果的准确性。
四、实验结果的处理和分析在实验操作完成后，需要对实验结果进行处理和分析。
这包括数据的测量和记录，实验数据的计算和统计，以及实验结果的分析和解释。
在实验结果的处理和分析中，要注意以下几点：1. 数据的测量和记录在进行实验操作过程中，要准确测量和记录实验数据。
测量数据时要注意仪器的精确度和准确性，并记录下实验数据的具体数值和单位。
2. 实验数据的计算和统计根据实验结果的需要，对实验数据进行计算和统计。
这包括平均值的计算、标准差的计算和数据的图表表示等。
3. 实验结果的分析和解释根据实验目的和要求，对实验结果进行分析和解释。
这包括对实验结果的理论解释和实验误差的分析。
生物化学实验内容
生物化学实验内容生物化学实验内容一、细胞的酶促反应实验实验原理：酶是生物体内起调节和催化作用的一类蛋白质，它能够催化某些基质（叫底物）的反应，促使底物转化成产物的过程。
本实验以酵母中的酶为例，研究酵母如何利用葡萄糖进行发酵反应，以产生二氧化碳气体。
实验步骤：1. 准备酵母发酵液：先在酵母粉中加入适量的葡萄糖，加入5%的酵母悬液，搅拌均匀，然后使用减压过滤器将液体过滤，并将过滤出的发酵液倒入操作管内。
2. 制备实验装置：将操作管与气体收集瓶通过U型玻璃管连接起来，用消毒酒精灯将管道消毒，然后将取样器放到气体收集瓶内。
3. 开始实验：将操作管倒置放在气体收集瓶内，然后用黄色指示移交管检测样品PH值。
等取样器内的气体达到稳定状态后，记录气体体积和温度，计算出气体的体积（记为V），并使用计算器计算气体里面的CO₂体积比例（%VCO₂=气体中CO₂体积/气体总体积）。
4. 重复实验：重复三次以上实验，计算平均值并分析实验数据。
实验结果：根据实验可得，当葡萄糖浓度越高时，发酵液中可产生的二氧化碳气体就会越多。
而当发酵液中的酵母数量增加时，发酵反应速率增快，产生的二氧化碳气体也会相应增多。
另外，当发酵温度过低或酸碱度过高，也会影响酵母的生长繁殖和发酵反应。
二、酶的催化实验实验原理：酶能够将底物转化成产物，同时不会自身发生变化，其催化作用也受到环境因素的影响。
本实验通过比较未加酶的底物和加入酶的底物的反应速率，来探究酶的催化作用。
实验步骤：1. 制备酶溶液：取适量的胰蛋白酶，加入适量的缓冲液，搅拌均匀，制成胰蛋白酶溶液。
2. 制备底物溶液：取适量的葡萄糖溶液，分成两份。
其中一份为未加酶的底物。
3. 加入酶溶液：将另一份葡萄糖溶液加入适量的酶溶液中，即为加入了酶的底物溶液。
4. 测定反应速率：分别加入两份底物溶液到不同的试管中，同时开始计时，观察反应产物生成的颜色变化，记录每个时间点的吸光度。
5. 分析实验结果：根据实验数据和曲线分析，可以得出在加入酶的情况下，底物反应速率明显比未加酶的底物快。
生物化学实验3篇
生物化学实验第一篇：分离和纯化酶酶是一种具有催化作用的蛋白质，在生物化学研究中具有重要意义。
为了研究酶的性质和机制，需要对酶进行分离和纯化。
一、酶的分离方法1.分离基于酶的物理性质的方法，包括沉淀法、沉降法、过滤法和电泳法等。
2.基于酶的化学性质进行分离的方法，包括离子交换色谱法、凝胶过滤法、亲和层析法和扩散法等。
二、酶的纯化方法酶纯化的目的是通过不同的技术方法消除干扰因素，获得特异性高和纯度高的酶。
酶纯化一般通过以下步骤完成：1.初步分离：选择一种合适的分离方法（如沉淀法、凝胶过滤法或离子交换色谱法等），使酶从细胞或组织中分离出来。
2.活性测定：确定所分离出的物质是否为酶。
3.酶的纯化：经过不断的纯化步骤（如扩散法、凝胶层析法、电泳法、亲和层析法等），获得特异性高和纯度高的酶。
4.酶的结构与功能分析：对纯化后的酶进行结构与功能分析，探索其催化机理和调控机制。
三、酶的应用酶在生命科学和工业生产中应用广泛，主要应用包括：1.生命科学领域：用于疾病诊断、药物设计、基因工程、蛋白质工程和代谢组学等研究。
2.工业生产领域：用于食品加工、医药生产、纺织印染、制浆造纸、环境治理和能源生产等领域。
总之，酶的分离和纯化为酶的结构与功能分析和应用提供了基础。
随着生命科学和工业生产的不断发展，酶的应用前景日益广阔。
第二篇：酶催化反应酶是一种生物催化剂，能够加速生物化学反应，提高反应速率和效率。
酶催化反应的基本原理是：酶与底物结合，形成酶底物复合物，通过降低反应的活化能，促进反应速率，使底物转化成产物，最终释放出酶和产物。
具体而言，酶催化反应通常包括以下步骤：1.酶与底物的结合：酶与底物之间形成酶底物复合物，通常通过酶和底物之间的亲和性实现。
2.转化过渡态形成：酶催化的反应需要一定的能量（活化能）才能进行。
酶通过与底物结合，改变底物的构象，使底物转化成具有更高自由能的过渡态。
3.过渡态降解：在过渡态中，酶通过结构变化（催化中心的变化）降低了催化反应的活化能，促进了底物的转化，并释放出产物和酶。
生物化学大实验
生物化学大实验一、装柱及标准样品的分子筛层析：把柱子固定在夹子上，打开下面的盖，用取液器匀速加入介质。
保证介质均匀沉淀，且要缓慢加入，防止产生气泡。
待介质完全沉降打开柱的上盖，剪一与柱内径大小一致的圆形滤纸片放入柱中，沉淀于介质表面。
液体接近界面时加入3ml超纯水，同时在层析杯中加入100ml超纯水，连接泵洗柱15min，同时配制平衡液200mL（20mmol Tris-HCl,pH 8.0; 20mmol NaCl）。
待液体接近界面时，在柱中加入3ml平衡液（其余平衡液加到层析杯中），调节流速，控制滴速为3ml/10min（一分钟约6-7滴）。
平衡柱过中午。
实验材料：牛血清蛋白、糜蛋白酶二者比例为2:1 溶于20mmol Tris-HCl，pH 8.0; 20mmol NaCl（教师统一配制）。
缓慢向柱中加入样品（4ml）打开层析柱上下端，使样品靠重力流出。
当样品接近界面时在柱中加入3ml 上样缓冲液（即平衡液），连接泵，调T=100 A(0.5A)=0 ，开启记录仪，同时配制100ml 0.1M Nacl。
待两个峰都出来后，把层析杯中的液体换为0.1M Nacl洗柱20min，再用超纯水洗柱30min，封柱，关机。
实验二BAP的诱导表达1.在5ml培养基中加入Amp2.5μl（母液为100mg/ml）和10μl菌液。
在摇床上37℃ 130转过夜预培养。
2.取2.5ml菌液加入50ml含有Amp (25μl)的LB培养基中（1:20扩培）。
37℃恒温摇床，180-200rpm培养40-60min左右。
测OD600,使其值达到0.5-0.7。
3.加入终浓度为1mM的IPTG(500μl)进行外源基因的诱导表达。
于室温诱导4-5小时。
4.取出后进行细胞超声破碎，留1ml破碎前菌液处理后进行western及PAGE，其余放入冰箱于4度保存。
实验三BAP的亲和层析纯化一、破碎细菌A.盐酸胍破碎1.100ml诱导后的菌液分别放于大离心管中，配平，5000rpm离心15min。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
薄层色谱鉴定：展开剂中氯仿和甲醇的比例。 薄层色谱鉴定：展开剂中氯仿和甲醇的比例。
葡萄酒酵母
耐受高温、酒精的能力强，在自然发酵的过程中得以大量 耐受高温、酒精的能力强， 繁殖，并能顺利地完成酒精发酵过程。 繁殖，并能顺利地完成酒精发酵过程。
实验步骤
一、第一阶段 (主发酵) 主发酵)
• 要准备的工具和容器：食品级带旋盖的PVC塑料桶几个， PVC塑料桶几个 要准备的工具和容器：食品级带旋盖的PVC塑料桶几个， 灭菌纱布等（各组准备） 灭菌纱布等（各组准备） • 葡萄的分选：选择完全成熟的新鲜葡萄除烂、去梗、破 葡萄的分选：选择完全成熟的新鲜葡萄除烂、去梗、 尽快放入准备好的容器中不要超过容器总容量的2/3 2/3。 碎，尽快放入准备好的容器中不要超过容器总容量的2/3。 每组5 包括品尝和实验） 每组5斤（包括品尝和实验） • 加蔗糖 • 每天搅拌两到三次，这时盖子不用盖太紧。看到发酵结 每天搅拌两到三次，这时盖子不用盖太紧。 束的迹象（气泡减少或消失，皮渣有沉淀， 束的迹象（气泡减少或消失，皮渣有沉淀，桶温与环境 温度差值减小或残糖达到5g/L以下） 5g/L以下 温度差值减小或残糖达到5g/L以下）就开始考虑倒桶以 防酒体“还原” 此阶段最好控制在7天内完成。 防酒体“还原”。此阶段最好控制在7天内完成。
三、贮藏
葡萄酒的贮藏要求全密封容器，储藏酒时要将酒加满罐、 葡萄酒的贮藏要求全密封容器，储藏酒时要将酒加满罐、避 光，温度控制在10-20度无异味的房间内。 温度控制在10 20度无异味的房间内。 10- 度无异味的房间内
苹—乳酸发酵
苹果酸是双羧基酸，口味比较尖酸。红葡萄酒的后发酵过程， 苹果酸是双羧基酸，口味比较尖酸。红葡萄酒的后发酵过程， 也叫苹果酸—乳酸发酵过程。 也叫苹果酸—乳酸发酵过程。这个过程是在乳酸细菌的作用 下，将苹果酸分解成乳酸和CO2的过程。经过苹果酸—乳酸发 将苹果酸分解成乳酸和CO 的过程。经过苹果酸— 酵的红葡萄酒，尖酸降低，果香醇香加浓，口感柔协肥硕， 酵的红葡萄酒，尖酸降低，果香醇香加浓，口感柔协肥硕， 才称得上名副其实的红葡萄酒。 才称得上名副其实的红葡萄酒。
实验一 红葡萄酒酿制工艺实验
葡萄酒的营养
葡萄酒中已知有约600种对人体有益的成分， 葡萄酒中已知有约600种对人体有益的成分，其维生素含量比鲜牛奶 600种对人体有益的成分 高一倍以上，同时含有人体所必需的13种微量元素（ 13种微量元素 高一倍以上，同时含有人体所必需的13种微量元素（钙、镁、磷、钠、 碘和钴）。 钾、氯、硫、铁、铜、铝、锌、碘和钴）。 含有刺激嗅觉神经和味蕾的醋酸、单宁酸等物质，可增进食欲，其中 含有刺激嗅觉神经和味蕾的醋酸、单宁酸等物质，可增进食欲， 一些元素还能防止人体内某些病菌的繁殖。在国外，是食用海味、 一些元素还能防止人体内某些病菌的繁殖。在国外，是食用海味、生 吃蔬菜时不可缺少的饮料。 吃蔬菜时不可缺少的饮料。 一种称为resveratrol的物质可以预防癌症，在含有这种物质的70 一种称为resveratrol的物质可以预防癌症，在含有这种物质的70种 resveratrol的物质可以预防癌症 70种 植物中，以葡萄中的含量最为丰富，葡萄酒中以红葡萄酒中为最多。 植物中，以葡萄中的含量最为丰富，葡萄酒中以红葡萄酒中为最多。 调节人体新陈代谢，促进血液循环，防止胆固醇增加，同时还能利尿、 调节人体新陈代谢，促进血液循环，防止胆固醇增加，同时还能利尿、 激发肝功能和防止衰老的作用。长期饮用可防止坏血病、贫血、 激发肝功能和防止衰老的作用。长期饮用可防止坏血病、贫血、眼角 膜炎，降低血脂、促进消化。 膜炎，降低血脂、促进消化。
主要工艺流程
葡萄去坏、除梗、破碎 主发酵 （前发酵、酒精发酵，不需密封） （前发酵、酒精发酵，不需密封） 分离残渣与酒液 装密封容器陈酿发酵 （后发酵、苹-乳酸发酵，隔绝空气） （后发酵、苹-乳酸发酵，隔绝空气） 澄清或过滤 装瓶饮用
实验材料
葡萄
制作葡萄酒的关键， 分葡萄3分酿造。 制作葡萄酒的关键，7分葡萄3分酿造。 受生长气温、降雨量、土壤等气候条件决定。 受生长气温、降雨量、土壤等气候条件决定。酿红葡萄酒 的葡萄品种有赤霞珠、品丽珠、美乐、西拉、黑比诺等， 的葡萄品种有赤霞珠、品丽珠、美乐、西拉、黑比诺等，最 好不用食用葡萄酿酒。 好不用食用葡萄酿酒。 红葡萄酒的颜色来源于葡萄皮肉所含色素，所以必须选用 红葡萄酒的颜色来源于葡萄皮肉所含色素， 颜色深（紫黑），成熟度高的新鲜、干净的红葡萄。 ），成熟度高的新鲜 颜色深（紫黑），成熟度高的新鲜、干净的红葡萄。
比移值（ Rf值）
在薄层色谱中，组分的迁移距离(a)与展开剂的迁移距离(b)之比称 (a)与展开剂的迁移距离(b)之比称 在薄层色谱中，组分的迁移距离(a)与展开剂的迁移距离(b) 为比移值(Rf) (Rf)。 为比移值(Rf)。
溶剂前沿
Rf =
a b b
展开后斑点
a
起始线 硅胶板属于正相色谱，展开剂极性越大，洗脱能力越强， 硅胶板属于正相色谱，展开剂极性越大，洗脱能力越强，比移值就 0.15— 之间。 越大。调整展开剂极性，良好的分离， 值应在0.15 0.75之间 越大。调整展开剂极性，良好的分离， Rf值应在0.15—0.75之间。
后放置，抽滤。 后放置，抽滤。
精制：沉淀溶于20倍量沸水中，趁热过滤。滤液加浓盐酸调至pH 精制：沉淀溶于20倍量沸水中，趁热过滤。滤液加浓盐酸调至pH 20倍量
2-3，放置，过滤。80℃烘干即得盐酸小檗碱精制品。 放置，过滤。80℃烘干即得盐酸小檗碱精制品 烘干即得盐酸小檗碱精制品。
柱色谱：70g中性氧化铝 加入95%乙醇调成浆状，湿法装柱， 柱色谱：70g中性氧化铝，加入95%乙醇调成浆状，湿法装柱，不 中性氧化铝， 95%乙醇调成浆状
提取盐酸小檗碱常用的方法
酸水法 石灰乳法（可操作性强） 醇提法 超声提取法（时间短、生产成本高）
生物碱的色谱检识
柱色谱：湿法装柱。吸附剂（固定相） 柱色谱：湿法装柱。吸附剂（固定相）为中性氧化 洗脱剂（流动相） 95%乙醇 收集鲜黄色带。 乙醇， 铝。洗脱剂（流动相）为95%乙醇，收集鲜黄色带。 硅胶薄层色谱：利用硅胶的吸附作用， 硅胶薄层色谱：利用硅胶的吸附作用，生物碱极性 小， Rf值小大；极性大， Rf值小。 值小大；极性大， 值小。 展开剂是关键。不能与分离物质发生反应；若Rf值 展开剂是关键。不能与分离物质发生反应； 可在氯仿中加入甲醇等极性大的溶剂。 小，可在氯仿中加入甲醇等极性大的溶剂。
加糖
越少加越好，葡萄的甜度够就不加（达到制作12度葡萄酒的浓度值 12度葡萄酒的浓度值 越少加越好，葡萄的甜度够就不加（达到制作12 230克 ），否则就要补齐糖度 从理论上讲，加入17g/L 否则就要补齐糖度。 17g/L蔗糖可以 230克/升），否则就要补齐糖度。从理论上讲，加入17g/L蔗糖可以 提高1度酒。最终葡萄酒口味以含糖量小于4g/L风味良好。 4g/L风味良好 提高1度酒。最终葡萄酒口味以含糖量小于4g/L风味良好。 通过比重计测量糖度值后查表得出，然后再套用如下公式： 通过比重计测量糖度值后查表得出，然后再套用如下公式： 加糖量克数 = 葡萄汁升数×（希望得到的成酒度数－根据测出的葡 葡萄汁升数× 希望得到的成酒度数－ 萄汁比重查表得到相应的成酒的度数） 18（ 17或19） 萄汁比重查表得到相应的成酒的度数）×18（或17或19） 注：17克是用去皮渣的汁液来计算的，18克是按带皮渣的来计算的， 17克是用去皮渣的汁液来计算的 18克是按带皮渣的来计算的 克是用去皮渣的汁液来计算的， 克是按带皮渣的来计算的， 19克是根据保证酒精度这个要求以及实践教训（1.16的教训系数， 19克是根据保证酒精度这个要求以及实践教训（1.16的教训系数，弥 克是根据保证酒精度这个要求以及实践教训 的教训系数 补在发酵过程中糖的损失17 1.16=19.72）作出的。 17× 补在发酵过程中糖的损失17×1.16=19.72）作出的。
渗漉：黄柏皮粗粉100g 石灰乳加少量水研磨，浓度为终体积1% 渗漉：黄柏皮粗粉100g（石灰乳加少量水研磨，浓度为终体积1%） 100g（ 1%）
搅拌均匀，溶胀30分钟后，再加入6倍量水浸渍60分钟。 搅拌均匀，溶胀30分钟后，再加入6倍量水浸渍60分钟。 30分钟后 60分钟
盐析：收集渗漉液，加入渗漉液总体积20% W/V）的食盐， 盐析：收集渗漉液，加入渗漉液总体积20%（W/V）的食盐，搅拌 20%（
实验原理
红葡萄原料破碎后，皮渣和葡萄汁混合发酵， 红葡萄原料破碎后，皮渣和葡萄汁混合发酵，将葡 萄糖转化为酒精的过程。同时葡萄果粒中的有机酸、 萄糖转化为酒精的过程。同时葡萄果粒中的有机酸、 维生素、微量元素及单宁、色素等多酚类化合物，浸 维生素、微量元素及单宁、色素等多酚类化合物， 取转移到葡萄原酒中。红葡萄原酒经过贮藏、澄清和 取转移到葡萄原酒中。红葡萄原酒经过贮藏、 稳定处理，即成为精美的红葡萄酒。 稳定处理，即成为精美的红葡萄酒。
生物工程(技术) 生物工程(技术)专业实验
指导教师：高晓蓉 孜力汗
课程内容
理论讲解（ 学时） 理论讲解（4学时） 自酿红葡萄酒（4学时） 自酿红葡萄酒（ 学时） 生物碱分离提取（8学时） 生物碱分离提取（ 学时） 酒精发酵工艺试验（16学时） 学时） 酒精发酵工艺试验（16学时 基因工程重组蛋白的表达与分离纯化 （18学时） 18学时 学时）
小檗碱： 生物碱，缓溶于水， 小檗碱：属生物碱，缓溶于水，冷乙醇溶解度不 大，但易溶于热水或热乙醇，难溶有机溶剂。 但易溶于热水或热乙醇，难溶有机溶剂。 小檗碱主要以盐酸盐形式存在。在冷水中溶解度 小檗碱主要以盐酸盐形式存在。 小，较易溶于沸水。提取和分离过程中沉淀反应和 较易溶于沸水。 显色反应可用于生物碱的检测和鉴定。 显色反应可用于生物碱的检测和鉴定。